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Localized RNAi and Ectopic Gene Expression in the Medicinal Leech

In this video, we show the use of a pneumatic capillary gun for the accurate biolistic delivery of reagents into live tissue. We use the procedure to ...

University of California San Diego - UCSD

&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (RPTPs) &#x88AB;&#x8BA4;&#x4E3A;&#x901A;&#x8FC7;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x8D77;&#x751F;&#x957F;&#x5728;&#x5BFB;&#x8DEF;&#x4E0E;&#x76EE;&#x6807;&#x8BC6;&#x522B;&#x65B9;&#x9762;&#x53D1;&#x6325;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x804C;&#x80FD;&#x3002;&#x6C34;&#x86ED; RPTPs HmLAR1 &#x548C; HmLAR2 &#x7531;&#x4E2D;&#x592E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3001; &#x68B3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x5468;&#x56F4;&#x808C;&#x8089;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x80DA;&#x80CE;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x63A2;&#x7D22;&#x7684; HmLARs &#x529F;&#x80FD;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8BBE;&#x6CD5;&#x786E;&#x5B9A;&#x5176;&#x751F;&#x7406;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x514B;&#x9686;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x8389;&#x5A1C;&#xFF0C;&#x6C34;&#x86ED;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x542F;&#x7528;&#xFF0C;&#x7275;&#x8FDE;&#x5230;&#x57FA;&#x4E8E;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80DE;&#x6D46;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8389;&#x5A1C;&#x88AB;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x68B3;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#x8389;&#x5A1C;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x5C06;&#x4E0E;&#x80DE;&#x5185;&#x57DF;&#x7684; HmLAR1 &#x548C; HmLAR2&#x3002;&#x53E6;&#x5916;&#xFF0C;RNA &#x5E72;&#x6270; (RNAi) &#x5B8C;&#x597D;&#x6C34;&#x86ED;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684; HmLAR1 &#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x8389;&#x5A1C; hyperphosphorylation&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x8389;&#x5A1C;&#x662F;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143; HmLAR1 &#x548C;&#x4E5F;&#x8BB8; HmLAR2 &#x68B3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F53;&#x5185;&#x886C;&#x5E95;&#x3002;

&#x534F;&#x4F1A;&#x4E0E;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x4E2D;&#x5DF2;&#x542F;&#x7528;&#x7684;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269; LAR &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x3002;

Receptor protein tyrosine phosphatases (RPTPs) are thought to play important functions in pathfinding and target recognition by growing neuronal processes. The leech RPTPs HmLAR1 and HmLAR2 are expressed selectively by central neurons, Comb cells, and peripheral muscle tissues in the Hirudo medicinalis embryo. To explore the functions of HmLARs, we have sought to determine their physiological substrates. We report here the cloning and embryonic expression of Lena, the leech homolog of Enabled, a cytosolic protein implicated in actin-based cell motility. Lena is expressed in embryonic central neurons and in the Comb cell. We present experimental evidences indicating that Lena associates selectively with the intracellular domain of HmLAR1 and HmLAR2. Additionally, RNA interference (RNAi) of HmLAR1 in intact leech embryos leads to the hyperphosphorylation of Lena. We propose, therefore, that Lena is an in vivo substrate of HmLAR1 in neurons and perhaps of HmLAR2 in the Comb cells.

Association of LAR-like receptor protein tyrosine phosphatases with an enabled homolog in Hirudo medicinalis.

Phosphatases r&#xE9;cepteur de prot&#xE9;ine tyrosine RPTPs) sont suppos&#xE9;s jouer des fonctions importantes dans pathfinding et la reconnaissance de plus en plus la cible par des processus neuronaux. La sangsue RPTPs HmLAR1 et HmLAR2 sont exprim&#xE9;s de mani&#xE8;re s&#xE9;lective par les neurones, les cellules centrales peigne, et les tissus musculaires p&#xE9;riph&#xE9;riques chez l&#x26;#39;embryon Hirudo medicinalis. Pour explorer les fonctions de HmLARs, nous avons cherch&#xE9; &#xE0; d&#xE9;terminer leurs substrats physiologiques. Nous rapportons ici le clonage et l&#x26;#39;expression embryonnaire de Lena, l&#x26;#39;homologue de la sangsue activ&#xE9;, une prot&#xE9;ine cytosolique impliqu&#xE9;e dans la motilit&#xE9; cellulaire bas&#xE9;e sur l&#x26;#39;actine. Lena est exprim&#xE9;e en embryonnaires neurones centraux et dans la cellule peigne. Nous pr&#xE9;sentons des preuves exp&#xE9;rimentales indiquant que les associ&#xE9;s Lena s&#xE9;lectivement avec le domaine intracellulaire de HmLAR1 et HmLAR2. En outre, l&#x26;#39;interf&#xE9;rence ARN (ARNi) de HmLAR1 dans des embryons de sangsue intactes conduit &#xE0; l&#x26;#39;hyperphosphorylation de Lena. Nous proposons, par cons&#xE9;quent, que Lena est un substrat in vivo de HmLAR1 dans les neurones et peut-&#xEA;tre de HmLAR2 dans les cellules en forme de peigne.

Association des phosphatases r&#xE9;cepteurs LAR-comme la prot&#xE9;ine tyrosine avec un homologue Activ&#xE9; dans Hirudo medicinalis

Verband der LAR-like-Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatasen mit einer aktivierten Homolog in Hirudo medicinalis.

Receptor protein tirosina fosfatasi (RPTPs) sono pensati per giocare funzioni importanti nel riconoscimento di path-finding e destinazione da processi neuronali in crescita. La sanguisuga RPTPs HmLAR1 e HmLAR2 sono espressi selettivamente i neuroni centrali, cellule del pettine e tessuti muscolari periferici nell&#39;embrione Hirudo medicinalis. Per esplorare le funzioni di HmLARs, abbiamo cercato di determinare i loro substrati fisiologici. Riportiamo qui l&#39;espressione clonazione ed embrionale di Lena, l&#39;omologo di sanguisuga di Enabled, una proteina citosolica implicata nella motilit&agrave; cellulare basato su actina. Lena &egrave; espresso nei neuroni embrionali centrali e nella cella di pettine. Vi presentiamo le evidenze sperimentali che indicano che Lena associa in modo selettivo il dominio intracellulare di HmLAR1 e HmLAR2. Inoltre, interferenza del RNA (RNAi) di HmLAR1 in embrioni intatti sanguisuga conduce all&#39;iperfosforilazione di Lena. Proponiamo, pertanto, che la Lena &egrave; un substrato in vivo di HmLAR1 nei neuroni e forse di HmLAR2 in cellule del pettine.

Associazione del recettore LAR-like protein tirosina fosfatasi con un omologo abilitato in Hirudo medicinalis.

&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RPTPs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x3092;&#x6210;&#x9577;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x63A2;&#x7D22;&#x3068;&#x6A19;&#x7684;&#x8A8D;&#x8B58;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3068;&#x8003;&#x3048;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;RPTPs HmLAR1&#x3068;HmLAR2&#x306F;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3001;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x672B;&#x68A2;&#x7B4B;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; HmLARs&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x63A2;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x751F;&#x7406;&#x5B66;&#x7684;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3088;&#x3046;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x304D;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x30EC;&#x30CA;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x80DA;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;Enabled&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x904B;&#x52D5;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x30EC;&#x30CA;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3084;&#x30B3;&#x30FC;&#x30E0;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;HmLAR1&#x3068;HmLAR2&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x30EC;&#x30CA;&#x4EF2;&#x9593;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x8A3C;&#x62E0;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HmLAR1&#x306E;RNA&#x5E72;&#x6E09;&#xFF08;RNAi&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30CA;&#x306E;&#x904E;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x5316;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30CA;&#x304C;&#x6ADB;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F;HmLAR2&#x306E;HmLAR1&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x57FA;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;

Hirudo&#x306E;Medicinalis&#x306E;Enabled&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x3068;LAR&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x5354;&#x4F1A;

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Hirudo medicinalis&#xC5D0; &#xC124;&#xC815; &#xB41C; &#xCCB4;&#xB85C; LAR &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC758; &#xD611;&#xD68C;.

Receptores de prote&#xED;na tirosina fosfatasas (RPTPs) se cree que desempe&#xF1;an funciones importantes en la b&#xFA;squeda de caminos y el reconocimiento del objetivo por el crecimiento de los procesos neuronales. La sanguijuela RPTPs HmLAR1 HmLAR2 y se expresan de forma selectiva de las neuronas centrales, las c&#xE9;lulas de un peine, y los tejidos perif&#xE9;ricos del m&#xFA;sculo en el embri&#xF3;n Hirudo medicinalis. Para explorar las funciones de HmLARs, hemos tratado de determinar sus sustratos fisiol&#xF3;gicos. Presentamos aqu&#xED; la clonaci&#xF3;n y expresi&#xF3;n embrionaria de Lena, el hom&#xF3;logo de la sanguijuela de la Habilitada, una prote&#xED;na citos&#xF3;lica implicados en la motilidad celular basada en la actina. Lena se expresa en embrionarias neuronas centrales y en la celda de peine. Se presentan evidencias experimentales que indican que los asociados de Lena de forma selectiva con el dominio intracelular de HmLAR1 y HmLAR2. Adem&#xE1;s, el ARN de interferencia (RNAi) de HmLAR1 en embriones intactos sanguijuela lleva a la hiperfosforilaci&#xF3;n de Lena. Proponemos, por tanto, que Lena es un sustrato en vivo de HmLAR1 en las neuronas y quiz&#xE1;s de HmLAR2 en las c&#xE9;lulas peine.

Asociaci&#xF3;n de LAR-como receptor de la prote&#xED;na tirosina fosfatasas con un hom&#xF3;logo de Enabled en Hirudo medicinalis

&#x6C34;&#x86ED;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#xFF0C;&#x5728;&#x5916;&#x56F4;&#x7684;&#x611F;&#x89C9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8282;&#x6BB5;&#x6CBF;&#x5E38;&#x89C1;&#x795E;&#x7ECF;&#x675F;&#x5230;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5728;&#x4ED6;&#x4EEC; defasciculate&#xFF0C;&#x5206;&#x652F;&#xFF0C;&#x548C; arborize &#x5230;&#x5355;&#x72EC;&#x7684;&#x3001; &#x7279;&#x5B9A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x7A81;&#x89E6;&#x7EB9;&#x5C42;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x8868;&#x660E;&#x8BE5;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x9700;&#x8981;&#xFF0C;&#x81F3;&#x5C11;&#x5728;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x672C;&#x6784;&#xFF0C;&#x7136;&#x540E;&#x7279;&#x5B9A;&#x6A21;&#x5F0F;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#xFF0C;&#x6C34;&#x86ED; L1 &#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x901A;&#x8FC7;&#x68C0;&#x67E5;&#x5F62;&#x6001;&#x7684;&#x5355;&#x4E00;&#x8D8A;&#x6765;&#x8D8A;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x611F;&#x5B98; afferents &#x4F5C;&#x4E3A;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x51FD;&#x6570;&#x6765;&#x83B7;&#x5F97;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9884;&#x6D4B;&#x589E;&#x957F;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x3002;&#x6BCF;&#x9694; 3 &#x81F3; 30 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5C0F;&#x65F6;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x548C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x5B8C;&#x6574;&#x53D1;&#x5C55;&#x80DA;&#x80CE; 2 &#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x5149;&#x626B;&#x63CF;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#xFF0C;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x611F;&#x5B98;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x56FE;&#x50CF;&#x3002;&#x5EF6;&#x65F6;&#x7CFB;&#x5217;&#x56FE;&#x50CF;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#x548C;&#x6210;&#x719F;&#x72B6;&#x6001;&#x4F9D;&#x8D56;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x8FDB;&#x5165;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x5C16;&#x4E3B;&#x8F74;&#x7A81;&#x53D1;&#x82BD;&#x65E0;&#x6570;&#x957F; filopodial &#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x8BB8;&#x591A;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x53CD;&#x590D;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x7684;&#x5EF6;&#x957F;&#x548C;&#x9000;&#x7F29;&#x3002;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x53D8;&#x6210;&#x5F62;&#x6210;&#x7684;&#x5185;&#x6CBF;&#x524D;&#x540E;&#x8F74;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; neuropil &#x6269;&#x5C55;&#x7684;&#x4E8C;&#x7EA7;&#x5206;&#x884C;&#x901A;&#x8FC7;&#x611F;&#x5B98;&#x7684;&#x4E54;&#x6728;&#x3002;&#x4F17;&#x591A;&#x7684;&#x7B2C;&#x4E09;&#x548C;&#x7B2C;&#x56DB;&#x7EAA;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4ECE;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5206;&#x652F;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x4F1A;&#x663E;&#x793A;&#x6269;&#x5C55;&#x548C;&#x9000;&#x7F29;&#x7684;&#x5468;&#x671F;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x9AD8;&#x9636;&#x5206;&#x652F;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x6539;&#x53D8;&#x968F;&#x7740;&#x5E74;&#x9F84;&#x7684;&#x589E;&#x957F;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x5E74;&#x8F7B; afferents &#x663E;&#x793A;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x548C;&#x66F4;&#x5927;&#x7684;&#x52A8;&#x529B;&#x6BD4;&#x5E74;&#x957F;&#xFF0C;&#x66F4;&#x6210;&#x719F;&#x7684;&#x611F;&#x5B98;&#x4E54;&#x6728;&#x3002;&#x6700;&#x540E;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x8BA2;&#x5355;&#x9884;&#x6D4B;&#x51CF;&#x5C11;&#x91CD;&#x5408;&#x7684;&#x662F;&#x5916;&#x89C2;&#x7684; concavolar &#x7ED3;&#x6784;&#x4E0A;&#x7684;&#x8F85;&#x52A9;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7F29;&#x8FDB;&#x7684;&#x884C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x5F62;&#x6210;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D; en passant &#x4E13;&#x4E1A;&#x966A;&#x540C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x53D1;&#x5C55;&#x5F00;&#x59CB;&#x3002;

CNS &#x611F;&#x5B98;&#x4E54;&#x6728;&#x5F62;&#x6210;&#x4F53;&#x5185;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#xFF1A; &#x5EF6;&#x65F6;&#x7814;&#x7A76;&#x4E2D;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x3002;

In the embryo of the leech Hirudo medicinalis, afferent projections of peripheral sensory neurons travel along common nerve tracts to the CNS, where they defasciculate, branch, and arborize into separate, modality-specific synaptic laminae. Previous studies have shown that this process requires, at least in part, the constitutive and then modality-specific glycosylations of tractin, a leech L1 homologue. We report here on the dynamics of growth of these projections as obtained by examining the morphology of single growing dye-filled sensory afferents as a function of time. Using 2-photon laser-scanning microscopy of the intact developing embryo, we obtained images of individual sensory projections at 3 to 30 min intervals, over several hours of growth, and at different stages of development. The time-lapse series of images revealed a highly dynamic and maturation-state-dependent pattern of growth. Upon entering the CNS, the growth cone-tipped primary axon sprouted numerous long filopodial processes, many of which appeared to undergo repeated cycles of extension and retraction. The growth cone was transformed into a sensory arbor through the formation of secondary branches that extended within the ganglionic neuropil along the anterior-posterior axis of the CNS. Numerous tertiary and quaternary processes grew from these branches and also displayed cycles of extension and retraction. The motility of these higher-order branches changed with age, with younger afferents displaying higher densities and greater motility than older, more mature sensory arbors. Finally, coincident with a reduction in higher order projections was the appearance of concavolar structures on the secondary processes. Rows of these indentations suggest the formation of presynaptic en-passant specializations accompanying the developmental onset of synapse formation.

In vivo dynamics of CNS sensory arbor formation: a time-lapse study in the embryonic leech.

Dans l&#x26;#39;embryon de la sangsue Hirudo medicinalis, projections aff&#xE9;rentes de neurones sensoriels p&#xE9;riph&#xE9;riques se d&#xE9;placer le long voies nerveuses communes aux CNS, o&#xF9; ils defasciculate, branche, et en s&#x26;#39;arborisent s&#xE9;par&#xE9;e, modalit&#xE9; sp&#xE9;cifique lames synaptique. Des &#xE9;tudes ant&#xE9;rieures ont montr&#xE9; que ce processus exige, au moins en partie, les glycosylations constitutifs puis modalit&#xE9; sp&#xE9;cifique de tractin, un homologue de L1 sangsue. Nous rapportons ici sur la dynamique de la croissance de ces projections obtenues par l&#x26;#39;examen de la morphologie de croissance unique remplies de teinture aff&#xE9;rences sensorielles comme une fonction du temps. Utilisation de 2-photon laser &#xE0; balayage microscopie de l&#x26;#39;embryon intact le d&#xE9;veloppement, nous avons obtenu des images de projections sensorielles individuelles &#xE0; 3 &#xE0; 30 min d&#x26;#39;intervalle, pendant plusieurs heures de la croissance, et &#xE0; diff&#xE9;rents stades de d&#xE9;veloppement. La s&#xE9;rie time-lapse d&#x26;#39;images a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une tendance tr&#xE8;s dynamique et la maturation-d&#xE9;pendant de l&#x26;#39;&#xE9;tat de la croissance. En entrant dans le syst&#xE8;me nerveux central, l&#x26;#39;axone du c&#xF4;ne de croissance &#xE0; bout primaire germ&#xE9; de nombreux longs processus filopodial, dont beaucoup semblaient subir des cycles r&#xE9;p&#xE9;t&#xE9;s d&#x26;#39;extension et de r&#xE9;traction. Le c&#xF4;ne de croissance a &#xE9;t&#xE9; transform&#xE9; en un arbre sensorielle &#xE0; travers la formation de branches secondaires qui s&#x26;#39;&#xE9;tendait dans le neuropile ganglionnaire long de l&#x26;#39;axe ant&#xE9;ro-post&#xE9;rieur du syst&#xE8;me nerveux central. De nombreux proc&#xE9;d&#xE9;s tertiaires et quaternaires est pass&#xE9;e de ces branches et des cycles aussi affich&#xE9;es d&#x26;#39;extension et de r&#xE9;traction. La motilit&#xE9; de ces branches d&#x26;#39;ordre sup&#xE9;rieur chang&#xE9; avec l&#x26;#39;&#xE2;ge, les jeunes pr&#xE9;sentant des aff&#xE9;rences des densit&#xE9;s plus &#xE9;lev&#xE9;es et une plus grande motilit&#xE9; que les plus &#xE2;g&#xE9;s, plus matures arbres sensoriels. Enfin, co&#xEF;ncidant avec une r&#xE9;duction d&#x26;#39;ordre sup&#xE9;rieur saillies est l&#x26;#39;apparition de structures concavolar sur les processus secondaires. Des rang&#xE9;es de ces empreintes sugg&#xE8;rent la formation d&#x26;#39;pr&#xE9;synaptiques en-Passant sp&#xE9;cialisations qui accompagnent l&#x26;#39;apparition de d&#xE9;veloppement de la formation des synapses.

Dans la dynamique in vivo de la CNS, Arbor Formation sensorielle: une &#xE9;tude Time-lapse dans le embryonnaire Leech

In-vivo-Dynamik der sensorischen ZNS Laube Bildung: ein Zeitraffer-Studie in der embryonalen Blutegel.

Nell&#39;embrione di sanguisuga Hirudo medicinalis, afferenti proiezioni dei neuroni sensoriali periferici viaggiano lungo vie nervose comuni al CNS, dove essi defasciculate, ramo e alzaia in lamine sinaptici separati, modalit&agrave; specifiche. Studi precedenti hanno mostrato che questo processo richiede, almeno in parte, i glycosylations costitutiva e poi modalit&agrave; specifiche di tractin, un omologo sanguisuga L1. Riportiamo qui sulla dinamica di crescita di queste proiezioni come ottenuti esaminando la morfologia del singolo afferenze sensoriali crescente piena di tintura in funzione del tempo. Utilizzando 2-fotone laser-microscopia dell&#39;embrione in via di sviluppo intatto, abbiamo ottenuto immagini delle singole proiezioni sensoriali ad intervalli di 3-30 min, sopra parecchie ore di crescita e a diversi stadi di sviluppo. Il time-lapse serie di immagini ha rivelato un modello altamente dinamico e maturazione-stato-dipendente della crescita. Entrando il CNS, l&#39;assone primario con punta cono crescita germogliato numerosi processi di lunga filopodial, molti dei quali apparve a sottoporsi a ripetuti cicli di estensione e la retrazione. Il cono di crescita &egrave; stato trasformato in un arbor sensoriale attraverso la formazione di rami secondari che si estendeva all&#39;interno del neuropilo ganglionica lungo l&#39;asse antero-posteriore del sistema nervoso centrale. Numerosi processi terziari e quaternari &egrave; cresciuta da questi rami e visualizzati anche cicli di estensione e la retrazione. La motilit&agrave; di questi rami di ordine superiore &egrave; cambiato con l&#39;et&agrave;, con minore afferenze visualizzazione di densit&agrave; pi&ugrave; elevate e una maggiore motilit&agrave; che pi&ugrave; vecchia, pergole sensoriale pi&ugrave; maturi. Infine, coincida con una riduzione nelle proiezioni di ordine superiore era l&#39;aspetto delle strutture concavolar sui processi secondari. Le righe di questi rientri suggeriscono la formazione di specializzazioni en-passant presinaptiche che accompagna l&#39;insorgenza dello sviluppo della formazione di sinapsi.

Dinamiche in vivo della formazione arbor sensoriale CNS: uno studio time-lapse nella sanguisuga embrionale.

&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x306E;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x672B;&#x68A2;&#x611F;&#x899A;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;defasciculate CNS&#x3001;&#x30D6;&#x30E9;&#x30F3;&#x30C1;&#x306B;&#x5171;&#x901A;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BA1;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x79FB;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x5225;&#x306E;&#x3001;&#x30E2;&#x30C0;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CA;&#x306B;&#x6A39;&#x679D;&#x72B6;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x304F;&#x3068;&#x3082;&#x90E8;&#x5206;&#x7684;&#x306B;&#x3001;tractin&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;L1&#x76F8;&#x540C;&#x4F53;&#x306E;&#x30E2;&#x30C0;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x56FA;&#x6709;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x95A2;&#x6570;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x67D3;&#x6599;&#x3092;&#x5145;&#x586B;&#x3057;&#x305F;&#x611F;&#x899A;&#x306E;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x7121;&#x50B7;&#x80DA;&#x306E;2&#x5149;&#x5B50;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8D70;&#x67FB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x6570;&#x6642;&#x9593;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x3055;&#x307E;&#x3056;&#x307E;&#x306A;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x3001;3&#x304B;&#x3089;30&#x5206;&#x9593;&#x9694;&#x3067;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x611F;&#x899A;&#x306E;&#x6295;&#x5F71;&#x753B;&#x50CF;&#x3092;&#x5F97;&#x305F;&#x3002;&#x753B;&#x50CF;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x30B7;&#x30EA;&#x30FC;&#x30BA;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x3067;&#x6210;&#x719F;&#x72B6;&#x614B;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x305F;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; CNS&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x5148;&#x7AEF;&#x306E;&#x4E3B;&#x7D22;&#x306F;&#x3001;&#x62E1;&#x5F35;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x7E70;&#x308A;&#x8FD4;&#x3057;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x308B;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306F;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x9577;&#x3044;filopodial&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x3001;&#x767A;&#x82BD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306F;&#x3001;CNS&#x306E;&#x524D;&#x5F8C;&#x8EF8;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DB2;&#x5185;&#x306E;&#x62E1;&#x5F35;&#x4E8C;&#x6B21;&#x679D;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x611F;&#x899A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306B;&#x5F62;&#x8CEA;&#x8EE2;&#x63DB;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x7B2C;&#x4E09;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7B2C;&#x56DB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x679D;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x9577;&#x3057;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x62E1;&#x5F35;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30AF;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x9AD8;&#x6B21;&#x306E;&#x679D;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x3088;&#x308A;&#x53E4;&#x3044;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x6210;&#x719F;&#x3057;&#x305F;&#x611F;&#x899A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x306E;&#x904B;&#x52D5;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3059;&#x308B;&#x82E5;&#x3044;&#x6C42;&#x5FC3;&#x6027;&#x3067;&#x3001;&#x5E74;&#x9F62;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x5909;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6700;&#x5F8C;&#x306B;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x6B21;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3068;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3001;&#x4E8C;&#x6B21;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;concavolar&#x69CB;&#x9020;&#x7269;&#x306E;&#x5916;&#x89B3;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C7;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x884C;&#x306F;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x767A;&#x9054;&#x767A;&#x75C7;&#x306B;&#x4F34;&#x3046;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;EN-&#x30D1;&#x30C3;&#x30B5;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x5C02;&#x9580;&#x5206;&#x91CE;&#x306E;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x80DA;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x306B;&#x95A2;&#x3059;&#x308B;&#x7814;&#x7A76;&#xFF1A;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x611F;&#x899A;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;in vivo&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;

&#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; Hirudo medicinalis &#xBC30;&#xC544;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9D0; &#xCD08; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC758; &#xC131;&#xC758; &#xC608;&#xCE21; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCC45;&#xC790;&#xB97C; &#xB530;&#xB77C; &#xC5EC;&#xD589; CNS, &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; defasciculate, &#xBD84;&#xAE30;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBCC4;&#xB3C4;, &#xC801;&#xC784; &#xD2B9;&#xC815; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4;&#xC758; laminae&#xB85C; arborize. &#xC774;&#xC804; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294;&#xC774; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294;, &#xC801;&#xC5B4;&#xB3C4; &#xBD80;&#xBD84;&#xC5D0;&#xC11C; tractin, &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; L1 homologue &#xC81C;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC591;&#xC2DD; &#xC801;&#xC784; &#xD2B9;&#xC815; glycosylations &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC758; &#xD568;&#xC218;&#xB85C; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC131;&#xC7A5; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xAC00;&#xB4DD; &#xAC10;&#xAC01; afferents&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558; &#xC5EC; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACC4;&#xD68D;&#xC758; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC131;&#xC5D0; &#xC54C;&#xB824;&#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5;, &#xBA87; &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; 3 ~ 30 &#xBD84; &#xAC04;&#xACA9;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xAC10;&#xAC01; &#xC608;&#xCE21;&#xC758; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD68D;&#xB4DD; &#xADF8;&#xB300;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xC6B0;&#xB9AC;. &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xC2DC;&#xB9AC;&#xC988; &#xC131;&#xC7A5;&#xC758; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC131;&#xC219; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xC885;&#xC18D; &#xD328;&#xD134;&#xC744; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. CNS &#xC785;&#xB825; &#xC2DC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC2A4;&#xCCD0; &#xAE30;&#xBCF8; &#xCD95; &#xC0AD; &#xC720;&#xB3C5; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xAE34; filopodial &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xB9CE;&#xC740; &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC218; &#xCD95;&#xB825;&#xC758; &#xBC18;&#xBCF5;&#xB41C; &#xC8FC;&#xAE30;&#xB97C; &#xB4F1;&#xC7A5;. &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; CNS&#xC758; &#xC55E;&#xCABD;&#xC5D0; &#xD6C4;&#xBD80; &#xCD95; ganglionic neuropil &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC7A5; &#xD558;&#xB294; &#xBCF4;&#xC870; &#xBD84;&#xAE30;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xAC10;&#xAC01; &#xC2DD; &#xBAA9;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCC0;&#xBAA8; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; 3 &#xCC28; &#xBC0F; &#xC81C; &#xC0AC;&#xAE30; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xC218; &#xCD95;&#xB825;&#xC758; &#xC0AC;&#xC774;&#xD074;&#xC744; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC11C; &#xBD84;&#xAE30;&#xC758; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xB098;&#xC774;, &#xC80A;&#xC740; afferents &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xBC00;&#xB3C4;, &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xD070; &#xC6B4;&#xB3D9; &#xC131; &#xD45C;&#xC2DC;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB354; &#xC131;&#xC219;&#xD55C; &#xAC10;&#xAC01; &#xBC84;&#xB294; &#xBCC0;&#xACBD;. &#xB9C8;&#xC9C0;&#xB9C9;&#xC73C;&#xB85C;, &#xC77C;&#xCE58; &#xB192;&#xC740; &#xC21C;&#xC11C; &#xC608;&#xCE21;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCF4;&#xC870; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; concavolar &#xAD6C;&#xC870; &#xBAA8;&#xC591;&#xC744; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB4E4;&#xC5EC;&#xC4F0;&#xAE30; &#xD589; presynaptic en passant &#xD2B9;&#xC218;&#xD654; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD615;&#xC131; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBC1C;&#xBCD1;&#xC744; &#xB3D9;&#xBC18;&#xC758; &#xD615;&#xC131;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

CNS &#xAC10;&#xAC01; &#xC544; &#xBC84; &#xD615;&#xC131;&#xC758; in vivo &#xC5ED;&#xD559;: &#xBC30;&#xC544; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xC5F0;&#xAD6C;.

En el embri&#xF3;n de la sanguijuela Hirudo medicinalis, proyecciones aferentes de las neuronas sensoriales perif&#xE9;ricas viajar a lo largo de las fibras nerviosas comunes a las del SNC, donde defasciculate, rama, y &#x200B;&#x200B;se ramifican en la separada, la modalidad espec&#xED;fica de l&#xE1;minas sin&#xE1;ptica. Estudios previos han demostrado que este proceso requiere, al menos en parte, los glicosilaciones constitutivos y, a continuaci&#xF3;n modalidad espec&#xED;fica de tractin, un hom&#xF3;logo L1 sanguijuela. Se presenta aqu&#xED; en la din&#xE1;mica de crecimiento de estas proyecciones como se obtiene mediante el examen de la morfolog&#xED;a de crecimiento individuales llenos de tinte aferentes sensoriales como una funci&#xF3;n del tiempo. Uso de dos fotones l&#xE1;ser microscop&#xED;a de barrido del embri&#xF3;n intacta en desarrollo, se obtuvieron im&#xE1;genes de las distintas proyecciones sensoriales de 3 a intervalos de 30 minutos, a lo largo de varias horas de crecimiento, y en diferentes etapas de desarrollo. La serie de time-lapse de im&#xE1;genes revelaron un patr&#xF3;n de gran dinamismo y la maduraci&#xF3;n de estado dependiente del crecimiento. Al entrar en el sistema nervioso central, el cono de crecimiento axonal en la punta principal brotado numerosos procesos largos filopodial, muchos de los que aparecieron a someterse a repetidos ciclos de extensi&#xF3;n y retracci&#xF3;n. El cono de crecimiento se transform&#xF3; en un jard&#xED;n sensorial a trav&#xE9;s de la formaci&#xF3;n de ramas secundarias que se extend&#xED;an en el neuropilo ganglionar lo largo del eje antero-posterior del sistema nervioso central. Numerosos procesos terciarios y cuaternarios creci&#xF3; de estas ramas, y tambi&#xE9;n se muestran los ciclos de extensi&#xF3;n y retracci&#xF3;n. La movilidad de estas ramas de orden superior cambian con la edad, con los m&#xE1;s j&#xF3;venes muestran una mayor densidad aferentes y una mayor movilidad que los mayores, los cenadores sensoriales m&#xE1;s maduros. Finalmente, coincidente con una reducci&#xF3;n en las proyecciones de orden superior fue la aparici&#xF3;n de estructuras concavolar en los procesos secundarios. Las filas de estas muescas sugieren la formaci&#xF3;n de pre-sin&#xE1;pticas en-passant especializaciones que acompa&#xF1;an a la aparici&#xF3;n de desarrollo de la formaci&#xF3;n de sinapsis.

En Vivo Din&#xE1;mica de la formaci&#xF3;n del SNC sensorial Arbor: un estudio de lapso de tiempo en el embrionario Leech

&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x4E2D;&#x8113;&#x6BD2;&#x6027;&#x635F;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x5206;&#x6790;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x4E8C;&#x7EF4;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x51DD;&#x80F6;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x8868;&#x660E;&#x6B63;&#x5E38;&#x53CA;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6027;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7684;&#x4E00;&#x4E9B;&#x91CD;&#x5927;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x53D1;&#x73B0;&#x4E00;&#x79CD;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x5C06;&#x4E0A;&#x8C03;&#x540E;&#x8113;&#x6BD2;&#x6027;&#x4F11;&#x514B;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7; Edman &#x964D;&#x89E3;&#x3001; &#x8D28;&#x8C31;&#x6CD5;&#x548C;&#x5206;&#x5B50;&#x514B;&#x9686;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x65B0;&#x578B;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684; hemerythrin&#xFF0C;&#x5728;&#x56DB;&#x4E2A;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x95E8;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x7684;&#x4E00;&#x7EC4;&#x975E;&#x8840;&#x7EA2;&#x7D20;&#x94C1;&#x6C27;&#x8FD0;&#x8F93;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x7EC4;&#x5408;&#xFF1A; sipunculids&#xFF0C;priapulids&#xFF0C;&#x8155;&#x8DB3;&#x7C7B;&#x3001; &#x548C;&#x73AF;&#x8282;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x901A;&#x8FC7;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x6280;&#x672F;&#x65B0;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x79F0;&#x4E4B;&#x4E3A; neurohemerythrin&#xFF0C;&#x7684;&#x786E;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6D88;&#x606F;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4E2D;&#x5927;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; neuropile&#xFF0C;&#x73AF;&#x7ED5;&#x5728;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4E2D;&#x592E;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#xFF0C;&#x548C;&#x5355;&#x72EC;&#x7684; interganglionic &#x7684;&#x7ED3;&#x7F14;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x795E;&#x7ECF;&#x8F74;&#x7A81;&#x5206;&#x518C;&#x7684;&#x53CC;&#x8FB9;&#x7684;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x80DE;&#x4F53;&#x7684;&#x516D;&#x4E2A;&#x6570;&#x636E;&#x5305;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E00;&#x5BF9;&#x3002;&#x5728;&#x4E2D;&#x592E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6216;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5C0F;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x4E5F;&#x6709;&#x4EBA;&#x5728;&#x5899;&#x4F53;&#x4E0A;&#x8BB8;&#x591A;&#x5176;&#x5B83;&#xFF0C;&#x975E;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E2D;&#x3002;&#x5B9E;&#x65F6;&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;neurohemerythrin &#x662F;&#x4E0A;&#x8C03; posttranscriptionaly&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#xFF0C;neurohemerythrin&#xFF0C;&#x5B83;&#x80FD;&#x591F;&#x5C06;&#x6C27;&#x548C;&#x94C1;&#x3001; &#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5165;&#x4FB5;&#x7684;&#x975E;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x4E2D;&#x7684;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x5411;&#x4E0A;-&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x3001; &#x6C34;&#x86ED; &#x2170;&#x3001; &#x8113;&#x6BD2;&#x6027;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D; neurohemerythrin &#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8C03;&#x63A7;&#x3002;

We report here some results of a proteomic analysis of changes in protein expression in the leech Hirudo medicinalis in response to septic injury. Comparison of two-dimensional protein gels revealed several significant differences between normal and experimental tissues. One protein found to be up-regulated after septic shock was identified, through a combination of Edman degradation, mass spectrometry, and molecular cloning, as a novel member of the hemerythrin family, a group of non-heme-iron oxygen transport proteins found in four invertebrate phyla: sipunculids, priapulids, brachiopods, and annelids. We found by in situ hybridization and immunocytochemistry that the new leech protein, which we have called neurohemerythrin, is indeed expressed in the leech central nervous system. Both message and protein were detected in the pair of large glia within the ganglionic neuropile, in the six packet glia that surround neuronal somata in each central ganglion, and in the bilateral pair of glia that separate axonal fascicles in the interganglionic connective nerves. No expression was detected in central neurons or in central nervous system microglia. Expression was also observed in many other, non-neuronal tissues in the body wall. Real-time PCR experiments suggest that neurohemerythrin is up-regulated posttranscriptionaly. We consider potential roles of neurohemerythrin, associated with its ability to bind oxygen and iron, in the innate immune response of the leech nervous system to bacterial invasion.

Up-regulation of neurohemerythrin expression in the central nervous system of the medicinal leech, Hirudo medicinalis, following septic injury.

Nous rapportons ici quelques r&#xE9;sultats d&#x26;#39;une analyse prot&#xE9;omique des changements dans l&#x26;#39;expression des prot&#xE9;ines dans la sangsue Hirudo medicinalis en r&#xE9;ponse &#xE0; une blessure septique. Comparaison des gels de prot&#xE9;ines en deux dimensions a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; plusieurs diff&#xE9;rences importantes entre les tissus normaux et exp&#xE9;rimentale. Une prot&#xE9;ine qui se trouve &#xEA;tre r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse apr&#xE8;s un choc septique a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;, gr&#xE2;ce &#xE0; une combinaison de d&#xE9;gradation d&#x26;#39;Edman, spectrom&#xE9;trie de masse, et le clonage mol&#xE9;culaire, en tant que nouveau membre de la famille h&#xE9;m&#xE9;rythrine, un groupe de non-h&#xE8;me-fer des prot&#xE9;ines de transport d&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne pr&#xE9;sents dans quatre phylums d&#x26;#39;invert&#xE9;br&#xE9;s: Sipunculiens, les priapulids, brachiopodes, et les ann&#xE9;lides. Nous avons trouv&#xE9; par hybridation in situ et l&#x26;#39;immunocytochimie que la nouvelle prot&#xE9;ine sangsue, que nous avons appel&#xE9; neurohemerythrin, est en effet exprim&#xE9;e dans la chute du syst&#xE8;me nerveux central. La fois message et prot&#xE9;ines ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;es dans la paire de cellules gliales grande dans le neuropile ganglionnaire, dans la glie six paquets qui entourent somata neuronale dans chaque ganglion central, et dans la paire bilat&#xE9;rale de la glie qui s&#xE9;parent faisceaux axonales dans les nerfs interganglionic conjonctifs. Aucune expression n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e dans les neurones centraux ou dans la microglie du syst&#xE8;me nerveux central. Expression a &#xE9;galement &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans de nombreux autres tissus non neuronaux dans la paroi du corps. En temps r&#xE9;el les exp&#xE9;riences de PCR sugg&#xE8;rent que neurohemerythrin est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse posttranscriptionaly. Nous consid&#xE9;rons les r&#xF4;les potentiels de neurohemerythrin, associ&#xE9;s &#xE0; sa capacit&#xE9; &#xE0; lier l&#x26;#39;oxyg&#xE8;ne et le fer, dans la r&#xE9;ponse immunitaire inn&#xE9;e du syst&#xE8;me nerveux de sangsue &#xE0; l&#x26;#39;invasion bact&#xE9;rienne.

Up-r&#xE9;gulation de l&#x26;#39;expression Neurohemerythrin dans le syst&#xE8;me nerveux central de la sangsue m&#xE9;dicinale, Hirudo medicinalis, suite &#xE0; une blessure septique

Die Hochregulation der Expression neurohemerythrin im zentralen Nervensystem des Blutegels, Hirudo medicinalis, nach septischen Verletzungen.

Riportiamo qui alcuni risultati di un&#39;analisi proteomic dei cambiamenti nell&#39;espressione della proteina nella sanguisuga Hirudo medicinalis in risposta alle ferite settiche. Confronto dei gel bidimensionale della proteina ha rivelato parecchie differenze significative tra tessuti normali e sperimentali. Una proteina trovato per essere up-regolata dopo lo shock settico &egrave; stato identificato, attraverso una combinazione di Edman degradazione, spettrometria di massa e clonazione molecolare, come un nuovo membro della famiglia hemerythrin, un gruppo di proteine di trasporto del ferro non-eme ossigeno trovato in quattro phyla di invertebrati: sipunculids, priapulids, brachiopodi e anellidi. Abbiamo trovato l&#39;ibridazione in situ e immunocitochimica che la nuova proteina sanguisuga, che abbiamo chiamato neurohemerythrin, &egrave; infatti espresso in sanguisuga del sistema nervoso centrale. Della proteina e messaggio sono state individuate la coppia di grande glia entro il ganglionica compresa, nell&#39;Itaglia sei pacchetti che circondano somata neuronale in ogni ganglio centrale e nella coppia bilaterale di glia che separano assonale aghiformi nei nervi connettivi interganglionic. Nessuna espressione &egrave; stata rilevata nei neuroni centrali o in microglia del sistema nervoso centrale. Espressione &egrave; stata osservata anche in molti altri, tessuti non-neuronali della parete del corpo. Real-Time PCR esperimenti suggeriscono che neurohemerythrin &egrave; posttranscriptionaly up-regolato. Consideriamo potenziali ruoli di neurohemerythrin, connesso con la sua capacit&agrave; di legare ossigeno e ferro, nella risposta immunitaria innata del sistema nervoso sanguisuga all&#39;invasione batterica.

Up-regolazione dell&#39;espressione neurohemerythrin del sistema nervoso centrale di Sanguisuga medicinale, Hirudo medicinalis, seguito di infortunio settico.

&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x6557;&#x8840;&#x75C7;&#x6027;&#x50B7;&#x5BB3;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x767A;&#x73FE;&#x5909;&#x5316;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x89E3;&#x6790;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x4E8C;&#x6B21;&#x5143;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306F;&#x3001;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x76F8;&#x9055;&#x70B9;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x6557;&#x8840;&#x75C7;&#x6027;&#x30B7;&#x30E7;&#x30C3;&#x30AF;&#x304C;&#x30D8;&#x30E0;&#x30A8;&#x30EA;&#x30C8;&#x30EA;&#x30F3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x975E;&#x30D8;&#x30E0;&#x9244;&#x9178;&#x7D20;&#x8F38;&#x9001;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30A8;&#x30C9;&#x30DE;&#x30F3;&#x5206;&#x89E3;&#x3001;&#x8CEA;&#x91CF;&#x5206;&#x6790;&#x3001;&#x5206;&#x5B50;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x3001;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;4&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x9580;&#xFF1A;sipunculids&#x3001;priapulids&#x3001;&#x8155;&#x8DB3;&#x985E;&#x3068;&#x74B0;&#x5F62;&#x52D5;&#x7269;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;neurohemerythrin&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x305F;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x78BA;&#x304B;&#x306B;&#x86ED;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3067;&#x3067;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30E1;&#x30C3;&#x30BB;&#x30FC;&#x30B8;&#x3068;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x4F53;&#x3092;&#x56F2;&#x3080;6&#x30D1;&#x30B1;&#x30C3;&#x30C8;&#x306E;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x795E;&#x7D4C;&#x7DB2;&#x5185;&#x3067;&#x5927;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30DA;&#x30A2;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x5074;&#x4E00;&#x5BFE;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7BC0;&#x9593;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x795E;&#x7D4C;&#x5185;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x8EF8;&#x7D22;&#x675F;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x4E2D;&#x67A2;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3084;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x30DF;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x4F53;&#x58C1;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x975E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;PCR&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;neurohemerythrin&#x304C;posttranscriptionaly&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x79C1;&#x305F;&#x3061;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x4FB5;&#x5165;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x5148;&#x5929;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x9178;&#x7D20;&#x3068;&#x9244;&#x3092;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x80FD;&#x529B;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;neurohemerythrin&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x3066;&#x304F;&#x3060;&#x3055;&#x3044;&#x3002;

&#x6557;&#x8840;&#x75C7;&#x50B7;&#x5BB3;&#x5F8C;&#x306E;&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x3001;Hirudo&#x306E;Medicinalis&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Neurohemerythrin&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3001;

&#xC5EC;&#xAE30; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD; &#xC815;&#xD654; &#xC870; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; Hirudo medicinalis &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; proteomic &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC54C;&#xB824;&#xB4DC;&#xB9BD;&#xB2C8;&#xB2E4;. 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC824;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xCC28;&#xC774;&#xC810;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654; &#xC870; &#xC1FC;&#xD06C; Edman &#xC800;&#xD558;, &#xC9C8;&#xB7C9; &#xBD84;&#xC11D; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xD074;&#xB85C;&#xB2DD;, hemerythrin &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAD6C;&#xC131;&#xC6D0;&#xC73C;&#xB85C; 4 &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; phyla &#xC788;&#xB294; heme &#xCCA0; &#xC0B0;&#xC18C; &#xC804;&#xC1A1; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xADF8;&#xB8F9;&#xC758; &#xACB0;&#xD569;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xD6C4; &#xCD5C;&#xB300; &#xADDC;&#xC81C; &#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC1C;&#xACAC;: sipunculids, priapulids, &#xB958;&#xB098;, &#xBC0F; annelids. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBC0F; immunocytochemistry &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; neurohemerythrin &#xB77C;&#xB294;, &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xC81C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBA54;&#xC2DC;&#xC9C0;&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC740; &#xC2E0;&#xACBD; somata &#xAC01; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC808; &#xBC0F; axonal fascicles interganglionic &#xC5F0;&#xACB0; &#xC5B4; &#xC2E0;&#xACBD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xB9AC; &#xBA85;&#xACFC;&#xC758; &#xC591;&#xC790; &#xC30D;&#xC744; &#xB458;&#xB7EC;&#xC2F8;&#xACE0; 6 &#xD328;&#xD0B7; &#xBA85;&#xACFC;&#xC5D0;&#xC11C; ganglionic neuropile &#xB0B4;&#xC758; &#xD070; &#xBA85;&#xACFC; &#xC30D;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD;&#xC774; &#xC5C6;&#xB294; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB610;&#xB294; &#xC911;&#xCD94; microglia &#xAC80;&#xC0C9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC2DD; &#xB610;&#xD55C; &#xBAB8;&#xC744; &#xBCBD;&#xC5D0; &#xB9CE;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978;, &#xBE44; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04; PCR &#xC2E4;&#xD5D8; &#xADF8; neurohemerythrin posttranscriptionaly &#xC704;&#xB85C; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; neurohemerythrin, &#xC0B0;&#xC18C;&#xC640; &#xCCA0; &#xBD84;, &#xC138;&#xADE0; &#xCE68;&#xC785;&#xC744; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xB2A5; &#xC5F0;&#xAD00;&#xC758; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC778; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xACE0;&#xB824; &#xD558;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;.

&#xC57D; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;, Hirudo medicinalis, &#xC815;&#xD654; &#xC870; &#xBD80;&#xC0C1; &#xB2E4;&#xC74C;&#xC758; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0; neurohemerythrin &#xC2DD;&#xC758; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;.

Presentamos aqu&#xED; algunos resultados de un an&#xE1;lisis prote&#xF3;mico de los cambios en la expresi&#xF3;n de prote&#xED;nas en la sanguijuela Hirudo medicinalis, en respuesta a una lesi&#xF3;n s&#xE9;ptica. Comparaci&#xF3;n de los geles de prote&#xED;nas bidimensionales revel&#xF3; varias diferencias significativas entre los tejidos normales y experimentales. Una prote&#xED;na que se encuentra a ser regulados hasta despu&#xE9;s de shock s&#xE9;ptico se identific&#xF3;, mediante una combinaci&#xF3;n de degradaci&#xF3;n de Edman, espectrometr&#xED;a de masas, y la clonaci&#xF3;n molecular, como un nuevo miembro de la familia hemerythrin, un grupo de no-hierro hemo-prote&#xED;nas de transporte de ox&#xED;geno que se encuentran en cuatro phyla de invertebrados: sipunc&#xFA;lidos, priapulids, braqui&#xF3;podos, y an&#xE9;lidos. Encontramos por hibridaci&#xF3;n in situ e inmunocitoqu&#xED;mica que la nueva prote&#xED;na de sanguijuela, que hemos llamado neurohemerythrin, es, en efecto se expresa en la sanguijuela del sistema nervioso central. Tanto mensaje y prote&#xED;nas se detectaron en el par de gl&#xED;a grande dentro de la neuropile ganglionar, en la gl&#xED;a paquete seis que rodean somata neuronal en cada ganglio central, y en el par bilateral de la gl&#xED;a que separan fasc&#xED;culos axonales en los nervios conectivos interpuestos. No se detect&#xF3; expresi&#xF3;n en las neuronas centrales o en la microgl&#xED;a del sistema nervioso central. La expresi&#xF3;n tambi&#xE9;n se observ&#xF3; en muchos otros, no-tejidos neuronales en la pared del cuerpo. En tiempo real los experimentos de PCR sugieren que neurohemerythrin est&#xE1; regulado posttranscriptionaly. Consideramos que las funciones potenciales de neurohemerythrin, relacionados con su capacidad para atrapar el ox&#xED;geno y el hierro, en la respuesta inmune innata del sistema nervioso sanguijuela a la invasi&#xF3;n bacteriana.

Sobre regulaci&#xF3;n de la expresi&#xF3;n Neurohemerythrin en el sistema nervioso central de la sanguijuela medicinal, Hirudo medicinalis, Despu&#xE9;s de una lesi&#xF3;n s&#xE9;ptica

&#x95F4;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x5141;&#x8BB8;&#x5C0F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5206;&#x5B50;&#x53CA;&#x79BB;&#x5B50;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x7F1D;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x901A;&#x8BAF;&#x7684;&#x65F6;&#x7A7A;&#x5206;&#x5E03;&#x89C4;&#x5F8B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x673A;&#x5236;&#x7531;&#x54EA;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x56E0;&#x6B64;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5C5E;&#x6027;&#x548C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x547D;&#x8FD0;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x671F;&#x95F4;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x6C34;&#x86ED;&#x3001; &#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x662F;&#x7279;&#x522B;&#x6709;&#x5229;&#x7684;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x7528;&#x6765;&#x7814;&#x7A76;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x6D89;&#x53CA;&#x5DEE;&#x8DDD;&#x8DEF;&#x53E3;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x786E;&#x5B9A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x53EF;&#x5728;&#x5B66;&#x4E60;&#x4E2D;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x4E0E;&#x591A;&#x6570;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x6C34;&#x86ED;&#x7684;&#x95F4;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x4E5F;&#x7EC4;&#x6210;&#x7684; innexin &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x8DDD;&#x79BB;&#x7684;&#x8FDC;&#x8FD1;&#x4E0E;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684; pannexins&#xFF0C;&#x7531;&#x591A;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x7F16;&#x7801;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x514B;&#x9686;&#x5341;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x6C34;&#x86ED; innexins &#x548C;&#x63CF;&#x8FF0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x8FD9;&#x4E9B;&#xFF0C;&#x518D;&#x52A0;&#x4E0A;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x5148;&#x524D;&#x62A5;&#x544A;&#x6B64;&#x57FA;&#x56E0;&#x5BB6;&#x65CF;&#x6210;&#x5458;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x80DA;&#x80DA;&#x80CE;&#x5929; 6 &#x548C; 12&#xFF0C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x4E00;&#x6BB5;&#x65F6;&#x95F4;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E86;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x7279;&#x70B9;&#x3002;&#x56DB;&#x4E2A; innexins &#x88AB;&#x8868;&#x793A;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5728;&#x4E24;&#x4E2A;&#x800C;&#x51E0;&#x4E2A; innexins &#x88AB;&#x8868;&#x793A;&#x6392;&#x6CC4;&#x3001; &#x5FAA;&#x73AF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x548C;&#x751F;&#x6B96;&#x7684;&#x5668;&#x5B98;&#x3002;&#x7279;&#x522B;&#x611F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F; Hm inx6&#xFF0C;&#x5176;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x9650;&#x4E8E;&#x4E3A;&#x7279;&#x5F81;&#x7684; S &#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x8BA4;&#x5B9A;&#x4E3A;&#x7A81;&#x89E6;&#x524D;&#x5230;&#x6B64;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5176;&#x4ED6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x3002;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E24;&#x4E2A; innexins &#x8FD8;&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E2D;&#x663E;&#x793A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53D7;&#x9650;&#x5236;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x80B2;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x4E2D; innexins &#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

Gap junctions are direct intercellular channels that permit the passage of ions and small signaling molecules. The temporal and spatial regulation of gap junctional communication is, thus, one mechanism by which cell interactions, and hence cell properties and cell fate, may be regulated during development. The nervous system of the leech, Hirudo medicinalis, is a particularly advantageous system in which to study developmental mechanisms involving gap junctions because interactions between identified cells may be studied in vivo in both the embryo and the adult. As in most invertebrates, gap junctions in the leech are composed of innexin proteins, which are distantly related to the vertebrate pannexins and are encoded by a multi-gene family. We have cloned ten novel leech innexins and describe the expression of these, plus two other previously reported members of this gene family, in the leech embryo between embryonic days 6 and 12, a period during which the main features of the central nervous system are established. Four innexins are expressed in neurons and two in glia, while several innexins are expressed in the excretory, circulatory, and reproductive organs. Of particular interest is Hm-inx6, whose expression appears to be restricted to the characterized S cell and two other neurons putatively identified as presynaptic to this cell. Two other innexins also show highly restricted expressions in neurons and may be developmentally regulated.

Molecular characterization and embryonic expression of innexins in the leech Hirudo medicinalis.

Les jonctions lacunaires sont directs canaux intercellulaires qui permettent le passage des ions et des petites mol&#xE9;cules de signalisation. La r&#xE9;gulation temporelle et spatiale de la communication jonctions lacunaires est, par cons&#xE9;quent, un m&#xE9;canisme par lequel les interactions cellulaires, et donc des propri&#xE9;t&#xE9;s de cellules et le devenir des cellules, peut &#xEA;tre r&#xE9;gul&#xE9;e au cours du d&#xE9;veloppement. Le syst&#xE8;me nerveux de la sangsue, Hirudo medicinalis, est un syst&#xE8;me particuli&#xE8;rement avantageux dans lequel pour &#xE9;tudier les m&#xE9;canismes de d&#xE9;veloppement impliquant des jonctions lacunaires, car les interactions entre les cellules identifi&#xE9;es peuvent &#xEA;tre &#xE9;tudi&#xE9;es in vivo &#xE0; la fois dans l&#x26;#39;embryon et l&#x26;#39;adulte. Comme dans la plupart des invert&#xE9;br&#xE9;s, des jonctions lacunaires dans la sangsue sont compos&#xE9;es de prot&#xE9;ines innexin, qui sont de loin li&#xE9;s aux pannexins vert&#xE9;br&#xE9;s et sont cod&#xE9;es par une famille multi-g&#xE9;nique. Nous avons clon&#xE9; dix nouveaux innexins sangsues et de d&#xE9;crire l&#x26;#39;expression de celles-ci, ainsi que deux autres membres pr&#xE9;c&#xE9;demment rapport&#xE9;s de cette famille de g&#xE8;nes, dans l&#x26;#39;embryon de sangsue entre les jours embryonnaires 6 et 12, une p&#xE9;riode au cours de laquelle les principales caract&#xE9;ristiques du syst&#xE8;me nerveux central sont &#xE9;tablis . Quatre innexins sont exprim&#xE9;s dans les neurones et cellules gliales dans deux, tandis que plusieurs innexins sont exprim&#xE9;s dans le excr&#xE9;teur, circulatoire, et les organes reproducteurs. Il est particuli&#xE8;rement int&#xE9;ressant Hm-inx6, dont l&#x26;#39;expression semble &#xEA;tre limit&#xE9; &#xE0; la cellule S caract&#xE9;ris&#xE9; et deux autres neurones putativement identifi&#xE9; comme pr&#xE9;synaptique &#xE0; cette cellule. Deux autres innexins montrent aussi des expressions tr&#xE8;s restreints dans les neurones et peut &#xEA;tre r&#xE9;gul&#xE9;e par le d&#xE9;veloppement.

Caract&#xE9;risation mol&#xE9;culaire et d&#x26;#39;expression embryonnaire de Innexins dans la sangsue Hirudo medicinalis

GAP Junctions sind direkte interzellul&auml;re Kan&auml;le, die den Durchgang von Ionen und kleine signalisierende Molek&uuml;le zu erm&ouml;glichen. Die Verordnung zeitliche und r&auml;umliche L&uuml;cke junktionale Kommunikation ist also ein Mechanismus, durch welche Zelle Interaktionen, und daher Zelle Eigenschaften und Schicksal der Zelle, kann w&auml;hrend der Entwicklung reguliert werden. Das Nervensystem der Blutegel, Hirudo Medicinalis, ist ein besonders g&uuml;nstigen System, in dem Sie studieren mit Entwicklungsst&ouml;rungen Mechanismen Kreuzungen L&uuml;cke, weil Wechselwirkungen zwischen identifizierte Zellen in vivo sowohl Erwachsenen als auch der Embryo studiert werden k&ouml;nnen. Wie in den meisten Wirbellosen sind Gap Junctions in der Blutegel setzt sich aus Innexin Proteine, die entfernt an der vertebrate Pannexins verwandt sind und von einer Familie zwischen zahlreichen Genen codiert. Wir haben zehn neuartige Egel Innexins geklont und beschreiben den Ausdruck dieser, sowie zwei weiteren vorher eingetragenen Mitgliedern dieser gen-Familie, in der Egel-Embryo zwischen embryonalen Tage 6 und 12, ein Zeitraum, in dem die wichtigsten Merkmale des zentralen Nervensystems festgestellt werden. Vier Innexins werden in Neuronen und zwei in Glia, ausgedr&uuml;ckt, w&auml;hrend mehrere Innexins in den Ausscheidungsorganen, Kreislauf- und reproduktiven Organen ausgedr&uuml;ckt werden. Von besonderem Interesse ist Hm-inx6, deren Ausdruck erscheint eingeschr&auml;nkt auf die gekennzeichnete S-Zelle und zwei anderen Neuronen, die vermeintlich als pr&auml;synaptische Zelle identifiziert wird. Zwei andere Innexins auch stark eingeschr&auml;nkte Ausdr&uuml;cke in Neuronen und entwicklungspolitisch geregelt werden kann.

Molekulare Charakterisierung und embryonalen Ausdruck des Innexins in der Blutegel Hirudo Medicinalis.

Giunzioni di Gap sono diretti canali intercellulari che consentono il passaggio di ioni e piccole molecole di segnalazione. Il regolamento temporale e spazio della comunicazione giunzionale divario &egrave;, quindi, un meccanismo da cui interazioni cellula e quindi cella Propriet&agrave; e destino delle cellule, pu&ograve; essere regolata durante lo sviluppo. Il sistema nervoso di leech, Hirudo medicinalis, &egrave; un sistema particolarmente vantaggioso, in cui lo studio dello sviluppo meccanismi che coinvolgono gap giunzioni perch&eacute; le interazioni tra cellule identificate possono essere studiate in vivo sia l&#39;embrione che l&#39;adulto. Come la maggior parte invertebrati, giunzioni di gap in the leech sono composte da proteine innexin, che sono tiepidi i vertebrati pannexins e sono codificate da una famiglia multi-gene. Ci hanno clonato dieci sanguisuga romanzo innexins e descrivere l&#39;espressione di questi, oltre a due altri membri precedentemente segnalati di questa famiglia di geni, nell&#39;embrione di sanguisuga tra embrionali giorni 6 e 12, un periodo durante il quale vengono stabilite le caratteristiche principali del sistema nervoso centrale. Quattro innexins sono espresse nei neuroni e due in Itaglia, mentre parecchi innexins sono espressi negli organi escretori, circolatori e riproduttivi. Di particolare interesse &egrave; la Hm-inx6, la cui espressione sembra essere limitato a due altri neuroni stercore identificati come presinaptica a questa cella e cella S caratterizzata. Due altri innexins anche mostrare le espressioni altamente limitate nei neuroni e pu&ograve; essere regolato inerente allo sviluppo.

Caratterizzazione molecolare e l&#39;espressione embrionale del innexins nella sanguisuga Hirudo medicinalis.

&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x3084;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x901A;&#x904E;&#x3092;&#x8A31;&#x53EF;&#x3057;&#x3001;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x898F;&#x5236;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D1;&#x30C6;&#x30A3;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x904B;&#x547D;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306B;&#x8ABF;&#x6574;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x30D2;&#x30EB;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3001;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x3068;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;in vivo&#x3067;&#x691C;&#x8A0E;&#x3059;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x3001;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x767A;&#x9054;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x7279;&#x306B;&#x6709;&#x5229;&#x306A;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x3001;&#x30D2;&#x30EB;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x30B8;&#x30E3;&#x30F3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x200B;&#x200B;&#x30F3;&#x306F;&#x9060;&#x304F;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;pannexins&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30DE;&#x30EB;&#x30C1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;innexin&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3067;&#x69CB;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x80DA;&#x65E5;6&#x301C;12&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x80DA;&#x3001;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x6A5F;&#x80FD;&#x304C;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x671F;&#x9593;&#x3067;&#x3001;10&#x5C0F;&#x8AAC;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;innexins&#x3092;&#x30AF;&#x30ED;&#x30FC;&#x30CB;&#x30F3;&#x30B0;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D5;&#x30A1;&#x30DF;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E1;&#x30F3;&#x30D0;&#x30FC;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;innexins&#x306F;&#x6392;&#x6CC4;&#x3001;&#x5FAA;&#x74B0;&#x5668;&#x3001;&#x751F;&#x6B96;&#x5668;&#x5B98;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x9593;&#x56DB;innexins&#x306F;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x306E;2&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x7279;&#x5FB4;&#x3068;&#x3059;&#x308B;S&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x63A8;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x8B58;&#x5225;&#x3055;&#x308C;&#x308B;2&#x3064;&#x306E;&#x4ED6;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;HM-inx6&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;innexins&#x3082;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5236;&#x9650;&#x3055;&#x308C;&#x8868;&#x60C5;&#x3092;&#x898B;&#x305B;&#x308B;&#x3068;&#x767A;&#x9054;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x6027;&#x8CEA;&#x3068;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;Hirudo&#x306E;Medicinalis&#x3067;Innexins&#x306E;&#x80DA;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;

&#xAC2D; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xB294; &#xC774;&#xC628; &#xBC0F; &#xC791;&#xC740; &#xC2E0;&#xD638; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xD1B5;&#xACFC; &#xD5C8;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xC9C1;&#xC811; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C;. &#xAC2D; &#xC811;&#xD569; &#xD1B5;&#xC2E0;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC801; &#xBC0F; &#xACF5;&#xAC04; &#xADDC;&#xC815;&#xC740;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC138;&#xD3EC; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD558; &#xC5EC; &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xC140; &#xC18D;&#xC131; &#xBC0F; &#xC140; &#xC6B4;&#xBA85;, &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;, Hirudo medicinalis, &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xD2B9;&#xD788; &#xC720;&#xB9AC;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xC140; &#xAC04;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD0DC;&#xC544;&#xC640; &#xC131;&#xC778; &#xBAA8;&#xB450;&#xC5D0;&#xC11C; &#xACF5;&#xBD80; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB54C;&#xBB38;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD558;&#xB294; &#xCC28;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xCC98;&#xB7FC; &#xAC2D; &#xC811;&#xD569;&#xBD80;&#xB294; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBA3C; &#xCC99;&#xCD94; pannexins&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xD558; &#xACE0; multi-gene &#xAC00;&#xC871;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; innexin &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD6C;&#xC131; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; 10 &#xC18C;&#xC124; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; innexins &#xBCF5;&#xC81C; &#xD558; &#xACE0;, &#xC774;&#xB4E4;&#xC758; &#xC2DD; &#xD50C;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; &#xBC30;&#xC544; &#xC77C; 6 &#xBC0F; 12 &#xB144; &#xC0AC;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC774; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xAC00;&#xC871;&#xC758; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB41C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xBA64;&#xBC84;&#xC5D0; &#xC124;&#xBA85; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xC124;&#xB9BD; &#xD558;&#xB294; &#xAE30;&#xAC04;. 4 Innexins &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB450; &#xBA85;&#xACFC;, &#xC5EC;&#xB7EC; innexins, &#xC21C;&#xD658;, &#xBC30;&#xC124; &#xBC0F; &#xC0DD;&#xC2DD; &#xAE30;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xB418;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC758; Hm-inx6, &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xC2DD; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC774; S &#xC140; &#xBC0F; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xB274;&#xB7F0;&#xC73C;&#xB85C; presynaptic&#xC774; &#xC140;&#xC744; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB420; &#xB4EF;&#xD558;&#xB2E4;&#xB294;. &#xB610;&#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; innexins &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC81C;&#xD55C; &#xB41C; &#xC2DD;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xB2EC; &#xD1B5;&#xC81C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xBD84;&#xC790; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; Hirudo medicinalis&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; innexins&#xC758; &#xBC30;&#xC544; &#xC2DD;.

Gap cruces son directos canales intercelulares que permiten el paso de iones y peque&#xF1;as mol&#xE9;culas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n. La regulaci&#xF3;n temporal y espacial de la brecha junctional comunicaci&#xF3;n es, por tanto, un mecanismo por el cual las interacciones celulares, y por lo tanto las propiedades de celda y el destino de la c&#xE9;lula, puede ser regulada durante el desarrollo. El sistema nervioso de la sanguijuela, Hirudo medicinalis, es un sistema particularmente ventajoso en el que estudiar los mecanismos de desarrollo que involucran uniones debido a las interacciones entre las c&#xE9;lulas identificadas pueden ser estudiados in vivo, tanto en el embri&#xF3;n y el adulto. Al igual que en la mayor&#xED;a de los invertebrados, uniones de la sanguijuela se componen de prote&#xED;nas, que innexin son parientes lejanos de los vertebrados pannexins y est&#xE1;n codificados por una familia de genes m&#xFA;ltiples. Hemos clonado diez nuevos innexins sanguijuela y describen la expresi&#xF3;n de &#xE9;stos, adem&#xE1;s de otros dos miembros de informes anteriores de esta familia de genes, en el embri&#xF3;n sanguijuela entre los d&#xED;as 6 y 12 embrionarias, un per&#xED;odo durante el cual las caracter&#xED;sticas principales del sistema nervioso central se estableci&#xF3; . Cuatro innexins se expresan en las neuronas y c&#xE9;lulas gliales en dos, mientras que varios innexins se expresan en el excretor, circulatorio y &#xF3;rganos reproductivos. De particular inter&#xE9;s es Hm-inx6, cuya expresi&#xF3;n parece estar restringida a la c&#xE9;lula S caracterizado y dos otras neuronas putativamente identificado como presin&#xE1;ptica de esta celda. Dos innexins tambi&#xE9;n muestran expresiones muy restringidos en las neuronas y puede ser regulada de desarrollo.

Caracterizaci&#xF3;n molecular y expresi&#xF3;n embrionaria de Innexins en la sanguijuela Hirudo medicinalis

&#x5728;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5916;&#x6E90;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5DF2;&#x6210;&#x4E3A;&#x5B66;&#x4E60;&#x7F16;&#x7801;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x7684;&#x6709;&#x529B;&#x624B;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x62A5;&#x544A;&#x7684;&#x9694;&#x79BB;&#x548C;&#x4E09;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x548C; 5&#39; UTR &#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x4F38;&#x957F;&#x56E0;&#x7D20;-1alpha (HmEF-1alpha&#xFF09; &#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x529F;&#x80FD;&#x5206;&#x6790;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6807;&#x8BB0;&#x663E;&#x793A; EF 1alpha &#x57FA;&#x56E0;&#x548C;&#x81EA;&#x53D1;&#x6027;&#x4E4B;&#x4E00;&#x4E86;&#x6CDB;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#xFF0C;&#x800C;&#x5176;&#x4ED6;&#x4E24;&#x4E2A;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x4E5F;&#x8868;&#x793A;&#x4E86;&#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x4F53;&#x58C1;&#x808C;&#x8089;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5206;&#x6790;&#x8868;&#x660E;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x90FD;&#x663E;&#x793A;&#x5178;&#x578B;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8BB8;&#x591A;&#x529F;&#x80FD;&#x548C; EF 1alpha &#x521B;&#x529E;&#x4EBA;&#x4ECE;&#x5176;&#x4ED6;&#x7269;&#x79CD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x89C4;&#x8303;&#x5854;&#x5854;&#x6846;&#x5E8F;&#x5217;&#x548C;&#x9884;&#x6D4B;&#x4E00;&#x822C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x56E0;&#x5B50;&#x7ED3;&#x5408;&#x4F4D;&#x70B9; &#xFF08;&#x5982; CCATT&#xFF0C;&#x52A0;&#x5DDE;&#x6846;&#x548C; CG &#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x5730;&#x533A;&#xFF09;&#x3002;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (EGFP) &#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x8868;&#x8FBE;&#x8FD9;&#x4E9B; 5&#39; UTR &#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x86ED;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#x7684;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x6C34;&#x86ED; synaptobrevin &#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x5BA1;&#x67E5;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684;&#x76F4;&#x63A5;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x6838;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5FAE;&#x91CF;&#x6CE8;&#x5C04;&#x627E;&#x6765;&#x4EA7;&#x751F;&#x53EF;&#x9760;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x6784;&#x9020;&#x548C;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x5F15;&#x5165;&#x53EF;&#x9760;&#x548C;&#x6709;&#x6548;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#xFF0C;&#x6765;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x5730;&#x8868;&#x8FBE;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x80DA;&#x80CE;&#x53D1;&#x80B2;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x4F53;&#x5185;&#x6C34;&#x86ED;&#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; DNA &#x4FC3;&#x9500;&#x5458;&#x8FDB;&#x884C;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x523B;&#x5212;&#x3002;

The expression of exogenous genes in neurons and other cells has become a powerful means for studying the function of encoded proteins. We report here on the isolation and functional analysis of three Hirudo medicinalis actin gene promoters and the 5' UTR of a leech elongation factor-1alpha (HmEF-1alpha) gene. In situ hybridization labeling revealed that the EF-1alpha gene and one of the actins had pan-neuronal expression, whereas, the other two actin genes were expressed by the embryo's body wall musculature. Comparative analysis shows that they all display many features typical of actin and EF-1alpha promoters from other species, including canonical TATA box sequences and predicted general transcription factor binding sites (such as CCATT, CarB boxes and CG-rich regions). The ability of these 5' UTR sequences to drive expression of the enhanced green fluorescent protein (EGFP), leech cytoplasmic actin and leech synaptobrevin was examined. Direct intracellular nuclear, but not cytoplasmic, microinjection of each of the promoter sequences was found to produce reliably cellular expression of the reporter construct in both neuronal and muscle cells. These results introduce reliable and effective methods to selectively express genes in individual cells of the leech in vivo during embryonic development.

Characterizations of Hirudo medicinalis DNA promoters for targeted gene expression.

L&#x26;#39;expression des g&#xE8;nes exog&#xE8;nes dans les neurones et les cellules d&#x26;#39;autres est devenu un moyen puissant pour &#xE9;tudier la fonction des prot&#xE9;ines cod&#xE9;es. Nous rapportons ici l&#x26;#39;isolement et l&#x26;#39;analyse fonctionnelle des trois promoteurs Hirudo medicinalis g&#xE8;ne de l&#x26;#39;actine et la 5 &#x26;#39;UTR d&#x26;#39;un allongement de sangsue facteur-1alpha (FECH-1alpha) g&#xE8;ne. Dans l&#x26;#39;&#xE9;tiquetage hybridation in situ a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que le g&#xE8;ne EF-1 alpha et l&#x26;#39;un des actines eu pan-neuronal d&#x26;#39;expression, alors, les deux autres g&#xE8;nes d&#x26;#39;actine ont &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;es par le corps de l&#x26;#39;embryon mur musculature. L&#x26;#39;analyse comparative montre que tous pr&#xE9;sentent des caract&#xE9;ristiques typiques de nombreux promoteurs de l&#x26;#39;actine et EF-1alpha provenant d&#x26;#39;autres esp&#xE8;ces, y compris les s&#xE9;quences canoniques bo&#xEE;te TATA et pr&#xE9;dit g&#xE9;n&#xE9;raux des sites de liaison de facteurs de transcription (comme CCATT, bo&#xEE;tes Carb et CG-r&#xE9;gions riches). La capacit&#xE9; de s&#xE9;quences UTR ces 5 &#x26;#39;pour diriger l&#x26;#39;expression de la prot&#xE9;ine fluorescente verte am&#xE9;lior&#xE9;e (EGFP) actine, la sangsue cytoplasmique et la chute synaptobr&#xE9;vine a &#xE9;t&#xE9; examin&#xE9;. Directe microinjection intracellulaire nucl&#xE9;aire, mais pas cytoplasmique, de chacune des s&#xE9;quences promotrices &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;e pour produire de mani&#xE8;re fiable l&#x26;#39;expression cellulaire de la construction rapporteur dans les deux neuronale et les cellules musculaires. Ces r&#xE9;sultats d&#x26;#39;introduire des m&#xE9;thodes fiables et efficaces de mani&#xE8;re s&#xE9;lective expriment des g&#xE8;nes dans des cellules individuelles de la sangsue in vivo au cours du d&#xE9;veloppement embryonnaire.

Caract&#xE9;risations des promoteurs Hirudo medicinalis ADN pour l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique cibl&#xE9;e

Der Ausdruck der exogenen Gene in Nervenzellen und anderen Zellen ist ein wirksames Instrument zur Untersuchung der Funktion der kodierten Proteine geworden. Wir berichten hier &uuml;ber die Isolation und funktionelle Analyse von drei Hirudo Medicinalis Aktin gen-Promotoren und 5&#39; UTR ein Blutegel Dehnung Faktor-1alpha (HmEF-1alpha) Gen. In situ Hybridisierung Kennzeichnung ergeben, dass das EF-1alpha-gen und einer der des Actins Pfanne-neuronale Ausdruck, gehabt, w&auml;hrend die anderen zwei Aktin-Genen des Embryos K&ouml;rper Wand Muskulatur mitgeteilt hatten. Vergleichende Analyse zeigt, dass sie alle viele typisch f&uuml;r Aktin Anzeigefunktionen und EF-1alpha Promotoren von anderen Tierarten, darunter kanonische TATA box Sequenzen und vorhergesagten allgemeine &Uuml;bertragungfaktor binden Websites (z. B. CCATT, CarB-Boxen und CG-reiche Regionen). Die F&auml;higkeit dieser 5&#39;-UTR-Sequenzen mit dem Ausdruck der erweiterten gr&uuml;n fluoreszierenden Proteins (EGFP), Blutegel zytoplasmatischen Aktin und Blutegel Synaptobrevin wurde untersucht. Direkte intrazellul&auml;re nukleare, aber nicht zytoplasmatischen, Microinjection der Projekttr&auml;ger-Sequenzen wurde festgestellt, dass produzieren zuverl&auml;ssig zellul&auml;re Ausdruck des Reporter-Konstrukts in beiden neuronalen und Muskel-Zellen. Diese Ergebnisse stellen zuverl&auml;ssige und effektive Methoden, um gezielt Gene in den einzelnen Zellen der Blutegel in-vivo w&auml;hrend der Embryonalentwicklung Ausdruck.

Charakterisierungen der Hirudo Medicinalis DNA F&ouml;rderer f&uuml;r gezielte Genexpression.

L&#39;espressione di geni esogeni in neuroni e altre cellule &egrave; diventato un potente mezzo per studiare la funzione delle proteine codificate. Segnaliamo qui sull&#39;isolamento e l&#39;analisi funzionale dei tre Hirudo medicinalis actina gene promotori e la 5&#39; UTR del gene fattore-1alpha (HmEF-1alpha) allungamento sanguisuga. Ibridazione in situ di etichettatura ha rivelato che il gene EF-1alpha e uno l&#39;actina avevano espressione pan-neuronale, mentre gli altri due geni di actina sono stati espressi dalla muscolatura della parete di corpo dell&#39;embrione. Analisi comparativa dimostra che mostrano molte caratteristiche tipiche dell&#39;actina e promotori di EF-1alpha da altre specie, tra cui canonica TATA box sequenze e fattore di trascrizione generale predetto vincolante siti (ad esempio CCATT, CarB scatole e regioni ricche di CG). La capacit&agrave; di questi 5&#39; UTR sequenze all&#39;espressione di unit&agrave; della proteina fluorescente verde migliorata (EGFP), sanguisuga actina citoplasmatica e sinaptobrevina leech &egrave; stato esaminato. Microinjection intracellulare nucleare, ma non citoplasmatica, diretta di ciascuna delle sequenze promotore &egrave; stato trovato per produrre attendibilmente cellulare espressione del costrutto reporter in entrambi i neuroni e le cellule del muscolo. Questi risultati introducono metodi affidabili ed efficaci per esprimere selettivamente geni nelle cellule individuali di sanguisuga in vivo durante lo sviluppo embrionale.

Caratterizzazioni di Hirudo medicinalis promotori del DNA per l&#39;espressione del gene bersaglio.

&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3068;&#x4ED6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3067;&#x5916;&#x6765;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;3&#x3064;&#x306E;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3068;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x4F38;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;-1&#x3B1;&#xFF08;HmEF-1&#x3B1;&#xFF09;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;5 &#x26;#39;UTR&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3068;&#x6A5F;&#x80FD;&#x89E3;&#x6790;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;&#x3002; in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30E9;&#x30D9;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x80DA;&#x306E;&#x4F53;&#x58C1;&#x7B4B;&#x8089;&#x7D44;&#x7E54;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x4E00;&#x65B9;&#x3001;EF-1&#x3B1;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x53CA;&#x3073;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30F3;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6BD4;&#x8F03;&#x5206;&#x6790;&#x306F;&#x3001;&#x5F7C;&#x3089;&#x304C;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6A19;&#x6E96;&#x7684;&#x306A;TATA&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x914D;&#x5217;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x4ED6;&#x306E;&#x7A2E;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;EF-1&#x3B1;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4EE3;&#x8868;&#x7684;&#x306A;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x8868;&#x793A;&#x3057;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x8EE2;&#x5199;&#x56E0;&#x5B50;&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#xFF08;&#x4F8B;&#x3048;&#x3070;CCATT&#x3001;&#x70AD;&#x6C34;&#x5316;&#x7269;&#x30DC;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x3068;CG-&#x30EA;&#x30C3;&#x30C1;&#x9818;&#x57DF;&#x306A;&#x3069;&#xFF09;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;EGFP&#xFF09;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30D6;&#x30EC;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x99C6;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;5 &#x26;#39;UTR&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x76F4;&#x63A5;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x306E;&#x6838;&#x304C;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8CEA;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x914D;&#x5217;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B8;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x7B4B;&#x8089;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3067;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3059;&#x308B;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x4F5C;&#x308A;&#x51FA;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x80DA;&#x767A;&#x751F;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4FE1;&#x983C;&#x6027;&#x306E;&#x9AD8;&#x3044;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x3054;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;Hirudo&#x306E;Medicinalis DNA&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30AD;&#x30E3;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30EA;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB2E4;&#xB978; &#xC138;&#xD3EC; exogenous &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; &#xACF5;&#xBD80; &#xC778;&#xCF54;&#xB529;&#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xC218;&#xB2E8;&#xC774; &#xB418;&#xACE0;&#xC788;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xACE0;&#xB9BD;&#xACFC; 3 Hirudo medicinalis &#xB9D0;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130;&#xC640;&#xB294; 5&#39; UTR &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;-1alpha (HmEF-1alpha) &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xB77C;&#xBCA8; &#xBC18;&#xBA74; &#xD0DC;&#xC544;&#xC758; &#xBAB8;&#xC774; &#xBCBD; &#xADFC;&#xC721;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xB978; &#xB450; &#xB9D0;&#xB77C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4; EF 1alpha &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC640;&#xB294; actins &#xC911; &#xD32C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DD; &#xD588;&#xB2E4; &#xBC1D;&#xD614;&#xB2E4;. &#xBE44;&#xAD50; &#xBD84;&#xC11D;&#xC774; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xB9CE;&#xC740; &#xAE30;&#xB2A5; &#xB9D0;&#xB77C;&#xC758; &#xC804;&#xD615;&#xC801;&#xC778; &#xD45C;&#xC2DC; &#xC815;&#xC2DD; &#xD0C0; &#xD0C0;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC885;&#xC5D0;&#xC11C; EF 1alpha &#xD504;&#xB85C;&#xBAA8;&#xD130; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC640; &#xC608;&#xCE21; &#xB41C; &#xC77C;&#xBC18; &#xC804;&#xC0AC; &#xC778;&#xC790; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; (&#xC608;: CCATT, &#xC218;&#xD654;&#xBB3C; &#xC0C1;&#xC790;&#xC640; cg&#xB85C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC9C0;&#xC5ED;) &#xC0C1;&#xC790;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (EGFP)&#xC758; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC2DD; 5&#39; UTR &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xB2A5;&#xB825; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; &#xB9D0;&#xB77C; &#xACE0; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; synaptobrevin &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xAC01; &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xC758; &#xC9C1;&#xC811; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xD575;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xD558;&#xC9C0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC9C8; microinjection &#xC2E0;&#xACBD; &#xB450; &#xAE30;&#xC790; &#xAD6C;&#xBB38; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2DD; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD558; &#xACE0; &#xADFC;&#xC721;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xBC30;&#xC544; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC140;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD0C0;&#xAC9F;&#xB41C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Hirudo medicinalis DNA &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC758; characterizations.

La expresi&#xF3;n de genes ex&#xF3;genos en las neuronas y otras c&#xE9;lulas se ha convertido en un medio eficaz para estudiar la funci&#xF3;n de las prote&#xED;nas codificadas. Se presenta aqu&#xED; en el aislamiento y el an&#xE1;lisis funcional de los tres promotores de Hirudo medicinalis gen de la actina y el 5 &#x26;#39;UTR de un factor de elongaci&#xF3;n de la sanguijuela-1 alfa (HMEF-1 alfa) de genes. En el etiquetado de hibridaci&#xF3;n in situ revel&#xF3; que el gen EF-1 alfa y uno de los actins ten&#xED;a pan-neuronal expresi&#xF3;n, mientras que, los otros dos genes de actina se expresa por el cuerpo de la musculatura del embri&#xF3;n pared. El an&#xE1;lisis comparativo muestra que todos ellos muestran muchas caracter&#xED;sticas t&#xED;picas de la actina y la EF-1 alfa, los promotores de otras especies, incluyendo las secuencias can&#xF3;nicas caja TATA y predijo generales factor de transcripci&#xF3;n sitios de uni&#xF3;n (como CCATT, cajas de carbohidratos y las regiones ricas en GC). La capacidad de estas secuencias 5 &#x26;#39;UTR para dirigir la expresi&#xF3;n de la prote&#xED;na verde fluorescente mejorada (EGFP), sanguijuela citopl&#xE1;smica actina y sinaptobrevina sanguijuela fue examinado. Directa microinyecci&#xF3;n intracelular nuclear, pero no citopl&#xE1;smico, de cada una de las secuencias del promotor se encontr&#xF3; que produc&#xED;a expresi&#xF3;n fiable celular del reportero construir tanto en neuronas y c&#xE9;lulas musculares. Estos resultados introducir m&#xE9;todos fiables y eficaces para expresar selectivamente genes en las c&#xE9;lulas individuales de la sanguijuela en vivo durante el desarrollo embrionario.

Las caracterizaciones de los promotores Hirudo medicinalis de ADN para la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica dirigida

Microtargeted &#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x751F;&#x6D3B;&#x80DA;&#x80CE;&#x57FA;&#x56E0;&#x67AA;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x4F7F;&#x7528;&#x6C14;&#x52A8;&#x6BDB;&#x7EC6;&#x7BA1;&#x67AA;&#x3002;

Microtargeted gene silencing and ectopic expression in live embryos using biolistic delivery with a pneumatic capillary gun.

Gene Silencing Microtargeted et d&#x26;#39;expression ectopique dans les embryons vivants &#xE0; l&#x26;#39;aide de livraison Biolistic avec un pistolet pneumatique capillaire

Microtargeted gen-silencing und ektopische Expression in Leben Embryonen mit biolistische Lieferung mit einer pneumatischen Kapillar-Kanone.

Microtargeted silenziamento genico ed espressione ectopica in live embrioni utilizzando tali consegna con una pistola pneumatica capillare.

&#x7A7A;&#x6C17;&#x5727;&#x30AD;&#x30E3;&#x30D4;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x30AC;&#x30F3;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x9283;Delivery&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x80DA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;Microtargeted&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;

Microtargeted &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; &#xD558; &#xACE0; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; &#xBC30;&#xC544; biolistic &#xBC30;&#xB2EC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC555;&#xCD95; &#xACF5;&#xAE30;&#xB97C; &#xB123;&#xC740; &#xBAA8; &#xC138;&#xAD00; &#xCD1D; &#xC0B4;.

El silenciamiento g&#xE9;nico Microtargeted y la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica en embriones vivos mediante la entrega biol&#xED;stica con una pistola neum&#xE1;tica capilar

&#x4E00;&#x65E6;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x56FA;&#x6709;&#x514D;&#x75AB;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x5DF2;&#x77E5;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x80FD;&#x591F;&#x5B89;&#x88C5;&#x5176;&#x81EA;&#x8EAB;&#x56FA;&#x6709;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x867D;&#x7136;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x89E3;&#x91CA;&#x7684;&#x4E00;&#x822C;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x5929;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x673A;&#x5236;&#x975E;&#x5E38;&#x6709;&#x7528;&#xFF0C;&#x53EA;&#x6709;&#x7A00;&#x5C11;&#x6709;&#x6570;&#x636E;&#x5BF9;&#x514D;&#x75AB;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x8FD9;&#x7EC4;&#x5185;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x8FD9;&#x9879;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x65B0;&#x6570;&#x636E;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x7684;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; 2 D &#x663E;&#x793A;&#x7279;&#x5B9A;&#x66F4;&#x6539;&#x540E;&#x7EC6;&#x83CC;&#x7684;&#x6311;&#x6218;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x8868;&#x660E;&#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x80FD;&#x591F;&#x5C06;&#x88C5;&#x8F7D;&#x5230;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x6FC0;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED; CNS &#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x51DD;&#x80F6;&#x4E2D;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x666F;&#x70B9;&#x3002;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x9274;&#x5B9A;&#x7684;&#x4F9D;&#x636E;&#x4E0E;&#x516C;&#x5F00;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x6BD4;&#x8F83;&#x548C;&#x6700;&#x8FD1;&#x6210;&#x7ACB;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x65E0;&#x5BB3;&#x73AF;&#x5883;&#x6280;&#x672F;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x3002;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x7684;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x6027;&#x8D28;&#x8868;&#x660E;&#x660E;&#x786E;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9AA8;&#x67B6;&#x91CD;&#x6392;&#x3001; &#x5185;&#x8D28;&#x7F51;&#x5E94;&#x6FC0;&#x3001; &#x8C03;&#x5236;&#x7A81;&#x89E6;&#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C;&#x9499;&#x52A8;&#x5458;&#xFF0C;&#x6240;&#x6709;&#x90FD;&#x662F;&#x5728;&#x7B2C;&#x4E00;&#x4E2A; 24 &#x5C0F;&#x65F6;&#x7684;&#x8FD9;&#x79CD;&#x53CD;&#x5E94;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5177;&#x4F53;&#x8868;&#x793A;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x4E3A;&#x795E;&#x7ECF;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x514D;&#x75AB;&#x5E94;&#x7B54;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4EC0;&#x4E48;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x4E86;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x7EC4;&#x5B66;&#x7684;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7EC6;&#x83CC;&#x6311;&#x6218;&#x4E0B;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x3002;

Once considered as lacking intrinsic immune mechanisms, the CNS of vertebrates is now known to be capable of mounting its own innate immune response. Interestingly, while invertebrates have been very useful in the interpretation of general vertebrate innate immunity mechanisms, only scarce data are available on the immune response of nervous tissue within this group. This study provides new data on the innate immune response of medicinal leech Hirudo medicinalis CNS. We identified several spots in 2-D gels of leech CNS proteins that showed specific changes following bacterial challenge, thus demonstrating the ability of the leech nervous system to mount a response to an immune stress. Protein identifications were based on comparison of sequence data with publicly available databases and a recently established leech ESTs database. The broad nature of the identified proteins suggests a clear involvement of cytoskeletal rearrangements, endoplasmic reticulum stress, modulation of synaptic activity and calcium mobilization, all during the first 24 hours of this response. Moreover, several of these proteins are specifically expressed in glial cells, suggesting an important role for glial cells in the immune response of the leech nervous system, similar to what has been observed in vertebrates.

Proteome modifications of the medicinal leech nervous system under bacterial challenge.

Une fois consid&#xE9;r&#xE9; comme manquant intrins&#xE8;ques des m&#xE9;canismes immunitaires, les CNS des vert&#xE9;br&#xE9;s est maintenant connu pour &#xEA;tre capable de monter sa propre r&#xE9;ponse immunitaire inn&#xE9;e. Il est int&#xE9;ressant, tandis que les invert&#xE9;br&#xE9;s ont &#xE9;t&#xE9; tr&#xE8;s utiles dans l&#x26;#39;interpr&#xE9;tation des m&#xE9;canismes g&#xE9;n&#xE9;raux de vert&#xE9;br&#xE9;s de l&#x26;#39;immunit&#xE9; inn&#xE9;e, seules les donn&#xE9;es limit&#xE9;es sont disponibles sur la r&#xE9;ponse immunitaire du tissu nerveux dans ce groupe. Cette &#xE9;tude fournit de nouvelles donn&#xE9;es sur la r&#xE9;ponse immunitaire inn&#xE9;e de la sangsue m&#xE9;dicinale CNS Hirudo medicinalis. Nous avons identifi&#xE9; plusieurs endroits dans les gels 2-D des prot&#xE9;ines du syst&#xE8;me nerveux central de sangsues qui ont montr&#xE9; des changements sp&#xE9;cifiques suivants d&#xE9;fi bact&#xE9;rienne, d&#xE9;montrant ainsi la capacit&#xE9; du syst&#xE8;me nerveux de sangsue de monter une r&#xE9;ponse &#xE0; un stress immunitaire. Identifications de prot&#xE9;ines ont &#xE9;t&#xE9; bas&#xE9;es sur la comparaison des donn&#xE9;es de s&#xE9;quence avec des bases de donn&#xE9;es accessibles au public et une chute r&#xE9;cemment mis en place de bases de donn&#xE9;es TER. Le caract&#xE8;re g&#xE9;n&#xE9;ral des prot&#xE9;ines identifi&#xE9;es sugg&#xE8;re une implication claire des r&#xE9;arrangements du cytosquelette, le stress du r&#xE9;ticulum endoplasmique, la modulation de l&#x26;#39;activit&#xE9; synaptique et la mobilisation de calcium, tout au cours des 24 premi&#xE8;res heures de cette r&#xE9;ponse. En outre, plusieurs de ces prot&#xE9;ines sont sp&#xE9;cifiquement exprim&#xE9;s dans les cellules gliales, sugg&#xE9;rant un r&#xF4;le important pour les cellules gliales dans la r&#xE9;ponse immunitaire du syst&#xE8;me nerveux de sangsue, semblable &#xE0; ce qui a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e chez les vert&#xE9;br&#xE9;s.

Modifications du prot&#xE9;ome du syst&#xE8;me nerveux sous sangsue m&#xE9;dicinale D&#xE9;fi bact&#xE9;rienne

Sobald als intrinsische immune Mechanismen fehlen, ist die CNS von Wirbeltieren bekannt, dass Montage eigenen angeborenen Immunantwort k&ouml;nnen. Interessanterweise w&auml;hrend Wirbellosen sehr n&uuml;tzlich bei der Auslegung der allgemeinen vertebrate Angeborene Immunit&auml;t Mechanismen wurden, stehen nur knappe Daten auf die Immunantwort des Nervengewebes innerhalb dieser Gruppe. Diese Studie liefert neue Daten &uuml;ber die angeborenen Immunantwort des medizinischen Blutegel Hirudo Medicinalis CNS. Wir haben mehrere Stellen in 2-D-Gele der Blutegel-CNS-Proteine, die bestimmte &Auml;nderungen nach bakteriellen Herausforderung, so demonstriert die F&auml;higkeit des Nervensystems Blutegel, eine Antwort auf eine immun Stress zeigte identifiziert. Protein-Identifikationen basierte auf Vergleich der Sequenzdaten mit &ouml;ffentlich zug&auml;nglichen Datenbanken und einem vor kurzem gegr&uuml;ndete Blutegel ESTs Datenbank. Die Breite Natur der identifizierten Proteine schl&auml;gt eine klare Einbeziehung Zytoskelett Umlagerungen, Endoplasmatisches Reticulum Stress, Modulation des synaptischen Aktivit&auml;t und Calcium-Mobilisierung, alle w&auml;hrend der ersten 24 Stunden dieser Reaktion. Dar&uuml;ber hinaus werden mehrere dieser Proteine spezifisch ausgedr&uuml;ckt in Gliazellen, schl&auml;gt eine wichtige Rolle f&uuml;r die Gliazellen in der Immunantwort des Blutegel Nervensystems, &auml;hnlich, was bei Wirbeltieren beobachtet worden ist.

Proteome Modifikationen des Nervensystems medizinische Blutegel unter bakteriellen Herausforderung.

Una volta considerato come privo di intrinseche meccanismi immuni, SNC dei vertebrati ora &egrave; conosciuto per essere in grado di montare la propria risposta immunitaria innata. &Egrave; interessante notare che, mentre gli invertebrati sono stati molto utili nell&#39;interpretazione dei meccanismi di immunit&agrave; innata vertebrati generale, solo scarsi dati sono disponibili sulla risposta immunitaria del tessuto nervoso all&#39;interno di questo gruppo. Questo studio fornisce nuovi dati sulla risposta immunitaria innata di medicinale sanguisuga Hirudo medicinalis CNS. Abbiamo individuato diversi punti in 2-D gel di proteine di CNS sanguisuga che ha mostrato cambiamenti specifici in seguito sfida batterica, dimostrando cos&igrave; la capacit&agrave; del sistema nervoso sanguisuga per montare una risposta ad uno stress immunitario. Identificazioni di proteina sono stati basati sul confronto dei dati di sequenza con basi di dati pubblicamente disponibili e una sanguisuga recentemente stabilita ESTs database. La vasta natura delle proteine identificate suggerisce un chiaro coinvolgimento dei riarrangiamenti citoscheletrici, lo stress del reticolo endoplasmatico, modulazione di synaptic mobilitazione di attivit&agrave; e di calcio, tutti durante le prime 24 ore di questa risposta. Inoltre, molte di queste proteine sono specificamente espresso nelle cellule gliali, suggerendo un ruolo importante per le cellule gliali nella risposta immunitaria del sistema nervoso sanguisuga, simile a quello che &egrave; stato osservato nei vertebrati.

Proteoma modifiche del sistema nervoso Sanguisuga medicinale sotto sfida batterica.

&#x4E00;&#x5EA6;&#x672C;&#x8CEA;&#x7684;&#x306A;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x6B20;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x898B;&#x306A;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306F;&#x73FE;&#x5728;&#x3001;&#x72EC;&#x81EA;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306F;&#x3001;&#x4E00;&#x822C;&#x7684;&#x306A;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x81EA;&#x7136;&#x514D;&#x75AB;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306E;&#x89E3;&#x91C8;&#x306B;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x4E00;&#x65B9;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x5E0C;&#x5C11;&#x306A;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5185;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3067;&#x3054;&#x5229;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3060;&#x3051;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x5148;&#x5929;&#x6027;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x514D;&#x75AB;&#x3001;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3078;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x30DE;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30D2;&#x30EB;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x767A;&#x63EE;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A6;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;CNS&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;2-D&#x30B2;&#x30EB;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x30B9;&#x30DD;&#x30C3;&#x30C8;&#x3092;&#x540C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x540C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x516C;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x6700;&#x8FD1;&#x8A2D;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;EST&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3068;&#x306E;&#x914D;&#x5217;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x6BD4;&#x8F03;&#x306B;&#x57FA;&#x3065;&#x3044;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x6027;&#x8CEA;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x306E;&#x518D;&#x914D;&#x5217;&#x3001;&#x5C0F;&#x80DE;&#x4F53;&#x30B9;&#x30C8;&#x30EC;&#x30B9;&#x3001;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x5909;&#x8ABF;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306E;&#x6700;&#x521D;&#x306E;24&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x52D5;&#x54E1;&#x306E;&#x660E;&#x78BA;&#x306A;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306F;&#x7279;&#x306B;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3068;&#x4F3C;&#x86ED;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x6311;&#x6226;&#x306E;&#x4E0B;&#x3067;&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30AA;&#x30FC;&#x30E0;&#x5909;&#x66F4;

&#xC77C;&#xB2E8; &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xBCF8;&#xC9C8;&#xC801;&#xC778; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC;, &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC911;&#xCD94; &#xC9C0;&#xAE08; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xC7A5;&#xCC29; &#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xC77C;&#xBC18; &#xCC99;&#xCD94; &#xC120; &#xCC9C; &#xC801; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xD574;&#xC11D;&#xC5D0; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC548;, &#xBD80;&#xC871; &#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB9CC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC870;&#xC9C1;&#xC774;&#xC774; &#xADF8;&#xB8F9; &#xB0B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xC57D; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; Hirudo medicinalis CNS&#xC758; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; 2 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC824; &#xC138;&#xADE0; &#xB3C4;&#xC804;, &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xD0D1;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC8FC;&#xB294; &#xD2B9;&#xC815; &#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xB97C; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC900; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; CNS &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD00;&#xAD11; &#xBA85;&#xC18C; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xACF5;&#xAC1C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC640;&#xC758; &#xBE44;&#xAD50;&#xC640; &#xCD5C;&#xADFC; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; ESTs &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xAE30;&#xBC18;&#xC73C;&#xB85C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC790;&#xC5F0;&#xC758; cytoskeletal &#xC7AC;&#xBC30;&#xC5F4;, endoplasmic &#xADF8;&#xBB3C; &#xC2A4;&#xD2B8;&#xB808;&#xC2A4;,&#xC774; &#xBC18;&#xC751;&#xC758; &#xCCAB; 24 &#xC2DC;&#xAC04; &#xB3D9;&#xC548; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2DC; &#xB0C5; &#xC2A4; &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; &#xCE7C;&#xC298; &#xB3D9;&#xC6D0;&#xC758; &#xBCC0;&#xC870; &#xBD84;&#xBA85; &#xCC38;&#xC5EC;&#xB97C; &#xC81C;&#xC548;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAD6C;&#xCCB4;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xD604; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; glial &#xC138;&#xD3EC; &#xAD50; &#xC140; &#xC5B4;&#xB5A4; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xBA74;&#xC5ED; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xC138;&#xADE0;&#xC131; &#xB3C4;&#xC804; &#xBC11;&#xC758; &#xC57D; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACC4;&#xD1B5;&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xD14C;&#xC634; &#xC218;&#xC815;.

Una vez considerada como carente intr&#xED;nsecas mecanismos inmunes, el SNC de los vertebrados se sabe ahora que es capaz de montar su propia respuesta inmune innata. Curiosamente, mientras que los invertebrados han sido muy &#xFA;tiles en la interpretaci&#xF3;n de los mecanismos generales de vertebrados inmunidad innata, s&#xF3;lo escasos datos disponibles sobre la respuesta inmune del tejido nervioso dentro de este grupo. Este estudio proporciona nuevos datos sobre la respuesta inmune innata del sistema nervioso central medicinales sanguijuela Hirudo medicinalis. Se identificaron varios puntos en los geles 2-D de SNC sanguijuela prote&#xED;nas que mostraron cambios espec&#xED;ficos siguientes reto bacteriano, demostrando as&#xED; la capacidad del sistema nervioso sanguijuela para montar una respuesta a un estr&#xE9;s inmunol&#xF3;gico. Identificaci&#xF3;n de prote&#xED;nas se basa en la comparaci&#xF3;n de datos de secuencias con bases de datos p&#xFA;blicamente disponibles y en un reciente creaci&#xF3;n de bases de datos de sanguijuela tecnolog&#xED;as ecol&#xF3;gicamente racionales. El car&#xE1;cter amplio de las prote&#xED;nas identificadas sugiere una clara participaci&#xF3;n de reordenamientos del citoesqueleto, el estr&#xE9;s del ret&#xED;culo endopl&#xE1;smico, la modulaci&#xF3;n de la actividad sin&#xE1;ptica y la movilizaci&#xF3;n de calcio, todo durante las primeras 24 horas de esta respuesta. Adem&#xE1;s, varias de estas prote&#xED;nas se expresan espec&#xED;ficamente en las c&#xE9;lulas gliales, lo que sugiere un papel importante para las c&#xE9;lulas gliales en la respuesta inmune del sistema nervioso sanguijuela, similar a lo que se ha observado en vertebrados.

Modificaciones del proteoma de Medicamentos del sistema nervioso en la sanguijuela exposici&#xF3;n a las bacterias

&#x6C34;&#x86ED;&#x80DA;&#x3001; &#x5916;&#x56F4;&#x68B3;&#x683C; (CC) &#x53D1;&#x9001;&#x51FA;&#x8BB8;&#x591A;&#x4E0D;&#x91CD;&#x53E0;&#xFF0C;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x5C16;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x5E76;&#x884C;&#x589E;&#x957F;&#x548C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x652F;&#x67B6;&#x7684;&#x540E;&#x671F;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC1;&#x79FB;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5C42;&#x659C;&#x808C;&#x3002;&#x63A2;&#x8BA8;&#x5982;&#x4F55;&#x751F;&#x6210;&#x5E73;&#x884C;&#x6392;&#x5217;&#x7684;&#x6211;&#x4EEC;&#x9996;&#x5148;&#x8868;&#x793A;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x86CB;&#x767D;&#x7ED3;&#x5408;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x7814;&#x7A76; CC &#x9AA8;&#x67B6;&#x7EC4;&#x4EF6;&#x7684;&#x6392;&#x5217;&#x65B9;&#x5F0F;&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6807;&#x8BB0;&#x6709;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x3002;&#x8FD9;&#x8868;&#x660E;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x88AB;&#x5272;&#x88C2;&#x6210; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;-&#x4E30;&#x5BCC;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x548C;&#x5BCC;&#x542B;&#x5FAE;&#x7BA1;&#x7684;&#x4E2D;&#x90E8;&#x5730;&#x533A;&#x3002;2 &#x53CC;&#x5149;&#x5B50;&#x6FC0;&#x5149;&#x626B;&#x63CF;&#x663E;&#x5FAE;&#x955C;&#x7684;&#x5EF6;&#x65F6;&#x5206;&#x6790;&#x663E;&#x793A;&#x6D88;&#x59D4;&#x4F1A;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x52A8;&#x6001;&#xFF0C;&#x6B63;&#x5728;&#x5FEB;&#x901F;&#x7684; filopodial &#x6269;&#x5C55;&#x548C;&#x9000;&#x7F29;&#x3002;Filopodial &#x4F7F;&#x7528;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x957F;&#x5EA6;&#x6D4B;&#x91CF;&#x53D1;&#x73B0;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x524D;&#x6CBF;&#x53D6;&#x5F97;&#x663E;&#x8457;&#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x5BFF;&#x547D;&#x548C;&#x957F;&#x5EA6;&#x6BD4;&#x5916;&#x4FA7;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x77ED;&#x6682;&#x7684;&#x6A2A;&#x5411;&#x4F8B;&#x8BC1;&#xFF0C;&#x660E;&#x663E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0E;&#x76F8;&#x90BB;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x5C06;&#x5176; &#xFF08;&#x5728; 2-4 &#x5206;&#x949F;&#xFF09; &#x5185;&#x51E0;&#x4E4E;&#x7ACB;&#x5373;&#x9000;&#x7F29;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x9884;&#x6D4B;&#x6307;&#x6807;&#x3002;&#x5F53;&#x63A5;&#x89E6;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x53C8;&#x56E0;&#x70E7;&#x8680;&#x4E2A;&#x522B; CCs &#x65F6;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x76F8;&#x90BB;&#x8282;&#x6BB5;&#x90BB;&#x5C45;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x53D1;&#x73B0;&#x5DF2;&#x5220;&#x9664;&#x7684;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684;&#x65B9;&#x5411;&#x4F1A;&#x5927;&#x5927;&#x52A0;&#x957F;&#x3002;Cytochalasin D &#x6270;&#x4E71; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x88C5;&#x914D;&#x7684;&#x4F4E;&#x5242;&#x91CF;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#x5BFC;&#x81F4; filopodial &#x9000;&#x7F29;&#x548C;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x5D29;&#x6E83;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5BFC;&#x81F4;&#x8BB8;&#x591A; CC &#x6D41;&#x7A0B;&#x3001; &#x4F17;&#x591A;&#x4EA4;&#x53C9;&#x9519;&#x8BEF;&#x548C;&#x635F;&#x5931;&#x7684;&#x5E76;&#x884C;&#x5EA6;&#x7684;&#x5206;&#x5C94;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x5B58;&#x5728;&#x7684;&#x6D88;&#x59D4;&#x4F1A;&#x7684;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8054;&#x7CFB;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x6392;&#x65A5;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

&#x6D3B;&#x4F53;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x548C; filopodial &#x52A8;&#x6001;&#xFF1A; &#x63A5;&#x89E6;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x9000;&#x7F29;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x5BFC;&#x81F4;&#x540C;&#x7EA7;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5E73;&#x94FA;&#x7684;&#x8BC1;&#x636E;&#x3002;

In the leech embryo, the peripheral comb cell (CC) sends out many nonoverlapping, growth cone-tipped processes that grow in parallel and serve as a scaffold for the migrating myocytes of the later-developing oblique muscle layer. To explore how the parallel arrangement is generated we first examined the arrangement of CC cytoskeletal components by expressing a tubulin-binding protein and actin, both tagged with fluorescent reporters. This revealed that the growth cones were compartmentalized into F-actin-rich filopodia and a microtubule-rich central region. Time-lapse analysis with a 2-photon laser scanning microscope revealed that the growth cones of the CC are highly dynamic, undergoing rapid filopodial extension and retraction. Measurements of filopodial lifespan and length revealed that most filopodia at the leading edge of the growth cone achieved significantly longer lifespans and length than lateral filopodia. Furthermore, for the short-lived lateral filopodia, apparent interaction with a neighboring process was found to be a significant predictor of their nearly immediate (within 2-4 minutes) retraction. When contact was experimentally prevented by ablating individual CCs, the filopodia from the growth cones of adjacent segmental neighbors were found to be significantly lengthened in the direction of the removed homolog. Treatment with low doses of cytochalasin D to disrupt F-actin assembly led to filopodial retraction and growth cone collapse and resulted in the bifurcation of many CC processes, numerous crossover errors, and the loss of parallelism. These findings indicate the existence of a contact-mediated repulsive interaction between processes of the CC.

In vivo imaging of growth cone and filopodial dynamics: evidence for contact-mediated retraction of filopodia leading to the tiling of sibling processes.

Dans l&#x26;#39;embryon de sangsue, la cellule peigne p&#xE9;riph&#xE9;rique (CC) envoie plusieurs ne se chevauchent pas, la croissance de c&#xF4;ne &#xE0; pointe processus qui poussent en parall&#xE8;le et servir d&#x26;#39;&#xE9;chafaudage pour des myocytes migration de la couche c&#xF4;t&#xE9;-d&#xE9;veloppement muscle oblique. Pour explorer la fa&#xE7;on dont le montage en parall&#xE8;le est g&#xE9;n&#xE9;r&#xE9; nous avons d&#x26;#39;abord examin&#xE9; la disposition des composants du cytosquelette CC en exprimant une prot&#xE9;ine tubuline et l&#x26;#39;actine de liaison, &#xE0; la fois &#xE9;tiquet&#xE9; avec des journalistes fluorescentes. Cette &#xE9;tude a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les c&#xF4;nes de croissance ont &#xE9;t&#xE9; compartiment&#xE9; en F-actine riche en filopodes et une r&#xE9;gion riche en microtubules centrale. Time-lapse analyse avec un microscope &#xE0; 2 photons laser &#xE0; balayage a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que les c&#xF4;nes de croissance de la CC sont tr&#xE8;s dynamiques, en cours d&#x26;#39;extension rapide filopodial et la r&#xE9;traction. Les mesures de dur&#xE9;e de vie et de la longueur filopodial r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; que la plupart des filopodes &#xE0; la fine pointe du c&#xF4;ne de croissance atteint la dur&#xE9;e de vie beaucoup plus longues et la dur&#xE9;e que filopodes lat&#xE9;rale. En outre, pour la filopodes courte dur&#xE9;e lat&#xE9;ral, l&#x26;#39;interaction apparente avec un processus voisin a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9; pour &#xEA;tre un facteur pr&#xE9;dictif significatif de leur quasi imm&#xE9;diate (dans les 2-4 minutes) de r&#xE9;traction. Lorsque le contact a &#xE9;t&#xE9; emp&#xEA;ch&#xE9; par ablation exp&#xE9;rimentalement CC individuels, l&#x26;#39;filopodes des c&#xF4;nes de croissance de adjacents voisins segmentaires ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s d&#x26;#39;&#xEA;tre sensiblement allong&#xE9;e dans la direction de l&#x26;#39;homologue enlev&#xE9;. Le traitement avec de faibles doses de cytochalasine D de perturber F-actine de montage a permis &#xE0; la r&#xE9;traction filopodial et l&#x26;#39;effondrement du c&#xF4;ne de croissance et ont abouti &#xE0; la bifurcation des processus CC nombreuses, les erreurs de croisement de nombreuses, et la perte de parall&#xE9;lisme. Ces r&#xE9;sultats indiquent l&#x26;#39;existence d&#x26;#39;une interaction de contact m&#xE9;di&#xE9;e par r&#xE9;pulsion entre les processus de la CC.

L&#x26;#39;imagerie in vivo du c&#xF4;ne de croissance et la dynamique Filopodial: Evidence for r&#xE9;traction Contactez-m&#xE9;diatis&#xE9;e de filopodes Menant au carrelage des processus fr&#xE8;res et s&#x153;urs

Im Blutegel Embryo, verschickt die peripheren Kamm-Zelle (CC) viele nicht &uuml;berlappende, Kegel-Kreiss&auml;gebl&auml;tter Wachstumsprozessen, die parallel wachsen und dienen als ein Ger&uuml;st f&uuml;r die Migration von Myozyten der sp&auml;teren Entwicklung abdominis Schicht. Zu erforschen, wie die parallele Anordnung generiert wird zun&auml;chst pr&uuml;fen wir die Anordnung der CC Zytoskelett Komponenten zum Ausdruck bringen, eine Tubulin-verbindliches Protein und Actin, beide getaggt mit fluoreszierenden Reporter. Dies ergab, dass die Wachstum-Konen in F-Aktin-reiche Filopodium und eine zentrale Region des Microtubule-reiche aufgeteilt wurden. Zeitraffer-Analyse mit einem 2-Photonen-Laser scanning Mikroskop gezeigt, dass die Zapfen Wachstum des ZK hochdynamische, einer raschen Filopodial aus- und einfahren. Messungen von Filopodial Lebensdauer und L&auml;nge ergeben, dass die meisten Filopodium an der Spitze des Kegels Wachstum deutlich l&auml;ngere Lebensdauer und L&auml;nge als seitliche Filopodium erreicht. Dar&uuml;ber hinaus f&uuml;r die kurzlebige seitliche Filopodium, scheinbare Interaktion mit einem benachbarten Prozess erwies sich eine signifikante Pr&auml;diktor f&uuml;r ihre fast sofort (innerhalb von 2-4 Minuten) einfahren. Bei Kontakt experimentell durch Abtragen von einzelnen CCs verhindert wurde, wurden die Filopodium aus den Wachstum-Gipfeln des angrenzenden segmentale Nachbarn deutlich in Richtung der entfernten Homolog verl&auml;ngert werden gefunden. Behandlung mit niedrigen Dosen von Cytochalasin D F-Actin-Versammlung zu st&ouml;ren zu Filopodial Wachstum und Retraktion Kegel Zusammenbruch gef&uuml;hrt und f&uuml;hrte die Bifurkation viele CC-Prozesse, zahlreiche weiche St&ouml;rungen und den Verlust der Parallelit&auml;t. Diese Befunde zeigen die Existenz einer Kontakt-vermittelte absto&szlig;end Interaktion zwischen Prozessen des ZK.

In-vivo Bildgebung der Wachstumsdynamik Kegel und Filopodial: Beweise f&uuml;r Kontakt-vermittelte einfahren der Filopodium f&uuml;hrt zu die Fliesen der Geschwister Prozesse.

Nell&#39;embrione di sanguisuga, pettine periferici cella (CC) manda fuori molti non sovrapposte, cono-tipped processi di crescita che crescono in parallelo e serviscono come un&#39;impalcatura per la migrazione miociti di sviluppare successivamente strato muscolo obliquo. Per esplorare come la disposizione parallela viene generata in primo luogo abbiamo esaminato la disposizione dei componenti citoscheletriche CC esprimendo un tubulina-binding protein e actina, entrambi contrassegnati con reporter fluorescente. Questo ha rivelato che i coni di crescita erano compartimentati in una regione centrale microtubule-ricco e ricchi di F-actina filopodia. Analisi time-lapse con microscopio a scansione laser 2-fotone ha rivelato che i coni di crescita della CC sono altamente dinamici, in fase di retrazione e filopodial rapida estensione. Le misure di lunghezza e durata filopodial rivelarono che filopodia pi&ugrave; all&#39;avanguardia del cono di crescita raggiunto durate di vita significativamente pi&ugrave; lunga e la lunghezza di filopodia laterale. Inoltre, per il filopodia laterale di breve durata, apparente interazione con un processo vicino &egrave; stato trovato per essere un predittore significativo del loro ritiro quasi immediato (entro 2-4 minuti). Quando contatto sperimentalmente &egrave; stato impedito di ablazione singoli CCs, il filopodia dai coni di crescita dei vicini segmenti adiacenti sono stati trovati per essere significativamente allungato in direzione dell&#39;omologo rimosso. Il trattamento con basse dosi di citocalasina D di perturbare l&#39;Assemblea di F-actina port&ograve; al crollo di cono di retrazione e crescita filopodial e ha portato la biforcazione di molti processi CC, numerosi errori di crossover e la perdita di parallelismo. Questi risultati indicano l&#39;esistenza di un&#39;interazione repulsiva mediata dal contatto tra i processi del CC.

Imaging in vivo del cono e filopodial dinamiche di crescita: prove per contatto mediato retrazione di filopodia leader per l&#39;affiancamento dei processi di pari livello.

&#x30D2;&#x30EB;&#x80DA;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x5468;&#x8FBA;&#x6ADB;&#x30BB;&#x30EB;&#xFF08;CC&#xFF09;&#x306F;&#x4E26;&#x5217;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x308C;&#x4EE5;&#x964D;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x659C;&#x7B4B;&#x5C64;&#x306E;&#x79FB;&#x884C;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8DB3;&#x5834;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x91CD;&#x8907;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x5148;&#x7AEF;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3092;&#x9001;&#x51FA;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E26;&#x5217;&#x914D;&#x7F6E;&#x304C;&#x751F;&#x6210;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x63A2;&#x7D22;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x307E;&#x305A;&#x30C1;&#x30E5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30EA;&#x30F3;&#x7D50;&#x5408;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x3051;&#x3055;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;CC&#x7D30;&#x80DE;&#x9AA8;&#x683C;&#x6210;&#x5206;&#x306E;&#x914D;&#x7F6E;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306F;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3068;&#x5FAE;&#x5C0F;&#x7BA1;&#x304C;&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306A;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x533A;&#x753B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 2&#x5149;&#x5B50;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B6;&#x30FC;&#x8D70;&#x67FB;&#x9855;&#x5FAE;&#x93E1;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30E9;&#x30D7;&#x30B9;&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;CC&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306F;&#x3001;&#x8FC5;&#x901F;&#x306A;filopodial&#x62E1;&#x5F35;&#x3068;&#x53CE;&#x7E2E;&#x3092;&#x53D7;&#x3051;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x52D5;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002; filopodial&#x5BFF;&#x547D;&#x3068;&#x9577;&#x3055;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x3067;&#x6700;&#x3082;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306F;&#x3001;&#x6A2A;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x306F;&#x308B;&#x304B;&#x306B;&#x9577;&#x3044;&#x5BFF;&#x547D;&#x3068;&#x9577;&#x3055;&#x3092;&#x9054;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x77ED;&#x547D;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x307B;&#x307C;&#x5373;&#x6642;&#xFF08;2-4&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#xFF09;&#x64A4;&#x56DE;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x56E0;&#x5B50;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9023;&#x7D61;&#x5148;&#x306F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x500B;&#x3005;&#x306E;CC&#x3092;&#x5207;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x9632;&#x6B62;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x30BB;&#x30B0;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x96A3;&#x4EBA;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x304B;&#x3089;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x524A;&#x9664;&#x3055;&#x200B;&#x200B;&#x308C;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x65B9;&#x5411;&#x306B;&#x9577;&#x304F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002; F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x30A2;&#x30BB;&#x30F3;&#x30D6;&#x30EA;&#x3092;&#x7834;&#x58CA;&#x3059;&#x308B;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30E9;&#x30B7;&#x30F3;D&#x306E;&#x4F4E;&#x7528;&#x91CF;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x6CBB;&#x7642;&#x306F;filopodial&#x53CE;&#x7E2E;&#x3068;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5D29;&#x58CA;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x591A;&#x304F;&#x306E;CC&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4E26;&#x5217;&#x51E6;&#x7406;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x306E;&#x5206;&#x5C90;&#x3068;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;CC&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x9593;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x53CD;&#x767A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x5144;&#x5F1F;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30EB;&#x3092;&#x5C0E;&#x304F;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x53CE;&#x7E2E;&#x306E;&#x8A3C;&#x62E0;&#xFF1A;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3068;Filopodial&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30AF;&#x30B9;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;

&#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xBC30;&#xC544; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBE57; &#xC140; (CC) &#xB9CE;&#xC740; &#xACB9;&#xCE58;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;, &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xC2A4;&#xCCD0; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB97C; &#xBCD1;&#xB82C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5;&#xACFC; &#xC5ED;&#xD560; &#xB9C8;&#xC774;&#xADF8;&#xB808;&#xC774;&#xC158; myocytes &#xCD5C;&#xC2E0; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBE44; &#xACC4;&#xB97C; &#xBC16;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xB0B4;&#xB294; &#xBE44;&#xC2A4;&#xB4EC;&#xD55C; &#xADFC;&#xC721; &#xB808;&#xC774;&#xC5B4;. &#xBCD1;&#xB82C; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xD0D0;&#xAD6C; &#xD558; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBA3C;&#xC800; tubulin &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xB9D0;&#xB77C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558; &#xC5EC; CC cytoskeletal &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C; &#xBC30;&#xC5F4;&#xC744; &#xAC80;&#xC0AC;, &#xD615;&#xAD11; &#xAE30;&#xC790;&#xC640; &#xD0DC;&#xADF8; &#xB458; &#xB2E4;. &#xC774; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xD588;&#xB2E4; F &#xB9D0;&#xB77C; &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; filopodia microtubule &#xD48D;&#xBD80;&#xD55C; &#xC911;&#xC559; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xB4E4; &#xC5D0;&#xAC8C;&#xB9CC; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC2DC;&#xAC04; &#xACBD;&#xACFC; &#xBD84;&#xC11D; 2 &#xAD11;&#xC790; &#xB808;&#xC774;&#xC800; &#xC2A4;&#xCE94; &#xD604;&#xBBF8;&#xACBD;&#xC744; CC&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC740; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC5ED;&#xB3D9;&#xC801;&#xC778;, &#xBE60;&#xB978; filopodial &#xD655;&#xC7A5; &#xBC0F; &#xCCA0;&#xD68C; &#xC9C4;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. Filopodial &#xC218;&#xBA85; &#xBC0F; &#xAE38;&#xC774; &#xCE21;&#xC815; &#xBC1D;&#xD600; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xCCA8;&#xB2E8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; filopodia &#xCE21;&#xBA74; filopodia &#xBCF4;&#xB2E4; &#xAE38;&#xC774; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xAE34; &#xC218;&#xBA85;&#xC744; &#xB2EC;&#xC131;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC9E7;&#xC740; &#xCE21;&#xBA74; filopodia&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBA85;&#xBC31;&#xD55C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC778;&#xC811; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xB294; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; (2-4 &#xBD84;) &#xC774;&#xB0B4;&#xC5D0; &#xAC70;&#xC758; &#xC989;&#xAC01;&#xC801;&#xC778; &#xCCA0;&#xD68C;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC608;&#xCE21; &#xB420; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBCC4; CCs ablating&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE08;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0;, &#xACBD;&#xC6B0; &#xC778;&#xC811; &#xD55C; segmental &#xC774;&#xC6C3;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0;&#xC11C; filopodia &#xC81C;&#xAC70; &#xCCB4;&#xC758; &#xBC29;&#xD5A5;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xAE38;&#xC5B4; &#xC218;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. Cytochalasin D F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC5B4;&#xC148;&#xBE14;&#xB9AC; &#xBC29;&#xD574;&#xC758; &#xB0AE;&#xC740; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; filopodial &#xCCA0;&#xD68C;&#xC640; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xBD95;&#xAD34;&#xC5D0; &#xC774;&#xB974;&#xB800;&#xACE0; &#xB9CE;&#xC740; &#xCC38;&#xC870; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;, &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xC624;&#xBC84; &#xC624;&#xB958; &#xBC0F; &#xBCD1;&#xB82C; &#xCC98;&#xB9AC;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4;&#xC758; &#xBD84;&#xAE30;&#xC810; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;&#xC740; CC&#xC758; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC911;&#xC7AC; &#xBD88;&#xCF8C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC758; &#xC874;&#xC7AC;&#xB97C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; filopodial &#xC5ED;&#xD559;&#xC758; in vivo &#xC601;&#xC0C1;: filopodia &#xD615;&#xC81C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xAE30;&#xC640;&#xB85C; &#xC774;&#xC5B4;&#xC9C0;&#xB294;&#xC758; &#xBB38;&#xC758; &#xC911;&#xC7AC; &#xCCA0;&#xD68C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC99D;&#xAC70;.

En el embri&#xF3;n sanguijuela, la c&#xE9;lula peine perif&#xE9;rica (CC) env&#xED;a muchos no superpuestas, el crecimiento punta de cono procesos que crecen en paralelo y servir como un andamio para los miocitos migran de la capa muscular posterior-desarrollo oblicuo. Para explorar c&#xF3;mo la disposici&#xF3;n en paralelo se genera en primer lugar examinar la disposici&#xF3;n de los componentes del citoesqueleto CC expresando una prote&#xED;na de uni&#xF3;n a tubulina y actina, ambos marcados con los reporteros fluorescentes. Esto revel&#xF3; que los conos de crecimiento fueron compartimentada en la F-actina-rico filopodios y una regi&#xF3;n central de microt&#xFA;bulos rico. Time-lapse an&#xE1;lisis con un microscopio l&#xE1;ser de 2 fotones de exploraci&#xF3;n revel&#xF3; que los conos de crecimiento de la CC son muy din&#xE1;micas, experimentando una r&#xE1;pida extensi&#xF3;n y retracci&#xF3;n filopodial. Las mediciones de filopodial vida &#xFA;til y la duraci&#xF3;n revel&#xF3; que la mayor&#xED;a filopodios en la punta del cono de crecimiento alcanzado expectativa de vida significativamente m&#xE1;s larga y la duraci&#xF3;n que filopodios lateral. Por otra parte, para el filopodios lateral de corta duraci&#xF3;n, la interacci&#xF3;n aparente con un proceso de vecino result&#xF3; ser un predictor significativo de su casi inmediata (dentro de 2-4 minutos) retracci&#xF3;n. Cuando el contacto se impidi&#xF3; experimentalmente mediante la ablaci&#xF3;n de CC individuales, el filopodios de los conos de crecimiento de los vecinos adyacentes segmentarios se encontraron significativamente alargado en la direcci&#xF3;n del hom&#xF3;logo eliminado. El tratamiento con bajas dosis de citocalasina D para interrumpir la F-actina de montaje permiti&#xF3; a la retracci&#xF3;n filopodial y el colapso del cono de crecimiento y dio lugar a la bifurcaci&#xF3;n de los procesos de CC muchos, los errores de numerosos cruzados, y la p&#xE9;rdida de paralelismo. Estos resultados indican la existencia de una interacci&#xF3;n mediada por contacto de repulsi&#xF3;n entre los procesos de la CC.

En im&#xE1;genes in vivo de cono de crecimiento y din&#xE1;mica filopodial: Evidencia para la retracci&#xF3;n de contacto mediada de filopodios l&#xED;der de los azulejos de los procesos de hermanos

&#x5BF9;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x635F;&#x4F24;&#x4F1A;&#x89E6;&#x53D1;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x9499;&#x6CE2;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x548C;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x3002;&#x5728;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D; pannexin1 ATP &#x91CA;&#x653E;&#x901A;&#x9053;&#x51FA;&#x73B0;&#x63D0;&#x4F9B;&#x9499;&#x6CE2;&#x840C;&#x751F;&#x4E0E;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;Innexins&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7684;&#x7F1D;&#x9699;&#xFF0C;&#x6709; pannexins &#x5E8F;&#x5217;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E4B;&#x5904;&#xFF0C;&#x662F;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#xFF0C;&#x5F62;&#x6210;&#x65E0;&#x7F1D;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x901A;&#x9053;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x5728;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x7684;&#x4E24;&#x79CD;&#x6C34;&#x86ED; innexins &#x9752;&#x86D9;&#x5375;&#x6BCD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x8868;&#x793A;&#x3002;&#x9664;&#x4E86;&#x7F1D;&#x9699;&#x5916;&#xFF0C;innexins &#x8FD8;&#x5F62;&#x6210;&#x4E86;&#x4E0E;&#x5C5E;&#x6027;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E; pannexons &#x7684;&#x65E0;&#x7F1D;&#x9699;&#x8FDE;&#x63A5;&#x819C;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x73C0;&#x53EF;&#x9006;&#x963B;&#x6B62;&#x4ECE;&#x4F53;&#x6001;&#x6C34;&#x86ED;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EBF;&#xFF0C;&#x5373;&#x8868;&#x793A;&#x6211;&#x4EEC;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684; innexins &#x5DE8;&#x80F6;&#x8D28;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D74; carboxyfluorescein &#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x635F;&#x5931;&#x3002;

Innexins &#x5F62;&#x6210;&#x4E24;&#x79CD;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x6E20;&#x9053;&#x3002;

Injury to the central nervous system triggers glial calcium waves in both vertebrates and invertebrates. In vertebrates the pannexin1 ATP-release channel appears to provide for calcium wave initiation and propagation. The innexins, which form invertebrate gap junctions and have sequence similarity with the pannexins, are candidates to form non-junctional membrane channels. Two leech innexins previously demonstrated in glia were expressed in frog oocytes. In addition to making gap junctions, innexins also formed non-junctional membrane channels with properties similar to those of pannexons. In addition, carbenoxolone reversibly blocked the loss of carboxyfluorescein dye into the bath from the giant glial cells in the connectives of the leech nerve cord, which are known to express the innexins we assayed.

Innexins form two types of channels.

Blessure de l&#x26;#39;appareil nerveux central d&#xE9;clenche des vagues de calcium gliales dans les deux vert&#xE9;br&#xE9;s et les invert&#xE9;br&#xE9;s. Chez les vert&#xE9;br&#xE9;s du pannexin1 ATP-canal de lib&#xE9;ration semble fournir pour l&#x26;#39;initiation et la propagation d&#x26;#39;ondes de calcium. Les innexins, qui forment des jonctions d&#x26;#39;invert&#xE9;br&#xE9;s et ont une similarit&#xE9; de s&#xE9;quence avec les pannexins, sont candidats pour former des canaux membranaires non-jonctionnels. Deux innexins sangsues d&#xE9;j&#xE0; d&#xE9;montr&#xE9; dans la glie ont &#xE9;t&#xE9; exprim&#xE9;s dans des ovocytes de grenouille. En plus de faire des jonctions communicantes, innexins &#xE9;galement form&#xE9; les canaux membranaires non jonctionnels ayant des propri&#xE9;t&#xE9;s similaires &#xE0; celles de pannexons. En outre, carb&#xE9;noxolone r&#xE9;versible bloqu&#xE9; la perte de carboxyfluoresc&#xE9;ine colorant dans le bain &#xE0; partir des cellules gliales dans les g&#xE9;ants connecteurs de la moelle &#xE9;pini&#xE8;re sangsue, qui sont connus pour exprimer les innexins nous avons dos&#xE9;.

Innexins forment deux types de canaux

Sch&auml;digung des zentralen Nervensystems l&ouml;st Gliazellen Kalzium Wellen in Wirbeltiere und Wirbellose. Bei Wirbeltieren scheint der pannexin1 ATP-Freisetzung Kanal vorsehen, dass Kalzium Welle Initiation und Vermehrung. Die Innexins, die Wirbellosen Gap Junctions und Sequenz-&Auml;hnlichkeit mit der Pannexins haben, sind die Kandidaten zu nicht-junktionale Membran Kan&auml;le. Frosch Eizellen wurden zwei Blutegel Innexins zuvor demonstrierten in Glia ausgedr&uuml;ckt. Dar&uuml;ber hinaus macht die Gap Junctions, gebildet Innexins auch nicht-junktionale Membran Kan&auml;le mit Eigenschaften &auml;hnlich denen des Pannexons. Au&szlig;erdem blockiert Carbenoxolone umkehrbar den Verlust von Carboxyfluorescein Farbstoff in die Wanne aus der riesigen Gliazellen in der Jungverheiratete der Blutegel Nerv Schnur, die bekannt sind, die Innexins zum Ausdruck zu bringen, die wir gepr&uuml;ft.

Innexins bilden zwei Arten von Kan&auml;len.

Lesioni al sistema nervoso centrale attiva onde calcio gliali, sia vertebrati che invertebrati. Nei vertebrati il canale ATP-comunicato pannexin1 appare per calcio onda iniziazione e propagazione. Il innexins, che formano giunzioni di gap invertebrati e hanno somiglianza di sequenza con il pannexins, sono candidati per formare canali di membrana non giunzionale. Due innexins sanguisuga precedentemente dimostrato in Itaglia sono stati espressi in ovociti di rana. Oltre a fare giunzioni di gap, innexins formata anche canali di membrana non giunzionale con propriet&agrave; simili a quelle di pannexons. Inoltre, carbenoxolone bloccato reversibilmente la perdita del chetone di fluoromethyl tintura in bagno dalle cellule gliali gigante nei connettivi del cordone nervoso sanguisuga, che sono conosciuti per esprimere la innexins che noi dosati.

Innexins formare due tipi di canali.

&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3078;&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x306F;&#x3001;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3068;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6CE2;&#x3092;&#x30C8;&#x30EA;&#x30AC;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;pannexin1 ATP&#x653E;&#x51FA;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306F;&#x30AB;&#x30EB;&#x30B7;&#x30A6;&#x30E0;&#x6CE2;&#x306E;&#x767A;&#x751F;&#x3068;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x3001;pannexins&#x3068;&#x914D;&#x5217;&#x985E;&#x4F3C;&#x6027;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;innexins&#x306F;&#x3001;&#x975E;&#x63A5;&#x5408;&#x90E8;&#x306E;&#x819C;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x5019;&#x88DC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3064;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;innexins&#x306F;&#x3001;&#x30AB;&#x30A8;&#x30EB;&#x306E;&#x5375;&#x6BCD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x767A;&#x73FE;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x30AE;&#x30E3;&#x30C3;&#x30D7;&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x884C;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x52A0;&#x3048;&#x3001;innexins&#x3082;pannexons&#x3068;&#x4F3C;&#x305F;&#x6027;&#x8CEA;&#x3092;&#x6301;&#x200B;&#x200B;&#x3064;&#x975E;&#x63A5;&#x5408;&#x819C;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x3092;&#x5F62;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x30AB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30CE;&#x30AD;&#x30BD;&#x30ED;&#x30F3;&#x306F;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x306B;&#x6211;&#x3005;&#x304C;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;innexins&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x795E;&#x7D4C;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x306E;&#x7D50;&#x5408;&#x5B50;&#x306E;&#x5DE8;&#x5927;&#x30B0;&#x30EA;&#x30A2;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x304A;&#x98A8;&#x5442;&#x306B;&#x30AB;&#x30EB;&#x30DC;&#x30AD;&#x30B7;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x640D;&#x5931;&#x3092;&#x963B;&#x6B62;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

Innexins&#x306F;&#x3001;&#x30C1;&#x30E3;&#x30CD;&#x30EB;&#x306E;2&#x7A2E;&#x985E;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;

&#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xACC4;&#xD1B5;&#xC5D0; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC744; &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0; &#xAD50; &#xCE7C;&#xC298; &#xD30C;&#xB3C4;&#xB97C; &#xD2B8;&#xB9AC;&#xAC70;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC99;&#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; pannexin1 ATP &#xB9B4;&#xB9AC;&#xC2A4; &#xCC44;&#xB110; &#xCE7C;&#xC298; &#xC6E8;&#xC774;&#xBE0C; &#xAC1C;&#xC2DC; &#xBC0F; &#xC804;&#xD30C; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0A9;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; &#xAC2D; &#xC811;&#xD569;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xC0AC; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4;&#xB294; pannexins, innexins &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xBE44; &#xC811;&#xD569; &#xB9C9; &#xD6C4;&#xBCF4;&#xB294;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC608;&#xC57D; &#xC785;&#xC99D; &#xB41C; &#xBA85;&#xACFC; &#xB450; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; innexins &#xAC1C;&#xAD6C;&#xB9AC; oocytes&#xC5D0;&#xC11C; &#xD45C;&#xD604; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC2D; &#xC811;&#xD569; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; innexins pannexons&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xD2B9;&#xC131;&#xC744; &#xAC00;&#xC9C4; &#xBE44; &#xC811;&#xD569; &#xB9C9; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131;. &#xB610;&#xD55C;, carbenoxolone&#xB294; &#xC5ED;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; &#xD558;&#xB294; innexins&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xB824;&#xC838; &#xC788;&#xB294; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xCF54;&#xB4DC;&#xC758; connectives&#xC758; &#xAC70; &#xB300; &#xD55C; &#xAD50; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBAA9;&#xC695; carboxyfluorescein &#xC5FC;&#xB8CC;&#xC758; &#xC190;&#xC2E4; &#xCC28;&#xB2E8;.

Innexins &#xB450; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xCC44;&#xB110;&#xC744; &#xD615;&#xC131;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La lesi&#xF3;n del sistema nervioso central provoca olas gliales de calcio en vertebrados e invertebrados. En los vertebrados el pannexin1 ATP canal de liberaci&#xF3;n parece prever la iniciaci&#xF3;n y propagaci&#xF3;n de onda de calcio. Los innexins, que forman uniones gap de invertebrados y tienen similitud de secuencia con los pannexins, son candidatos para formar no de uni&#xF3;n canales de la membrana. Dos innexins sanguijuela demostrado previamente en la gl&#xED;a se expresaron en ovocitos de rana. Adem&#xE1;s de hacer uniones, innexins tambi&#xE9;n form&#xF3; no de uni&#xF3;n de canales de membrana con propiedades similares a las de pannexons. Adem&#xE1;s, carbenoxolona reversiblemente bloqueada la p&#xE9;rdida de carboxifluoresce&#xED;na colorante en el ba&#xF1;o de las c&#xE9;lulas gigantes gliales en los t&#xE9;rminos de enlace de la m&#xE9;dula nervio sanguijuela, que se sabe que expresan los innexins que ensayadas.

Innexins forman dos tipos de canales

&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (RPTPs) &#x8868;&#x660E;&#x8981;&#x53D1;&#x6325;&#x8C03;&#x8282;&#x8F74;&#x7A81;&#x5BFC;&#x5411;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x4E2D;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x5728;&#x51E0;&#x4E2A;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x72EC;&#x7279;&#x8282;&#x6BB5;&#x8FED;&#x4EE3;&#x5916;&#x5468;&#x8840;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x68B3;&#x683C; (CC)&#xFF0C;&#x88AB;&#x8868;&#x793A; HmLAR2&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5BC6;&#x5207;&#x76F8;&#x5173; LAR &#x6837; RPTPs &#x80DA;&#x80CE;&#x7684;&#x6C34;&#x86ED;&#x4E2D;, &#x4E4B;&#x4E00;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; HmLAR2 &#x4E0E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x7684;&#x767D;&#x70B9;&#x56FE;&#x6848;&#x5728;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x6284;&#x9001;&#xFF0C;&#x7279;&#x522B;&#x662F;&#x5728;&#x6269;&#x5927;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x6807;&#x8BB0;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5E76;&#x4E0D;&#x5F71;&#x54CD;&#x6284;&#x9001;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x5F62;&#x6001;&#xFF0C;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;CS-HmLAR2&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x5B58;&#x5728;&#x663E;&#x6027;&#x8D1F;&#x7A81;&#x53D8;&#x5BFC;&#x81F4;&#x6269;&#x5927;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#xFF0C;&#x7F29;&#x77ED;&#x7684;&#x4F8B;&#x8BC1;&#x548C;&#x8702;&#x7A9D;&#x62FC;&#x8D34;&#x4E2D;&#x7684;&#x9519;&#x8BEF;&#x3002;Rnai &#x6280;&#x672F;&#x7684;&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#x3001; &#x8389;&#x5A1C; &#xFF08;&#x6C34;&#x86ED; Ena/Vasp)&#x3001; &#x6574;&#x5408;&#x7D20; &beta; &#x548C;&#x6869;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x8FDE;&#x73AF;&#x3001; phenocopies HmLAR2 RNAi &#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x7684;&#x7279;&#x6B8A;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x51E0;&#x4E2A;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x57FA;&#x677F;&#x3002;&#x4E3A;&#x6869;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5728;&#x751F;&#x957F;&#x9525; puncta co-localizes &#x4E0E; HmLAR2&#xFF0C;&#x649E;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4E86;&#x8FD9;&#x79CD; puncta &#x7684;&#x4EBA;&#x6570;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x5728;&#x4E00;&#x8D77;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E; HmLAR2 &#x8C03;&#x8282;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x7684;&#x5F62;&#x6001;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x63A7;&#x5236; F-&#x808C;&#x52A8;&#x86CB;&#x767D;&#x805A;&#x5408;&#x548C;&#x7C98;&#x7740;&#x7269;&#x3002;

&#x78F7;&#x9178;&#x9176; HmLAR2 &#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x7C98;&#x7740;&#x86CB;&#x767D; filopodial &#x7684;&#x63D0;&#x793A;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x63A7;&#x5236;&#x751F;&#x957F;&#x9525;&#x5F62;&#x6001;&#x4E2D;&#x7684;&#x5408;&#x4F5C;&#x3002;

Receptor protein tyrosine phosphatases (RPTPs) have been shown to play key roles in regulating axon guidance and synaptogenesis. HmLAR2, one of two closely related LAR-like RPTPs in the embryonic leech, is expressed in a few central neurons and in a unique segmentally-iterated peripheral cell, the comb cell (CC). Here we show that tagged HmLAR2-EGFP has a punctate pattern of expression in the growth cones of the CC, particularly at the tips of extending filopodia. Moreover, although expression of the wild-type EGFP-tagged receptor does not affect CC growth cone morphology, expression of a putative dominant-negative mutant of the receptor, CS-HmLAR2, leads to the enlargement of the growth cones, a shortening of filopodia, and errors in cellular tiling. RNAi of several candidate substrate signaling proteins, Lena (leech Ena/Vasp), beta-integrin and paxillin, but not beta-catenin, phenocopies particular aspects of the effects of HmLAR2 RNAi. For paxillin, which co-localizes with HmLAR2 at growth cone puncta, knock-down led to a reduction in the number of such puncta. Together, our data suggests that HmLAR2 regulates the morphology of the growth cone by controlling F-actin polymerization and focal adhesion complexes.

The receptor phosphatase HmLAR2 collaborates with focal adhesion proteins in filopodial tips to control growth cone morphology.

Phosphatases r&#xE9;cepteur de prot&#xE9;ine tyrosine RPTPs) ont &#xE9;t&#xE9; montr&#xE9; &#xE0; jouer des r&#xF4;les cl&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de guidage axonal et la synaptogen&#xE8;se. HmLAR2, l&#x26;#39;un des deux &#xE9;troitement li&#xE9;s LAR-comme RPTPs dans la sangsue embryonnaire, est exprim&#xE9;e en quelques neurones centraux et dans une cellule unique p&#xE9;riph&#xE9;rique segmentaire a r&#xE9;it&#xE9;r&#xE9;, la cellule peigne (CC). Ici, nous montrons que &#xE9;tiquet&#xE9; HmLAR2-EGFP a un motif ponctu&#xE9;e d&#x26;#39;expression dans les c&#xF4;nes de croissance de la CC, en particulier aux conseils de l&#x26;#39;extension de filopodes. En outre, bien que l&#x26;#39;expression du r&#xE9;cepteur de type sauvage EGFP-&#xE9;tiquet&#xE9; n&#x26;#39;affecte pas la morphologie conique CC de croissance, l&#x26;#39;expression d&#x26;#39;un dominant n&#xE9;gatif pr&#xE9;sum&#xE9; mutant du r&#xE9;cepteur, le CS-HmLAR2, conduit &#xE0; l&#x26;#39;&#xE9;largissement des c&#xF4;nes de croissance, un raccourcissement de filopodes , et les erreurs de carrelage cellulaire. ARNi de plusieurs prot&#xE9;ines de signalisation substrat candidat, Lena (sangsue Ena / VASP), b&#xEA;ta-int&#xE9;grine et paxilline, mais pas la beta-cat&#xE9;nine, ph&#xE9;nocopies des aspects particuliers des effets de HmLAR2 ARNi. Pour paxilline, qui co-localise avec HmLAR2 au c&#xF4;ne de croissance puncta, knock-down a conduit &#xE0; une r&#xE9;duction du nombre de points lacrymaux tels. Ensemble, nos donn&#xE9;es sugg&#xE8;rent que la morphologie HmLAR2 r&#xE9;glemente du c&#xF4;ne de croissance en contr&#xF4;lant F-polym&#xE9;risation de l&#x26;#39;actine et des complexes d&#x26;#39;adh&#xE9;sion focale.

Le r&#xE9;cepteur Phosphatase HmLAR2 Collabore avec Prot&#xE9;ines d&#x26;#39;adh&#xE9;sion focaux Conseils Filopodial &#xE0; contr&#xF4;le de la morphologie du c&#xF4;ne de croissance

Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatasen (RPTPs) haben nachweislich entscheidende Rolle bei der Regulierung von Axon Anleitung und Synaptogenese spielen. HmLAR2, eine der zwei eng miteinander verbundene LAR-artigen RPTPs in der embryonalen Blutegel, wird in einigen zentralen Neuronen und in einer einzigartigen segmentally iteriert periphere-Zelle, die Kamm-Zelle (CC) ausgedr&uuml;ckt. Hier zeigen wir, dass markierte HmLAR2-EGFP eine punktierte Muster des Ausdrucks in den Wachstum-Gipfeln des CC, besonders an den Spitzen der Filopodium erweitern. Dar&uuml;ber hinaus, obwohl Ausdruck des Wildtyp EGFP-Tags Rezeptors CC Wachstum Kegel Morphologie nicht auswirkt, Ausdruck der vermeintlichen Dominant Negative Mutanten des Rezeptors, CS-HmLAR2, f&uuml;hrt zu der Erweiterung der Zapfen mit dem Wachstum einer Verk&uuml;rzung der Filopodium und St&ouml;rungen im zellul&auml;ren Fliesen. RNAi mehrere Kandidaten Substrat Signalisierung Proteine, Lena (Egel Ena/Vasp), Beta-Integrin und Paxillin, aber nicht Beta-Catenin, Ph&auml;nokopien bestimmte Aspekte der Auswirkungen der HmLAR2 RNAi. F&uuml;r Paxillin, die mit HmLAR2 am Wachstum Kegel Puncta co-localizes, Knock-Down zu einer Verringerung der Zahl von solchen Puncta gef&uuml;hrt. Unsere Daten zufolge zusammen, die HmLAR2 die Morphologie des Kegels Wachstum reguliert durch die Kontrolle der F-Aktin-Polymerisation und fokale Adh&auml;sion-komplexe.

Die Rezeptor-Phosphatase HmLAR2 arbeitet mit fokale Adh&auml;sion Proteine in Filopodial Tipps zur Kontrolle von Wachstum Kegel Morphologie.

Receptor protein tirosina fosfatasi (RPTPs) hanno dimostrati di giocare ruoli chiave nella regolazione orientamento assone e pervasivi. HmLAR2, uno dei due RPTPs LAR-come strettamente correlati nella sanguisuga embrionale, &egrave; espressa in alcuni neuroni centrali e in un&#39;unica segmentally iterato cellule periferiche, la cella di pettine (CC). Qui vi mostriamo che tag HmLAR2-EGFP ha un pattern di espressione punctato i coni di crescita della CC, particolarmente alle punte di estendere filopodia. Inoltre, sebbene l&#39;espressione del recettore wild-type EGFP-tag non influisce sul CC morfologia di crescita cono, espressione di un mutante dominante-negativo putativo del recettore, CS-HmLAR2, conduce all&#39;allargamento dei coni di crescita, un accorciamento del filopodia ed errori nel rivestimento cellulare. RNAi del substrato di candidato diverse proteine, Lena (leech Ena/Vasp), beta-integrina e paxillin, ma non beta-catenina, fenocopie particolari aspetti degli effetti di RNAi HmLAR2 di segnalazione. Per paxillin, che co-localizes con HmLAR2 in crescita cono puncta, knock-down ha portato ad una riduzione del numero di tali punti. Insieme, i nostri dati suggeriscono che HmLAR2 regola la morfologia del cono di crescita attraverso il controllo di F-actina polimerizzazione e complessi di adesione focale.

La fosfatasi del recettore HmLAR2 collabora con proteine di adesione focale in filopodial consigli per controllare la morfologia di cono di crescita.

&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RPTPs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x8EF8;&#x7D22;&#x30AC;&#x30A4;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x3068;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3059;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; HmLAR2&#x3001;&#x80DA;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x3067;2&#x5BC6;&#x63A5;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3057;&#x3066;LAR&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;RPTPs&#x306E;&#x4E00;&#x3064;&#x3067;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4E2D;&#x592E;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3067;&#x3001;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x5206;&#x7BC0;&#x3001;&#x53CD;&#x5FA9;&#x5468;&#x8FBA;&#x30BB;&#x30EB;&#x3001;&#x6ADB;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;CC&#xFF09;&#x3067;&#x8868;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30BF;&#x30B0;HmLAR2-EGFP&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x3092;&#x5EF6;&#x3070;&#x3059;&#x306E;&#x5148;&#x7AEF;&#x306B;&#x3001;CC&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x3067;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;&#x70B9;&#x72B6;&#x306E;&#x30D1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30F3;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;EGFP-&#x30BF;&#x30B0;&#x4ED8;&#x304D;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;CC&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30C9;&#x30DF;&#x30CA;&#x30F3;&#x30C8;&#x30CD;&#x30AC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;CS-HmLAR2&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x62E1;&#x5927;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x3001;&#x7CF8;&#x72B6;&#x4EEE;&#x8DB3;&#x306E;&#x77ED;&#x7E2E;&#x306B;&#x306F;&#x5F71;&#x97FF;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001; &#x3001;&#x643A;&#x5E2F;&#x96FB;&#x8A71;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30EB;&#x3067;&#x30A8;&#x30E9;&#x30FC;&#x304C;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x5019;&#x88DC;&#x57FA;&#x8CEA;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;RNAi&#x3001;&#x30EC;&#x30CA;&#xFF08;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x6075;&#x90A3;/ VASP&#xFF09;&#x3001;&#x3B2;-&#x30A4;&#x30F3;&#x30C6;&#x30B0;&#x30EA;&#x30F3;&#x3068;&#x30D1;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3B2;-&#x30AB;&#x30C6;&#x30CB;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;HmLAR2 RNAi&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306E;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5074;&#x9762;&#x3092;phenocopies&#x3002;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6D99;&#x70B9;&#x306E;&#x6570;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x6D99;&#x70B9;&#x3001;&#x3067;HmLAR2&#x3068;&#x5171;&#x5C40;&#x5728;&#x30D1;&#x30AD;&#x30B7;&#x30EA;&#x30F3;&#x7528;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;HmLAR2&#x304C;F-&#x30A2;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x306E;&#x91CD;&#x5408;&#x3068;&#x63A5;&#x7740;&#x6591;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x30EC;&#x30BB;&#x30D7;&#x30BF;&#x30FC;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;HmLAR2&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x9577;&#x5186;&#x9310;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;Filopodial&#x306E;&#x30D2;&#x30F3;&#x30C8;&#x306B;&#x7126;&#x70B9;&#x63A5;&#x7740;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x306E;&#x30B3;&#x30E9;&#x30DC;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; (RPTPs) &#xCD95; &#xC0AD; &#xC9C0;&#xCE68;&#xACFC; synaptogenesis &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xD575;&#xC2EC; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC654;&#xB2E4;. HmLAR2 &#xBC30;&#xC544; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xBC00;&#xC811; &#xD558; &#xAC8C; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; LAR &#xAC19;&#xC740; RPTPs &#xC911; &#xD558;&#xB098;&#xB294; &#xBA87; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; segmentally &#xBC18;&#xBCF5; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xC140;, &#xBE57; &#xC140; (CC) &#xD45C;&#xC2DC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xD0DC;&#xADF8; HmLAR2 EGFP filopodia &#xD655;&#xC7A5;&#xC758; &#xB05D; &#xD2B9;&#xD788; CC&#xC758; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC5D0; &#xD45C;&#xD604;&#xC758; punctate &#xD328;&#xD134;&#xC744;&#xAC00;&#xC9C0;&#xACE0; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; EGFP &#xD0DC;&#xADF8; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xD45C;&#xD604;&#xC5D0; CC &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xD615;&#xD0DC; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; CS HmLAR2 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC0C1; &#xC74C;&#xC774; &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801;&#xC778; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774;&#xC758; &#xD45C;&#xD604; filopodia, &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xAE30;&#xC640;&#xC758; &#xC624;&#xB958; &#xB2E8;&#xCD95; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xD655;&#xB300;&#xB97C; &#xB9AC;&#xB4DC;. RNAi &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xAE30;&#xD310; &#xC2E0;&#xD638; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;, &#xB808;&#xB098; (&#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC6F9;&#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;, / Vasp), &#xBCA0;&#xD0C0; integrin paxillin, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8; &#xBCA0;&#xD0C0;-catenin, phenocopies HmLAR2 RNAi &#xD6A8;&#xACFC;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xCE21;&#xBA74;&#xC758;. &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; puncta&#xC5D0;&#xC11C; Hmlar2&#xC640; co-localizes, paxillin&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB178;&#xD06C; &#xB2E4;&#xC6B4; &#xAC19;&#xC740; puncta&#xC758; &#xC218;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC774;&#xB04C;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; HmLAR2 F &#xB9D0;&#xB77C; &#xC911; &#xD569; &#xBC0F; &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; &#xB2E8;&#xC9C0; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558; &#xC5EC; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4;&#xC758; &#xD615;&#xD0DC;&#xD559;&#xC744; &#xC870;&#xC808; &#xB098;&#xC654;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; HmLAR2 filopodial &#xD301; &#xC131;&#xC7A5; &#xC6D0;&#xBFD4; &#xD615;&#xD0DC; &#xC81C;&#xC5B4;&#xC5D0; &#xCD08;&#xC810; &#xC811;&#xCC29; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xACFC; &#xD611;&#xB825; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Receptores de prote&#xED;na tirosina fosfatasas (RPTPs) se ha demostrado que juegan un papel clave en la regulaci&#xF3;n de guiado de los axones y la sinaptog&#xE9;nesis. HmLAR2, uno de los dos estrechamente relacionados LAR-como RPTPs en la sanguijuela embrionario, se expresa en unos pocos neuronas centrales y en una &#xFA;nica c&#xE9;lula segmentariamente reiter&#xF3; perif&#xE9;rica, la c&#xE9;lula peine (CC). Aqu&#xED; nos muestran que etiquetados HmLAR2-EGFP tiene un patr&#xF3;n puntiforme de expresi&#xF3;n en los conos de crecimiento de la CC, sobre todo en las puntas de la ampliaci&#xF3;n de filopodios. Adem&#xE1;s, aunque la expresi&#xF3;n del receptor de tipo salvaje EGFP de etiquetado no afecta al crecimiento CC morfolog&#xED;a cono, la expresi&#xF3;n de un putativo dominante negativo mutante del receptor, CS-HmLAR2, conduce a la ampliaci&#xF3;n de los conos de crecimiento, un acortamiento de filopodios , y los errores en mosaico celular. RNAi de varias prote&#xED;nas candidatas sustrato de se&#xF1;alizaci&#xF3;n, Lena (sanguijuela Ena / VASP), beta-integrina y paxillin, pero no la beta-catenina, fenocopias aspectos particulares de los efectos de HmLAR2 RNAi. Para paxillin, que co-localiza con HmLAR2 en crecimiento cono puncta, derribo condujo a una reducci&#xF3;n en el n&#xFA;mero de tales puntos lagrimales. Juntos, nuestros datos sugieren que HmLAR2 regula la morfolog&#xED;a del cono de crecimiento mediante el control de la F-actina de polimerizaci&#xF3;n y los complejos de adhesi&#xF3;n focal.

El receptor de fosfatasa HmLAR2 Colabora con prote&#xED;nas de adhesi&#xF3;n focal en Consejos filopodial para el control de la morfolog&#xED;a del crecimiento del cono

LAR &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (RPTPs)&#xFF0C;&#x636E;&#x62A5;&#x544A;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x8868;&#x793A;&#x7684;&#x5927;&#x591A;&#x6570; bilaterian &#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5982;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BFB;&#x8DEF;&#x3001; &#x7EC6;&#x80DE;&#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x89C4;&#x7BA1;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x5728;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#xFF0C;HmLAR1 &#x548C; HmLAR2&#xFF0C;&#x4E24;&#x4E2A;&#x6837; LAR RPTPs &#x53D1;&#x6325;&#x548C;&#x4F53;&#x58C1;&#x4E2D;&#x8C03;&#x8282;&#x5927;&#x5C0F;&#x548C;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5728;&#x53D1;&#x5C55;&#x4E2D;&#x56FD;&#x5BB6;&#x7684;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x5185;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E54;&#x6728;&#x6811;&#x79CD;&#x7684;&#x89D2;&#x8272;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x91C7;&#x7528;&#x4E86;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C; RNAi &#x7EC4;&#x5408;&#x5F0F;&#x53CA;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x6280;&#x672F;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; HmLAR1 &#x76F4;&#x63A5;&#x5173;&#x8054;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x6811;&#x679D;&#x72B6;&#x7684;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;&#x649E;&#x5012; mechanosensory HmLAR1 mRNA &#x6C34;&#x5E73;&#x538B;&#x529B; (P) &#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4EA7;&#x751F;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E2D;&#x592E;&#x4E54;&#x6728;&#x548C;&#x5916;&#x56F4;&#x673A;&#x6784;&#x5899;&#x4E0A;&#xFF0C;&#x7528;&#x8F83;&#x5C11;&#x7684;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x5206;&#x652F;&#x7684;&#x5C0F;&#x4E54;&#x6728;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8FD9; P &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4F1A;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5927;&#x91CF;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x82BD;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x5F88;&#x591A;&#x7F16;&#x5916; neurites &#x548C;&#x7EC8;&#x7AEF;&#x7684;&#x5206;&#x652F;&#x673A;&#x6784;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x67D0;&#x4E9B;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;P &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6210;&#x4E3A;&#x591A;&#x6781;&#x4E16;&#x754C;&#x7684;&#x5355;&#x6781;&#x5F62;&#x6001;&#x6B63;&#x5E38;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x62A5;&#x544A;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x82BD;&#x9700;&#x8981;&#x8868;&#x8FBE;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x6813;&#x7CFB;&#x819C;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC; NH 2 Ig &#x57DF;&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x57DF;&#x3002;&#x6709;&#x8DA3;&#x7684;&#x662F;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x540E;&#x7684; HmLAR1 &#x548C;&#x76F8;&#x5173;&#x7684; RPTP&#xFF0C;&#x5728; P &#x548C;&#x5176;&#x4ED6;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x90A3;&#x4E9B;&#x901A;&#x5E38;&#x4E0D;&#x8868;&#x793A;&#x6216; RPTP&#xFF0C;&#x8868;&#x660E;&#x53C2;&#x4E0E; HmLAR &#x8BF1;&#x5BFC;&#x53D1;&#x82BD;&#x7684;&#x7684;&#x886C;&#x5E95;&#x6750;&#x6599;&#x76EE;&#x524D;&#x5728;&#x5927;&#x591A;&#x6570;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x4E0D;&#x8BBA;&#x662F;&#x5426;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x901A;&#x5E38;&#x8868;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6837; LAR RPTPs HmLAR2 &#x5F02;&#x4F4D;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F15;&#x8D77;&#x53D1;&#x82BD;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x662F;&#x4E0E;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684; ectodomains &#x4FC3;&#x8FDB;&#x80F6;&#x7C98;&#x5242;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x589E;&#x5F3A;&#x4E86;&#x7EF4;&#x62A4;&#x7684;&#x65B0;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x7684;&#x5047;&#x8BF4;&#x76F8;&#x4E00;&#x81F4;&#x3002;

LAR &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x6C34;&#x5E73;&#x4E0E;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5206;&#x652F;&#x548C;&#x4E54;&#x6728;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x5173;&#x8054;&#x3002;

LAR-like receptor protein tyrosine phosphatases (RPTPs), which are reported to be highly expressed in the nervous systems of most bilaterian animals, have been implicated in the regulation of critical developmental processes, such as neuronal pathfinding, cell adhesion and synaptogenesis. Here we report that two LAR-like RPTPs in the medicinal leech, HmLAR1 and HmLAR2, play roles in regulating the size and density of neuronal arbors within the developing nervous system and in the body wall. Employing single-cell RNAi knockdown and transgene expression techniques, we demonstrate that the expression level of HmLAR1 is directly correlated with the density of an identified neuron's arborization. Knocking down HmLAR1 mRNA levels in the mechanosensory pressure (P) neurons produces a reduced central arbor and a smaller arbor in the peripheral body wall, with fewer terminal branches. By contrast, overexpression of this receptor in a P cell leads to extensive neuronal sprouting, including many supernumerary neurites and terminal branches as well as, in some instances, the normal monopolar morphology of the P cell becoming multipolar. We also report that induced neuronal sprouting requires the expression of the receptor's membrane tethered ectodomain, including the NH(2)-Ig domains, but not of the intracellular phosphatase domains of the receptor. Interestingly, sprouting could be elicited upon ectopic expression of HmLAR1 and the related RPTP, HmLAR2 in the P and other neurons, including those that do not normally express either RPTP, suggesting that the substrates involved in HmLAR-induced sprouting are present in most neurons irrespective of whether they normally express these LAR-like RPTPs. Our data are consistent with the hypothesis that the receptors' ectodomains promote an adhesive interaction that enhances the maintenance of new processes.

Expression levels of a LAR-like receptor protein tyrosine phosphatase correlate with neuronal branching and arbor density in the medicinal leech.

LAR-phosphatases comme r&#xE9;cepteur de prot&#xE9;ine tyrosine RPTPs), qui sont signal&#xE9;s &#xE0; &#xEA;tre fortement exprim&#xE9;e dans les syst&#xE8;mes nerveux de la plupart des animaux bilat&#xE9;riens, ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de processus critiques de d&#xE9;veloppement, tels que pathfinding neuronale, l&#x26;#39;adh&#xE9;sion cellulaire et la synaptogen&#xE8;se. Nous rapportons ici que deux LAR-comme RPTPs dans la sangsue m&#xE9;dicinale, HmLAR1 et HmLAR2, jouent un r&#xF4;le dans la r&#xE9;gulation de la taille et la densit&#xE9; des arbres neuronaux au sein du syst&#xE8;me nerveux en d&#xE9;veloppement et dans la paroi du corps. Employant une seule cellule d&#xE9;montable ARNi et les techniques de l&#x26;#39;expression du transg&#xE8;ne, nous d&#xE9;montrons que le niveau d&#x26;#39;expression de HmLAR1 est directement corr&#xE9;l&#xE9;e &#xE0; la densit&#xE9; d&#x26;#39;une arborisation identifi&#xE9; neurone. Abattre HmLAR1 les niveaux d&#x26;#39;ARNm de la pression m&#xE9;canosensorielle (P) neurones produit une centrale r&#xE9;duite tonnelle et une petite tonnelle de la paroi du corps p&#xE9;riph&#xE9;rique, avec moins de branches terminales. En revanche, la surexpression de ce r&#xE9;cepteur dans une cellule neuronale P conduit &#xE0; une vaste germination, y compris de nombreux neurites surnum&#xE9;raires et les branches terminales, ainsi que, dans certains cas, la morphologie monopolaire normal de la cellule P devient multipolaire. Nous avons &#xE9;galement signaler que des cellules neuronales induite germination n&#xE9;cessite l&#x26;#39;expression de la membrane du r&#xE9;cepteur attach&#xE9; ectodomaine, y compris le NH (2)-Ig domaines, mais pas des domaines phosphatase intracellulaire du r&#xE9;cepteur. Fait int&#xE9;ressant, la germination peut &#xEA;tre obtenue lors de l&#x26;#39;expression ectopique de HmLAR1 et le RPTP connexe, HmLAR2 dans le P et d&#x26;#39;autres neurones, y compris ceux qui ne sont pas normalement exprimer soit RPTP, ce qui sugg&#xE8;re que les substrats impliqu&#xE9;s dans HmLAR induite par la germination sont pr&#xE9;sents dans la plupart des neurones ind&#xE9;pendamment de savoir si elles normalement exprimer ces RPTPs LAR-comme. Nos donn&#xE9;es sont compatibles avec l&#x26;#39;hypoth&#xE8;se que les r&#xE9;cepteurs des ectodomaines promouvoir une interaction adh&#xE9;sive qui am&#xE9;liore le maintien de nouveaux proc&#xE9;d&#xE9;s.

Niveaux d&#x26;#39;expression d&#x26;#39;une phosphatase LAR-like receptor tyrosine prot&#xE9;ine neuronale en corr&#xE9;lation avec branchement et de la densit&#xE9; Arbor dans le sangsue m&#xE9;dicinale

LAR-Like-Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatasen (RPTPs), die hochgradig ausgedr&uuml;ckt in das Nervensystem von den meisten Bilateria Tiere gemeldet werden, haben bei der Regulierung der kritischen Entwicklungsprozesse, wie neuronale Pathfinding, Zelladh&auml;sion und Synaptogenese verwickelt. Hier berichten wir, dass zwei LAR-artigen RPTPs in der medizinischen Blutegel, HmLAR1 und HmLAR2, Rollen in die Gr&ouml;&szlig;e und Dichte der neuronalen Dorne in die sich entwickelnde Nervensystem reguliert und der K&ouml;rper Wand spielen. Einzellige RNAi Niederschlag und Transgene Ausdruck Techniken besch&auml;ftigen, zeigen wir, dass Ausdrucksebene der HmLAR1 direkt mit der Dichte von einer identifizierten Neuron Arborization korreliert ist. Druck (P) Neuronen umzuwerfen HmLAR1 mRNA-Stufen in der Mechanosensory produziert werden, eine reduzierte zentrale Arbor und eine kleinere Arbor in der peripheren K&ouml;rper Wand, mit weniger terminal Niederlassungen. Im Gegensatz dazu f&uuml;hrt eine &Uuml;berexpression von diesen Rezeptor in einer P-Zelle zu umfangreichen neuronalen sprie&szlig;en, einschlie&szlig;lich viele &uuml;berz&auml;hlige Neurites und terminal-Filialen sowie in einigen F&auml;llen die normale Monopolare Morphologie der zunehmend multipolaren P-Zelle. Wir berichten auch, dass die induzierten neuronale sprie&szlig;en der Ausdruck des Rezeptors Membran gefesselte APPs&alpha;, einschlie&szlig;lich die NH-2-Ig-Dom&auml;nen, nicht aber die intrazellul&auml;re Phosphatase-Dom&auml;nen des Rezeptors erfordert. Interessanterweise k&ouml;nnte Keime hervorgerufen werden, auf ektopische Expression von HmLAR1 und die damit verbundenen RPTP, HmLAR2 in P und anderen Neuronen, einschlie&szlig;lich derjenigen, die nicht normalerweise entweder RPTP Express, darauf hindeutet, dass die Substrate HmLAR induziert sprie&szlig;en beteiligt vorhanden in den meisten Neuronen unabh&auml;ngig davon sind, ob sie normalerweise diese RPTPs LAR-&auml;hnlichen Ausdr&uuml;cken. Unsere Daten stehen im Einklang mit der Hypothese, dass die Rezeptoren Ectodomains eine selbstklebende Interaktion f&ouml;rdern, die die Wartung der neuen Prozesse verbessert.

Stufen von einem LAR-Like-Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatase korrelieren mit neuronalen Verzweigungen und Arbor-Dichte in der medizinischen Blutegel.

Recettore LAR-like protein tirosina fosfatasi (RPTPs), che sono segnalati per essere altamente espresso nei sistemi nervoso della maggior parte degli animali di Spriggina, sono stati implicati nella regolazione dei processi di sviluppo critici, quali pathfinding neuronale, adesione cellulare e pervasivi. Qui riportiamo che due RPTPs LAR-come nella Sanguisuga medicinale, HmLAR1 e HmLAR2, giocano un ruolo nel regolare la dimensione e la densit&agrave; delle pergole neuronali all&#39;interno di sviluppo del sistema nervoso e della parete del corpo. Impiegando tecniche cella singola RNAi atterramento e transgene expression, dimostriamo che il livello di espressione di HmLAR1 &egrave; direttamente correlato con la densit&agrave; di arborization di un neurone identificati. Abbattendo i livelli di mRNA di HmLAR1 nella che mechanosensory neuroni di pressione (P) produce un arbor centrale ridotto e una minore arbor nel muro periferico di corpo, con meno rami terminali. Al contrario, sovraespressione di questo recettore in una cella P conduce alla vasta neuronale spuntano, compresi molti neuriti sovrannumerari e rami terminali, nonch&eacute;, in alcuni casi, la normale morfologia monopolare della cella P diventando multipolare. Segnaliamo inoltre che spuntano neuronale indotta richiede l&#39;espressione del ectodomain di membrana tethered del recettore, compreso il NH (2)-domini Ig, ma non dei domini fosfatasi intracellulare del recettore. &Egrave; interessante notare che, germogliando potrebbe essere suscitato su espressione ectopica di HmLAR1 e il RPTP correlate, HmLAR2 in P e altri neuroni, compresi quelli che normalmente non esprimono o RPTP, suggerendo che i substrati coinvolti in HmLAR-indotta che spuntano sono presenti nella maggior parte dei neuroni indipendentemente se essi esprimono normalmente questi RPTPs LAR-come. I nostri dati sono coerenti con l&#39;ipotesi che ectodomains dei recettori promuovere un&#39;interazione adesiva che migliora il mantenimento di nuovi processi.

I livelli di espressione di una LAR-come recettore della proteina tirosina fosfatasi correlano con densit&agrave; di ramificazione e arbor neuronale nella Sanguisuga medicinale.

&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x5DE6;&#x53F3;&#x76F8;&#x79F0;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;LAR&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RPTPs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x63A2;&#x7D22;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x63A5;&#x7740;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x767A;&#x9054;&#x904E;&#x7A0B;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306B;2 LAR&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;RPTPs&#x3001;HmLAR1&#x3068;HmLAR2&#x306F;&#x3001;&#x767A;&#x9054;&#x4E2D;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x5185;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4F53;&#x58C1;&#x5185;&#x795E;&#x7D4C;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30BA;&#x3068;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3092;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3059;&#x308B;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x679C;&#x305F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x5358;&#x4E00;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;RNAi&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3068;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30FC;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x6280;&#x8853;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;HmLAR1&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x76F4;&#x63A5;&#x8B58;&#x5225;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306E;&#x5206;&#x679D;&#x306E;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x6A5F;&#x68B0;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x5727;&#x529B;&#xFF08;P&#xFF09;&#x3067;HmLAR1 mRNA&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30C0;&#x30A6;&#x30F3;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3001;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x304C;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;&#x7AEF;&#x672B;&#x306E;&#x679D;&#x3067;&#x3001;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x3001;&#x4E2D;&#x592E;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x672B;&#x68A2;&#x4F53;&#x58C1;&#x306B;&#x5C0F;&#x3055;&#x306A;&#x6771;&#x5C4B;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;P&#x30BB;&#x30EB;&#x5185;&#x306E;&#x3053;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x904E;&#x5270;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x3068;&#x7AEF;&#x672B;&#x306E;&#x679D;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x4F8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x6975;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x3066;P&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x901A;&#x5E38;&#x306E;&#x5358;&#x6975;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x767A;&#x82BD;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x767A;&#x82BD;&#x305D;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3059;&#x308B;NH&#xFF08;2&#xFF09;-Ig&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x819C;&#x306E;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3001;&#x767A;&#x82BD;&#x306F;&#x767A;&#x82BD;HmLAR&#x8A98;&#x8D77;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x57FA;&#x677F;&#x306B;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;HmLAR1&#x306E;&#x7570;&#x6240;&#x6027;&#x767A;&#x73FE;&#x3068;P&#x3001;&#x901A;&#x5E38;RPTP&#x306E;&#x3044;&#x305A;&#x308C;&#x304B;&#x3092;&#x767A;&#x73FE;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x3082;&#x542B;&#x3081;&#x3066;&#x4ED6;&#x306E;&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;RPTP&#x3001;HmLAR2&#x306B;&#x8A98;&#x767A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x901A;&#x5E38;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;LAR&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;RPTPs&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3069;&#x3046;&#x304B;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53; &#x26;quot;&#x5916;&#x90E8;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C6;&#x30CA;&#x30F3;&#x30B9;&#x3092;&#x5F37;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x63A5;&#x7740;&#x5264;&#x306E;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3068;&#x6574;&#x5408;&#x7684;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;

LAR&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x306F;&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x5206;&#x5C90;&#x3068;&#x30A2;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;

&#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xAC83;&#xB3C4; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; bilaterian &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xB294; LAR &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; (RPTPs), &#xC2E0;&#xACBD; pathfinding, &#xC138;&#xD3EC; &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; synaptogenesis &#xB4F1;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xADDC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4; &#xC788;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; LAR &#xAC19;&#xC740; RPTPs HmLAR1 &#xBC0F; HmLAR2, &#xC57D;&#xC6A9; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xBAB8;&#xC744; &#xBCBD;&#xC5D0; &#xD06C;&#xAE30;&#xC640; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC544; &#xBC84;&#xC758; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC5ED;&#xD560; &#xD50C;&#xB808;&#xC774; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; RNAi &#xCD5C;&#xC800; &#xBC0F; transgene &#xC2DD; &#xAE30;&#xBC95;&#xC744; &#xCC44;&#xC6A9;, Hmlar1&#xC758; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900; &#xD655;&#xC778; &#xB41C; &#xC2E0;&#xACBD; arborization&#xC758; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC640; &#xC9C1;&#xC811; &#xC0C1;&#xAD00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. Mechanosensory&#xC5D0;&#xC11C; HmLAR1 mRNA &#xC218;&#xC900; &#xC544;&#xB798;&#xB85C; &#xB450;&#xB4DC;&#xB9AC;&#xB294; &#xC18C;&#xB9AC; &#xC555;&#xB825; (P) &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xAC10;&#xC18C; &#xC911;&#xC559; &#xC544; &#xBC84;&#xC640; &#xC801;&#xC740; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xC9C0;&#xC810; &#xC8FC;&#xBCC0; &#xBAB8; &#xBCBD;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xC544; &#xBC84;. &#xB300;&#xC870;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, P &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC774; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; overexpression &#xB3CB; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC544;, &#xBB3C;&#xB860;, &#xC5B4;&#xB5A4; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;, &#xB9CE;&#xC740; supernumerary neurites&#xC640; &#xD130;&#xBBF8;&#xB110; &#xBD84;&#xAE30;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4; &#xADF9; &#xB418; &#xACE0; P &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; monopolar &#xD615;&#xD0DC; &#xB9AC;&#xB4DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC720;&#xB3C4; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB3CB; &#xC544; &#xB274; &#xD584;&#xD504;&#xC154; (2)-Ig &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xB9C9; &#xACC1;&#xC5D0; ectodomain&#xC758; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xB3C4;&#xBA54;&#xC778;&#xC758; &#xC2DD;&#xC774; &#xD544;&#xC694; &#xD568;&#xC744; &#xBCF4;&#xACE0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD765;&#xBBF8;&#xB86D;&#xAC8C;&#xB3C4;, &#xB3CB; &#xC544; Hmlar1&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; RPTP, HmLAR2 P&#xB97C; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAE30;&#xD310; &#xB3CB; &#xC544; HmLAR &#xC720;&#xBC1C;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; LAR &#xAC19;&#xC740; Rptps&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xBD80;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC874;&#xC7AC; &#xD558;&#xB294; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xAC70;&#xB098; RPTP&#xC744; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558; &#xC5EC; &#xB2E4;&#xB978; &#xB274;&#xB7F0;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC18C;&#xC131; &#xC2DD; elicited &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; ectodomains &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4;&#xC758; &#xC720;&#xC9C0; &#xBCF4;&#xC218;&#xB97C; &#xD5A5;&#xC0C1; &#xC2DC;&#xCF1C; &#xC811;&#xCC29;&#xC81C;&#xC758; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xB294; &#xAC00;&#xC124;&#xACFC; &#xC77C;&#xCE58; &#xD558;&#xB294;.

LAR &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; &#xD6A8;&#xC18C; &#xC2DD; &#xC218;&#xC900;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xBD84;&#xAE30; &#xBC0F; &#xC544; &#xBC84; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC57D; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xAD00;.

LAR-como receptores de prote&#xED;na tirosina fosfatasas (RPTPs), que se presentan para ser altamente expresado en el sistema nervioso de la mayor&#xED;a de los animales bilaterales, han sido implicados en la regulaci&#xF3;n de los procesos cr&#xED;ticos del desarrollo, tales como la b&#xFA;squeda de caminos neuronales, la adhesi&#xF3;n celular y la sinaptog&#xE9;nesis. Aqu&#xED; mostramos que dos LAR-como RPTPs en la sanguijuela medicinal, HmLAR1 y HmLAR2, juegan un papel en la regulaci&#xF3;n del tama&#xF1;o y la densidad de los cenadores neuronales en el sistema nervioso en desarrollo y en la pared del cuerpo. El empleo de una sola c&#xE9;lula RNAi desmontables y las t&#xE9;cnicas de expresi&#xF3;n del transgen, se demuestra que el nivel de expresi&#xF3;n de HmLAR1 est&#xE1; directamente correlacionada con la densidad de una persona f&#xED;sica identificada neurona arborizaci&#xF3;n. Derribar HmLAR1 los niveles de mRNA de la presi&#xF3;n mecanosensorial (P), las neuronas produce una reducci&#xF3;n del jard&#xED;n central y un jard&#xED;n m&#xE1;s peque&#xF1;o en la pared del cuerpo perif&#xE9;rico, con un menor n&#xFA;mero de ramas terminales. Por el contrario, la sobreexpresi&#xF3;n de este receptor en una c&#xE9;lula neuronal P conduce a una amplia brote, incluyendo muchas neuritas supernumerarios y las ramas terminales, as&#xED; como, en algunos casos, la morfolog&#xED;a monopolar normal de la c&#xE9;lula P convertirse en multipolar. Tambi&#xE9;n informan que neuronal inducida por germinaci&#xF3;n requiere la expresi&#xF3;n de los receptores de membrana de atado ectodominio, incluyendo el NH (2)-Ig de dominios, pero no de los dominios fosfatasa intracelular del receptor. Curiosamente, brotes podr&#xED;a obtenerse en la expresi&#xF3;n ect&#xF3;pica de HmLAR1 y el RPTP relacionado, HmLAR2 en el P y otras neuronas, incluidas las que normalmente no se expresan bien RPTP, lo que sugiere que los sustratos que participan en HmLAR inducida por el brote est&#xE1;n presentes en la mayor&#xED;a de las neuronas independientemente de si se expresan normalmente estos RPTPs LAR-similares. Nuestros datos son consistentes con la hip&#xF3;tesis de que ectodominios los receptores de promover una interacci&#xF3;n adhesivo que mejora el mantenimiento de nuevos procesos.

Los niveles de expresi&#xF3;n de una tirosina fosfatasa LAR-como receptor de la prote&#xED;na neuronal se correlacionan con ramificaci&#xF3;n y densidad Arbor en la sanguijuela medicinal

&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x3001; &#x6C34;&#x86ED; &#x2170; &#x662F;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7ED3;&#x6784;&#x3001; &#x529F;&#x80FD;&#x3001; &#x53D1;&#x5C55;&#x3001; &#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x4FEE;&#x590D;&#x7684;&#x91CD;&#x8981;&#x6A21;&#x578B;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E5F;&#x662F;&#x76EE;&#x524D;&#x88AB;&#x6279;&#x51C6;&#x4F7F;&#x7528;&#x5728;&#x533B;&#x7597;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x5982;&#x6E05;&#x9664;&#x6C60;&#x8840;&#x540E;&#x67D0;&#x4E9B;&#x5916;&#x79D1;&#x624B;&#x672F;&#x7684;&#x72EC;&#x6709;&#x7269;&#x79CD;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x5F53;&#x524D;&#x548C;&#x6F5C;&#x5728;&#x8FD8;&#x672A;&#x6765;&#xFF0C;&#x6E90;&#x533B;&#x5B66;&#x4E0A;&#x6709;&#x7528;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x56E0;&#x7D20;&#xFF0C;&#x4F8B;&#x5982;&#x6297;&#x51DD;&#x8840;&#x5242;&#x548C;&#x6297;&#x83CC;&#x80BD;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x7531;&#x4E8E;&#x5176;&#x5BC4;&#x751F;&#x7684;&#x5927;&#x578B;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x3002;&#x5C3D;&#x7BA1;&#x5728;&#x6B64;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E0A;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x91CD;&#x70B9;&#x751A;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x6216;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x4E00;&#x7EA7;&#x548C;&#x516C;&#x5F00;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6570;&#x636E;&#x7684;&#x7F3A;&#x4E4F;&#x3002;&#x9996;&#x5148;&#x8981;&#x89E3;&#x51B3;&#x8FD9;&#x4E00;&#x95EE;&#x9898;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6784;&#x9020;&#x6574;&#x4E2A;&#x80DA;&#x80CE;&#x548C;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF; (CNS) EST &#x5E93;&#x548C;&#x521B;&#x5EFA;&#x6C34;&#x86ED;&#x8F6C;&#x5F55;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x53EF;&#x7528;&#x7684;&#x79D1;&#x5B66;&#x754C;&#x4EBA;&#x58EB;&#x805A;&#x96C6;&#x7684;&#x5E8F;&#x5217;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x3002;

&#x5EFA;&#x8BBE;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x8F6C;&#x5F55;&#x7EC4;&#x6570;&#x636E;&#x5E93;&#x4E0E;&#x795E;&#x7ECF;&#x548C;&#x5148;&#x5929;&#x514D;&#x75AB;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C34;&#x86ED;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x9274;&#x5B9A;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

The medicinal leech, Hirudo medicinalis, is an important model system for the study of nervous system structure, function, development, regeneration and repair. It is also a unique species in being presently approved for use in medical procedures, such as clearing of pooled blood following certain surgical procedures. It is a current, and potentially also future, source of medically useful molecular factors, such as anticoagulants and antibacterial peptides, which may have evolved as a result of its parasitizing large mammals, including humans. Despite the broad focus of research on this system, little has been done at the genomic or transcriptomic levels and there is a paucity of openly available sequence data. To begin to address this problem, we constructed whole embryo and adult central nervous system (CNS) EST libraries and created a clustered sequence database of the Hirudo transcriptome that is available to the scientific community.

Construction of a medicinal leech transcriptome database and its application to the identification of leech homologs of neural and innate immune genes.

La sangsue m&#xE9;dicinale, Hirudo medicinalis, est un important syst&#xE8;me mod&#xE8;le pour l&#x26;#39;&#xE9;tude de la structure du syst&#xE8;me nerveux, la fonction, le d&#xE9;veloppement, la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration et la r&#xE9;paration. Il est &#xE9;galement une esp&#xE8;ce unique en &#xE9;tant actuellement approuv&#xE9; pour utilisation dans des proc&#xE9;dures m&#xE9;dicales, telles que l&#x26;#39;&#xE9;limination du sang commun &#xE0; la suite de certaines interventions chirurgicales. C&#x26;#39;est un courant, et potentiellement aussi l&#x26;#39;avenir, source de m&#xE9;dicalement utiles facteurs mol&#xE9;culaires, tels que des anticoagulants et des peptides antibact&#xE9;riens, qui peuvent avoir &#xE9;volu&#xE9; &#xE0; la suite de ses parasitant les grands mammif&#xE8;res, y compris les humains. En d&#xE9;pit de la large port&#xE9;e de la recherche sur ce syst&#xE8;me, peu a &#xE9;t&#xE9; fait aux niveaux g&#xE9;nomiques ou transcriptomique et il ya un manque de donn&#xE9;es de s&#xE9;quences ouvertement disponibles. Pour commencer &#xE0; r&#xE9;soudre ce probl&#xE8;me, nous avons construit embryon entier et des adultes du syst&#xE8;me nerveux central (SNC) biblioth&#xE8;ques EST et cr&#xE9;&#xE9; une base de donn&#xE9;es en cluster s&#xE9;quence du transcriptome Hirudo qui est disponible &#xE0; la communaut&#xE9; scientifique.

Construction d&#x26;#39;une base de donn&#xE9;es du transcriptome sangsue m&#xE9;dicinale et son application &#xE0; l&#x26;#39;identification d&#x26;#39;homologues de neurones de sangsue et Innate g&#xE8;nes du syst&#xE8;me immunitaire

Der medizinische Blutegel, Hirudo Medicinalis, ist ein wichtiges Modell-System f&uuml;r die Studie des Nervensystems Struktur, Funktion, Entwicklung, Aufbereitung und Reparatur. Es ist auch eine einzigartigen Arten in derzeit f&uuml;r den Einsatz in medizinischen Verfahren, z. B. das L&ouml;schen von gepoolten Blut bestimmte chirurgische Verfahren genehmigt. Es ist eine aktuelle und potenziell auch zuk&uuml;nftige, Quelle medizinisch n&uuml;tzliche Molekulare Faktoren wie Antikoagulantien und Antibakterielle Peptide, die infolge ihrer parasitierende gro&szlig;e S&auml;ugetiere entwickelt haben, einschlie&szlig;lich Menschen. Trotz der breiten Ausrichtung der Forschung auf diesem System wenig getan wurde, auf genomische oder Transcriptomic Ebene und gibt es einen Mangel von &ouml;ffentlich verf&uuml;gbaren Sequenzdaten. Um zu beginnen, dieses Problem anzugehen, haben wir gebaut, ganze Embryo und Erwachsenen Zentralnervensystem (ZNS) EST Bibliotheken und erstellt eine Datenbank mit gruppierten Reihenfolge der Hirudo Transkriptom, die der wissenschaftlichen Gemeinschaft zur Verf&uuml;gung steht.

Bau einer medizinischen Blutegel Transkriptom-Datenbank und seine Anwendung zur Identifizierung der Blutegel UCP1 neuronalen und angeborenen Immunsystem Gene.

La Sanguisuga medicinale, Hirudo medicinalis, &egrave; un importante modello sistema per lo studio della struttura del sistema nervoso, funzione, sviluppo, rigenerazione e riparazione. &Egrave; anche una specie unica in essere attualmente approvato per l&#39;uso in procedure mediche, ad esempio l&#39;eliminazione di sangue nel pool seguendo determinate procedure chirurgiche. &Egrave; una corrente, e potenzialmente anche futuri, fonte dei fattori molecolari medicalmente utili, come anticoagulanti e peptidi antibatterici, che potrebbero essersi evoluto a causa sua parasitizing grandi mammiferi, compreso gli esseri umani. Nonostante l&#39;ampio focus della ricerca su questo sistema, poco &egrave; stato fatto a livello genomica e trascrittomica e c&#39;&egrave; una scarsit&agrave; di dati di sequenza apertamente disponibili. Per cominciare a risolvere questo problema, abbiamo costruito intero embrione e librerie EST adulti del sistema nervoso centrale (CNS) e creato un database in cluster sequenza del transcriptome Hirudo che &egrave; disponibile per la comunit&agrave; scientifica.

Costruzione di un database di transcriptome Sanguisuga medicinale e la sua applicazione per l&#39;identificazione degli omologhi sanguisuga dei geni immuni neurali e innati.

&#x85AC;&#x7528;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x3001;Hirudo&#x306E;medicinalis&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E;&#x69CB;&#x9020;&#x3001;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x3001;&#x518D;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x4FEE;&#x5FA9;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x7CFB;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x5916;&#x79D1;&#x624B;&#x8853;&#x5F8C;&#x306B;&#x30D7;&#x30FC;&#x30EB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8840;&#x6DB2;&#x306E;&#x30AF;&#x30EA;&#x30A2;&#x306A;&#x3069;&#x306E;&#x533B;&#x7642;&#x51E6;&#x7F6E;&#x3067;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306B;&#x627F;&#x8A8D;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x306E;&#x30E6;&#x30CB;&#x30FC;&#x30AF;&#x306A;&#x7A2E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6297;&#x51DD;&#x56FA;&#x5264;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30D2;&#x30C8;&#x3092;&#x542B;&#x3081;&#x305F;&#x305D;&#x306E;&#x5BC4;&#x751F;&#x5927;&#x578B;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x9032;&#x5316;&#x3057;&#x305F;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x6297;&#x83CC;&#x6027;&#x30DA;&#x30D7;&#x30C1;&#x30C9;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x533B;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x6709;&#x7528;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x8981;&#x56E0;&#x3001;&#x73FE;&#x5728;&#x306E;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x4ECA;&#x5F8C;&#x3082;&#x3001;&#x30BD;&#x30FC;&#x30B9;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x7126;&#x70B9;&#x306B;&#x3082;&#x304B;&#x304B;&#x308F;&#x3089;&#x305A;&#x3001;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306F;&#x3001;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0;&#x3084;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x3001;&#x30AA;&#x30FC;&#x30D7;&#x30F3;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x914D;&#x5217;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x554F;&#x984C;&#x306B;&#x5BFE;&#x51E6;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x958B;&#x59CB;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5168;&#x80DA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6210;&#x4F53;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#xFF08;CNS&#xFF09;&#x306E;EST&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x3092;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3057;&#x3001;&#x79D1;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30B3;&#x30DF;&#x30E5;&#x30CB;&#x30C6;&#x30A3;&#x306B;&#x5229;&#x7528;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;Hirudo&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30AF;&#x30EA;&#x30D7;&#x30C8;&#x30FC;&#x30E0;&#x306E;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x914D;&#x5217;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

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&#xC57D;&#xC6A9; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;, Hirudo medicinalis, &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4; &#xAD6C;&#xC870;, &#xAE30;&#xB2A5;, &#xAC1C;&#xBC1C;, &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xC218;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD604;&#xC7AC; &#xD2B9;&#xC815; &#xC218;&#xC220; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xD480;&#xB9C1;&#xB41C; &#xD53C;&#xC758; &#xC9C0;&#xC6B0;&#xAE30; &#xC758;&#xB8CC; &#xC808;&#xCC28;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2B9;&#xC778; &#xB418; &#xACE0; &#xB3C5;&#xD2B9;&#xD55C; &#xC885;&#xC871; &#xC774;&#xAE30;&#xB3C4; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xAC83;&#xC774; &#xC804;&#xB958;&#xB97C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB610;&#xD55C; anticoagulants parasitizing &#xB300;&#xD615; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xB85C; &#xC9C4;&#xD654; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD56D;&#xADE0; &#xD3A9; &#xD2F0; &#xB4DC; &#xB4F1; &#xC758;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC720;&#xC6A9;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBBF8;&#xB798;, &#xC18C;&#xC2A4; &#xB4F1; &#xC778;&#xAC04; &#xD558; &#xACE0;. &#xC774; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xCD08;&#xC810;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBD88;&#xAD6C; &#xD558; &#xACE0; &#xC791;&#xC740; &#xAC8C;&#xB188; &#xB610;&#xB294; transcriptomic &#xC218;&#xC900; &#xC644;&#xB8CC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xACF5;&#xAC1C;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC18C;&#xC218;. &#xC774; &#xBB38;&#xC81C;&#xB97C; &#xD574;&#xACB0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC804;&#xCCB4; &#xD0DC;&#xC544; &#xBC0F; &#xC131;&#xC778; &#xC911;&#xC559; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C; (CNS) EST &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xACFC;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC5ED; &#xC0AC;&#xD68C;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294; Hirudo transcriptome&#xC758; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xB41C; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC57D; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; transcriptome &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xBCA0;&#xC774;&#xC2A4;&#xC640; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD558; &#xACE0; &#xD0C0;&#xACE0; &#xB09C; &#xBA74;&#xC5ED; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; homologs &#xC2DD;&#xBCC4;&#xC5D0;&#xC758; &#xC751;&#xC6A9;&#xC758; &#xAC74;&#xC124;.

La sanguijuela medicinal, Hirudo medicinalis, es un importante sistema modelo para el estudio de la estructura del sistema nervioso, la funci&#xF3;n, el desarrollo, la regeneraci&#xF3;n y reparaci&#xF3;n. Tambi&#xE9;n es una especie &#xFA;nica en la actualidad est&#xE1; aprobado para su uso en los procedimientos m&#xE9;dicos, tales como la desaparici&#xF3;n de un charco de sangre despu&#xE9;s de ciertos procedimientos quir&#xFA;rgicos. Es una corriente, y potencialmente futuro tambi&#xE9;n, fuente de factores moleculares m&#xE9;dicamente &#xFA;tiles, tales como anticoagulantes y p&#xE9;ptidos antibacterianos, que pueden haber evolucionado como resultado de sus mam&#xED;feros parasitando grandes, incluyendo los humanos. A pesar del amplio enfoque de la investigaci&#xF3;n sobre este sistema, poco se ha hecho a nivel gen&#xF3;mico o de transcript&#xF3;mica y hay una escasez de datos de la secuencia abiertamente disponibles. Para comenzar a abordar este problema, se construy&#xF3; toda de embriones y de adultos del sistema nervioso central (SNC) EST bibliotecas y cre&#xF3; una base de datos de secuencia agrupada del transcriptoma Hirudo que est&#xE1; disponible para la comunidad cient&#xED;fica.

Construcci&#xF3;n de una base de datos de Medicinal Leech transcriptoma y su aplicaci&#xF3;n a la identificaci&#xF3;n de hom&#xF3;logos de genes inmunol&#xF3;gicos Leech neuronales e innata

LAR &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; (RPTPs)&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x591A;&#x6570;&#x5982;&#x679C;&#x8FC4;&#x4ECA;&#x5BA1;&#x67E5;&#x5E76;&#x4E0D;&#x662F;&#x6240;&#x6709; bilaterian &#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x5341;&#x5206;&#x6E05;&#x695A;&#x5730;&#x8868;&#x793A;&#xFF0C;&#x5728;&#x89C4;&#x7BA1;&#x5404;&#x79CD;&#x5173;&#x952E;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x7A81;&#x8D77;&#x6709;&#x7275;&#x8FDE;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5305;&#x62EC;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x5BFB;&#x8DEF;&#x3001; &#x7C98;&#x9644;&#x548C;&#x7A81;&#x89E6;&#x5F62;&#x6210;&#x5728;&#x5F00;&#x53D1;&#x671F;&#x95F4;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x6210;&#x5E74;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x6210;&#x4EBA;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x673A;&#x68B0;&#x521B;&#x4F24;&#x53CD;&#x5E94;&#x63A2;&#x8BA8; LAR &#x7C7B;&#x4F3C; RPTP (HmLAR1) &#x7684;&#x53EF;&#x80FD;&#x53D1;&#x6325;&#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x548C;&#x4E2A;&#x522B;&#x8282;&#x6BB5;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282; HmLAR1 &#x8868;&#x8FBE; QPCR &#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#xFF0C;&#x5728;&#x73B0;&#x573A;&#x548C;&#x7ECF;&#x8FC7;&#x4E00;&#x6BB5;&#x65F6;&#x671F;&#x4F53;&#x5916;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x663E;&#x8457;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x5728;&#x6C34;&#x86ED;&#x540C;&#x7CFB;&#x7269;&#x7684; Abelson &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#xFF0C;&#x5047;&#x5B9A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5408;&#x4F5C;&#x4F19;&#x4F34; LAR &#x53D7;&#x4F53;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x5305;&#x62EC;&#x5176;&#x4ED6;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x4E0A;&#x8C03;&#x3002;&#x5BF9;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x6DB2;&#x8D28;&#x8054;&#x6BD4;&#x8F83;&#x589E;&#x957F;&#x4E4B;&#x95F4;&#x795E;&#x7ECF;&#x6324;&#x538B;&#x7684;&#x9884;&#x6D4B;&#x4E2A;&#x4EBA;&#x80CC; P &#x795E;&#x7ECF;&#x5143; (P(D)) &#x540E;&#x5BF9;&#x53D7;&#x4F53;&#x6216;&#x63A7;&#x5236; Rna &#x5E72;&#x6270; Rna &#x7684;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x6CE8;&#x5C04;&#x3002;&#x53D7;&#x4F53; RNAi &#x5BFC;&#x81F4;&#x6CE8;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE; HmLAR1 &#x8868;&#x8FBE;&#x5927;&#x5E45;&#x5EA6;&#x51CF;&#x5C11;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7C89;&#x788E;&#x7AD9;&#x70B9;&#x76F8;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x63A7;&#x4EF6;&#x7684;&#x53D1;&#x82BD;&#x548C;&#x84C4;&#x70ED;&#x5F0F;&#x589E;&#x957F;&#x663E;&#x8457;&#x4E0B;&#x8DCC;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x5C06; HmLARs &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECE;&#x6C34;&#x86ED;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x5C55;&#x6269;&#x5C55;&#x5230;&#x6210;&#x4EBA;&#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x7EC6;&#x80DE;&#x518D;&#x751F;&#xFF0C;&#x5E76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5E73;&#x53F0;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x518D;&#x751F;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8C03;&#x63A7;&#x5728;&#x5355;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7EA7;&#x522B;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;

&#x53D7;&#x4F53;&#x86CB;&#x767D;&#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x78F7;&#x9178;&#x9176; HmLAR1 &#x662F;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x635F;&#x4F24;&#x540E;&#x7684;&#x6210;&#x4EBA;&#x836F;&#x7528;&#x6C34;&#x86ED;&#x7684;&#x4E0A;&#x8C03;&#xFF0C;&#x795E;&#x7ECF;&#x5143;&#x53D1;&#x82BD;&#x548C;&#x518D;&#x751F;&#x6240;&#x5FC5;&#x9700;&#x7684;&#x3002;

LAR-like receptor protein tyrosine phosphatases (RPTPs), which are abundantly expressed in the nervous systems of most if not all bilaterian animals thus far examined, have been implicated in regulating a variety of critical neuronal processes. These include neuronal pathfinding, adhesion and synaptogenesis during development and, in adult mammals, neuronal regeneration. Here we explored a possible role of a LAR-like RPTP (HmLAR1) in response to mechanical trauma in the adult nervous system of the medicinal leech. In situ hybridization and QPCR analyses of HmLAR1 expression in individual segmental ganglia revealed a significant up-regulation in receptor expression following CNS injury, both in situ and following a period in vitro. Furthermore, we observed up-regulation in the expression of the leech homologue of the Abelson tyrosine kinase, a putative signaling partner to LAR receptors, but not among other tyrosine kinases. The effects on neuronal regeneration were assayed by comparing growth across a nerve crush by projections of individual dorsal P neurons (P(D)) following single-cell injection of interfering RNAs against the receptor or control RNAs. Receptor RNAi led to a significant reduction in HmLAR1 expression by the injected cells and resulted in a significant decrease in sprouting and regenerative growth at the crush site relative to controls. These studies extend the role of the HmLARs from leech neuronal development to adult neuronal regeneration and provide a platform to investigate neuronal regeneration and gene regulation at the single cell level.

The receptor protein tyrosine phosphatase HmLAR1 is up-regulated in the CNS of the adult medicinal leech following injury and is required for neuronal sprouting and regeneration.

LAR-like phosphatases r&#xE9;cepteur de prot&#xE9;ine tyrosine RPTPs), qui sont abondamment exprim&#xE9;s dans les syst&#xE8;mes nerveux de la plupart sinon tous les animaux bilat&#xE9;riens jusqu&#x26;#39;ici examin&#xE9;s, ont &#xE9;t&#xE9; impliqu&#xE9;s dans la r&#xE9;gulation de divers critiques des processus neuronaux. Il s&#x26;#39;agit notamment de pathfinding neuronale, l&#x26;#39;adh&#xE9;rence et la synaptogen&#xE8;se au cours du d&#xE9;veloppement et, chez les mammif&#xE8;res adultes, la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration neuronale. Ici, nous avons explor&#xE9; le r&#xF4;le &#xE9;ventuel d&#x26;#39;un RPTP LAR-like (HmLAR1) en r&#xE9;ponse &#xE0; un traumatisme m&#xE9;canique dans le syst&#xE8;me nerveux adulte de la sangsue m&#xE9;dicinale. L&#x26;#39;hybridation in situ et les analyses de la QPCR HmLAR1 expression dans les ganglions segmentaires individuelle a r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; une importante r&#xE9;gulation &#xE0; la hausse l&#x26;#39;expression des r&#xE9;cepteurs &#xE0; la suite une blessure au SNC, &#xE0; la fois in situ et apr&#xE8;s une p&#xE9;riode in vitro. En outre, nous avons observ&#xE9; une r&#xE9;gulation positive dans l&#x26;#39;expression de l&#x26;#39;homologue chute de la tyrosine kinase Abelson, un partenaire pr&#xE9;sum&#xE9; de signalisation &#xE0; LAR r&#xE9;cepteurs, mais pas chez d&#x26;#39;autres tyrosine kinases. Les effets sur la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration neuronale ont &#xE9;t&#xE9; analys&#xE9;s en comparant la croissance &#xE0; travers une &#xE9;crasement du nerf par des projections de neurones individuels P dorsales (P (D)) apr&#xE8;s une seule injection de cellules ARN interf&#xE9;rents contre les ARN r&#xE9;cepteurs ou de contr&#xF4;le. R&#xE9;cepteur ARNi conduit &#xE0; une r&#xE9;duction significative de HmLAR1 expression par les cellules inject&#xE9;es et a entra&#xEE;n&#xE9; une diminution significative de la germination et la croissance r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ratrice sur le site d&#x26;#39;&#xE9;crasement par rapport aux t&#xE9;moins. Ces &#xE9;tudes d&#x26;#39;&#xE9;tendre le r&#xF4;le des HmLARs de sangsue d&#xE9;veloppement neuronal &#xE0; la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration neuronale des adultes et de fournir une plate-forme pour enqu&#xEA;ter sur la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration neuronale et la r&#xE9;gulation des g&#xE8;nes au niveau cellulaire unique.

La Tyrosine Phosphatase r&#xE9;cepteur de prot&#xE9;ine HmLAR1 est r&#xE9;gul&#xE9;e &#xE0; la hausse dans le SNC de la blessure Leech adultes m&#xE9;dicament &#xE0; la suite et est requis pour la germination et la r&#xE9;g&#xE9;n&#xE9;ration neuronale

LAR-Like-Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatasen (RPTPs), die reichlich in das Nervensystem von die meisten wenn nicht alle Bilateria Tiere, die bislang untersucht angegeben sind, haben bei der Regulierung einer Vielzahl von kritischen neuronale Prozesse verwickelt. Dazu geh&ouml;ren neuronale Pathfinding, Adh&auml;sion und Synaptogenese, w&auml;hrend der Entwicklung und in Erwachsene S&auml;ugetiere, neuronalen Regeneration. Hier erkunden wir eine m&ouml;gliche Rolle von einer LAR-wie RPTP (HmLAR1) als Reaktion auf mechanische Trauma des erwachsenen Nervensystems von der medizinischen Blutegel. In situ-Hybridisierung und QPCR Analysen des HmLAR1 Ausdrucks im einzelnen segmentalen Ganglien ergab eine signifikante bis-Verordnung in Rezeptor Ausdruck nach CNS Verletzungen, sowohl in-situ und Ablauf einer in-vitro. Dar&uuml;ber hinaus beobachten wir oben-Verordnung in der Auspr&auml;gung der Blutegel-Homolog von Abelson-Tyrosinkinase, ein mutma&szlig;liches Signalling Partner LAR-Rezeptoren, aber nicht bei anderen Tyrosinkinasen. Die Auswirkungen auf die neuronalen Regeneration wurden normalisiert durch Vergleich Wachstum f&uuml;r eine Nerven-Crush von Projektionen der einzelnen dorsal P Neuronen (P(D)) nach einzellige Injektion von st&ouml;renden RNAs gegen den Rezeptor oder Steuerelement RNAs. Rezeptor RNAi f&uuml;hrte zu einem erheblichen R&uuml;ckgang der HmLAR1 Ausdruck durch die eingef&uuml;gten Zellen und f&uuml;hrte zu einem deutlichen R&uuml;ckgang der Keimung und regenerative Wachstum am Standort Gedr&auml;nge im Verh&auml;ltnis zu Steuerelementen. Diese Studien reicht die Rolle der HmLARs von Blutegel neuronale Entwicklung bis zum Erwachsenen neuronalen Regeneration und bieten eine Plattform, um neuronale Regeneration und Genregulation auf der Ebene der einzelnen Zelle zu untersuchen.

Die Rezeptor-Protein-Tyrosin-Phosphatase HmLAR1 ist oben-geregelt im ZNS von der Erwachsenen medizinische Blutegel nach Verletzung und ist erforderlich f&uuml;r neuronale sprie&szlig;en und Regeneration.

LAR-come recettore della proteina tirosina fosfatasi (RPTPs), che sono abbondantemente espresso nel sistema nervoso della maggior parte se non tutti gli animali di Spriggina finora esaminati, sono stati implicati nella regolazione di una variet&agrave; di processi neuronali critici. Questi includono pathfinding neuronale, adesione e pervasivi, durante lo sviluppo e, nei mammiferi adulti, rigenerazione neuronale. Qui abbiamo esplorato un possibile ruolo di una LAR-come RPTP (HmLAR1) in risposta al trauma meccanico nel sistema nervoso adulto di Sanguisuga medicinale. QPCR analisi dell&#39;espressione di HmLAR1 nei singoli gangli segmentali e l&#39;ibridazione in situ ha rivelato un significativo up-regolamento a seguito di infortunio CNS, entrambi in situ e dopo un periodo in vitro dell&#39;espressione dei recettori. Inoltre, abbiamo osservato in su-regolazione nell&#39;espressione dell&#39;omologo di sanguisuga di Abelson chinasi della tirosina, un partner di segnalazione putativo ai recettori LAR, ma non tra altre chinasi della tirosina. Gli effetti sulla rigenerazione neuronale sono stati analizzati confrontando la crescita attraverso uno schiacciamento del nervo da proiezioni di singoli neuroni P dorsale (P(D)) seguito a cella singola iniezione di RNAs d&#39;interferenza contro il RNAs recettore o controllo. Recettore RNAi ha portato a una significativa riduzione nell&#39;espressione di HmLAR1 dalle cellule iniettate e ha provocato una diminuzione significativa nella crescita di germogliatura e rigenerativa presso il sito schiacci relativi controlli. Questi studi di estendono il ruolo dell&#39;HmLARs da sviluppo neuronale sanguisuga per adulti rigenerazione neuronale e forniscono una piattaforma per indagare la rigenerazione neuronale e regolazione genica a livello di singola cellula.

Della fosfatasi della tirosina della proteina recettore HmLAR1 &egrave; up-regolato nel SNC di adulti Sanguisuga medicinale dopo lesioni ed &egrave; necessaria per la germinazione neuronale e rigenerazione.

&#x8C4A;&#x5BCC;&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x3067;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x307E;&#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5DE6;&#x53F3;&#x76F8;&#x79F0;&#x52D5;&#x7269;&#x3067;&#x8868;&#x73FE;&#x3055;&#x308C;&#x308B;LAR&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30DB;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A1;&#x30BF;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;RPTPs&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x795E;&#x7D4C;&#x7A81;&#x8D77;&#x306E;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x63A2;&#x7D22;&#x3001;&#x958B;&#x767A;&#x4E2D;&#x306E;&#x63A5;&#x7740;&#x3084;&#x30B7;&#x30CA;&#x30D7;&#x30B9;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x3001;&#x5927;&#x4EBA;&#x306E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x3067;&#x3001;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x7528;&#x30D2;&#x30EB;&#x306E;&#x6210;&#x4EBA;&#x306E;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x6A5F;&#x68B0;&#x7684;&#x5916;&#x50B7;&#x306B;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3057;&#x3066;&#x3001;LAR&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;RPTP&#xFF08;HmLAR1&#xFF09;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x63A2;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x5206;&#x7BC0;&#x795E;&#x7D4C;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;HmLAR1&#x767A;&#x73FE;&#x306E;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3068;&#x5B9A;&#x91CF;PCR&#x89E3;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5834;&#x3067;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306E;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x4EE5;&#x4E0B;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x3001;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3001;&#x6B21;&#x306E;CNS&#x306E;&#x640D;&#x50B7;&#x304C;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;LAR&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30A2;&#x30D9;&#x30EB;&#x30BD;&#x30F3;&#x30C1;&#x30ED;&#x30B7;&#x30F3;&#x30AD;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x63A8;&#x5B9A;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D1;&#x30FC;&#x30C8;&#x30CA;&#x30FC;&#x306E;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x30DB;&#x30E2;&#x30ED;&#x30B0;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x30EC;&#x30AE;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x3078;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3084;&#x5236;&#x5FA1;&#x6027;RNA&#x306B;&#x5BFE;&#x3059;&#x308B;RNA&#x306E;&#x5E72;&#x6E09;&#x306E;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x6CE8;&#x5165;&#x5F8C;&#x306E;&#x500B;&#x3005;&#x306E;&#x80CC;P&#x30CB;&#x30E5;&#x30FC;&#x30ED;&#x30F3;&#xFF08;P&#xFF08;D&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x7A81;&#x8D77;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x795E;&#x7D4C;&#x306E;&#x3068;&#x304D;&#x3081;&#x304D;&#x3092;&#x8D8A;&#x3048;&#x3066;&#x6210;&#x9577;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;RNAi&#x306F;&#x3001;&#x6CE8;&#x5165;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;HmLAR1&#x8868;&#x73FE;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x524A;&#x6E1B;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x3068;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C8;&#x30ED;&#x30FC;&#x30EB;&#x3078;&#x306E;&#x76F8;&#x5BFE;&#x7684;&#x306A;&#x3068;&#x304D;&#x3081;&#x304D;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x3067;&#x767A;&#x82BD;&#x3068;&#x56DE;&#x751F;&#x6210;&#x9577;&#x306E;&#x6709;&#x610F;&#x306A;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x304C;&#x8A8D;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30FC;&#x30C1;&#x795E;&#x7D4C;&#x767A;&#x9054;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x4F53;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x306B;HmLARs&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3092;&#x62E1;&#x5F35;&#x3057;&#x3001;&#x5358;&#x4E00;&#x7D30;&#x80DE;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306E;&#x795E;&#x7D4C;&#x518D;&#x751F;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

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&#xB300;&#xBD80;&#xBD84;&#xC758; &#xACBD;&#xC6B0; &#xC9C0;&#xAE08;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xAC80;&#xC0AC; &#xD558;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; bilaterian &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC758; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD48D;&#xBD80; &#xD558; &#xAC8C; &#xD45C;&#xD604; &#xD558;&#xB294; LAR &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574; (RPTPs), &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD504;&#xB85C;&#xC138;&#xC2A4; &#xC870;&#xC808;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xB8E8; &#xB418;&#xC5B4;. &#xC131;&#xC778; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958;, &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7AC;&#xC0DD;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAC1C;&#xBC1C; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC2E0;&#xACBD; pathfinding, &#xC811;&#xCC29; &#xBC0F; synaptogenesis &#xD3EC;&#xD568; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC57D;&#xC6A9; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC;&#xC758; &#xC131;&#xC778; &#xC2E0; &#xACBD;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAE30;&#xACC4;&#xC801; &#xC678;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC751;&#xB2F5;&#xC5D0;&#xC11C; LAR &#xAC19;&#xC740; RPTP (HmLAR1)&#xC758; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xD0D0;&#xD5D8;. &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1; &#xBC0F; &#xAC1C;&#xBCC4; segmental &#xC911;&#xCD94;&#xC5D0; HmLAR1 &#xC2DD;&#xC758; QPCR &#xBD84;&#xC11D; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC2DD; CNS &#xBD80;&#xC0C1; &#xBAA8;&#xB450; &#xC6D0;&#xB798;&#xC758; &#xC7A5;&#xC18C;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAE30;&#xAC04; &#xCCB4; &#xC678;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C;&#xB97C; &#xACF5;&#xAC1C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC5C5;-&#xB808; &#xADE4; &#xB808;&#xC774; &#xC158; Abelson &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C;, LAR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB2E4;&#xB978; tyrosine kinases &#xC911; putative &#xC2E0;&#xD638; &#xD30C;&#xD2B8;&#xB108;&#xC758; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; homologue &#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC9C0; P &#xC2E0;&#xACBD; &#xC138;&#xD3EC; (&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB610;&#xB294; &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864; Rnas&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBC29;&#xD574; Rnas&#xC758; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC140; &#xC8FC;&#xC785;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; P(D))&#xC758; &#xACC4;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC2E0;&#xACBD; &#xD638;&#xAC10;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC5D0; &#xBBF8;&#xCE58;&#xB294; &#xC601;&#xD5A5; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; RNAi &#xC0BD;&#xC785; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; HmLAR1 &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4;&#xD558; &#xACE0;, &#xCEE8;&#xD2B8;&#xB864;&#xC744; &#xAE30;&#xC900;&#xC73C;&#xB85C; &#xD638;&#xAC10; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB3CB; &#xC544;&#xC640; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xC131;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD070; &#xAC10;&#xC18C; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; &#xC2E0;&#xACBD; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC131;&#xC778; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC740; Hmlars&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC5F0;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC2E0;&#xACBD; &#xC7AC;&#xC0DD; &#xBC0F; &#xB2E8;&#xC77C; &#xC138;&#xD3EC; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xADDC;&#xCE59;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC778;&#xC0B0; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xB294; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD6A8;&#xC18C; Hmlar1&#xC758; &#xBD80;&#xC0C1;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xC131;&#xC778; &#xC57D;&#xC6A9; &#xAC70;&#xBA38;&#xB9AC; CNS&#xC5D0; &#xC5C5; &#xADDC;&#xC81C; &#xC774;&#xBA70; &#xC2E0;&#xACBD; &#xB3CB; &#xC544; &#xBC0F; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; &#xD544;&#xC694;&#xD55C;.

LAR-como receptores de prote&#xED;na tirosina fosfatasas (RPTPs), que se expresa abundantemente en el sistema nervioso de la mayor&#xED;a si no todos los animales bilaterales examinado hasta ahora, han sido implicados en la regulaci&#xF3;n de una variedad de importantes procesos neuronales. Estos incluyen pathfinding neuronal, adhesi&#xF3;n y sinaptog&#xE9;nesis durante el desarrollo y, en mam&#xED;feros adultos, la regeneraci&#xF3;n neuronal. Aqu&#xED; hemos explorado el posible papel de un RPTP LAR-como (HmLAR1) en respuesta a un trauma mec&#xE1;nico en el sistema nervioso del adulto de la sanguijuela medicinal. La hibridaci&#xF3;n in situ y los an&#xE1;lisis de QPCR HmLAR1 expresi&#xF3;n en los ganglios de segmentos individuales revel&#xF3; una significativa regulaci&#xF3;n en la expresi&#xF3;n del receptor despu&#xE9;s de una lesi&#xF3;n del SNC, tanto in situ como despu&#xE9;s de un per&#xED;odo in vitro. Asimismo, se observ&#xF3; sobre regulaci&#xF3;n en la expresi&#xF3;n del hom&#xF3;logo de la sanguijuela de la tirosina quinasa Abelson, socio putativo de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de los receptores de LAR, pero no entre otras tirosina quinasas. Los efectos sobre la regeneraci&#xF3;n neuronal se ensayaron mediante la comparaci&#xF3;n de crecimiento a trav&#xE9;s de un aplastamiento del nervio por las proyecciones de las neuronas individuales dorsales P (P (D)) despu&#xE9;s de una sola c&#xE9;lula de inyecci&#xF3;n de interferir ARN contra los ARN del receptor o de control. Receptor de ARNi condujo a una reducci&#xF3;n significativa en HmLAR1 expresi&#xF3;n por las c&#xE9;lulas inyectadas y result&#xF3; en una disminuci&#xF3;n significativa en la germinaci&#xF3;n y el crecimiento regenerativo en el sitio de aplastamiento relaci&#xF3;n con los controles. Estos estudios se extienden el papel de los HmLARs del desarrollo neuronal sanguijuela a la regeneraci&#xF3;n neuronal adulta y proporcionar una plataforma para investigar la regeneraci&#xF3;n neuronal y la regulaci&#xF3;n de genes en el nivel de c&#xE9;lulas individuales.

El receptor de la prote&#xED;na tirosina fosfatasa HmLAR1 est&#xE1; regulado en el SNC de la lesi&#xF3;n de Adultos sanguijuela medicinal continuaci&#xF3;n y se le exige a la germinaci&#xF3;n y regeneraci&#xF3;n neuronal

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Eduardo R Macagno

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