Name: 마우스의 물 미로 시험의 얕은 물 (패들링) 변종 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-03T08:55:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: 학습하세요 마우스의 공간 인지 능력을 평가하는 얕은 물 미로 시험 방법을. 전통적인 수중 미로보다 스트레스를 줄이면서 해마 기능 연구에 활용할 수 있는 신뢰성 높은 행동 신경과학 기법입니다.

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옥스포드 대학의 오픈 액세스 자금을 제공하는 웰컴 트러스트 (Wellcome Trust). 로버트 집사는 Wellcome 트러스트 부여 WT084655MA에 의해 자금 옥스포드 OXION 그룹의 구성원입니다.

<html> 1. 옥스포드 패들링 풀 얕은 수영장은 세 가지 연속적인 디자인, 막 1-3에 따라 만들어졌다. 모든 방풍 또는 명확한 아크릴 플라스틱으로 만든 투명한 벽으로 둘러싸인 흰색 (그 aversiveness을 향상시키기 위해)베이스에 포함 된 얕은 (2 CM) 물을 사용합니다. 이들은 그들에 설정된 참 / 거짓 종료해야합니다. 진정한 출구가 열려 있고 안쪽에 마우스를 제거 할 수있는 검은 플라스틱 파이프에 가입 반면 거짓 종료는 검은 색 페인트 나무 플러그에 의해 폐색되어 있습니다. 마우스는 다음 신속하고 atraumatically 관내 동안의 홈 케이지에 반환됩니다. 얕은 수영장의 첫 번째 출판 후에는 홈 케이지로 돌아도 Lashley III의 미로 2 학습을위한 효과적인 동기라고보고되었다. 20-25의 물 온도는 ° C가 사용됩니다. 20-21 ° C에 이상적이며 일부 마우스는 높은 온도에서 덜 동기를 보인다 있다고 지적하고있다. 내용은 &quot;&gt; 첫 번째 미로 5 원형이었다. 그러나, 때때로 마우스 (특히 해마 병변을 가진 사람들은) 오픈 출구 관을 통지하지 나타납니다. 팔각형 디자인, 모서리에 배치 출구 튜브를 유치하는만큼 생쥐의 관심은 크게이 문제를 개량. 그러나 기회의 성능에 오류 비율이 12 튜브 원형 디자인 6/trial 대조적으로, 4/trial 될 것입니다. 따라서 dodecagonal 풀은 현재 11 거짓과 1 사용 진정한 출구 벽의 접합에 의해 각도에서 설정합니다. 1.1. 진화와 얕은 풀의 특성 막 1 : 12 참 / 거짓 종료 (그림 1) 직경 원형 수영장 85cm. 막 2 : 모서리에 설정된 8 참 / 거짓 종료와 직경 팔각형 수영장 86cm. 막 3 : 12 참 / 거짓 출구에 직경 120 센티미터 옥수수에서 설정 dodecagonal (12면) 수영장ERS (그림 4). 위의 모든 (및 Y-미로 얕은, 아래 참조) 출구 관 40 mm 직경이었다. 그러나 때때로 마우스가 이러한 입력하기를 꺼려했고, 그들이 잘 응답 된 후에 Y-미로의 제어 성능이 가끔 찍어 것이 감지되었다. 40mm는 너무했다 따라서, 그리고 그들이 (주피터 출판물을 참조하십시오 &quot;생쥐 굴, 둥지 건설 및 비장을 평가&quot;)내는 장치 입력 방법을 쉽게 생각 또한 반스 미로에서 출구 구멍 50 mm 직경 있는지, 그것은 간주 작은. 시험은 6 C57BL / 6 마​​우스의 홈 케이지에서 실시되었다. 작은 관이 약간 혐오한다면 (그들은 너무 가정 케이지에서 테스트를하고, 아마도 스트레스 장치의 조각보다 여기에 더 낮은 상태로 가정 케이지 40mm 튜브를 입력 할 더 많은 준비를 보인다는 만들기 항목의 차이를 최소화 할 수 ) 더 보수적 테스트합니다. 두 개의 40mm 튜브와 두 개의 50mm의 튜브의 바닥에 배치패턴을 번갈아. 예상대로, 40mm (9 항목) 50mm 이상 관 (28 개 항목)에 더 많은 항목이 있었다. 따라서 파일럿 테스트는 50mm 출구 튜브와 Y-미로 새에 계획되어있다;이 성공하면 dodecagonal 수영장, Y-미로 얕은에 오래 된 40mm 관은 새로운 50mm 것들로 대체됩니다. 얕은 수영장으로, Y-미로 공간 참신 Y-미로 얕은 마우스가 장치의 투명한 벽을 통해 보는 방 단서에 의존하는 모든 공간 테스트입니다, 객실은 물론 특유의 단서 (예 : 선반, 함께 제공되어야한다 찬장, 벽에 검은 색 플라스틱 모양). 2. 얕은 수영장을 실행 <ol><li> 주변 4 개의 위치 중 하나에 직면 수영장 (9, 탈출 관 6시 방향에있는 경우 12 3시)의 중앙에 마우스를 놓습니다. 위치는 반 무작위, 3 개의 연속적인 시험의 최대는 같은 방향으로 할 수 있습니다. 이것은 실제로 달성하기 어려울 수 있습니다으로 인해학습 쥐들이 꼬리 풀에 내려대로 올바른 종료를 향해 자신을 찾으시는 경향이 진행됩니다. 그들은 이러한 기능을 수행 할 경우에는 시도들은 단순히 학습을 입증되기 때문에, 계획된 위치로 그들을 강제로 이루어지지해야한다. </li><li> 그들은 단지 물 위에있을 때 그들을 해제 등 그때 그들은에서 삭제하고 즉시 그들은 더 이상 유지하지 않습니다 것을 알고있다. 천천히 그들에게 스스로를 해방하는이 초기 방향을 손상 할 수 있습니다 어려움을 겪고 그 결과를 발표. 이것은 또한 Y-미로 얕은 적용됩니다. </li><li> 최대 시험 길이는 60 초입니다. 마우스가 그때까지 탈출에 실패 할 경우, 수동으로 명확한 방풍 충격기의 커플 30 X 20cm에 대한 각 측정을 사용하여 출구로 안내합니다. 및 오류 : 취한 조치는 출구를 찾을 시간 (머리의 튜브 내에서 정의)입니다. 오류가 튜브 (실제 출구를 포함)에서 머리의 길이를 내오고로 정의 하였다. 입력하지 않고, 실제 출구 가까이에 전달 일반적으로 i를 발생nfrequently 처음 몇 재판 후. 경우는이 문제가 있음을 만들 수 있지만, 그들이 거기에 주변에 출구가 모르기 때문에, 다른 뷰는 공간 인식에 손상 쥐가이 작업을 수행 할 것입니다. 컨트롤은 알고있다, 따라서 더욱 완벽하게 조사 않습니다. 11 오류 / 시험 천장이 너무 많이 왜곡의 데이터를 방지하기 위해, 분석 오류의 수에 부과됩니다. 이 공간적으로 손상 쥐에서 발견되는 적자에 대한 완화시킬 즉, 그것은 보수적 인 조치입니다. 60 초 이내에 출구에 도달하는 데 실패 마우스는 그 시험 11 오류의 점수가 할당됩니다. 그래서 60 초 시간은 항상 11 오류가 있습니다. </li></ol> 3. Y-미로 패들링 얕은 수영장 절차를 간소화하고 그것을 Y-미로 실험을하기로 결정했다 장치는 얕은 수영장과 같은 원칙에 따라 작동합니다. 장치는 투명한 폴리스티렌 또는 방풍 유리로 만들어진 세 개의 팔, 각각 30으로 구성X 8 X 20cm. 이 흰색베이스 (그림 7)에 장착된다. 흰색은 바닥 색상의 aversiveness을 극대화하기 위해 선택하고 그래서 얕은 (2cm 깊이)에서 탈출을 장려 하였다. 물 미로와 같이 단 하나의 진정한 출구가 다른 두 팔 미로 (그림 8) 내부에서 동일하게 거짓 종료의 종료와 함께있다. 얕은 Y-미로를 실행 중심에서 멀리 직면 폐쇄 무기 중 하나의 끝에 마우스를 놓습니다. 시작 위치로 선택 팔의 순서는 반 임의의 순서로 정의됩니다, 같은 위치, 왼쪽 또는 오른쪽 팔의 같은 숫자 세 개 이상 연속 실험. 각 시험은 60 초 동안 지속됩니다. 마우스가이 시간 내에 (출구 관에서 전체 머리) 종료가 투명 방풍의 조각의 도움으로 팔을 입력하도록 유도하는 실패합니다. 출구 팔의 기본은 방풍에 의해 차단을 허용하는 마우스 자체 출구를 발견입니다;이오른쪽 튜브에 밀어보다 더 나은 학습을 장려해야한다. 하지만이 마우스가 15 초 후에 튜브를 입력하기를 꺼려하는 경우에 의지해야 할 수 있습니다. 종료 총 시간의 측정 및 오류의 수 (전신 제외 꼬리 장님 팔 입력)를보십시오. 얕은 Y-미로 득점 마우스가 &lt;60 초에서 출구를 찾아 장님 팔이 입력 및 / 또는 경우 출구 60에서 찾을 수없는 경우 오류가 득점 되 고, 장님 팔에 아무 항목도하지하는 첫째 하나 올바른 재판의 두 가지 정의가있다 초. 이 분석은 팔 항목의 오류가 움직이기 시작하는 실패를 혼동. 둘째,인지 능력을 강조하는 시험 분석은 마우스가 60 초 이내에 시작 팔을 남기지 않았습니다 모든 시험은, 각 마우스를 제외하여 수행 할 수 있습니다 (즉, 모든 0 +60 점수 삭제) 다음의 올바른 %를 계산 남은 시험. 4. Y-미로의 두 가지 유형결합 된 1. 기구 얕은 Y-미로를 구축 할 때, 그것이 (건조) 공간 참신 메모리 실험 6 (그림 13)로 실행 할 수 있도록 두 개의 문을 통합하는 데 유용합니다. 불투명 단두대 문이 테스트의 샘플링 단계에서 다른 두에서 한 팔의 밀봉 삽입 할 수 있지만 투명 단두대 문, 출구 팔의 끝에 벽에 출구 구멍을 다룹니다. 그것은이 문을 주자들이 잠재적 인 탈출 경로를 표시하기 때문에 그렇지 않으면 그들의 관심을 전환 수 있으므로, 마우스의 이동할 수없는 것이 중요합니다. 이상적으로 그들은 미로 벽의 상단에서 7cm를 확장해야합니다. 2. 셋업 Y-미로의 바닥에 나무 칩 침구 소재의 얇은 (0.5 cm) 레이어를 놓습니다. 이것은 각각의 마우스에 대한 두 개의 테스트 단계 사이, 배포,와 마우스 사이입니다. 모범 사례를 들어, 후각 환경 MO를 만들기 위해실험이 시작되기 전에 몇 분 동안 첫 번째 대 이후의 마우스, 장소 하나 또는 미로 않은 두 생쥐 실험 비슷 다시. 3. 순서 투명 문에 의해 차단 불투명 문 및 출구 구멍에 막혀 출구 팔, 시작 팔 마우스를 놓습니다 (미로의 두 비 종료 무기 중 하나)과 5 분 동안 탐색 할 수 있습니다. 그런 다음 제거 세 가지 무기에 대한 액세스를 허용 불투명 문을 올리고 시작 팔 교체하고 2 분 정도를 관찰합니다. 항목의 번호를 기록하고 시간은 각 팔을 보냈다. 컨트롤 마우스는 처음 두 팔을 기억하고 이전에 액세스 암에 더 ​​많은 시간을 할애해야한다.

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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

결론적으로, 얕은 쥐에 대한 일반적으로 효과적인 동기 것, 그리고 깊은 물에서 수영과 관련된 스트레스를 피할 수 있습니다. 경로 길이와 모리스 물 미로 탈출 시간 측정과는 달리, 해마 lesioned 생쥐의 얕은 수영장에서 오류 비율이 연수 기간 5 걸쳐 일정하게 유지되므로이는 시간이나 경로를 탈출 반대 공간 메모리의 순수한 측정을 나타냅니다 마우스가 작업의 비 공간적 요소와 익숙해지는 감소로 모두 길이. 오류 법안은 또한 장애 (예를 들면 해마 lesioned) 마우스와 컨트롤 사이의 차이보다 크기를 제공합니다. 원래 발행물에서 프로브 테스트는 마우스가 진정으로 공간적 단서는 5를 사용 하였다 있는지 확인하기 위해 실시되었다. 프로브 1, 미로 회전 120 ℃에서 만 탈출 튜브의 지리적 위치는 훈련과 같은 남아 있었다. 성능은 거의 변화가 없었다. 프로브 2, 모리스 미로의 표준 멸종 시험과 유사한 출구 관이 차단되었습니다. 출구 관이 이전 위치한 미로의 교육 사분면에 소요 된 시간은 대조군 50 %, 해마 병변을 가진 마우스는 25 %였다. 출구 관의 위치가 변경되는 세 번째 프로브 테스트, 컨트롤이 다시 원래의 교육 사분면에 더 많은 시간을 보냈다. 이 프로브 테스트는 마우스 intramaze 큐를 사용하지 않은 것을 확인하지만, 미로 외부 실험실에서 공간적 단서에 의해 유도 하였다. intramaze 큐의 영향력이 부족 바네스 미로를 통해 장점에 얕은 수영장을 넣습니다. 우리는 얕은 미로에있는 쥐를 시도하지 않은하지만이 20-25보다 물 추운를 만들 수있는 장점이 될 수도 있지만, 이것이 가능할 수 있습니다 ° C 정상적으로 모리스 미로에 사용됩니다. 그들의 시체가 물에 잠겨되지 않습니다 때문에 그러나,이 부작용 복지 영향이 없어야합니다.

모리스와 반즈 미로 실험 심리학의 시작은, 동물의 학습 연구는 미로에 크게 의존하고 있기 때문에, 일반적으로 불투명 한 나무 또는 금속의 건설. 사실 주로하고 실험 그가 / 그녀가 동물에게 시각적 또는 위치에 차별을 교육에 성공했다고 생각했을 때, 쥐 또는 마우스가 있었다; 필연적으로, 설치류의 특별한 후각 능력으로 인해, 그들을 사용하여 많은 연구가 어느 정도 손상되었다 문제를 해결하기 위해 후각을 사용. 이 해마의 병변과 쥐 2002 년 4에서 자세히 논의 공간 참조 메모리 작업을 수행 할 수 있는지 여부에 논란 대명사 있습니다. 기본적으로, 다윗 Olton와 동료 떨어져 방사형 미로와 초기 작품에서 항상 체계적 미로를 회전하도록 나타나지 않습니다. 이 아마도 전자 한 냄새 신호에 의해 작업을 해결하는 해마 lesioned 동물을 주도ACH 팔 독특한입니다. 옥스포드에서 (자연적으로) 블라인드 마우스를 한 번 여섯 팔 방사형 미로에서 관찰되었다. 그것의 시작 팔을 좌우 아닙니다. 그런 다음 중앙을 넘어 반대 팔을 선택했다. 이후 항상 우회전의 틀에 박힌 전략으로었지만 그것을 입력 한 첫 번째 암의 기초를 다시 만날 때, 그것을 거부하고 다음 팔에 이동 한 후 (~ 0.2 초) 그것을 냄새 순간을했다. 병변이 어떤 방해도 하나의 방문에 후각 정보 기억 될 수 있다면, 그것은 항상 미끼 같은 팔 정적 미로에서 반복 실험을 통해 테스트를하면 보상과 학습 강한 후각 협회로 이어질 것이 분명하다 쉽게 발생합니다 순수 공간 학습. 이와 같은 문제는 7 그의 물 미로를 개발하는 모리스 자극이었다; 물이 일정한 지역화 된 후각 신호를 제공하지 않습니다. 얕은 수영장은 기본적으로 tradi 사이의 하이브리드모리스 7과 건조 반즈 1 미로에 의해 설계 tional 물 미로. 모리스 물 미로에서 깊은 물에있는 동물 수영은 어떤의 미로 중심을 향해있는 약간 물속에 잠긴 플랫폼을 덮고있는 얕은 물에 탈출. 반즈 미로에서, 동물은 아래에 배치 상자 탈출을 제공합니다 하나만의 주변 주변에 출구 구멍 (건조) 원형 플랫폼에 배치됩니다. 형질 전환 생쥐의 일부 변종의 불균형 번호는 모리스 미로에서 제대로 수영을 실패했을 때 동기 부여가 문제를 발생 탈출로 얕은의 사용은 보도했다. 그들 중 다이빙 또는 수동적으로 11 떴다. 이 스트레스 관련 반응을 나타낼 수 있기 때문에, 그것은 얕은 깊이로 물을 줄이는 것이 참으로했던이 문제를 극복하기 위해 충분하다 권유 하였다. 또한 오히려 플랫폼을 포함하는 얕은 물보다는, 장치의 측면에서 설정 건조한 튜브에 탈출을 허용하기로 결정했습니다. 이더 &quot;자연&quot;탈출 반응, 그리고 모리스 미로의 초기 학습의 많은 절차이기 때문에, 테스트의 공간 구성 요소를 증가시킬 것, 동물이 먼저하기 전에 미로의 벽을 따라 수영하는 타고난 경향을 극복해야 공간 학습을 시작할 수 있습니다. 반즈 미로도 충분히 순환 플랫폼에게 10,11을 탈출하기 위해 동기 부여를하지 않는 동물로부터 고통을 수 있습니다.

마우스의 물 미로 시험의 얕은 물 (패들링) 변종

Shallow Water (Paddling) Variants of Water Maze Tests in Mice

리차드 모리스 1981 년 7 자신의 물 미로를 고안 할 때, 대부분의 행동 연구는 쥐에서 이루어졌다. 그러나 마우스 유전학의 더 큰 이해가 점점 더 중요 해지고 마우스되었다. 그러나 연구진은 돌연변이 생쥐의 일부 변종들은 모리스 물 미로 11에서 테스트했을 때 수동적으로 떠 나 다이빙 같은 문제에 쉽게 무너지는 것으로 나타났다. 이것은 그들의 자연 서식지를 고려 놀라지이었다 생쥐는 중앙 아시아의 건조 지역에서 진화 반면 쥐 (고전, &quot;하수도 쥐&quot;) 자연적으로 수영. 이러한 문제를 극복하기 위해, 그것은 얕은 물이 생쥐 탈출 동기를 부여하는 충분한 자극이 될 것이라는 점을 고려되었다. 이것은 또한 수건의 작은 생물을 건조하고 쥐보다 훨씬 더 심각한 문제가 저체온증을 방지하기 위해 가열 복구 챔버에서 그들을 퍼팅의 문제를 피할 것이다, 마우스 볼륨 표면적의 큰 비율을 만든다 그것은 P빠른 열 손실 articularly 취약. 또 다른 고려 사항은 학습을 촉진하기 위해, 더 자연스러운 탈출 전략을 사용할 수 있는지 여부이다. 물에 떨어져 해안의 안전에서 멀리 수영 동물이 자신의 유전자에 통과 할 가능성이 있기 때문에, 동물은 물이 몸의 가장자리에 수영하는 자연적인 경향을 진화했다. 그들의 진화 동작 정반대 - 모리스 물 미로는, 그러나, 그들이 미로의 중심을 향해 숨겨진 플랫폼에 수영을해야합니다. 따라서 얕은 미로 장치의 가장자리로 탈출을 통합해야한다. 이 기능은 상대적으로 비 혐오 얕은 물의 사용과 함께, 러셀과 버치 8 &quot;3 루피&quot;의 &quot;세련&quot;측면을 구현. 미로 디자인의 다양한 종류가 시도되었다; 일반적인 기능은 물이 장치의 투명한 벽을 관통 튜브를 통해이었다 항상 얕은 (2cm 깊이) 탈출이었다이었다. 다른 튜브 ( &quot;잘못된 종료현재 dodecagonal (12면) 미로는 12로, 옥스퍼드 셔 (주)의 사용의 &quot;)는 또한 벽 주위에 배치했지만 이들 전원이 차단되었다. 미로의 내부에서 모든 거짓 종료되고 하나의 진정한 출구가 같은 모습을.입니다 참 / 거짓 종료 모서리에서 설정합니다. 최근 개발에 투명한 얕은 Y-미로가 성공적으로 테스트되었습니다.

해마 병변은 크게 얕은 수영장 5에서 학습 손상. Y-미로 얕은 사용하여 나이에 따라 적자는 10, 14에서 설명하지만 3 개월 이전 Tg2576 마우스 (아밀로이드을 통해 표현의 모델). 한 세 (21 월) 컨트롤 마우스는 제대로 3 수행. Y-미로 건조에서 실행 공간 참신 메모리 실험 글루타민산 염 수용체 (GluR-A) AMPA 수용체 소단위 9 녹아웃 생쥐의 손상을 밝혔다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 원형 막 1 얕은 수영장에서 마우스입니다. <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 마우스 얕은 수영장의 출구 관을 찾습니다. 그림 3 "SRC ="/ files/ftp_upload/2608/2608fig3.jpg "/&gt; 그림 3. 출구 관으로 탈출 마우스입니다. 관은 그 미로에서 분리하고 마우스의 홈 케이지에 반환됩니다. <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig4.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 4"> 그림 4. dodecagonal 얕은 수영장에서 마우스입니다. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig5.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 5"> 그림 5. 마우스가 거짓 출구에 접근 오류를 커밋하는 방법에 대한. <img alt="그림 6" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig6.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 6"> 그림 6. 마우스의 코가 거짓 출구의 머리의 거리에 온다 오류가 최선을 다하고 있습니다. 실제 출구 연결된 출구 관과 더불어 그것의 오른쪽에 있습니다. 그림 7. Y-미로 얕은. <img alt="그림 8" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig8.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 8"> 그림 8. Y-미로의 출구 팔 끝의 세부 사항입니다. 얕은 U 자형 저점은 결국 벽에 출구 구멍을 인접. 이 위의 그림에서 지원 아래 그림과 출구 관을 지원합니다. 출구 관의 홈 케이지에 다시 마우스를 취할 수있는 지원에서 제거 할 수 있습니다. 모든 팔은 탈출을 허용하는 그것으로 원형 구멍 컷이이 셋업 만 한 팔 끝 벽 장착되어 있습니다. <img alt="그림 9" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig9.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 9"> 그림 9. Y-미로 얕은의 막 다른 골목에서 마우스입니다. <img alt="그림 10" src='"/' files> 그림 10. 마우스 출구 관을 찾습니다. <img alt="그림 11" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig11.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 11"> 그림 11. Y-미로 얕은에서 탈출 한 마우스, 자신의 홈 케이지에 반환 될 때까지 기다립니다. <img alt="그림 12" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig12.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 12"> 그림 12. 마우스는 일반적으로 그들은 자신의 근처의 홈 케이지에 다시 진행되는 동안 관에서 숙박에 의존 할 수 있습니다. <img alt="그림 13" src="/files/ftp_upload/2608/2608fig13.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 13"> 그림 13. 공간 참신 Y-미로 구성 Y-미로 얕은 결합. 불투명 단두대 문은 한 팔의 근위 끝에 슬라이드에 삽입하고, 투명 단두대됩니다출구 구멍 오프 도어 패킹.

마우스<em&gt; 수</em&gt; 수영 있지만, 많은 변종이 활동은 스트레스를 찾기 위해 나타납니다. 얕은 물에서 탈출이 동작을 동기를 부여하는 데 사용되는이 문제 미로가 고안되었다 극복하기 위해. 이들은 적어도 기존의 널리 사용되는 모리스 물 미로처럼 좋은 학습을 지원하기 위해 증명되었습니다.

Richard Morris가 1981년에 수중 미로를 고안했을 당시, 대부분의 행동 연구는 쥐(rats)를 대상으로 수행되었습니다. 하지만 생쥐(mouse) 유전학에 대한 이해가 깊어지면서...

이 절차의 목적은 워터 메이즈(water maze)의 변형 모델을 사용하여 마우스의 공간 인지 능력을 연구하는 것입니다. 다른 모델과 달리, 수위가 마우스가 발을 저어 이동할 수 있을 정도로 얕게 설정되어 있습니다. 마우스는 수영을 하는 대신 메이즈 중앙에 배치되어 출구를 찾도록 유도됩니다.패들링 풀의 출구는 보다 자연스러운 탈출 반응을 모사하기 위해 측면에 위치해 있습니다. 올바른 출구를 찾으면 동물을 꺼내고, 공간 인지 능력을 나타내는 데이터를 기록합니다. 패들링 풀 또는 패들링 Y-미로는 마우스 수중 미로(Morris water maze)나 반스 미로(Barnes maze)와 같은 기존의 공간 인지 테스트 기법과 비교했을 때, 수중 미로보다 스트레스가 훨씬 적으며 반스 미로에서 발생할 수 있는 혼란스러운 국소적 또는 공장 단서의 영향을 받지 않는다는 주요 장점이 있습니다.패들링 풀 마크의 세 가지 연속적인 설계가 이루어졌습니다. 첫 번째는 지름 85cm의 원형 풀로, 12개의 실제 출구 또는 강제 출구가 있습니다. 두 번째 마크는 지름 86cm의 팔각형 풀로, 모서리에 8개의 실제 출구 또는 강제 출구가 배치되어 있습니다.마지막으로, 세 번째 표시는 지름 120cm의 팔각형 풀이며, 모서리에 12개의 진입 또는 퇴출구가 설치되어 있습니다. 각 디자인은 흰색 바닥 위에 구축되었으며 투명 아크릴 플라스틱으로 제작된 투명 벽으로 둘러싸여 있습니다. 마우스를 더 깊은 풀에 넣었을 때 때때로 발생하는 수영 스트레스를 줄이기 위해 풀은 20 to 25 °C의 물로 채워집니다.패들링 행동을 유도하기 위해 수위는 약 2 cm 깊이로 설정합니다. 보다 자연스러운 탈출 반응을 용이하게 하기 위해, 동물은 장치 측면에 설치된 검은색 플라스틱 파이프로 만들어진 건조한 튜브로 탈출할 수 있습니다. 가짜 출구들은 검은색 나무 플러그로 막혀 있는 반면, 실제 출구는 개방되어 있으며 추가 파이프와 연결되어 있습니다.마우스가 실제 출구로 들어가면, 이 파이프 안에서 홈 케이지로 신속하고 극적으로 복귀할 수 있습니다. 모든 공간 기억 테스트와 마찬가지로, 마우스는 장치의 투명한 벽을 통해 보이는 방 안의 단서들에 의존합니다. 뚜렷한 시각적 단서 역할을 할 수 있도록 벽면에 선반, 찬장 및 검은색 플라스틱 도형들을 배치해야 합니다.시행을 시작하려면, 마우스를 풀 중앙에 두고 외곽의 네 가지 위치 중 하나인 9시, 12시 또는 3시 방향을 향하게 합니다. 탈출 튜브가 6시 방향에 있는 경우, 동물을 천천히 놓으면 발버둥을 쳐서 초기 방향 설정에 방해가 될 수 있으므로, 수면 바로 위에서 신속하게 놓아줍니다. 마우스가 60초 이내에 탈출하지 못하면, 수동으로 출구까지 안내합니다.투명 퍼스펙스(Perspex) 패들을 사용하십시오. 출구를 찾는 데 걸린 시간과 발생한 오류를 기록합니다. 오류는 튜브로부터 머리 길이 이내로 접근하거나, 실제 출구 근처를 지나치면서 진입하지 못한 경우로 정의합니다.머리 전체가 튜브 안으로 들어갔을 때 타이머를 중지합니다. 각 마우스에 대해 10회씩 시험을 실시하며, 시험 사이에는 5분간의 휴식 시간을 둡니다. 다음으로, 패들링 풀 모델을 Y-미로에 적용하였습니다.이 장치는 각각 30 x 8 x 20 cm 크기의 투명 플라스틱으로 제작된 세 개의 팔로 구성되어 있습니다. 이는 흰색 받침대 위에 설치되며 얕은 물로 채워집니다. 실제 출구는 단 하나뿐이며, 나머지 두 팔은 가짜 출구로 끝납니다.패들링 Y-미로(paddling y maze) 시험을 시작하려면, 마우스를 폐쇄된 팔 중 하나의 끝에 중심부 반대 방향을 향하게 하여 둡니다. 마우스가 60초 이내에 탈출하지 못하면, 수동으로 유도하여 탈출시킵니다. 투명 퍼스펙스(Perspex) 패들을 사용하여 총 탈출 시간과 오류 횟수를 측정하며, 패들링 Y-미로는 물 없이도 사용 가능합니다.공간 신규성 기억을 테스트하기 위해, 먼저 Y-미로 바닥에 얇게 나무 칩 베딩을 깝니다. 후각적 환경을 풍부하게 하기 위해, 실험 시작 전 실험 대상이 아닌 마우스 한두 마리가 몇 분 동안 미로를 탐색하게 합니다. 그다음 톱밥을 섞어 후각적 단서를 제거합니다.이는 다음 마우스가 공간적 단서에 의존하도록 보장하는 데 도움이 됩니다. 출구 암 끝의 출구 구멍을 덮을 투명한 길로틴 도어와, 해당 암을 나머지 두 개의 암으로부터 차단할 불투명한 길로틴 도어를 설치하십시오. 테스트의 첫 번째 단계에서는 마우스를 시작 암에 두고 자유롭게 탐색하도록 합니다.각 암(arm)에 진입한 횟수와 머문 시간을 기록하십시오. 마우스가 5분 동안 탐색을 마친 후, 동물을 제거하고 불투명한 문을 올려 세 개의 암 모두에 자유롭게 접근할 수 있도록 합니다. 마우스를 다시 시작 암에 넣고 2분 동안 관찰하십시오.각 구역의 진입 횟수와 머문 시간을 기록하십시오. 대조군. 마우스는 처음 두 구역을 기억하여 그곳에서 더 많은 시간을 보내야 합니다. 이전에 접근할 수 없었던 새로운 구역의 경우, 해마 손상은 패들링 풀에서의 학습 능력을 크게 저하시킵니다.본 예시에서, Y-미로 테스트의 수행 결과 글루타메이트 수용체 AMPA 수용체 서브유닛이 결손된 생쥐에서 공간적 신규성 기억의 손상이 드러났습니다. 모리스 수중 미로의 경로 길이 및 탈출 시간 측정값과 달리, 해마가 손상된 생쥐의 패들링 풀 내 오류율은 훈련 기간 내내 일정하게 유지되었습니다.따라서 이는 탈출 시간이나 이동 경로 길이와는 대조적으로 공간 기억만을 순수하게 측정하는 지표가 됩니다. 탈출 시간과 이동 경로는 생쥐가 과제의 비공간적 요소에 익숙해짐에 따라 모두 감소하기 때문입니다. 또한 오차 측정치는 손상된 생쥐와 대조군 사이의 차이를 더 큰 폭으로 보여줍니다. 패들 풀(paddling pool) 또는 Y-미로(Y-maze) 테스트를 수행할 때는 실험자 자체가 공간적 단서로 작용하므로, 항상 동일한 위치에 앉아야 한다는 점을 기억하는 것이 중요합니다.한번은 노벨상 수상자 두 명을 포함하여 유럽분자생물학기구(EMBO)에서 방문객들이 온 적이 있었는데, 그들의 존재가 마우스의 수행 능력에 영향을 주었습니다. 따라서 패들링 풀 실험을 시작하기 전에, 주변에 노벨상 수상자가 없는지 확인하여 모두 물러나게 하십시오.

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Research

연구

JoVE Journal

Behavior

행동

모리스 물 미로는 행동 작업에 해마의 참여를 문서화하는 데 사용하는 잘 접수 도구입니다.

모리스 워터 메이즈 실험

레쉴리 III의 미로가 자극 aversive 또는 Visual 단서에 의존하지 않는 경로 학습 작업입니다. 그것은 따라서 특히 노화 생쥐의하거나 어디에 스트레스가 고려, 학습 및 메모리를 평가하기위한 매우 매력적인 옵션입니다.

마우스에 레쉴리 III 메이즈를 사용하여 낮은 스트레스 루트 학습

모리스 워터 미로는 hippocampal 종속적인 학습과 기억을 테스트하는 행동 작업입니다. 이것은 널리 설치류 모델에서 신경 생물학, 신경 약리학과 neurocognitive 장애의 연구에 사용되었습니다.

알츠하이머병 모델 마우스에서 학습 및 메모리 적자에 대한 모리스 워터 메이즈 테스트

이 비디오에서는 설치류의 작업 기억을 연구하는 데 사용되는 탐색 작업인 플랫폼 재배치를 사용한 Morris 물 미로 테스트에 대해 설명합니다.

플랫폼 재배치를 통한 물 미로: 작업 기억을 평가하는 방법

마른 땅 반스 미로 널리 응답 약간 혐오 자극에 공간 탐색 능력을 측정하는 데 사용됩니다. 연속 일 동안 대조군의 성능 (탈출 케이지를 찾습니다 예를 들어 지연 시간) 일반 학습과 기억을 나타내는 향상. 쥐와 생쥐의 차이는 여기에 자세히 설명되어 있습니다 장치 및 방법의 변경을 필요로.

크고 작은 설치류 모델 바네스 미로 테스트 전략

이 프로토콜의 목표는 설치류의 공간 인지를 조사하는 것입니다. double-H water maze는 새로운 테스트로, 학습, 통합 및 기억의 다양한 구성 요소와 기억 시스템의 상호 작용을 설명하는 데 특히 유용합니다.

더블 H 미로 : 설치류의 강력한 행동 학습에 대한 테스트 및 메모리

이 원고는 일반적으로 사용되는 알츠하이머병의 마우스 모델과 함께 사용하도록 맞춤화된 Morris water maze(MWM) 프로토콜을 설명합니다. MWM은 형질전환 마우스 모델에 널리 사용됩니다. 마우스 모델의 배경 변형률에 민감한 절차의 구현은 그룹 차이를 감지하는 데 필수적입니다.

모리스 물 미로 테스트 : 마우스 스트레인 및 테스트 환경을위한 최적화

본 명세서에서, 알츠하이머병 모델 마우스의 학습 및 기억 능력을 평가하고 이를 치료하기 위한 수동 침술의 효과를 평가하기 위한 모리스 수질 미로 시험을 수행하는 프로토콜이 기재되어 있다.

모리스 워터 미로를 이용한 알츠하이머 병 마우스 모델의 학습 및 기억 능력 분석

팔이 여덟 개인 방사형 물 미로는 피험자가 탈출 플랫폼을 찾기 위해 미로 밖의 신호를 사용하도록 요구하고 지상 기반 방사형 팔 미로 설계에서 관찰된 한계를 해결함으로써 참조 및 작업 기억 성능을 동시에 평가하도록 설계되었습니다.

Using of a Eight-arm Radial Water Maze to assess Working and Reference Memory following Neonatal Brain Injury(신생아 뇌 손상 후 작업 및 참조 기억을 평가하기 위한 8개의 팔 방사형 물 미로 사용)

질병, 머리 부상, 유전자 변형 및 약물 투여 쥐의 치료는 행동에 깊은 영향을 미칠 수 있습니다. 대리석 매몰 및 둥지 파쇄와 같은 잘 특성화되고 검증된 접근 방식을 사용하여 인간 강박 장애 및 자폐 스펙트럼 장애의 모델로 생쥐에서 강박과 유사한 행동을 정확하게 문서화할 수 있습니다.

Marble Burying 및 Nestlet Shredding as Tests of Repetitive, Comobive-like behaviors in Mice(쥐의 반복적이고 강박적인 행동 테스트로서의 Marble Burying and Nestlet shredding as Marble Burying and Nestlet shredding as testitive, compulsive-like behaviors in mice)

학습하세요 마우스의 공간 인지 능력을 평가하는 얕은 물 미로 시험 방법을. 전통적인 수중 미로보다 스트레스를 줄이면서 해마 기능 연구에 활용할 수 있는 신뢰성 높은 행동 신경과학 기법입니다.

마우스의 물 미로 시험의 얕은 물 (패들링) 변종

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