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Georgetown University

Georgetown University Medical Center

&#x514B;&#x9686;&#x52A8;&#x7269;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x7684;&#x6838;&#x8F6C;&#x79FB;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x540E;&#x690D;&#x5165;&#x5230;&#x56CA;&#x80DA;&#x9636;&#x6BB5;&#x4F46;&#x6A21;&#x5177;&#x5F00;&#x53D1;&#x3002;Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x5176;&#x53D1;&#x5C55;&#x6F5C;&#x80FD;&#x7684;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x81F3;&#x56CA;&#x80DA;&#x9636;&#x6BB5;&#x548C;&#x8FD8;&#x6B7B;&#x540E;&#x690D;&#x5165;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x5B83;&#x4EEC;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x80DA;&#x80CE;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x57FA;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x79CD;&#x76F8;&#x4F3C;&#x6027;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x5B9A;&#x6709;&#x533A;&#x522B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x672A;&#x80FD;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x771F;&#x6B63;&#x591A;&#x80DA;&#x80CE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x4EBA;&#x53E3;&#x7531;&#x4E8E;&#x6545;&#x969C;&#x6062;&#x590D;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982; Oct4&#x3002;&#x4E3A;&#x4E86;&#x63A2;&#x8BA8;&#x8FD9;&#x4E00;&#x5047;&#x8BBE;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x7845;&#x8BC6;&#x522B;&#x5176;&#x53D1;&#x5C55;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x662F;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684; Oct4 Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4E00;&#x5957;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5F53; Oct4 &#x548C; 10 Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5206;&#x6790;&#x5355;&#x4E2A;&#x5375;&#x4E18;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x56CA;&#x80DA;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709; 62%&#x6B63;&#x786E;&#x8868;&#x8FBE;&#x6240;&#x6709;&#x88AB;&#x6D4B;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;Oct4 &#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x8FD9;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x6062;&#x590D;&#xFF0C;&#x4E0E; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x56CA;&#x80DA;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x63A7;&#x5236;&#x80DA;&#x80CE;&#x901A;&#x5E38;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x503C;&#x5F97;&#x6CE8;&#x610F;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x6548;&#x7387;&#x7684;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6A21;&#x5F0F;&#x4E0E; ES &#x7EC6;&#x80DE;&#x6E90;&#x6027;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x514B;&#x9686;&#x4E00;&#x8BCD;&#x5230;&#x56CA;&#x80DA;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x8868;&#x660E;&#x672A;&#x80FD;&#x91CD;&#x65B0;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B; Oct4 &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x5168;&#x90E8;&#x53EF;&#x80FD;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x5728;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514B;&#x9686;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x81F4;&#x6B7B;&#x3002;

&#x4ECE;&#x4F53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6838;&#x514B;&#x9686; Oct4 &#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x6574;&#x6062;&#x590D;&#x3002;

The majority of cloned animals derived by nuclear transfer from somatic cell nuclei develop to the blastocyst stage but die after implantation. Mouse embryos that lack an Oct4 gene, which plays an essential role in control of developmental pluripotency, develop to the blastocyst stage and also die after implantation, because they lack pluripotent embryonic cells. Based on this similarity, we posited that cloned embryos derived from differentiated cell nuclei fail to establish a population of truly pluripotent embryonic cells because of faulty reactivation of key embryonic genes such as Oct4. To explore this hypothesis, we used an in silico approach to identify a set of Oct4-related genes whose developmental expression pattern is similar to that of Oct4. When expression of Oct4 and 10 Oct4-related genes was analyzed in individual cumulus cell-derived cloned blastocysts, only 62% correctly expressed all tested genes. In contrast to this incomplete reactivation of Oct4-related genes in somatic clones, ES cell-derived cloned blastocysts and normal control embryos expressed these genes normally. Notably, the contrast between expression patterns of the Oct4-related genes correlated with efficiency of embryonic development of somatic and ES cell-derived cloned blastocysts to term. These observations suggest that failure to reactivate the full spectrum of these Oct4-related genes may contribute to embryonic lethality in somatic-cell clones.

Incomplete reactivation of Oct4-related genes in mouse embryos cloned from somatic nuclei.

La majorit&#xE9; des d&#xE9;riv&#xE9;s d&#x26;#39;animaux clon&#xE9;s par transfert nucl&#xE9;aire &#xE0; partir de noyaux de cellules somatiques se d&#xE9;veloppent jusqu&#x26;#39;au stade blastocyste, mais meurent apr&#xE8;s l&#x26;#39;implantation. Les embryons de souris qui n&#x26;#39;ont pas un g&#xE8;ne Oct4, qui joue un r&#xF4;le essentiel dans le contr&#xF4;le de la pluripotence de d&#xE9;veloppement, de d&#xE9;velopper jusqu&#x26;#39;au stade de blastocyste et meurent aussi apr&#xE8;s l&#x26;#39;implantation, parce qu&#x26;#39;ils n&#x26;#39;ont pas des cellules embryonnaires pluripotentes. Sur la base de cette similitude, nous avons pos&#xE9; que les embryons clon&#xE9;s provenant de noyaux de cellules diff&#xE9;renci&#xE9;es ne parviennent pas &#xE0; &#xE9;tablir une population de cellules embryonnaires pluripotentes vraiment en raison de la r&#xE9;activation d&#xE9;fectueuse des principaux g&#xE8;nes embryonnaires tels que Oct4. Pour explorer cette hypoth&#xE8;se, nous avons utilis&#xE9; une approche in silico pour identifier un ensemble de g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; Oct4 dont le d&#xE9;veloppement le mod&#xE8;le d&#x26;#39;expression est similaire &#xE0; celle de Oct4. Lorsque l&#x26;#39;expression de Oct4 et 10 Oct4 li&#xE9;es g&#xE8;nes a &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;e dans les diff&#xE9;rents d&#xE9;riv&#xE9;s de cellules du cumulus blastocystes clon&#xE9;s, seulement 62% ont exprim&#xE9; correctement tous les g&#xE8;nes test&#xE9;s. Contrairement &#xE0; cette r&#xE9;activation incompl&#xE8;te de Oct4 g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; des clones somatiques, les cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es d&#x26;#39;embryons blastocystes clon&#xE9;s et de contr&#xF4;le normales exprim&#xE9; ces g&#xE8;nes normalement. Notamment, le contraste entre les profils d&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; Oct4 en corr&#xE9;lation avec l&#x26;#39;efficacit&#xE9; du d&#xE9;veloppement embryonnaire du somatique et les cellules souches embryonnaires d&#xE9;riv&#xE9;es de blastocystes clon&#xE9;s &#xE0; terme. Ces observations sugg&#xE8;rent que l&#x26;#39;&#xE9;chec de r&#xE9;activer le spectre complet de ces g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; Oct4 peut contribuer &#xE0; une l&#xE9;talit&#xE9; embryonnaire dans somatique clones de cellules.

R&#xE9;activation incompl&#xE8;te de Oct4 g&#xE8;nes li&#xE9;s &#xE0; des embryons de souris clon&#xE9;es &#xE0; partir noyaux somatiques

Unvollst&#xE4;ndige Reaktivierung von Oct4-assoziierter Gene in Maus-Embryonen von somatischen Zellkernen geklont.

La maggior parte degli animali clonati, derivato da trasferimento nucleare da cellule somatiche nuclei si sviluppa a morire allo stadio di blastocisti dopo l&#39;impianto. Gli embrioni del mouse che difettano di un gene Oct4, che svolge un ruolo essenziale nel controllo della pluripotenza evolutiva, sviluppano allo stadio di blastocisti e morire anche dopo l&#39;impianto, perch&eacute; mancano le cellule embrionali pluripotenti. In base a questa somiglianza, abbiamo postulato che gli embrioni clonati derivati dai nuclei delle cellule differenziate non riescono a stabilire una popolazione di veramente le cellule embrionali pluripotenti a causa della riattivazione difettoso dei geni embrionali chiave come Oct4. Per esplorare questa ipotesi, abbiamo utilizzato un in silico approccio per identificare un set di geni correlati a Oct4 cui pattern di espressione evolutiva &egrave; simile a quella di Oct4. Quando espressione di Oct4 e 10 geni correlati a Oct4 &egrave; stato analizzato in cellule derivate blastocisti clonata a cumulus individuale, solo il 62% espresso correttamente testati tutti i geni. Contrariamente a questa riattivazione incompleta dei geni correlati a Oct4 nei cloni somatici, controllo normale embrioni e cellule derivate blastocisti clonate a ES espressero questi geni normalmente. In particolare, il contrasto tra il pattern di espressione dei geni correlati a Oct4 correlati con l&#39;efficienza dello sviluppo embrionale di somatico e cellule derivate ES clonato blastocisti al termine. Queste osservazioni suggeriscono che fallimento per riattivare l&#39;intero spettro di questi geni correlati a Oct4 possa contribuire alla letalit&agrave; embrionale in cloni delle cellule somatiche.

Riattivazione incompleta dei geni correlati a Oct4 in embrioni di topo clonato da nuclei somatici.

&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x6838;&#x79FB;&#x690D;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x304C;&#x6CE8;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x5F8C;&#x306B;&#x6B7B;&#x306C;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5927;&#x534A;&#x3002;&#x767A;&#x9054;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Oct4&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x80DA;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x79FB;&#x690D;&#x5F8C;&#x6B7B;&#x4EA1;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x80DA;&#x304C;&#x539F;&#x56E0;&#x306A;&#x3069;&#x306E;Oct4&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x80DA;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x771F;&#x306E;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x80DA;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96C6;&#x56E3;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;Oct4&#x306E;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30B7;&#x30EA;&#x30B3;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; Oct4&#x3068;10 Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x7A4D;&#x96F2;&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x3053;&#x308D;&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;62&#xFF05;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x306F;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x3068;&#x6B63;&#x5E38;&#x5BFE;&#x7167;&#x306E;&#x80DA;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306B;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x7531;&#x6765;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x80DA;&#x76E4;&#x80DE;&#x306E;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x5316;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E9;&#x30B9;&#x30C8;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x200B;&#x200B;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x30B9;&#x30DA;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x3092;&#x518D;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x80DA;&#x6027;&#x81F4;&#x6B7B;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x6838;&#x304B;&#x3089;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Oct4&#x306E;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x4E0D;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x518D;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;

&#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD575; &#xD575; &#xC774;&#xC2DD;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84; &#xC774;&#xC2DD; &#xD6C4; &#xB2E4; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; blastocyst &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xBC1C;&#xB2EC; pluripotency &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD55C;&#xB2E4;, Oct4 &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBD80;&#xC871; blastocyst &#xB2E8;&#xACC4;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558; &#xACE0; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC; &#xBD80;&#xC871; &#xD558;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xB610;&#xD55C; &#xC8FC;&#xC785;, &#xD6C4;&#xC5D0; &#xC8FD;&#xB294;. &#xC774; &#xC720;&#xC0AC;&#xC131;&#xC744; &#xBC14;&#xD0D5;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xB41C; &#xBC30;&#xC544; Oct4 &#xB4F1; &#xC8FC;&#xC694; &#xBC30;&#xC544; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xACB0;&#xD568;&#xC774; &#xC7AC; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xC9C4;&#xC815;&#xD55C; &#xB9CC;&#xB2A5; &#xBC30;&#xC544; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC778;&#xAD6C;&#xB97C; &#xD655;&#xB9BD; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD558;&#xB294; posited. &#xC774; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xD0D0;&#xD5D8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC2DC;&#xB0B4; silico &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD328;&#xD134;&#xC740; Oct4 &#xBE44;&#xC2B7;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4; Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC9D1;&#xD569;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xB294; &#xC811;&#xADFC;. &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC801; &#xC6B4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xBCF5;&#xC81C; blastocysts Oct4 &#xBC0F; 10 Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;&#xB9CC; 62%&#xB294; &#xC62C;&#xBC14;&#xB974;&#xAC8C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604;. &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860;&#xC5D0; Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC7AC;&#xAC00;&#xB294; &#xB2EC;&#xB9AC; &#xBCF5;&#xC81C; blastocysts ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xBC0F; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC81C;&#xC5B4; &#xBC30;&#xC544; &#xD45C;&#xD604;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;. &#xD2B9;&#xD788;, Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xACFC; &#xC0C1;&#xAD00; &#xC2DD; &#xD328;&#xD134; &#xBC0F; ES &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xB798; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xB300;&#xC870; blastocysts &#xC6A9;&#xC5B4;&#xB97C; &#xBCF5;&#xC81C;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC774; Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC804;&#xCCB4; &#xC2A4;&#xD399;&#xD2B8;&#xB7FC;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD328; &#xC138;&#xD3EC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD074;&#xB860;&#xC5D0; &#xBC30;&#xC544; &#xCE58; &#xC0AC; &#xC728;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; Oct4 &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xBD88;&#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xC7AC; &#xCCB4;&#xC138;&#xD3EC; &#xD575;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La mayor&#xED;a de los derivados de animales clonados por transferencia nuclear a partir de n&#xFA;cleos de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas desarrollarse hasta el estadio de blastocisto, pero que mueren despu&#xE9;s de la implantaci&#xF3;n. Los embriones de rat&#xF3;n que carecen de un gen Oct4, que desempe&#xF1;a un papel esencial en el control de la pluripotencia de desarrollo, el desarrollo de la fase de blastocisto y tambi&#xE9;n mueren despu&#xE9;s de la implantaci&#xF3;n, debido a que carecen de c&#xE9;lulas embrionarias pluripotentes. Sobre la base de esta semejanza, que postulaba que los embriones clonados procedentes de n&#xFA;cleos de las c&#xE9;lulas diferenciadas no logran establecer una poblaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas embrionarias pluripotentes, porque realmente la reactivaci&#xF3;n de falla de los principales genes embrionarios como Oct4. Para explorar esta hip&#xF3;tesis, hemos utilizado un m&#xE9;todo in silico para identificar un conjunto de genes relacionados con el Oct4 cuyo desarrollo es el patr&#xF3;n de expresi&#xF3;n similar a la de Oct4. Cuando la expresi&#xF3;n de Oct4 y 10 relacionados con los genes Oct4 se analiz&#xF3; en c&#xFA;mulos individuales derivadas de blastocistos clonados de c&#xE9;lulas, s&#xF3;lo el 62% expresado correctamente todos los genes probados. En contraste con esta reactivaci&#xF3;n incompleta de Oct4 relacionadas con los genes en los clones som&#xE1;tica, ES c&#xE9;lulas derivadas de blastocistos clonados y embriones normales de control de estos genes expresados &#x200B;&#x200B;normalmente. En particular, el contraste entre los patrones de expresi&#xF3;n de los genes Oct4-correlaci&#xF3;n con la eficiencia del desarrollo embrionario de la c&#xE9;lula som&#xE1;tica y ES derivadas de blastocistos clonados a largo plazo. Estas observaciones sugieren que la falta de reactivaci&#xF3;n de todo el espectro de estos genes Oct4 relacionados pueden contribuir a la letalidad embrionaria en los clones de c&#xE9;lulas som&#xE1;ticas.

Reactivaci&#xF3;n incompleta de genes relacionados con el Oct4 en embriones de rat&#xF3;n clonado a partir de n&#xFA;cleos som&#xE1;ticos

Caspase family proteases play important roles in the regulation of apoptotic cell death. Initiator caspases are activated in response to death stimuli, and they transduce and amplify these signals by cleaving and thereby activating effector caspases. In Drosophila, the initiator caspase Nc (previously Dronc) cleaves and activates two short-prodomain caspases, Dcp-1 and Ice (previously Drice), suggesting these as candidate effectors of Nc killing activity. dcp-1-null mutants are healthy and possess few defects in normally occurring cell death. To explore roles for Ice in cell death, we generated and characterized an Ice null mutant. Animals lacking Ice show a number of defects in cell death, including those that occur during embryonic development, as well as during formation of adult eyes, arista and wings. Ice mutants exhibit subtle defects in the destruction of larval tissues, and do not prevent destruction of salivary glands during metamorphosis. Cells from Ice animals are also markedly resistant to several stresses, including X-irradiation and inhibition of protein synthesis. Mutations in Ice also suppress cell death that is induced by expression of Rpr, Wrinkled (previously Hid) and Grim. These observations demonstrate that Ice plays an important non-redundant role as a cell death effector. Finally, we demonstrate that Ice participates in, but is not absolutely required for, the non-apoptotic process of spermatid differentiation.

The Drosophila caspase Ice is important for many apoptotic cell deaths and for spermatid individualization, a nonapoptotic process.

&#x665A;&#x53D1;&#x6027;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A81;&#x51FA;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x6613;&#x635F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EA0;&#x7F20;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x79EF;&#x7D2F;&#x3002;&#x5F53;&#x7EA0;&#x7F20;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x538B;&#x5012;&#x964D;&#x89E3;&#x9014;&#x5F84;&#x65F6;&#xFF0C;&#x5176;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6BD2;&#x6027;&#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;&#x6709;&#x8FB1;&#x4EBA;&#x683C;&#x7684;&#x7EA0;&#x7F20;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x673A;&#x5236;&#x5305;&#x62EC;&#x6CDB;&#x7D20;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x7CFB;&#x7EDF; &#xFF08;UPS&#xFF09;&#x3001; &#x6CDB;&#x7D20;&#x5316;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x548C;&#x81EA;&#x566C;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x975E;&#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x964D;&#x89E3;&#x9014;&#x5F84;&#x3001; &#x6EB6;&#x9176;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x964D;&#x89E3;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;UPS &#x548C;&#x81EA;&#x566C;&#x957F;&#x5DF2;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x8865;&#x5145;&#x9000;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x6CA1;&#x6709;&#x4EA4;&#x96C6;&#x70B9;&#x3002;&#x6B64;&#x89C6;&#x56FE;&#x5DF2;&#x53D7;&#x5230;&#x6697;&#x793A;&#x660E;&#x663E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x610F;&#x89C1;&#xFF1A; UPS &#x7684;&#x635F;&#x4F24;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x81EA;&#x566C;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x53CA;&#x6709;&#x6761;&#x4EF6;&#x6316;&#x7A7A;&#x7684;&#x81EA;&#x566C;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5927;&#x8111;&#x5BFC;&#x81F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x4E0E;&#x6CDB;&#x7D20;&#x9633;&#x6027;&#x75C5;&#x7406;&#x3002;&#x5B83;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x662F;&#x5426;&#x81EA;&#x566C;&#x662F;&#x4E25;&#x683C;&#x5E73;&#x884C;&#x7684;&#x9000;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x6216;&#x662F;&#x5426;&#x8865;&#x507F;&#x6027;&#x9000;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x65F6;&#xFF0C;UPS &#x662F;&#x53D7;&#x635F; &#xFF1B;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5982;&#x679C;&#x6709;&#x8865;&#x507F;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x77E5;&#x9053;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x81EA;&#x566C;&#x884C;&#x4E3A;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x79CD;&#x8865;&#x507F;&#x6027;&#x9000;&#x5316;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5F53; UPS &#x9ED1;&#x8179;&#x679C;&#x8747;&#x4E2D;&#x53D7;&#x635F;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x53BB;&#x4E59;&#x9170; 6 (HDAC6) polyubiquitinated &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x8FDB;&#x884C;&#x4EA4;&#x4E92;&#x7684;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x76F8;&#x5173;&#x4E59;&#x9170;&#x662F;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6216;&#x7F3A;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8865;&#x507F;&#x6027;&#x7684;&#x4E92;&#x52A8;&#x73AF;&#x8282;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BE5;&#x8865;&#x507F;&#x81EA;&#x566C;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7A81;&#x53D8;&#x5F71;&#x54CD;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;&#x4F53;&#x54CD;&#x5E94;&#x548C;&#x54CD;&#x5E94; UPS &#x635F;&#x4F24;&#x795E;&#x7ECF;&#x9000;&#x884C;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5; spinobulbar &#x808C;&#x840E;&#x7F29;&#x98DE;&#x6A21;&#x578B;&#x4E2D;&#x3002;&#x81EA;&#x566C; HDAC6 &#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x5728; UPS &#x529F;&#x80FD;&#x635F;&#x5BB3;&#x7684;&#x8865;&#x507F;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;HDAC6 &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x662F;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x62EF;&#x6551;&#x53D8;&#x6027;&#x4E0E; UPS &#x529F;&#x80FD;&#x969C;&#x788D;&#x4F53;&#x5185;&#x81EA;&#x566C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x65B9;&#x5F0F;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x7684;&#x8F7B;&#x5EA6;&#x81EA;&#x566C;&#x7684; &#xFF08;&#x4F8B;&#x5982;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x8001;&#x5316;&#x6216;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5F02;) &#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x53D1;&#x5C55;&#x6210;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;Morover&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0; HDAC6 &#x52A0;&#x5F3A;&#x81EA;&#x566C;&#x4ECB;&#x5165;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#x3002;

HDAC6 &#x8425;&#x6551;&#x795E;&#x7ECF;&#x53D8;&#x6027;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x81EA;&#x566C;&#x4E0E; UPS &#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x8054;&#x7CFB;&#x3002;

A prominent feature of late-onset neurodegenerative diseases is accumulation of misfolded protein in vulnerable neurons. When levels of misfolded protein overwhelm degradative pathways, the result is cellular toxicity and neurodegeneration. Cellular mechanisms for degrading misfolded protein include the ubiquitin-proteasome system (UPS), the main non-lysosomal degradative pathway for ubiquitinated proteins, and autophagy, a lysosome-mediated degradative pathway. The UPS and autophagy have long been viewed as complementary degradation systems with no point of intersection. This view has been challenged by two observations suggesting an apparent interaction: impairment of the UPS induces autophagy in vitro, and conditional knockout of autophagy in the mouse brain leads to neurodegeneration with ubiquitin-positive pathology. It is not known whether autophagy is strictly a parallel degradation system, or whether it is a compensatory degradation system when the UPS is impaired; furthermore, if there is a compensatory interaction between these systems, the molecular link is not known. Here we show that autophagy acts as a compensatory degradation system when the UPS is impaired in Drosophila melanogaster, and that histone deacetylase 6 (HDAC6), a microtubule-associated deacetylase that interacts with polyubiquitinated proteins, is an essential mechanistic link in this compensatory interaction. We found that compensatory autophagy was induced in response to mutations affecting the proteasome and in response to UPS impairment in a fly model of the neurodegenerative disease spinobulbar muscular atrophy. Autophagy compensated for impaired UPS function in an HDAC6-dependent manner. Furthermore, expression of HDAC6 was sufficient to rescue degeneration associated with UPS dysfunction in vivo in an autophagy-dependent manner. This study suggests that impairment of autophagy (for example, associated with ageing or genetic variation) might predispose to neurodegeneration. Morover, these findings suggest that it may be possible to intervene in neurodegeneration by augmenting HDAC6 to enhance autophagy.

HDAC6 rescues neurodegeneration and provides an essential link between autophagy and the UPS.

Une caract&#xE9;ristique marquante de la fin d&#x26;#39;apparition des maladies neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratives est l&#x26;#39;accumulation de prot&#xE9;ines mal repli&#xE9;es dans les neurones vuln&#xE9;rables. Lorsque les niveaux de prot&#xE9;ines mal repli&#xE9;es submerger les voies de d&#xE9;gradation, le r&#xE9;sultat est la toxicit&#xE9; cellulaire et de la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence. M&#xE9;canismes cellulaires pour prot&#xE9;ines mal repli&#xE9;es d&#xE9;gradants incluent le syst&#xE8;me ubiquitine-prot&#xE9;asome (UPS), le principal non lysosomale voie de d&#xE9;gradation des prot&#xE9;ines ubiquitin&#xE9;es, et l&#x26;#39;autophagie, une voie de d&#xE9;gradation m&#xE9;di&#xE9;e par lysosome. L&#x26;#39;onduleur et l&#x26;#39;autophagie ont longtemps &#xE9;t&#xE9; consid&#xE9;r&#xE9;s comme des syst&#xE8;mes de d&#xE9;gradation compl&#xE9;mentaires sans point d&#x26;#39;intersection. Ce point de vue a &#xE9;t&#xE9; contest&#xE9; par deux observations sugg&#xE8;rent une interaction apparente: l&#x26;#39;alt&#xE9;ration de l&#x26;#39;UPS induit l&#x26;#39;autophagie in vitro, et knock-out conditionnel de l&#x26;#39;autophagie dans le cerveau de souris conduit &#xE0; la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence avec l&#x26;#39;ubiquitine-positives pathologie. On ne sait pas si l&#x26;#39;autophagie est strictement un syst&#xE8;me de d&#xE9;gradation parall&#xE8;le, ou s&#x26;#39;il s&#x26;#39;agit d&#x26;#39;un syst&#xE8;me de d&#xE9;gradation compensatoire lorsque l&#x26;#39;onduleur est alt&#xE9;r&#xE9;e; en outre, s&#x26;#39;il ya une interaction entre ces syst&#xE8;mes de compensation, le lien mol&#xE9;culaire n&#x26;#39;est pas connue. Ici, nous montrons que les actes que l&#x26;#39;autophagie un syst&#xE8;me de d&#xE9;gradation compensatoire lorsque l&#x26;#39;onduleur est alt&#xE9;r&#xE9;e chez Drosophila melanogaster, et que histone d&#xE9;sac&#xE9;tylase 6 (HDAC6), une d&#xE9;sac&#xE9;tylase associ&#xE9;e aux microtubules qui interagit avec les prot&#xE9;ines polyubiquitinated, est un maillon essentiel dans cette interaction m&#xE9;canique compensatoire. Nous avons constat&#xE9; que l&#x26;#39;autophagie a &#xE9;t&#xE9; compensatoire induite en r&#xE9;ponse &#xE0; des mutations affectant le prot&#xE9;asome et en r&#xE9;ponse &#xE0; une insuffisance UPS dans un mod&#xE8;le de la mouche de la maladie neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rative spinobulbar atrophie musculaire. L&#x26;#39;autophagie compens&#xE9; UPS alt&#xE9;ration de la fonction d&#x26;#39;une mani&#xE8;re HDAC6-d&#xE9;pendante. En outre, l&#x26;#39;expression de HDAC6 est suffisante pour arracher la d&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence associ&#xE9;e &#xE0; un dysfonctionnement onduleur in vivo de mani&#xE8;re autophagie-d&#xE9;pendante. Cette &#xE9;tude sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;affaiblissement de l&#x26;#39;autophagie (par exemple, associ&#xE9;e &#xE0; la variation du vieillissement ou g&#xE9;n&#xE9;tique) pourraient pr&#xE9;disposer &#xE0; la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence. Morover, ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il peut &#xEA;tre possible d&#x26;#39;intervenir dans la neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence en augmentant HDAC6 pour am&#xE9;liorer l&#x26;#39;autophagie.

HDAC6 Rescues neurod&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;rescence et fournit un lien essentiel entre l&#x26;#39;autophagie et l&#x26;#39;onduleur

Una caracter&#xED;stica destacada de aparici&#xF3;n tard&#xED;a enfermedades neurodegenerativas es la acumulaci&#xF3;n de prote&#xED;na mal plegada en las neuronas vulnerables. Cuando los niveles de prote&#xED;na mal plegada saturar las v&#xED;as de degradaci&#xF3;n, el resultado es la toxicidad celular y la neurodegeneraci&#xF3;n. Mecanismos celulares de la prote&#xED;na mal plegada degradantes incluyen el sistema ubiquitina-proteasoma (UPS), el principal no lisosomal v&#xED;a de degradaci&#xF3;n de las prote&#xED;nas ubiquitina, y la autofagia, una v&#xED;a de degradaci&#xF3;n mediada por lisosoma. El SAI y la autofagia han sido vistos como sistemas complementarios de la degradaci&#xF3;n, sin punto de intersecci&#xF3;n. Esta visi&#xF3;n ha sido cuestionada por dos observaciones que sugieren una aparente interacci&#xF3;n: el deterioro de la UPS induce autofagia in vitro, y knock-out condicional de la autofagia en el cerebro de los ratones conduce a la neurodegeneraci&#xF3;n con ubiquitina-positiva patolog&#xED;a. No se sabe si la autofagia es estrictamente un sistema de degradaci&#xF3;n paralelo, o si se trata de un sistema de degradaci&#xF3;n compensatoria cuando la UPS est&#xE1; deteriorado, por otro lado, si hay una interacci&#xF3;n de compensaci&#xF3;n entre estos sistemas, el enlace molecular no se conoce. Aqu&#xED; nos muestran que los actos de la autofagia como la degradaci&#xF3;n del sistema de compensaci&#xF3;n cuando el SAI est&#xE1; alterada en la Drosophila melanogaster, y que la histona deacetilasa 6 (HDAC6), un deacetilasa asociada a los microt&#xFA;bulos que interact&#xFA;a con las prote&#xED;nas polyubiquitinated, es un eslab&#xF3;n esencial en esta interacci&#xF3;n mec&#xE1;nica compensatoria. Hemos encontrado que compensatoria autofagia fue inducida en respuesta a las mutaciones que afectan el proteasoma y en respuesta a un deterioro de UPS en un modelo de mosca de la enfermedad neurodegenerativa espinobulbar atrofia muscular. La autofagia compensados &#x200B;&#x200B;por UPS deterioro de la funci&#xF3;n de una manera HDAC6-dependiente. Adem&#xE1;s, la expresi&#xF3;n de HDAC6 era suficiente para rescatar degeneraci&#xF3;n asociada con la disfunci&#xF3;n de UPS in vivo en una manera dependiente de la autofagia. Este estudio sugiere que el deterioro de la autofagia (por ejemplo, asociados con la variaci&#xF3;n de la edad o gen&#xE9;tica) podr&#xED;a predisponer a la neurodegeneraci&#xF3;n. Cabe agregar que estos hallazgos sugieren que es posible intervenir en la neurodegeneraci&#xF3;n mediante el aumento de HDAC6 para aumentar la autofagia.

HDAC6 Rescates Neurodegeneraci&#xF3;n y proporciona un v&#xED;nculo esencial entre la autofagia y la UPS

Eine sp&auml;t beginnende neurodegenerativer Erkrankungen ist Ansammlung von misfolded Protein in gef&auml;hrdeten Neuronen. Wenn Ebenen von misfolded Protein Degradations Wege &uuml;berw&auml;ltigen, ist das Ergebnis zellul&auml;re Toxizit&auml;t und Neurodegeneration. Zellul&auml;re Mechanismen f&uuml;r die erniedrigende misfolded Protein enthalten das Ubiquitin-Proteasom-System (UPS), die wichtigsten nicht-lysosomal Degradations-Bahn f&uuml;r Ubiquitinated Proteine und Autophagy, ein Lysosom-vermittelte Degradations Weg. Die UPS und Autophagy haben lange als erg&auml;nzende Abbau Systeme ohne Punkt Schnittpunkt angesehen. Diese Ansicht hat durch zwei Beobachtungen schl&auml;gt eine scheinbare Interaktion herausgefordert worden: Beeintr&auml;chtigung der USV induziert Autophagy in-vitro- und bedingte Autophagy im Gehirn Maus-ko f&uuml;hrt zu Neurodegeneration mit Ubiquitin-Positive Pathologie. Es ist nicht bekannt, ob Autophagy streng eine parallele Abbau-System ist oder ob es eine kompensatorische Erniedrigung-System ist, wenn die UPS beeintr&auml;chtigt wird; Dar&uuml;ber hinaus existiert eine kompensatorische Wechselwirkung zwischen diesen Systemen, ist die molekulare Verbindung nicht bekannt. Hier zeigen wir, dass diese Autophagy fungiert als eine kompensatorische Erniedrigung-System, wenn die UPS in Drosophila Melanogaster beeintr&auml;chtigt ist, und dass Histon-Deacetylase 6 (HDAC6), eine Microtubule-verbundenen Deacetylase, die mit Polyubiquitinated Proteine, interagiert ein wesentliches mechanistische Glied in dieser kompensatorische Wechselwirkung ist. Wir fanden, dass diese kompensatorische Autophagy als Reaktion auf Mutationen der Proteasom und als Reaktion auf UPS Beeintr&auml;chtigung in einem fliegen-Modell von der Neurodegenerative Krankheit Spinobulbar Muskelatrophie verursacht wurde. Autophagy gest&ouml;rter UPS-Funktion in HDAC6-abh&auml;ngigen Weise kompensiert. Dar&uuml;ber hinaus war Ausdruck der HDAC6 ausreicht, um die Entartung verbunden mit UPS Dysfunktion in-vivo Autophagy-abh&auml;ngigen Weise zu retten. Diese Studie legt nahe, dass Wertminderung von Autophagy (z. B. zugeordnete &Uuml;beralterung oder genetische Variation) k&ouml;nnte zu Neurodegeneration pr&auml;disponieren. Au&szlig;erdem, schlagen diese Erkenntnisse, dass es m&ouml;glich ist, durch eine Verst&auml;rkung der HDAC6 zur Verbesserung der Autophagy Neurodegeneration einzugreifen.

HDAC6 rettet Neurodegeneration und stellt ein wesentliches Glied zwischen Autophagy und der USV.

Una caratteristica importante delle malattie neurodegenerative ad esordio tardivo &egrave; accumulo di proteina malpiegata nei neuroni vulnerabili. Quando i livelli di proteina malpiegata sopraffanno vie di degradazione, il risultato &egrave; la neurodegenerazione e tossicit&agrave; cellulare. Meccanismi cellulari per degradare la proteina malpiegata includono il sistema ubiquitina-proteasoma (UPS), il principale pathway degradazione lisosomiale-non per proteine ubiquitarie e autophagy, un percorso di degradazione mediata dal lisosoma. L&#39;UPS e autophagy lungamente sono state considerate come sistemi complementari di degradazione con nessun punto di intersezione. Questa vista &egrave; stata contestata da due osservazioni, suggerendo un&#39;apparente interazione: compromissione dell&#39;UPS induce autophagy in vitro, e knockout condizionale di autophagy nel cervello del mouse porta alla neurodegenerazione con patologia ubiquitina-positivi. Non &egrave; noto se autophagy &egrave; rigorosamente un sistema parallelo degrado, o se &egrave; un sistema compensativo degradazione quando l&#39;UPS &egrave; compromessa; Inoltre, se vi &egrave; un&#39;interazione tra questi sistemi compensativi, il legame molecolare non &egrave; noto. Qui vi mostriamo che autophagy agisce come un sistema di degradazione compensativa quando l&#39;UPS &egrave; alterata in Drosophila melanogaster, e quel deacetylase dell&#39;istone 6 (HDAC6), un deacetylase microtubule-associated che interagisce con le proteine polyubiquitinated, &egrave; un collegamento meccanicistico essenziale in questa interazione compensativo. Abbiamo trovato che autophagy compensativa &egrave; stata indotta in risposta a mutazioni che colpiscono il proteasoma e in risposta alla svalutazione di UPS in un modello fly di atrofia muscolare neurodegenerative malattia spinobulbar. Autophagy compensata per alterata funzione UPS in modo HDAC6-dipendente. Inoltre, espressione di HDAC6 &egrave; stata sufficiente a salvare la degenerazione associata a disfunzione UPS in vivo in un modo autophagy-dipendente. Questo studio suggerisce che danno di autophagy (associato, ad esempio, variazione genetica o invecchiamento) potrebbe predisporre alla neurodegenerazione. Inoltre, questi risultati suggeriscono che potrebbe essere possibile intervenire nella neurodegenerazione aumentando HDAC6 per migliorare autophagy.

HDAC6 salv&ograve; la neurodegenerazione e fornisce un collegamento essenziale tra autophagy e UPS.

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- &#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#xFF08;UPS&#xFF09;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x975E;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x5206;&#x89E3;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3001;&#x30EA;&#x30BD;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x5206;&#x89E3;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; UPS&#x3068;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x9577;&#x3044;&#x9593;&#x4EA4;&#x5DEE;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x70B9;&#x3067;&#x76F8;&#x88DC;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x89E3;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D3;&#x30E5;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;2&#x89B3;&#x6E2C;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x200B;&#x200B;&#x3066;&#x6311;&#x6226;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#xFF1A;UPS&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3057;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x8133;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B7;&#x30E7;&#x30CA;&#x30EB;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x967D;&#x6027;&#x75C5;&#x7406;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;UPS&#x304C;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306F;&#x53B3;&#x5BC6;&#x306B;&#x5E73;&#x884C;&#x306A;&#x5206;&#x89E3;&#x7CFB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x4EE3;&#x511F;&#x5206;&#x89E3;&#x7CFB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x306F;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x9593;&#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x4F5C;&#x7528;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;UPS&#x306F;&#x3001;&#x30AD;&#x30A4;&#x30ED;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x3067;&#x306F;&#x640D;&#x306A;&#x308F;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x4EE3;&#x511F;&#x5206;&#x89E3;&#x7CFB;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3057;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x30C7;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;6&#xFF08;HDAC6&#xFF09;&#x3001;&#x30DD;&#x30EA;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30C1;&#x30F3;&#x5316;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x95A2;&#x9023;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x4EE3;&#x511F;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x4E0D;&#x53EF;&#x6B20;&#x306A;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x4EE3;&#x511F;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30BD;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x7403;&#x810A;&#x9AC4;&#x6027;&#x7B4B;&#x840E;&#x7E2E;&#x75C7;&#x306E;&#x30CF;&#x30A8;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;UPS&#x306E;&#x969C;&#x5BB3;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x7A81;&#x7136;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;HDAC6&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;&#x969C;&#x5BB3;UPS&#x6A5F;&#x80FD;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x88DC;&#x511F;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;HDAC6&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x4F9D;&#x5B58;&#x7684;&#x306B;in vivo&#x3067;&#x306E;UPS&#x6A5F;&#x80FD;&#x4E0D;&#x5168;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5909;&#x6027;&#x3092;&#x6551;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x306E;&#x6E1B;&#x640D;&#x304C;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;&#x3001;&#x8001;&#x5316;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x7684;&#x5909;&#x7570;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#xFF09;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x306E;&#x7D20;&#x56E0;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; Morover&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x304C;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;HDAC6&#x3092;&#x88DC;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x306B;&#x4ECB;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

HDAC6&#x306F;&#x795E;&#x7D4C;&#x5909;&#x6027;&#x3092;&#x6551;&#x52A9;&#x3057;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A1;&#x30B8;&#x30FC;&#x3068;UPS&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xB2A6;&#xC740; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658;&#xC758; &#xB208;&#xC5D0; &#xB744;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC740; &#xCDE8;&#xC57D; &#xD55C; &#xB274;&#xB7F0; misfolded &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xCD95;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;. Misfolded &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xC555;&#xB3C4; degradative &#xACBD;&#xB85C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xB3C5;&#xC131; &#xBC0F; neurodegeneration &#xACB0;&#xACFC;. Misfolded &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC744; &#xC800;&#xD558; &#xD558;&#xB294; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4;-&#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (UPS), ubiquitinated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; autophagy &#xC8FC;&#xC694; &#xBE44; lysosomal degradative &#xD1B5;&#xB85C;, &#xB9AC;&#xC18C;&#xC880; &#xC911;&#xC7AC; degradative &#xD1B5;&#xB85C; &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. UPS&#xC640; autophagy &#xC624;&#xB798; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C;&#xC758; &#xC694;&#xC810;&#xC740; &#xBCF4;&#xC644; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBCF4;&#xAE30;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xAD00;&#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3C4;&#xC804;&#xC744; &#xBC1B;&#xACE0; &#xC788;&#xB2E4;: UPS&#xC758; &#xC7A5;&#xC560; &#xC720;&#xB3C4; autophagy &#xCCB4; &#xC678;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC950;&#xC758; &#xB1CC;&#xC5D0;&#xC11C; autophagy&#xC758; &#xC870;&#xAC74;&#xBD80; &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; neurodegeneration &#xC720;&#xBE44;&#xD034;&#xD2F4; &#xC591;&#xC131; &#xBCD1; &#xB9AC;&#xC640; &#xB9AC;&#xB4DC;. Autophagy &#xBCD1;&#xB82C; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC5C4;&#xACA9; &#xD558; &#xAC8C; &#xC778;&#xC9C0; &#xB610;&#xB294; UPS &#xC7A5;&#xC560;; &#xB54C; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC800;&#xD558; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC778;&#xC9C0; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB2E4; &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xBD84;&#xC790; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB54C; UPS Drosophila melanogaster&#xC5D0; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; &#xB418;&#xBA70; &#xADF8; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; deacetylase 6 (HDAC6) microtubule &#xAD00;&#xB828; deacetylase polyubiquitinated &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294;&#xC774; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xAE30;&#xACC4; &#xB9C1;&#xD06C; &#xADF8; autophagy&#xC758; &#xC5ED;&#xD560; &#xC800;&#xD558; &#xBCF4;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xADF8; &#xBCF4;&#xC0C1; autophagy &#xC720;&#xB3C4; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC544;&#xC880;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5; &#xBC0F; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD1F4;&#xD589; &#xC131; &#xC9C8;&#xD658; spinobulbar &#xADFC;&#xC721; &#xC704;&#xCD95; &#xC99D;&#xC758; &#xD50C;&#xB77C;&#xC774; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; UPS &#xC7A5;&#xC560;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC;. Autophagy HDAC6 &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC7A5;&#xC560;&#xAC00; UPS &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xC0C1;. &#xB610;&#xD55C;, hdac6&#xC758; &#xC2DD; UPS &#xC7A5;&#xC560; autophagy &#xC885;&#xC18D; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; vivo&#xC640; &#xC5F0;&#xAD00; &#xB41C; &#xBCC0;&#xC131;&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC548; autophagy&#xC758; &#xADF8; &#xC7A5;&#xC560; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xB178;&#xD654; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615;) neurodegeneration&#xC744; predispose &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Morover, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; neurodegeneration&#xC5D0;&#xC11C; autophagy &#xD5A5;&#xC0C1; hdac6&#xC744; &#xBCF4;&#xAC15; &#xD558; &#xC5EC; &#xAC1C;&#xC785;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

HDAC6 neurodegeneration&#xC744; &#xAD6C;&#xCD9C; &#xD558; &#xACE0; autophagy&#xC640; UPS &#xAC04;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Autophagy is a catabolic process that is negatively regulated by growth and has been implicated in cell death. We find that autophagy is induced following growth arrest and precedes developmental autophagic cell death of Drosophila salivary glands. Maintaining growth by expression of either activated Ras or positive regulators of the class I phosphoinositide 3-kinase (PI3K) pathway inhibits autophagy and blocks salivary gland cell degradation. Developmental degradation of salivary glands is also inhibited in autophagy gene (atg) mutants. Caspases are active in PI3K-expressing and atg mutant salivary glands, and combined inhibition of both autophagy and caspases increases suppression of gland degradation. Further, induction of autophagy is sufficient to induce premature cell death in a caspase-independent manner. Our results provide in vivo evidence that growth arrest, autophagy, and atg genes are required for physiological autophagic cell death and that multiple degradation pathways cooperate in the efficient clearance of cells during development.

Growth arrest and autophagy are required for salivary gland cell degradation in Drosophila.

Autophagic cell death is a prominent morphological form of cell death that occurs in diverse animals. Autophagosomes are abundant during autophagic cell death, yet the functional role of autophagy in cell death has been enigmatic. We find that autophagy and the Atg genes are required for autophagic cell death of Drosophila salivary glands. Although caspases are present in dying salivary glands, autophagy is required for complete cell degradation. Further, induction of high levels of autophagy results in caspase-independent autophagic cell death. Our results provide the first in vivo evidence that autophagy and the Atg genes are required for autophagic cell death and confirm that autophagic cell death is a physiological death program that occurs during development.

Autophagy functions in programmed cell death.

Most developmentally programmed cell death in metazoans is mediated by caspases. During Drosophila metamorphosis, obsolete tissues, including the midgut and salivary glands, are removed by programmed cell death [1]. The initiator caspase Dronc and its activator Ark are required for the death of salivary glands, but not for midgut removal [2, 3]. In addition to caspases, complete removal of salivary glands requires autophagy [4]. However, the contribution of autophagy to midgut cell death has not been explored. Examination of combined mutants of the main initiator and effector caspases revealed that the canonical apoptotic pathway is not required for midgut cell death. Further analyses revealed that the caspase Decay is responsible for most of the caspase activity in dying midguts, yet inhibition of this activity has no effect on midgut removal. By contrast, midgut degradation was severely delayed by inhibition of autophagy, and this occurred without a decrease in caspase activity. Surprisingly, the combined inhibition of caspases and autophagy did not result in an additional delay in midgut removal. Together, our results indicate that autophagy, not caspases, is essential for midgut programmed cell death, providing the first in vivo evidence of caspase-independent programmed cell death that requires autophagy despite the presence of high caspase activity.

Autophagy, not apoptosis, is essential for midgut cell death in Drosophila.

&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5E8F;&#x5217;&#x4E2D;&#x7684;&#x65E0;&#x5F00;&#x653E;&#x9605;&#x8BFB;&#x6846;&#x67B6; &#xFF08;ORFs&#xFF09; &#x5F80;&#x5F80;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x7684;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x81EA;&#x7136;&#x4FDD;&#x62A4;&#x533A;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6709;&#x5F88;&#x5C11;&#x6216;&#x6CA1;&#x6709;&#x7EC4;&#x7EC7; EST &#x6216;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x6570;&#x636E;&#x6697;&#x793A;&#x6027;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4EA7;&#x54C1;&#x529F;&#x80FD;&#x3002;&#x7F16;&#x7801;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x53EF;&#x80FD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x9650;&#x5236;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4E13;&#x95E8;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E13;&#x4E1A;&#xFF0C;&#x548C;/&#x6216;&#x7A84; windows &#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x4E00;&#x79CD;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x4E13;&#x95E8;&#x5316;&#x7684;&#x3001; &#x5206;&#x949F;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F66;&#x53A2;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5982;&#x679C;&#x63A5;&#x89E6;&#x808C;&#x8089;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x808C;&#x8089;&#x63A5;&#x5934; &#xFF08;NMJ&#xFF09;&#x3002;&#x7535;&#x52A8;&#x9C7C;&#x96F7; ray &#x9010;&#x6E10;&#x6269;&#x5927; NMJ &#x7ED3;&#x6784;&#x7684;&#x5927;&#x5668;&#x5B98; (&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5668;&#x5B98;&#xFF09;&#xFF0C;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5047;&#x8BBE;&#x8BE5;&#x9C7C;&#x96F7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4F1A;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684; NMJ &#x8868;&#x793A;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x65E0;&#x5BB3;&#x73AF;&#x5883;&#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x3002;&#x5171; 9719 &#x4E3B;&#x8981;&#x8BF1;&#x5BFC; cDNA &#x514B;&#x9686;&#x88AB;&#x6D4B;&#x5E8F;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x786E;&#x5B9A;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8; 44 &#x4EBA; ORFs (&gt; 63%) &#x6C28;&#x57FA;&#x9178;&#x8EAB;&#x4EFD;&#x5230;&#x9C7C;&#x96F7;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6210;&#x7EE9;&#x5355;&#x4E0E;&#x6D53;&#x7F29;&#x7684; mRNA &#x62FC;&#x63A5;&#x56FE;&#x6848; (SH2 &#x548C; pre mRNA &#x526A;&#x63A5;&#x57DF;&#xFF09;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7531;&#x57FA;&#x7840; NMJ myonuclei &#x7EF4;&#x62A4;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x6838;&#x57DF;&#x53EF;&#x80FD;&#x5F88;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x751F;&#x6210;&#x4E24;&#x4E2A;&#x65E0;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x57FA;&#x56E0;&#x6297;&#x4F53; (C19orf29 [&#x679C;&#x8747; cactin] &#x548C; C15orf24) &#x548C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7684;&#x786E;&#x5728;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; NMJ &#x8868;&#x793A;&#x3002;Cactin&#xFF0C;&#x5728;&#x679C;&#x8747;&#xFF0C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x7684;&#x6838;&#x819C;&#x4EE5;&#x53CA; NMJ &#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x6DB2;&#x4E3A; Rel &#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7684;&#x6210;&#x5458;&#x3002;C15orf24 &#x86CB;&#x767D;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7A81;&#x89E6;&#x540E;&#x808C;&#x819C;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x786E;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E13;&#x4E1A;&#x5316;&#x4F7F;&#x7528;&#x8FDB;&#x5316;&#x591A;&#x6837;&#x6027;&#x7684;&#x810F;&#x5668;&#x529F;&#x80FD;&#x548C;&#x8DE8;&#x7269;&#x79CD;&#x7684;&#x6620;&#x5C04;&#x8868;&#x793A;&#x3002;

&#x8FDB;&#x5316;&#x548C;&#x6BD4;&#x8F83;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684;&#x4E9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E13;&#x4E1A;&#x5316;&#xFF1A; EST &#x5E8F;&#x5217;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x9C7C;&#x96F7;&#x53D1;&#x7535;&#x5668;&#x5B98;&#x3002;

Uncharacterized open reading frames (ORFs) in human genomic sequence often show a high degree of evolutionary conservation, yet have little or no tissue EST or protein data suggestive of protein product function. The encoded proteins may have highly restricted expression in specialized cells, subcellular specializations, and/or narrow windows during development. One such highly specialized and minute subcellular compartment is the neuromuscular junction (NMJ), where motorneurons contact muscle fibers. The electric Torpedo ray has evolved to expand the NMJ structure to the size of a large organ (electroplax organ), and we hypothesized that Torpedo electroplax proteins would be candidates for human ESTs expressed at the human NMJ. A total of 9719 primary electroplax cDNA clones were sequenced. We identified 44 human ORFs showing high (>63%) amino acid identity to Torpedo electroplax transcripts with enrichment for mRNA splicing motifs (SH2 and pre-mRNA splicing domains), an observation potentially important for the strict nuclear domains maintained by myonuclei underlying the NMJ. We generated antibodies against two uncharacterized human genes (C19orf29 [Drosophila cactin] and C15orf24) and showed that these were indeed expressed at the murine NMJ. Cactin, a member of the Rel transcription factor family in Drosophila, localized to the postsynaptic cytosol of the NMJ and nuclear membrane. C15orf24 protein localized to the murine postsynaptic sarcolemma. We show a novel approach towards identifying proteins expressed at a subcellular specialization using evolutionary diversity of organ function and cross-species mapping.

Evolution and comparative genomics of subcellular specializations: EST sequencing of Torpedo electric organ.

Non caract&#xE9;ris&#xE9;s cadres de lecture ouverts (ORF) dans la s&#xE9;quence g&#xE9;nomique humaine montrent souvent un degr&#xE9; &#xE9;lev&#xE9; de conservation &#xE9;volutive, encore HNE tissus peu ou pas de donn&#xE9;es sur les prot&#xE9;ines suggestives de la fonction produit prot&#xE9;ique. Les prot&#xE9;ines cod&#xE9;es peut-&#xEA;tre tr&#xE8;s limit&#xE9; d&#x26;#39;expression dans des cellules sp&#xE9;cialis&#xE9;es, les sp&#xE9;cialisations subcellulaires, et / ou Windows &#xE9;troites au cours du d&#xE9;veloppement. Une telle compartiment hautement sp&#xE9;cialis&#xE9;e et les minutes subcellulaire est la jonction neuromusculaire (JNM), o&#xF9; les motoneurones contacter fibres musculaires. Le Torpedo &#xE9;lectrique ray a &#xE9;volu&#xE9; pour d&#xE9;velopper la structure JNM &#xE0; la taille d&#x26;#39;un grand orgue (orgue electroplax), et nous avons suppos&#xE9; que Torpedo prot&#xE9;ines electroplax seraient des candidats pour les TER de l&#x26;#39;homme exprim&#xE9;es lors de la jonction neuromusculaire humaine. Un total de 9719 clones d&#x26;#39;ADNc primaires electroplax ont &#xE9;t&#xE9; s&#xE9;quenc&#xE9;s. Nous avons identifi&#xE9; 44 ORF humains pr&#xE9;sentant &#xE9;lev&#xE9; (&#x26;gt; 63%) identit&#xE9; en acides amin&#xE9;s de torpiller transcriptions electroplax &#xE0; l&#x26;#39;enrichissement pour des motifs &#xE9;pissage de l&#x26;#39;ARNm (SH2 et domaines d&#x26;#39;&#xE9;pissage de pr&#xE9;-ARNm), une observation potentiellement importante pour les domaines nucl&#xE9;aires strictes appliqu&#xE9;es par myonuclei qui sous-tend la JNM . Nous avons g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; des anticorps dirig&#xE9;s contre deux g&#xE8;nes humains non caract&#xE9;ris&#xE9;s (C19orf29 [Drosophila cactin] et C15orf24) et a montr&#xE9; que ces ont en effet &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;e lors de la JNM murin. Cactin, un membre de la famille Rel facteur de transcription chez la drosophile, localis&#xE9;e dans le cytosol postsynaptique de la JNM et la membrane nucl&#xE9;aire. C15orf24 prot&#xE9;ines localis&#xE9;es au sarcolemme murin postsynaptique. Nous montrons une nouvelle approche vers l&#x26;#39;identification des prot&#xE9;ines exprim&#xE9;es &#xE0; une sp&#xE9;cialisation subcellulaire utilisant la diversit&#xE9; de l&#x26;#39;&#xE9;volution de la fonction des organes et entre les esp&#xE8;ces de cartographie.

G&#xE9;nomique comparative et &#xE9;volution des sp&#xE9;cialisations Subcellular: EST S&#xE9;quen&#xE7;age du Torpedo orgue &#xE9;lectrique

Uncharakterisiertes offene Lesung Frames (ORFs) im menschlichen Genom-Sequenz oft zeigen ein hohes Ma&szlig; an evolution&auml;ren Erhaltung, haben aber wenig oder gar kein Gewebe EST oder Protein Daten suggestive der Protein-Produkt-Funktion. Die kodierten Proteine k&ouml;nnen hoch Ausdruck in spezialisierten Zellen, subzellulare Spezialisierungen und/oder schmale Fenster w&auml;hrend der Entwicklung eingeschr&auml;nkt haben. Ein solcher hoch spezialisierte und Minute subzellulare Fach ist der neuromuskul&auml;ren Synapse (NMJ), wo Motorneurons Muskelfasern kontaktieren. Die elektrische Torpedo-Ray hat sich weiterentwickelt, um die NMJ-Struktur auf die Gr&ouml;&szlig;e des ein gro&szlig;es Organ (Electroplax Orgel) zu erweitern, und wir die Hypothese, dass Torpedo Electroplax Proteine Kandidaten f&uuml;r menschliche ESTs ausgedr&uuml;ckt an den menschlichen NMJ w&auml;re. Wurden insgesamt 9719 prim&auml;re Electroplax cDNA Klone sequenziert. Wir 44 menschlichen ORFs zeigen hohe identifiziert (&gt; 63 %) Aminos&auml;ure Identit&auml;t zu Torpedo Electroplax Abschriften mit Bereicherung f&uuml;r mRNA Splei&szlig;en Motive (SH2 und Pre-mRNA-Splei&szlig;en-Dom&auml;nen), eine Beobachtung, die m&ouml;glicherweise wichtig f&uuml;r die strengen atomaren Dom&auml;nen verwaltet von Myonuclei zugrunde liegt die NMJ. Wir haben Antik&ouml;rper gegen zwei uncharakterisiertes menschlicher Gene generiert (C19orf29 [Drosophila Cactin] und C15orf24) und zeigte, dass dies in der Tat bei der murinen NMJ zum Ausdruck gebracht wurden. Cactin, ein Mitglied aus der Familie der Transkription Rel-Faktor in Drosophila, auf die postsynaptisches Zytosol der NMJ und Kernmembrane lokalisiert. C15orf24 Protein in der murinen postsynaptisches Sarkolemm lokalisiert. Wir zeigen einen neuen Ansatz zur Ermittlung der Proteine, die an eine subzellul&auml;re Spezialisierung mit evolution&auml;ren Vielfalt der Organfunktion und Kreuz-Arten-Mapping.

Evolution und vergleichende Genomik subzellulare Spezialisierungen: EST-Sequenzierung der Torpedo elektrische Orgel.

Atipici open reading frame (ORF) nella sequenza genomica umana spesso mostrano un alto grado di conservazione evolutiva, ma hanno poco o nessun tessuto EST o proteina dati suggestivi di funzione della proteina prodotto. Le proteine codificate possono altamente limitata espressione in cellule specializzate, specializzazioni sottocellulare e strette finestre durante lo sviluppo. Un tale comparto sottocellulare altamente specializzato e minuto &egrave; la giunzione neuromuscolare (NMJ), dove i motoneuroni contattare fibre muscolari. Il raggio siluro elettrico si &egrave; evoluta per espandere la struttura NMJ alla dimensione di un grande organo (organo electroplax), e abbiamo ipotizzato che siluro electroplax proteine sarebbe candidati per ESTs umana espressa presso il NMJ umane. Un totale di cloni di cDNA 9719 electroplax primario sono stati sequenziati. Abbiamo individuato 44 ORFs umana mostrando elevate (&amp;gt; 63%) identit&agrave; dell&#39;amminoacido di trascrizioni electroplax siluro con arricchimento per mRNA impionbatura motivi (SH2 e pre-mRNA impionbatura domini), un&#39;osservazione potenzialmente importanti per la rigorose domini nucleare mantenuti da myonuclei sottostanti della NMJ. Abbiamo generato anticorpi contro due geni umani atipici (C19orf29 [drosofila cactin] e C15orf24) e ha dimostrato che questi sono stati infatti espressi presso le NMJ murino. Cactin, un membro della famiglia del fattore di trascrizione Rel in drosofila, localizzata nel citosol postsinaptico delle NMJ e membrana nucleare. C15orf24 proteina localizzata per il sarcolemma postsinaptica murino. Vi mostriamo un nuovo approccio verso identificando le proteine espresse in una specializzazione sottocellulare utilizzando diversit&agrave; evolutiva della funzione dell&#39;organo e la mappatura di cross-specie.

Evoluzione e comparative genomics of sottocellulari specializzazioni: sequenziamento EST dell&#39;organo elettrico Torpedo.

&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C7;&#x30A3;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30E0;&#xFF08;ORF&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3057;&#x3070;&#x3057;&#x3070;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x3001;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x306F;&#x307E;&#x3063;&#x305F;&#x304F;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;EST&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x88FD;&#x54C1;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3059;&#x308B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x307E;&#x3060;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x7684;&#x4FDD;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x7279;&#x6B8A;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x7279;&#x6B8A;&#x5316;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x72ED;&#x3044;&#x30A6;&#x30A3;&#x30F3;&#x30C9;&#x30A6;&#x306B;&#x5F0F;&#x3092;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x306B;&#x5C02;&#x9580;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x533A;&#x753B;&#x306F;motorneurons&#x306F;&#x3001;&#x7B4B;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x306B;&#x9023;&#x7D61;&#x3059;&#x308B;&#x795E;&#x7D4C;&#x7B4B;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#xFF08;NMJ&#xFF09;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x96FB;&#x6C17;&#x9B5A;&#x96F7;&#x7DDA;&#x306F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x3055;&#xFF08;&#x96FB;&#x6C17;&#x677F;&#x5668;&#x5B98;&#xFF09;&#x306B;NMJ&#x69CB;&#x9020;&#x3092;&#x5C55;&#x958B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3001;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x9B5A;&#x96F7;&#x96FB;&#x6C17;&#x677F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x4EBA;&#x9593;&#x306E;NMJ&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x30D2;&#x30C8;EST&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x3068;&#x306A;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x7ACB;&#x3066;&#x305F;&#x3002; 9719&#x4E3B;&#x306A;&#x96FB;&#x6C17;&#x677F;cDNA&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x5408;&#x8A08;&#x306F;&#x3001;&#x914D;&#x5217;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;mRNA&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30E2;&#x30C1;&#x30FC;&#x30D5;&#x306E;&#x6FC3;&#x7E2E;&#xFF08;SH2&#x304A;&#x3088;&#x3073;pre-mRNA&#x30B9;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF09;&#x3001;NMJ&#x306E;&#x57FA;&#x790E;&#x3068;&#x306A;&#x308B;myonuclei&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x6838;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3068;&#x96FB;&#x6C17;&#x677F;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x7523;&#x7269;&#x3092;&#x7C89;&#x7815;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#xFF08;&#x26;gt; 63&#xFF05;&#xFF09;&#x306E;&#x30A2;&#x30DF;&#x30CE;&#x9178;&#x540C;&#x4E00;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3059;44&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x306E;ORF&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;2&#x3064;&#x200B;&#x200B;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#xFF08;C19orf29 [&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;cactin]&#x3068;C15orf24&#xFF09;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x304C;&#x5B9F;&#x969B;&#x306B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;NMJ&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002; Cactin&#x3001;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;rel&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;NMJ&#x3068;&#x6838;&#x819C;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F8C;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30BE;&#x30EB;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3002; C15orf24&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306B;&#x5C40;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x81D3;&#x5668;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3084;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x7A2E;&#x306E;&#x30DE;&#x30C3;&#x30D4;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x591A;&#x69D8;&#x6027;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x5206;&#x696D;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B9;&#x30DA;&#x30B7;&#x30E3;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x9032;&#x5316;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#xFF1A;&#x30C8;&#x30EB;&#x30DA;&#x30C9;&#x96FB;&#x6C17;&#x30AA;&#x30EB;&#x30AC;&#x30F3;&#x306E;EST&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;

&#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAC8C;&#xB188; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; &#xC5F4;&#xB824;&#xC788;&#xB294; &#xB3C5;&#xC11C; &#xD504;&#xB808;&#xC784; (ORFs) &#xC885;&#xC885; &#xC9C4;&#xD654; &#xBCF4;&#xC874;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xD559;&#xC704;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC544;&#xC9C1;&#xC740; &#xAC70;&#xC758; &#xC5C6;&#xAC70;&#xB098; &#xC804;&#xD600; &#xC5C6;&#xB294; &#xC870;&#xC9C1; EST &#xB610;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC81C;&#xD488; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC758; &#xC554;&#xC2DC;. &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB192;&#xC740; &#xC2DD; &#xC804;&#xBB38;&#xB41C; &#xC140;, subcellular &#xC804;&#xBB38;&#xD654; &#xBC0F; &#xC881;&#xC740; &#xC708;&#xB3C4;&#xC6B0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC81C;&#xD55C; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xD2B9;&#xC218; &#xD558; &#xACE0; &#xBD84; subcellular &#xAD6C;&#xD68D; &#xC2E0;&#xACBD; &#xADFC;&#xC721; &#xD559; &#xAD50;&#xCC28;&#xB85C; (NMJ) motorneurons &#xADFC;&#xC721; &#xC12C;&#xC720;&#xB97C; &#xBB38;&#xC758; &#xD558;&#xB294; &#xACF3; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC804;&#xAE30; &#xC5B4; &#xB8B0; &#xB808;&#xC774; NMJ &#xAD6C;&#xC870; &#xB300;&#xD615; &#xC624;&#xB974;&#xAC04; (electroplax &#xAE30;&#xAD00;)&#xC758; &#xD06C;&#xAE30;&#xB97C; &#xD655;&#xC7A5; &#xC9C4;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC5B4; &#xB8B0; electroplax &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; NMJ&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Ests&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xAC00; &#xB420; &#xAC83; &#xC774;&#xB77C;&#xACE0; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC138;&#xC6E0;&#xB2E4;. &#xCD1D; 9719 &#xAE30;&#xBCF8; electroplax cDNA &#xD074;&#xB860; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB192;&#xC740; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0; 44 &#xC778;&#xAC04;&#xC758; Orfs&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DD;&#xBCC4; (&amp;gt; 63%) &#xBAA8;&#xD2F0;&#xD504;&#xB97C; &#xC811;&#xD569; &#xD558;&#xB294; Mrna&#xC5D0; &#xB18D;&#xCD95; &#xB41C; &#xC5B4; &#xB8B0; electroplax &#xC131;&#xC801;&#xD45C;&#xC5D0; &#xC544;&#xBBF8;&#xB178;&#xB97C; &#xD568;&#xC720;&#xD55C; &#xC0B0; &#xC131; &#xC815;&#xCCB4;&#xC131; (SH2 pre mRNA &#xC811;&#xD569; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778; &#xBC0F;), myonuclei&#xB294; NMJ&#xB97C; &#xAE30;&#xBCF8;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xD575; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAD00;&#xCC30;. 2 &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; &#xC778;&#xAC04; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; (C19orf29 [&#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC; cactin] &#xBC0F; C15orf24)&#xC774; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; murine NMJ&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xC5C8;&#xB2E4;. Cactin, &#xCD08;&#xD30C;&#xB9AC;, NMJ &#xD575; &#xB9C9;&#xC758; postsynaptic cytosol &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654;&#xC5D0; Rel &#xC804;&#xC0AC; &#xC694;&#xC18C; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC77C;&#xC6D0;. C15orf24 &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; murine postsynaptic sarcolemma&#xB85C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; subcellular &#xC804;&#xBB38;&#xD654; &#xC9C4;&#xD654; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC7A5;&#xAE30;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBC0F; &#xC885; &#xAC04; &#xB9E4;&#xD551;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB41C; &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Subcellular &#xC804;&#xBB38;&#xD654;&#xC758; &#xC9C4;&#xD654;&#xC640; &#xBE44;&#xAD50; &#xC720;&#xC804;&#xCCB4;&#xD559;: &#xC5B4; &#xB8B0; &#xC804;&#xAE30; &#xC624;&#xB974;&#xAC04;&#xC758; EST&#xC5D0; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2F1; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Caracterizados marcos de lectura abierta (ORF) en la secuencia gen&#xF3;mica humana a menudo muestran un alto grado de conservaci&#xF3;n evolutiva, sin embargo, tienen EST tejido poca o ninguna prote&#xED;na de datos sugestivos de la funci&#xF3;n de prote&#xED;nas del producto. Las prote&#xED;nas codificadas pueden haber muy restringida la expresi&#xF3;n en c&#xE9;lulas especializadas, las especializaciones subcelulares, y / o ventanas estrechas durante el desarrollo. Uno de los compartimentos subcelulares como altamente especializado y minutos es la uni&#xF3;n neuromuscular (UNM), en neuronas motoras en contacto con las fibras musculares. La el&#xE9;ctrica raya torpedo se ha desarrollado para expandir la estructura de NMJ con el tama&#xF1;o de un gran &#xF3;rgano (&#xF3;rgano electroplax), y la hip&#xF3;tesis de que las prote&#xED;nas Torpedo electroplax ser&#xED;an candidatos para las tecnolog&#xED;as ecol&#xF3;gicamente racionales humanas expresadas en la UNM humana. Un total de 9719 clones de ADNc electroplax primarios fueron secuenciados. Se identificaron 44 ORFs humanos que muestran alta (&#x26;gt; 63%) de identidad de amino&#xE1;cidos a Torpedo transcripciones electroplax con el enriquecimiento de los motivos de empalme de ARNm (SH2 y pre-mRNA de empalme dominios), una observaci&#xF3;n potencialmente importante para los dominios estrictos nucleares mantenidos por mion&#xFA;cleos que subyace a la NMJ . Hemos generado anticuerpos contra dos sin caracterizar los genes humanos (C19orf29 [Drosophila cactin] y C15orf24) y muestran que se manifiesta precisamente en la UNM murino. Cactin, un miembro de la familia del factor de transcripci&#xF3;n Rel en Drosophila, localizada en el citosol postsin&#xE1;ptica de la NMJ y la membrana nuclear. C15orf24 prote&#xED;na localizada en el sarcolema postsin&#xE1;ptica murino. Se muestra un nuevo enfoque hacia la identificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas expresadas en una especializaci&#xF3;n subcelular uso de la diversidad evolutiva de la funci&#xF3;n del &#xF3;rgano y la cartograf&#xED;a de especies cruzadas.

Evoluci&#xF3;n y Gen&#xF3;mica Comparada de Especializaciones subcelulares: EST secuencia de Torpedo &#xF3;rgano el&#xE9;ctrico

Transforming growth factor beta (TGF-β) is an important regulator of cell growth, and loss of TGF-β signaling is a hallmark of carcinogenesis. The Smad3/4 adaptor protein β2-spectrin (β2SP) is emerging as a potent regulator of tumorigenesis through its ability to modulate the tumor suppressor function of TGF-β. However, to date the role of the TGF-β signaling pathway at specific stages of the development of hepatocellular carcinoma (HCC), particularly in relation to the activation of other oncogenic pathways, remains poorly delineated. Here we identify a mechanism by which β2SP, a crucial Smad3 adaptor, modulates cyclin dependent kinase 4 (CDK4), cell cycle progression, and suppression of HCC. Increased expression of β2SP inhibits phosphorylation of the retinoblastoma gene product (Rb) and markedly reduces CDK4 expression to a far greater extent than other CDKs and cyclins. Furthermore, suppression of CDK4 by β2SP efficiently restores Rb hypophosphorylation and cell cycle arrest in G(1) . We further demonstrate that β2SP interacts with CDK4 and Smad3 in a competitive and TGF-β-dependent manner. In addition, haploinsufficiency of cdk4 in β2sp(+/-) mice results in a dramatic decline in HCC formation compared to that observed in β2sp(+/-) mice.

Transforming growth factor-β adaptor, β2-spectrin, modulates cyclin dependent kinase 4 to reduce development of hepatocellular cancer.

Human papilloma virus (HPV) is the principal etiological agent of cervical cancer in women, and its DNA is present in virtually all of these tumors. However, exposure to the high-risk HPV types alone is insufficient for tumor development. Identifying specific collaborating factors that will lead to cervical cancer remains an unanswered question, especially because millions of women are exposed to HPV. Our earlier work using an in vitro model indicated that activation of the canonical Wnt pathway in HPV-positive epithelial cells was sufficient to induce anchorage independent growth. We therefore hypothesized that constitutive activation of this pathway might function as the "second hit." To address this possibility, we developed two double-transgenic (DT) mouse models, K14-E7/ΔN87βcat and K14-HPV16/ΔN87βcat that express either the proteins encoded by the E7 oncogene or the HPV16 early region along with constitutively active β-catenin, which was expressed by linking it to the keratin-14 (K14) promoter. We initiated tumor formation by treating all groups with estrogen for six months. Invasive cervical cancer was observed in 11% of the K14-ΔN87βcat mice, expressing activated β-catenin and in 50% of the animals expressing the HPV16 E7 oncogene. In double-transgenic mice, coexpression of β-catenin and HPV16 E7 induced invasive cervical cancer at about 7 months in 94% of the cases. We did not observe cervical cancer in any group unless the mice were treated with estrogen. In the second model, K14-HPV16 mice suffered cervical dysplasias, but this phenotype was not augmented in HPV16/ΔN87βcat mice. In summary, the phenotypes of the K14-E7/ΔN87βcat mice support the hypothesis that activation of the Wnt/β-catenin pathway in HPV-associated premalignant lesions plays a functional role in accelerating cervical carcinogenesis.

Beta-catenin accelerates human papilloma virus type-16 mediated cervical carcinogenesis in transgenic mice.

The role of dietary factors in inhibiting or delaying the development of non-melanoma skin cancer (NMSC) has been investigated for many years. Cardamom, which is a dietary phytoproduct, has been commonly used in cuisines for flavour and has numerous health benefits, such as improving digestion and stimulating metabolism and having antitumorigenic effects. We have investigated the efficacy of dietary cardamom against 7,12-dimethylbenz[a]anthracene (DMBA)-induced skin papillomatogenesis in Swiss albino mice that closely resembles human NMSC. Mice were grouped into normal wild type (untreated), vehicle-treated (acetone), carcinogen-treated (DMBA), and DMBA and cardamom-treated (DMBA+CARD) to delineate the role of cardamom against DMBA-induced papillomatogenesis. Oral administration of cardamom to DMBA-treated mice up-regulated the phase II detoxification enzymes, such as glutathione-S-transferase and glutathione peroxidase, probably via activation of nuclear factor erythroid-2-related factor 2 transcription factor in 'DMBA+CARD' mice. Furthermore, reduced glutathione, glutathione reductase, superoxide dismutase and catalase were also up-regulated by cardamom in the same 'DMBA+CARD' group of mice compared with DMBA-treated mice. Cardamom ingestion in DMBA-treated mice blocked NF-κB activation and down-regulated cyclo-oxygenase-2 expression. As a consequence, both the size and the number of skin papillomas generated on the skin due to the DMBA treatment were reduced in the 'DMBA+CARD' group. Thus, the results from the present study suggest that cardamom has a potential to become a pivotal chemopreventive agent to prevent papillomagenesis on the skin.

Antioxidative effects of the spice cardamom against non-melanoma skin cancer by modulating nuclear factor erythroid-2-related factor 2 and NF-κB signalling pathways.

&#x4E19;&#x70EF;&#x919B; (Acr) &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E0;&#x5904;&#x4E0D;&#x5728;&#x7684;&#x73AF;&#x5883;&#x6C61;&#x67D3;&#x7269;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x4E00;&#x79CD;&#x5185;&#x6E90;&#x6027;&#x7684;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3002;&#x4E19;&#x70EF;&#x919B;&#x884D;&#x751F;&#x7684; 1&#x3001; N 2-propanodeoxyguanosines (Acr dG) &#x90FD;&#x662F; exocyclic DNA &#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x5F62;&#x6210;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x66B4;&#x9732;&#x5377;&#x70DF;&#x70DF;&#x6C14;&#x6216;&#x4ECE;&#x8102;&#x8D28;&#x8FC7;&#x6C27;&#x5316;&#x3002;Acr dG &#x81F4;&#x7A81;&#x53D8;&#x6027;&#x548C;&#x81F4;&#x764C;&#x6027;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6709;&#x7528;&#x7684;&#x751F;&#x7269;&#x6807;&#x5FD7;&#x7269;&#x4E0E;&#x5438;&#x70DF;&#x6216;&#x5176;&#x4ED6;&#x6C27;&#x5316;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#xFF0C;&#x5982;&#x6162;&#x6027;&#x708E;&#x75C7;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x764C;&#x75C7;&#x7684;&#x65E9;&#x671F;&#x53D1;&#x73B0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F00;&#x53D1;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x5229;&#x7528;&#x6210;&#x50CF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x6784;&#x9020;&#x91CF;&#x5316; Acr dG &#x8F6F;&#x4EF6;&#x5728;&#x4EBA;&#x7684;&#x53E3;&#x8154;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x52A0;&#x5408;&#x7269;&#x4F7F;&#x7528;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#x6700;&#x8FD1;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x5355;&#x514B;&#x9686;&#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x68C0;&#x6D4B; HistoRx &#x4E0B;&#x5348;-2000&#x5E74;&#x7684;&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#x3001; &#x81EA;&#x52A8;&#x5316;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x7528;&#x5DF2;&#x77E5;&#x6D53;&#x5EA6;&#x7684; Acr &#x53CC;&#x9C7C;-2B &#x6CBB;&#x7597;&#x652F;&#x6C14;&#x7BA1;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x8FDB;&#x884C;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x3002;&#x7ED3;&#x679C;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x6838;&#x5B9E;&#x4E86; Acr dG &#x4E2D;&#x4F7F;&#x7528;&#x6DB2;&#x76F8;&#x8272;&#x8C31;/&#x4E32;&#x8054;&#x5927;&#x89C4;&#x6A21;&#x5149;&#x8C31;/&#x591A;&#x53CD;&#x5E94;&#x76D1;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x53CC;&#x9C7C; 2B &#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x7684;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x81EA;&#x52A8;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x662F;&#x624B;&#x52A8;&#x8BC4;&#x4EF7;&#x7684;&#x8BA1;&#x6570;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x793A; Acr dG &#x548C;&#x91CF;&#x5316;&#x8367;&#x5149;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x66F4;&#x5FEB;&#x3001; &#x66F4;&#x51C6;&#x786E;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3002;&#x5B83;&#x53EF;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x5176;&#x4ED6;&#x7528;&#x4E8E;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5728;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x3001; &#x4E3B;&#x6587;&#x5316;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5176;&#x4ED6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x3002;

&#x9AD8;&#x541E;&#x5410;&#x91CF;&#xFF0C;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x4E19;&#x70EF;&#x919B;&#x7EC6;&#x80DE; DNA &#x52A0;&#x5408;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x53E3;&#x8154;&#x7EC6;&#x80DE;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x5316;&#x5B66;&#x3002;

Acrolein (Acr) is a ubiquitous environmental pollutant as well as an endogenous compound. Acrolein-derived 1,N(2)-propanodeoxyguanosines (Acr-dG) are exocyclic DNA adducts formed following exposure to cigarette smoke or from lipid peroxidation. Acr-dG is mutagenic and potentially carcinogenic and may represent a useful biomarker for the early detection of cancers related to smoking or other oxidative conditions, such as chronic inflammation. In this study, we have developed a high-throughput, automated method using a HistoRx PM-2000 imaging system combined with MetaMorph software for quantifying Acr-dG adducts in human oral cells by immunohistochemical detection using a monoclonal antibody recently developed by our laboratory. This method was validated in a cell culture system using BEAS-2B human bronchial epithelial cells treated with known concentrations of Acr. The results were further verified by quantitative analysis of Acr-dG in DNA of BEAS-2B cells using a liquid chromatography/tandem mass spectrometry/multiple-reaction monitoring method. The automated method is a quicker, more accurate method than manual evaluation of counting cells expressing Acr-dG and quantifying fluorescence intensity. It may be applied to other antibodies that are used for immunohistochemical detection in tissues as well as cell lines, primary cultures, and other cell types.

High-throughput, quantitative analysis of acrolein-derived DNA adducts in human oral cells by immunohistochemistry.

Acrol&eacute;ine (Acr) est un polluant environnemental omnipr&eacute;sent comme un compos&eacute; endog&egrave;ne. Acrol&eacute;ine d&eacute;riv&eacute;s 1, N 2-propanodeoxyguanosines (Acr-dG) sont exocycliques form&eacute;e apr&egrave;s une exposition &agrave; la fum&eacute;e de cigarette ou de la peroxydation lipidique des adduits d&#39;ADN. ACR-dG est mutag&egrave;ne et potentiellement canc&eacute;rig&egrave;nes et peut-&ecirc;tre repr&eacute;senter un biomarqueur utile pour la d&eacute;tection pr&eacute;coce des cancers li&eacute;s au tabac ou autres conditions oxydatives, telles que l&#39;inflammation chronique. Dans cette &eacute;tude, nous avons d&eacute;velopp&eacute; une m&eacute;thode de haut-d&eacute;bit, automatis&eacute;e &agrave; l&#39;aide d&#39;un syst&egrave;me d&#39;imagerie combin&eacute; avec MetaMorph logiciel pour quantifier l&#39;Acr-dG adduits dans les cellules humaines par voie orale par d&eacute;tection immunohistochimique utilisant un anticorps monoclonal mis au point r&eacute;cemment par notre laboratoire HistoRx PM-2000. Cette m&eacute;thode a &eacute;t&eacute; valid&eacute;e dans un syst&egrave;me de culture cellulaire &agrave; l&#39;aide de BEAS-2 b, les cellules &eacute;pith&eacute;liales bronchiques humaines trait&eacute;es avec des concentrations connues de l&#39;Acr. Les r&eacute;sultats ont &eacute;t&eacute; v&eacute;rifi&eacute;s plus loin par l&#39;analyse quantitative de l&#39;Acr-dG dans l&#39;ADN des cellules BEAS-2 b &agrave; l&#39;aide d&#39;une m&eacute;thode de contr&ocirc;le de chromatographie en phase liquide/tandem mass spectrometry/multiple-r&eacute;action. La m&eacute;thode automatis&eacute;e est une m&eacute;thode plus rapide et plus pr&eacute;cise que l&#39;&eacute;valuation manuelle de comptage de cellules exprimant Acr-dG et quantifier l&#39;intensit&eacute; de la fluorescence. Il peut &ecirc;tre appliqu&eacute; &agrave; d&#39;autres anticorps qui sont utilis&eacute;s pour la d&eacute;tection immunohistochimique de tissus ainsi que les lign&eacute;es cellulaires, cultures primaires et autres types de cellules.

Haut-d&eacute;bit, l&#39;analyse quantitative de l&#39;ADN d&eacute;riv&eacute; acrol&eacute;ine adduits dans les cellules humaines par voie orale par immunohistochimie.

Acrolein (Acr) ist eine allgegenw&auml;rtige Umwelt Schadstoffemissionen sowie eine endogene Substanz. Acrolein abgeleiteten 1, N 2-Propanodeoxyguanosines (Acr-GD) sind EXOCYCLISCHE DNA Addukte gebildeten folgenden Exposition aus Lipidperoxidation oder Zigarettenrauch. ACR-dG ist mutagen und potentiell krebserregend und n&uuml;tzlichen Biomarker f&uuml;r die Fr&uuml;herkennung von Krebserkrankungen, die im Zusammenhang mit Rauchen oder andere oxidativen Bedingungen, wie chronische Entz&uuml;ndung darstellen kann. In dieser Studie haben wir eine hoch-Durchsatz, automatische Methode, die mithilfe einer HistoRx PM-2000-imaging-System mit MetaMorph kombiniert, die Software zur Quantifizierung von Acr-GD in m&uuml;ndlichen Humanzellen durch immunhistochemische Nachweis verwenden einen monoklonalen Antik&ouml;rper, die k&uuml;rzlich von unserem Labor Addukte entwickelt. Diese Methode wurde in einem Zellkultursystem mit BEAS-2B menschliche bronchiale Epithelzellen behandelt mit bekannten Konzentrationen von Acr &uuml;berpr&uuml;ft. Die Ergebnisse wurden weiter durch Quantitative Analyse der Acr-GD in DNA der BEAS-2B mit eine &Uuml;berwachungsmethode f&uuml;r die fl&uuml;ssige Chromatographie/Tandem-Massen-Spektrometrie/Multiple-Reaktion &uuml;berpr&uuml;ft. Das automatisierte Verfahren ist eine schnellere und genauere Methode als manuellen Auswertung z&auml;hlen Zellen auszudr&uuml;cken Acr-GD und Fluoreszenz-Intensit&auml;t zu quantifizieren. Es kann auf andere Antik&ouml;rper angewendet werden, die f&uuml;r die immunhistochemische Detektion in Geweben und Zelllinien, Prim&auml;rkulturen, sowie andere Zelltypen verwendet werden.

Hochdurchsatz-Addukte Quantitative Analyse von Acrolein abgeleitete DNA in den menschlichen Zellen der m&uuml;ndlichen von Immunohistochemistry.

Acroleina (Acr) &egrave; un inquinante ambientale onnipresente come pure un composto endogeno. 1 Derivata acroleina, N. 2-propanodeoxyguanosines (Acr-dG) sono exocyclic DNA addotti formato seguente esposizione al fumo di sigaretta o dalla perossidazione lipidica. ACR-dG &egrave; potenzialmente cancerogeni e mutageni e pu&ograve; rappresentare un utile biomarcatore per la diagnosi precoce dei tumori correlati al fumo o altre condizioni ossidativi, come l&#39;infiammazione cronica. In questo studio, abbiamo sviluppato un metodo di alto-rendimento, automatizzato utilizzando un sistema di imaging combinato con MetaMorph software per quantificare Acr-dG addotti nelle cellule umane orale di rilevazione immunohistochemical usando un anticorpo monoclonale recentemente sviluppato dal nostro laboratorio HistoRx PM-2000. Questo metodo &egrave; stato validato in un sistema di coltura cellulare utilizzando BEAS-2B cellule epiteliali bronchiali umane trattate con concentrazioni note di Acr. I risultati sono stati verificati ulteriori di analisi quantitativa di Acr-dG nel DNA delle cellule BEAS-2B, utilizzando un metodo monitoraggio di cromatografia liquida/tandem mass spectrometry e multiple-reazione. Il metodo automatizzato &egrave; un metodo pi&ugrave; veloce, pi&ugrave; accurato di valutazione manuale del conteggio cellule che esprimono Acr-dG e quantificare l&#39;intensit&agrave; di fluorescenza. Pu&ograve; essere applicato ad altri anticorpi che sono utilizzati per la rilevazione immunohistochemical in tessuti come pure linee cellulari, colture primarie e altri tipi di cellule.

High-throughput, analisi quantitativa di DNA derivati da Acroleina addotti nelle cellule umane orale da immunohistochemistry.

&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3; &#xFF08;Acr&#xFF09; &#x306F;&#x3001;&#x30E6;&#x30D3;&#x30AD;&#x30BF;&#x30B9;&#x74B0;&#x5883;&#x6C5A;&#x67D3;&#x7269;&#x8CEA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x5185;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x6D3E;&#x751F; 1 N 2-propanodeoxyguanosines &#xFF08;Acr dG&#xFF09; &#x306F; exocyclic DNA &#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x66B4;&#x9732;&#x305F;&#x3070;&#x3053;&#x306E;&#x7159;&#x3084;&#x8102;&#x8CEA;&#x904E;&#x9178;&#x5316;&#x53CD;&#x5FDC;&#x304B;&#x3089;&#x3002;Acr dG &#x306F;&#x5909;&#x7570;&#x539F;&#x6027;&#x3068;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x764C;&#x3042;&#x308A;&#x55AB;&#x7159;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6162;&#x6027;&#x7684;&#x306A;&#x708E;&#x75C7;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x9178;&#x5316;&#x6761;&#x4EF6;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x764C;&#x306E;&#x65E9;&#x671F;&#x767A;&#x898B;&#x306E;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x30D0;&#x30A4;&#x30AA; &#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x3092;&#x8868;&#x3059;&#x5834;&#x5408;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;, &#x4E45;&#x4E07; Acr dG &#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30BD;&#x30D5;&#x30C8;&#x30A6;&#x30A7;&#x30A2;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x5BA4;&#x3067;&#x8FD1;&#x5E74;&#x30E2;&#x30CE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CA;&#x30EB;&#x6297;&#x4F53;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x691C;&#x51FA;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x53E3;&#x8154;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0; &#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3068;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066; HistoRx &#x5348;&#x5F8C;-2000&#x5E74;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x3001;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x306F;&#x6B21;&#x306E;&#x3068;&#x304A;&#x308A;&#x3068; 2 b &#x306E;&#x3072;&#x3068;&#x6C17;&#x7BA1;&#x652F;&#x4E0A;&#x76AE;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x51E6;&#x7406; Acr &#x306E;&#x65E2;&#x77E5;&#x6FC3;&#x5EA6;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x990A;&#x7CFB;&#x3067;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B; Acr dG &#x306E;&#x6DB2;&#x4F53;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C8;&#x30B0;&#x30E9;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;/&#x30BF;&#x30F3;&#x30C7;&#x30E0;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x6CD5;/&#x8907;&#x6570;&#x53CD;&#x5FDC;&#x306E;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x624B;&#x6CD5;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x6B21;&#x306E;&#x3068;&#x304A;&#x308A;&#x3068; 2 b &#x7D30;&#x80DE;&#x306E; DNA &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x81EA;&#x52D5;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E; Acr dG &#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3057;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x624B;&#x52D5;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3088;&#x308A;&#x901F;&#x304F;&#x3088;&#x308A;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7D44;&#x7E54;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3001;&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA; &#x30AB;&#x30EB;&#x30C1;&#x30E3;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x578B;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x7D44;&#x7E54;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x691C;&#x51FA;&#x7528;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305D;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x6297;&#x4F53;&#x306B;&#x9069;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9AD8;&#x30B9;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x4ED8;&#x52A0;&#x4F53;&#x3072;&#x3068;&#x53E3;&#x8154;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30ED;&#x30EC;&#x30A4;&#x30F3;&#x7531;&#x6765; DNA &#x306E;&#x5B9A;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3002;

Acrolein (Acr) &#xC0DD; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC11C; &#xC720;&#xBE44;&#xCFFC;&#xD130;&#xC2A4; &#xD658;&#xACBD; &#xC624;&#xC5FC; &#xBB3C;&#xC9C8; &#xC774;&#xB2E4;. Acrolein &#xD30C;&#xC0DD; 1 N (2)-propanodeoxyguanosines (Acr-dG)&#xB294; exocyclic DNA &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; &#xD615;&#xC131;&#xB41C; &#xB41C; &#xB2E4;&#xC74C; &#xB178;&#xCD9C; &#xB2F4;&#xBC30; &#xC5F0;&#xAE30; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0;&#xC9C8; &#xACFC;&#xC0B0;&#xD654; &#xB85C;&#xBD80;&#xD130;. Acr&#xC740; dG &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC1C;&#xC554; &#xC131; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xC774; &#xC6D0; &#xC131; &#xC774;&#xBA70; &#xD761;&#xC5F0; &#xB610;&#xB294; &#xB9CC;&#xC131; &#xC5FC;&#xC99D; &#xB4F1;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC0B0;&#xD654; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC554;&#xC758; &#xC870;&#xAE30; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; biomarker&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0BC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; HistoRx &#xC624;&#xD6C4; 2000 &#xC774;&#xBBF8;&#xC9D5; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; MetaMorph immunohistochemical &#xAC10;&#xC9C0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC18C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xB41C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD074;&#xB860; &#xD56D; &#xCCB4;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAD6C;&#xAC15; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C; Acr dG &#xCE21;&#xC815;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC18C;&#xD504;&#xD2B8;&#xC6E8;&#xC5B4;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;, &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB294; Acr&#xC758; &#xC54C;&#xB824;&#xC9C4;&#xB41C; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC640; BEAS 2B &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAE30;&#xAD00;&#xC9C0; &#xC0C1;&#xD53C; &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC140; &#xBB38;&#xD654; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xACB0;&#xACFC; &#xCD94;&#xAC00; BEAS 2B &#xC140; &#xC9C1;&#xB82C; &#xC2DD; &#xC561;&#xCCB4; &#xD06C;&#xB85C;&#xB9C8;&#xD1A0;&#xADF8;&#xB798;&#xD53C;/&#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;/&#xB2E4;&#xC911; &#xBC18;&#xC751; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xBA54;&#xC11C;&#xB4DC;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; DNA&#xC5D0; Acr-Dg&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC790;&#xB3D9;&#xD654; &#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;&#xC740; Acr dG &#xD45C;&#xD604; &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xAC15;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xACC4;&#xC0B0; &#xC140;&#xC758; &#xC218;&#xB3D9; &#xD3C9;&#xAC00; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xBE68;&#xB9AC;, &#xB354; &#xC815;&#xD655; &#xD558; &#xAC8C; &#xBC29;&#xBC95;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC870;&#xC9C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xC120;, &#xC8FC; &#xBB38;&#xD654; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xD615;&#xC5D0; immunohistochemical &#xAC80;&#xCD9C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xD56D; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB192;&#xC740; &#xCC98;&#xB9AC;&#xB7C9;, acrolein &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; DNA&#xC758; &#xC815;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xAE30;&#xC220;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; &#xAD6C;&#xAC15; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC131;&#xBB3C;.

Acrole&iacute;na (Acr) es un contaminante ambiental ubicuo como un compuesto end&oacute;geno. Acrole&iacute;na derivados 1, N 2-propanodeoxyguanosines (Acr-dG) son exocyclic aductores de ADN formada siguiente exposici&oacute;n al humo de cigarrillo o de la peroxidaci&oacute;n lip&iacute;dica. ACR-dG es potencialmente cancer&iacute;genos y mut&aacute;genos y puede representar un marcador &uacute;til para la detecci&oacute;n precoz de c&aacute;nceres relacionados con fumar u otras condiciones oxidativos, como la inflamaci&oacute;n cr&oacute;nica. En este estudio, hemos desarrollado un m&eacute;todo de alto rendimiento, automatizado utilizando un sistema de imagen combinado con MetaMorph software para cuantificaci&oacute;n de Acr-dG aductos en c&eacute;lulas humanas orales por detecci&oacute;n inmunohistoqu&iacute;mica usando un anticuerpo monoclonal desarrollado recientemente por nuestro laboratorio de HistoRx PM-2000. Este m&eacute;todo fue validado en un cultivo celular con BEAS-2B las c&eacute;lulas epiteliales bronquiales humanas tratadas con concentraciones conocidas de Acr. Adem&aacute;s, los resultados fueron verificados por an&aacute;lisis cuantitativo de Acr-dG en el ADN de las c&eacute;lulas de BEAS-2B utilizando un m&eacute;todo de monitoreo de masa espectrometr&iacute;a/m&uacute;ltiple-reacci&oacute;n de cromatograf&iacute;a l&iacute;quida/t&aacute;ndem. El m&eacute;todo automatizado es un m&eacute;todo m&aacute;s r&aacute;pido, m&aacute;s preciso que la evaluaci&oacute;n manual de conteo de c&eacute;lulas expresando Acr-dG y cuantificar la intensidad de fluorescencia. Se puede aplicar a otros anticuerpos que se utilizan para la detecci&oacute;n de immunohistochemical en otros tipos de c&eacute;lulas, tejidos as&iacute; como l&iacute;neas celulares y cultivos primarios.

Alto rendimiento, an&aacute;lisis cuantitativo de ADN derivados de acrole&iacute;na aductos en c&eacute;lulas humanas orales por inmunohistoqu&iacute;mica.

Gene fusions between the ERG transcription factor and the androgen-regulated gene TMPRSS2 occur in a subset of prostate cancers and contribute to transformation of prostatic epithelial cells. Prior reports have used fluorescence in situ hybridization (FISH) or quantitative PCR (QPCR) to determine the presence of TMPRSS2-ERG fusions or ERG expression, respectively. Recently, several groups have reported on immunohistochemistry (IHC) to measure ERG expression, which is much more readily performed in clinical practice. However, the prior studies examining ERG expression by IHC had small sample sizes or they failed to clarify the association of ERG protein expression with important clinico-pathological features or prostate cancer-specific mortality.

Immunohistochemical expression of ERG in the molecular epidemiology of fatal prostate cancer study.

Prostate cancer (PCa) is the most common type of cancer in men in the United States, which disproportionately affects African American descents. While metastasis is the most common cause of death among PCa patients, no specific markers have been assigned to severity and ethnic biasness of the disease. MicroRNAs represent a promising new class of biomarkers owing to their inherent stability and resilience. In the present study, we investigated potential miRNAs that can be used as biomarkers and/or therapeutic targets and can provide insight into the severity and ethnic biasness of PCa. PCR array was performed in FFPE PCa tissues (5 Caucasian American and 5 African American) and selected differentially expressed miRNAs were validated by qRT-PCR, in 40 (15 CA and 25 AA) paired PCa and adjacent normal tissues. Significantly deregulated miRNAs were also analyzed in urine samples to explore their potential as non-invasive biomarker for PCa. Out of 8 miRNAs selected for validation from PCR array data, miR-205 (p<0.0001), mir-214 (p<0.0001), miR-221(p<0.001) and miR-99b (p<0.0001) were significantly downregulated in PCa tissues. ROC curve shows that all four miRNAs successfully discriminated between PCa and adjacent normal tissues. MiR-99b showed significant down regulation (p<0.01) in AA PCa tissues as compared to CA PCa tissues and might be related to the aggressiveness associated with AA population. In urine, miR-205 (p<0.05) and miR-214 (p<0.05) were significantly downregulated in PCa patients and can discriminate PCa patients from healthy individuals with 89% sensitivity and 80% specificity. In conclusion, present study showed that miR-205 and miR-214 are downregulated in PCa and may serve as potential non-invasive molecular biomarker for PCa.

MicroRNA profiling in prostate cancer--the diagnostic potential of urinary miR-205 and miR-214.

The unfolded protein response (UPR) monitors the folding environment within the endoplasmic reticulum (ER). Accumulation of misfolded proteins within the ER activates the UPR resulting in the execution of adaptive or non-adaptive signaling pathways. α-Synuclein (α-syn) whose accumulation and aggregation define the pathobiology of Parkinson's disease (PD) has been shown to inhibit ER-Golgi transit of COPII vesicles. ATF6, a protective branch of the UPR, is processed via COPII mediated ER-Golgi transit following its activation via ER stress. Using cellular PD models together with biochemical reconstitution assays, we showed that α-syn inhibited processing of ATF6 directly through physical interactions and indirectly through restricted incorporation into COPII vesicles. Impaired ATF6 signaling was accompanied by decreased ER-associated degradation (ERAD) function and increased pro-apoptotic signaling. The mechanism by which α-syn inhibits ATF6 signaling expands our understanding of the role ER stress and the UPR play in neurodegenerative diseases such as PD.

α-Synuclein-mediated inhibition of ATF6 processing into COPII vesicles disrupts UPR signaling in Parkinson's disease.

Mutations in the p53 gene are among the most frequent genetic events in human cancer and may be triggered by environmental and occupational exposures. We examined the association of clinical and pathological characteristics of breast tumors and breast cancer risk factors according to the prevalence and type of p53 mutations. Using tumor blocks from incident cases from a case-control study in western New York, we screened for p53 mutations in exons 2-11 using the Affymetrix p53 Gene Chip array and analyzed case-case comparisons using logistic regression. The p53 mutation frequency among cases was 28.1 %; 95 % were point mutations (13 % of which were silent) and the remainder were single base pair deletions. Sixty seven percent of all point mutations were transitions; 24 % of them are G:C>A:T at CpG sites. Positive p53 mutation status was associated with poorer differentiation (OR, 95 % CI 2.29, 1.21-4.32), higher nuclear grade (OR, 95 % CI 1.99, 1.22-3.25), and increased Ki-67 status (OR, 95 % CI 1.81, 1.10-2.98). Cases with P53 mutations were more likely to have a combined ER-positive and PR-negative status (OR, 95 % CI 1.65, 1.01-2.71), and a combined ER-negative and PR-negative status (OR, 95 % CI 2.18, 1.47-3.23). Body mass index >30 kg/m(2), waist circumference >79 cm, and waist-to-hip ratio >0.86 were also associated with p53 status; obese breast cancer cases are more likely to have p53 mutations (OR, 95 % CI 1.78, 1.19-2.68). We confirmed that p53 mutations are associated with less favorable tumor characteristics and identified an association of p53 mutation status and adiposity.

ArticleTotal : 3	Year
Publication title Cited by 5	2015
Publication title Cited by 7	2017
Publication title Cited by 24	2020

Article	Year
Incomplete reactivation of Oct4-related genes in mouse embryos cloned from somatic nuclei. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 12620990	2003
The Drosophila caspase Ice is important for many apoptotic cell deaths and for spermatid individualization, a nonapoptotic process. Development (Cambridge, England)\| PubMed ID: 16887831	2006
HDAC6 rescues neurodegeneration and provides an essential link between autophagy and the UPS. Nature\| PubMed ID: 17568747	2007
Growth arrest and autophagy are required for salivary gland cell degradation in Drosophila. Cell\| PubMed ID: 18083103	2007
Autophagy functions in programmed cell death. Autophagy\| PubMed ID: 18212526	2008
Autophagy, not apoptosis, is essential for midgut cell death in Drosophila. Current biology : CB\| PubMed ID: 19818615	2009
Evolution and comparative genomics of subcellular specializations: EST sequencing of Torpedo electric organ. Marine genomics\| PubMed ID: 21429463	2011
Transforming growth factor-β adaptor, β2-spectrin, modulates cyclin dependent kinase 4 to reduce development of hepatocellular cancer. Hepatology (Baltimore, Md.)\| PubMed ID: 21520178	2011
Beta-catenin accelerates human papilloma virus type-16 mediated cervical carcinogenesis in transgenic mice. PloS one\| PubMed ID: 22087269	2011
Antioxidative effects of the spice cardamom against non-melanoma skin cancer by modulating nuclear factor erythroid-2-related factor 2 and NF-κB signalling pathways. The British journal of nutrition\| PubMed ID: 22182368	2012
High-throughput, quantitative analysis of acrolein-derived DNA adducts in human oral cells by immunohistochemistry. The journal of histochemistry and cytochemistry : official journal of the Histochemistry Society\| PubMed ID: 22899861	2012
Immunohistochemical expression of ERG in the molecular epidemiology of fatal prostate cancer study. The Prostate\| PubMed ID: 23661613	2013
MicroRNA profiling in prostate cancer--the diagnostic potential of urinary miR-205 and miR-214. PloS one\| PubMed ID: 24167554	2013
α-Synuclein-mediated inhibition of ATF6 processing into COPII vesicles disrupts UPR signaling in Parkinson's disease. Neurobiology of disease\| PubMed ID: 25725420	2015
Adiposity is associated with p53 gene mutations in breast cancer. Breast cancer research and treatment\| PubMed ID: 26364297	2015

Deborah L. Berry

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