Name: minimizing stress in mouse and rat handling
Uploaded: 2015-08-24T15:22:25.000Z
Duration: 15 min 57 s
Channel: JoVE

1. Scruffing
I topi sono più spesso trattenuti usando la tecnica di scruffing, ma anche i giovani ratti possono essere trattenuti con questo metodo. I ratti adulti sono più difficili da trattenere con questa tecnica a causa di un collo più muscoloso, una ridotta quantità di pelle sciolta e un'avversione a questo metodo.
<ol><li>Il metodo di ritenuta con una sola mano viene utilizzato più spesso in ceppi di topo molto calmi, come il nudo atimico, lo SCID e alcuni ceppi GEM. Tuttavia, c'è un rischio maggiore di essere morsi con questo metodo. I gestori di animali alle prime armi dovrebbero familiarizzare con la tecnica di ritenuta a due mani prima di tentare il metodo con una sola mano.<ol>
<li>Posiziona l'animale su una superficie che può afferrare, come una parte superiore della gabbia della barra metallica o un tappetino.</li>
		<li>Tenere la coda tra il terzo e il quarto dito della mano non dominante e applicare una leggera trazione all'indietro. Ciò fa sì che l'animale si aggrappi alla superficie e si traduca in un corpo allungato e allungato.</li>
		<li>Gira la mano in modo che il palmo sia rivolto verso il corpo dell'animale.</li>
		<li>Con l'indice e il pollice, appuntare il roditore sulle spalle.</li>
		<li>Far scorrere delicatamente il pollice e l'indice in avanti e posizionarli alla base del cranio. Afferra la pelle sciolta al collo e solleva l'animale.</li>
		<li>Usa il dito medio per stabilizzare l'animale lungo la schiena bloccando la pelle dorsale contro la base del pollice.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Contenimento a due mani<ol>
<li>Posiziona l'animale su una superficie che possa afferrare.</li>
		<li>Tenere la coda alla base (entro 1-2 cm dal corpo) con la mano dominante e applicare una leggera trazione all'indietro. Ciò fa sì che l'animale si aggrappi alla superficie e si traduca in un corpo allungato e allungato.</li>
		<li>Con l'indice e il pollice dell'altra mano, appuntare il roditore sulle spalle.</li>
		<li>Far scorrere delicatamente il pollice e l'indice in avanti e posizionarli alla base del cranio. Afferra la pelle sciolta al collo e solleva l'animale.</li>
		<li>Usa le dita rimanenti per stabilizzare l'animale lungo la schiena bloccando la pelle dorsale contro la base del pollice.</li>
		<li>Fissare i quarti posteriori bloccando la coda contro il palmo con il quarto dito o lasciando riposare gli arti posteriori su una superficie solida.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig1.jpg"> Figura 1: Metodo di ritenuta con una e due mani per i topi
2. Guanti
Ci sono una varietà di guanti disponibili per i gestori da indossare per la protezione dai morsi di ratto. Sono generalmente inadatti al lavoro con i topi a causa della perdita di destrezza. Spesso, gli svantaggi di molti tipi di guanti superano i vantaggi.
<ol><li>I guanti da lavoro in tela di cotone non sono resistenti ai morsi, ma forniscono una piccola quantità di protezione da denti e unghie. Non forniscono una buona presa in quanto scivolano facilmente sulla pelliccia.</li>
	<li>I guanti in pelle di buona qualità sono resistenti ai morsi. Tuttavia, la loro rigidità provoca una riduzione della destrezza. Lo spessore della pelle, sebbene protettivo, riduce l'acuità tattile e la mobilità della mano.</li>
	<li>I guanti per posta a catena forniscono un senso psicologico di sicurezza per il conduttore di animali. Tuttavia, sono pesanti e la maggior parte dei denti dei ratti può penetrare tra i collegamenti. Inoltre, questi guanti diminuiscono la destrezza manuale e, se usati in modo improprio, sono più pericolosi sia per l'animale che per il conduttore.</li>
	<li>I guanti isolati in gomma che sono comunemente usati nelle case per lavare i piatti forniscono una superficie palmare strutturata e consentono una presa sicura sul pelo dei roditori. La superficie elastica in lattice è abbastanza spessa da resistere alla puntura degli incisivi dei roditori e abbastanza sottile da essere in grado di sentire e controllare l'animale. Il principale svantaggio è che sono fatti di lattice, che è una preoccupazione per le persone con allergie al lattice. Inoltre, questi guanti si deteriorano alla luce e devono essere sostituiti regolarmente.</li>
</ol>3. Contenimento del corpo
<ol><li>La "presa T. rex" è un metodo di ritenuta a due mani per ratti.<ol>
<li>Posiziona un topo su una superficie che può essere afferrata.</li>
		<li>Tenendo la base della coda con una mano, porta l'altra mano su e sopra la schiena con l'indice e il medio divisi.</li>
		<li>Posiziona la mano sulla spalla con l'indice su un lato della testa e il dito medio sull'altro lato. Le dita su ciascun lato della testa limitano il movimento da un lato all'altro della testa.</li>
		<li>Circonda il corpo dietro le zampe anteriori con il terzo dito, il quarto dito e il pollice. Bisogna fare attenzione per evitare di comprimere il torace e compromettere le respirazioni. Questa presa impedisce al topo di muoversi avanti o indietro fuori dalla mano.</li>
		<li>Stabilizzare la coda e i quarti posteriori afferrando la base della coda con o senza aggrapparsi ai piedi posteriori.</li>
		<li>Questa restrizione funziona bene con ratti più grandi e quando è necessario l'accesso alla testa.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Il metodo incrociato dell'archo anteriore è un metodo di ritenuta a due mani.<ol>
<li>Posiziona l'animale su una superficie che possa afferrare.</li>
		<li>Tenere la coda alla base (entro 1-2 cm dal corpo) con la mano dominante e applicare una leggera trazione all'indietro. Ciò fa sì che l'animale si aggrappi alla superficie e si traduca in un corpo allungato e allungato.</li>
		<li>Porta l'altra mano da dietro sopra la schiena.</li>
		<li>Afferrare il topo direttamente dietro le spalle, con le dita su un lato e il pollice sull'altro lato del torace, e far scorrere la mano in avanti, forzando così le zampe anteriori in avanti.</li>
		<li>Le zampe anteriori si attraverseranno sotto il mento del topo, creando una barriera fisica e impedendo al ratto di muovere la testa verso il basso verso le dita.</li>
		<li>Fare attenzione ad evitare di comprimere il torace e compromettere le respirazioni.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig2.jpg"> Figura 2: Presa T-rex e metodo incrociato degli arch per trattenere i ratti
4. Dispositivi di ritenuta
<img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig3.jpg"> Figura 3: Dispositivo di ritenuta in stile Broome
<img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig4.jpg"> Figura 4: Restrainer per roditori a fondo piatto
<ol><li>I dispositivi rigidi sono disponibili in una varietà di tipi e sono generalmente realizzati in materiale non poroso che è facilmente disinfettato.<ol>
<li>Il sistema di ritenuta in stile Broome è progettato per fornire l'accesso alla coda per iniezioni endovenose. È costruito con una fessura che corre lungo l'intera lunghezza del dispositivo, che consente all'animale di essere tirato prima nei quarti posteriori del freno. Un nasello di plastica viene inserito per tenere l'animale in posizione.<ol>
<li>Rimuovere il nasello dal corpo del tubo di ritenuta allentando la vite.</li>
			<li>Afferrare l'animale alla base della coda e orientare il tubo di ritenuta in modo che la fessura che corre per tutta la lunghezza del tubo sia rivolta verso l'alto. Tirare delicatamente l'animale nei quarti posteriori del dispositivo di ritenuta prima.</li>
			<li>Spesso è vantaggioso posizionare l'animale su una superficie liscia per facilitarne il posizionamento nel tubo.</li>
			<li>Una volta che l'animale è completamente nel tubo - ed è stato attirato verso l'estremità chiusa - far scorrere il nasello di plastica nel tubo per occludere l'apertura.</li>
			<li>Posizionare il gruppo nasello in modo che il naso dell'animale si trova nell'apertura centrale. Non posizionare il nasello così strettamente che l'animale non possa respirare.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Il dispositivo di ritenuta per roditori a fondo piatto è un mezzo cilindro con aperture che consentono l'accesso dall'alto e dal basso del dispositivo di ritenuta. Un cancello di plastica rigida viene inserito in uno dei numerosi slot graduati per contenere l'animale all'interno del dispositivo.<ol>
<li>Tieni l'animale per la base della coda con la mano dominante su una superficie liscia o sulla parte superiore di una gabbia.</li>
			<li>Tenere il tubo di ritenuta a fondo piatto nell'altra mano e inclinarlo in modo che l'estremità aperta sia alla testa dell'animale con un angolo di 45 ° rispetto alla superficie superiore del tavolo / gabbia.</li>
			<li>Alcuni animali entreranno immediatamente nel tubo, mentre altri sono riluttanti e richiedono al conduttore di guidarli nel tubo.</li>
			<li>Posiziona il tubo sopra la testa dell'animale. Toccare immediatamente la groppa dell'animale e mantenere la pressione per impedire all'animale di eseguire il backup.</li>
			<li>Una volta che l'animale è nel dispositivo di ritenuta, far scorrere il cancello di plastica nella fessura appropriata per tenere l'animale nel dispositivo di ritenuta.</li>
		</ol>
</li>
		<li>I sistemi di ritenuta per tubi sono cilindri in plexiglass con un'estremità chiusa contenente fori o fessure per la circolazione dell'aria. Alcuni sono modificati con un'ampia fessura della metà della lunghezza del cilindro per accogliere l'esposizione di un arto posteriore per iniezioni intramuscolari, raccolta di sangue safeno e femorale o accesso alla superficie dorsale per iniezioni sottocutanee.<ol>
<li>Afferra l'animale per la base della coda con la mano dominante su una superficie liscia o sulla parte superiore di una gabbia.</li>
			<li>Tenere il tubo di ritenuta nell'altra mano e angolarlo in modo che l'estremità aperta sia alla testa dell'animale con un angolo di 45 ° rispetto alla superficie superiore del tavolo / gabbia.</li>
			<li>Alcuni animali entreranno immediatamente nel tubo. Altri animali sono riluttanti e richiedono al conduttore di guidarli nel tubo.</li>
			<li>Posiziona il tubo sopra la testa dell'animale. Toccare immediatamente la groppa dell'animale e mantenere la pressione per impedire all'animale di eseguire il backup.</li>
			<li>Scruff e guida manualmente gli animali ingestibili nel tubo, consentendo alla pelle trattenuta di scivolare attraverso la fessura nel tubo.</li>
			<li>Una volta che l'animale si trova nel dispositivo di ritenuta, è necessario occludere l'apertura per impedire all'animale di eseguire il backup.</li>
			<li>A seconda della procedura, diverse dita sono posizionate attraverso l'apertura.</li>
			<li>Infila un grande guanto di lattice nell'apertura. I guanti sono solitamente strutturati e afferrano la superficie in plexiglass.</li>
			<li>Alcuni tubi di ritenuta avranno chiusure specifiche per quello stile o dimensione.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig5.jpg"> Figura 5: Dispositivo di ritenuta del tubo
<ol start="2"><li>I dispositivi di ritenuta flessibili sono coni di plastica flessibili usa e getta. Sono disponibili in plastica trasparente o opaca. La plastica è abbastanza sottile da consentire la penetrazione da parte di un ago per eseguire iniezioni senza rimuovere l'animale dal dispositivo di ritenuta. Sono disponibili in una varietà di dimensioni per adattarsi a topi e ratti, sia adulti che svezzati.<ol>
<li>Tagliare la plastica con le forbici per consentire l'accesso agli arti, alla coda e ad altri siti di iniezione.</li>
		<li>Selezionare una dimensione del cono appropriata per l'animale. Il cono dovrebbe essere abbastanza lungo da estendersi di 2-3 pollici oltre la groppa dell'animale.</li>
		<li>Inserire l'animale nel cono<ol>
<li>Apri il cono e afferralo intorno alla metà superiore.</li>
			<li>Afferrare l'animale per la base della coda con la mano dominante, posizionandolo su una superficie liscia o su una parte superiore della gabbia.</li>
			<li>Tenere il cono di ritenuta nell'altra mano e inclinarlo in modo che l'estremità aperta sia alla testa dell'animale con un angolo di 45 ° rispetto alla superficie superiore del tavolo / gabbia.</li>
			<li>Alcuni animali entreranno immediatamente nel cono. Altri animali sono riluttanti e richiedono al conduttore di guidarli nel cono di cono di contenzione.</li>
			<li>Posiziona il cono sopra la testa dell'animale. Toccare immediatamente la groppa dell'animale e mantenere la pressione per impedire all'animale di eseguire il backup. A causa del diametro maggiore dell'apertura del cono, gli animali hanno molte più probabilità di girarsi per uscire dal cono.</li>
			<li>Non appena l'animale entra nel cono, afferrare l'estremità aperta e sigillarla per costringere l'animale alla fine.</li>
			<li>Fissare l'apertura piegando la plastica su un lato della coda e applicando la clip legante alla plastica piegata, facendo attenzione a evitare di bloccare la coda o la pelle. In alternativa, raccogliere la plastica intorno alla coda in modo uniforme e posizionare la cravatta a torsione il più vicino possibile al corpo per fissare l'apertura.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 6" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig6.jpg"> Figura 6: Restrainer flessibile
5. Metodi di contenimento per procedure tecniche specifiche
<ol><li>L'esposizione ventrale è necessaria per le iniezioni intraperitoneali.<ol>
<li>Scruffing<ol>
<li>Scruff l'animale e gira la mano in modo che l'addome sia esposto.</li>
			<li>Inclinare l'animale in modo che la testa sia rivolta verso il basso con un angolo di 30°.</li>
			<li>Fissare i quarti posteriori bloccando la coda contro il palmo usando il quarto dito.</li>
			<li>In alternativa, i quarti posteriori possono essere immobilizzati bloccando la pelle in eccesso lungo la schiena tra le dita e la base del pollice.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Metodi di ritenuta incrociati dell'impugnatura del T. rex e dell'archlombo anteriore<ol>
<li>Afferrare l'animale (solo ratti) usando una delle tecniche di cui sopra.</li>
			<li>Con la mano libera, afferrare entrambe le zampe posteriori sopra il garretto ed estenderle caudale.</li>
			<li>Sostieni il peso dell'animale con il palmo della mano sul retro.</li>
			<li>Inclinare l'animale in modo che la testa sia rivolta verso il basso con un angolo di 30°.</li>
			<li>Una seconda persona esegue l'iniezione.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Trattene rigida<ol>
<li>La maggior parte dei dispositivi di ritenuta rigidi non può impedire all'animale di rotolare istintivamente per rimanere in posizione verticale.</li>
			<li>Se viene utilizzato un limitatore rigido, ruotare l'animale in modo che la testa sia rivolta verso il basso e sia perpendicolare al piano del tavolo.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Restrainer flessibile<ol>
<li>Se posizionato correttamente in un cono di plastica flessibile, l'animale non è in grado di girarsi o girarsi.</li>
			<li>Bisogna fare attenzione a posizionare l'animale in modo che gli arti posteriori siano sufficientemente separati da consentire l'accesso all'addome.</li>
			<li>Poiché l'animale è compresso, è imperativo che l'iniezione sia abbastanza bassa sulla superficie ventrale per evitare la puntura della milza, del fegato, del rene o dello stomaco.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>L'esposizione dorsale è necessaria per le iniezioni nello spazio sottocutaneo.<ol>
<li>Scruffing<ol>
<li>Scruff l'animale e lascia che le sue zampe posteriori riposino su una superficie solida e piana.</li>
			<li>Sollevare la collottola per creare una tenda di pelle sopra il collo e le spalle.</li>
			<li>Posizionare il peso della mano sul tavolo quando si iniettano i topi. Mettere peso sul mouse può causare soffocamento.</li>
			<li>Tenere i ratti in posizione con peso sui quarti posteriori, ma mai sul petto.</li>
			<li>Iniettare la sostanza nello spazio sotto le dita sul corpo dell'animale.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Immobili rigidi<ol>
<li>Metti l'animale in un dispositivo di ritenuta con un'apertura abbastanza grande da tirare su la pelle.</li>
			<li>Potrebbe essere necessario utilizzare una pince per afferrare la pelle.</li>
			<li>La maggior parte degli animali rimane nella postura corretta a meno che la restrizione non sia ruotata.</li>
			<li>Non iniettare un volume che impedisca alla pelle di ritirarsi dall'apertura una volta completata l'iniezione.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>La moderazione dell'arto posteriore è necessaria per l'iniezione intramuscolare; prelievo di sangue dalla vena safena, dalla vena femorale o dall'arteria femorale; e iniezione nella pedana.<ol>
<li>Scruffing di topi e piccoli ratti (meno di 200 g)<ol>
<li>Scruff l'animale e gira la mano in modo che l'addome sia esposto.</li>
			<li>Accedere al piede posteriore posizionando il piede tra le dita.</li>
			<li>Questo metodo è meglio utilizzato solo per le iniezioni di footpad.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Impugnatura T. rex o incrocio dell'archo anteriore<ol>
<li>Questo metodo richiede due persone: una per il contenimento del corpo e una per il contenimento dell'arto e l'esecuzione dell'iniezione.</li>
			<li>Estendere la zampa posteriore del ratto afferrando il piede per l'accesso alla vena safena, alla vena femorale o all'arteria o al muscolo per iniezione.</li>
			<li>Tenere la gamba appena sopra il garretto per l'iniezione della pedana.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Immobili rigidi<ol>
<li>Metti prima l'animale in una testa del tubo di ritenuta.</li>
			<li>Esporre la coda e i quarti posteriori tirandoli delicatamente all'indietro dal tubo.</li>
			<li>Immobilizzare la gamba afferrando la pelle del fianco e bloccando il ginocchio dritto. Ciò fornisce l'accesso al muscolo quadricipite per l'iniezione nel topo o nel ratto e impedisce all'animale di uscire dal dispositivo di ritenuta.</li>
			<li>Nei dispositivi con grandi fessure, posizionare la gamba all'esterno del tubo per l'accesso ai vasi sanguigni per il campionamento o l'iniezione della pedana.</li>
			<li>Quei tubi di ritenuta con estremità piatte consentono al tubo di appoggiarsi sul tavolo e stabilizzare il dispositivo durante la procedura.</li>
			<li>Poiché l'animale è fissato in questo modo, è possibile eseguire iniezioni o prelievi di sangue di ratti da un singolo tecnico.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Contenimento flessibile<ol>
<li>I sistemi di ritenuta in plastica flessibili possono essere modificati tagliando le aperture per adattarsi all'esposizione degli arti.</li>
			<li>Le aperture realizzate possono essere personalizzate per ogni animale, o per procedure specifiche.</li>
			<li>Poiché l'animale è fissato in questo modo, è possibile per un singolo tecnico eseguire iniezioni o prelievi di sangue di ratti.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>

La manipolazione di routine per il cambio delle gabbie e le procedure tecniche sono causa di stress per gli animali da esperimento. Sebbene questo tipo di stress non sia una minaccia per il benessere generale dell'animale, può causare fluttuazioni nei parametri fisiologici che possono avere un effetto negativo sui dati della ricerca. L'uso di personale qualificato, tecniche e attrezzature adeguate può mitigare parte dello stress.

tecniche di manipolazione e contenzione dei roditori

Rodent Handling and Restraint Techniques

Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Università di Notre Dame, IN
È stato dimostrato che anche una minima manipolazione di topi e ratti è stressante per gli animali. La manipolazione per il cambio di gabbia e altre procedure non invasive provoca un aumento della frequenza cardiaca, della pressione sanguigna e di altri parametri fisiologici, come i livelli sierici di corticosterone. Le fluttuazioni possono continuare fino a diverse ore. I metodi di contenzione richiesti per le iniezioni e i prelievi di sangue causano anche cambiamenti fisiologici che possono potenzialmente influenzare i dati scientifici. La formazione nella corretta gestione di topi e ratti è necessaria per ridurre al minimo gli effetti sugli animali. 1 Topi e ratti possono essere trattenuti manualmente con dispositivi di ritenuta o con agenti chimici. I metodi manuali e l'uso di dispositivi di ritenuta sono trattati in questo manoscritto. Tutti i metodi di contenimento includono il processo di sollevamento degli animali dalla loro gabbia domestica.

Tecniche di manipolazione e contenzione dei roditori

Source: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN
It has been demonstrated that even minimal handling ...

I roditori sono organismi modello ampiamente utilizzati per indagare su diverse questioni scientifiche ed è stato dimostrato che anche una manipolazione minima è stressante per questi animali. La manipolazione per attività semplici come il cambio della gabbia può causare un aumento della frequenza cardiaca, della pressione sanguigna e dei livelli sierici di corticosterone e queste fluttuazioni possono continuare per diverse ore. I metodi di contenzione necessari per le comuni procedure di iniezione e prelievo di sangue possono anche causare cambiamenti fisiologici, che possono potenzialmente influenzare i dati scientifici. Pertanto, è necessaria una formazione per una corretta gestione di topi e ratti per ridurre al minimo questi effetti sugli animali. In questo video, esamineremo prima le tecniche di base per la gestione dei roditori, quindi discuteremo le procedure di contenzione dei roditori, comprese le tecniche manuali e i metodi che prevedono l'uso di dispositivi di contenzione. Iniziamo discutendo le basi della gestione dei roditori. Uno dei metodi più comuni per spostare un topo adulto o un ratto è sollevare l'animale per la coda. Durante questa operazione, è imperativo che la coda sia afferrata alla base vicino alla groppa. Se l'animale viene sollevato per l'estremità della coda, la pelle può essere strappata a causa del peso corporeo e può portare a una lesione con conseguente amputazione della coda. È importante sottolineare che lo spostamento di un animale da un luogo all'altro dovrebbe essere fatto in modo rapido e costante. Sospendere l'animale in aria per un certo periodo di tempo non solo causerà angoscia, ma causerà anche la torsione o la lotta dell'animale, causando eventualmente danni alla coda. Inoltre, il conduttore non dovrebbe mettere una mano sotto l'animale, perché potrebbe cercare di afferrarlo per sicurezza, provocando un morso. Un altro metodo per maneggiare i roditori adulti è usare il forcipe. I tipi di pinze comunemente usati sono le pinze a medicazione lunga o le pinze per la lingua con tubi in gomma, plastica o silicone posizionati sopra le estremità per fornire un cuscino. Il forcipe può afferrare il topo sia alla collottola che alla base della coda. L'uso di pinze riduce al minimo la contaminazione incrociata da animale ad animale ed è più rapido e meno costoso rispetto alla sostituzione dei guanti tra una gabbia e l'altra. I principianti dovranno essere addestrati su quanto strettamente afferrare i topi con il forcipe, specialmente alla collottola in quanto potrebbe interferire con la respirazione. Quando si utilizza la pinza sulla coda, è necessario prestare attenzione a posizionare la pinza vicino alla base della coda per evitare lesioni. Ricordati di conservarli a faccia in giù in etanolo al 70% tra la manipolazione di diversi gruppi di animali. Inoltre, si possono usare tubi fatti di un materiale non poroso per trasferire gli animali. Questi tubi possono essere aggiunti a una gabbia come luogo in cui l'animale può ripararsi o cercare un rifugio sicuro. La maggior parte dei topi o dei ratti entrerebbe volentieri nei tubi quando la loro gabbia viene aperta, oppure possono essere facilmente guidati nel tubo. Quando l'animale è all'interno, copri le estremità aperte con il palmo della mano e le dita. Successivamente, per incoraggiare l'animale ad andarsene, inclinare delicatamente il tubo verso l'alto nella nuova gabbia. Gli animali sono facilmente condizionati a questo metodo di cambio della gabbia, rendendo questo processo semplice e veloce per spostare gli animali da un luogo all'altro. Alcune istituzioni preferiscono che gli animali, in particolare i ratti, vengano sollevati dal loro corpo, anche durante la manipolazione di routine. I ratti adulti vengono afferrati delicatamente intorno al torace, sollevati e rapidamente messi in un'altra gabbia. È importante che gli animali siano abituati a questo metodo di manipolazione fin dalla tenera età. Quando si lavora con ratti giovani, mettere una mano sulla schiena del ratto lo farà saltare nel palmo del conduttore permettendogli di essere afferrato. Potrebbe essere necessaria una seconda mano per evitare che il topo si dimeni dalla presa. Quando si cambiano gabbie con topi o ratti neonati, è spesso necessario rimuoverli mantenendo intatto il nido. Usa due mani per raccogliere il nido e i cuccioli dal fondo della gabbia in una nuova gabbia. Tieni le dita vicine per evitare di far cadere i cuccioli. Una volta che il nido è stato spostato in una nuova gabbia, è importante verificare che tutti i cuccioli siano presenti. In alternativa, è possibile utilizzare una paletta di plastica per spostare i roditori neonati nei loro nidi. Mentre lo fai, è importante posizionare la mano sopra la parte superiore della paletta per evitare che i neonati si muovano o saltino fuori. Rispetto alla gestione individuale dei cuccioli, raccogliere l'intero nido è meno angosciante sia per i cuccioli che per le madri. Ora che abbiamo discusso le basi della gestione dei roditori, approfondiamo le procedure dettagliate per la contenzione dei roditori. Per prima cosa illustreremo come trattenere manualmente questi animali. I topi e i ratti giovani possono essere trattenuti usando la tecnica a una mano o a due mani. Tuttavia, per i ratti adulti, la contenzione di tutto il corpo utilizzando l'impugnatura T-rex o il metodo incrociato degli arti anteriori sono le tecniche preferite. Cominciamo imparando il metodo di contenzione a due mani. Per prima cosa, posiziona l'animale su una superficie che può afferrare, come il coperchio della barra metallica. Con la mano dominante, tieni la coda alla base e tira delicatamente il mouse all'indietro. Questo fa sì che l'animale si aggrappi alla superficie e permetta al suo corpo di essere allungato. Quindi, blocca delicatamente il roditore con l'indice e il pollice non dominanti posizionati alla base del cranio e afferra la pelle flaccida sul collo per sollevare l'animale. Usa le dita rimanenti per stabilizzare l'animale con la schiena contro la base del pollice. Puoi fissare i quarti posteriori bloccando la coda con l'anulare contro il palmo della mano. Per il metodo di contenzione con una sola mano, posizionare nuovamente l'animale su una superficie che possa afferrare. Tieni la coda tra il terzo e il quarto dito della mano non dominante e applica una leggera trazione all'indietro. Con l'indice e il pollice della stessa mano, appunta il roditore sulle spalle. Fai scorrere delicatamente il pollice e l'indice in avanti e afferra la pelle flaccida al collo e solleva l'animale. Usa il dito medio per stabilizzare l'animale lungo la schiena appuntando la pelle dorsale contro la base del pollice. Il terzo metodo di contenzione di cui parleremo è l'impugnatura T-rex, un metodo di contenzione a due mani per i ratti. Per prima cosa, posiziona il topo su una superficie solida, come un tappetino, che possa afferrare. Tenendo la base della coda con una mano, metti l'altra mano sopra la spalla del topo con l'indice e il medio divisi su entrambi i lati. Questo per limitare il movimento laterale della testa. Una volta stabilizzata la testa, circondare il corpo dietro le zampe anteriori con il medio e l'anulare e il pollice. Evitare di comprimere il torace in modo che non comprometta la respirazione dell'animale. Infine, stabilizza la coda e i quarti posteriori afferrando la base della coda SENZA aggrapparti alle zampe posteriori, se prevedi di somministrare un gavagage orale; o CON l'aggrapparsi alle zampe posteriori, se l'intenzione è quella di iniettare l'animale. Infine, per trattenere un ratto usando il metodo incrociato degli arti anteriori, posiziona l'animale su una superficie che può afferrare. Quindi, con la mano dominante, tieni la coda alla base e applica una leggera trazione all'indietro in modo che il corpo dell'animale si allunghi. Successivamente, con l'altra mano, afferra l'animale direttamente dietro le spalle, con le dita da un lato e il pollice dall'altro lato del petto, e fai scorrere la mano in avanti. Questo movimento costringerà le zampe anteriori dell'animale a incrociarsi sotto il mento, creando una barriera fisica che impedisce all'animale di muovere la testa verso il basso. Fare attenzione a evitare di comprimere il torace, che porterà a difficoltà respiratorie. Ora che abbiamo esaminato le tecniche di contenzione manuale, impariamo come trattenere i roditori utilizzando dispositivi specializzati. Il primo dispositivo che impareremo a conoscere è il dispositivo di ritenuta in stile Broome. Ha una fessura che corre lungo l'intera lunghezza del dispositivo e un nasello in plastica, che viene inserito per tenere l'animale in posizione. Inizia allentando la vite per rimuovere il nasello. Quindi, orientare il tubo di ritenuta in modo che la fessura sia rivolta verso l'alto. Afferrare l'animale alla base della coda e tirarlo delicatamente nel dispositivo di ritenuta, prima i quarti posteriori. Una volta che l'animale è dentro, fai scorrere nuovamente il nasello di plastica nel tubo per evitare che si apra. Posizionare il nasello in modo che il naso dell'animale sia centrato nell'apertura. Non posizionarlo così strettamente che l'animale non possa respirare. Un altro esempio di dispositivo di ritenuta è il sistema di ritenuta per roditori a fondo piatto, che è un mezzo cilindro con aperture che consentono l'accesso dall'alto e dal basso del dispositivo. Dispone inoltre di fessure in cui è possibile inserire un cancello di plastica rigida per tenere l'animale in posizione. Per utilizzare questo contenitore, afferra il roditore per la base della coda con la mano dominante e posizionalo su una superficie liscia. Usando l'altra mano, tieni il tubo di ritenuta a fondo piatto in modo che l'estremità aperta sia alla testa dell'animale a 45? rispetto alla superficie. Posiziona il tubo sopra la testa dell'animale e picchietta immediatamente la groppa per evitare che l'animale indietreggi. Una volta inserito nel dispositivo, far scorrere il cancello di plastica nell'apposita fessura per fissare la posizione dell'animale. Il terzo tipo di dispositivo di cui parleremo sono i sistemi di ritenuta per tubi. Si tratta di cilindri in plexiglass con un'estremità chiusa contenente fori per la circolazione dell'aria e una fessura all'estremità aperta. Per utilizzare un sistema di ritenuta a tubo, afferrare l'animale e posizionarlo su una superficie liscia. Quindi, posizionare l'estremità aperta del tubo sulla testa dell'animale a 45? angolo. Non appena il roditore entra nel tubo, picchiettare la groppa per evitare che si accumuli. Infine, occludi l'apertura imbottindo un grande guanto in lattice, che afferrerà la superficie in plexiglass e impedirà all'animale di uscire dal tubo. Infine, discuteremo come utilizzare i sistemi di ritenuta flessibili, che sono coni di plastica flessibili usa e getta disponibili in diverse dimensioni. La selezione di un cono dipende dalle dimensioni dell'animale. Idealmente, dovrebbe essere abbastanza lungo da estendersi di 2-3 pollici oltre la groppa dell'animale. Come i metodi precedenti, posizionare l'animale su una superficie liscia e posizionare il cono di ritenuta a 45? sopra la testa dell'animale. Non appena l'animale entra nel cono, afferra l'estremità aperta e sigillala per costringere l'animale alla fine. Fissare l'apertura piegando la plastica su un lato della coda e applicando una clip per legante sulla plastica piegata, facendo attenzione a evitare di bloccare la coda o la pelle. Dopo aver discusso le basi della manipolazione e le diverse tecniche di contenzione, esaminiamo il motivo per cui avere una comprensione di queste procedure è necessario per qualsiasi scienziato in vivo. La conoscenza e la logica alla base di queste procedure di manipolazione di base sono al centro del mantenimento della salute dell'animale. Dal momento in cui nascono, gli animali vengono gestiti per semplici attività quotidiane come la pesatura, l'ispezione e il cambio della gabbia, che dovrebbero essere eseguite indipendentemente dall'obiettivo scientifico. Le procedure di contenimento sono utili anche per la marcatura. Ad esempio, per eseguire procedure come il pugno all'orecchio, l'animale deve essere trattenuto con la collottola. D'altra parte, quando si inserisce un microchip nei ratti, è necessario utilizzare un dispositivo di contenzione in modo che possano essere etichettati in modo permanente. Infine, i metodi di contenzione manuale vengono utilizzati per le comuni procedure di iniezione come la somministrazione sottocutanea e intraperitoneale. E la conoscenza dei dispositivi di contenzione è utile quando si esegue la somministrazione endovenosa, che richiede un movimento minimo dell'animale durante l'iniezione. Hai appena visto l'introduzione di JoVE alle tecniche di base di manipolazione e contenzione per i roditori. Queste procedure richiedono un tocco sicuro e deciso, ma delicato. Gli approcci incerti possono provocare morsi da parte del conduttore, mentre una manipolazione aggressiva può causare lesioni al roditore. Pertanto, è importante apprendere a fondo queste tecniche e trovare un equilibrio tra una presa decisa ma delicata. Come sempre, grazie per la visione!

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minimizing stress in mouse and rat handling

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours.

Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible.

Mice and rats can be restrained by hand, with restraint devices, or with chemical agents. This manuscript focuses on manual methods and restraint devices. Each restraint method begins with lifting the animal from its home cage.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

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rodent handling and restraint techniques

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours. Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible. <br...

basic care procedures

Caring for Research Mice and Rats

Research mice and rats need careful housing, feeding, and handling. These animals make up over 90% of the animals used for biomedical research, so their care can strongly affect experiment results. Both immunocompetent animals, which have a normal immune response, and immunocompromised animals need proper support during studies. Some research animals have weakened immune systems and need extra steps to stay healthy. Common examples include naturally occurring immunocompromised mice and mice...

fundamentals of breeding and weaning

Mouse and Rat Breeding Methods

Mouse and rat breeding methods are used in biomedical research to supply animals for laboratory studies. Many research facilities buy mice from commercial breeders, but some also breed mice and rats in-house. In-house breeding can reduce costs and give researchers more options for their studies. Breeding animals in the facility also lets researchers manage genetics and timing. They can plan pregnancies to match research needs and work with embryos and newborns when needed. Mice and rats can be...

rodent identification i

Mice and Rats: Ear Tags and Punch Codes

Proper identification of laboratory mice and rats is important in biomedical research. The right animal must be used for each procedure and for data collection. Clear identification helps keep research records accurate and reliable. This page focuses on permanent identification methods for mice and rats. These methods include ear tags, ear punch codes, microchip implantation, tail tattoos for adult mice, and toe tattoos for neonates. Temporary methods such as dyes and marking pens can also be...

rodent identification ii

Rodent ID Methods for Accurate Records

Accurate rodent identification supports reliable animal records and data collection. Research animal records may include simple cage cards or a detailed database with full information on each animal. Individual identification is the key part of keeping those records correct. Mice and rats can be identified by several methods. These include tattooing, microchip placement, and temporary identification methods. Each method serves a different need in research animal management. The procedure also...

compound administration i

Rodent Injection Routes and Restraint

Rodent injection routes and restraint methods are key parts of compound administration in mice and rats. When a substance must be injected into an animal, the delivery route and the amount of compound must be chosen with care. The right choice helps match the dose to the protocol. Several factors guide the route of administration. These include the pH of the solution, the volume needed for the desired dose, and the viscosity of the solution. Viscosity means how thick or resistant to flow a...

compound administration ii

Choosing the Right Route for Compound Delivery

Compound delivery is a key part of many animal studies. The route used to give the compound can change how it is absorbed. Careful planning helps make sure the compound is delivered correctly. The substance itself also matters when a route is chosen. Its pH, viscosity, and concentration can all affect which method is best. These properties help guide the choice of administration route in a study.

compound administration iii

Specialized Injection Routes in Mice and Rats

Specialized injection routes in mice and rats are sometimes used when standard compound administration methods are not enough. Some study protocols call for less common routes such as intradermal, intranasal, and intracranial injections. These methods are used in laboratory animals and require careful technique. Intradermal injections place a compound into the skin. Intranasal injections deliver a compound through the nose. Intracranial injections are given into the brain. Because these...

compound administration iv

Specialized Injection Routes in Rodents

Specialized injection routes in laboratory mice and rats include intracardiac, footpad, and retro-orbital administration. These methods are used when a protocol calls for a route that is less common than standard compound delivery methods. Each route requires specialized training to perform correctly. Intracardiac injections deliver into the heart, footpad injections target the paw area, and retro-orbital injections are given around the eye region. Because these procedures are more technical,...

blood withdrawal i

Rodent Blood Collection Methods

Blood collection in mice and rats is a common part of research studies. The method used depends on how much blood is needed, how often samples must be taken, the animal's health, and the technician's skill level. This topic includes three blood withdrawal methods: retro-orbital sinus bleeds, initial tail snip bleeds, and intracardiac bleeds. Each method requires general anesthesia, which means the animal is made unconscious before the procedure begins.

blood withdrawal ii

Rodent Blood Sampling Methods

Blood collection from mice and rats can be done with several methods. The choice depends on the restraint needed, how invasive the procedure is, and whether a general anesthetic is required. These factors help determine which method is best for a given analysis. One older method uses the retro-orbital sinus cavity, which is located behind the eye. This approach has been debated because it may cause tissue damage or even blindness. For that reason, facial vein and submandibular vein bleeding...

anesthesia induction and maintenance

Laboratory Anesthesia and Pain Control

Laboratory anesthesia and pain control are important parts of veterinary care for research animals. The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals says that pain assessment and pain relief must be part of that care. Anesthesia means the loss of feeling or sensation.

considerations for rodent surgery 

Aseptic Steps in Rodent Survival Surgery

Aseptic technique is essential for rodent survival surgery. It is used to keep the surgical site as clean as possible and to reduce contamination during the procedure. This approach includes patient preparation, surgeon preparation, and sterilization of instruments and other supplies. It also depends on a clean, controlled environment. Careful planning before surgery helps set up these steps for success. During the operation, animals need close monitoring. After the surgery, postoperative...

diagnostic necropsy and tissue harvest

Rat Necropsy for Tissue Collection

Rat necropsy is a key step for collecting organs and tissues at the end of many animal studies. These final samples are used for data collection time points and later testing. Because the samples are used for analysis, the way they are taken can affect sample quality. Careful collection methods help preserve the organs and tissues for testing. The method of euthanasia, or the procedure used to humanely end the animal's life, can also affect sample quality. This article outlines proper necropsy...

sterile tissue harvest

Aseptic Organ Collection in Rats and Mice

Aseptic organ collection in rats and mice is used to keep harvested tissues free from contamination. The process is important when tissues will be used for cell and tissue cultures. It also supports later protein and RNA analysis, as well as metabolic profiling of tissues. The transcript connects this work to the 3 R's, which were introduced in 1959 by W.M.S. Russell and R.L. Burch in The Principles of Humane Experimental Technique. The 3 R's are replacement, reduction, and refinement in the...

early intervention and pain management

Intervento precoce e gestione del dolore

Tutti i procedimenti sugli animali descritti qui devono essere condotti in conformità con le linee guida istituzionali sull'etica animale e approvati da IACUC. Tutti i procedimenti devono seguire i principi dei 3R—Rimozione, Riduzione e Raffinamento—e devono essere eseguiti da personale addestrato.  Monitoraggio degli animali per segni di dolore e sofferenza Riconoscere i primi segni di dolore è essenziale per una ricerca etica sugli animali. Gli animali vengono monitorati di routine...

humane euthanasia and confirmation of death in rodents

Eutanasia umana e conferma della morte nei roditori

Tutti i procedimenti sugli animali qui descritti devono essere condotti in conformità con le linee guida istituzionali sull'etica animale e approvati dall'IACUC. Tutti i procedimenti devono seguire i principi dei 3R - Sostituzione, Riduzione e Raffinamento - e devono essere eseguiti da personale addestrato. Gli endpoint umani nei roditori sono indicatori clinici, comportamentali o fisiologici predefiniti che segnalano che un animale sta sperimentando dolore significativo, angoscia o un declino...

habituation and positive reinforcement for rodent handling

Abitudine e rinforzo positivo per la manipolazione dei roditori

Tutti i procedimenti sugli animali qui descritti devono essere condotti in conformità con le linee guida istituzionali sull'etica degli animali e approvati dall'IACUC. Tutti i procedimenti devono seguire i principi dei 3R - Sostituzione, Riduzione e Perfezionamento - e devono essere eseguiti da personale addestrato. L'abitudine e il rinforzo positivo sono strategie di perfezionamento che aiutano a ridurre lo stress durante la manipolazione di routine e i procedimenti sperimentali nei roditori.

breeding management in rodent studies

Gestione dell'allevamento negli studi sui roditori

Tutte le procedure sugli animali descritte qui devono essere condotte in conformità con le linee guida etiche istituzionali sugli animali e approvate dall'IACUC. Tutte le procedure devono seguire i principi delle 3R - Sostituzione, Riduzione e Raffinamento - e devono essere eseguite da personale addestrato. La gestione dell'allevamento supporta le 3R minimizzando la produzione inutile di animali e assicurando che venga generato solo il numero di animali richiesto per uno studio. Strategie di...

transport and acclimatization of rodents for research

Trasporto e Acclimatazione di Roditori per la Ricerca

Tutte le procedure sugli animali descritte qui devono essere condotte in conformità con le linee guida etiche istituzionali sugli animali e approvate dall'IACUC. Tutte le procedure devono seguire i principi delle 3R - Sostituzione, Riduzione e Raffinamento - e devono essere eseguite da personale addestrato. Il trasporto dei roditori per la ricerca richiede procedure che minimizzino lo stress e mantengano il benessere degli animali durante il movimento per minimizzare l'influenza sui risultati...

environmental enrichment for rodents

Arricchimento ambientale per roditori

Tutte le procedure sugli animali descritte qui devono essere condotte in conformità con le linee guida istituzionali sull'etica animale e approvate da IACUC. Tutte le procedure devono seguire i principi delle 3R - Sostituzione, Riduzione e Raffinamento - e devono essere eseguite da personale addestrato. L'arricchimento ambientale coinvolge oggetti e pratiche che incoraggiano comportamenti naturali, migliorano il benessere psicologico e promuovono un migliore benessere nei roditori da...

rodents

Learn how mouse and rat handling can affect stress, heart rate, and blood pressure, and explore manual restraint methods and devices used in labs.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

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