Name: 안구 약의 약동학 연구에서 토끼 눈의 사용 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2016-07-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 2 s
Description: 배우세요 안구 내 약물의 약동학 특성을 토끼 눈을 이용해 조사하는 방법을. 이 기술은 안약 전달 메커니즘을 이해하고 효과적인 안과 치료법 개발에 필수적인 데이터를 제공합니다.

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동물실험에 기술적인 도움을 주신 박지현 선생님과 박지연님께 감사드립니다. 본 연구는 분당서울대학교 병원연구기금(연구비번호: 제14-2014-022호)과 서울시 국립과학기술연구회의 융합사업사업(CCP-13-02-KIST)의 지원금으로 이루어졌다.

우리의 프로토콜은이 프로토콜에 제시된 동물 절차 및 동물 관리 방법을 모두 승인 분당 서울 대학교 병원의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 지침을 따릅니다. IACUC는 실험 동물의 관리 및 사용 (2011)에 대한 안내서의 제 8 판을 완전히 준수에 있습니다. 모든 절차는 동물에서 안과 및 비전 연구에서 동물의 사용을위한 비전 및 안과 정책 연구 협회의 가이드 라인을 준수하여 수행 하였다. 개별 케이지는 토끼를 주택에 사용 하였다. 추가 수술이나 준비이 실험을 수행하기 전에 (즉, 살균)이 필요하지 않을 수 있습니다. 토끼 눈에 약 1. 안구 내 주사 <ol><li> tiletamine 염산염과 zolazepam의 혼합물의 근육 내 주사로 1.5 kg 무게 건강한 뉴질랜드 흰 토끼를 마취염산염 (15 ㎎ / ㎏)와 자일 라진 하이드로 클로라이드 (/ kg 5 mg)을 얻었다. 수술법 (깜박임) 반사를 모니터링하거나 귀 핀치에 의해 마취를 확인합니다. 참고 : 안압 약이 눈 안료에 결합하면 결합의 정도는 약물의 안구 약물 동태의 수정을 유도 할 수 있습니다. 예를 들어, 착색 된 토끼의 유리체 수성 체액에서 안료 결합 약물의 반감기를 증가 알비노 토끼 (14)이 비교 될 수있다. 인간의 눈은 인간의 대응을 표현하지 않을 수도 색소와 알비노 토끼 눈의 상이한 정도가이 경우, 착색 된 토끼의 눈으로부터 얻은 데이터는 인간의 눈에 더 유사하고 적용 할 수있다. 따라서, 약물 - 안료의 상호 작용을 고려하여, 착색이나 알비노 토끼의 사용은 신중하게 고려되어야하며, 그 결과는 토끼의 스트레인 (색소)와 함께 해석되어야한다. 그러나 흰둥이 토끼는 D로 약동학 적 특성을 비교 연구에 사용 권장양탄자 - 안료 상호 작용은 비교의 교란 요인이 될 수있다. <ol><li> 1 % proparacaine 염산염 안과 눈 방울과 국소 마취제를 적용합니다. 마취에서 회복 될 때까지 눈 건조를 방지하기 위해 수의사 연고 (2 % 히드 록시 프로필 메틸 셀룰로오스)를 사용합니다. 참고 : 마취 상태에서 무인 토끼를 두지 마십시오. </li></ol></li><li> 페닐 염산염 tropicamide 한두 방울 동공 팽창. </li><li> 안압 주입하기 전에 수술 준비를 위해, 면봉 5와 눈 주위 피부에 5 ~ 10 %의 포비돈 - 요오드를 적용합니다. 눈의 결막에 5 ~ 10 %의 포비돈 - 요오드 한 방울을 놓습니다. </li><li> 무균 기술 5를 사용 중 유리체 강내 또는에 각막 안압 약을 관리 할 수 있습니다. 참고 : 전신 순환에 흡수 된 약물은 또한 동료의 눈을 관통 할 수있다. 약물이 양쪽 눈에 투여하는 경우, 한쪽 눈의 약물 농도가 약물 주입에 의해 영향을받을 수있다다른 눈. 이 반대측 주입의 영향은 다른 눈을 관통 할 수없는 전신 순환 약물로 무시 될 수 있다고 확인 된 경우, 안구 주사 양안의 사용은 경제적으로 고려 동물의 수는 희생이 최소화 될 수있다 약동학 연구. 안내 주입 다음 전신 농도 약동학 연구를 위해, 오직 하나의 눈의 사용이 적절하다. <ol><li> 유리체 강내 주사의 경우, 공막면 (5)에 수직으로 30 G 바늘과 중 상업 1ml를 주사기, 인슐린 주사기, 또는 유리 주사기를 사용하여 유리체 강내 1mm 상이 측 사분면에서 수술 윤부 뒤에 약물을 주입. 참고 : 전방 내 및 유리체 강내 주입에 사용되는 약물의 양이 조사에서 약물에 따라 달라집니다. 토끼 눈을 사용하여 안티 VEGF 요원에 대한 약동학 실험을 위해, 이전의 연구는 0.025, 0.05 (가장 일반적), 0.1 m를 사용전방 내 또는 유리체 강내 주입 베바 시주 맙 또는 라니 비주 맙의 리터. 항 - 혈관 내피 세포 성장 인자, 베바 시주 맙 (15)의 0.05 ㎖, VEGF 트랩 16 0.025 라니 비주 맙의 ㎖, 0.03 ml로 안내 약동학에 우리의 이전 연구에 사용 하였다. 이 (17)을지지하는 증거가되었지만 천자없이 안전하게 큰 부피를 0.1 ml의 것으로 생각된다. 과도한 양이 어느 하나에 각막 또는 유리체 강내 주입되면 안압이 크게 증가된다. IIOP는 뇌의 뇌졸중과 유사 손상된 안구 혈류 및 망막 중심 동맥 폐쇄, 리드 극단적 인 경우에 직접 안압 상승 (IIOP)에 의한 시신경 손상, 즉 녹내장 성 시신경 손상,뿐만 아니라. </li><li> 전방 내 주사의 경우, 최대 경사와 공막 윤부를 통해 30 G 바늘을 삽입하고 그것을 씩 전진하여 전방에 약물을 주입홍채 렌즈 또는 외상의 위험을 최소화하기 위해 조리개 평면 rallel. 주 : 약물 제형에 따라보다 큰 30 G 사용할 수 바늘. 큰 게이지 바늘을 필요로하는 조건은 약물 함유 미립자 큰 단백질 약물, 고점도 조성물을 포함한다. </li><li> 주사 후 상처 치유를 촉진하기 위해 멸균 솜 팁 어플리케이터 주사 부위를 압축합니다. 참고 : 일반적으로 30 초 30 G 바늘이 안구 내 주사에 사용되는 상처 치유를위한 충분하다. 큰 게이지 주사 바늘이 안구에 사용되는 경우, 더 긴 시간은 공막 상처로부터의 누설을 최소화하기 위해 밀봉 부상에 적합 할 것이다. 공막 상처 누설을 확인하기 위해서는 더 큰 게이지 바늘을 사용하는 경우 특히 안압 주사 후 즉시 사용 안내 약물의 양이 주입량과 동일 함을 보장하는 것이 중요하다. </li></ol></li><li> 매일 처리 토끼에 대한 관찰일주, 그리고 이후 일주일에 한 번, 심한 안구 내 염증 (결막 충혈 및 전방 축 농과)의 징후가 안락사까지. 참고 : 주사 후 진통제는 30 G 바늘은 수술 후 통증을 동반하지 않는 최소 침습 절차 이용 안내 주입이 필요하지 않습니다. 완전히 회복 될 때까지 다른 동물의 회사에 수술을 한 동물을 반환하지 않습니다. </li></ol> 2. 샘플 준비 <ol><li> 적출의 경우, 안내 약물 주입 후 다양한 시점에서 토끼 (예., 1 시간, 1, 2, 5, 9, 14 일 또는 30 일)에 안락사. 참고 :이 시점이 관심의 약물 및 알려진 약동학 적 프로파일에 따라 달라집니다. 각각의 시간 지점에 대한 적어도 2 개의 안구 (13)를 사용한다. 신뢰성있는 데이터에 대해, 샘플링 시간은 약 13 개의 반감기의 적어도 시간 간격에서 균형 샘플링 신중 적어도 네 번 포인트를 선택해야 </&gt; SUP. 우리는 균형 잡힌 샘플링 6-8 시간 포인트가 적합 할 수 있다고 생각합니다. 특히 소분자 (≤1,000 다) (18)의 경우, 제 24 시간 동안 1 개 이상의 시간 지점은 매우 중요하다. 따라서,에 대한 고분자 (&gt; 1000 다) 18 샘플링주기 등으로 1 시간 및 1, 2, 5, 9, 14, 30 일 (19)는 좋은 선택 일 수있다. 소분자 (≤1,000 다), 1, 2, 4, 8 시간 및 1, 3, 7 일간 하나의 옵션 (20) 일 수있다. 분자량에 따라 샘플링주기가 더 변형 될 수있다. <ol><li> 안락사 빠르게 tiletamine 염산 zolazepam 염산염 (15 ㎎ / ㎏)와 자일 라진 하이드로 클로라이드 (/ kg 5 mg)의 혼합물을 근육 주사로 토끼를 마취 한 후 15 % 정맥 KCl을 10 ml의 관리. </li></ol></li><li> 일말의 트랙터와 안 검열을 엽니 다. 윤부에 360 ° 결막 절개 2-3mm 후방을 확인하고 C를 해부하여 후방 연장onjunctiva과 세계에서 장부의 캡슐. </li><li> 전 세계에 자신의 삽입에 가까운 안구 근육을 잘라. 곡선 집게로 시신경을 고정하고 집게와 세계 사이의 신경을 잘라. 그대로 주변 조직을 떠나있는 동안 안구 자체를 제거합니다. 안구 적출술 후 즉시 시선을 고정하고 -80 ° C에 저장합니다. 주 : 즉시 동결에 대한 두 가지 옵션이있을 수 있습니다. 약물 농도가 매우 초기 단계에서 측정되는 경우 (예. 1 시간 미만), 액체 질소는 안구의 더 나은 적시 동결을 보장하는 것이 더 적절할 수있다. 그러나, 후속 기간 동안 얼음 즉시 안구를 냉각하는 데 사용될 수 있으며, 그러면 냉동고는 -80 ° C에서 시선을 저장하는 데 사용될 수있다. </li><li> 시간의 모든 지점에 대해 시선을 얻은 후, 세 개의 구획, 유리체, 방수 내, 망막 / 맥락막에 냉동 시선을 분리한다. defros 전에 이러한 구획을 분리팅. 주 : 세 구획으로 분리를위한 가장 중요한 포인트는 절차의 속도이다. 안구는 매우 빠르게 해동 전에 분리되어야하고, 해동 과정을 지연 얼음에 수행 될 수있다. <ol><li> 세계를 열려면, 메스 블레이드와 각막 윤부 (300 ℃ 이상)에서 절개를합니다. 홍채, 수성 유머 앞에 얼어 붙은 함을 얻습니다. </li><li> 당기 및 조직 집게를 사용 통렬하게 비판하여 고정 조리개와 렌즈를 제거합니다. 유리체에 액세스 할 수있게되면, 남아있는 조직 (망막 / 맥락막 / 공막)에서 분리하여 냉동 유리체을 구하십시오. </li><li> 호 메스 (15) 블레이드를 사용하여, 하부 공막에서 망막 / 맥락막 조직을 분리한다. </li></ol></li><li> 면역 들어, 방수 샘플을 해동하고, 각 샘플의 체적을 측정한다. 튜브 함유 t에서의 빈 튜브의 중량을 뺀 동결 시료의 중량을 측정하여그는 샘플을 동결. 주 : 동결 시료의 비중이 대략 1이기 때문에, 각 시료의 중량을 시료의 양을 계산하는데 사용될 수있다. </li><li> 상기 유리체 샘플 무게 샘플을 해동하고, 밤새 4 ℃에서 회 전자의 1 % 소 혈청 알부민을 함유하는 인산염 완충 염수 중 1.0 ㎖에 용해들을. 그런 다음, 10 분 21 387 XG에서 샘플을 원심 분리기. </li><li> 균질화를위한 냉동 망막 / 맥락막 샘플을 달아. 1시 10분 (조직 1g / 시약 10 ㎖)의 시약 조직의 비율로 단백질 추출 시약을 추가한다. 미리 냉각 microhomogenizer를 사용하여 조직을 균질화. 12,000-20,000 XG에서 10 분 동안 용해 샘플을 원심 분리기 및 냉장 EPP 튜브에 뜨는을 전송합니다. </li></ol> 3. 면역 주 : 여러 분석 방법은 단백질 농도 측정을 위해 사용될 수있다. D, 적절한 정량적 인 방법을 선택합니다감지 범위에 epending. LC-MS / MS는 각각 MRM / PRM 모드 프로파일에 대한 단백질의 나노 그램과 피코 레벨을 검출 할 수있는 반면, 간단히, HPLC 선택된 이온 모니터링 모드는 피코 그램 분자의 수준을 검출 할 수있다. ELISA의 검출 한계는 피코 그램 수준으로 간주된다. <ol><li> 간접 효소 면역 분석법 (ELISA를)의 경우, 항 VEGF 제의 농도를 측정하기 위해 관심있는 약물을 검출하고 공지 된 약물의 농도는 표준 곡선을 생성하는 96- 웰 플레이트에서 ELISA 키트를 사용한다. <ol><li> 유리체의 방수 및 선형 범위 내에 농도 1X 인산 완충 식염수 (PBS) 중 0.1 % 소 혈청 알부민으로 망막 / 맥락막 샘플을 희석하고, 분석을 위해 이들을 사용한다. </li></ol></li><li> 잘 / 100 μL에서 접시에 분취에 샘플을 나눕니다. 4 ℃에서 밤새 인큐베이션 한 후, 플레이트를 0 세정 용액 200 μl를 사용하여 세 번 세척 하였다.1X PBS에서 05% 트윈 20. 참고 : ELISA에 대한 일차 항체로 샘플 행위의 방지 VEGF 존재; 따라서, 차 항체의 추가 사용이 필요하지 않습니다. </li><li> 1X PBS에서 20,000 0.1의 %의 BSA를 잘 당 희석-용액 100 μl를 추가 : 1로 차 항체를 희석. 4 ℃에서 하룻밤 동안 희석 된 이차 항체와 함께 플레이트를 배양 한 후 450 nm 파장에서의 흡광도를 측정한다. 각각의 표준 및 샘플 중복 측정 값의 평균에서 평균 제로 표준 광학 밀도를 뺍니다. </li><li> 이러한 프로 소프트 맥스 등의 4- 파라미터 로지스틱 (4- PL) 곡선 맞춤을 생성 할 수있는 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 데이터를 감소 알려진 농도의 약물 용액에서 상대적 광 신호에 기초하여 표준 곡선을 생성한다. [맞춤] - 표준 곡선을 작성하는 경우, 4 PL 곡선 맞춤은 [표준 곡선]의 [4- 파라미터] 클릭함으로써 획득 될 수있다. </li><li> 견본 FR의 약물 농도를 계산표준 곡선을 옴. 주 : 항 -VEGF 약물의 검출 한계 (LOD)를 본 실험에서 연구 하였다. 베바 시주 맙의 LOD는 ml의 0.024-3.125 NG /했고 aflibercept의는 0.039-10 ng를 / ㎖이었다. </li></ol> 4. 약동학 적 분석 방법 주 : PK 분석을 위해, 하나는 구획되지 또는 구획되지 않은 분석 중 하나를 사용할 수있다. 구획되지 분석에서 분자의 배열 동작은 방정식 (모델)에 의해 설명 될 수있다. 구획되지 않은 모델을 시각화 또는 다른 투여 요법에 대한 농도 - 시간 프로파일을 예측할 수없는 반면에 따라서, 구획되지 PK 분석은 시간 t에서의 농도를 예측할 수있다. 그러나, 구획되지 모델의 피팅은 복잡하고 긴 과정이 될 수 있습니다. 대조적으로, 가정 구획되지 않은 모델에서 덜 제한적이다. 비 구획되지 방법은 간단하며 반감기가 클리어런스 및 분포 부피 등의 약물 동력학 파라미터를 계산하기 위해 일반적으로 사용된다.우리는 안티 VEGF 요원에 대한 약동학 연구에 구획되지 모델을 선택했다. <ol><li> 이러한 피닉스 WinNonlin 소프트웨어로서 모델링 소프트웨어를 사용하여 구획되지 모델 약물 농도 데이터를 분석한다. <ol><li> [WNL5 클래식 모델]에서 [PK 모델]를 클릭하고 [설정] 메뉴에서 관측 시간, 투여 용량, 및 약물 농도를 매핑합니다. </li><li> 에서 [모델 선택] 탭에서 (예를 들어, 구획 수) 구획되지 모델을 선택하고 모델 매개 변수를 계산하기 위해 [실행] 버튼을 클릭합니다. </li></ol></li><li> (. 예를 들어, 표준 에러) (1) 아카 이케 정보 기준 (2) 파라미터 추정의 정밀도, 및 (3) 그래픽 분석 : 분석 한 결과, 가장 아래의 기준에 따라 약물 농도 데이터를 설명하는 최종 구획 모델을 선택 (예., 맞는 그래프의 선 (善)). </li><li> 같은 시간에 집중하고 아래의 반감기 (T 1/2) 및 지역 관심의 약물 동태 학적 파라미터를 계산구획되지 모델에 의해 구동되는 모델 파라미터 방정식으로부터 기 곡선 (AUC). </li></ol>

<ol><li>Urtti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+obstacles+of+ocular+pharmacokinetics+and+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Adv+Drug+Deliv+Rev%22%5BJournal%5D)">Challenges and obstacles of ocular pharmacokinetics and drug delivery.</a> Adv Drug Deliv Rev. 58, 1131-1135 (2006).</li>
<li>Geroski, D. H., Edelhauser, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+delivery+for+posterior+segment+eye+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Drug delivery for posterior segment eye disease.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 41, 961-964 (2000).</li>
<li>Ghate, D., Edelhauser, H. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Deliv%22%5BJournal%5D)">Ocular drug delivery.</a> Expert Opin Drug Deliv. 3, 275-287 (2006).</li>
<li>Del Amo, M. E., Urtti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Current+and+future+ophthalmic+drug+delivery+systems.+A+shift+to+the+posterior+segment%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Discov+Today%22%5BJournal%5D)">Current and future ophthalmic drug delivery systems. A shift to the posterior segment.</a> Drug Discov Today. 13, 135-143 (2008).</li>
<li>Avery, R. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravitreal+injection+technique+and+monitoring%3A+updated+guidelines+of+an+expert+panel%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Intravitreal injection technique and monitoring: updated guidelines of an expert panel.</a> Retina. 34, Suppl 12. S1-S18 (2014).</li>
<li>Kim, Y. C., Chiang, B., Wu, X., Prausnitz, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+delivery+of+macromolecules%5BTitle%5D)+AND+%22J+Control+Release%22%5BJournal%5D)">Ocular delivery of macromolecules.</a> J Control Release. 190, 172-181 (2014).</li>
<li>Group, C. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ranibizumab+and+bevacizumab+for+neovascular+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22N+Engl+J+Med%22%5BJournal%5D)">Ranibizumab and bevacizumab for neovascular age-related macular degeneration.</a> N Engl J Med. 364, 1897-1908 (2011).</li>
<li>Campochiaro, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sustained+benefits+from+ranibizumab+for+macular+edema+following+central+retinal+vein+occlusion%3A+twelve-month+outcomes+of+a+phase+III+study%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Sustained benefits from ranibizumab for macular edema following central retinal vein occlusion: twelve-month outcomes of a phase III study.</a> Ophthalmology. 118, 2041-2049 (2011).</li>
<li>Brown, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ranibizumab+for+macular+edema+following+central+retinal+vein+occlusion%3A+six-month+primary+end+point+results+of+a+phase+III+study%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Ranibizumab for macular edema following central retinal vein occlusion: six-month primary end point results of a phase III study.</a> Ophthalmology. 117, 1124-1133 (2010).</li>
<li>Diabetic Retinopathy Clinical Research Network. Aflibercept, bevacizumab, or ranibizumab for diabetic macular edema. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22N+Engl+J+Med%22">N Engl J Med</a>. 372, 1193-1203 (2015).</li>
<li>McCannel, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Meta-analysis+of+endophthalmitis+after+intravitreal+injection+of+anti-vascular+endothelial+growth+factor+agents%3A+causative+organisms+and+possible+prevention+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Meta-analysis of endophthalmitis after intravitreal injection of anti-vascular endothelial growth factor agents: causative organisms and possible prevention strategies.</a> Retina. 31, 654-661 (2011).</li>
<li>Meyer, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Incidence+of+rhegmatogenous+retinal+detachments+after+intravitreal+antivascular+endothelial+factor+injections%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Incidence of rhegmatogenous retinal detachments after intravitreal antivascular endothelial factor injections.</a> Acta Ophthalmol. 89, 70-75 (2011).</li>
<li>Del Amo, E. M., Urtti, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rabbit+as+an+animal+model+for+intravitreal+pharmacokinetics%3A+Clinical+predictability+and+quality+of+the+published+data%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Rabbit as an animal model for intravitreal pharmacokinetics: Clinical predictability and quality of the published data.</a> Exp Eye Res. 137, 111-124 (2015).</li>
<li>Hughes, P. M., Krishnamoorthy, R., Mitra, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitreous+disposition+of+two+acycloguanosine+antivirals+in+the+albino+and+pigmented+rabbit+models%3A+a+novel+ocular+microdialysis+technique%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ocul+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Vitreous disposition of two acycloguanosine antivirals in the albino and pigmented rabbit models: a novel ocular microdialysis technique.</a> J Ocul Pharmacol Ther. 12, 209-224 (1996).</li>
<li>Ahn, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+Intravitreally+Injected+Bevacizumab+in+Vitrectomized+Eyes%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ocul+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of Intravitreally Injected Bevacizumab in Vitrectomized Eyes.</a> J Ocul Pharmacol Ther. , (2013).</li>
<li>Park, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+pharmacokinetics+of+intravitreal+vascular+endothelial+growth+factor-Trap+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Eye+%28Lond%29%22%5BJournal%5D)">Intraocular pharmacokinetics of intravitreal vascular endothelial growth factor-Trap in a rabbit model.</a> Eye (Lond). 29, 561-568 (2015).</li>
<li>Jager, R. D., Aiello, L. P., Patel, S. C., Cunningham, E. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risks+of+intravitreous+injection%3A+a+comprehensive+review%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Risks of intravitreous injection: a comprehensive review.</a> Retina. 24, 676-698 (2004).</li>
<li>Durairaj, C., Shah, J. C., Senapati, S., Kompella, U. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prediction+of+vitreal+half-life+based+on+drug+physicochemical+properties%3A+quantitative+structure-pharmacokinetic+relationships+%28QSPKR%29%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Res%22%5BJournal%5D)">Prediction of vitreal half-life based on drug physicochemical properties: quantitative structure-pharmacokinetic relationships (QSPKR).</a> Pharm Res. 26, 1236-1260 (2009).</li>
<li>Ahn, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+pharmacokinetics+of+ranibizumab+in+vitrectomized+versus+nonvitrectomized+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Intraocular pharmacokinetics of ranibizumab in vitrectomized versus nonvitrectomized eyes.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 55, 567-573 (2014).</li>
<li>Mochizuki, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraocular+kinetics+of+ceftazidime+%28Modacin%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+Res%22%5BJournal%5D)">Intraocular kinetics of ceftazidime (Modacin).</a> Ophthalmic Res. 24, 150-154 (1992).</li>
<li>Bakri, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+intravitreal+ranibizumab+%28Lucentis%29%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of intravitreal ranibizumab (Lucentis).</a> Ophthalmology. 114, 2179-2182 (2007).</li>
<li>Kondo, T., Miura, M., Imamichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measurement+method+of+the+anterior+chamber+volume+by+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Measurement method of the anterior chamber volume by image analysis.</a> Br J Ophthalmol. 70, 668-672 (1986).</li>
<li>Toris, C. B., Yablonski, M. E., Wang, Y. L., Camras, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aqueous+humor+dynamics+in+the+aging+human+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Aqueous humor dynamics in the aging human eye.</a> Am J Ophthalmol. 127, 407-412 (1999).</li>
<li>Remtulla, S., Hallett, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+schematic+eye+for+the+mouse%2C+and+comparisons+with+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">A schematic eye for the mouse, and comparisons with the rat.</a> Vision Res. 25, 21-31 (1985).</li>
<li>Barza, M. Animal models in evaluation of chemotherapy of ocular infections. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBarza%2C+M+%22Experimental+Models+in+Antimicrobial+Chemotherapy%22">Experimental Models in Antimicrobial Chemotherapy</a>. Zak, O., Sande, M. A. , Harcourt Brace Jovanovich. 187-211 (1986).</li>
<li>Hughes, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+schematic+eye+for+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">A schematic eye for the rat.</a> Vision Res. 19, 569-588 (1979).</li>
<li>Maurice, D. M., Mishima, S. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMaurice%2C+DM+%22Ocular+pharmacokinetics%22">Ocular pharmacokinetics</a>. 69, Springer Verlag. (1984).</li>
<li>Greenbaum, S., Lee, P. Y., Howard-Williams, J., Podos, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+optically+determined+corneal+and+anterior+chamber+volumes+of+the+cynomolgus+monkey%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">The optically determined corneal and anterior chamber volumes of the cynomolgus monkey.</a> Curr Eye Res. 4, 187-190 (1985).</li>
<li>Ruby, A. J., Williams, G. A., Blumenkranz, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vitreous+humor%5BTitle%5D)+AND+%22Foundations+of+Clinical+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Vitreous humor.</a> Foundations of Clinical Ophthalmology. , Lippincott Williams & Wilkins. (2006).</li>
<li>Jaffe, G. J., Ashton, P., Andrew, P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJaffe%2C+GJ+%22Intraocular+Drug+Delivery%22">Intraocular Drug Delivery</a>. , Taylor & Francis. (2006).</li>
<li>Iyer, M. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clearance+of+intravitreal+moxifloxacin%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Clearance of intravitreal moxifloxacin.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 47, 317-319 (2006).</li>
<li>Fauser, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+safety+of+intravitreally+delivered+etanercept%5BTitle%5D)+AND+%22Graefes+Arch+Clin+Exp+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and safety of intravitreally delivered etanercept.</a> Graefes Arch Clin Exp Ophthalmol. 242, 582-586 (2004).</li>
<li>Scholes, G. N., O'Brien, W. J., Abrams, G. W., Kubicek, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clearance+of+triamcinolone+from+vitreous%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Clearance of triamcinolone from vitreous.</a> Arch Ophthalmol. 103, 1567-1569 (1985).</li>
<li>Stastna, M., Behrens, A., McDonnell, P. J., Van Eyk, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+protein+composition+of+rabbit+aqueous+humor+following+two+different+cataract+surgery+incision+procedures+using+2-DE+and+LC-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Proteome+Sci%22%5BJournal%5D)">Analysis of protein composition of rabbit aqueous humor following two different cataract surgery incision procedures using 2-DE and LC-MS/MS.</a> Proteome Sci. 9, 8(2011).</li>
<li>Sinapis, C. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+intravitreal+bevacizumab+%28Avastin%28R%29%29+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of intravitreal bevacizumab (Avastin(R)) in rabbits.</a> Clin Ophthalmol. 5, 697-704 (2011).</li>
<li>Gaudreault, J., Fei, D., Rusit, J., Suboc, P., Shiu, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preclinical+pharmacokinetics+of+Ranibizumab+%28rhuFabV2%29+after+a+single+intravitreal+administration%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Preclinical pharmacokinetics of Ranibizumab (rhuFabV2) after a single intravitreal administration.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 46, 726-733 (2005).</li>
<li>Maurice, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review%3A+practical+issues+in+intravitreal+drug+delivery%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ocul+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Review: practical issues in intravitreal drug delivery.</a> J Ocul Pharmacol Ther. 17, 393-401 (2001).</li>
<li>Laude, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intravitreal+therapy+for+neovascular+age-related+macular+degeneration+and+inter-individual+variations+in+vitreous+pharmacokinetics%5BTitle%5D)+AND+%22Prog+Retin+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Intravitreal therapy for neovascular age-related macular degeneration and inter-individual variations in vitreous pharmacokinetics.</a> Prog Retin Eye Res. 29, 466-475 (2010).</li>
<li>Christoforidis, J. B., Carlton, M. M., Knopp, M. V., Hinkle, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET%2FCT+imaging+of+I-124-radiolabeled+bevacizumab+and+ranibizumab+after+intravitreal+injection+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">PET/CT imaging of I-124-radiolabeled bevacizumab and ranibizumab after intravitreal injection in a rabbit model.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 52, 5899-5903 (2011).</li>
<li>Sangwan, V. S., Pearson, P. A., Paul, H., Comstock, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+the+Fluocinolone+Acetonide+Intravitreal+Implant+for+the+Treatment+of+Noninfectious+Posterior+Uveitis%3A+3-Year+Results+of+a+Randomized+Clinical+Trial+in+a+Predominantly+Asian+Population%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmol+Ther%22%5BJournal%5D)">Use of the Fluocinolone Acetonide Intravitreal Implant for the Treatment of Noninfectious Posterior Uveitis: 3-Year Results of a Randomized Clinical Trial in a Predominantly Asian Population.</a> Ophthalmol Ther. 4, 1-19 (2015).</li>
<li>Bajwa, A., Aziz, K., Foster, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficacy+of+fluocinolone+acetonide+intravitreal+implant+%280.59+mg%29+in+birdshot+retinochoroidopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Safety and efficacy of fluocinolone acetonide intravitreal implant (0.59 mg) in birdshot retinochoroidopathy.</a> Retina. 34, 2259-2268 (2014).</li>
<li>Sanford, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fluocinolone+acetonide+intravitreal+implant+%28Iluvien%28R%29%29%3A+in+diabetic+macular+oedema%5BTitle%5D)+AND+%22Drugs%22%5BJournal%5D)">Fluocinolone acetonide intravitreal implant (Iluvien(R)): in diabetic macular oedema.</a> Drugs. 73, 187-193 (2013).</li>
<li>Haller, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dexamethasone+intravitreal+implant+in+patients+with+macular+edema+related+to+branch+or+central+retinal+vein+occlusion+twelve-month+study+results%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Dexamethasone intravitreal implant in patients with macular edema related to branch or central retinal vein occlusion twelve-month study results.</a> Ophthalmology. 118, 2453-2460 (2011).</li>
<li>Boyer, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year%2C+randomized%2C+sham-controlled+trial+of+dexamethasone+intravitreal+implant+in+patients+with+diabetic+macular+edema%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Three-year, randomized, sham-controlled trial of dexamethasone intravitreal implant in patients with diabetic macular edema.</a> Ophthalmology. 121, 1904-1914 (2014).</li>
<li>Patel, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+administration+into+the+suprachoroidal+space+using+a+microneedle+for+drug+delivery+to+the+posterior+segment+of+the+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Targeted administration into the suprachoroidal space using a microneedle for drug delivery to the posterior segment of the eye.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 53, 4433-4441 (2012).</li>
<li>Makadia, H. K., Siegel, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Poly+Lactic-co-Glycolic+Acid+%28PLGA%29+as+Biodegradable+Controlled+Drug+Delivery+Carrier%5BTitle%5D)+AND+%22Polymers+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Poly Lactic-co-Glycolic Acid (PLGA) as Biodegradable Controlled Drug Delivery Carrier.</a> Polymers (Basel). 3, 1377-1397 (2011).</li>
</ol>

저자는 공개할 이해 상충이 없습니다.

다양한 안과 질환 치료를 위해 항혈관 내피 성장 인자(VEGF) 제제와 같은 안내 약물의 사용이 증가함에 따라 안내 주사 후 약물의 조직 분포 및 제거에 대한 지식이 중요합니다. 안내 약물의 약동학을 이해하는 것은 약물의 효능과 안전성을 이해하고, 약물의 최적 용량을 결정하고, 전신 또는 안내 합병증을 최소화하는 데 중요합니다. 그러나 인간의 안내 약물에 대한 상세한 약동학 연구는 안전성 문제로 인해 제한적이며 적절한 동물 모델이 필요합니다.
토끼 시스템은 안내 약물의 전방내, 유리체강내 및 망막내 약동학을 연구하는 데 사용되는 잘 확립된 모델입니다16,21,31-33. 토끼는 다루기 쉽고 실험에 사용할 수 있습니다. 또한 토끼를 사용한 동물 연구는 원숭이와 같은 더 큰 동물을 사용하는 동물 연구에 비해 매우 경제적입니다. 약동학 연구의 경우, 이 시스템을 사용하면 동일한 토끼의 수성, 전체 유리체, 망막 및 혈청을 서로 다른 토끼의 서로 다른 시점에서 동시에...

안구 내 약물 전달의 출현 전에 안구 질환에 대한 의학적 치료의 주된 관심사는 약물이 눈에 침투 할 수있는 효율이었다. 혈액 - 눈 장벽은 눈에 확산, 마약 등 많은 물질을 방지 할 수 있습니다. 따라서, 치료 수준 위에있는 약물의 농도는 쉽게 얻을 수 없다. 약물의 치료 적 농도는 눈 4,5-에서 달성 될 수 있도록 전방 내 강내 주사를 포함하는 안구 내 약물 투여 방법은 수 직접 혈액 - 안구 장벽을 우회 1-3. 따라서, 유리체 강내 약물 전달은 여러 가지 안구 질환 5,6 치료의 인기있는 방법이되고있다. 예를 들어, 강내 주사 널리 연령 관련 황반 변성, 당뇨병 성 망막증, 망막 정맥 폐색, 및 안구 감염 7-10 행한다. 특히, 이후항 -VEGF 약물의 도입은, 강내 주사 주파수는 현저히 망막 질환의 치료에 증가했다. 따라서, 약물 치료의 효능 및 안전성을 평가하기 위해 이러한 약물의 약동학 안압을 이해하는 것이 중요하다. 약물의 안내 행정부가 안구 내 약물 농도를 모니터링 안구 질환에 대한 약물 치료에 중요한 돌파구로 간주되지만 기술적으로 요구하고있다. 인간의 눈은 방수 (약 200 μL) 및 유리질 (4.5 ㎖, 표 1)의 소량을 포함하기 때문에, 약물의 농도를 측정하는 안구 유체의 충분한 양을 획득하는 것은 기술적으로 곤란하다. 또한, 이러한 유리체 도청 또는 전방 천자로 눈 유체를 얻기 위해 사용하는 방법은, 안구 조직을 손상 및 백내장, 안내 염, 또는 심각한 합병증이 발생할 수 있습니다망막 박리 (11, 12). 따라서, 동물 모델은 일반적으로 사용되는 약물 안내 (13)의 약물 동력학 연구에 사용된다. 이러한 동물 모델 중에서, 토끼, 또는 원숭이는 가장 자주 사용되는 동물이다. 가족 토끼의 순서 토끼 목의 작은 포유류 토끼는 세계의 여러 부분에서 발견된다. 토끼 공격적인 없기 때문에, 그들은 처리 실험에서 사용하여 관찰하기 쉽다. 비용 절감, 인간 동물 유사한 아이 사이즈의 준비된 가용성 및 비교 호의 토끼 눈을 사용하여 약동학 연구를 수행하기위한 정보의 대형 데이터베이스. 본 논문에서는 토끼 눈의 안압 약의 약동학 적 연구를위한 프로토콜을 설명한다.

<table><tbody><tr><td>Zoletil</td><td>Virbac Laboratories, Carros Cedex, 프랑스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>자일라진 염산염&nbsp;</td><td>포트 닷지 연구소, 포트 닷지, IA</td><td></td><td></td></tr><tr><td>프로파라카인 염산염 (알카인)</td><td>알콘 연구소, 포트 워스, 텍사스</td><td></td><td></td></tr><tr><td>페닐 에프린 염산염 및 트로피카 아미드</td><td>Santen Pharmaceutical, Co., Osaka, Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>재조합 인간 VEGF 165</td><td>R & D systems</td><td>293-VE-050</td><td></td></tr><tr><td>Carboate-Bicarbonate buffer</td><td>SIGMA</td><td>C3041-50CAP</td><td></td></tr><tr><td>Nunc Microwell 96F(뚜껑 포함) 
Nunclon D Si</td><td>Thermo SCIENTIFIC</td><td>167008</td><td>96 웰 플레이트</td></tr><tr><td>소 혈청 알부민(BSA) 25g(Net)</td><td>BOVOGEN</td><td>BSA025</td><td></td></tr><tr><td>인산염 완충 식염수(PBS) pH 7.4(1x), 500ml</td><td>gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Sheep anti-Human IgG 2차 항체, HRP 접합체</td><td>Thermo SCIENTIFIC</td><td>PA1-28652</td><td></td></tr><tr><td>염소 항인간 IgG Fc(HRP)</td><td>abcam</td><td>ab97225</td><td></td></tr><tr><td>염소 항-인간 IgG, Fab'2 보조 항체, HRP 결합</td><td>Thermo SCIENTIFIC</td><td>PA1-85183</td><td></td></tr><tr><td>CelLytic MT&nbsp; 세포 용해 시약</td><td>SIGMA</td><td>C3228-50ML</td><td>용해 버퍼</td></tr><tr><td>100 메스 블레이드</td><td>nopa 기구</td><td>BLADE #15</td><td></td></tr><tr><td>100 메스 블레이드</td><td>nopa 기구</td><td>BLADE #10</td><td></td></tr><tr><td>Feather 수술용 칼날 스테인리스 스틸</td><td>FEATHER</td><td>11</td><td></td></tr><tr><td>1-StepTM TMB-블로팅 기질 용액, 250ml</td><td>Thermo SCIENTIFIC</td><td>34018</td><td></td></tr><tr><td>안정적인 과산화물 기질 버퍼 (10x), 100 ml</td><td>Thermo Scientific</td><td>34062</td><td></td></tr><tr><td>Softmax Pro</td><td>Molecular Devices</td><td>v.5.4.1</td><td>소프트웨어로 표준 곡선</td></tr><tr><td>생성 SAAM II&nbsp;</td><td>Saam Institute, Seattle, WA</td><td></td><td>약동학 모델링을 위한 소프트웨어</td></tr><tr><td>Phoenix WinNonlin</td><td>Pharsight, Cary, NC</td><td>v. 6.3</td><td>약동학 모델링을 위한 소프트웨어</td></tr><tr><td>Avastin (bevacizumab)</td><td>Genentech</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

안구 약의 약동학 연구에서 토끼 눈의 사용

Use of Rabbit Eyes in Pharmacokinetic Studies of Intraocular Drugs

자신의 전신 흡수를 최소화하면서 약물 투여의 안내 경로, 치료 약물의 높은 농도의 전달을 가능하게한다. 몇몇 약물은 전방 또는 유리체 내로 투여되고, 주사 안내 다양한​​ 안구 질환의 치료에 효과적이었다. 동물이 다른 포유 동물에 비해 취급이 용이하고 경제적이기 때문에 가토 널리 안과 연구에 사용되었고, 토끼 눈의 크기는 사람의 눈의 그것과 유사하다. 30 G 바늘을 사용하여, 약물은 토끼 눈의 전방 내 강내 공간으로 주입 될 수있다. 안구는 분석까지 동결되고, 방수, 유리체, 망막 / 맥락막으로 나눌 수 있습니다. 유리체 망막 / 맥락막 샘플을 균질화하고 분석하기 전에 가용화 할 수있다. 그리고, 면역 각 구획에서 인공 약물의 농도를 측정하기 위해 수행 될 수있다. 적절한 약물 동력 학적 모델 일 수있다이러한 반감기 및 약물의 최대 농도 등 여러 가지 파라미터를 계산하는 데 사용된다. 토끼의 눈은 안구 내 약물의 약동학 적 연구를위한 좋은 모델이 될 수 있습니다.

무균 기법 가토 관심 약물의 체내 주사를 실시하는 데 사용되는 방법은도 1에 도시되어있다. 처리 된 눈 예약 된 시간에 적출하고 -80 ℃에서 보관한다. 그림 2에서 입증 된 바와 같이 분석, 세 개의 구획, 수성 유머, 유리체, 망막 / 맥락막를 들어, 냉동 토끼 눈에서 분리된다. 구획의 샘플은 ELISA에 대 한 준비가되어 있습니다. 이차 항체와 함께 배양 한 결과, 광학 농도가 강내 주사 후 여러 시점에서 수집 된 세 개의 구획으로부터 표준 곡선에 대한 관심과 샘플의 약물의 공지 농도를 함유하는 96- 웰 플레이트에서 측정된다 (도 3). 표준 곡선 (보충도 1)로부터 산출되는 농도 데이터는 pharmacokine에 장착 될 수있다TIC 모델 및 약동학 적 파라미터가 피팅 된 선 (도 4)로부터 결정될 수있다. <...

토끼는 안구 주사 약물의 약동학을 연구하는 데 널리 사용됩니다. 토끼 눈을 사용하여 안구 내 약물의 약동학 연구를 수행하는 방법을 설명합니다.

The intraocular route of drug administration enables the delivery of high concentrations of therapeutic drugs, while minimizing their systemic absorption. ...

본 실험의 전체적인 목적은 토끼의 눈을 이용하여 안구 내 투여 약물의 약동학적 특성을 조사하는 것입니다. 이 방법은 유리체 내 주사된 약물의 약동학 등 안구 약리학 분야의 핵심 질문들에 대한 답을 찾는 데 도움이 될 수 있습니다. 이 기술의 주요 장점은 토끼의 안구가 상대적으로 커서, 유리체 내 주사 기술 및 주입된 약물의 안구 내 분포가 인간과 비교 가능할 정도라는 점입니다.또한, 토끼는 영장류보다 다루기 쉽고 비용이 적게 듭니다. 이 기술의 함의는 안구 내 약물 전달과 관련이 있는데, 이는 약물 전달 방식의 사용이 안구 구획 내의 약물 농도와 작용 지속 시간에 큰 영향을 미치기 때문입니다. 따라서 각 구획별 시간 경과에 따른 약물 농도를 조사해야 합니다.실험 절차는 제 연구실의 박사후 연구원인 홍혜경 박사가 시연하겠습니다. 텍스트 프로토콜에 따라 건강한 뉴질랜드 화이트 토끼를 마취시킨 후, 국소 마취 안약을 점안하고, 마취에서 회복될 때까지 안구 건조를 방지하기 위해 각막에 보습 연고 또는 겔을 도포합니다. 동공을 확장시키기 위해 phenylephrine hydrochloride와 trapicamide를 한두 방울씩 점안합니다.면봉을 사용하여 안구 주변 피부에 10% 포비돈 요오드를 도포합니다. 그 다음, 5% 포비돈 요오드 한 방울을 안구의 결막에 떨어뜨립니다. 이어서 주사기에 장착된 30 gauge 바늘을 사용하여, 외측 상방 사분면의 수술적 각막연에서 1 mm 뒤쪽의 공막 표면에 수직으로 약물을 유리체 내에 주입합니다.누출은 편향의 원인이 될 수 있으므로 공막에서의 누출을 최소화하는 것이 중요합니다. 유리체강에서의 누출을 방지하기 위해, 바늘을 제거한 후 면봉을 적용하고 최소 30초 동안 압박해야 합니다. 상처가 치유될 때까지 충분한 시간을 둔 후, 치료받은 토끼를 일주일 동안 매일 관찰하고, 그 이후에는 일주일에 한 번씩 심각한 안구 내 염증 징후가 있는지 관찰하십시오.텍스트 프로토콜에 따라 토끼를 안락사시킨 후, 안검 견인기를 사용하여 안검열을 엽니다. 각막연에서 후방으로 2~3mm 떨어진 지점에서 360도 결막 절개를 시행하고, 결막과 테논낭을 안구로부터 박리하여 후방으로 확장합니다. 외안근을 안구 삽입 지점에 가깝게 절단합니다.그런 다음, 곡선 핀셋을 사용하여 시신경을 고정하고 핀셋과 안구 사이의 신경을 절단합니다. 주변 조직은 그대로 둔 채 안구만을 제거합니다. 이후 액체 질소를 사용하여 안구

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Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

이 비디오에서는 토끼 모델에서 상눈물샘의 안구 부분에 Concanavalin A를 주입하여 수성 결핍성 안구 건조증을 유발하는 절차를 보여줍니다. 이 모델은 안구건조증 치료를 위한 약물의 약동학 및 생체내 분포 분석에 유용합니다.

Performing Injection into Palpebral Portion of the Superior Lacrimal Gland: A Technique for Inducing Dry Eye Disease in Rabbit Model

이 비디오는 상눈물샘의 안와엽에 Concanavalin A를 주입하여 토끼 모델에서 안구건조증을 유발하는 절차를 설명합니다. 개발된 모델은 안구건조증 치료를 위한 다양한 약물의 효과를 연구하는 데 유용합니다.

Performing Injection into Orbital Lobe of Superior Lacrimal Gland: A Technique for Inducing Eye Dry Skin in Rabbit Model(우수 눈물샘의 안와엽에 주사 수행: 토끼 모델에서 안구건조증을 유발하는 기술)

우리는 축 신장 토끼 눈에 리보플라빈과 UVA와 공막 가교의 효과를 보여줍니다. 축 방향 신장은 오른쪽 눈의 눈꺼풀 (안검 봉합을) 봉합하여 (남성과 여성) 십삼일 된 뉴질랜드 토끼 유도 하였다.

공막 래빗 모델에 축 방향 근시의 예방 리보플라빈 및 자외선-A 방사선을 사용하여 교차 결합

이 원고 소설 설정과 운영 photoacoustic 현미경와 토끼 같은 더 큰 동물의 비 침범 성, 레이블 없는 chorioretinal 이미징 광학 일관성 단층 촬영 듀얼 모달 시스템의 절차에 설명 합니다.

살아있는 토끼 눈에 소설 Photoacoustic 현미경 및 광학 일관성 단층 촬영 듀얼 적임 Chorioretinal 이미징

이 기사에서는 궤도 해구 시스템의 모든 부분에 concanavalin A를 주입하여 토끼에서 급성 또는 만성 안구 건조 증을 유도하는 방법의 개발을 설명합니다. 이미 보고된 방법보다 우수한 이 방법은 약리학 적 제제의 연구에 적합한 안구 건조증의 재현 가능하고 안정적인 모델을 생성합니다.

코카나발린A에 의해 유도된 수성 결핍 안구 건조증의 토끼 모델: 약물 효능 연구에 적용

토끼에 있는 만성 안구 건조병을 외과로 모든 궤도 해구땀샘을 제거하여 유도하기 위하여 새로운 접근이 제시됩니다. 이전에 보고된 것과 는 구별되는 이 방법은 눈물 생리학 및 병리생리학 및 안구 치료제를 연구하는 데 적합한 수성 결핍 안구 건조증의 안정적이고 재현 가능한 모델을 생성합니다.

토끼의 완전한 다크레오아데네절제술을 이용한 중증 안구건조증 모델 구축

우리는 경내 주입 후 눈에 리포좀의 스파티오 측두분포를 비침습적으로 연구하기 위해 광섬유 공초점 레이저 미세 내시경 검사(CLM)의 사용을 위한 프로토콜을 제시한다.

광섬유 공초점 레이저 미세 내시경 검사를 사용하여 안구 약물 전달 시스템의 생체 내 측두 체 이미징

이 프로토콜은 전체 토끼 눈의 고품질 냉동 절개를 얻기 위한 신뢰할 수 있는 방법을 설명합니다. 토끼 눈 절제술, 고정, 포매 및 절편 절차에 대해 자세히 설명하며, 이는 큰 눈에 면역조직화학을 활용하는 모든 연구에 쉽게 적용할 수 있습니다.

Whole Rabbit Eye의 고품질 냉동 절개 획득 

이 프로토콜은 중앙 각막 절개와 전방으로의 긴 터널을 사용하여 쥐에서 안내 주사 기술을 설명합니다. 이 주입 방법은 부주의한 조직 손상을 유발할 위험을 최소화하여 정밀도와 재현성을 향상시킵니다.

부작용 위험이 낮은 쥐에 대한 카메라내 주사

이 논문은 표준 안과 수술 기법을 사용하여 토끼 모델에서 시신경 압착을 수행하기 위한 자세한 지침을 제시합니다.

토끼 모델에서 시신경 파쇄를 위한 외과적 접근 방식

이 연구는 성체 쥐의 망막과 시신경에 치료제를 전달하는 방법론을 제시합니다. 또한, 성체 쥐의 시신경과 망막을 하향식으로 일괄적으로 수집하기 위해 독특한 조직 회수 방법이 도입되었습니다.

성체 쥐의 안구 치료 전달 및 고급 조직 회수(Ocular Therapeutic Delivery and Advanced Tissue Retrieval in adult rats)

배우세요 안구 내 약물의 약동학 특성을 토끼 눈을 이용해 조사하는 방법을. 이 기술은 안약 전달 메커니즘을 이해하고 효과적인 안과 치료법 개발에 필수적인 데이터를 제공합니다.

안구 약의 약동학 연구에서 토끼 눈의 사용

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