Flux de travail complet pour l'analyse des histones modifications post-traductionnelles utilisant la spectrométrie de masse Bottom-up: De Histone Extraction à l'analyse des données

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11:02 min

17 mai 2016

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Ce protocole décrit un flux de travail entièrement intégrée pour caractériser histone modifications post-traductionnelles par spectrométrie de masse (MS). Le flux de travail comprend histone purification à partir de cultures de cellules ou de tissus, histone dérivatisation et la digestion, l'analyse de MS en utilisant la chromatographie et des instructions pour l'analyse des données de liquide nano-flux. Le protocole est conçu pour l'achèvement dans les 2 - 3 jours.

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Dérivation des histones

Chapters in this video

0:05

Titre

1:07

Isolation des noyaux à partir de cellules intactes

3:18

Extraction et purification des histones à partir des noyaux

5:53

Dérivatisation chimique des histones à l'aide d'anhydride propionique pour l'analyse bottom-up

7:43

Dessalage des échantillons avec des Stage-tips

8:59

Résultats : Caractérisation des modifications post-traductionnelles des histones

10:10

Conclusion

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