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Artigo de método

Um Modelo de Instabilidade Articular do Complexo Tornozelo-Subtalar em Camundongos

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DOI:

10.3791/64481

28 de outubro de 2022

* These authors contributed equally

Neste artigo

Resumo

A articulação do complexo tornozelo-subtalar (JSCA) é o núcleo do pé e desempenha um papel fundamental no controle do equilíbrio nas atividades diárias. Lesões esportivas muitas vezes levam à instabilidade nessa articulação. Aqui, descrevemos um modelo murino de instabilidade induzida por transecção ligamentar da JSCA.

Resumo

As entorses de tornozelo são talvez as lesões esportivas mais comuns na vida diária, muitas vezes resultando em instabilidade da articulação do complexo tornozelo-subtalar (ASCS), e podem eventualmente levar à osteoartrite pós-traumática (ATP) a longo prazo. No entanto, devido à complexidade do mecanismo de lesão e às manifestações clínicas, como equimose, hematoma ou sensibilidade na lateral do pé, não há consenso clínico sobre o diagnóstico e tratamento da instabilidade da ASJS. Uma vez que a estrutura musculoesquelética dos ossos e ligamentos do retropé de camundongo é comparável à dos seres humanos, um modelo animal de instabilidade da JSCA em camundongos foi estabelecido pela transecção dos ligamentos ao redor da JSCA. O modelo foi bem validado por meio de uma série de testes comportamentais e análises histológicas, incluindo um teste de feixe de equilíbrio, uma análise de pegadas (uma avaliação do nível de exercício e da capacidade de equilíbrio em camundongos), uma avaliação de nocicepção térmica (uma avaliação da função sensorial do pé em camundongos), microtomografia computadorizada (TC) e coloração de corte da cartilagem articular (uma avaliação de dano e degeneração da cartilagem articular em camundongos). O estabelecimento bem-sucedido de um modelo de instabilidade da ASCA em camundongos fornecerá uma referência valiosa para a pesquisa clínica sobre o mecanismo de lesão e resultará em melhores opções de tratamento para entorse de tornozelo.

Introdução

A entorse de tornozelo é uma das lesões esportivas mais comuns em todo o mundo. Estima-se que 10.000 pessoas sejam feridas diariamente nos Estados Unidos1, das quais as lesões relacionadas ao esporte são responsáveis por 15%-45%2. Os custos médicos associados ao tratamento da entorse de tornozelo nos Estados Unidos são de US$ 4,2 bilhões anuais 3,4,5. A instabilidade crônica do pé é um problema comum após entorses de tornozelo e ocorre em aproximadamente 74% das entorses de tornozelo6, incluindo instabili....

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Protocolo

Todos os estudos em animais foram realizados de acordo com as Diretrizes para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório e foram aprovados pelo Comitê Institucional de Cuidados e Uso de Animais da Universidade Soochow.

1. Procedimentos cirúrgicos

  1. Divida 21 camundongos machos C57BL/6 com 6 semanas de idade em três grupos: o grupo do ligamento cervical transverso e ligamento talofibular anterior, o grupo do ligamento cervical transverso e do ligamento deltoide e o grupo da cirurgia simulada. Certifique-se de que todos os camundongos foram criados em um ambiente que atenda aos padrões específicos livres de patógenos (....

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Resultados

A análise estatística dos dados de correlação foi realizada por meio de ferramentas de análise estatística online. Os dados que atenderam aos dois testes de distribuição normal e homogeneidade de variância foram utilizados para posterior análise estatística por análise de variância one-way. Caso os dados não atendessem aos dois testes, o teste de Kruskal-Wallis era utilizado para a análise estatística. Os dados estão expressos como média ± desvio padrão (DP), sendo considerado estatisticamente significante p <.......

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Discussão

Neste estudo, dois modelos murinos de instabilidade da JSCA foram construídos com sucesso por transecção CL + ATFL ou CL + DL. O tempo de passagem dos camundongos pelo feixe de equilíbrio aumentou significativamente em 8 semanas e 12 semanas após a cirurgia, o que é semelhante aos resultados obtidos pela equipe de Hubbard-Turner pelo corte do ligamento lateral da articulação do tornozelo23,24. No teste de deslizamento do pé direito, observamos que os tempos de de.......

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Divulgações

Nenhum dos autores tem interesses conflitantes.

Agradecimentos

Este estudo foi apoiado pelo programa de bolsas de estudo do governo provincial de Jiangsu e pelo Programa Acadêmico Prioritário de Desenvolvimento das Instituições de Ensino Superior de Jiangsu (PAPD).

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
5-0 Sutura de Nylon CirúrgicaNingbo Medical Needle Co., Ltd.
Solução de diferenciação de etanol ácido (1%)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.R20778
corrediças adesivasJiangsu Shitai Company
Solução de amônia (1%)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.R20788
Etanol anidroShanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.
Ácido acético aquoso (1%)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.R20773
de cubo pretoShanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.
Tubo de centrífuga 15mlBeijing Soleibo Technology Co., Ltd.YA0476
Tubo de centrífuga 50mlBeijing Soleibo Technology Co., Ltd.YA0472
Vidro de coberturaJiangsu Shitai Company
CTAn softwareanálise de micro-CT Azul software de análise de micro-CTcientífico
Dataviewsoftware AEMC instrumentosanálise de dados comerciais
Disodium ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na)Beijing Soleibo Technology Co., Ltd.E8490
Incubadora elétricaSuzhou Huamei Equipment Factory
Incorporando parafinaLeica, Alemanha39001006
Solução de coloração de eosina (solúvel em álcool, 1%)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.R30117
Solução de coloração verde rápidaSigma-Aldrich, EUAF7275
Papelmarcha Baoding Huarong Paper Factory
GraphPad Prism 8.0Software Graphpad ferramentasde análise estatística on-line
Bolas de algodão IodophorQingdao Hainuo Bioengineering Co., Ltd.
Leica 818 bladeLeica, Alemanha
Micro-CTSkyscan, BélgicaMicroscópio de micromanipulação SkyScan 1176
Suzhou Omet Optoelectronics Co., Ltd.
Imita o softwareMaterializar Software de processamento de imagens médicas 3D 
Co. de Shanghai Yuanye da coloraçãoHarris HematoxylinR20566
Tipo anti-rato colagênio do rato IIAbcam Company
NaOHShanghai Sinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.
N-butanolShanghai Sinopharm Group Reagente Químico Co., Ltd.
Fixador de formalina neutra (10%)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.
Resina neutraSigma-Aldrich, EUA
Software de reconstrução Nrecon Micro Fotônica Inc.
Máquina de cortar cabeloOaks Group Co., Ltd.
Máquina de encaixotamento de parafinaLeica, Alemanha
Medidor de PHShanghai Leitz Company
Solução salina tamponada com fosfato (PBS)American Biosharp
Solução salina fisiológica (para mamíferos, estéril)Shanghai Yuanye Biotechnology Co., Ltd.R22172
Solução de coloração O SafraninSigma-Aldrich, EUAHT90432
solução salina (0,9%)Shanghai Baxter Medical Drug Co., Ltd.
ShakerHaimen Qilin Bell Instrument Manufacturing Co., Ltd.
SPSS 23Ferramentas de análise estatística on-lineda IBM
Máquina de comprimidosLeica, Alemanha
Fatiador de tecidosLeica, Alemanha
UgoBasile Ugo Basile Biological Research Company
Microscópio de fluorescência verticalZeiss Axiovert, Alemanha
Canal de plástico em forma de UShanghai Yizhe Instrument Co., Ltd.
Pomada veterináriaPfizer
Xileno XangaiSinopharm Group Chemical Reagent Co., Ltd.
Verificador de fadiga da roda de YLS-10B Desenvolvimentode tecnologia Co. de Jinan Yiyan, Ltd.
191104 de de de Biotecnologia alterada de , Ltd. American 3091072008779

Referências

  1. Waterman, B. R., Belmont, P. J. Jr, Cameron, K. L., Deberardino, T. M., Owens, B. D. Epidemiology of ankle sprain at the United States Military Academy. American Journal of Sports Medicine. 38 (4), 797-803 (2010).
  2. Fong, D. T., Chan, Y. Y., Mok, K. M., Yung, P. S., Chan, K. M.

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Reimpressões e permissões

Etiquetas

Instabilidade Subtalar do TornozeloModelo de Articulação em CamundongoTransecção LigamentarTeste da Barra de EquilíbrioAnálise de PegadaNocicepção TérmicaTomografia Computadorizada de Micro-CTColoração da Cartilagem ArticularModelo de Osteoartrite em CamundongoLesão Ligamentar do Retropé