Name: Murino Procedimento de Transplante Renal (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2009-07-10T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: Aprenda o procedimento de transplante renal em camundongos, incluindo a colheita do rim doador, anastomose vascular e monitoramento pós-operatório da função do enxerto por meio dos níveis de creatinina.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Estes estudos foram suportados em parte pelo financiamento pelo NIH R01 AI36532 para GAH. Gostaríamos de agradecer o apoio de destaque no transplante de patologia fornecidos pelo Dr. Tibor Nadasdy, ea orientação de valor inestimável e previsão fornecida pelo falecido Dr. Charles G. Orosz em iniciar este esforço de pesquisa.

Colheita de doadores de órgãos (2): <ol><li> Anestesiar o doador utilizando 65mg/kg IP pentobarbital; anestesia é mantida por isoflurano (2-3%). </li><li> Faça uma incisão na linha média do esterno às pubis para entrar no abdômen do doador e expor o rim esquerdo, deslocando o intestino lateralmente para o lado direito. </li><li> Isolar o rim esquerdo por ligadura e dividindo os vasos adrenal e testicular com um fio de seda 8-0. </li><li> Mobilizar a aorta acima de sua junção com a artéria e veia renal. </li><li> Mobilizar a veia cava inferior (VCI) acima e abaixo de sua junção com a artéria e veia renal. </li><li> Ligadura da aorta abaixo da artéria renal e veia com um fio de seda 8-0 para minimizar o sangramento. </li><li> Dissecar o ureter esquerdo do hilo renal até a bexiga. </li><li> Expor a junção ureterovesical usando retração caudal na cúpula da bexiga. </li><li> Especiais de consumo um patch, pequena elíptica da bexiga contendo a junção ureterovesical esquerdo, utilizado para a reconstrução urinária através de uma anastomose da bexiga a bexiga. O ureter direito não está incluído com a bexiga. </li><li> Ligadura da VCI abaixo da artéria renal e veia com um fio de seda 8-0. </li><li> Ligadura da aorta acima da artéria renal e veia e, lentamente, perfundir o enxerto in situ com 0,4 ml de 0,2 frio, heparinizado solução de Ringer lactato através da aorta infra-renal. </li><li> Ligadura da VCI acima da artéria renal e veia com um fio de seda 8-0. </li><li> Transecto da veia renal na sua junção com o IVC. </li><li> Divida a aorta obliquamente, cerca de 2 milímetros abaixo da artéria renal. </li><li> Remover o rim e sua fonte vascular com ureter anexado ao remendo de bexiga em bloco. Loja em solução Ringer com lactato no gelo. </li><li> Euthanize o mouse doador por deslocamento cervical sob anestesia. </li></ol> Transplante de destinatário (2): <ol><li> Anestesiar o destinatário IP com 65 mg / kg pentobarbital e manter a anestesia com isoflurano (2-3%). </li><li> Faça uma incisão na linha média, cobrir o intestino com uma gaze molhada e com cuidado retirar-la para o lado esquerdo. </li><li> Ligadura do ureter direito, artéria e veia renal, e remover o rim direito. </li><li> Cuidadosamente isolar e cross-clamp da aorta infra-renal e veia cava inferior com duas pinças de 4 mm microvasular após a ligadura dos ramos lombares. </li><li> Coloque um fio de náilon 10-0 através de uma espessura total de aorta e retrair para fazer uma aortaotomy elíptica por um único corte (cerca de um quinto do diâmetro do vaso). </li><li> Faça uma venotomia longitudinal perfurando a veia cava inferior com uma agulha de calibre 30 e estender adequadamente com microtesoura. </li><li> Irrigar tanto a aorta e veia cava inferior com solução salina heparinizada para limpar o sangue intraluminal ou coágulos. </li><li> Remover o rim de doador do gelo e coloque-o intra-abdominal no flanco direito do mouse. O rim do doador é mantida úmida com uma gaze embebida com solução salina fria. </li><li> Coloque duas suturas permanecer no ápice proximal e distal do aortaotomy destinatários com a braçadeira aórtica doadores. </li><li> Faça uma anastomose término-lateral entre a braçadeira aórtica doador ea parede anterior do aortaotomy destinatários, utilizando 2 ~ 3 contínua 10-0 suturas de nylon na parte externa da aorta. </li><li> Vire o enxerto renal de doador até o flanco esquerdo do destinatário. repita o procedimento anterior entre a braçadeira aórtica doador ea parede posterior da aortaotomy destinatários </li><li> Executar uma anastomose término-lateral entre a veia do doador renal e da parede posterior da VCI destinatários, utilizando 4-5 contínua 10-0 suturas de nylon no interior da VCI. e, em seguida, a parede anterior do IVC e doadores veia renal são fechadas com 4 ~ 5 sutura contínua fora da VCI. </li><li> Anastomose da veia e artéria ambos deve ser concluído dentro de 20 minutos. </li><li> Lavar o enxerto com solução salina fria várias vezes durante a anastomose. </li><li> Divide a cúpula da bexiga destinatário, e parar o sangramento com cauterização. </li><li> Faça um pequeno corte na cúpula. </li><li> Coloque duas suturas estadia de nylon 10-0 para os doadores anastomize bexiga pequena mancha com a cúpula da bexiga destinatários. Cada lado da anastomose é suturada com 8 ~ 10 pontos contínuos. </li><li> Fechar o abdômen em duas camadas com 4-0 estéril, fio absorvível sintético vicryl. </li><li> Dê ratos destinatário salina morna 0,4 ml durante a cirurgia por injeção intermitente IV. </li></ol> Cuidados pós-operatórios de destinatário <ol><li> Após o fechamento do abdome, uma única injeção intramuscular de penicilina (500U/10g) é administrado (2). </li><li> Além disso, os destinatários recebem buprenorfina 0,05 mg / kg por via intramuscular no dia 0 e cirurgia dia pós 1 para dor. Após a cirurgia, pacientes transplantados recebem água contendo sulfatrim (100mg/kg) até que o experimento é terminated. </li><li> Para primeiras 24h pós-operatório os ratos são mantidos em uma temperatura controlada incubadora. </li><li> Camundongos geralmente se recupera da anestesia dentro de 1 hora da operação e recebem comida regular e água ad libitum. </li><li> Suturas são removidas duas semanas após a cirurgia. </li></ol> Destinatário nefrectomia <ol><li> Anestesiar o destinatário 4 ~ 7 dias pós-transplante renal com 65 mg / kg IP pentobarbital; anestesia é mantida por isoflurano (2-3%). </li><li> Abrir o abdómen através de uma incisão mediana. </li><li> Cobrir o intestino com solução salina, gaze e com cuidado retirar-la para o lado direito. </li><li> Remover o rim esquerdo após ligadura à esquerda ureter veia renal e artéria. </li><li> Fechar o abdômen em duas camadas com fio absorvível 4-0 vicryl sintéticos. </li></ol> As determinações de creatinina Sangue Total <ol><li> Semanais para coleta de sangue a cada duas semanas, inferior a 0,2 cc é realizada submandibularly sem anestesia ou retro-orbital sob anestesia isoflurano. </li><li> Quantitativas dos níveis de creatinina no sangue são determinados utilizando um I-Stat Analyzer portátil Clínica (Heska Corp, Fort Collins, CO). </li><li> Unidades convencionais (mg / dl) são convertidos em unidades SI de micromol / L multiplicando as unidades convencionais por 88,4. </li></ol>

<ol><li>Russell, P. S., Chase, C. M., Colvin, R. B., Plate, J. M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kidney+transplants+in+mice.+An+analysis+of+the+immune+status+of+mice+bearing+long-term%2C+H-2+incompatible+transplants%5BTitle%5D)+AND+%22JExpMed%22%5BJournal%5D)">Kidney transplants in mice. An analysis of the immune status of mice bearing long-term, H-2 incompatible transplants.</a> JExpMed. 147, 1449-1468 (1978).</li>
<li>Zhang, Z., Schlachta, C., Duff, J., Stiller, C., Grant, D., Zhong, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+techniques+for+kidney+transplantation+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Improved techniques for kidney transplantation in mice.</a> Microsurgery. 16 (2), 103-109 (1995).</li>
</ol>

Experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pela The Ohio State University IACUC.

Efetuamos cerca de 1200 casos de transplante renal em ratos com uma taxa de sucesso técnico de&gt; 90%. Comparado com o transplante cardíaco, a taxa de sucesso de transplante renal é geralmente baixa. No entanto, nosso laboratório tem mantido uma alta taxa de sucesso (&gt; 90%) de transplante renal. Os pontos-chave para o sucesso são para reduzir as lesões de reperfusão a ambos os rins de doadores e receptores, bem como minimizar o sangramento e trombose durante todo o procedimento e pós-operatório. Os seguintes fatores...

<table><tbody><tr><td>i-STAT</td><td>Outro</td><td>HESKA</td><td>Cat 5101</td><td></td></tr><tr><td>Cartucho i-STAT</td><td>Outro</td><td>HESKA</td><td>CAT 5110-CREA</td><td></td></tr><tr><td>Sulfatrim</td><td>Outro</td><td>Actavis</td><td>R02109</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurano</td><td>Outro</td><td>NOVAPLUS</td><td>CA-0474</td><td></td></tr><tr><td>Sutura 10-0</td><td>Cirurgia</td><td>Sharpoint</td><td>AK0100</td><td></td></tr></tbody></table>

murino procedimento de transplante renal

Murine Renal Transplantation Procedure

Transplante renal ortotópico em ratos é um procedimento tecnicamente desafiador. Embora o primeiro transplante renal em ratos foram realizadas por Russell et al mais de 30 anos (1) e refinada por Zhang et al anos depois (2), poucas pessoas no mundo têm dominado este procedimento. Em nosso laboratório temos realizado com sucesso 1.200 transplantes renais com ortotópico&gt; taxa de sobrevivência de 90%. Os pontos-chave para o sucesso incluem o controle rigoroso do sangramento reperfusão, e trombose, tanto durante o procedimento e pós-transplante, e uso de 10-0, em vez de 11-0 sutura para anastomoses. Pós-operatório cuidados e tratamento do destinatário é extremamente importante para o sucesso do transplante e da avaliação. Todos os destinatários do enxerto renal receber antibióticos sob a forma de uma injeção de penicilina imediatamente pós-transplante e sulfatrim na água de beber continuamente. Saúde animal global é avaliado diariamente e análises de creatinina no sangue são realizados rotineiramente com uma máquina portátil I-STAT para avaliar a função do enxerto.

Transplante renal em ratos é um procedimento tecnicamente desafiador que requer cuidados pós-operatórios cuidado e tratamento para o sucesso.

Murino Procedimento de Transplante Renal

O transplante ortotópico renal em camundongos é um procedimento tecnicamente desafiador. Embora os primeiros transplantes de rim em camundongos tenham sido realizados por Russell...

O procedimento de transplante de rim em camundongos começa com a colheita de um órgão doador, na qual o rim esquerdo é removido do camundongo doador e armazenado em gelo. O rim direito é removido do camundongo receptor para abrir espaço para o rim doador. Em seguida, o rim doador é retirado do gelo e transplantado para o camundongo receptor.O camundongo é deixado em recuperação por quatro dias antes de o rim nativo remanescente ser removido. Após sete dias, os níveis de creatinina são monitorados utilizando um analisador clínico portátil I STAT para avaliar a função do enxerto. Olá, sou Sarah Heimer do laboratório do Dr. Greg Hadley e do Departamento de Cirurgia de Transplante da Universidade Estadual de Ohio.Hoje vamos mostrar um procedimento de transplante renal em camundongo. A cirurgia de transplante renal que você verá hoje será realizada por nossa neurocirurgiã especialista Jing Wing. Utilize este procedimento em nosso laboratório para estudar os eventos imunológicos da rejeição de transplante, bem como estratégias para prevenir a ocorrência de rejeição.Então vamos começar. Para iniciar a coleta do órgão doador, realiza-se um pino de dor para garantir que o animal esteja comp

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Diferenciação dirigida de hESCs em células específicas tem gerado muito interesse na medicina regenerativa. Nós fornecemos uma concisa, protocolo passo a passo para determinar...

Mapeamento de destino de células estaminais embrionárias humanas por formação de teratomas

Transplante de ilhotas isoladas foi proposto para ser um potencial tratamento para diabetes tipo 1. Aqui nós descrevemos um método para isolar ilhotas de rato pancreata e transplantá-las para o espaço subcapsular do rim.

Um método para isolamento de ilhotas murino e transplante renal subcapsular

Aqui, apresentamos um protocolo para estudar a imunologia da rejeição. O modelo cirúrgico apresentado relata um curto tempo operatório e uma técnica concisa. Dependendo da combinação de cepas doador-receptor, o rim transplantado pode desenvolver rejeição celular aguda ou dano crônico ao aloenxerto, definido por fibrose intersticial e atrofia tubular.

Rato Transplante Renal: Modelos de rejeição de enxertos

Este relatório fornece uma descrição detalhada do transplante de timi murino de camundongos doadores de diferentes idades sob a cápsula renal de receptores de camundongos imunodeficientes. O objetivo desta abordagem é modelar o desenvolvimento de células T e eventos de seleção tímica in vivo.

Isolamento e Transplante de diferentes envelhecidas murino tímicos enxertos.

O objetivo deste manuscrito é descrever as etapas necessárias para realizar um transplante renal em um camundongo, prestando atenção especial aos detalhes da anastomose arterial.

Rim murino técnica de transplante

Nós fornecemos um método simples e eficiente para transplantar 2 '-deoxyguanosine tratou e 18.5 timo na cápsula renal de um rato nu. Este método deve auxiliar no estudo da função de células epiteliais tímicas e da maturação das células T.

Transplantação subcapsular renal do Thymus Embryonic murine 2 '-Deoxyguanosine-Tratado em ratos nus

Este protocolo apresenta uma nova técnica cirúrgica de transplante de rim de camundongos com foco em uma estratégia de anastomose arterial modificada. Uma técnica de sutura vascular, incluindo um método simples e mais seguro de anastomose ureter-bexiga também é apresentada. Essas modificações reduzem o tempo de operação e melhoram a taxa de sucesso do procedimento de transplante renal do camundongo.

Uma técnica cirúrgica modificada para transplante de rim em camundongos

O modelo de transplante renal ortotópico de rato contribui para investigar o mecanismo de rejeição de aoenxerto renal. O modelo atual aumenta a sobrevivência dos receptores sem interferência com o suprimento de sangue e refluxo venoso da parte inferior do corpo usando uma anastomose de ponta a ponta da implantação renal e um método de "túnel" de ponta a ponta de anastomose ureter-bexiga.

Um modelo de transplante renal ortotópico de rato para rejeição de aoenerxerto renal

Esse protocolo descreve um procedimento de sobrevivência para linfadenectomia renal bilateral murina segura e bem tolerada.

Linfodenectomia Renal Bilateral Murina

O rato modelo de transplante cardíaco heterotópico tem sido comprovada por muitos pesquisadores de ser um método importante para o estudo dos mecanismos de rejeição e de resposta imune. No entanto, as técnicas envolvidas são ainda um desafio. Ao modificar as técnicas padrão que temos tido sucesso com mais de 1.000 transplantes.

Transplante cardíaco heterotópico em ratos

Aprenda o procedimento de transplante renal em camundongos, incluindo a colheita do rim doador, anastomose vascular e monitoramento pós-operatório da função do enxerto por meio dos níveis de creatinina.

Murino Procedimento de Transplante Renal

Explorar mais vídeos