Name: 췌장암의 진행 발광 동소 모델 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2013-06-28T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 25 s
Description: 배우세요 췌장암의 정위 마우스 모델 구축 및 생체 발광 영상을 통한 비침습적 종양 진행 모니터링 방법을. 이 기술은 치료 효과 평가와 췌장암 연구에 필수적인 도구입니다.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

이 작품은 국립 보건 의학 연구위원회, 호주 (1,008,865), 호주 연구위원회 (LE110100125), 국립 암 연구소 (CA138687-01), 에리카 슬론은 국립 유방암의 초기 경력 원정대에 의해 지원됩니다에 의해 지원되었다 재단, 호주. 코리나 김 푹스는 스위스 암 리그와 제약 과학의 모나 쉬 대학에서 HDR 장학금의 친교에 의해 지원됩니다. Eliane의 불안은 베른 암 리그에서 교부금에 의해 지원됩니다.

증명되는 프로토콜은 저자의 기관의 동물 관리 및 사용위원회의지도 및 승인하에 수행됩니다. 모든 실험은 모든 관련 지침, 규정 및 규제 기관 준수에 실행됩니다. 1. 췌장암 세포 라인을 transducing에 <ol><li> 앞에서 설명한대로 형질 도입 췌장암 세포는 루시 페라 제 표현. 12,13 테드 스티븐스 - 1 Capan-1 췌장암 세포주 반딧불 루시 페라로 형질 여기에 사용됩니다. </li></ol> 참고 : Renilla의 루시 페라 나 세균 루시퍼도 사용할 수 있습니다. 2. 췌장암 세포의 준비 <ol><li> 문화가 70 % 합류 할 때까지 췌장암 세포를 형질. </li><li> 췌장 세포를 올리고 가능성 90 % 이상되어 있는지 확인합니다. </li><li> 냉장 마트 리젤의 3:2 혼합물에서 2 × 10 7 세포 / ML에 resuspend을 : 인산 염은 버퍼오프라인 (PBS). </li><li> 이전 췌장에 주입 얼음 마트 리젤 세포 현탁액을 유지합니다. </li></ol> 참고 : 마트 리젤의 빠른 응고을 보장하기 위해, 세포 펠렛의 양을 고려하여 PBS 볼륨을 줄일 수 있습니다. 이전 주입 응고를 방지하기 위해 항상 얼음처럼 차가운 악기와 주사기를 사용하여 마트 리젤을 처리합니다. 제안 된 휴대폰 번호는 가이드와 각 세포주에 대해 경험적으로 결정되어야한다. 3. 마우스 준비 <ol><li> 2-3% isoflurane을 흡입하여 마우스를 마취. 부드러운 발가락 핀치에 페달 반사의 부족에 의한 마취의 깊이를 결정합니다. </li><li> 건조를 방지하기 위해 눈에 윤활제를 바릅니다. </li><li> 37 ° C 가열 패드의 뒷면에 마우스를 놓고 조심스럽게 복부의 왼쪽을 높이기 위해 마우스를 켭니다. </li><li> 10 % 포비돈 요오드 용액으로 복부를 준비합니다. </li></ol> 참고 : Injectab르 마취 흡입 마취 대신 사용할 수 있습니다. 수술 전 금식이 필요하지 않습니다. 4. 개복술 <ol><li> 불임 수술기구를 사용하면 대략 1 센티미터 정중선에서 옆 왼쪽​​으로 피부에 1.5 cm의 절개를합니다. </li><li> 기본 복부 근육에 1.5 cm의 절개를합니다. </li><li> 집게를 사용하여 비장을 찾아 부드럽게 복강에서 비장을 제거합니다. 기본 췌장을 노출하는 멸균 면봉에 따라서 비장을 보호합니다. </li><li> 비장에 인접한 췌장의 꼬리를 찾습니다. </li><li> 29 G 0.3 ML 인슐린 주사기 사용, 췌장에 마트 리젤 세포 현탁액의 20 μl를 주입. </li><li> 마트 리젤이 응고 할 때까지 주입 후, 30 ~ 60 초 동안 췌장에 주사기를 누릅니다. 이 중요한 단계는 세포의 누출을 최소화합니다. </li><li> 누설이 발생하지 확인하기 위해 주사 부위를 검사합니다. </li><li> 복강에 비장과 췌장을 반환합니다. </li></ol> 참고 : 얇은 될 수있는 췌장의 등쪽면을 펑 쳐링 않도록주의하십시오. 5. 복부 벽 마감 <ol><li> 연속 스티치를 사용하여 원형 바늘로 흡수 꼰 4-0 봉합사와 마우스의 복부 근육을 닫습니다. </li><li> 연속 스티치를 사용하여 절단 바늘 비 흡수성 필라멘트 6-0 봉합사로 외부 피부를 닫습니다. </li><li> 흡입 마취제 및 피하 주입 0.05-0.1 ㎎ / ㎏ 부 프레 노르 핀에서 마우스를 제거합니다. </li><li> 마우스가 음식과 물을 무료로 이용할와 37 ° C 가열 패드에 배치의 새장에 복구 할 수 있습니다. 쥐 같은 hunching 또는 감소 이동성 고통의 흔적을 보여 경우, 부 프레 노르 핀은 36 시간에 걸쳐 매 12 시간을 부여 할 수 있습니다. </li><li> 상처 치유 (7-10 일) 후, 마우스를 마취와 외부 봉합을 제거합니다. </li></ol> 6. 췌장 Canc의 발광 추적어 진행 <ol><li> isoflurane을 흡입하여 마우스를 마취. </li><li> 꼬리 정맥을 통해 150 ㎎ / ㎏ D-루시페린을 주입. </li><li> 발광 생물 이미징 시스템에 마우스를 놓고 앞에서 설명한대로 백색 빛과 생물 발광 영상을 캡처합니다. 14,15가 </li><li> 흡입 마취에서 마우스를 제거하고 그것의 홈 케이지에 복구 할 수 있습니다. </li></ol> 참고 : 바이오 루미 네 센트 영상은 비 침습적이며, 종양의 성장 속도론을 조사하기 위해 정기적으로 실시 할 수 있습니다. 췌장 꼬리의 이미지 종양에 그것의 왼쪽에 마우스를두고하는 것이 중요합니다, 카메라를 향해 종양 점 때문에. 주파수 전에 FOV 12.5 비닝 (binning) 4와 함께 살고 이미징 4.3.1 소프트웨어를 실행하는 루미나 II 이미징 시스템 (퍼킨 - 엘머, 이전 캘리퍼스 생명 과학)를 사용하여 실험 끝점에 일주일에 세 번까지 증가로 우리는 일주일에 한 번 군데 F-스톱 1, 노출 1-60 초 (높은 경험치에 의해 결정픽셀의 채도없이 osure).

<ol><li>American Cancer Society. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Facts+and+Figures%22">Facts and Figures</a>. , American Cancer Society. Atlanta. (2013).</li>
<li>Hariharan, D., Saied, A., Kocher, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+mortality+rates+for+pancreatic+cancer+across+the+world%5BTitle%5D)+AND+%22HPB+%28Oxford%29%22%5BJournal%5D)">Analysis of mortality rates for pancreatic cancer across the world.</a> HPB (Oxford). 10, 58-62 (2008).</li>
<li>Li, D., Xie, K., Wolff, R., Abbruzzese, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Pancreatic cancer.</a> Lancet. 363, 1049-1057 (2004).</li>
<li>Oettle, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adjuvant+chemotherapy+with+gemcitabine+vs+observation+in+patients+undergoing+curative-intent+resection+of+pancreatic+cancer%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Adjuvant chemotherapy with gemcitabine vs observation in patients undergoing curative-intent resection of pancreatic cancer: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 297, 267-277 (2007).</li>
<li>Andersson, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gemcitabine+chemoresistance+in+pancreatic+cancer%3A+molecular+mechanisms+and+potential+solutions%5BTitle%5D)+AND+%22Scand.+J.+Gastroenterol%22%5BJournal%5D)">Gemcitabine chemoresistance in pancreatic cancer: molecular mechanisms and potential solutions.</a> Scand. J. Gastroenterol. 44, 782-786 (2009).</li>
<li>Angst, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioluminescence+imaging+of+angiogenesis+in+a+murine+orthotopic+pancreatic+cancer+model%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Imaging+Biol%22%5BJournal%5D)">Bioluminescence imaging of angiogenesis in a murine orthotopic pancreatic cancer model.</a> Mol. Imaging Biol. 12, 570-575 (2010).</li>
<li>Angst, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((N-myc+downstream+regulated+gene-1+expression+correlates+with+reduced+pancreatic+cancer+growth+and+increased+apoptosis+in+vitro+and+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">N-myc downstream regulated gene-1 expression correlates with reduced pancreatic cancer growth and increased apoptosis in vitro and in vivo.</a> Surgery. 149, 614-624 (2011).</li>
<li>Hotz, H. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+orthotopic+nude+mouse+model+for+evaluating+pathophysiology+and+therapy+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreas%22%5BJournal%5D)">An orthotopic nude mouse model for evaluating pathophysiology and therapy of pancreatic cancer.</a> Pancreas. 26, 89-98 (2003).</li>
<li>Partecke, L. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+syngeneic+orthotopic+murine+model+of+pancreatic+adenocarcinoma+in+the+C57%2FBL6+mouse+using+the+Panc02+and+6606PDA+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+Surg.+Res%22%5BJournal%5D)">A syngeneic orthotopic murine model of pancreatic adenocarcinoma in the C57/BL6 mouse using the Panc02 and 6606PDA cell lines.</a> Eur. Surg. Res. 47, 98-107 (2011).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preinvasive+and+invasive+ductal+pancreatic+cancer+and+its+early+detection+in+the+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Preinvasive and invasive ductal pancreatic cancer and its early detection in the mouse.</a> Cancer Cell. 4, 437-450 (2003).</li>
<li>Sloan, E. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sympathetic+nervous+system+induces+a+metastatic+switch+in+primary+breast+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The sympathetic nervous system induces a metastatic switch in primary breast cancer.</a> Cancer Res. 70, 7042-7052 (2010).</li>
<li>Wang, X., McManus, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentivirus+production%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Lentivirus production.</a> J. Vis. Exp. (32), e1499(2009).</li>
<li>Morizono, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lentiviral+vector+retargeting+to+P-glycoprotein+on+metastatic+melanoma+through+intravenous+injection%5BTitle%5D)+AND+%22Nat.+Med%22%5BJournal%5D)">Lentiviral vector retargeting to P-glycoprotein on metastatic melanoma through intravenous injection.</a> Nat. Med. 11, 346-352 (2005).</li>
<li>Saha, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+bioluminescence+imaging+of+tumor+hypoxia+dynamics+of+breast+cancer+brain+metastasis+in+a+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">In vivo bioluminescence imaging of tumor hypoxia dynamics of breast cancer brain metastasis in a mouse model.</a> J. Vis. Exp. (56), e3175(2011).</li>
<li>Lim, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monitoring+tumor+metastases+and+osteolytic+lesions+with+bioluminescence+and+micro+CT+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Vis.+Exp%22%5BJournal%5D)">Monitoring tumor metastases and osteolytic lesions with bioluminescence and micro CT imaging.</a> J. Vis. Exp. (52), e2775(2011).</li>
<li>Burton, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adenovirus-mediated+gene+expression+imaging+to+directly+detect+sentinel+lymph+node+metastasis+of+prostate+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Adenovirus-mediated gene expression imaging to directly detect sentinel lymph node metastasis of prostate cancer.</a> Nat Med. 14, 882-888 (2008).</li>
<li>Vezeridis, M. P., Doremus, C. M., Tibbetts, L. M., Tzanakakis, G., Jackson, B. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+and+metastasis+following+orthotopic+transplantation+of+human+pancreatic+cancer+in+the+nude+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Surg.+Oncol%22%5BJournal%5D)">Invasion and metastasis following orthotopic transplantation of human pancreatic cancer in the nude mouse.</a> J. Surg. Oncol. 40, 261-265 (1989).</li>
<li>Fu, X., Guadagni, F., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+metastatic+nude-mouse+model+of+human+pancreatic+cancer+constructed+orthotopically+with+histologically+intact+patient+specimens%5BTitle%5D)+AND+%22Proc.+Natl.+Acad.+Sci.+U.S.A%22%5BJournal%5D)">A metastatic nude-mouse model of human pancreatic cancer constructed orthotopically with histologically intact patient specimens.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89, 5645-5649 (1992).</li>
<li>Reyes, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Orthotopic+xenografts+of+human+pancreatic+carcinomas+acquire+genetic+aberrations+during+dissemination+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Orthotopic xenografts of human pancreatic carcinomas acquire genetic aberrations during dissemination in nude mice.</a> Cancer Res. 56, 5713-5719 (1996).</li>
<li>Kim, M. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Generation+of+orthotopic+and+heterotopic+human+pancreatic+cancer+xenografts+in+immunodeficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">Generation of orthotopic and heterotopic human pancreatic cancer xenografts in immunodeficient mice.</a> Nat Protoc. 4, 1670-1680 (2009).</li>
<li>Furukawa, T., Kubota, T., Watanabe, M., Kitajima, M., Hoffman, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+%22patient-like%22+treatment+model+of+human+pancreatic+cancer+constructed+using+orthotopic+transplantation+of+histologically+intact+human+tumor+tissue+in+nude+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">A novel "patient-like" treatment model of human pancreatic cancer constructed using orthotopic transplantation of histologically intact human tumor tissue in nude mice.</a> Cancer Res. 53, 3070-3072 (1993).</li>
<li>Lewis, C. E., Pollard, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinct+role+of+macrophages+in+different+tumor+microenvironments%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Distinct role of macrophages in different tumor microenvironments.</a> Cancer Res. 66, 605-612 (2006).</li>
<li>Brembeck, F. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mutant+K-ras+oncogene+causes+pancreatic+periductal+lymphocytic+infiltration+and+gastric+mucous+neck+cell+hyperplasia+in+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">The mutant K-ras oncogene causes pancreatic periductal lymphocytic infiltration and gastric mucous neck cell hyperplasia in transgenic mice.</a> Cancer Res. 63, 2005-2009 (2003).</li>
</ol>

저자는 그들이 더 경쟁 재정적 이익이 없다는 것을 선언합니다.

여기에서 우리는 췌장 종양 개발 및 진행의​​ 경도 평가를위한 동소 모델을 설명합니다. 기본 종양의 성장 속도론을 재현 할 수있다 (그림 3)과 새로운 안티 - 췌장암 치료에 대한 종양 반응의 분석 예 : 루시 페라 제 태그가 세포의 생물 발광 영상을 사용하여 비 침습적으로 모니터링 할 수 있습니다. 인간의 질병과 일치 모델은 췌장의 미세와 종양 세포의 상호 작용을 조사 할 수 있습니다 현지 췌장의 침략 (그림 4A)를 보여줍니다. 루시 페라 제 태그가 세포주의 사용은 전이성 보급의 빈도, 위치 및 동역학 분석을 할 수 있습니다. 그들은 시각적으로 분명하게하고 전이의 조직 현지화가 생체 이미징 및 조직 학적으로 확인 할 수 있습니다 전에 루시 페라 제 태그가 세포주의 사용은 전이의 검출을 용이하게합니다. 임상 상황으로, 모델은 조직으로 전이를 보여줍니다장간막 림프절, 간, 위장관 및 복막 캐비티 (그림 4).</stron...

췌장암 4-6 %의 5 년 생존율, 암 관련 사망의 네 번째 주요 원인이다. 환자의 1,2 단지 15 %는 수술을받을 수 질병 조기에 진단하고, 종양이 재발된다 &gt;에서 그 환자의 80 %가. 3,4 젬시 타빈은 췌장 선암의 치료에 사용된다, 그러나, chemoresistance는 일반적이고 자주 약물 생존율에 거의 영향을 미친다. 췌장암을 치료하는 새로운 5 약리 전략이 매우 필요합니다. 그들의 개발은 치료 적 개입에 민감 할 수 있습니다 질병의 진행의 주요 단계를 크게 향상 이해에 따라 달라집니다. 췌장암의 동소 모델은 췌장암의 생물학을 공부 그들을 이상적인 도구를 만드는 인간의 질병의 주요 측면을 모방. 췌장암 세포 행동의 체외에서 세포 기반 분석과는 달리 6-9췌장암의 생체 내 모델에서 D 피하는 동소 모델은 췌장의 미세와 종양 세포의 상호 작용을 조사 할 수 있습니다. 질병 진행의 반응 속도는 동소 모델에서 높은 재현성하고 잘 새로운 치료제의 전임상 시험에 적합하게 짧은 시간 프레임 (주)에 발생합니다. 이 질병의 발병이 더 많은 변수 기간 (개월 1 년) 10. 더 공격적인 세포 라인과 함께 사용을 통해 발생 형질 전환 모델 대조적입니다, 췌장암의 동소 모델에서 본 것과 유사한 자연 전이의 패턴을 가지고 환자는. 같은 반딧불 루시 페라로 발광 리포터 유전자의 8 발현 종양 성장의 종 모니터링, 전이성 보급, 재발 및 치료에 대한 반응을 용이하게합니다. 6,11 여기에 우리가 MATR을 활용 췌장암의 동소 모델을 설명종양 진행의 비 침습 모니터링을위한 지역화 된 세포 전달 및 생체 내 생물 발광 이미징에 대한 이젤. 췌장암이 동소 모델은 질병의 진행 및 syngenic 또는 이종 이식 모델에서 치료 개입에 대한 응답의 비 침습 분석을 할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>클린 벤치 코트</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>히팅 패드</td><td></td><td></td><td>37로 설정 &deg; C </td></tr><tr><td>Ivis Lumina ll Bioluminescent Imager</td><td>캘리퍼스</td><td></td><td>대체 생물 발광 이미징 시스템에는 In vivo F PRO(Carestream) 및 Photon Imager(Biospace Lab)가 포함됩니다.</td></tr><tr><td>해부 가위</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>홍채 집게(톱니)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>바늘 홀더</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>27 G 0.3ml 인슐린 주사기</td><td>Terumo</td><td></td><td></td>T35525M2913</tr></tbody></table>

췌장암의 진행 발광 동소 모델

Bioluminescent Orthotopic Model of Pancreatic Cancer Progression

<p class="jove_content"&gt; 췌장암 4-6 %의 매우 가난한 5 년 생존율이 있습니다. 새로운 치료 옵션이 매우 필요하고 췌장암 생물학의 이해 증진에 의존하고 있습니다. 더 나은 췌장의 미세과 암 세포의 상호 작용을 이해하기 위해, 우리는 암 진행의 비 침습 모니터링을 허용 췌장암의 동소 모델을 보여줍니다. 루시 페라 제 태그가 췌장암 세포는 리겔에 재현 탁하고 개복 수술 중에 췌장의 꼬리에 전달됩니다. Matrigel을 주입하는 동안 암 세포의 누출을 방지하기 위해 신체 온도에서 응고. 먼 장기에 기본 종양의 성장과 전이를 사용하여 루시 페라 제 기판 루시페린의 주입에 따라 모니터링됩니다<em&gt; 생체 내</em암 세포 생물 발광 방출의&gt; 영상.<em&gt; 생체 내</em&gt; 영상 또한 절제 후 일차 종양의 재발을 추적하는 데 사용할 수 있습니다. 이 동소 모델은 동계 및 이종 이식 모델 모두에 적합하고 기본 췌장 종양 전이의 성장 소설 안티 - 암 치료의 영향을 조사하기 위해 사전 임상 실험에 사용할 수 있습니다.</p&gt;

이 방법은 마취 유도, 개복술, 마트 리젤 및 복부 폐쇄 (그림 1A)에서 암 세포의 주입 등의 수술 절차를 사용하여 췌장암의 동소 모델을 설명합니다. 주입 된 세포는 췌장의 표면에 거품 (그림 1B)를 형성한다. 췌장암의 진행은 비 침습적 암 세포 증식 및 보급 (그림 2)를 추적하는 생체 생물 발광 이미징에 사용하여 모니터링 할 수 있습니다. 간 전이는 수술 적 절제시 간 생물 발광의 관찰로 표시 (그림 2)와 조직학 (그림 4B)에 의해 생체을 확인 하였다. 기본 종양 이식로부터 6 주에 췌장의 꼬리와 비장 절제 하였다. 이 동소 주입 모델에서 종양의 성장 역학 재현성과 밀접하게 PA의 동소 이식 모델의 동역학과 유사<html> ncreatic 암 (그림 3). 췌장 종양의 성장은 로컬 침략과 ...

췌장암 생물학의 개선 이해는 매우 췌장암을 치료하는 더 나은 치료 옵션의 개발을 가능하게하기 위해 필요합니다. 이러한 요구를 해결하기 위해, 우리는 사용하여 암 진행의 비 침습 모니터링을 허용 췌장암의 동소 모델을 보여<em&gt; 생체 내</em&gt; 생물 발광 영상.

Pancreatic cancer has an extremely poor five-year survival rate of 4-6%.  New therapeutic options are critically needed and depend on improved ...

이 실험 절차의 전체적인 목표는 생체 내 생물 발광 이미징(in vivo bioluminescence imaging)을 통해 종양의 발달을 비침습적으로 모니터링할 수 있는 췌장암 정위성 마우스 모델을 제작하는 것입니다. 이를 위해 먼저 루시페레이스(luciferase)가 표지된 암세포를 Matrigel에 재현탁시킵니다. 다음 단계로 개복술을 시행하여 복강을 열고 췌장의 위치를 찾아 고정합니다.다음으로, 매트리젤(matrigel)에 현탁시킨 종양 세포를 췌장에 주입합니다. 마지막 단계는 췌장을 원래 위치로 되돌리고 봉합사를 사용하여 복강을 폐쇄하는 것입니다. 최종적으로, 생물 발광 이미징을 통해 종양의 진행 상황을 모니터링하고 치료 개입에 대한 반응을 추적합니다.이 모델이 in vitro 기반의 세포 분석법이나 췌장암 피하 모델보다 갖는 주요 장점은 췌장 종양 세포와 췌장 미세환경 사이의 상호작용을 실제로 조사할 수 있다는 점입니다. 이 모델에서 질환 진행의 역학은 재현성이 매우 높고 짧은 기간 내에 발생하므로, 췌장암의 새로운 치료제를 검토하는 데 유용하며, 이 모델의 시연은 매우 중요합니다. 종양 세포 주입 시 누출을 방지하기 위해 주의 깊게 수행해야 합니다. 이 절차를 시작하려면 배양을 진행하십시오.서면 프로토콜에 설명된 대로 루시페레이스(luciferase)를 발현하도록 형질전환된 췌장암 세포를 70% 합류(confluent)될 때까지 배양한 후, 0.05% trypsin EDTA로 세포를 수확하고 혈구계수기(hemocytometer)를 사용하여 세포 수를 측정하며 생존율이 90% 이상인지 확인합니다. 다음으로, 200 ×g에서 5분 동안 부드럽게 원심분리하여 세포 침전물을 형성시킨 후, 상층액을 제거하고 췌장암 세포를 mL당 2천만 개로 재현탁합니다. Matrigel과 냉각된 PBS를 3:2 비율로 혼합하여 혼합물을 얼음에 둡니다. 그런 다음 0.3 mL 29게이지 인슐린 주사기를 사용합니다.준비된 matrigel 세포 현탁액을 주사기에 흡입합니다. 이 절차를 시작하려면 2~3%의 isoflurane을 흡입시켜 마우스에 마취를 실시합니다. 1~2분 후, 마우스의 발가락을 살짝 꼬집어 발 반사 반응이 없는지 확인하여 마취 깊이를 점검합니다.다음으로, 수술 중 건조를 방지하기 위해 각 눈에 충분한 윤활제를 도포합니다. 그런 다음 37 °C 가열 패드 위에 마우스를 등으로 눕히고, 마우스를 조심스럽게 돌려 복

bioluminescent-orthotopic-model-of-pancreatic-cancer-progression

Research

연구

JoVE Journal

Medicine

의학

안정 immunodeficient 생쥐의 좌골 신경에 루시페라제 - 태그 인간의 악성 말초 신경 칼집 종양 세포를 접목하는 방법이 설명되어 있습니다. 스터디 그룹에 동물 임의의 분리를위한 종양 이식과 기준의 적절한 설립을 증명하기 위해 bioluminescence 이미징의 사용도 설명합니다.

대한 인간 루시페라제 태그가 추가된 악성 주변 신경 쉬스 종양 세포 Orthotopic Xenografting 생체내에</em후보 치료 대리점> 테스트

hypoxia inducible 인자 - 1α 활동 Bioluminescence 이미징은 유방암 뇌 전이의 마우스 모델에서 종양 intracranial hypoxia 개발을 모니터에 적용됩니다.

유방암 뇌 전이의 종양 Hypoxia 역학 생체내의 Bioluminescence 이미징에서는 마우스 모델에서

이 비디오는 녹색 형광 단백질 발현 췌장암 세포를 마우스의 췌장에 이식하는 프로토콜을 보여줍니다. 정소성 마우스 모델은 원발성 및 전이성 종양에 대한 새로운 치료법의 효능을 조사하는 데 도움이 됩니다.

형광 정교성 마우스 모델: 생체 내 종양 진행을 평가하기 위해 암세포를 발현하는 GFP를 마우스에 이식

이 비디오는 종양 진행의 비침습적 모니터링을 위해 국소 세포 전달 및 생체 내 생물 발광 이미징을 위해 Matrigel을 활용하는 췌장암의 정소성 모델을 보여줍니다. 정소성 모델은 신유전 및 이종 이식 모델 모두에 적합하며 원발성 췌장 종양의 성장 및 전이에 대한 새로운 항암 치료제의 영향을 조사하기 위한 전임상 시험에 사용할 수 있습니다.

생물 발광 직소성 췌장암 마우스 모델: 마우스의 암 진행을 모니터링하기 위한 비침습적 기술

근원:마리나 아란테스 라디키1, 빅터 카를로스 멜로1,빅토리아 파스 마차도1, 마르시아 크리스티나 올리베이라 다 로샤1, 자클린 바즈 데 올리베이라1, 루아나 크리스티나 카마르고1,2, 루이스 알렉상드르 뮐만1, 리카르도 벤테스 아제베도1, 소니아 나이르 바오1, 주앙 파울로 피게이로 롱고11브라질리아 대학교 생물과학연구소, 2브라질리아대학교 심리학연구소 기초심리과정학과이 비디오는 루시페라아제 발현 유방 선암종 세포를 암컷 마우스에 주입하고 생물발광 신호를 모니터링하여 시간 경과에 따른 원발성 및 전이성 종양 성장을 평가함으로써 생체 내에서 종양 진행을 추적하는 절차를...

암컷 마우스 모델에서 유방 종양 진행의 생물발광 이미징

이 프로토콜의 목표는 마우스의 정소성 췌장 종양 이종 이식편에 동적 대비 강화 자기 공명 영상(DCE-MRI)을 적용하는 것입니다. DCE-MRI는 표적 조직의 미세혈관 구조를 분석하는 비침습적 방법이며, 새로운 요법 후 종양의 혈관 반응을 평가하는 데 유용합니다.

동소 이식 췌장 암 마우스 모델의 동적 대비 강화 된 자기 공명 영상

Balb-c Ola Hsd-Fox1nu 마우스의 췌장에 녹색 형광 단백질 발현 췌장암 세포(PANC-1 GFP)를 항소적으로 이식하여 종양 진행 및 전이를 평가하는 절차가 여기에 나와 있습니다.

췌장암의 형광 동소 이식 마우스 모델

이 프로토콜은 이중 생물 발광 이미징에 의해 종양 진행 및 혈관신생을 실시간으로 모니터링하는 종양 베어링 마우스 모델의 확립을 설명합니다.

종양 진행 및 혈관 신생의 이중 생물 발광 이미징

췌장의 생체 내 고해상도 이미징은 췌장 내 생체 내 이미징 창으로 촉진되었다.

췌장 인트라바이탈 이미징 창이 있는 뮤린 모델에서 췌장의 생체 내 세포 수준 시각화안정화

우리는 인간 췌장암 세포의 초음파 유도 주사와 초음파 영상에 의한 생체 내 종양 성장의 후속 모니터링에 의해 최소 침습 동종 췌장암 모델을 생성하는 프로토콜을 제시합니다.

초음파 유도 주사에 의한 췌장암 세포의 동종 이종이의 생성

이 프로토콜은 최대 4마리의 동물에 대해 다중 챔버 침대를 사용하여 유전자 조작 마우스 모델에서 췌장 선암종 종양을 검출하기 위해 최대 4대의 동물에 대해 병렬 자기공명영상(MRI)을 촬영합니다. 이 다동물 MRI 프로토콜은 종양을 빠르고 비용 효율적으로 탐지하고 측정하여 전임상 연구를 위한 동물 선발과 종양 성장의 종단 모니터링을 용이하게 합니다.

췌장암 마우스 모델에서 종양 측정을 위한 다동물 자기공명영상

배우세요 췌장암의 정위 마우스 모델 구축 및 생체 발광 영상을 통한 비침습적 종양 진행 모니터링 방법을. 이 기술은 치료 효과 평가와 췌장암 연구에 필수적인 도구입니다.

췌장암의 진행 발광 동소 모델

더 많은 동영상 탐색