JoVE General
Niva Russek-Blum*, Helit Nabel-Rosen*, Gil Levkowitz
Molecular Cell Biology, Weizmann Institute of Science
多光子显微镜允许控制与深厚的光学渗透和减少光毒性低能量的光子。我们描述了使用这项技术在斑马鱼胚胎活细胞标记。该协议可以很容易地适应各种光反应的分子的光感应。
Development (Cambridge, England). Oct, 2008 | Pubmed ID: 18799544
我们探讨了鲁棒神经板阵列信号,如 Wnt,分化和配置在单个单元格的分辨率的斑马鱼间脑中的神经元亚型的影响。奇怪的是,摄动的 Wnt 信号没有整体效果上的 diencephalic 的命运,规范,但有选择性地受影响的多巴胺 (DA) 能神经元数目。我们发现在使用一个基于两个光子的 uncaging 方法在神经板 diencephalic 素质 DA 祖区并显示来自此祖区非 DA 神经元数目并不改变由 Wnt 衰减。我们使用 birthdating 分析,确定最后一个 DA 祖细胞的细胞分裂的时间安排和发现 DA 细胞数以下 Wnt 抑制的变化并不是退出细胞周期动力学的变化。条件抑制 Wnt 和细胞增殖证明 Wnt 期间发生在主神经的可塑性的窗口限制了 DA 祖细胞的数量。最后,我们证明 Wnt8b 是调制器的行为通过 Fz8a 的 DA 的细胞数 (Fzd8a) 受体和其下游效应 Lef1,并要求活动的 Fezl (Fezf2) 转录因子为这一进程。我们的数据显示不同神经元人口对 Wnt 信号的微分反应不是简单的解释,其相对的体位。该研究还表明,对于第一次,比预期的要早得多,diencephalic DA 人口规模调制内神经板伴介导 Wnt 区域阵列操作事件。
Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. Jul, 2009 | Pubmed ID: 19504459
间脑充当感官、 中部,和内分泌系统之间的互动网站,是脊椎动物大脑中最精致的建筑之一。为了更好地了解胚胎发育及形态发生的间脑,我们制订改进的调亡的 (uncaging)-基于沿袭跟踪策略。若要确定某个给定的 diencephalic 祖域的确切位置,我们使用转基因行驾驶绿色荧光蛋白 (GFP) 在细胞表达 proneural 蛋白,Neurogenin1 (Neurog1),它被用作可见神经板的一个里程碑。这种方法有助于精确贴标的斑马鱼神经板准间脑中的单元格定义的组。以这种方式,我们标有多个重叠区域的间脑,从而确保准确性和可重复性的我们沿袭跟踪,而不考虑发展中国家的神经板的动态变化。我们目前较高的空间分辨率,比先前所述的斑马鱼间脑命运地图。