Name: عضوي النمط من الثقافة شريحة أدمغة الفئران E18 (فيديو) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-07-11T00:00:00.000+00:00
Duration: 18 min 48 s
Description: تعلم تقنية زراعة شرائح أدمغة الجرذان الجنينية E18 العضوية لدراسة تطور القشرة الدماغية والهجرة العصبية. تُستخدم هذه الطريقة في أبحاث علم الأعصاب والطب التجددي.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

عضوي النمط من الثقافة شريحة أدمغة الفئران e18

Organotypic Slice Culture of E18 Rat Brains

وتستخدم على نطاق واسع الثقافات شريحة عضوي النمط من أدمغة القوارض الجنينية لدراسة تطور الدماغ. بينما غالبا ما تكون هناك مزايا للنظام داخل الجسم الحي ، والثقافات شريحة عضوي النمط يسمح احد لإجراء عدد من المناورات التي ليست ممكنة في الوقت الحاضر داخل الجسم الحي. حتى الآن ، وقد استخدمت organtotypic شريحة الدماغ الجنينية لمتابعة الثقافات الخلايا الفردية باستخدام المجهر مرور الزمن ، والتعامل معها والتعبير عن الجينات في emanances العقدية (وهي المنطقة التي من الصعب أن الهدف بحلول داخل الرحم electroporation) ، فضلا عن الدوائية الدراسات. في هذا البروتوكول الفيديو نحن لشرح كيفية جعل شريحة الثقافات عضوي النمط من الفئران الجنينية يوم 18 الأجنة. ويشمل البروتوكول تشريح الأجنة ودمجها على الجليد في الذوبان agarose منخفضة ، تشريح أدمغة مضمن على vibratome ، وأخيرا شرائح الطلاء على مرشحات في أطباق الثقافة. هذا البروتوكول ينطبق أيضا في شكله الحالي لجعل شريحة الثقافات عضوي النمط من مختلف الأعمار الجنينية لكلا الجرذان والفئران.

عضوي النمط من الثقافة شريحة أدمغة الفئران E18

تُستخدم مزارع الشرائح العضوية المستخلصة من أدمغة القوارض الجنينية على نطاق واسع لدراسة تطور الدماغ. وبينما توجد غالباً مزايا للأنظمة الحيوية (in-vivo)، ...

اسمي لورا إلياس، وأنا طالبة دراسات عليا في تخصص العلوم العصبية، أعمل في مختبر أرنولد ك. شتاين. نحن في معهد طب التجديد هنا في جامعة كاليفورنيا، سان فرانسيسكو (UCSF)، وسأوضح لكم اليوم كيفية إجراء استزراع شرائح عضوية نمطية لأدمغة الجرذان في اليوم الجنيني E 18.تتضمن هذه العملية تشريح الأدمغة واستخراجها، ثم تضمينها في agarose منخفض الانصهار، وبعد ذلك تقطيعها باستخدام جهاز viome للحصول على مقاطع إكليلية، ثم وضعها في نظام زراعة الشرائح. لذا، هناك بعض الأدوات والكواشف الهامة التي نستخدمها في إجراء زراعة الشرائح هذا؛ حيث ستحتاج إلى مجهر تشريحي لاستئصال الأدمغة.نستخدم أيضاً هذا الـ V بشكل مشابه لجهاز VT 1000 S vibram، وهو نظام جيد لتقطيع الشرائح. يمكن أن يكون الغراء مهماً؛ لذا نستخدم هذا النوع من القفل للغراء الذي يثبت الأدمغة بشكل جيد جداً، لأن استخدام النوع الخاطئ من الغراء قد يؤدي أحياناً إلى انفصال الأدمغة أثناء محاولة تقطيعها، وهو أمر قد يسبب مشكلات.نستخدم أيضاً مرشحات "milli cell" هذه، وهي المرشحات التي نضع عليها الشرائح أثناء استزراعها، وهذا جزء مهم أيضاً من العملية. حسناً، قبل البدء في عملية استزراع الشرائح، هناك بضع خطوات يجب القيام بها. أولاً، يتعين عليك تحضير الـ A CSF، وبعد الانتهاء من تحضيره، يجب وضعه على الثلج لكي يبرد، وكذلك البدء في فقاعته بغاز الكاربوجين (carbogen).ستحتاج أي

organotypic-slice-culture-of-e18-rat-brains

Research

JoVE Journal

Biology

علم الأحياء

وorganoptypic ثقافة شريحة الحصين هو...

وعضوي النمط الثقافة شريحة الحصين النموذجي لفحص الإصابات متعلق بالخلايا العصبية

نحن تصف طريقة لتحضير شرائح الحصين عضوي النمط التي يمكن تكييفها بسهولة إلى مناطق أخرى من الدماغ. وضعت شرائح الدماغ على الأغشية التي يسهل اختراقها وسائل الاعلام الثقافة يسمح له شكل واجهة. هذا الأسلوب يحافظ على بنية الإجمالي للقرن آمون لمدة تصل الى 2 أسابيع في الثقافة.

عضوي النمط الثقافات شريحة الحصين

يصف هذا البروتوكول مقايسة شريحة عضوي النمط الأمثل للدماغ بعد الولادة وعالية الدقة الوقت الفاصل بين التصوير الهجرة neuroblast في تيار الهجرة منقاري.

والفحص عن عضوي النمط شريحة الوقت الفاصل بين التصوير عالية الدقة للهجرة الخلايا العصبية في الدماغ بعد الولادة

هذا هو بروتوكول لإعداد والحفاظ على القشرة المخية الحديثة في إعداد شريحة الثقافة عضوي النمط لغرض صنع التسجيلات الكهربائية من العصبونات الهرمية.

تسجيل خلية كاملة من إعداد عضوي النمط شريحة من القشرة المخية الحديثة

يوصف أسلوب لتوليد شرائح عضوي النمط من الدماغ المتوسط ​​E12.5 الفئران الجنينية. يمكن استخدام شريحة عضوي النمط الثقافات لمراقبة سلوك الخلايا العصبية الدوبامين العصبية الدماغ المتوسط ​​أو غيرها من بطني.

الثقافات شريحة عضوي النمط من المخ الأوسط بطني الجنينية : نظام لدراسة التنمية متعلق بالخلايا العصبية الدوبامينية في المختبر</em

يوضح هذا الفيديو طريقة لإعداد مزارع شرائح الحصين العضوية من دماغ جرو الفئران. وهو يحدد الخطوات المتبعة في تشريح الحصين ، والتقطيع ، وظروف الاستزراع المطلوبة لتعزيز بقاء الخلية ونموها في شرائح الحصين ، مما يؤدي في النهاية إلى إنشاء ثقافات شرائح عضوية.

تحضير ثقافات الشرائح العضوية من الحصين لجرو الفئران

يوضح الفيديو طريقة للحصول على شرائح قشرة الأنف والحصين من دماغ جرو الفئران وزراعتها في إدخالات غشائية داخل صفيحة متعددة الآبار مليئة بالوسائط لمزيد من التحليل.

تحضير شرائح قشرة الأنف والحصين من دماغ جرو الفئران

تم وصف تقنية لدراسة خلايا NG2 والخلايا الدبقية قليلة التغصن باستخدام نظام زراعة شرائح الدماغ الأمامي والمخيخ.  تسمح هذه الطريقة بفحص ديناميكيات تكاثر وتمايز الخلايا داخل سلالة الخلايا قليلة التغصن حيث يمكن التلاعب بالبيئة خارج الخلية بسهولة مع الحفاظ على بنية الخلايا الأنسجة.

الثقافات شريحة عضوي النمط لدراسة ديناميات دبقية قليلة التغصن وتكون الميالين

نحن هنا وصف تقنية لدراسة تكوين الخلايا العصبية بعد الولادة قرن آمون باستخدام تقنية عضوي النمط ثقافة شريحة. هذا الأسلوب يسمح للفي المختبر التلاعب في تكوين الخلايا العصبية الكبار ويسمح التطبيق المباشر من وكلاء الدوائية إلى الحصين مثقف.

الثقافات شريحة عضوي النمط لدراسات ما بعد الولادة تكوين الخلايا العصبية

نحن وصف بروتوكول للتعبير عن نوع الخلية محدده من المستشعر القائم علي التاكل المرمزة وراثيا ATeam 1.03يمك في الثقافات شريحة النمط العضوي من الدماغ الامامي الماوس. علاوة علي ذلك ، نعرض كيفيه استخدام هذا المستشعر للتصوير الديناميكي لمستويات ATP الخلوية في الخلايا العصبية و astrocytes.

التصوير من ATP داخل الخلايا في شرائح الانسجه العضوية من الدماغ الماوس باستخدام الاستشعار القائم علي التاكل ATeam 1.03يمك

هنا، ونحن نصف إعداد شرائح القشرة قرن آمون rhinal organotypic. في ظل الحرمان التدريجي والسيطرة عليها من المصل، وهذه الشرائح تصور الأحداث المتطورة مثل الصرع ويمكن اعتبار نموذج الجسم الحي السابق من تكوين الصرع. يمثل هذا النظام أداة ممتازة لرصد ديناميات النشاط التلقائي ، وكذلك لتقييم تطور الميزات العصبية خلال فترة تكوين الصرع.

نموذج لتولد الصرع في رينال القشرة-قرن آمون ثقافات شريحة العضوية

تعلم تقنية زراعة شرائح أدمغة الجرذان الجنينية E18 العضوية لدراسة تطور القشرة الدماغية والهجرة العصبية. تُستخدم هذه الطريقة في أبحاث علم الأعصاب والطب التجددي.

عضوي النمط من الثقافة شريحة أدمغة الفئران E18

استكشف المزيد من الفيديوهات