Name: minimizing stress in mouse and rat handling
Uploaded: 2015-08-24T15:22:25.000Z
Duration: 15 min 57 s
Channel: JoVE

1. Niechlujny
Myszy są najczęściej krępowane za pomocą techniki scruffing, ale tą metodą można również krępować młode szczury. Dorosłe szczury są trudniejsze do powstrzymania tą techniką ze względu na bardziej umięśnioną szyję, zmniejszoną ilość luźnej skóry i niechęć do tej metody. 
<ol>
	<li>Metoda unieruchamiania jedną ręką jest najczęściej stosowana w odmianach myszy, które są bardzo spokojne, takich jak atymiczny nude, SCID i niektóre szczepy GEM. Istnieje jednak większe ryzyko ugryzienia tą metodą. Początkujący treserzy zwierząt powinni przyzwyczaić się do techniki krępowania oburęcznego przed wypróbowaniem metody jednoręcznej.
	<ol>
		<li>Umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić, takiej jak druciana krata lub mata.</li>
		<li>Przytrzymaj ogon między trzecim a czwartym palcem ręki niedominującej i zastosuj delikatną trakcję do tyłu. Powoduje to, że zwierzę trzyma się powierzchni, co powoduje, że ciało jest rozciągnięte i wydłużone. </li>
		<li>Obróć rękę tak, aby dłoń była skierowana w stronę ciała zwierzęcia. </li>
		<li>Palcem wskazującym i kciukiem przypnij gryzonia do ramion. </li>
		<li>Delikatnie przesuń kciuk i palec wskazujący do przodu i umieść je u podstawy czaszki. Chwyć luźną skórę na szyi i podnieś zwierzę. </li>
		<li>Użyj środkowego palca, aby ustabilizować zwierzę wzdłuż grzbietu, przytrzymując skórę grzbietową do podstawy kciuka. </li>
	</ol>
	</li>
	<li>Unieruchamianie oburęczne
	<ol>
		<li>Umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. </li>
		<li>Przytrzymaj ogon u podstawy (w odległości 1-2 cm od ciała) dominującą ręką i zastosuj delikatną trakcję do tyłu. Powoduje to, że zwierzę trzyma się powierzchni, co powoduje, że ciało jest rozciągnięte i wydłużone. </li>
		<li>Palcem wskazującym i kciukiem drugiej ręki przypnij gryzonia do ramion. </li>
		<li>Delikatnie przesuń kciuk i palec wskazujący do przodu i umieść je u podstawy czaszki. Chwyć luźną skórę na szyi i podnieś zwierzę. </li>
		<li>Użyj pozostałych palców, aby ustabilizować zwierzę wzdłuż grzbietu, przytrzymując skórę grzbietową do podstawy kciuka. </li>
		<li>Zabezpiecz kończyny tylne, przygniatając ogon do dłoni czwartym palcem lub pozwalając tylnym kończynom spocząć na twardej powierzchni. </li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig1.jpg"> 
Rysunek 1: Metoda krępowania jedną ręką i oburęczną dla myszy
2. Rękawiczki
Dostępnych jest wiele rękawic dla opiekunów, które można nosić w celu ochrony przed ugryzieniami szczurów. Generalnie nie nadają się do pracy z myszami ze względu na utratę zręczności. Często wady wielu rodzajów rękawic przeważają nad zaletami. 
<ol>
	<li>Rękawice robocze z płótna bawełnianego nie są odporne na gryzienie, ale zapewniają niewielką ochronę przed zębami i paznokciami. Nie zapewniają dobrej przyczepności, ponieważ łatwo ślizgają się po sierści.</li>
	<li>Dobrej jakości rękawice skórzane są odporne na gryzienie. Jednak ich sztywność powoduje zmniejszenie zręczności. Grubość skóry, choć zapewnia ochronę, zmniejsza ostrość dotyku i ruchomość dłoni. </li>
	<li>Rękawice kolczugi zapewniają psychologiczne poczucie bezpieczeństwa opiekunowi zwierząt. Są jednak ciężkie i większość zębów szczurów może przebić się między ogniwami. Ponadto rękawice te zmniejszają sprawność manualną, a przy niewłaściwym użytkowaniu są bardziej niebezpieczne zarówno dla zwierzęcia, jak i przewodnika. </li>
	<li>Rękawice ocieplane gumą, które są powszechnie używane w domach do mycia naczyń, zapewniają teksturowaną powierzchnię dłoniową i pozwalają na pewny chwyt sierści gryzoni. Rozciągliwa powierzchnia lateksowa jest wystarczająco gruba, aby wytrzymać przebicie siekaczami gryzoni i wystarczająco cienka, aby móc wyczuć i kontrolować zwierzę. Główną wadą jest to, że są wykonane z lateksu, co jest problemem dla osób z alergią na lateks. Ponadto rękawice te niszczą się pod wpływem światła i należy je regularnie wymieniać. </li>
</ol>
3. Unieruchomienie ciała
<ol>
	<li>"Chwyt tyranozaura" to dwuręczna metoda krępowania szczurów.
	<ol>
		<li>Umieść szczura na powierzchni, którą można chwycić. </li>
		<li>Trzymając jedną ręką podstawę ogona, drugą ręką podnieś i przełóż przez grzbiet z rozdzielonymi palcami wskazującym i środkowym. </li>
		<li>Połóż dłoń na ramieniu z palcem wskazującym po jednej stronie głowy, a środkowym po drugiej. Palce po obu stronach głowy ograniczają ruchy głowy na boki. </li>
		<li>Owiń ciało za przednimi kończynami trzecim palcem, czwartym palcem i kciukiem. Należy zachować ostrożność, aby uniknąć ucisku klatki piersiowej i pogorszenia oddychania. Ten uchwyt zapobiega przesuwaniu się szczura do przodu lub do tyłu poza ręką. </li>
		<li>Ustabilizuj ogon i zad, chwytając podstawę ogona z lub bez trzymania tylnych łap. </li>
		<li>To ograniczenie działa dobrze w przypadku większych szczurów i gdy potrzebny jest dostęp do głowy. </li>
	</ol>
	</li>
	<li>Metoda krzyżowania kończyn przednich jest metodą krępowania oburęcznego.
	<ol>
		<li>Umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. </li>
		<li>Przytrzymaj ogon u podstawy (w odległości 1-2 cm od ciała) dominującą ręką i zastosuj delikatną trakcję do tyłu. Powoduje to, że zwierzę chwyta się powierzchni, co powoduje, że ciało jest rozciągnięte i wydłużone. </li>
		<li>Przenieś drugą rękę od tyłu przez plecy. </li>
		<li>Chwyć szczura bezpośrednio za ramionami, palcami po jednej stronie i kciukiem po drugiej stronie klatki piersiowej, i przesuń rękę do przodu, zmuszając w ten sposób przednie nogi do przodu. </li>
		<li>Przednie nogi skrzyżują się pod brodą szczura, tworząc fizyczną barierę i uniemożliwiając szczurowi przesuwanie głowy w dół w kierunku palców. </li>
		<li>Uważaj, aby nie uciskać klatki piersiowej i nie utrudniać oddychania. </li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig2.jpg"> 
Rysunek 2: Chwyt T-rexa i metoda krzyżowania kończyn przednich do krępowania szczurów
4. Urządzenia przytrzymujące
<img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig3.jpg"> 
Rysunek 3: Urządzenie krępujące typu Broome
<img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig4.jpg"> 
Rysunek 4: Płaskodenny środek odstraszający gryzonie
<ol>
	<li>Sztywne urządzenia występują w różnych typach i są zazwyczaj wykonane z nieporowatego materiału, który można łatwo zdezynfekować.
	<ol>
		<li>Unieruchomienie typu Broome'a zostało zaprojektowane tak, aby zapewnić dostęp do ogona w przypadku wstrzyknięć dożylnych. Jest zbudowany ze szczeliny biegnącej przez całą długość urządzenia, co pozwala na wciągnięcie zwierzęcia w pierwszą stronę tylną krępującą siedzenie. Wkładany jest plastikowy nosek, aby utrzymać zwierzę na miejscu.
		<ol>
			<li>Wyjmij końcówkę z korpusu rurki przytrzymującej, poluzowując śrubę. </li>
			<li>Chwyć zwierzę u podstawy ogona i ustaw rurkę przytrzymującą tak, aby szczelina biegnąca przez całą długość rurki była skierowana do góry. Najpierw delikatnie wciągnąć zwierzę do tylnej części urządzenia przytrzymującego. </li>
			<li>Często korzystne jest umieszczenie zwierzęcia na gładkiej powierzchni, aby ułatwić jego umieszczenie w tubie. </li>
			<li>Gdy zwierzę znajdzie się całkowicie w tubie - i zostanie przyciągnięte do zamkniętego końca - wsuń plastikowy nos do rurki, aby zatkać otwór. </li>
			<li>Umieść zespół końcówki tak, aby nos zwierzęcia znajdował się w środkowym otworze. Nie umieszczaj noska tak ciasno, aby zwierzę nie mogło oddychać. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Płaskodenny środek przytrzymujący gryzonie jest półcylindrem z otworami, które umożliwiają dostęp od góry i od dołu urządzenia przytrzymującego. Sztywna plastikowa bramka jest wkładana w jedną z kilku stopniowanych szczelin, aby utrzymać zwierzę w urządzeniu.
		<ol>
			<li>Trzymaj zwierzę za podstawę ogona dominującą ręką na gładkiej powierzchni lub na górze klatki. </li>
			<li>Chwyć rurkę przytrzymującą z płaskim dnem w drugiej ręce i ustaw ją pod takim kątem, aby otwarty koniec znajdował się przy głowie zwierzęcia pod kątem 45° do górnej powierzchni stołu/klatki. </li>
			<li>Niektóre zwierzęta natychmiast wejdą do rury, podczas gdy inne są niechętne i wymagają od przewodnika skierowania ich do rury. </li>
			<li>Umieść rurkę nad głową zwierzęcia. Natychmiast postukaj w zad zwierzęcia i utrzymuj nacisk, aby zwierzę się nie cofnęło. </li>
			<li>Gdy zwierzę znajdzie się w urządzeniu przytrzymującym, wsuń plastikową bramkę w odpowiednią szczelinę, aby utrzymać zwierzę w urządzeniu przytrzymującym. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Utwierdzenia rurowe to cylindry z pleksiglasu z jednym zamkniętym końcem zawierającym otwory lub szczeliny zapewniające cyrkulację powietrza. Niektóre są zmodyfikowane z szeroką szczeliną w połowie długości cylindra, aby dostosować się do ekspozycji kończyny tylnej do wstrzyknięć domięśniowych, pobierania krwi odpiszczelowej i udowej lub dostępu do powierzchni grzbietowej w przypadku wstrzyknięć podskórnych.
		<ol>
			<li>Chwyć zwierzę za podstawę ogona dominującą ręką na gładkiej powierzchni lub na górze klatki. </li>
			<li>Przytrzymaj rurkę przytrzymującą w drugiej ręce i ustaw ją pod takim kątem, aby otwarty koniec znajdował się przy głowie zwierzęcia pod kątem 45° do górnej powierzchni stołu/klatki. </li>
			<li>Niektóre zwierzęta natychmiast wejdą do tuby. Inne zwierzęta są niechętne i wymagają od przewodnika, aby skierował je do rury. </li>
			<li>Umieść rurkę nad głową zwierzęcia. Natychmiast postukaj w zad zwierzęcia i utrzymuj nacisk, aby zwierzę się nie cofnęło. </li>
			<li>Skark i ręcznie prowadź trudne do opanowania zwierzęta do tuby, pozwalając trzymanej skórze przesunąć się przez szczelinę w rurce. </li>
			<li>Gdy zwierzę znajdzie się w urządzeniu przytrzymującym, konieczne jest zablokowanie otworu, aby zapobiec cofaniu się zwierzęcia. </li>
			<li>W zależności od procedury w poprzek otworu umieszcza się kilka palców. </li>
			<li>Włóż dużą lateksową rękawicę do otworu. Rękawice są zwykle teksturowane i trzymają się powierzchni z pleksi. </li>
			<li>Niektóre rurki przytrzymujące będą miały zamknięcia specyficzne dla tego stylu lub rozmiaru. </li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig5.jpg"> 
Rysunek 5: Urządzenie przytrzymujące rurkę
<ol start="2">
	<li>Elastyczne ograniczniki to jednorazowe elastyczne stożki z tworzywa sztucznego. Są dostępne w wersji z przezroczystego lub nieprzezroczystego tworzywa sztucznego. Tworzywo sztuczne jest na tyle cienkie, że umożliwia penetrację przez igłę w celu wykonania wstrzyknięć bez wyjmowania zwierzęcia z urządzenia przytrzymującego. Występują w różnych rozmiarach, aby pasowały do myszy i szczurów, zarówno dorosłych, jak i odsadzonych.
	<ol>
		<li>Przeciąć plastik nożyczkami, aby umożliwić dostęp do kończyn, ogona i innych miejsc wstrzyknięcia. </li>
		<li>Wybierz rozmiar stożka odpowiedni dla zwierzęcia. Stożek powinien być wystarczająco długi, aby wystawał 2-3 cale poza zad zwierzęcia. </li>
		<li>Włóż zwierzę do stożka
		<ol>
			<li>Otwórz stożek i chwyć go wokół górnej połowy. </li>
			<li>Chwyć zwierzę za podstawę ogona dominującą ręką, umieszczając je na gładkiej powierzchni lub szczycie klatki. </li>
			<li>Przytrzymaj stożek przytrzymujący w drugiej ręce i ustaw go pod takim kątem, aby otwarty koniec znajdował się przy głowie zwierzęcia pod kątem 45° do górnej powierzchni stołu/klatki. </li>
			<li>Niektóre zwierzęta natychmiast wejdą do stożka. Inne zwierzęta są niechętne i wymagają od przewodnika, aby skierował je do stożka krępującego. </li>
			<li>Umieść stożek nad głową zwierzęcia. Natychmiast postukaj w zad zwierzęcia i utrzymuj nacisk, aby zwierzę się nie cofnęło. Ze względu na większą średnicę otworu stożka zwierzęta znacznie chętniej odwracają się, aby wyjść ze stożka. </li>
			<li>Gdy tylko zwierzę wejdzie do stożka, chwyć otwarty koniec i uszczelnij go, aby zmusić zwierzę do końca. </li>
			<li>Zabezpiecz otwór, składając plastik na jedną stronę ogona i przyłożając klips do segregatora do złożonego plastiku, uważając, aby nie zacisnąć ogona lub skóry. Alternatywnie, zbierz folię równomiernie wokół ogona i umieść opaskę zaciskową jak najbliżej ciała, aby zabezpieczyć otwór. </li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Figure 6" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig6.jpg"> 
Rysunek 6: Elastyczny ogranicznik
5. Metody unieruchamiania dla konkretnych procedur technicznych
<ol>
	<li>W przypadku wstrzyknięć dootrzewnowych wymagana jest ekspozycja brzuszna.
	<ol>
		<li>Zgrzyt
		<ol>
			<li>Pochyl zwierzę i obróć rękę tak, aby brzuch był odsłonięty. </li>
			<li>Przechyl zwierzę tak, aby głowa była skierowana w dół pod kątem 30°. </li>
			<li>Zabezpiecz kończyny tylne, przysuwając ogon do dłoni czwartym palcem. </li>
			<li>Alternatywnie, kończyny tylne można unieruchomić, przypinając nadmiar skóry wzdłuż grzbietu między palcami a podstawą kciuka. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>T. metody chwytania rexa i krzyżowania kończyn przednich
		<ol>
			<li>Chwyć zwierzę (tylko szczury) za pomocą jednej z powyższych technik. </li>
			<li>Wolną ręką chwyć obie tylne nogi powyżej stawu skokowego i wyciągnij je doogonowo. </li>
			<li>Podeprzyj ciężar zwierzęcia dłonią na grzbiecie. </li>
			<li>Przechyl zwierzę tak, aby głowa była skierowana w dół pod kątem 30°. </li>
			<li>Wstrzyknięcie wykonuje druga osoba. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Sztywny ogranicznik
		<ol>
			<li>Większość sztywnych urządzeń przytrzymujących nie jest w stanie zapobiec instynktownemu toczeniu się zwierzęcia w celu utrzymania pozycji pionowej. </li>
			<li>Jeśli stosuje się sztywny kręp, obróć zwierzę tak, aby jego głowa była skierowana w dół i prostopadła do blatu. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Elastyczny ogranicznik
		<ol>
			<li>Po prawidłowym umieszczeniu w elastycznym plastikowym stożku zwierzę nie jest w stanie się obrócić ani obrócić. </li>
			<li>Należy zwrócić uwagę na to, aby zwierzę ułożyło się w taki sposób, aby tylne kończyny były wystarczająco oddzielone, aby umożliwić dostęp do odwłoka. </li>
			<li>Ponieważ zwierzę jest uciskane, konieczne jest, aby wstrzyknięcie było wystarczająco nisko na powierzchni brzusznej, aby uniknąć nakłucia śledziony, wątroby, nerki lub żołądka. </li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Do wstrzyknięć w przestrzeń podskórną wymagana jest ekspozycja grzbietowa.
	<ol>
		<li>Zgrzyt
		<ol>
			<li>Pochyl zwierzę i pozwól jego tylnym łapom spocząć na solidnej, płaskiej powierzchni. </li>
			<li>Podnieś kark, aby stworzyć namiot ze skóry na szyi i ramionach. </li>
			<li>Połóż ciężar dłoni na stole podczas wstrzykiwania myszy. Obciążanie myszy może spowodować uduszenie. </li>
			<li>Trzymaj szczury w miejscu, obciążając je tylnymi kończynami, ale nigdy klatką piersiową. </li>
			<li>Wstrzyknąć substancję w przestrzeń poniżej palców na ciele zwierzęcia. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Sztywne ograniczniki
		<ol>
			<li>Umieścić zwierzę w urządzeniu przytrzymującym z otworem wystarczająco dużym, aby podciągnąć skórę do góry. </li>
			<li>Może być konieczne użycie kleszczy do uchwycenia skóry. </li>
			<li>Większość zwierząt pozostaje w prawidłowej pozycji, chyba że krępowanie zostanie obrócone. </li>
			<li>Nie należy wstrzykiwać objętości, która zapobiega cofaniu się skóry od otworu po zakończeniu wstrzyknięcia. </li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Do wstrzyknięcia domięśniowego konieczne jest unieruchomienie kończyny tylnej; pobranie krwi z żyły odpiszczelowej, żyły udowej lub tętnicy udowej; i wstrzyknięcie w podnóżek.
	<ol>
		<li>Chrupanie myszy i małych szczurów (poniżej 200 g)
		<ol>
			<li>Pochyl zwierzę i obróć rękę tak, aby brzuch był odsłonięty. </li>
			<li>Uzyskaj dostęp do tylnej stopy, umieszczając stopę między palcami. </li>
			<li>Tę metodę najlepiej stosować tylko do wstrzykiwań w poduszkę stopy. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>T. chwyt rexa lub skrzyżowanie kończyn przednich
		<ol>
			<li>Ta metoda wymaga dwóch osób: jednej do unieruchomienia ciała, a drugiej do unieruchomienia kończyny i wykonania iniekcji. </li>
			<li>Wyprostuj tylną nogę szczura, chwytając stopę, aby uzyskać dostęp do żyły odpiszczelowej, żyły udowej lub tętnicy lub mięśnia do wstrzyknięcia. </li>
			<li>Trzymać nogę tuż nad stawem skokowym w celu wstrzyknięcia opuszki stopy. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Sztywne ograniczniki
		<ol>
			<li>Umieść zwierzę w rurze przytrzymującej głową do przodu. </li>
			<li>Odsłoń ogon i zad, delikatnie pociągając je do tyłu od rurki. </li>
			<li>Unieruchomij nogę, chwytając skórę boku i blokując kolano prosto. Zapewnia to dostęp do mięśnia czworogłowego uda w celu wstrzyknięcia u myszy lub szczura i uniemożliwia zwierzęciu opuszczenie urządzenia przytrzymującego. </li>
			<li>W urządzeniach z dużymi otworami należy umieścić nogę na zewnątrz rurki, aby uzyskać dostęp do naczyń krwionośnych w celu pobrania próbki lub wstrzyknięcia opuszki stopy. </li>
			<li>Te rurki przytrzymujące z płaskimi końcówkami pozwalają rurki oprzeć się na stole i stabilizować urządzenie podczas zabiegu. </li>
			<li>Ponieważ zwierzę jest zabezpieczone w ten sposób, możliwe jest wykonanie zastrzyków lub pobranie krwi od szczurów przez jednego technika. </li>
		</ol>
		</li>
		<li>Elastyczne utwierdzenie
		<ol>
			<li>Elastyczne plastikowe ograniczniki można modyfikować poprzez wycinanie otworów w celu dostosowania się do ekspozycji kończyn. </li>
			<li>Wykonane otwory można dostosować do każdego zwierzęcia lub do konkretnych zabiegów. </li>
			<li>Ponieważ zwierzę jest zabezpieczone w ten sposób, możliwe jest, że jeden technik wykona zastrzyki lub pobierze próbki krwi od szczurów. </li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Rutynowe obchodzenie się ze zmianą klatek i procedurami technicznymi jest przyczyną stresu u zwierząt doświadczalnych. Chociaż ten rodzaj stresu nie stanowi zagrożenia dla ogólnego dobrostanu zwierzęcia, może powodować wahania parametrów fizjologicznych, które mogą mieć niekorzystny wpływ na dane badawcze. Korzystanie z wykwalifikowanego personelu, odpowiednich technik i sprzętu może złagodzić część stresu.

techniki obchodzenia się z gryzoniami i ich krępowania

Rodent Handling and Restraint Techniques

Źródło: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Uniwersytet Notre Dame, IN 
Wykazano, że nawet minimalne obchodzenie się z myszami i szczurami jest dla nich stresujące. Obchodzenie się ze zmianą klatki i innymi nieinwazyjnymi procedurami powoduje wzrost częstości akcji serca, ciśnienia krwi i innych parametrów fizjologicznych, takich jak poziom kortykosteronu w surowicy. Wahania mogą trwać do kilku godzin. Metody krępowania wymagane przy wstrzykiwaniu i pobieraniu krwi powodują również zmiany fizjologiczne, które mogą potencjalnie wpływać na dane naukowe. Szkolenie w zakresie prawidłowego obchodzenia się z myszami i szczurami jest wymagane, aby zminimalizować skutki dla zwierząt. 1 Myszy i szczury mogą być krępowane ręcznie za pomocą urządzeń krępujących lub środków chemicznych. W niniejszym manuskrypcie omówiono metody ręczne i stosowanie urządzeń krępujących. Wszystkie metody krępowania obejmują proces podnoszenia zwierząt z ich domowej klatki.

Techniki obchodzenia się z gryzoniami i ich krępowania

Source: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN
It has been demonstrated that even minimal handling ...

Gryzonie są szeroko stosowanymi organizmami modelowymi do badania różnych zagadnień naukowych i wykazano, że nawet minimalne obchodzenie się z nimi jest dla nich stresujące. Obsługa prostych zadań, takich jak zmiana klatki, może spowodować wzrost częstości akcji serca, ciśnienia krwi i poziomu kortykosteronu w surowicy, a wahania te mogą utrzymywać się przez kilka godzin. Metody krępowania wymagane w powszechnych procedurach wstrzykiwania i pobierania krwi mogą również powodować zmiany fizjologiczne, które mogą potencjalnie wpływać na dane naukowe. Dlatego wymagane jest szkolenie w zakresie prawidłowego obchodzenia się z myszami i szczurami, aby zminimalizować ten wpływ na zwierzęta. W tym filmie najpierw omówimy podstawowe techniki obchodzenia się z gryzoniami, a następnie omówimy procedury krępowania gryzoni, w tym techniki manualne i metody obejmujące użycie urządzeń krępujących. Zacznijmy od omówienia podstaw obchodzenia się z gryzoniami. Jedną z najczęstszych metod poruszania się dorosłej myszy lub szczura jest podnoszenie zwierzęcia za ogon. Robiąc to, konieczne jest, aby ogon został chwycony u podstawy w pobliżu zadu. Jeśli zwierzę zostanie podniesione za koniec ogona, skóra może zostać oderwana ze względu na ciężar ciała i może prowadzić do urazu skutkującego amputacją ogona. Co ważne, przemieszczanie zwierzęcia z miejsca na miejsce powinno odbywać się szybko i stabilnie. Zawieszenie zwierzęcia w powietrzu przez dowolny czas nie tylko spowoduje niepokój, ale także spowoduje, że zwierzę będzie się skręcać lub szarpać, co może spowodować uszkodzenie ogona. Opiekun nie powinien również wkładać ręki pod zwierzę, ponieważ może próbować chwycić je dla bezpieczeństwa, co skutkuje ugryzieniem. Inną metodą obchodzenia się z dorosłymi gryzoniami jest użycie kleszczy. Powszechnie stosowanymi rodzajami kleszczy są kleszcze do długich opatrunków lub kleszcze do języka z gumowymi, plastikowymi lub silikonowymi rurkami umieszczonymi na końcach, aby zapewnić poduszkę. Kleszcze mogą chwycić mysz za kark lub u nasady ogona. Stosowanie kleszczy minimalizuje zanieczyszczenie krzyżowe między zwierzętami i jest szybsze i tańsze niż zmiana rękawiczek między każdą klatką dla zwierząt. Początkujący będą musieli zostać przeszkoleni, jak mocno chwytać myszy kleszczami, zwłaszcza w karku, ponieważ może to przeszkadzać w oddychaniu. Podczas używania kleszczy na ogonie należy uważać, aby umieścić kleszcze w pobliżu podstawy ogona, aby uniknąć obrażeń. Pamiętaj, aby przechowywać je twarzą do dołu w 70% etanolu między kontaktem z różnymi grupami zwierząt. Do przenoszenia zwierząt można również używać rurek wykonanych z nieporowatego materiału. Rurki te można dodać do klatki jako miejsce, w którym zwierzę może się schronić lub szukać bezpiecznego schronienia. Większość myszy lub szczurów chętnie wchodziłaby do rurek, gdy ich klatka jest otwarta, lub można je łatwo wprowadzić do rurki. Gdy zwierzę znajdzie się w środku, zakryj otwarte końce dłonią i palcami. Następnie, aby zachęcić zwierzę do wyjścia, delikatnie przechyl rurkę do góry w nowej klatce. Zwierzęta łatwo przyzwyczajają się do tej metody zmiany klatki, dzięki czemu jest to szybki i łatwy proces przenoszenia zwierząt z jednego miejsca na drugie. Niektóre instytucje wolą, aby zwierzęta – zwłaszcza szczury – były podnoszone za ciało, nawet podczas rutynowego obchodzenia się z nimi. Dorosłe szczury są delikatnie chwytane wokół klatki piersiowej, podnoszone i szybko umieszczane w innej klatce. Ważne jest, aby zwierzęta były przyzwyczajone do tej metody obchodzenia się z nimi od najmłodszych lat. Podczas pracy z młodymi szczurami umieszczenie dłoni na grzbiecie szczura spowoduje, że wskoczy on w dłoń przewodnika, umożliwiając jego uchwycenie. Może być potrzebna druga ręka, aby szczur nie wił się z uścisku. Podczas zmiany klatek z nowonarodzonymi myszami lub szczurami często konieczne jest ich usunięcie, zachowując nienaruszone gniazdo. Użyj dwóch rąk, aby zgarnąć gniazdo i młode z dna klatki do nowej klatki. Trzymaj palce blisko siebie, aby uniknąć upuszczenia szczeniąt. Po przeniesieniu gniazda do nowej klatki ważne jest, aby sprawdzić, czy wszystkie szczenięta są obecne. Alternatywnie plastikowa szufelka może być używana do przenoszenia nowonarodzonych gryzoni w ich gniazdach. Robiąc to, ważne jest, aby położyć rękę na górnej części miarki, aby zapobiec wierceniu się lub wyskakiwaniu noworodków. W porównaniu z indywidualnym obchodzeniem się ze szczeniętami, zgarnianie całego gniazda jest mniej stresujące zarówno dla młodych, jak i matek. Teraz, gdy omówiliśmy podstawy obchodzenia się z gryzoniami, zagłębmy się w szczegółowe procedury powstrzymywania gryzoni. Najpierw przedstawimy, jak ręcznie krępować te zwierzęta. Myszy i młode szczury można krępować techniką jednoręczną lub dwuręczną. Jednak w przypadku dorosłych szczurów preferowanymi technikami są krępowanie całego ciała za pomocą chwytu T-rex lub metody krzyżowania kończyn przednich. Zacznijmy od poznania metody krępowania oburęcznego. Najpierw umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić, takiej jak pokrywa z drucianego pręta. Dominującą ręką przytrzymaj ogon u podstawy i delikatnie pociągnij mysz do tyłu. Powoduje to, że zwierzę trzyma się powierzchni i pozwala na rozciągnięcie ciała. Następnie delikatnie przygwoźdź gryzonia niedominującym palcem wskazującym i kciukiem umieszczonymi u podstawy czaszki i chwyć luźną skórę na szyi, aby podnieść zwierzę. Pozostałymi palcami ustabilizuj zwierzę grzbietem opartym o podstawę kciuka. Możesz zabezpieczyć kończyny tylne, przypinając ogon palcem serdecznym do dłoni. W przypadku metody krępowania jedną ręką ponownie umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. Przytrzymaj ogon między trzecim a czwartym palcem ręki niedominującej i zastosuj delikatną trakcję do tyłu. Palcem wskazującym i kciukiem tej samej ręki przypnij gryzonia do ramion. Delikatnie przesuń kciuk i palec wskazujący do przodu, chwyć luźną skórę na szyi i unieś zwierzę. Użyj środkowego palca, aby ustabilizować zwierzę wzdłuż grzbietu, przytrzymując skórę grzbietową do podstawy kciuka. Trzecią metodą krępowania, którą omówimy, jest chwyt T-rex - dwuręczna metoda krępowania szczurów. Najpierw umieść szczura na twardej powierzchni, takiej jak mata, którą może chwycić. Trzymając jedną ręką podstawę ogona, drugą rękę połóż na ramieniu szczura z palcem wskazującym i środkowym rozciętym po obu stronach. Ma to na celu ograniczenie ruchów głowy na boki. Gdy głowa się ustabilizuje, obejmij ciało za przednimi kończynami palcami środkowym i serdecznym oraz kciukiem. Unikaj uciskania klatki piersiowej, aby nie utrudniało to oddychania zwierzęcia. Na koniec ustabilizuj ogon i zad, chwytając podstawę ogona BEZ trzymania się tylnych łap, jeśli planujesz podać zgłębnik ustny; lub z trzymaniem się tylnych łap, jeśli zamiarem jest wstrzyknięcie zwierzęciu. Wreszcie, aby powstrzymać szczura metodą skrzyżowania kończyn przednich, umieść zwierzę na powierzchni, którą może chwycić. Następnie dominującą ręką przytrzymaj ogon u podstawy i zastosuj delikatną trakcję do tyłu, aby ciało zwierzęcia się wydłużyło. Następnie drugą ręką chwyć zwierzę bezpośrednio za ramiona, palcami po jednej stronie i kciukiem po drugiej stronie klatki piersiowej i przesuń rękę do przodu. Ten ruch zmusi przednie nogi zwierzęcia do skrzyżowania się pod brodą, tworząc fizyczną barierę, która uniemożliwi zwierzęciu poruszanie głową w dół. Uważaj, aby nie uciskać klatki piersiowej, co doprowadzi do trudności w oddychaniu. Teraz, gdy dokonaliśmy przeglądu technik ręcznego krępowania, dowiedzmy się, jak powstrzymywać gryzonie za pomocą specjalistycznych urządzeń. Pierwszym urządzeniem, o którym się dowiemy, jest urządzenie przytrzymujące w stylu Broome'a. Posiada szczelinę biegnącą przez całą długość urządzenia oraz plastikowy nosek, który jest wkładany, aby utrzymać zwierzę na miejscu. Zacznij od poluzowania śruby, aby wyjąć końcówkę. Następnie ustaw rurkę przytrzymującą tak, aby szczelina była skierowana do góry. Chwyć zwierzę za podstawę ogona i delikatnie wciągnij zwierzę do urządzenia przytrzymującego, najpierw tylnymi kończynami. Gdy zwierzę znajdzie się w środku, wsuń plastikowy nos z powrotem do tuby, aby zapobiec jej otwarciu. Umieść końcówkę w taki sposób, aby nos zwierzęcia był wyśrodkowany w otworze. Nie ustawiaj go tak ciasno, aby zwierzę nie mogło oddychać. Innym przykładem urządzenia przytrzymującego jest płaskodenny ogranicznik gryzoni, który jest półcylindrem z otworami umożliwiającymi dostęp od góry i od dołu urządzenia. Posiada również szczeliny, w które można włożyć sztywną plastikową bramkę, aby utrzymać zwierzę na miejscu. Aby użyć tego ogranicznika, chwyć gryzonia za podstawę ogona dominującą ręką i połóż go na gładkiej powierzchni. Drugą ręką przytrzymaj rurkę przytrzymującą z płaskim dnem tak, aby otwarty koniec znajdował się przy głowie zwierzęcia pod kątem 45? kąt do powierzchni. Umieść rurkę nad głową zwierzęcia i natychmiast postukaj w zad, aby zapobiec cofaniu się zwierzęcia. Gdy znajdzie się w urządzeniu, wsuń plastikową bramkę w odpowiednie miejsce, aby zabezpieczyć pozycję zwierzęcia. Trzecim typem urządzenia, które omówimy, są ograniczniki rurowe. Są to cylindry z pleksiglasu z jednym zamkniętym końcem zawierającym otwory do cyrkulacji powietrza i szczeliną na otwartym końcu. Aby użyć krępowania rurki, chwyć zwierzę i połóż je na gładkiej powierzchni. Następnie umieść otwarty koniec rurki na głowie zwierzęcia pod kątem 45? kąt. Gdy tylko gryzoń wejdzie do rury, postukaj w zad, aby zapobiec jego cofnięciu. Na koniec zatkaj otwór, wkładając dużą lateksową rękawicę, która chwyci powierzchnię pleksi i uniemożliwi zwierzęciu wyjście z tuby. Na koniec omówimy, jak używać elastycznych ograniczników, które są jednorazowymi elastycznymi plastikowymi stożkami dostępnymi w różnych rozmiarach. Wybór stożka zależy od wielkości zwierzęcia. Idealnie byłoby, gdyby był wystarczająco długi, aby wystawał 2-3 cale poza zad zwierzęcia. Podobnie jak w przypadku poprzednich metod, umieść zwierzę na gładkiej powierzchni i umieść stożek krępujący na 45? kąt nad głową zwierzęcia. Gdy tylko zwierzę wejdzie do stożka, chwyć otwarty koniec i uszczelnij go, aby zmusić zwierzę do końca. Zabezpiecz otwór, składając plastik na jedną stronę ogona i przyklejając klips do segregatora do złożonego plastiku, uważając, aby nie zacisnąć ogona lub skóry. Po omówieniu podstaw obchodzenia się z nimi i różnych technik krępowania, przyjrzyjmy się, dlaczego zrozumienie tych procedur jest niezbędne dla każdego naukowca in vivo. Wiedza i uzasadnienie stojące za tymi podstawowymi procedurami obchodzenia się z nimi jest podstawą utrzymania zdrowia zwierzęcia. Od momentu narodzin zwierzęta są poddawane prostym, codziennym czynnościom, takim jak ważenie, inspekcja i zmiana klatku, które powinny być wykonywane niezależnie od celu naukowego. Procedury krępowania są również przydatne do celów znakowania. Na przykład, aby wykonać zabiegi, takie jak uderzanie w uszy, zwierzę musi być skrępowane przez chrupanie. Z drugiej strony, podczas wszczepiania mikroczipa szczurom należy użyć urządzenia przytrzymującego, aby można je było oznakować na stałe. Wreszcie, ręczne metody krępowania są stosowane w typowych procedurach iniekcji, takich jak podawanie podskórne i dootrzewnowe. Wiedza na temat urządzeń krępujących jest przydatna podczas wykonywania podawania dożylnego, które wymaga minimalnego ruchu zwierzęcia podczas wstrzykiwania. Właśnie obejrzałeś wprowadzenie JoVE do podstawowych technik obchodzenia się i krępowania gryzoni. Zabiegi te wymagają pewnego i stanowczego, ale delikatnego dotyku. Nieśmiałe podejście może skutkować ugryzieniami przewodnika, podczas gdy agresywne obchodzenie się może spowodować obrażenia gryzonia. Dlatego ważne jest, aby dokładnie nauczyć się tych technik i znaleźć równowagę między asertywnym, ale delikatnym chwytem. Jak zawsze, dziękujemy za oglądanie!

Education

JoVE Science Education

Basic Biology

Podstawy biologii

Lab Animal Research

Badania na zwierzętach laboratoryjnych

Rodents

Gryzonie

minimizing stress in mouse and rat handling

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours.

Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible.

Mice and rats can be restrained by hand, with restraint devices, or with chemical agents. This manuscript focuses on manual methods and restraint devices. Each restraint method begins with lifting the animal from its home cage.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

minimizing-stress-in-mouse-and-rat-handling

rodent handling and restraint techniques

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours. Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible. <br...

basic care procedures

Caring for Research Mice and Rats

Research mice and rats need careful housing, feeding, and handling. These animals make up over 90% of the animals used for biomedical research, so their care can strongly affect experiment results. Both immunocompetent animals, which have a normal immune response, and immunocompromised animals need proper support during studies. Some research animals have weakened immune systems and need extra steps to stay healthy. Common examples include naturally occurring immunocompromised mice and mice...

fundamentals of breeding and weaning

Mouse and Rat Breeding Methods

Mouse and rat breeding methods are used in biomedical research to supply animals for laboratory studies. Many research facilities buy mice from commercial breeders, but some also breed mice and rats in-house. In-house breeding can reduce costs and give researchers more options for their studies. Breeding animals in the facility also lets researchers manage genetics and timing. They can plan pregnancies to match research needs and work with embryos and newborns when needed. Mice and rats can be...

rodent identification i

Mice and Rats: Ear Tags and Punch Codes

Proper identification of laboratory mice and rats is important in biomedical research. The right animal must be used for each procedure and for data collection. Clear identification helps keep research records accurate and reliable. This page focuses on permanent identification methods for mice and rats. These methods include ear tags, ear punch codes, microchip implantation, tail tattoos for adult mice, and toe tattoos for neonates. Temporary methods such as dyes and marking pens can also be...

rodent identification ii

Rodent ID Methods for Accurate Records

Accurate rodent identification supports reliable animal records and data collection. Research animal records may include simple cage cards or a detailed database with full information on each animal. Individual identification is the key part of keeping those records correct. Mice and rats can be identified by several methods. These include tattooing, microchip placement, and temporary identification methods. Each method serves a different need in research animal management. The procedure also...

compound administration i

Rodent Injection Routes and Restraint

Rodent injection routes and restraint methods are key parts of compound administration in mice and rats. When a substance must be injected into an animal, the delivery route and the amount of compound must be chosen with care. The right choice helps match the dose to the protocol. Several factors guide the route of administration. These include the pH of the solution, the volume needed for the desired dose, and the viscosity of the solution. Viscosity means how thick or resistant to flow a...

compound administration ii

Choosing the Right Route for Compound Delivery

Compound delivery is a key part of many animal studies. The route used to give the compound can change how it is absorbed. Careful planning helps make sure the compound is delivered correctly. The substance itself also matters when a route is chosen. Its pH, viscosity, and concentration can all affect which method is best. These properties help guide the choice of administration route in a study.

compound administration iii

Specialized Injection Routes in Mice and Rats

Specialized injection routes in mice and rats are sometimes used when standard compound administration methods are not enough. Some study protocols call for less common routes such as intradermal, intranasal, and intracranial injections. These methods are used in laboratory animals and require careful technique. Intradermal injections place a compound into the skin. Intranasal injections deliver a compound through the nose. Intracranial injections are given into the brain. Because these...

compound administration iv

Specialized Injection Routes in Rodents

Specialized injection routes in laboratory mice and rats include intracardiac, footpad, and retro-orbital administration. These methods are used when a protocol calls for a route that is less common than standard compound delivery methods. Each route requires specialized training to perform correctly. Intracardiac injections deliver into the heart, footpad injections target the paw area, and retro-orbital injections are given around the eye region. Because these procedures are more technical,...

blood withdrawal i

Rodent Blood Collection Methods

Blood collection in mice and rats is a common part of research studies. The method used depends on how much blood is needed, how often samples must be taken, the animal's health, and the technician's skill level. This topic includes three blood withdrawal methods: retro-orbital sinus bleeds, initial tail snip bleeds, and intracardiac bleeds. Each method requires general anesthesia, which means the animal is made unconscious before the procedure begins.

blood withdrawal ii

Rodent Blood Sampling Methods

Blood collection from mice and rats can be done with several methods. The choice depends on the restraint needed, how invasive the procedure is, and whether a general anesthetic is required. These factors help determine which method is best for a given analysis. One older method uses the retro-orbital sinus cavity, which is located behind the eye. This approach has been debated because it may cause tissue damage or even blindness. For that reason, facial vein and submandibular vein bleeding...

anesthesia induction and maintenance

Laboratory Anesthesia and Pain Control

Laboratory anesthesia and pain control are important parts of veterinary care for research animals. The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals says that pain assessment and pain relief must be part of that care. Anesthesia means the loss of feeling or sensation.

considerations for rodent surgery 

Aseptic Steps in Rodent Survival Surgery

Aseptic technique is essential for rodent survival surgery. It is used to keep the surgical site as clean as possible and to reduce contamination during the procedure. This approach includes patient preparation, surgeon preparation, and sterilization of instruments and other supplies. It also depends on a clean, controlled environment. Careful planning before surgery helps set up these steps for success. During the operation, animals need close monitoring. After the surgery, postoperative...

diagnostic necropsy and tissue harvest

Rat Necropsy for Tissue Collection

Rat necropsy is a key step for collecting organs and tissues at the end of many animal studies. These final samples are used for data collection time points and later testing. Because the samples are used for analysis, the way they are taken can affect sample quality. Careful collection methods help preserve the organs and tissues for testing. The method of euthanasia, or the procedure used to humanely end the animal's life, can also affect sample quality. This article outlines proper necropsy...

sterile tissue harvest

Aseptic Organ Collection in Rats and Mice

Aseptic organ collection in rats and mice is used to keep harvested tissues free from contamination. The process is important when tissues will be used for cell and tissue cultures. It also supports later protein and RNA analysis, as well as metabolic profiling of tissues. The transcript connects this work to the 3 R's, which were introduced in 1959 by W.M.S. Russell and R.L. Burch in The Principles of Humane Experimental Technique. The 3 R's are replacement, reduction, and refinement in the...

early intervention and pain management

Wcześnie włączenie interwencji i zarządzanie bólem

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi etyki dotyczącymi zwierząt i muszą być zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R – Zastępowania, Redukcji i Udoskonalania – i muszą być przeprowadzane przez wykwalifikowany personel.  Monitorowanie zwierząt pod kątem oznak bólu i udręki Rozpoznawanie wczesnych oznak bólu jest niezbędne w etycznych badaniach na zwierzętach. Zwierzęta są rutynowo...

humane euthanasia and confirmation of death in rodents

Ludzka eutanazja i potwierdzenie śmierci u gryzoni

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi dotyczącymi etyki eksperymentów na zwierzętach i muszą być zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R—Zastępstwa, Redukcji i Ułatwienia—oraz muszą być wykonywane przez wyszkolonego personel. Humanitarne punkty końcowe u gryzoni to wcześniej określone kliniczne, behawioralne lub fizjologiczne wskaźniki, które sygnalizują, że zwierzę doświadcza...

habituation and positive reinforcement for rodent handling

Nawyk i pozytywne wzmocnienie w obsłudze gryzoni

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi dotyczącymi etyki w badaniach na zwierzętach i zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R – Zamienności, Redukcji i Ułatwienia – i muszą być wykonywane przez przeszkolone personel. Przyzwyczajanie i pozytywne wzmacnianie to strategie ułatwienia, które pomagają zmniejszyć stres podczas rutynowych procedur obsługi i eksperymentalnych z gryzoniami. Te...

breeding management in rodent studies

Zarządzanie hodowla w badaniach na gryzoniach

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi etycznymi dotyczącymi zwierząt i muszą zostać zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R—Zastępowania, Redukcji i Rafinacji—i muszą być przeprowadzane przez przeszkolony personel. Zarządzanie hodowlą wspiera 3R poprzez minimalizowanie niepotrzebnej produkcji zwierząt i zapewnienie, że generowana jest tylko liczba zwierząt wymagana do badania.

transport and acclimatization of rodents for research

Transport i aklimatyzacja gryzoni do badań

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi etycznymi dotyczącymi zwierząt i zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R—Zastępowanie, Redukcja i Udoskonalenie—i muszą być wykonywane przez przeszkolone osoby. Transport gryzoni do badań wymaga procedur, które minimalizują stres i utrzymują dobrostan zwierząt podczas przemieszczania, aby zminimalizować wpływ na wyniki eksperymentalne. Klatki...

environmental enrichment for rodents

Wzbogacanie środowiska dla gryzoni

Wszystkie procedury dotyczące zwierząt opisane tutaj muszą być przeprowadzane zgodnie z instytucjonalnymi wytycznymi etyki zwierzęcej i zatwierdzone przez IACUC. Wszystkie procedury muszą przestrzegać zasad 3R – Zamienności, Redukcji i Ulepszenia – i muszą być wykonywane przez przeszkolony personel. Enrychment środowiskowy obejmuje obiekty i praktyki, które zachęcają do naturalnego zachowania, poprawiają samopoczucie psychologiczne i promują lepsze dobre samopoczucie u gryzoni laboratoryjnych.

rodents

Learn how mouse and rat handling can affect stress, heart rate, and blood pressure, and explore manual restraint methods and devices used in labs.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

Description

Transcript

Tags