الجمع بين الأعصاب الطرفية التطعيم والتحوير ماتريكس لإصلاح الحبل الشوكي المصاب الجرذ

يبدأ التحضير لتطعيم العصب المحيطي في موقع إصابة الحبل الشوكي بالتنكس المسبق ل PNG قبل سبعة إلى 10 أيام من التطعيم. يتم تمرير فرع العصب الظنبوبي من فأر متبرع. يتم إجراء قسم عنق الرحم من المستوى الخامس أو C خمسة عن طريق الشفط.

تتم إزالة PNG من الجرذ المتبرع وعكس الجدار المنقاري لتجويف الآفة ويتم تثبيته عن طريق خياطة الشالة إلى الأم الجافية. بعد ثلاثة أسابيع ، يتم عمل آفة رباعية ظهرية في C ، يتم وضع رغوة الجل المشبعة ب C-H-A-B-C في التجويف لمدة 15 دقيقة لهضم البروتيوغليكان من الندبة الدبقية. بعد يومين ، يتم حقن C-H-A-B-C بجوار موقع الآفة والنهاية البعيدة من PNG تتعارض مع الآفة الرباعية الظهرية.

مرحبا ، أنا جون هولا. أنا مدير مركز أبحاث إصابات الحبل الشوكي في كلية الطب بجامعة دريكسيل. أنا الدكتورة فيرونيكا توم من مختبر الهولا وأنا مارثا يعني.

من مختبر الهولا. سنعرض اليوم إجراء زرع جزء من العصب المحيطي في الحبل الشوكي المصاب لفأر بالغ. نستخدم هذا الإجراء في مختبرنا لدراسة تجديد المحور العصبي واستعادة الوظيفة بعد إصابة الحبل الشوكي.

حسنا ، هيا بنا نبدأ. للتحضير للجراحة المجهرية ، قم بتعقيم المحطة الجراحية وتعقيم جميع الأدوات الجراحية. قم بإعداد الحاجز الحراري والقطع الصغيرة التي يقل حجمها عن مكعبات من رغوة الجل للإرقاء الدقيق.

ضع مسحات قطنية ووسادات شاش وأدوات جراحية. ضع الجرذ المخدر على طاولة التحضير بعد التأكد بقرصة إصبع القدم من أن مخدر تماما. حلق مساحة واسعة من الفراء من موقع جراحة الغسيل الميداني الجراحي المقصود باتباع تقنية الفرك المعقم الموضحة في بروتوكول النص المصاحب.

بعد ذلك ، ضع الجرذ على الحاجز الحراري ، وقم بتغطية أنفه وفمه بمخروط الاستنشاق وقلل من الفلور إلى 3٪ ومعدل التدفق إلى 0.2 لتر في الدقيقة. تطبيق الجرعة المناسبة من الأمبيسلين بالمضاد الحيوي عن طريق الحقن تحت الجلد والبوبرينورفين المسكن بالحقن العضلي. يتم تمرير العصب المحيطي أو PN قبل سبعة إلى 10 أيام من إزالته لتعزيز التنكس ، مما يوفر بيئة أكثر ملاءمة للنمو المحوري من تحضير العصب الجديد.

لبدء قطع pn ، ضع على جانبه. قم بالتبديل إلى القفازات المعقمة وضع ستارة جراحية معقمة حول موقع الجراحة. قم بعمل شق مستقيم من رأس عظم الفخذ إلى الركبة ، مع الحفاظ على التوازي وحوالي ثلاثة ملليمترات من عظم الفخذ ، وقطع عضلات العضلة ذات الرأسين السطحية ، على طول نفس الخط مثل شق الجلد ، لفضح العضلة الجانبية الواسعة الأساسية.

بمجرد أن تتعرض العضلة الجانبية الواسعة ، استخدم المقص لعمل قطع صغير بالقرب من الركبة ومديده باتجاه رأس عظم الفخذ. افصل بلطف مع الضاعمات الجوانب الواسعة حتى يتم تصور فروع العصب الظنبوبي والعجاني الملتصقة بالعصب العصبي بالتوازي مع عظم الفخذ. بعد ذلك ، تتبع هذه الفروع العصبية باتجاه رأس عظم الفخذ حتى يتم تحديد الجذع الرئيسي للعصب الوركي.

أسفل تشعب العصب العصبي مباشرة ، استخدم ملقطا دقيقا لفصل النسيج الضام أو العصبية المحيطة بفرع العصب الظنبوبي بعناية. هذا هو الفرع الأكبر. بمجرد عزل فرع العصب الظنبوبي ، قم بربط حريري ستة أوه حوله وشدوه.

استخدم مقصا صغيرا لنقل نزهة العصب الخام إلى الرباط. مرر خط الخياطة عبر العضلة الوحشية الواسعة واربطها في عقدة. سيوفر هذا خطا لسهولة تحديد موقع الطرف المقطوع للعصب الظنبوبي.

عندما يتم حصاد العصب. في وقت لاحق ، أغلق العضلة الجانبية الواسعة بستة خيوط حريرية. بعد ذلك ، أغلق العضلة ذات الرأسين PMOs بستة خيوط حريرية.

أخيرا ، أغلق الجلد بمشابك جرح ميشيل. قم بإيقاف تشغيل تدفق الفلور وإزالة مخروط الأنف المستنشق. ضع في قفص احتجاز على حاجز حراري.

أعد إلى قفص منزله. بمجرد أن يصبح في حالة تأهب ونشط ، بعد سبعة إلى 10 أيام ، يصبح جزء PN جاهزا للحصاد. لبدء الزرع ، ضع المخدر على الحاجز الحراري.

بعد التأكد من أن مخدر تماما ، قم بإزالة مشابك الجرح وفصل شق الجلد. قد لا يكون حلق المنطقة أولا ضروريا لأن الجلد يجب أن ينفصل بسهولة لتجنب التلوث. من خلال التخلص من الحاجة إلى قطع الفراء ، قم بقطع خياطة العضلات السطحية لفضح الجوانب الشاسعة وقطع الخيط في هذه العضلة.

تتبع خط الخياطة إلى الطرف المقطوع من العصب الظنبوبي وإزالة الخيط من العصب. استخدم ملقطا دقيقا لتشريح epineurium من طول 15 ملم من العصب الظنبوبي وقطع هذه النهاية البعيدة. قم بإزالة الجزء العصبي واغمره في محلول الملح المتوازن المعقم للهانك.

نحن الآن مستعدون للخطوة التالية ، وهي إحداث إصابة في الحبل الشوكي لزرع زرع PN قد يكون ذاتيا أو غير متجانس. ضع الجرذ المخدر على الحاجز الحراري وقم بإعطاء المضادات الحيوية والمسكنات كما هو موضح في القسم السابق للحث على إصابة الحبل الشوكي في قسم HEMI. أولا ، حدد موقع الشق القذالي والعملية الفقرية الظهرية T البارزة.

قم بعمل شق بطول كامل بين هذه المعالم الخارجية. اقطع خط الوسط للعضلة شبه المنحرفة السطحية وافصل عضلات أرديس عنق الرحم الأساسية. أدخل موزعة لإبقاء العضلات منفصلة.

يجب قطع العضلات فوق الشوكية العميقة من العمليات الفقرية الظهرية C أربعة و C و Five و C. باستخدام R ، يقوم المحلفون بإجراء استئصال جزئي للصفيحة الفقرية من C five لفضح الجانب الأيمن بالكامل والجزء الإنسي من الجانب الأيسر من الحبل الشوكي. استخدم الوريد الظهري البارز كمعلم لخط الوسط في الحبل الشوكي.

بعد ذلك ، استخدم شفرة مشرط دقيقة لثقب الأم الجافية وتمديد الشق فوق الحبل الشوكي C five. قم بعمل شق صغير في تحت العنكبوتية السفلية والأم P باستخدام قنية زجاجية صغيرة مسحوبة. ابدأ في شفط الجانب الأيمن الظهري من الحبل الشوكي باستخدام الضغط اللطيف والملقط الدقيق لفصل الأنسجة وتسهيل إزالتها.

استمر في الأجزاء المتوسطة والبطنية من الحبل الشوكي لإنشاء تجويف بطول ملليمترين كامل من الظهر إلى البطني ومن خط الوسط إلى السحايا الجانبي. ضع رغوة الجل المنقوعة بالمحلول الملحي في تجويف آفة قسم HEMI. لتحقيق الإرقاء ، قم بإزالة الجزء الذي تم حصاده مسبقا من العصب المحيطي من محلول هانك.

اشعر بلطف ببرنامج التحصين الموسع من ثلاثة ملليمترات قريبة من الجزء العصبي وعارض هذه النهاية إلى الجدار المنقاري لتجويف آفة قسم HEMI. قم بتأمين الجزء ب 10 خيوط من خلال epi uum إلى الأم الجافية. ثم خياطة الجافية مغلقة فوق الطرف المزروع من شطيرة الكسب غير المشروع الكسب غير المشروع بين قطعتين من الغشاء المرن cel.

ضع الكسب غير المشروع جنبا إلى جنب مع العمليات الفقرية C و C و C و seven و T one. لا تعارض نهاية العصب البعيد للحبل الشوكي أو الأنسجة العضلية. أغلق العضلات في طبقات بأربع خيوط وأغلق شق الجلد بمشابك الجرح.

أخيرا ، ضع في قفص احتجاز على حاجز حراري وأعده إلى قفص منزله. بمجرد أن تصبح في حالة تأهب ونشاط ، غالبا ما تفشل المحاور المتجددة التي تصل إلى الطرف البعيد من طعم PN في التمدد مرة أخرى إلى الحبل الشوكي. لذلك نستخدم الحقن الدقيقة للكوندرويتين الإنزيم المحول للأنجيوتنسين لتحلل الأنسجة الندبية المحيطة بمنطقة الإصابة.

يتم تنفيذ هذا الإجراء بعد 21 يوما من بدء عملية زرع PN ، وتأكد من أن مخدر تماما. ثم قم بإزالة مشابك الجرح وقم بإعطاء المضادات الحيوية والمسكنات كما هو موضح سابقا. اقطع الغرز السطحية لكشف الغشاء المرن المحيط بالطعم العصبي باستخدام ملقط رفيع ومقص زنبركي.

حرر بعناية طول العصب من الأغشية المرنة cel. يعكس العصب من المجال الجراحي. قم بإجراء استئصال الصفيحة الفقرية الجزئي على الجانب الأيمن من عملية الفقرات C السبعة.

اخترق السحايا بشفرة مشرط صغير وعن طريق الشفط ، قم بإعداد تجويف آفة رباعي ظهري مكعب بحجم ملم واحد في الحبل الشوكي C السبعة. ضع رغوة الجل المبللة بالمحلول الملحي في تجويف الآفة لتحقيق الإرقاء. بعد ذلك ، استبدل رغوة الجل بأخرى مبللة بكوندرويتين.

أ قبل الميلاد. عالج موقع الآفة لمدة 15 دقيقة ، مع توفير رغوة جل منقوعة طازجة كل خمس دقائق. قم بتغطية الطول الخارجي للطعم العصبي بغشاء مدرسي. أغلق العضلات السطحية بأربع خيوط وشق جلدي بمشابك الجرح.

ضع في قفص احتجاز على حاجز حراري وأعده إلى قفص منزله بمجرد أن يكون في حالة تأهب ونشاط. بعد يومين ، بعد 23 يوما من زرع PN ، يتم إجراء الجراحة مرة أخرى على لحقن شوندروتن NA في النخاع الشوكي. كما كان من قبل ، تتم إزالة مقاطع الجرح من المخدر ويتم إعطاء المضادات الحيوية والمسكنات.

اقطع الغرز السطحية لكشف الغشاء المرن المحيط بالطعم العصبي. كشف موقع الكسب غير المشروع C seven دون إزعاج الكسب غير المشروع. ثم استخدم حقنة هاميلتون مع قنية زجاجية مسحوبة لحقن ميكرولتر واحد من شوندروتن آس A BC في الجانب الأيمن من الحبل الشوكي ، على بعد ملليمتر واحد تقريبا من وضع الكسب غير المشروع في الحبل الشوكي.

قشر اليورو برفق من المليمترين البعيدين من الجزء العصبي وعارض هذه النهاية إلى تجويف الآفة C السبعة. قم بتأمين الجزء ب 10 خيوط من خلال epi nearium إلى الأم الجافية. أغلق العضلات السطحية بأربع خيوط وشق جلدي بمشابك الجرح.

ضع في قفص احتجاز على حاجز حراري وأعده إلى قفص منزله بمجرد أن يكون في حالة تأهب ونشاط. عندما يتم تحسين هذا الإجراء ، سيتكامل جزء العصب المحيطي بشكل وثيق مع الحبل الشوكي المضيف لتصور المحاور الشوكية التي تتجدد في الكسب غير المشروع. لقد ملأنا الانتشار الكسب غير المشروع بأمين دكسترين بيوتينيل أو BDA تصاعديا وتنازلا.

تدخل المحاور الشوكية بشكل عام إلى الكسب غير المشروع ، وتنمو في خط مستقيم نسبيا مواز لطول الكسب غير المشروع وتمتد إلى الطرف البعيد من الكسب غير المشروع بمعدل ملليمتر واحد تقريبا في اليوم. سوف تخترق محاور الأعصاب الطرفية الحبل الشوكي المجاور. إذا تم استخدام شوندروتن NACE لإزالة البروتيوغليكان المثبط من الأنسجة الندبية المحيطة عند الوصول إلى النهاية البعيدة ، فإن عددا قليلا جدا من محاور الأعصاب الطرفية يمتد إلى الأنسجة المضيفة بعد العلاج عند معالجتها بالسيارة.

ومع ذلك ، إذا تم التعامل مع الواجهة البعيدة بالكوندرويتين ، فإن المحاور العصبية تظهر من الكسب غير المشروع لإعادة ابتكار الحبل الشوكي. كما هو موضح هنا في قسم التمثيل هذا من 15 إلى 20 قسما لكل حيث لوحظ نمو محوري ، يوضح هذا الرسم البياني الشريطي زيادة كبيرة في النمو المحوري بعد علاج nace A BC المتلاق. يمكن استخدام الكشف الكيميائي المناعي للعلامات المشبكية على الخلايا العصبية في الحبل الشوكي استجابة للتحفيز الكهربائي للمحاور داخل الكسب غير المشروع لتقييم الاتصال الوظيفي بين الكسب غير المشروع المزروع والحبل الشوكي المضيف.

كانت منطقة الحبل الشوكي هذه التي تحتوي على موقع التثبيت البعيد ملطخة كيميائيا لكل من أمين الدكسترين البيوتينيل باللون الأخضر وعلامة المشبكية المشبكية في رؤوس الأسهم الحمراء تشير إلى المناطق التي كان فيها تموضع العلامات مما يشير إلى أن بعض الألياف التي تجددت من الكسب غير المشروع شكلت اتصالات متشابكة وظيفية. كما تم إثبات الاتصال الوظيفي بين الخلايا العصبية للكسب غير المشروع والحبل الشوكي من خلال فحص تعبير المديرين الماليين. بعد التحفيز المشبكي للخلايا العصبية المضيفة خارج الواجهة البعيدة ، يمكن التعرف على علامة التنشيط عبر المشبكي هذه بواسطة العديد من الخلايا العصبية الإيجابية للمديرين الماليين في الأنسجة المماثلة لموقع الكسب غير المشروع ، وفي التكبير العالي ، يمكن ملاحظة عدد قليل جدا من الخلايا العصبية الإيجابية للمديرين الماليين في الأنسجة المقابلة للطعم.

لقد أوضحنا لك للتو كيفية تحضير موقع إصابة الحبل الشوكي استعدادا لزرع طعم الأعصاب المحيطية لتعزيز التجدد بعد إصابة الحبل الشوكي. عند القيام بهذا الإجراء ، من المهم أن تتذكر أن يكون لديك طول عصب كاف قبل التطعيم وأن يكون لديك تثبيت قريب للطعم في موقع إصابة الحبل الشوكي. هذا كل شيء.

شكرا على المشاهدة ونتمنى لك السعادة في تجاربك.