Name: Aprile 2012: Questo mese in JOVE (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-04-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 13 s
Description: Scopri le tecniche sperimentali innovative in neuroscienza e biologia attraverso esperimenti visualizzati. Questo metodo aiuta i ricercatori a comprendere e applicare nuovi approcci scientifici con chiarezza.

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<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3646">Sistema di coltura di film di fibroina di seta per analisi in vitro e progettazione di biomateriali</a></h2>
Brian D. Lawrence1, Zhi Pan2, 1, Michael D. Weber1, David L. Kaplan3, Mark I. Rosenblatt1 1 MargaretM. Dyson Vision Research Institute, Weill Cornell Medical College , 21 Istituto di ricerca sulla visione Margaret M. Dyson, Weill Cornell Medical College, 3Dipartimento di Ingegneria Biomedica, Tufts University
I film di seta sono una nuova classe di biomateriali facilmente personalizzabili per una vasta gamma di applicazioni biomediche. Il sistema di coltura del film di seta presentato è altamente adattabile a una varietà di analisi in vitro. Questo sistema rappresenta una piattaforma di progettazione di biomateriali che offre l'ottimizzazione in vitro prima della traduzione diretta in modelli in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3666">Induzione dell'infarto miocardico nel pesce zebra adulto utilizzando la criolesione</a></h2>
Fabian Chablais, Anna Jaźwińska Dipartimento di Biologia, Unità di Zoologia, Università di Friburgo, Friburgo, Svizzera
Il pesce zebra rappresenta un modello prezioso per studiare i meccanismi di rigenerazione cardiaca nei vertebrati. Qui, presentiamo un protocollo per l'induzione di un infarto cardiaco in zebrafish adulto utilizzando la criolesione. Questo metodo provoca una massiccia morte cellulare entro il 20% della parete ventricolare, simile a quella osservata negli infarti dei mammiferi.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3680">Segmentazione e misurazione dei volumi di grasso nei modelli di obesità murina utilizzando la tomografia computerizzata a raggi X</a></h2>
Todd A. Sasser1, Sarah E. Chapman2, Shengting Li1, Caroline Hudson2, Sean P. Orton1, Justin M. Diener3, Seth T. Gammon1, Carlos Correcher4, W. Matthew Leevy2 1Carestream Molecular Imaging , 2Dipartimento di Chimica e Biochimica, Università di Notre Dame , 3Freimann Life Science Center, Università di Notre Dame , 4Ricerca e Sviluppo, Oncovision, GEM-Imaging S.A.
L'analisi del contenuto di grasso viene condotta di routine in studi che utilizzano modelli di obesità murina. I metodi emergenti nell'imaging e nell'analisi TC di piccoli animali stanno fornendo un'analisi longitudinale del contenuto di grasso ricca di dettagli. Qui descriviamo in dettaglio le procedure passo dopo passo per l'esecuzione di imaging, analisi e visualizzazione TC di piccoli animali.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3793">Radiochirurgia stereotassica per il cancro ginecologico </a></h2>
Charles Kunos1, James M. Brindle1, Robert Debernardo2 1Dipartimento di Radioterapia Oncologica, Ospedali Universitari Case Medical Center e Case Western Reserve University School of Medicine, 2Dipartimento di Ostetricia e Ginecologia, Divisione di Oncologia Ginecologica, Ospedali Universitari Case Medical Center e Case Western Reserve University School of Medicine
La radioterapia stereotassica corporea (SBRT) prevede radiazioni ablative guidate da immagini somministrate a bersagli tumorali refrattari alla chemioterapia o al trattamento con radiazioni convenzionali. Il sistema robotico Cyberknife SBRT, che utilizza una sofisticata localizzazione dei bersagli, eroga dosi di radiazioni ipofrazionate in grado di sterilizzare i bersagli tumorali. Questo articolo prenderà in considerazione i nuovi ruoli terapeutici della SBRT per i tumori ginecologici.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3992">Istituzione di colture di arricchimento eucariotico microbico da un lago antartico chimicamente stratificato e valutazione del potenziale di fissazione del carbonio</a></h2>
Jenna M. Dolhi, <font color='black'>Nicholas Ketchum, Rachael M. Morgan-Kiss Dipartimento di Microbiologia, Miami University 
Gli eucarioti microbici sono sia una fonte di carbonio derivato fotosinteticamente che le principali specie predatrici nei laghi antartici permanentemente coperti di ghiaccio. Questo rapporto descrive un approccio di coltura di arricchimento per isolare eucarioti microbici metabolicamente versatili dal lago antartico, il lago Bonney, e valuta il potenziale di fissazione del carbonio inorganico utilizzando un saggio radioisotopico per l'attività della ribulosio-1,5-bisfofato carbossilasi ossigenasi (RubisCO).
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/4008">Carico retrogrado di nervi, tratti e radici spinali con coloranti fluorescenti</a></h2>
Dvir Blivis, Michael J. O'Donovan Sezione di Neurobiologia dello Sviluppo, Istituto Nazionale di Disturbi Neurologici e Ictus, National Institutes of Health
Descriviamo una tecnica semplice e a basso costo per introdurre un'alta concentrazione di coloranti fluorescenti e sensibili al calcio nei neuroni o in qualsiasi tratto neuronale utilizzando una pipetta di aspirazione in polietilene.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3823">Un sistema di coltura neuronale primario per lo studio della latenza e della riattivazione del virus dell'herpes simplex</a></h2>
Mariko Kobayashi1, Ju-Youn Kim1, Vladimir Camarena2, Pamela C. Roehm3, Moses V. Chao4, 2, 5, 6, 7, Angus C. Wilson1, Ian Mohr1 1Dipartimento di Microbiologia, New York University School of Medicine, 2Programma di Neurobiologia Molecolare, Skirball Institute for Biomolecular Medicine, New York University School of Medicine, 3Dipartimento di Otorinolaringoiatria, New York University School of Medicine, 4Dipartimento di Biologia Cellulare, New York University School of Medicine, 5Dipartimento di Fisiologia e Neuroscienze, New York University School of Medicine, 6Dipartimento di Psichiatria, Scuola di Medicina dell'Università di New York, 7Center for Neural Science, Scuola di Medicina dell'Università di New York
Il protocollo descrive un sistema modello efficiente e riproducibile per studiare la latenza e la riattivazione del virus dell'herpes simplex di tipo 1 (HSV-1). Il test impiega colture omogenee di neuroni simpatici e consente la dissezione molecolare delle interazioni virus-neurone utilizzando una varietà di strumenti, tra cui l'interferenza dell'RNA e l'espressione di proteine ricombinanti.

Non ci sono conflitti di interesse dichiarati.

aprile 2012: questo mese in jove

April 2012: This Month in JoVE

Il numero di aprile del Journal of Visualized Experiments (JoVE) include un articolo che segue un laboratorio dall'Università di Miami dell'Ohio al Lago Bonney - un lago salino permanentemente coperto di ghiaccio in Antartide. Pochi organismi possono sopravvivere alle dure condizioni sotto il ghiaccio, dove la luce, il calore e le fonti di carbonio sono molto scarse. I microrganismi unicellulari chiamati protisti sono la principale classe di microbi che vivono sotto il lago Bonney e sono in grado di portare il carbonio, attraverso la fotosintesi, nel cerchio della vita.
Dopo aver determinato il sito di campionamento appropriato, i nostri autori perforano e sciolgono il ghiaccio in modo da poter raccogliere campioni da varie profondità all'interno della colonna d'acqua chimicamente stratificata del lago. Una volta raccolti, i campioni vengono portati in un laboratorio sul campo per la filtrazione e la stabilizzazione. Dopo l'elaborazione, i microbi presenti nel campione d'acqua vengono coltivati per ulteriori sperimentazioni. Ad esempio, i nostri autori dimostrano che le loro colture di arricchimento mantengono l'attività fotosintetica e gli esperimenti futuri dovrebbero aiutare a comprendere meglio la fisiologia dei protisti, nonché il modo in cui tali organismi possono influenzare il ciclo geochimico globale.
In Medicina Clinica e Traslazionale, JoVE rivolge la sua attenzione alla radioterapia stereotassica corporea, o SBRT, per il trattamento dei tumori ginecologici. SBRT è una forma minimamente invasiva di trattamento del cancro che si basa sulle radiazioni, erogate da un acceleratore lineare montato su un braccio robotico, per inattivare biologicamente i tumori.
I nostri autori, del Case Medical Center, spiegano come i marcatori fiduciali dorati dei tessuti molli vengono posizionati attorno al bersaglio del cancro a varie profondità sulla base della tomografia computerizzata. Durante una sessione di pianificazione del trattamento, vengono acquisite immagini TC e PET e quindi co-registrate. Guidati da queste immagini, sia gli oncologi radioterapisti che quelli ginecologici designano i volumi tumorali che saranno presi di mira durante la terapia, nonché il contorno che circonda le strutture normali che dovrebbero essere lasciate illese. All'inizio del trattamento, un sistema di localizzazione del bersaglio rileva i marcatori fiduciali tramite imaging radiografico cross-plane e la posizione del marcatore viene confrontata con i dati di imaging ottenuti in precedenza.
Durante il trattamento, i diodi emettitori di luce tracciano il movimento di un paziente, al fine di correlare il suo modello di respirazione alla posizione dei marcatori fiduciali, in modo che la radiazione possa essere erogata con precisione. Superando le complicanze associate all'immobilizzazione del paziente, i nostri autori dimostrano che la loro procedura per la radioterapia stereotassica del corpo può erogare con precisione radiazioni al volume bersaglio, limitando il dosaggio alle strutture vicine.
Nella nostra sezione di Bioingegneria, JoVE presenta un articolo che riguarda la realizzazione di substrati biocompatibili da bozzoli di bachi da seta. In primo luogo, i bozzoli vengono sottoposti a screening per la contaminazione e lavorati in modo da produrre l'estratto di seta. L'estratto viene posto sopra uno stampo PDMS, che è stato progettato per creare un motivo nel film di seta che si asciuga sulla sua superficie. Una volta essiccato, il film di seta viene sottoposto a un processo denominato ricottura ad acqua, che rende il film trasparente e perfetto per la microscopia. Dopo la semina cellulare sui film, i nostri autori dimostrano che tracciare la migrazione cellulare sul substrato di seta micro-modellato è altrettanto facile che sulle superfici di coltura tissutale più convenzionali. La biocompatibilità dei film di seta e il loro potenziale di essere modificati chimicamente e strutturalmente li rende materiali candidati interessanti per applicazioni in vivo, come la progettazione di dispositivi medici.
Sorprendentemente, la coltura neuronale primaria si fa strada nella nostra sezione di Immunologia e Infezioni, perché questo aprile, JoVE documenta un innovativo sistema di coltura di neuroni simpatici primari utilizzato per studiare la latenza e l'attivazione del virus dell'herpes simplex.
I neuroni periferici agiscono come serbatoi per il virus dell'herpes che sono la fonte degli eventi di riattivazione. Per stabilire una coltura di neuroni periferici, i gangli cervicali superiori vengono isolati da topi embrionali e dopo la digestione e la dissociazione vengono piastrati in piastre a 96 pozzetti. Intorno al giorno 6 in vitro, i virus dell'herpes che codificano una proteina di fusione virale-GFP vengono aggiunti alle cellule insieme a un inibitore della replicazione litica. Dopo la sospensione dell'inibitore, il virus latente si riattiverà e l'espressione della GFP sarà osservabile tramite microscopia a fluorescenza. Contando il numero di pozzetti che presentano fluorescenza GFP, è possibile testare la capacità di piccole molecole o oligonucleotidi di silenziamento genico di sopprimere o indurre la riattivazione virale, rendendo questo test un potenziale strumento per scoprire nuove terapie per aiutare a gestire l'infezione da HSV-1.
Questo breve riassunto descrive solo quattro dei cinquanta articoli che JoVE pubblicherà ad aprile. Altri rilasci degni di nota includono metodi per quantificare l'obesità nei ratti utilizzando la tomografia computerizzata a raggi X, l'induzione dell'infarto del miocardio nel cuore del pesce zebra e l'etichettatura retrograda del midollo spinale asportato. Restate sintonizzati.

Aprile 2012: Questo mese in JOVE

The April issue of the Journal of Visualized Experiments (JoVE) includes an article that follows a lab from the University of Miami of Ohio to Lake Bonney ...

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Aaron Kolski-Andreaco

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