a-calcium-bioluminescence-assay-for-functional-analysis-mosquito

A Calcium Bioluminescence Assay for Functional Analysis of Mosquito (<em>Aedes aegypti</em>) and Tick (<em>Rhipicephalus microplus</em>) G Protein-coupled Receptors

Arthropod hormone receptors are potential targets for novel pesticides as they regulate many essential physiological and behavioral processes.  The ...

Texas A&M University (TAMU)

&#x868A;&#x5B50;&#x5438;&#x8840;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x6F14;&#x53D8;&#x6240;&#x9700;&#x6FC0;&#x7D20;&#x534F;&#x8C03;&#x591A;&#x4E2A;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B; &#xFF08;&#x884C;&#x4E3A;&#x3001; &#x6D88;&#x5316;&#x3001; &#x5229;&#x5C3F;&#x3001; &#x5375;&#x5B50;&#x53D1;&#x751F;)&#x3002;&#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x6FC0;&#x80BD; &#xFF08;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; leucokinin &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x80BD;) &#x53C2;&#x4E0E;&#x90AE;&#x653F;&#x8840;&#x9972;&#x5582;&#x751F;&#x7406;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5177;&#x6709;&#x5229;&#x5C3F;&#x548C; myotropic &#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x4E86;&#x89E3;&#x5230;&#x5973;&#x6027;&#x7684;&#x603B;&#x4F53;&#x5BF9;&#x9910;&#x540E;&#x6DB2;&#x6392;&#x6CC4;&#xFF0C;RNAi &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x5176;&#x540E;&#x6D41;&#x4F53;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4F53;&#x5185;&#x8D21;&#x732E;&#x5206;&#x6CCC;&#x68C0;&#x6D4B;&#x4E2D;&#x5FEB;&#x901F;&#x5229;&#x5C3F;&#x8BC1;&#x660E;&#x5176;&#x57FA;&#x672C;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x3002;&#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x6FC0;&#x80BD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E5F;&#x662F;&#x4EE5;&#x524D;&#x672A;&#x62A5;&#x544A;&#x5728;&#x868A;&#x5B50;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x5C40;&#x90E8;&#x7684;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x7A81;&#x51FA;&#x663E;&#x793A;&#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x6FC0;&#x80BD;&#x6210;&#x529F;&#x9002;&#x5E94;&#x7684;&#x5438;&#x8840;&#x7684;&#x7EFC;&#x5408;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x767D;&#x7EB9;&#x4F0A;&#x868A;&#x57C3;&#x53CA; (L.) leucokinin &#x53D7;&#x4F53;&#x662F;&#x4F53;&#x5185;&#x6DB2;&#x6392;&#x6CC4;&#x540E;&#x8840;&#x6DB2;&#x5582;&#x517B;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

The evolution of the blood feeding adaptation in mosquitoes required hormonal coordination of multiple physiological processes (behavior, digestion, diuresis, oogenesis). The Aedes kinins (leucokinin-like neuropeptides) are involved in post blood feeding physiological processes, having diuretic and myotropic functions. To understand the in vivo contribution of the kinin receptor to overall female post-prandial fluid excretion, RNAi knockdown was followed by fluid secretion assays which proved its fundamental role in rapid diuresis. The Aedes kinin receptor was also localized in several tissues not previously reported in mosquitoes. Results highlight the integrative role of the Aedes kinins in the success of the blood feeding adaptation.

Mosquito Aedes aegypti (L.) leucokinin receptor is critical for in vivo fluid excretion post blood feeding.

L&#x26;#39;&#xE9;volution de l&#x26;#39;adaptation du sang d&#x26;#39;alimentation chez les moustiques de coordination hormonal n&#xE9;cessaire de multiples processus physiologiques (comportement, la digestion, la diur&#xE8;se, l&#x26;#39;ovogen&#xE8;se). Le kinines Aedes (leucokinin-comme neuropeptides) sont impliqu&#xE9;s dans le sang apr&#xE8;s l&#x26;#39;alimentation des processus physiologiques, ayant diur&#xE9;tique et fonctions myotropes. Pour comprendre la contribution en vivo du r&#xE9;cepteur &#xE0; l&#x26;#39;ensemble des kinines excr&#xE9;tion de liquide femmes post-prandiale, knockdown ARNi a &#xE9;t&#xE9; suivie par des tests de s&#xE9;cr&#xE9;tion des fluides qui a prouv&#xE9; son r&#xF4;le fondamental dans la diur&#xE8;se rapide. Le r&#xE9;cepteur Aedes kinine a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; localis&#xE9; dans les tissus de plusieurs, non signal&#xE9;s pr&#xE9;c&#xE9;demment chez les moustiques. Les r&#xE9;sultats font ressortir le r&#xF4;le int&#xE9;grateur des kinines Aedes dans le succ&#xE8;s de l&#x26;#39;adaptation se nourrir de sang.

Moustique Aedes aegypti (L.) Receptor Leucokinin est critique pour l&#x26;#39;alimentation excr&#xE9;tion de liquide Vivo Poste de sang

Die Entwicklung der F&uuml;tterung Anpassung in M&uuml;cken Blut ben&ouml;tigt, hormonelle Koordination mehrerer physiologischer Prozesse (Verhalten, Verdauung, Diurese, Oogenese). Die Aedes Kinins (Leucokinin-wie Neuropeptide) sind im Post-Blut, die F&uuml;tterung von physiologischer Prozessen, Diuretikum und Myotropic Funktionen beteiligt. Den in-vivo Beitrag des Rezeptors Kinine, insgesamt weibliche postprandialen fl&uuml;ssige Ausscheidung, RNAi verstehen, den Niederschlag von Fl&uuml;ssigkeit gefolgt war-Sekretion Proben die seine grundlegende Rolle in rapid Diurese bewiesen. Der Aedes Kinine Rezeptor wurde auch in verschiedenen Geweben in M&uuml;cken nicht zuvor gemeldet lokalisiert. Ergebnisse unterstreichen die integrative Rolle von der Aedes-Kinins f&uuml;r den Erfolg des Blutes F&uuml;tterung Anpassung.

M&uuml;cke Aedes Aegypti (L.) Leucokinin Rezeptor ist entscheidend f&uuml;r die in-vivo fl&uuml;ssige Ausscheidung Post Blut F&uuml;tterung.

L&#39;evoluzione del sangue alimentazione adattamento nelle zanzare necessaria coordinazione ormonale di molteplici processi fisiologici (comportamento, digestione, diuresi, ovogenesi). Le chinine Aedes (leucokinin-come neuropeptidi) sono coinvolti nel sangue post alimentazione processi fisiologici, avendo funzioni diuretiche e myotropic. Per capire il contributo in vivo del recettore di escrezione fluido postprandiali in generale femminile, atterramento &egrave; stata seguita da fluidi RNAi chinine secrezione dosaggi che ha dimostrato il ruolo fondamentale nella rapida diuresi. Il recettore di chinine Aedes era localizzato anche in diversi tessuti non precedentemente segnalati nelle zanzare. Risultati sottolineano il ruolo integrativo delle chinine Aedes nel successo del sangue adattamento di alimentazione.

Recettore leucokinin di zanzara Aedes aegypti (L.) &egrave; fondamentale per l&#39;alimentazione di escrezione di fluidi in vivo post sangue.

&#x868A;&#x306E;&#x8840;&#x6DB2;&#x4F9B;&#x7D66;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x9032;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30DB;&#x30EB;&#x30E2;&#x30F3;&#x8ABF;&#x6574;&#xFF08;&#x884C;&#x52D5;&#x200B;&#x200B;&#x3001;&#x6D88;&#x5316;&#x3001;&#x5229;&#x5C3F;&#x3001;&#x5375;&#x5F62;&#x6210;&#xFF09;&#x304C;&#x5FC5;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B9;&#x30B8;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#xFF08;leucokinin&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x5229;&#x5C3F;&#x85AC;&#x3068;myotropic&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3001;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x904E;&#x7A0B;&#x3092;&#x4F9B;&#x7D66;&#x5F8C;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5168;&#x4F53;&#x7684;&#x306A;&#x5973;&#x6027;&#x306E;&#x98DF;&#x5F8C;&#x6D41;&#x4F53;&#x6392;&#x6CC4;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x8CA2;&#x732E;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;RNAi&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x6025;&#x901F;&#x306A;&#x5229;&#x5C3F;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x8A3C;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x6DB2;&#x5206;&#x6CCC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x304C;&#x7D9A;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B9;&#x30B8;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x3082;&#x868A;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x8840;&#x6DB2;&#x4F9B;&#x7D66;&#x306E;&#x9069;&#x5FDC;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x306B;&#x200B;&#x200B;&#x30D2;&#x30C8;&#x30B9;&#x30B8;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#x306E;&#x30AD;&#x30CB;&#x30F3;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x7684;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x5F37;&#x8ABF;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x868A;&#x30CD;&#x30C3;&#x30BF;&#x30A4;&#x30B7;&#x30DE;&#x30AB;&#xFF08;L.&#xFF09;Leucokinin&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x6D41;&#x4F53;&#x6392;&#x6CC4;&#x5F8C;&#x306E;&#x5438;&#x8840;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xC5EC;&#xB7EC; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; (&#xB3D9;&#xC791;, &#xC18C;&#xD654;, diuresis, oogenesis)&#xC758; &#xBAA8;&#xAE30; &#xD544;&#xC694;&#xD55C; &#xD638;&#xB974;&#xBAAC; &#xC870;&#xC815;&#xC5D0; &#xC801;&#xC751; &#xC218; &#xC720; &#xD608;&#xC561;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;. Aedes kinins (leucokinin &#xAC19;&#xC740; neuropeptides) &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xD608;&#xC561; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;,&#xC774; &#xB1E8; &#xC81C; &#xBC0F; myotropic &#xD568;&#xC218;&#xB294; &#xB370; &#xBA39;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC804;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5EC;&#xC131; &#xB192;&#xC740;&#xAC00;&#xACA9;&#xC21C; &#xC720;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC124;, &#xCD5C;&#xC800;&#xC758; &#xC561;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADF8; &#xB4A4;&#xB97C; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4; RNAi kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; in vivo &#xAE30;&#xC5EC; &#xC774;&#xD574; &#xD558; &#xBD84; &#xBE44; &#xBE60;&#xB978; diuresis&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xADFC;&#xBCF8;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC785;&#xC99D; &#xD558;&#xB294; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8;. &#xB610;&#xD55C; Aedes kinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xBAA8;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xC801;&#xC751; &#xC218; &#xC720; &#xD608;&#xC561;&#xC758; &#xC131;&#xACF5;&#xC758; Aedes kinins&#xC758; &#xD1B5;&#xD569; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xAC15;&#xC870; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBAA8;&#xAE30; Aedes aegypti (L.) leucokinin &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xC561;&#xCCB4; &#xBC30;&#xC124; &#xAC8C;&#xC2DC;&#xBB3C; &#xD608;&#xC561; &#xACF5;&#xAE09; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La evoluci&#xF3;n de la adaptaci&#xF3;n de la sangre de alimentaci&#xF3;n de los mosquitos requiere la coordinaci&#xF3;n hormonal de los m&#xFA;ltiples procesos fisiol&#xF3;gicos (comportamiento, la digesti&#xF3;n, la diuresis, la ovog&#xE9;nesis). El Aedes cininas (leucoquinina-como neurop&#xE9;ptidos) est&#xE1;n involucrados en la sangre despu&#xE9;s de la alimentaci&#xF3;n de los procesos fisiol&#xF3;gicos, que tiene funciones diur&#xE9;ticas y myotropic. Para comprender el vivo en la contribuci&#xF3;n de los receptores de cininas de la excreci&#xF3;n total de mujeres de fluido post-prandial, RNAi desmontables fue seguido por los ensayos de la secreci&#xF3;n de fluidos que demostraron su papel fundamental en la diuresis r&#xE1;pida. El receptor de Aedes quinina se localiz&#xF3; tambi&#xE9;n en varios tejidos no reportadas previamente en los mosquitos. Los resultados destacan el papel integrador de las cininas Aedes en el &#xE9;xito de la adaptaci&#xF3;n de la alimentaci&#xF3;n de sangre.

Cymon N. Kersch

Biography

JoVE Journal Publications

Other Publications