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Articles by Maria L. Lombardi in JoVE
JoVE General
계면 세포 핵의 기계적 성질을 알아내기 위해 Biophysical Assays : 기판 스트레인 신청 및 Microneedle 조작
1Brigham and Women's Hospital / Harvard Medical School, Department of Medicine, Cardiovascular Division, 2Weill Institute for Cell and Molecular Biology & Department of Biomedical Engineering, Cornell University
우리는 글로벌 또는 지역화된 스트레인 응용 프로그램에 대한 응답으로 하나의 살아있는 자기편 세포에서 유도된 핵 및 cytoskeletal deformations을 측정하기 위해 두 개의 독립적인, 현미경 기반의 도구를 제시한다. 이러한 기술은 핵 강성 (즉, deformability)을 확인하고 핵과 cytoskeleton 세포 사이에 강제로 전송을 탐사하는 데 사용됩니다.
Other articles by Maria L. Lombardi on PubMed
인간의 흑색 종 전이 기능 CXCR4 익스프레스
Chemokine 수용 체 CXCR4 기본 흑색 종에 있는 빈약한 예 지의 독립적인 예측으로 확인 되었습니다. 연구의 목표는 인간의 흑색 종 전이 cxcr4의 역할을 조사 했다.
Dictyostelium에서 견인 힘 현미경 Myosin II 모터 및 편광된 셀 운동에 말라 가교 활동에 대 한 뚜렷한 역할을 보여준다
연속 셀 운동 셀의 뒤쪽에 수축 세력 앞 가장자리에서 밀어내 세력의 조정이 필요합니다. Myosin II는 철회;을 촉진 하기 위하여 필요한 수축 성 힘을 생성 하는 데 필요한 그러나, Dictyostelium 셀 myosin II (mhcA-)이 부족은 여전히 운동입니다. 직접 수축에 myosin II의 역할을 조사 진도 및 견인 스트레스 임의로 이동 하는 야생-타입, myosin II 필수 빛 체인 null (mlcE-) 및 mhcA 세포에 의해 생성 된 동적 재배포 젤라틴 견인 힘 분석 결과 사용 했습니다. 데이터 표시는 각 세포 유형에 기간의 급속 한, 감독 셀 운동 견인 스트레스의 비대칭 분포를 뒤쪽에는 견인 스트레스는 앞의 것 보다 훨씬 더 높은에 있는 경우에 발생. 우리는 셀 속도의 주요 결정 요인 속도 주파수는 견인에 스트레스 불균형 개발, 하지 견인 스트레스의 절대 규모는 발견. 우리 그 견인 스트레스 비대칭 이므로 중요 급속 한 편광된 셀 움직임을 위해 후면에 높은 견인 스트레스 추진 철회, 앞에 낮은 견인 있습니다 돌출 결론. 우리는 말라 가교 활동은 그것을 안정화에 대 한 중요 한 반면 myosin II 모터 활동 증가 속도 주파수는 견인에 스트레스 비대칭을 개발 하 고, 그 제안 합니다.
북부와 남부 이탈리아에서 Cw HLA 대립 유전자 주파수
골 수 이식, NK alloreactivity 민감성 및 다른 질병에 대 한 후속 면역 응답의 변조에 Cw HLA 항 원 참여에 대 한 증거가 최근 몇 년 동안에서 성장을 해 왔다 하지만 건강 한 이탈리아 과목에서 HLA Cw 분포에 거의 데이터 날짜를 사용할 수 있습니다. 이 보고서 북부 (롬바르디아) 나라의 남부 (캄파니아와 Puglia) 부분에서 데이터를 비교의 이탈리아, HLA Cw 주파수 업데이트 설명을 선물 한다. 이탈리아 출신의 1101 건강 한 과목의 총 genotyped, 그리고 결과 HLA Cw * 04, Cw * 07 Cw * 12, 그리고 특히, Cw * 0401, Cw * 0701, Cw * 1203, 모든 세 가지 영역 분석에 가장 자주 대립 했다. Cw에서 통계적으로 유의 한 차이가 관찰 되지 않았다 그럼에도 불구 하 고, * 이탈리아 북부에서 보다 남부에서 자주는 07 분포 (28.8% 대 22.4%; p = 0.001; OR: 1.4; 95 %Ci: 1.14-1.73), Cw에서 *는 남쪽 보다 북쪽에 더 자주 12 유통 (17.0% vs 12.4%; p = 0.007, 또는: 1.4; 95 %ci: 1.10-1.91). 이탈리아 인구에서 HLA Cw 대립 배포의 향상 된 패턴을 주고, 이러한 결과 골 수 이식 및 인류학 연구에 유용할 것 이다. 또한, Cw HLA 항 원 면역 반응 및 NK alloreactivity의 변조에 중요 한 역할 때문에 이러한 데이터 민감성, 후속 조치 및 다른 질병에 대 한 보호에 대 한 연구에 관심이 될 것 이다.
핵 봉투에서 Nesprins 및 Sun 단백질 사이의 상호 작용은 핵 Cytoskeleton 사이 강제 전송에 대 한 중요 합니다
핵과는 cytoskeleton 간의 물리적 연결을 유지 하는 조율 된 움직임을 필요로 하는 많은 세포 프로세스에 대 한 중요 하 고 핵의 위치. Nucleo cytoskeletal 커플링은 또한 핵, 하 cytoskeleton에 걸쳐 세포 외 기계적 자극을 전송 하는 데 필요한 그들은 mechanotransduction 이벤트를 시작할 수 있습니다. 링컨 (Nucleoskeleton 링커 및 Cytoskeleton) 복잡 한, 핵 및 cytoskeletal 요소; 바인딩할 수 nesprins와 핵 봉투에 태양 단백질의 상호 작용에 의해 형성 된 그러나 세포내 세력 전송의 기능적인 중요성은 결코 직접 테스트 되었습니다. 이 질문은 최근 연구 결과 nesprin 돌연변이 근 위축 증에 연결 하 고 심장 근육 병 증을 넓힐 때문에 특히 적합. 생물 리 분석 실험을 사용 하 여 세포내 강제로 전송과 관련 된 세포 기능을 평가 하기 위해, 우리 nucleo cytoskeletal 강제 전송에 대 한 중요 한 구성 요소로 복잡 한 링컨 식별 됩니다. 중단 인 한 복잡 한 링컨의 세포내 세력의 전파 장애 및 perinuclear 말라와 중간 필 라 멘 트 네트워크의 조직 방해. Mechanosensitive 유전자의 기계적으로 유도 된 활성화는 정상 (제안 핵 변형 mechanotransduction 신호 필요 하지 않습니다) 셀 링컨 복잡 한 혼란; 후 다른 심각한 기능적 결함을 전시 핵 위치 및 셀 양극 화에 장애가 있던 마이그레이션 셀 및 셀에 micropatterned 기판에 도금 및 셀 마이그레이션 속도 지 속성 시간 크게 감소 했다. 함께 찍은 우리의 발견 건의 복잡 한 링컨 nucleo cytoskeletal 강제 전송에 대 한 중요 하 고 링컨 복잡 한 장애 세포 구조에 결함이 발생할 수 및 함수의 근 영양 및 cardiomyopathies의 개발에 기여할 수 있습니다.
셀룰러 환경의 실시간 검색에 대 한 세포-표면 센서
셀 및 셀 신호 통신을 탐험 하기 위한 능력 세포 생물학을 이해 하 고 효과적인 치료제 개발을 위해 필수적 이다. 그러나, 그것은 불가능 아직 셀 실시간으로 그들의 환경과 상호 작용을 모니터링. 여기, 우리는 세포 막에 부착 된 형광 센서 셀룰러 환경에서 신호 분자를 감지할 수 있습니다 보여줍니다. 센서는 aptamer (짧은 길이의 단일 가닥 DNA) 혈소판 유래 성장 인자 (PDGF)에 바인딩하고 형광 염료의 쌍을 포함 하는. PDGF에 바인딩된 경우는 aptamer 변경 나 란 하 고 염료 생산 하는 신호를 서로 게 가까이 올. 炭 중간 엽 줄기 세포의 세포 막에 부착 된 센서는 높은 공간 및 시간적 해상도 세포 배양에 추가 되거나 이웃 세포에 의해 분 비 된 PDGF 양적 감지할 수 있습니다. 설계 된 줄기 세포는 골 수에 그들의 방법을 찾아 자신의 능력을 유지 그리고 모니터링할 수 있습니다 vivo에서 intravital 현미경 검사 법을 사용 하 여 단일 세포 수준에서.
유지는 링컨: 세포내 강제 전송 및 세포 기능에 커플링 하는 Nucleocytoskeletal의 중요성
핵 사이 cytoskeleton 안정적인 물리적 연결을 제공 하 고 광범위 한 세포 기능에 대 한 필수적 이며 그것은 또한 내부 및 추가 cellular 기계적 자극 cytoskeleton 핵을 통해 전송 하 여 mechanosensing를 참여할 수 있습니다. Nesprins 및 SUN 단백질 핵 봉투 양식 링컨 (nucleoskeleton 및 cytoskeleton의 링커) 핵 cytoskeleton;에 연결 하는 복잡 한에 있습니다 기본 핵 lamins 정박 링컨 핵 봉투의 복잡 한 구성 요소에 기여. 복잡 한 링컨의 중단 또는 lamins의 손실 방해 perinuclear 말라 귀 착될 수 있다 및 중간 필 라 멘 트 네트워크와 장애 핵 위치, 셀 양극 화 세포의 운동 성 등 심각한 기능 오류 발생. 최근 연구 핵 봉투에 주요 강제 전송 요소와 복잡 한 링컨 확인 및 제안 하는 많은 위에서 언급 한 결함에 기인 수 교란 핵은 cytoskeleton 사이 전송 강제로. 따라서 변이 nesprins, 태양 단백질 또는 lamins는 근 영양 및 cardiomyopathies에 연결 된, 약화 수 있습니다 또는 완전히 핵 봉투에 결과에서 링컨 복잡 한 기능을 제거 함으로써 세포의 중요 한 기능을 방해 하는 세포내 포스 전송 장애인.
