УФ-облучение: метод интеграции внехромосомных решеток

Abstract

Источник: Mariol, M. C et al. A Rapid Protocol for Integration Extrachromosomal Array with High Transmission in the C. elegans.J. Vis. Exp.(2013).

Микроинъекция трансгенов обычно приводит к получению штаммов C. elegans с большими внехромосомными массивами, что приводит к переменной экспрессии и передаче трансгена. УФ-излучение может индуцировать хромосомную интеграцию массива и более стабильную трансгенную передачу.

Protocol

Этот протокол является выдержкой из Mariol et al, A Rapid Protocol for Integration Extrachromosomal Arrays with High Transmission Rate into the C. elegans Genomes, J. Vis. Exp.(2013).

1. УФ-облучение и восстановление трансгенных червей

1. Облучение червями:
   1. Соберите 30-100 флуоресцентных трансгенных животных L4 на отдельные культуральные планшеты (по 15-20 животных на планшет).
   2. Поместите пластины со снятыми крышками в УФ-сшиватель. Обл....

Results

Таблица 1. Сравнение стандартного и улучшенного протоколов интеграции внехромосомных матриц в геном C. elegans.Два неинтегрированных трансгена, передающих примерно с одинаковой частотой, были интегрированы с использованием стандартного или усовершенствованного протокола. Основное отличие заключается в том, что в стандартном протоколе проводится скрининг потомства.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
U.V. cross-linker	Fischer Scientific		Длина волны 254 nm
Микроскоп SteREO Discovery V8	Карл Цейсс, Инк.
чашки Петри, 60 мм	ХМЛ	BPS55E6
Платиниевый провод 0.25 мм	Альфа Аэсар	6/4/7440	Чтобы сделать кирку для червей