Name: Bewertung der vaskulären Kontrollmechanismen Nutzung Videomikroskopie der isolierten Widerstand Arterien von Ratten (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-12-05T12:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 28 s
Description: Lernen Sie die Videomikroskopie isolierter Widerstandsarterien von Ratten zur Bewertung vaskulärer Kontrollmechanismen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung endothelialer und glatter Muskelzellfunktionen.

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Die Autoren äußern ihren aufrichtigen Dank Katie Fink und Lynn Dondlinger für ihre unschätzbare Hilfe bei der Vorbereitung dieser Handschrift.
Zuschuss: NIH #R21-OD018309; #R56-HL065289; und #R01-HL128242.

Die Autoren haben keinen finanziellen Interessenkonflikt.

Wie in der Einleitung erwähnt, dieses Paper beschreibt die Verwendung von Fernsehen Mikroskopie und isolierten Widerstand Arterie Ansätze zur Bewertung der Gefäßfunktion nicht nur in standard Ratte-Modellen (wie im Video), aber auch in hochspezialisierten genetisch veränderter Ratte Stämme, die zeigen, das neuartige und leistungsfähige Einsichten, die unter Verwendung dieser Ansätze gewonnen werden können. Die Verwendung dieser leistungsfähigen Techniken, aktive Ton zu bewerten und passiv mechanischen Eigenschaften des k...

Die frühesten Studien der Gefäßfunktion in Arterien verwendet Conduit Arterien und in vielen Fällen die Aorta. Krafterzeugung in großen Arterien wurde in der Regel untersucht, durch das Anbringen eines Ring-Segments der Arterie zu einem Kraftaufnehmer in einem Gewebe-Bad; bei der Aorta Streifen durch Schneiden spiralförmige des Schiffes, so dass der glatten Muskelfasern in Längsrichtung zwischen den Punkt der Anlage und der Kraftaufnehmer, zu den besten Schätzwert für die Kraft, die durch Kontraktion der orientiert waren die glatte Muskulatur entlang seiner Längsachse. Die Standardtechnik für das Schneiden von spiralförmigen Streifen der Hauptschlagadern war, legen Sie einen Glasstab in das Lumen des Gefäßes, machen Sie einen Schnitt in der Gefäßwand im gewünschten Winkel und halten bis zum Ende der exponierte Kante der Gefäßwand, wie der Schnitt verlängert wurde, um ein Ganzes zu produzieren spiralförmigen Streifen des Schiffes. Zu diesem Zeitpunkt die endotheliale Seite des Schiffes war in der Regel ausgelöscht, um Ablagerungen zu entfernen, vor Befestigung des Schiff-Streifens zu Kraftaufnehmers und Eintauchen der Vorbereitung in Sauerstoff und Temperatur gesteuert Gewebe Bad. Schließlich, dass Ansatz zu einem der bekanntesten und wichtigsten Entdeckungen in der Geschichte der Physiologie von Furchgott und Zawadski1, nämlich die Rolle des Endothels führte abgeleitet entspannende Faktor (EFRE), anschließend identifiziert als Stickstoffmonoxid, in Regulierung der Gefäßfunktion. Das entscheidende Ereignis zu dieser Entdeckung war eine Situation, in der die Ermittler eine intakte Endothel durch Vermeidung des Kontakts der endothelialen Seite der Arterie mit ausländischen Oberflächen beibehalten, und bemerkte, dass der Aorta Streifen nicht die erwarteten aufweisen, Kontraktion von Acetylcholin (ACh), aber stattdessen entspannt als Reaktion auf ACh. Basierend auf dieser Beobachtung, die Ermittler entwickelt eine "Sandwich"-Vorbereitung, in der sie eine Aorten-Segment mit einem intakten Endothel (aber nicht in der Lage, Kontraktionskraft zu generieren) angebracht, zu einem standard spiralförmigen Streifen der Aorta und konvertiert die ACh-induzierte Kontraktion in eine Entspannung.
Zwei bedeutende Fortschritte auf diesem Gebiet, das heute weitgehend benutzt werden sind die Entwicklung von Präparaten Messen aktiv Kontraktionskraft in kleinen Widerstand Arterien2,3 (z. B. im Darm Mesenterium3 ) und kanülierte Widerstand Arterie Vorbereitungen4,5,6. In einer der frühesten Berichte, Mulvany und Halpern3 beschriebenen Verwendung der Draht Myograph Zubereitung, aktive Kontraktionskraft in isolierten Widerstand Arterien aus dem Darm Mesenterium spontan Hypertensive Ratten (SHR) zu studieren und normotonen WKY Kontrollen. Im Anschluss an die Entwicklung des Systems der Draht Myograph waren kanülierte Widerstand Arterie Präparate entwickelt, um Studien der Schiffe näher, die in Vivo Bedingungen4,5,6zu ermöglichen.  Während beide Ansätze wertvolle Ergebnisse zu liefern, hat die kanülierte Arterie Vorbereitung die zusätzlichen Vorteile von mehr effektiv Erhaltung intrinsische aktiv Ton in den Arterien; und so die Ermittler, aktive myogen Reaktionen auf Veränderungen im Transmural Druck und Schiff Reaktionen auf Veränderungen in der Durchflussmenge und endotheliale Schubspannung zu studieren (siehe Beitrag von Halpern und Kelley6).
Ein wesentliches Ziel der vorliegenden Arbeit soll beschreiben, wie die altehrwürdige Technik der Videomikroskopie mit isolierten, kanülierte Widerstand Arterien um genaue Informationen über die Mechanismen zu gewinnen, die aktiv Ton in dieser entscheidenden Regeln beschäftigen Schiffe, unabhängig von Einflüssen der neuronalen, humorale oder parenchymatösen Zelle. Diese Basisinformationen, mit einem standard Rattenmodell und Beispiele aus unseren Studien von neu genetisch engineered Ratte Stämme, vermitteln dem Leser eine Vorstellung von den Arten der Erkenntnisse bezüglich Gefäßfunktion, die mit dem Fernsehen gewonnen werden können Mikroskopie-Ansätze und die eingesetzt werden können, in Studien mit jeder Kontrolle und experimentelle Gruppe(n) der Ermittler zu wählen, darunter mächtige neue experimentelle Ratte Modelle produziert durch gezielte Inzucht und neu entwickelte genetische Engineering-Techniken.
Dank der Präzision des Fernsehens Mikroskopie Ansätze bieten Messung von Durchmesserwechsel kanülierte Arterie Vorbereitungen sehr wertvolle Informationen über Endothel-abhängigen und Endothel-unabhängige Mechanismen der vaskulären Entspannung, als auch wichtige (und manchmal unerwartete) Veränderungen der vaskulären Kontrollmechanismen, die mit Bluthochdruck, hohe salzarme Kost und andere experimentellen Interventionen. Darüber hinaus Messung von Druck-Durchmesser Beziehungen in isoliert und kanülierte Widerstand Arterien, die durch die Behandlung mit Ca2 +maximal entspannt sind-freie Lösung oder eine pharmakologische gefäßerweiternde Medikament, ermöglicht es den Prüfer bewerten strukturelle Veränderungen in den Arterien durch vaskuläre remodeling und passive Spannungs-Dehnungs-Beziehungen-7 zu berechnen, die wichtige Erkenntnisse Änderungen in die passive mechanische Eigenschaften der Arterien bieten kann, die arterielle Funktion beeinflussen können unabhängig von (oder zusätzlich zu) ändert sich der aktive Kontrollmechanismen. Es ist auch wichtig zu beachten, dass Erkenntnisse aus Studien der isolierten Widerstand Arterien durch Informationen, die Verwendung von LDF, eine praktische Methode für die Bewertung der Gewebedurchblutung an das ganze Tier Level8,9 ergänzt werden können ,10, und durch kapilläre Dichte mit Gewebekulturen gekennzeichneten GS1 Lektin Bewertung gewonnenen Informationen, die spezifisch bindet an Glykoprotein Moieties in der Basalmembran der kleinen Arteriolen und Kapillaren11 , 12. letztere Methode ermöglicht eine sehr genaue Schätzung kapilläre Dichte, die nicht die klassische Schwierigkeiten bei der Abschätzung der kapilläre Dichte durch Schiffe in Vivo, z. B. fehlende nicht durchblutet zählen unterliegt Schiffe, wo die Durchblutung durch aktive Schließung der Arteriolen gestoppt ist. Wenn Sie zusammen verwendet, bieten diese Ansätze wichtige Erkenntnisse zum funktionelle Veränderungen in isolierten Widerstand Arterien zu Veränderungen der Gewebedurchblutung Ebene der mikrozirkulatorischen korrelieren; und einige Beispiele für die Verwendung dieser wertvolle Ansätze in Verbindung mit kanülierte Arterie Techniken erhalten Sie auch in der vorliegenden Handschrift.
Der vorliegende Beitrag konzentriert sich auf die Verwendung von Techniken der Videomikroskopie, vaskuläre Veränderungen in den Arterien von fremd-Sprague-Dawley Ratten zu bewerten. Es ist jedoch wichtig zu beachten, dass diese Techniken sehr wertvoll in Aufklärung phänotypische Veränderungen in hochspezialisierten gentechnisch Ratte Stämme erstellt durch selektive Züchtung oder gen Bearbeitung mit Hilfe von Techniken bewährt haben. In diesem Manuskript stellen wir Beispiele dafür, wie video Mikroskopiertechniken wichtige Informationen bezüglich Gefäßfunktion in einer Reihe von wertvollen Rat zur Verfügung gestellt haben-Modelle, darunter die Dahl Salz-Sensitive (SS) Ratte-eine Inzucht Ratte Belastung, die die am weitesten verbreitete ist experimentelles Modell verwendet untersuchen die Mechanismen von Salz sensible Hypertenson18,19,20,21,22,23; und Consomic Ratten durch selektive Züchtung von SS Ratten mit dem Salz-unempfindliche braun Norwegen (BN) Ratte Stamm erstellt. Jedes Chromosom aus Braun Norwegen Ratte wurde in der Consomic-Ratte-Panels Introgressed einzeln in den Dahl SS24,25,26 genetischen Hintergrund. Verwendung von Consomic Ratte Platten lieferte wertvolle Hinweise auf bestimmten Chromosomen, die Salz Empfindlichkeit der Blutdruck und anderen Phänotypen, darunter vaskuläre Reaktivität24,25,26 beitragen ,27,28.
Selektive Zuchtstrategien nutzen SS Ratten und Consomic Ratten tragen einzelne BN Chromosomen konnten auch die Generation der verengten Congenic Stämme mit kleinen Segmenten der einzelnen braun Norwegen Chromosomen Introgressed in die genetische Dahl-SS Hintergrund22,29. Diese können extrem wertvollen input auf bestimmte Gene oder schmale Regionen der Chromosomen, die entscheidende physiologischen Variablen, z. B. Blutdruck, Nierenschädigung und vaskuläre Reaktivität22,29beeinflussen können. Eine weitere leistungsstarke Ergänzung zu der Ratte genetische Toolbox ist die Entwicklung von Ratte gen Knockout Modelle nutzen fortschrittliche gen Bearbeitung Techniken einschließlich ZFN, transcriptional Aktivator-artigen-Effektor Nukleasen (TALENS), und zuletzt CRISPR-Cas913 ,14,15,16,17. Das Aufkommen dieser mächtigen Techniken, mit denen Gene bei der Ratte geschlagen werden können ist eine immens wichtige Entwicklung, weil gen Knockout Studien bisher verwendet haben (und weiterhin verwenden) Mäuse fast ausschließlich. Eine weitere experimentelle Komponente in der vorliegenden Arbeit zeigt die Bedeutung von kanülierte Arterie Techniken und Videomikroskopie, physiologische Kontrollmechanismen bei Knockout Ratten fehlt die master Antioxidans und Zelle schützende Transkription zu bewerten Faktor, nukleare Faktor (2 erythroiden abgeleitet) - wie - 2 (NRF2)30,31, die mit TALEN Technologie in Sprague-Dawley genetischen Hintergrund17entwickelt wurden. In-vitro- Videomikroskopie Techniken wurden in diesen Experimenten Verlust des Gens NRF2 funktionale nachzuweisen und einen potentiell wertvollen therapeutischen Ansatz basierend auf direkte Hochregulation von NRF2-vermittelten Antioxidans zu testen verwendet. Abwehrkräfte. NRF-2 ist der erhebliche therapeutische Bedeutung Bekämpfung vaskulären oxidativen Stress in den Menschen angesichts der enttäuschenden Ergebnisse der klinischen Studien mit direkten Verwaltung von Antioxidantien wie Vitamine C und E32.

<table><tbody><tr><td>SS Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS/JHsd/Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>SS.5BN Consomic Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS-Chr 5BN/Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>SS.13BN Consomic Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS-CH 13BN/Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>Ren1-BN Congenic Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS. BN-(D13hmgc41-D13)hmgc23/Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>Ren1-SSA Congenic Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS. BN-(D13rat77-D13rat105/Mcwi Stamm</td><td>Kontaktieren Sie Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>Ren1-SSB Congenic Rat</td><td>Medical College of Wisconsin</td><td>SS. BN-(D13rat124-D13rat101/Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>Nrf2(-/-) Knockout Ratte and Wildtype Littermates</td> Medical <td>College of Wisconsin</td><td>SD-Nfe212em1Mcwi Stamm</td><td>Kontakt Dr. Aron Geurts (ageurts@mcw.edu)</td></tr><tr><td>Low Salt Rat Chow (0,4% NaCl)-AIN-76A Dyets</td><td>, Inc.</td><td></td><td></td>113755</tr><tr><td>Rattenfutter mit hohem Salzgehalt (4 % NaCl)-AIN-76A</td><td>Dyets, Inc.</td><td></td><td></td>113756</tr><tr><td>Colorado Video Caliper</td><td>Colorado Video, Inc.</td><td>Modell 308</td><td></td></tr><tr><td>Videokamera</td><td>Hitachi</td><td>KPM1AN</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Olympus Life Science</td><td>CKX41</td><td></td></tr><tr><td>Fernsehmonitor</td><td>Panasonic</td><td>WVBM1410</td><td></td></tr><tr><td>Druckwandler</td><td>Stoelting</td><td>56360</td><td></td></tr><tr><td>Blutdruckanzeigeeinheit</td><td>Stoelting</td><td>50115</td><td></td></tr><tr><td>Kanülierte Arterienkammer</td><td>Living Systems Instrumentierung</td><td>CH-1</td><td>Einzelgefäßkammer für den allgemeinen Gebrauch</td></tr><tr><td>Temperaturregler für Einkammer-Lebendsysteme</td><td>Instrumentierung</td><td>TC-09S Gasdispersionsrohr</td><td></td></tr><tr><td>, Miniatur, gerade</td><td>Wohnsysteminstrumentierung</td><td>GD-MS</td><td>Bietet Belüftung im Gefäßbad</td></tr><tr><td>Gasaustausch Oxygenator, Miniatur-Lebendsystem-Instrumentierung</td><td></td><td>OX</td><td>Ermöglicht den Gasaustausch mit Perfusat</td></tr><tr><td>Laser-Doppler-Durchflussmesser</td><td>Perimed</td><td>PeriFlux 5000 LDPM</td><td></td></tr><tr><td>GS1 Lectin</td><td>Vector Labs</td><td>RL-1102</td><td></td></tr><tr><td>Glaskapillarröhrchen für Mikropipetten</td><td>Fredrich Haer Co.</td><td>27-33-1</td> 2 <td>mm ODX1 mm ID</td></tr><tr><td>Verticle Pipettenabzieher</td><td>David Kopf Instruments</td><td>Modell 700C</td><td></td></tr><tr><td>Nylon-Nahtmaterial (10/0)-3 PLY</td><td>Ashaway Line und Twine Manufacturing Co.</td><td>114-ANM-10</td><td>Einzelstränge aus 3-lagigem Nylonnaht, herausgekitzelt für die Verwendung auf Gefäßen</td></tr><tr><td>Dumont #5 Pinzette-Inox</td><td>Fine Science Tools</td><td>11254-20</td><td></td></tr><tr><td>Vannas Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15003-08</td><td></td></tr><tr><td>Protandim</td><td>Protandim</td><td></td><td>NRF2 Induktor: Wenden Sie sich an Dr. Joe McCord (JOE.MCCORD@UCDENVER.EDU)</td></tr><tr><td>Natriumchlorid</td><td>Fisher Bioreagenzien</td><td>BP358-212</td><td></td></tr><tr><td>Natriumbicarbonat</td><td>Fisher Chemical</td><td>S233-3</td><td></td></tr><tr><td>Dextrose (d-Glukose) wasserfrei</td><td>Fisher Chemical</td><td>D16-500</td><td></td></tr><tr><td>Magnesiumsulfat (MgSO4-7H2O)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M1880-500 G</td><td></td></tr><tr><td>Calciumchlorid (CaCl2-2 H2O)</td><td>Sigma</td><td>C5080-500G</td><td></td></tr><tr><td>Natriumphosphat-monobasisch (NaH2PO4)</td><td>Sigma</td><td>S0751-500G</td><td></td></tr><tr><td>Kaliumchlorid (KCl)</td><td>Fisher Chemical</td><td>P217-500G</td><td></td></tr><tr><td>Ethylendiamintetraessigsäure Dinatriumsalzdihydrat (EDTA)</td><td>Sigma</td><td>ED255-500G</td><td></td></tr></tbody></table>

bewertung der vaskulären kontrollmechanismen nutzung videomikroskopie der isolierten widerstand arterien von ratten

Evaluation of Vascular Control Mechanisms Utilizing Video Microscopy of Isolated Resistance Arteries of Rats

Dieses Protokoll beschreibt die Verwendung von in-vitro- Fernsehen Mikroskopie auszuwertende Gefäßfunktion in isolierte zerebrale Widerstand Arterien (und andere Schiffe) und beschreibt Techniken für die Bewertung der Gewebedurchblutung mit Laser Doppler Flowmetry (LDF ) und kapilläre Dichte Nutzung Eindringmittel beschriftet Griffonia Simplicifolia (GS1) Lektin. Aktuelle Methoden zur Untersuchung isoliert Widerstand Arterien an Transmural Druck begegnet in Vivo und in Ermangelung von parenchymatösen Zelle Einflüsse stellen ein wichtiges Bindeglied zwischen in-Vivo -Studien und Erkenntnissen aus molekularen reduktionistische Ansätze, die begrenzten in integrative Antworten auf die ganze Ebene Einblick. LDF und Techniken, um selektiv Arteriolen und Kapillaren mit Gewebekulturen beschriftet GS1 Lektin identifizieren bieten praktische Lösungen für Ermittler, die Erkenntnisse aus Studien der isolierten Widerstand Arterien erweitern können. Dieses Whitepaper beschreibt die Anwendung dieser Techniken, grundlegende Kenntnisse der vaskulären Physiologie und Pathologie in der Ratte als allgemeines experimentelles Modell zu gewinnen, und in einer Vielzahl von spezialisierten gentechnisch verändert "Designer" Ratte-Stämme, die bieten kann wichtige Erkenntnisse über den Einfluss bestimmter Gene auf wichtige vaskulären Phänotypen. Nutzen diese wertvolle experimentelle Ansätze in der Ratte Stämme durch selektive Zuchtstrategien und neue Technologien für die Herstellung von gen-Knockout-Modelle bei der Ratte entwickelt dehnt die strenge der wissenschaftlicher Räumlichkeiten in Knockout-Maus-Modellen entwickelt und Dieses Wissen zu mehr relevanten Tiermodell, mit einem gut verständlichen physiologischen Hintergrund und Eignung für physiologische Untersuchungen aufgrund seiner Größe zu erweitern.

In-vitro- Mikroskopie der kanülierte Widerstand Arterien ermöglicht die Untersuchung von Einflussfaktoren auf aktive Ton in kleinen Widerstand Arterien (und größeren Arteriolen) bei normalen in Vivo Transmural drücken und bei fehlender parenchymatösen Zelle beeinflusst. Neben der Beurteilung der Reaktivität der Schiffe auf verschiedene gefäßerweiternde und vasokonstriktorische Reize und myogen Antworten auf Transmural Druck Erhebung im normalen PSS, die Ca2 +-...

Dieses Manuskript beschreibt in Vitro Videomikroskopie Protokolle für die Bewertung der Gefäßfunktion in Ratte zerebralen Widerstand Arterien. Das Manuskript beschreibt auch Techniken für die Bewertung der kapilläre Dichte mit Gewebekulturen beschrifteten Lektine und Gewebe Perfusion mit Laser-Doppler-Flowmetry.

Bewertung der vaskulären Kontrollmechanismen Nutzung Videomikroskopie der isolierten Widerstand Arterien von Ratten

This protocol describes the use of in vitro television microscopy to evaluate vascular function in isolated cerebral resistance arteries (and other ...

Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens besteht darin, isolierte Widerstandsgefäße zu verwenden, um die Reaktivität der Gefäße gegenüber vasokonstriktorischen oder vasodilatatorischen Reizen zu testen. Es zeigt außerdem, wie Veränderungen in den Steuerungsmechanismen der glatten Muskulatur und in den passiven mechanischen Eigenschaften beurteilt werden können. Diese Methode kann helfen, zentrale Fragen der Gefäßbiologie bezüglich der Steuerungsmechanismen des Endothels und der vaskulären glatten Muskulatur in kleinen Widerstandsgefäßen unter verschiedenen Bedingungen zu beantworten.Der Hauptvorteil dieser Technik besteht darin, dass kleine Widerstandsarterien aus der parenchymalen Zellumgebung isoliert und bei ihrem normalen Druck gehalten werden können, während Reaktionen auf vasotaktive Stimuli getestet werden. Die Bedeutung dieser Technik reicht bis zur Therapie und Diagnose von vaskulären Funktionsstörungen. Eine derartige Manipulation ist in vivo nicht möglich.Obwohl diese Methode Einblicke in periphere Gefäßerkrankungen ermöglichen kann, ist sie auch auf die koronare Herzkrankheit anwendbar. Eine visuelle Demonstration dieser Methode ist entscheidend, da die Mikrokatheterisi

evaluation-vascular-control-mechanisms-utilizing-video-microscopy

Research

Forschung

JoVE Journal

Medicine

Medizin

Wir demonstrieren eine neuartige arteriellen Ligation Modell in murinen spinotrapezius Muskel, einschließlich eines Schritt-für-Schritt-Verfahren und der Beschreibung der erforderlichen Instrumente. Wir beschreiben die Chirurgie und relevante Outcome-Messungen in Bezug auf Gefäßnetz Umbau und funktionalen Gefäßerweiterung mittels intravitaler und konfokale Mikroskopie.

Murine Spinotrapezius Modell, um die Auswirkungen der Arteriolen Ligation auf mikrovaskuläre Funktion und Remodeling beurteilen

In Druck Myographie, wird ein intaktes kleines Segment von einem Schiff auf zwei kleine Kanülen angebracht und unter Druck gesetzt, um eine geeignete luminalen Druck. Hier beschreiben wir die Methode Vasorelaxation Reaktion der Maus 3...

Beurteilung Murine Widerstand Artery Funktion Mit Druck Myographie

Druck Myographie wird verwendet, um Vasoaktivität der kleinen Arterien, die anhaltende Verengung zu entwickeln, wenn unter Druck zu bewerten. Diese Handschrift ein detailliertes Protokoll, um in isolierten Segmenten der kleinen Mesenterialarterien von Ratten, Vasoaktivität und die Wirkung der intraluminale Druck auf die Gefäßdurchmesser zu bewerten.

Beurteilung Myogenic Antwort und Vasoaktivität In Resistance Mesenterialarterien Mit Druck Myographie

Videomicroscopy Systeme werden verwendet, um die funktionelle Eigenschaften der isolierten Fettgewebe Arteriolen in Reaktion auf physiologische und pharmakologische Stimuli zu untersuchen. Diese Technik kann verwendet werden, zu prüfen, mikrovaskuläre Phänotypen in verschiedenen Fettgewebe Domänen bei übergewichtigen Menschen.

Bewertung der menschlichen Fettgewebe mikrovaskuläre Funktion mit Videomicroscopy

Dieses Manuskript beschreibt eine einfache Protokoll für die Isolierung von Arteriolen von der Netzhaut der Ratte, die in elektrophysiologische, Kalzium Imaging und Druck Myographie Studien verwendet werden können.

Isolierung der retinalen Arteriolen für Ex Vivo Zelle Physiologie Studien

Das Protokoll beschreibt die Verwendung von Drahtsynografie zur Bewertung der transmural isometrischen Spannung von mesenterischen Arterien, die von Mäusen isoliert sind, unter besonderer Berücksichtigung der Modulation durch Faktoren, die aus Endothelzellen und perivaskulären Fettgewebe freigesetzt werden.

Bewertung der Reaktion der Gefäß-Tone mit isolierten mesenterischen Arterien mit einem Schwerpunkt auf der Modulation durch Perivascular Adipose Tissues

Die intensive Vorbereitung intakter zerebraler endothelialer "Röhrchen" der Maus aus den zerebralen parenchymalen Arteriolen wird für die Untersuchung der zerebralen Blutflussregulation veranschaulicht. Darüber hinaus demonstrieren wir die experimentellen Stärken dieses endothelialen Studienmodells für die Fluoreszenzbildgebung und die elektrophysiologische Messung wichtiger zellulärer Signalwege, einschließlich Änderungen des intrazellulären [Ca2+] und des Membranpotentials.

Isolierung und funktionelle Analyse des arteriolären Endothels des Hirnparenchyms der Maus

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Konzepte und die technische Anwendung der tensometrischen Myographentechnik unter Verwendung eines Mehrkammer-Myographensystems bei der experimentellen ex vivo Bewertung der Aortenendothelfunktion der Maus.

Messung der endothelabhängigen Vasorelaxation in der thorakalen Aorta der Maus mittels tensometrischer Kleinvolumenkammermyographie

Das vorliegende Protokoll beschreibt die Drahtmyographentechnik zur Messung der vaskulären Reaktivität der Koronararterie der Ratte.

Standardisierte Rattenkoronarringpräparation und Echtzeitaufzeichnung dynamischer Spannungsänderungen entlang des Gefäßdurchmessers

Twin-to-twin Transfusion-Syndrom und zwei Anämie Polyzythämie Sequenz sind zwei potenziell verheerende Probleme in Perinatalmedizin. Beide Erkrankungen treten nur in monochorialen Zwillingen und resultieren aus unsymmetrischen Durchblutung der Plazenta Gefäßanastomosen. Wir bieten ein einfaches Protokoll zur genauen Beurteilung der Anwesenheit von Gefäßanastomosen mit Farbstoff Injektion von Plazentagefäße nach der Geburt.

Präzise und einfache Auswertung der Gefäßanastomosen in Monochoriale Placenta mit Farbstoff

Lernen Sie die Videomikroskopie isolierter Widerstandsarterien von Ratten zur Bewertung vaskulärer Kontrollmechanismen. Diese Methode ermöglicht die Untersuchung endothelialer und glatter Muskelzellfunktionen.

Bewertung der vaskulären Kontrollmechanismen Nutzung Videomikroskopie der isolierten Widerstand Arterien von Ratten

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