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Articles by Yana Izenshtein in JoVE
JoVE General
포유 동물 세포에 Glycoproteins의 N - 연결 설탕 체인 펄스 체이스 분석
우리는 포유 동물 세포에서 생합성 후 glycoproteins의 초기 생활을 통해 N - 연결 glycans의 변조 분석을위한 방법을 설명합니다. 이것은 metabolically 표시 glycans, glycoproteins와 HPLC에 의해 시험에서 효소 릴리스의 펄스 체이스 분석에 의해 이루어진다.
Other articles by Yana Izenshtein on PubMed
Glycan 종속 당단백질 배달 위로 Edem1에 의해 ERAD 우회
N 연결 된 올리고 당 전조에서 스 잔류물의 트리밍은 당단백질 endoplasmic 그물 (ER)에 대 한 엄격한 요구 사항-저하 (ERAD)에 연결 합니다. 이 논문에서 우리는 표시, 놀랍게도, 응급실 저하 강화 α mannosidase 같은 단백질 1의 overexpression (EDEM1) 또는 IRE1에 의해 업 규제의 펼친된 단백질 반응에서 발생이 요구 사항을 무시 불필요 한 렌더링 될 때까지 응급실 mannosidase 식 나. 부족 한 대부분의 탄수화물 인식 도메인도 EDEM1 삭제 돌연변이 가속 ERAD, XTP3-B와 OS9 기판 제공. EDEM1 overexpression는 또한 돌연변이 nonglycosylated 기판의 저하를 가속. 어디 어 proteasomal 저해 시 EDEM1 pericentriolar ER 파생 된 품질 관리 실 (ERQC)에서 ERAD 기판 함께 집중 mannosidase 나와 ERAD 기계 구성 요소는 지역화, 등 우리가 여기, 보여 OS9. 초기 당단백질 edem1에서 일반적으로 분리할 수 고 calnexin refolding 사이클 스 트리밍에 의해 종료 하는 조건을 다시 입력 하 여 ERAD에서 구출 하는 것이 좋습니다. EDEM1 상부에 당단백질 릴리스 수 없습니다 및 glycan 상호 작용은 더 이상 필요, 그렇지 않으면 필수 ERAD 타이밍 스 트리밍 및 가속 저하를 대상으로 하 여 취소.
