女性A.ネッタイシマカのモスキートへのdsRNAの注射

1. ガラスキャピラリーチューブを引いて、マイクロインジェクションの針を作る。我々は、サターインストゥルCO、（モデルP - 2000）からニードルプラーを使用。針の引き手のプログラムの仕様は以下のとおりです。
   
   熱：275
   FIL：3
   VEL：37
   デル：250
   PUL：125
   
   
2. 針で水の体積が既知（例えば、1μl）をロードし、手動で微シャーピーとスケールをマーク。
3. 蚊のためのポスト噴射カップを設定します。最初の1000μlのピペットチップの一番外側の先端を切断。その後、カップの側面に穴をカットし、カップのピペットチップの残りの部分を挿入します。カップの上にネットや蓋をする。
4. 氷を持つ2つの発泡スチロールの箱を埋める。実体顕微鏡下で第1位アイスボックスを配置し、氷の上にガラスのwatchglassを置きます。
5. アイスボックスの成人＃2とCO ₂と場所のカップを持つ大人の蚊を麻酔。
6. dsRNAの注射のために針を準備します。注入ブロックのプラスチックホースにdsRNAを埋め針を刺します（射出ブロックの詳細については下記参照）。
7. 鉗子でコップから時計皿に麻酔蚊を移動します。蚊キューティクルで注射針の先端を破る。この蚊を捨てる。
8. 注射の場合、針は蚊の胸部に挿入されます。空いている手で、"安静時の位置"から"注射の位置"にインジェクタのバルブを調整し、dsRNAの所望の量が注入されるまでプランジャーを圧縮。
9. ポスト噴射のカップに注入された蚊を置きます。

インジェクションのブロックは、設定する

1. 軽量コンクリートブロックに50 mlの注射器を固定してください。
   
2. 少なくとも2エアアウトレットと注射器の端に調節可能な1ウェイバルブを取り付けます。
   
3. 1空気出口に密閉プラスチックホースを取り付けます。
   
4. ホースの自由端にマイクロピペットアダプタを挿入します。