Het hier gepresenteerde protocol beschrijft de procedures voor gegevensverzameling en gegevensanalyse voor beeldgeleide optische coherentietomografie (OCT) en demonstreert de toepassing ervan in meerdere knaagdiermodellen van oogziekten.
Een abonnement op JoVE is vereist om deze inhoud te bekijken. Log in of start vandaag met uw gratis proefperiode.
Methodenartikel
* These authors contributed equally
Het hier gepresenteerde protocol beschrijft de procedures voor gegevensverzameling en gegevensanalyse voor beeldgeleide optische coherentietomografie (OCT) en demonstreert de toepassing ervan in meerdere knaagdiermodellen van oogziekten.
Oogaandoeningen, zoals leeftijdsgebonden maculaire degeneratie, glaucoom, retinitis pigmentosa en uveïtis, gaan altijd gepaard met structurele veranderingen in het netvlies. Deze ziekten die de fundus aantasten, vertonen altijd typische afwijkingen in bepaalde celtypen in het netvlies, waaronder fotoreceptorcellen, retinale ganglioncellen, cellen in de retinale bloedvaten en cellen in de choroïdale vasculaire cellen. Niet-invasieve, zeer efficiënte en aanpasbare beeldvormingstechnieken zijn vereist voor zowel de klinische praktijk als fundamenteel onderzoek. Beeldgeleide optische coherentietomografie (OCT) voldoet aan deze vereisten omdat het fundusfotografie en OCT met hoge resolutie combineert, wat een nauwkeurige diagnose biedt van kleine laesies en belangrijke veranderingen in de retinale architectuur. Deze studie beschrijft de procedures voor gegevensverzameling en gegevensanalyse voor beeldgeleide OCT en demonstreert de toepassing ervan in knaagdiermodellen van choroïdale neovascularisatie (CNV), oogzenuwverbrijzeling (ONC), door licht geïnduceerde retinale degeneratie en experimentele auto-immuun uveïtis (EAU). Deze techniek helpt onderzoekers in het oogveld om structurele veranderingen in het netvlies van knaagdieren gemakkelijk, betrouwbaar en handelbaar te identificeren.
Oogaandoeningen die de fundus aantasten, vertonen altijd typische afwijkingen in bepaalde celtypen in het netvlies, zoals fotoreceptorcellen, retinale ganglioncellen, cellen in de retinale bloedvaten en cellen in de choroïdale bloedvaten, die vervolgens de gezichtsscherpte van patiënten kunnen beïnvloeden1. Om onomkeerbare visuele beperkingen te voorkomen, zijn tijdige diagnoses en passende behandelingen vereist1. Optische coherentietomografie (OCT) wordt in de kliniek veel gebruikt om een reeks oogaandoeningen te evalueren, waaronder leeftijdsgebonden maculaire degeneratie, retinitis pi....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Alle dierprocedures voldeden aan de verklaring van de Association for Research on Vision and Ophthalmology over het gebruik van dieren in oogheelkundig en gezichtsonderzoek en werden goedgekeurd door de Institutional Animal Care and Use Committee van de Wenzhou Medical University (WMU). De ratten en muizen kregen vrije toegang tot water en voedsel met een omgevingslichtintensiteit van 18 lux op een donker/lichtcyclus van 12 uur.
1. Voorbereiding van de oogdiermodellen
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Beeldgeleide OCT kan worden gebruikt om de ontwikkeling van de laserspot bij lasergeïnduceerde choroïdale neovascularisatie (CNV) bij muizen te volgen. Zoals te zien is in figuur 1, passeerden de bloedvaten van pasgeborenen zowel het membraan van Bruch als de laag van het retinale pigmentepitheel (RPE) en vormden ze een fibrotisch litteken na laserletsel11,12. Deze laesieplek kan worden vastgelegd .......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dit protocol geeft instructies voor het verzamelen en meten van de dikte van beeldgeleide OCT. Door de vier meest populaire knaagdiermodellen van oogziekten te demonstreren, ontdekten de onderzoekers dat beeldgeleide OCT uitstekende prestaties leverde bij het onderzoeken van drastische structurele veranderingen in het netvlies. In feite kunnen met afbeeldingen met een hoge resolutie kleine laesies ook gemakkelijk worden gevonden in OCT-afbeeldingen. Met behulp van beeldgeleide OCT vond e.......
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Geen van de auteurs heeft belangenconflicten om bekend te maken.
De auteurs bedanken de leden van het State Key Laboratory of Ophthalmology, Optometry, and Vision Science voor hun technische ondersteuning en nuttige opmerkingen over het manuscript. Dit werk werd ondersteund door subsidies van de National Natural Science Foundation of China (82101169, 81800857, 81870690), de Zhejiang Provincial Natural Science Foundation of China (LGD22H120001, LTGD23H120001, LTGC23H120001), het programma van Wenzhou Science and Technology Bureau of China (Y20211159), het Guizhou Science and Technology Support Project (Qiankehezhicheng [2020] 4Y146) en het project van het State Key Laboratory of Ophthalmology, Opto....
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
| Naam | Bedrijf | Catalogusnummer | Opmerkingen |
|---|---|---|---|
| BALB/c muis | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Bereiding van diermodel | |
| C57BL/6JNifdc muis | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Bereiding van diermodel | |
| Carbomer Eye Gel | Fabrik GmbH Subsidiary of Bausch & Lomb | Bevochtigen van het hoornvlies | |
| Complete Freund’s adjuvant | Sigma | F5881 | EAU experiment |
| Experimentele platform | Phoenix Technology Group | Bereiding van diermodel | |
| hIRBP161-180 | Shanghai Sangon Biological Engineering Technology & Services Co., Ltd. | EAU experiment | |
| Ketamine | Ceva Sante Animale | Algemene anesthesie | |
| Laser box | Haag-Streit Group | Merilas 532α | Bereiding van diermodel |
| Lewis rat | Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd | Bereiding van diermodel | |
| Mycobacterium Tuberculosis H37RA | Sigma | 344289 | EAU experiment |
| Phoneix Micron IV met beeldgestuurde OCT en beeldgestuurde laser | Phoenix Technology Group | Bereiding van diermodel | |
| Weefseltang | Suzhou Mingren Medical Instrument Co., Ltd | MR-F101A-5 | Bereiding van diermodel |
| Tropicamide Phenylephrine oogdruppels | SANTEN OY, Japan | Oogdilatatie | |
| Vannas schaar | Suzhou Mingren Medical Instrument Co., Ltd | MR-S121A | Bereiding van diermodel |
| Xylazin | Ceva Sante Animale | Algemene anesthesie |
Toegang beperkt. Log in of start een proefperiode om deze inhoud te bekijken.
Dit artikel is gepubliceerd
Video binnenkort beschikbaar