Name: minimizing stress in mouse and rat handling
Uploaded: 2015-08-24T15:22:25.000Z
Duration: 15 min 57 s
Channel: JoVE

1. Scruffing
Os ratos são mais frequentemente contidos usando a técnica de escrúpulos, mas ratos jovens também podem ser contidos com este método. Ratos adultos são mais difíceis de conter com essa técnica devido a um pescoço mais muscular, uma quantidade reduzida de pele solta e uma aversão a este método.
<ol><li>O método de contenção com uma mão é utilizado mais frequentemente em cepas de camundongos que são muito calmas, como o nu atímico, SCID e algumas cepas GEM. No entanto, há um risco maior de ser mordido com este método. Os manipuladores de animais novatos devem ficar confortáveis com a técnica de contenção de duas mãos antes de tentar o método de uma mão.<ol>
<li>Coloque o animal em uma superfície que eles possam segurar, como uma barra de arame superior ou um tapete.</li>
		<li>Segure a cauda entre o terceiro e o quarto dedos da mão não-ominante, e aplique tração suave para trás. Isso faz com que o animal se segure na superfície, e resulta em corpo sendo esticado e alongado.</li>
		<li>Vire a mão para que a palma esteja voltada para o corpo do animal.</li>
		<li>Com o dedo indicador e o polegar, fixe o roedor sobre os ombros.</li>
		<li>Deslize suavemente o polegar e o dedo indicador para a frente, e posicione-os na base do crânio. Segure a pele solta no pescoço e levante o animal.</li>
		<li>Use o dedo médio para estabilizar o animal ao longo das costas, fixando a pele dorsal contra a base do polegar.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Contenção de duas mãos<ol>
<li>Coloque o animal em uma superfície que eles possam agarrar.</li>
		<li>Segure a cauda na base (dentro de 1-2 cm do corpo) com a mão dominante, e aplique tração suave para trás. Isso faz com que o animal se segure na superfície, e resulta em corpo sendo esticado e alongado.</li>
		<li>Com o dedo indicador e o polegar da outra mão, fixar o roedor sobre os ombros.</li>
		<li>Deslize suavemente o polegar e o dedo indicador para a frente, e posicione-os na base do crânio. Segure a pele solta no pescoço e levante o animal.</li>
		<li>Use os dedos restantes para estabilizar o animal ao longo das costas, fixando a pele dorsal contra a base do polegar.</li>
		<li>Fixar os traseiros fixando a cauda contra a palma com o quarto dedo, ou permitindo que os membros traseiros descansem sobre uma superfície sólida.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 1" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig1.jpg"> Figura 1: Método de contenção com uma mão e duas mãos para ratos
2. Luvas
Há uma variedade de luvas disponíveis para os manipuladores usarem para proteção contra mordidas de ratos. Eles geralmente são inadequados para o trabalho com ratos devido à perda de destreza. Muitas vezes, as desvantagens de muitos tipos de luvas superam as vantagens.
<ol><li>As luvas de trabalho de lona de algodão não são resistentes à mordida, mas fornecem uma pequena quantidade de proteção contra dentes e unhas. Eles não fornecem uma boa aderência, pois deslizam facilmente sobre a pele.</li>
	<li>Luvas de couro de boa qualidade são resistentes a mordidas. No entanto, sua rigidez causa uma redução na destreza. A espessura do couro, embora protetora, reduz a acuidade tátil e a mobilidade das mãos.</li>
	<li>Luvas de correio de corrente fornecem uma sensação psicológica de segurança para o manipulador de animais. No entanto, eles são pesados e a maioria dos dentes de ratos pode penetrar entre as ligações. Além disso, essas luvas diminuem a destreza manual, e se usadas de forma inadequada são mais perigosas tanto para o animal quanto para o manipulador.</li>
	<li>Luvas isoladas de borracha que são comumente usadas em casas para lavar pratos fornecem uma superfície palmar texturizada, e permitem um aperto seguro na camada de cabelo dos roedores. A superfície elástica do látex é espessa o suficiente para resistir à perfuração por incisivos de roedores, e fina o suficiente para ser capaz de sentir e controlar o animal. A maior desvantagem é que eles são feitos de látex, o que é uma preocupação para pessoas com alergia ao látex. Além disso, essas luvas se deterioram à luz, e precisam ser substituídas regularmente.</li>
</ol>3. Contenção corporal
<ol><li>O "T. rex grip" é um método de contenção de duas mãos para ratos.<ol>
<li>Coloque um rato em uma superfície que pode ser agarrada.</li>
		<li>Segurando a base da cauda com uma mão, traga a outra mão para cima e para trás com o índice e os dedos médios rachados.</li>
		<li>Coloque a mão sobre o ombro com o dedo indicador em um lado da cabeça, e o dedo médio do outro lado. Os dedos de cada lado da cabeça restringem o movimento lado a lado da cabeça.</li>
		<li>Encote o corpo atrás das pernas dianteiras com o terceiro dedo, o quarto dedo e o polegar. Deve-se tomar cuidado para evitar comprimir o peito e comprometer as respirações. Esta aderência impede que o rato se mova para frente ou para trás para fora da mão.</li>
		<li>Estabilize a cauda e o traseiro, agarrando a base da cauda com ou sem segurar os pés traseiros.</li>
		<li>Essa contenção funciona bem com ratos maiores, e quando o acesso à cabeça é necessário.</li>
	</ol>
</li>
	<li>O método de cruzamento de membros dianteiros é um método de contenção de duas mãos.<ol>
<li>Coloque o animal em uma superfície que eles possam agarrar.</li>
		<li>Segure a cauda na base (dentro de 1-2 cm do corpo) com a mão dominante e aplique tração suave para trás. Isso faz com que o animal se agarre à superfície, e resulta em esticadas e alongadas pelo corpo.</li>
		<li>Traga a outra mão por trás.</li>
		<li>Segure o rato diretamente atrás dos ombros, com os dedos de um lado e o polegar do outro lado do peito, e deslize a mão para a frente, forçando assim as pernas dianteiras para a frente.</li>
		<li>As pernas dianteiras atravessarão sob o queixo do rato, criando uma barreira física e impedindo que o rato mova sua cabeça para baixo em direção aos dedos.</li>
		<li>Tome cuidado para evitar comprimir o peito e comprometer as respirações.</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 2" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig2.jpg"> Figura 2: T-rex aderência e método de cruzamento de membros dianteiros para conter ratos
4. Dispositivos de contenção
<img alt="Figure 3" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig3.jpg"> Figura 3: Dispositivo de contenção estilo Broome
<img alt="Figure 4" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig4.jpg"> Figura 4: Cabente de roedor de fundo plano
<ol><li>Dispositivos rígidos vêm em uma variedade de tipos, e geralmente são feitos de material não poroso que é facilmente desinfetado.<ol>
<li>A contenção ao estilo Broome foi projetada para fornecer acesso à cauda para injeções intravenosas. Ele é construído com um slot que percorre toda a extensão do dispositivo, o que permite que o animal seja puxado para o traseiro de contenção primeiro. Uma peça de nariz de plástico é inserida para manter o animal no lugar.<ol>
<li>Remova a peça do nariz do corpo do tubo de contenção afrouxando o parafuso.</li>
			<li>Segure o animal na base da cauda, e oriente o tubo de contenção para que a fenda que percorre o comprimento do tubo esteja voltada para cima. Puxe suavemente o animal para o dispositivo de contenção primeiro.</li>
			<li>Muitas vezes é vantajoso colocar o animal em uma superfície lisa para facilitar sua colocação no tubo.</li>
			<li>Uma vez que o animal está totalmente no tubo - e foi atraído para o fechamento final deslize a peça de nariz plástico para o tubo para ocluir a abertura.</li>
			<li>Coloque o conjunto da peça do nariz para que o nariz do animal esteja na abertura central. Não posicione a peça do nariz tão firmemente que o animal não possa respirar.</li>
		</ol>
</li>
		<li>O cabidor de roedores de fundo plano é um meio cilindro com aberturas que permitem o acesso a partir da parte superior e inferior do dispositivo de contenção. Um portão de plástico rígido é inserido em uma das várias ranhuras graduadas para segurar o animal dentro do dispositivo.<ol>
<li>Segure o animal pela base da cauda com a mão dominante em uma superfície lisa, ou em um topo de gaiola.</li>
			<li>Segure o tubo de contenção de fundo plano na outra mão, e dimensione-o para que a extremidade aberta esteja na cabeça do animal em um ângulo de 45° para a superfície superior da mesa/gaiola.</li>
			<li>Alguns animais entrarão imediatamente no tubo, enquanto outros estão relutantes e exigem que o manipulador os guie para o tubo.</li>
			<li>Coloque o tubo sobre a cabeça do animal. Bata imediatamente na garupa do animal e mantenha a pressão para evitar que o animal se recupere.</li>
			<li>Uma vez que o animal esteja no dispositivo de contenção, deslize o portão de plástico para dentro da fenda apropriada para segurar o animal no dispositivo de contenção.</li>
		</ol>
</li>
		<li>As restrições do tubo são cilindros plexiglass com uma extremidade fechada contendo orifícios ou fendas para circulação de ar. Alguns são modificados com uma faixa de fenda larga do comprimento do cilindro para acomodar a exposição de um membro traseiro para injeções intramusculares, coleta de sangue safeno e femoral, ou acesso à superfície dorsal para injeções subcutâneas.<ol>
<li>Segure o animal pela base da cauda com a mão dominante em uma superfície lisa, ou em um topo de gaiola.</li>
			<li>Segure o tubo de contenção na outra mão e dimensione-o para que a extremidade aberta esteja na cabeça do animal em um ângulo de 45° para a superfície superior da mesa/gaiola.</li>
			<li>Alguns animais entrarão imediatamente no tubo. Outros animais estão relutantes e exigem que o manipulador os guie para o tubo.</li>
			<li>Coloque o tubo sobre a cabeça do animal. Bata imediatamente na garupa do animal e mantenha a pressão para evitar que o animal se recupere.</li>
			<li>Escroto e guia manualmente animais incontroláveis para o tubo, permitindo que a pele que está sendo mantida deslize através da fenda no tubo.</li>
			<li>Uma vez que o animal está no dispositivo de contenção, é necessário ocluir a abertura para evitar que o animal se recupere.</li>
			<li>Dependendo do procedimento, vários dedos são colocados em toda a abertura.</li>
			<li>Enfie uma luva de látex grande na abertura. As luvas são geralmente texturizadas e vão segurar a superfície plexiglass.</li>
			<li>Alguns tubos de contenção terão fechamentos específicos para esse estilo ou tamanho.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 5" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig5.jpg"> Figura 5: Dispositivo de contenção do tubo
<ol start="2"><li>Os contentores flexíveis são cones plásticos flexíveis descartáveis. Eles estão disponíveis em plástico transparente ou opaco. O plástico é fino o suficiente para permitir a penetração por uma agulha para realizar injeções sem remover o animal do dispositivo de contenção. Eles vêm em uma variedade de tamanhos para caber ratos e ratos, tanto adultos quanto desmaseamento.<ol>
<li>Corte o plástico com uma tesoura para permitir o acesso aos membros, à cauda e a outros locais de injeção.</li>
		<li>Selecione um tamanho de cone apropriado para o animal. O cone deve ser longo o suficiente para estender 2-3 polegadas além da garupa do animal.</li>
		<li>Insira o animal no cone<ol>
<li>Abra o cone e segure-o ao redor da metade superior.</li>
			<li>Segure o animal pela base da cauda com a mão dominante, colocando-o em uma superfície lisa ou em um topo de gaiola.</li>
			<li>Segure o cone de contenção na outra mão, e dimensione-o para que a extremidade aberta esteja na cabeça do animal em um ângulo de 45° para a superfície superior da mesa/gaiola.</li>
			<li>Alguns animais entrarão imediatamente no cone. Outros animais estão relutantes e exigem que o manipulador os guie para o cone de contenção.</li>
			<li>Coloque o cone sobre a cabeça do animal. Bata imediatamente na garupa do animal e mantenha a pressão para evitar que o animal se recupere. Devido ao diâmetro maior da abertura do cone, os animais são muito mais propensos a se virar para sair do cone.</li>
			<li>Assim que o animal entra no cone, segure a extremidade aberta e selá-la para forçar o animal até o fim.</li>
			<li>Fixar a abertura dobrando o plástico para um lado da cauda e aplicando o clipe da pasta no plástico dobrado, tomando cuidado para evitar a fixação da cauda ou da pele. Alternativamente, reúna o plástico ao redor da cauda uniformemente, e coloque a gravata o mais próxima possível do corpo para garantir a abertura.</li>
		</ol>
</li>
	</ol>
</li>
</ol><img alt="Figure 6" src="/files/ftp_upload/10221/10221fig6.jpg"> Figura 6: Contenção flexível
5. Métodos de contenção para procedimentos técnicos específicos
<ol><li>A exposição ventral é necessária para injeções intraperitoneais.<ol>
<li>Scruffing<ol>
<li>Escro o animal e gire a mão para que o abdômen seja exposto.</li>
			<li>Incline o animal para que a cabeça esteja apontando para baixo em um ângulo de 30°.</li>
			<li>Segure o traseiro prendendo a cauda contra a palma usando o quarto dedo.</li>
			<li>Alternativamente, os traseiros podem ser imobilizados fixando o excesso de pele ao longo das costas entre os dedos e a base do polegar.</li>
		</ol>
</li>
		<li>T. rex aderência e métodos de contenção de cruz<ol>
<li>Segure o animal (somente ratos) usando qualquer uma das técnicas acima.</li>
			<li>Com a mão livre, segure as duas patas traseiras acima do hock, e estenda-as caudally.</li>
			<li>Apoie o peso do animal com a palma da mão nas costas.</li>
			<li>Incline o animal para que a cabeça esteja apontando para baixo em um ângulo de 30°.</li>
			<li>Uma segunda pessoa faz a injeção.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Contenção rígida<ol>
<li>A maioria dos dispositivos rígidos de contenção não pode impedir que o animal instintivamente enrole para permanecer ereto.</li>
			<li>Se um contidor rígido for empregado, gire o animal para que sua cabeça seja apontada para baixo e seja perpendicular à mesa.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Contenção flexível<ol>
<li>Quando colocado corretamente em um cone de plástico flexível, o animal é incapaz de virar ou virar.</li>
			<li>Deve-se tomar cuidado para posicionar o animal de tal forma que os membros traseiros estejam suficientemente separados para permitir o acesso ao abdômen.</li>
			<li>Como o animal é comprimido, é imperativo que a injeção seja baixa o suficiente na superfície ventral para evitar perfurar o baço, fígado, rim ou estômago.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>A exposição dorsal é necessária para injeções no espaço subcutâneo.<ol>
<li>Scruffing<ol>
<li>Esmague o animal e deixe suas patas traseiras descansarem sobre uma superfície plana e sólida.</li>
			<li>Levante o scruff para criar uma tenda de pele sobre o pescoço e ombros.</li>
			<li>Coloque o peso da mão sobre a mesa ao injetar ratos. Colocar peso no mouse pode causar sufocamento.</li>
			<li>Segure os ratos no lugar com peso no traseiro, mas nunca no peito.</li>
			<li>Injete a substância no espaço abaixo dos dedos no corpo do animal.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Restrições rígidas<ol>
<li>Coloque o animal em um dispositivo de contenção com uma abertura grande o suficiente para puxar a pele para cima.</li>
			<li>Pode ser necessário usar fórceps para agarrar a pele.</li>
			<li>A maioria dos animais permanece na postura adequada, a menos que a contenção seja girada.</li>
			<li>Não injete um volume que impeça a pele de recuar da abertura assim que a injeção estiver completa.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
	<li>A contenção do membro traseiro é necessária para injeção intramuscular; retirada sanguínea da veia safena, veia femoral ou artéria femoral; e injeção no footpad.<ol>
<li>Escrúpulos de ratos e ratos pequenos (abaixo de 200 g)<ol>
<li>Escro o animal e gire a mão para que o abdômen seja exposto.</li>
			<li>Acesse o pé traseiro colocando o pé entre os dedos.</li>
			<li>Este método é melhor utilizado apenas para injeções de footpad.</li>
		</ol>
</li>
		<li>T. rex aderência ou membro dianteiro crisscross<ol>
<li>Este método requer duas pessoas: uma para contenção do corpo e outra para contenção do membro e desempenho da injeção.</li>
			<li>Estenda a perna traseira do rato segurando o pé para acesso à veia safena, veia femoral ou artéria, ou o músculo para injeção.</li>
			<li>Segure a perna logo acima do hock para injeção do footpad.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Restrições rígidas<ol>
<li>Coloque o animal em uma cabeça de tubo de contenção primeiro.</li>
			<li>Exponha a cauda e o traseiro puxando-os suavemente para trás do tubo.</li>
			<li>Imobilize a perna segurando a pele do flanco e travando o joelho reto. Isso fornece acesso ao músculo quadríceps para injeção no rato ou rato, e impede que o animal saia do dispositivo de contenção.</li>
			<li>Em dispositivos com ranhuras grandes, posicione a perna fora do tubo para acesso aos vasos sanguíneos para amostragem ou injeção de footpad.</li>
			<li>Esses tubos de contenção com peças de extremidade plana permitem que o tubo repouse sobre a mesa e estabilize o dispositivo durante o procedimento.</li>
			<li>Como o animal é protegido dessa forma, é possível realizar injeções ou amostragem de sangue de ratos por um único técnico.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Contenção flexível<ol>
<li>As restrições plásticas flexíveis podem ser modificadas cortando aberturas para acomodar a exposição de membros.</li>
			<li>As vagas feitas podem ser personalizadas para cada animal, ou para procedimentos específicos.</li>
			<li>Como o animal é protegido desta forma, é possível que um único técnico realize injeções ou amostragem de sangue de ratos.</li>
		</ol>
</li>
	</ol></li>
</ol>

O manuseio rotineiro para troca de gaiolas e procedimentos técnicos é motivo de estresse para animais experimentais. Embora esse tipo de estresse não seja uma ameaça ao bem-estar geral do animal, pode causar flutuações nos parâmetros fisiológicos que podem ter um efeito adverso nos dados da pesquisa. O uso de pessoal qualificado, técnicas adequadas e equipamentos pode mitigar parte do estresse.

técnicas de manuseio e contenção de roedores

Rodent Handling and Restraint Techniques

Fonte: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. Universidade de Notre Dame, IN
Foi demonstrado que mesmo o manuseio mínimo de ratos e ratos é estressante para os animais. O manuseio para troca de gaiolas e outros procedimentos não invasivos causa um aumento na frequência cardíaca, pressão arterial e outros parâmetros fisiológicos, como os níveis de corticosterona sérica. As flutuações podem continuar por até várias horas. Os métodos de contenção necessários para injeções e retiradas de sangue também causam alterações fisiológicas que podem afetar potencialmente os dados científicos. O treinamento no manejo adequado de ratos e ratos é necessário para minimizar os efeitos aos animais. 1 Ratos e ratos podem ser contidos manualmente com dispositivos de contenção, ou com agentes químicos. Os métodos manuais e o uso de dispositivos de contenção são abordados neste manuscrito. Todos os métodos de contenção incluem o processo de retirada dos animais de sua gaiola doméstica.

Técnicas de manuseio e contenção de roedores

Source: Kay Stewart, RVT, RLATG, CMAR; Valerie A. Schroeder, RVT, RLATG. University of Notre Dame, IN
It has been demonstrated that even minimal handling ...

Os roedores são organismos modelo amplamente utilizados para investigar diversas questões científicas, e foi demonstrado que mesmo o manuseio mínimo é estressante para esses animais. O manuseio de tarefas simples, como troca de gaiola, pode causar um aumento na frequência cardíaca, pressão arterial e níveis séricos de corticosterona, e essas flutuações podem continuar por várias horas. Os métodos de contenção necessários para procedimentos comuns de injeção e retirada de sangue também podem causar alterações fisiológicas, o que pode afetar potencialmente os dados científicos. Portanto, o treinamento para o manuseio adequado de camundongos e ratos é necessário para minimizar esses efeitos nos animais. Neste vídeo, primeiro revisaremos as técnicas básicas para lidar com roedores e, em seguida, discutiremos os procedimentos de contenção de roedores, incluindo técnicas manuais e métodos que envolvem o uso de dispositivos de contenção. Vamos começar discutindo os fundamentos do manuseio de roedores. Um dos métodos mais comuns para mover um camundongo ou rato adulto é levantar o animal pela cauda. Ao fazer isso, é imperativo que a cauda seja agarrada na base perto da garupa. Se o animal for levantado pela ponta da cauda, a pele pode ser arrancada devido ao peso corporal e pode levar a uma lesão resultando na amputação da cauda. É importante ressaltar que mover um animal de um lugar para outro deve ser feito de forma rápida e constante. Suspender o animal no ar por qualquer período de tempo não apenas causará angústia, mas também fará com que o animal se torça ou lute, possivelmente causando danos à cauda. Além disso, o condutor não deve colocar a mão sob o animal, pois ele pode tentar agarrá-lo por segurança, resultando em uma mordida. Outro método para lidar com roedores adultos é usar fórceps. Os tipos de fórceps comumente usados são pinças de curativo longo ou pinças de língua com tubos de borracha, plástico ou silicone colocados sobre as extremidades para fornecer uma almofada. A pinça pode agarrar o mouse pela nuca ou pela base da cauda. O uso de fórceps minimiza a contaminação cruzada de animal para animal e é mais rápido e menos caro do que trocar as luvas entre cada gaiola de animal. Os iniciantes precisarão ser treinados sobre como segurar os ratos com força, especialmente na nuca, pois isso pode interferir na respiração. Ao usar a pinça na cauda, deve-se tomar cuidado para colocar a pinça perto da base da cauda para evitar ferimentos. Lembre-se de armazená-los virados para baixo em etanol 70% entre o manuseio de diferentes grupos de animais. Além disso, pode-se usar tubos feitos de um material não poroso para transferir animais. Esses tubos podem ser adicionados a uma gaiola como um local para o animal se abrigar ou buscar refúgio seguro. A maioria dos camundongos ou ratos entraria de bom grado nos tubos quando sua gaiola fosse aberta, ou eles podem ser facilmente guiados para dentro do tubo. Quando o animal estiver dentro, cubra as pontas abertas com a palma da mão e os dedos. Em seguida, para encorajar o animal a sair, incline suavemente o tubo para cima na nova gaiola. Os animais são facilmente condicionados a esse método de troca de gaiola, tornando este um processo rápido e fácil para mover animais de um lugar para outro. Algumas instituições preferem que os animais - especialmente os ratos - sejam levantados pelo corpo, mesmo durante o manuseio de rotina. Ratos adultos são gentilmente agarrados ao redor do tórax, levantados e rapidamente colocados em outra gaiola. É importante que os animais estejam habituados a este método de manuseio desde tenra idade. Ao trabalhar com ratos jovens, colocar a mão sobre as costas do rato fará com que ele pule na palma da mão do manipulador, permitindo que seja agarrado. Uma segunda mão pode ser necessária para evitar que o rato se contorça com o aperto. Ao trocar de gaiola com camundongos ou ratos recém-nascidos, muitas vezes é necessário removê-los, mantendo o ninho intacto. Use as duas mãos para colher o ninho e os filhotes do fundo da gaiola para uma nova gaiola. Mantenha os dedos juntos para evitar deixar cair os filhotes. Uma vez que o ninho tenha sido movido para uma nova gaiola, é importante verificar se todos os filhotes estão presentes. Alternativamente, uma concha de plástico pode ser usada para mover roedores recém-nascidos em seus ninhos. Ao fazer isso, é importante que você coloque a mão por cima da concha para evitar que os recém-nascidos se mexam ou pulem. Comparado com o manuseio individual dos filhotes, escavar todo o ninho é menos angustiante tanto para os filhotes quanto para as mães. Agora que discutimos os fundamentos do manuseio de roedores, vamos nos aprofundar nos procedimentos detalhados para contenção de roedores. Primeiro, descreveremos como conter esses animais manualmente. Camundongos e ratos jovens podem ser contidos usando a técnica de uma ou duas mãos. No entanto, para ratos adultos, a contenção de corpo inteiro usando a pegada de T-rex ou o método cruzado do membro anterior são as técnicas preferidas. Vamos começar aprendendo o método de contenção com as duas mãos. Primeiro, coloque o animal em uma superfície que ele possa segurar, como a tampa da barra de arame. Com a mão dominante, segure a cauda na base e puxe suavemente o mouse para trás. Isso faz com que o animal se segure na superfície e permita que seu corpo seja esticado. Em seguida, prenda suavemente o roedor com o dedo indicador não dominante e o polegar posicionados na base do crânio e segure a pele solta no pescoço para levantar o animal. Use os dedos restantes para estabilizar o animal com as costas contra a base do polegar. Você pode prender os quartos traseiros prendendo a cauda com o dedo anelar contra a palma da mão. Para o método de contenção com uma mão, coloque novamente o animal em uma superfície que ele possa segurar. Segure a cauda entre o terceiro e o quarto dedos da mão não dominante e aplique uma tração suave para trás. Com o dedo indicador e o polegar da mesma mão, prenda o roedor sobre os ombros. Deslize suavemente o polegar e o indicador para a frente e segure a pele solta no pescoço e levante o animal. Use o dedo médio para estabilizar o animal ao longo das costas, prendendo a pele dorsal contra a base do polegar. O terceiro método de contenção que discutiremos é o aperto de T-rex - um método de contenção com as duas mãos para ratos. Primeiro, coloque o rato em uma superfície sólida, como um tapete, que ele possa segurar. Enquanto segura a base da cauda com uma mão, coloque a outra mão sobre o ombro do rato com o indicador e o dedo médio divididos em ambos os lados. Isso é para restringir o movimento da cabeça de um lado para o outro. Assim que a cabeça estiver estabilizada, envolva o corpo atrás das patas dianteiras com os dedos médio e anelar e o polegar. Evite comprimir o peito para que não comprometa a respiração do animal. Finalmente, estabilize a cauda e os quartos traseiros segurando a base da cauda SEM segurar as patas traseiras, se você planeja administrar uma gavagem oral; ou COM segurar as patas traseiras, se a intenção for injetar o animal. Por fim, para conter um rato usando o método cruzado do membro anterior, coloque o animal em uma superfície que ele possa segurar. Em seguida, com a mão dominante, segure a cauda na base e aplique uma tração suave para trás para que o corpo do animal se alongue. Em seguida, com a outra mão, segure o animal diretamente atrás dos ombros, com os dedos de um lado e o polegar do outro lado do peito, e deslize a mão para a frente. Esse movimento forçará as patas dianteiras do animal a cruzar sob o queixo, criando uma barreira física que impede o animal de mover a cabeça para baixo. Tome cuidado para evitar comprimir o peito, o que levará à dificuldade para respirar. Agora que revisamos as técnicas de contenção manual, vamos aprender como conter roedores usando dispositivos especializados. O primeiro dispositivo sobre o qual aprenderemos é o dispositivo de contenção no estilo Broome. Possui uma ranhura que percorre todo o comprimento do dispositivo e um porta-objetivas de plástico, que é inserido para manter o animal no lugar. Comece afrouxando o parafuso para remover o revólver. Em seguida, oriente o tubo de retenção de forma que a fenda fique voltada para cima. Segure o animal pela base da cauda e puxe-o suavemente para dentro do dispositivo de contenção, primeiro os quartos traseiros. Assim que o animal estiver dentro, deslize o revólver de plástico de volta para dentro do tubo para evitar que ele se abra. Coloque o nariz de forma que o nariz do animal fique centralizado na abertura. Não o posicione com tanta força que o animal não consiga respirar. Outro exemplo de dispositivo de contenção é o limitador de roedores de fundo plano, que é um meio cilindro com aberturas que permitem o acesso pela parte superior e inferior do dispositivo. Ele também possui ranhuras nas quais um portão de plástico rígido pode ser inserido para manter o animal no lugar. Para usar este limitador, segure o roedor pela base da cauda com a mão dominante e coloque-o em uma superfície lisa. Usando a outra mão, segure o tubo de contenção de fundo plano de modo que a extremidade aberta fique na cabeça do animal a 45? ângulo em relação à superfície. Coloque o tubo sobre a cabeça do animal e bata imediatamente na garupa para evitar que o animal recue. Uma vez no dispositivo, deslize o portão de plástico no slot apropriado para proteger a posição do animal. O terceiro tipo de dispositivo que discutiremos são as restrições de tubo. Estes são cilindros de plexiglass com uma extremidade fechada contendo orifícios para circulação de ar e uma fenda na extremidade aberta. Para usar uma restrição de tubo, segure o animal e coloque-o em uma superfície lisa. Em seguida, coloque a extremidade aberta do tubo na cabeça do animal a 45? ângulo. Assim que o roedor entrar no tubo, bata na garupa para evitar que ele recue. Por fim, oclua a abertura enchendo uma grande luva de látex, que agarrará a superfície do Plexiglass e impedirá que o animal saia do tubo. Por fim, discutiremos como usar contenções flexíveis, que são cones de plástico flexíveis descartáveis disponíveis em diferentes tamanhos. A seleção de um cone depende do tamanho do animal. Idealmente, deve ser longo o suficiente para se estender de 2 a 3 polegadas além da garupa do animal. Como os métodos anteriores, coloque o animal em uma superfície lisa e coloque o cone de contenção em um 45? ângulo sobre a cabeça do animal. Assim que o animal entrar no cone, segure a extremidade aberta e sele-a para forçar o animal até o fim. Prenda a abertura dobrando o plástico para um lado da cauda e aplicando um clipe de fichário no plástico dobrado, tomando cuidado para evitar prender a cauda ou a pele. Depois de discutir os fundamentos do manuseio e as diferentes técnicas de contenção, vamos revisar por que ter uma compreensão desses procedimentos é necessário para qualquer cientista in vivo. O conhecimento e a lógica por trás desses procedimentos básicos de manuseio estão no centro da manutenção da saúde do animal. Desde o momento em que os animais nascem, eles são manuseados para atividades simples do dia-a-dia, como pesagem, inspeção e troca de gaiola, que devem ser realizadas independentemente do objetivo científico. Os procedimentos de restrição também são úteis para fins de marcação. Por exemplo, para realizar procedimentos como socos na orelha, o animal precisa ser contido por scruffing. Por outro lado, um dispositivo de contenção deve ser usado ao inserir um microchip em ratos para que possam ser marcados permanentemente. Por fim, os métodos de contenção manual são usados para procedimentos comuns de injeção, como administração subcutânea e intraperitoneal. E o conhecimento dos dispositivos de contenção é útil ao realizar a administração intravenosa, que exige movimento mínimo do animal durante a injeção. Você acabou de assistir à introdução de JoVE às técnicas básicas de manuseio e contenção para roedores. Esses procedimentos exigem um toque confiante e firme, mas suave. Abordagens provisórias podem resultar em mordidas do manipulador, enquanto o manuseio agressivo pode causar ferimentos ao roedor. Portanto, é importante aprender essas técnicas completamente e encontrar um equilíbrio entre uma pegada assertiva e suave. Como sempre, obrigado por assistir!

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Roedores

minimizing stress in mouse and rat handling

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours.

Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible.

Mice and rats can be restrained by hand, with restraint devices, or with chemical agents. This manuscript focuses on manual methods and restraint devices. Each restraint method begins with lifting the animal from its home cage.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

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rodent handling and restraint techniques

Mouse and rat handling can create stress, even when the procedure is brief. Cage changing and other noninvasive tasks can raise heart rate, blood pressure, and serum corticosterone levels. These changes may last for several hours. Restraint for injections and blood withdrawal can also affect the animals and may influence scientific data. Because of this, proper training is needed when working with mice and rats. The goal is to reduce the effect of handling on the animals as much as possible. <br...

basic care procedures

Caring for Research Mice and Rats

Research mice and rats need careful housing, feeding, and handling. These animals make up over 90% of the animals used for biomedical research, so their care can strongly affect experiment results. Both immunocompetent animals, which have a normal immune response, and immunocompromised animals need proper support during studies. Some research animals have weakened immune systems and need extra steps to stay healthy. Common examples include naturally occurring immunocompromised mice and mice...

fundamentals of breeding and weaning

Mouse and Rat Breeding Methods

Mouse and rat breeding methods are used in biomedical research to supply animals for laboratory studies. Many research facilities buy mice from commercial breeders, but some also breed mice and rats in-house. In-house breeding can reduce costs and give researchers more options for their studies. Breeding animals in the facility also lets researchers manage genetics and timing. They can plan pregnancies to match research needs and work with embryos and newborns when needed. Mice and rats can be...

rodent identification i

Mice and Rats: Ear Tags and Punch Codes

Proper identification of laboratory mice and rats is important in biomedical research. The right animal must be used for each procedure and for data collection. Clear identification helps keep research records accurate and reliable. This page focuses on permanent identification methods for mice and rats. These methods include ear tags, ear punch codes, microchip implantation, tail tattoos for adult mice, and toe tattoos for neonates. Temporary methods such as dyes and marking pens can also be...

rodent identification ii

Rodent ID Methods for Accurate Records

Accurate rodent identification supports reliable animal records and data collection. Research animal records may include simple cage cards or a detailed database with full information on each animal. Individual identification is the key part of keeping those records correct. Mice and rats can be identified by several methods. These include tattooing, microchip placement, and temporary identification methods. Each method serves a different need in research animal management. The procedure also...

compound administration i

Rodent Injection Routes and Restraint

Rodent injection routes and restraint methods are key parts of compound administration in mice and rats. When a substance must be injected into an animal, the delivery route and the amount of compound must be chosen with care. The right choice helps match the dose to the protocol. Several factors guide the route of administration. These include the pH of the solution, the volume needed for the desired dose, and the viscosity of the solution. Viscosity means how thick or resistant to flow a...

compound administration ii

Choosing the Right Route for Compound Delivery

Compound delivery is a key part of many animal studies. The route used to give the compound can change how it is absorbed. Careful planning helps make sure the compound is delivered correctly. The substance itself also matters when a route is chosen. Its pH, viscosity, and concentration can all affect which method is best. These properties help guide the choice of administration route in a study.

compound administration iii

Specialized Injection Routes in Mice and Rats

Specialized injection routes in mice and rats are sometimes used when standard compound administration methods are not enough. Some study protocols call for less common routes such as intradermal, intranasal, and intracranial injections. These methods are used in laboratory animals and require careful technique. Intradermal injections place a compound into the skin. Intranasal injections deliver a compound through the nose. Intracranial injections are given into the brain. Because these...

compound administration iv

Specialized Injection Routes in Rodents

Specialized injection routes in laboratory mice and rats include intracardiac, footpad, and retro-orbital administration. These methods are used when a protocol calls for a route that is less common than standard compound delivery methods. Each route requires specialized training to perform correctly. Intracardiac injections deliver into the heart, footpad injections target the paw area, and retro-orbital injections are given around the eye region. Because these procedures are more technical,...

blood withdrawal i

Rodent Blood Collection Methods

Blood collection in mice and rats is a common part of research studies. The method used depends on how much blood is needed, how often samples must be taken, the animal's health, and the technician's skill level. This topic includes three blood withdrawal methods: retro-orbital sinus bleeds, initial tail snip bleeds, and intracardiac bleeds. Each method requires general anesthesia, which means the animal is made unconscious before the procedure begins.

blood withdrawal ii

Rodent Blood Sampling Methods

Blood collection from mice and rats can be done with several methods. The choice depends on the restraint needed, how invasive the procedure is, and whether a general anesthetic is required. These factors help determine which method is best for a given analysis. One older method uses the retro-orbital sinus cavity, which is located behind the eye. This approach has been debated because it may cause tissue damage or even blindness. For that reason, facial vein and submandibular vein bleeding...

anesthesia induction and maintenance

Laboratory Anesthesia and Pain Control

Laboratory anesthesia and pain control are important parts of veterinary care for research animals. The Guide for the Care and Use of Laboratory Animals says that pain assessment and pain relief must be part of that care. Anesthesia means the loss of feeling or sensation.

considerations for rodent surgery 

Aseptic Steps in Rodent Survival Surgery

Aseptic technique is essential for rodent survival surgery. It is used to keep the surgical site as clean as possible and to reduce contamination during the procedure. This approach includes patient preparation, surgeon preparation, and sterilization of instruments and other supplies. It also depends on a clean, controlled environment. Careful planning before surgery helps set up these steps for success. During the operation, animals need close monitoring. After the surgery, postoperative...

diagnostic necropsy and tissue harvest

Rat Necropsy for Tissue Collection

Rat necropsy is a key step for collecting organs and tissues at the end of many animal studies. These final samples are used for data collection time points and later testing. Because the samples are used for analysis, the way they are taken can affect sample quality. Careful collection methods help preserve the organs and tissues for testing. The method of euthanasia, or the procedure used to humanely end the animal's life, can also affect sample quality. This article outlines proper necropsy...

sterile tissue harvest

Aseptic Organ Collection in Rats and Mice

Aseptic organ collection in rats and mice is used to keep harvested tissues free from contamination. The process is important when tissues will be used for cell and tissue cultures. It also supports later protein and RNA analysis, as well as metabolic profiling of tissues. The transcript connects this work to the 3 R's, which were introduced in 1959 by W.M.S. Russell and R.L. Burch in The Principles of Humane Experimental Technique. The 3 R's are replacement, reduction, and refinement in the...

early intervention and pain management

Intervenção precoce e gerenciamento da dor

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes éticas institucionais para animais e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios dos 3Rs—Substituição, Redução e Refinamento—e devem ser realizados por pessoal treinado.  Monitoramento de animais para sinais de dor e angústia Reconhecer sinais precoces de dor é essencial para a pesquisa ética em animais. Os animais são rotineiramente monitorados usando parâmetros...

humane euthanasia and confirmation of death in rodents

Eutanásia Humanitária e Confirmação de Morte em Roedores

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais de ética animal e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios dos 3Rs - Substituição, Redução e Refinamento - e devem ser realizados por pessoal treinado. Pontos finais humanitários em roedores são indicadores clínicos, comportamentais ou fisiológicos predefinidos que sinalizam que um animal está experimentando dor significativa, angústia ou declínio de...

habituation and positive reinforcement for rodent handling

Acostumação e Reforço Positivo para Manuseio de Roedores

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes de ética animal institucional e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios das 3Rs—Substituição, Redução e Refinamento—e devem ser realizados por pessoal treinado. Habituação e reforço positivo são estratégias de refinamento que ajudam a reduzir o estresse durante o manuseio rotineiro e procedimentos experimentais em roedores. Essas abordagens melhoram o bem-estar...

breeding management in rodent studies

Gestão da Reprodução em Estudos com Roedores

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes éticas institucionais para animais e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios das 3R—Substituição, Redução e Refinamento—e devem ser realizados por pessoal treinado. O gerenciamento da reprodução apoia as 3R ao minimizar a produção desnecessária de animais e garantir que apenas o número de animais necessário para um estudo seja gerado. Estratégias de reprodução...

transport and acclimatization of rodents for research

Transporte e Aclimatação de Roedores para Pesquisa

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais de ética animal e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios dos 3Rs—Substituição, Redução e Refinamento—e devem ser realizados por pessoal treinado. O transporte de roedores para pesquisa requer procedimentos que minimizem o estresse e mantenham o bem-estar dos animais durante a movimentação para minimizar a influência nos resultados experimentais. As...

environmental enrichment for rodents

Enriquecimento Ambiental para Roedores

Todos os procedimentos com animais descritos aqui devem ser conduzidos de acordo com as diretrizes institucionais de ética animal e aprovados pelo IACUC. Todos os procedimentos devem seguir os princípios dos 3Rs - Substituição, Redução e Refinamento - e devem ser realizados por pessoal treinado. O enriquecimento ambiental envolve objetos e práticas que incentivam comportamentos naturais, melhoram o bem-estar psicológico e promovem melhor bem-estar em roedores de laboratório. O enriquecimento...

rodents

Learn how mouse and rat handling can affect stress, heart rate, and blood pressure, and explore manual restraint methods and devices used in labs.

Minimizing Stress in Mouse and Rat Handling

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