Overview
סרטון זה מציג את מבחני הרגל המגע, שיטה התנהגותית C. elegans להערכת mechanosensation וכימות זמן למגורים.
Protocol
הפרוטוקול הבא הוא קטע מתוך מרשה ואח '. השלכות התנהגותיות ורבייה ארוכות טווח של חשיפה עוברית לחומרים רעילים במינון נמוך, J. Vis. Exp. (2018)
-
מבחני הרגלה למגע אטריור
- העבר כ-10 תולעים צעירות מסונכרנות ללוחות NGM חדשים שלא הושלכו באמצעות בורר חוטי פלטינה 30 G מעוקר באש. השאירו תולעים ללא הפרעה במשך 5 דקות כדי לאפשר להם זמן להתאקלם לצלחת החדשה.
- לתגובת ההרגלה, השתמשו בשיער גבות המחובר לקצה שיפוד עץ או קיסם, ועקרו על ידי טבילה באתנול 70%. לנגב עם רקמה נקייה ללא מוך ולחכות 1 דקות עבור אתנול להתאדות. בעדינות לגעת בתולעת על הראש (50 של הנורה הלוע) באמצעות שיער הגבה. חזור על הנגיעות, ומאפשר 10 s בין נגיעות על מנת לאפשר לתולעת להתאושש.
- המשך לגעת (המאפשר מרווחי ביניים של 10) עד שהתולעת לא תזוז עוד לאחור. בשלב זה, התולעת התרגלה לגירוי. רשום את num+ber של הנגיעות הנדרשות כדי שהתולעת תתרגל.
- נתח את ההבדל בין שיעורי המגורים הממוצעים של הפקדים המטופלים והלא מטופלים באמצעות ANOVA חד-כיווני ואחריו הבדיקה שלאחר הוק של Tukey.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
EtOH | Sigma-Aldrich | 64-17-5 | |
N2 (Wild-type C. elegans) worms | CGC | Repository at U of Minnesota | |
Platinum wire pick | Genesee Scientific | 59-AWP | |
Petri plates | Fisher | 07-202-011 | |
Dissection Microscope | AmScope | SM-2TYY |