Summary
在精细动作协调的赤字可以平衡木测试与评估。在横梁上的表现是量化,由梁走过的速度和在横梁上滑动鼠标的次数。
Abstract
脑损伤,遗传操作和药物治疗,可以导致小鼠的运动技能的改动。精细动作的协调和平衡,可梁步行试验评估。此测试的目的是为鼠标停留直立步行到一个安全的平台和跨高架窄波束。这个测试需要连续超过3天:2天的培训和测试1天。在横梁上的表现是量化测量的时间,它需要鼠标遍历梁和爪子单的过程中发生的数量。在这里,我们的报告在我们的实验室中使用的协议,并代表从C57BL / 6小鼠的队列结果。这个任务是特别有用的检测,可能不会被其他电机测试,如Rotarod检测到的运动技能和平衡的微妙的赤字。
Protocol
1。这个协议是基于萨斯维尔等。人 (2009年)和卡特等。人 (2001年)。
- 1米束束装置由一个12毫米的平面或6毫米宽)休息50厘米以上的两极表的顶端。一个黑盒子被放置在梁端的终点。 (胶合板和其他类型的木材为梁,波兰人,和箱可发现在大多数五金商店)。排料从家里笼放置在黑盒子,吸引了鼠标到终点。一个灯(60瓦灯泡)是用来照耀起点以上的光,和作为一个厌恶刺激。跨中心80厘米的时间是衡量两项议案探测器(Visopia编造):0厘米,启动一个计时器,并在80厘米,停止计时器之一。尼龙吊床(可从当地的面料商店获得)是捉襟见肘,下面的梁〜7.5厘米以上表的顶部,以减轻任何下降。在三角架上设置一个视频摄像机记录性能。在此演示中使用的仪器是建立在现场。
- 一个小鼠的每个条件至少有10队列,建议本次测试。老鼠被安置组,在可能的时候,在12个小时的灯(上午7时至下午7时)/暗周期和驯化他们的笼子在测试开始前至少2周的行为设施。培训/测试前约10分钟后,小鼠可运束装置的房间内。
- 在天的培训中,每个鼠标超过12毫米光束的3倍和6毫米的光束的3倍。梁更宽的宽度(即28毫米),可用于小鼠无法越过窄的或较大的小鼠。小鼠被放置在梁的一端跨在另一端的逃生框(80厘米的距离)是由运动探测器测量所需的时间。启动计时器鼠标进入中心80厘米的鼻子,停了下来,当动物达到80厘米年底。小鼠休息10分钟之间的培训班他们的家庭笼上的两束。在此intertrial期间,另一3-4小鼠可以训练,有效利用时间。 C57BL / 6小鼠通常跨梁,用少量的停止或拖延。然而,当他们做摊位,嗅或看不继续向前,研究者应鼓励鼠标继续打回原形,戳,或带着手套的手指从背后推向前迈进。一旦小鼠保险箱,允许他们有未来的审判之前休息一段时间(〜15秒)。每次训练后,老鼠直接返回他们家的鸡笼,并考虑他们的居住房间。值得注意的是,老鼠可能会停止,如果他们过度训练,并成为太熟悉任务和仪器。另一方面,培训可以继续额外的天,如果老鼠不经过2天的培训遍历整个梁成功。如果应用到小鼠的治疗,基线测量的性能,应事先获得治疗。
- 在考试当天,有时相互交叉梁被记录下来。两个试验取得成功,在该鼠标没有摊位在横梁上的平均值。可用于更精细的分析,滑倒和其他观察到的电机赤字的这些录像。评估束走的另一种方法是由神经的计分制 1,2,其中利率无法跨梁作为一个“1”的得分能力遍历束束表面上的两个爪子通常少于两个一脚震为“7”。被定义为未来梁上方的脚一滑。在这个索引系统,一个“3”的得分将对应跨越梁拖拽四肢。分数1两项试验是不复检的动物。菲尼等人 (1982年)和卡特等人,(2001)等几十束性能的描述中可以找到。
- 梁和箱清洗老鼠屎,并与前束放在仪器上,用70%的乙醇,然后用水浸泡毛巾擦干。
2。代表性的成果:
图1典型的跨时代的男性和女性C57BL66毫米和12mm光束。 9日至11周龄C57BL/6-NCRL WT小鼠的队列进行了测试两束,经过2天的培训。过12毫米光束的平均次数分别为4.6 ±男性为0.4秒(N = 14)和3.3 ± 0.3秒(N = 11)为女性。 6毫米束时间分别为6.8 ±男性为0.7秒(N = 13)和5.9 ± 0.5秒为女性(N = 10)(错误报告为教育统筹局局长)。
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Discussion
在平衡木上的表现是良好的协调和平衡的一个有益的措施,已经由以前的工作验证。束测试可以检测到在年轻人和老年人的啮齿类动物 2,3,4的电机由于年龄的赤字,中枢神经SYST`病变,遗传和药理操作。小鼠皮层的影响病变往往表现出对侧束5,6滑倒。束测试也被用来区分野生型(WT)和亨廷顿病(HD)的小鼠模型的运动技能,随着时间的推移,并评估治疗 7,8 HD小鼠的改善。电机赤字一直在平衡木上发现另一种基因小鼠模型,溶酶体贮积症 9 Sandhoff疾病的小鼠模型。在检测苯二氮卓类药物诱导的运动协调性的赤字,梁测试超过Rotarod敏感。斯坦利(2005年)显示,只有30%γ-氨基丁酸(一),地西泮或劳拉西泮受体占用需要,以观察受体超过70%的入住率相比,赤字Rotarod 10梁运动障碍。宽度窄的光束可以用来检测更细微的差别。
在这项研究中,我们测试了9日至11周龄C57BL/6-NCRL上的12毫米和6毫米的光束WT小鼠队列。过12毫米光束的平均次数分别为4.6 ±男性为0.4秒(N = 14)和3.3 ± 0.3秒(N = 11)为女性。 6毫米束时间分别为6.8 ± 0.7秒,男性(N = 13)和5.9 ± 0.5秒为女性(N = 10)(errorsare报道教统局局长)。有几单,并没有通过这些小鼠对这些光束落在。滑倒在操纵基因或药物的动物,可能会变得更加频繁和可量化的。受损的老鼠可能会吸附到梁侧面,从而提高自己的时间跨越。小鼠的年龄和应变的活跃程度可能有所不同。 C57BL / 6小鼠通常是活跃的动物6 。
本次测试的修改,可能会鼓励小鼠向前包括使用,而非横向 2,4的 倾斜光束。这些老鼠还可以被放置了几秒钟,增加愿意达到的目标2,在安全平台。使用的平衡木动作协调评估的干扰因素包括动机,overtrained小鼠可能会变得无聊和不合作。如果发现运动障碍,包括足迹分析的运动步态,网状登山,游泳,爬杆,楼梯测试的其他测试,可用于进一步评估赤字2,4。
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Disclosures
动物实验是由加州理工学院的机构动物护理和使用委员会(IACUC)规定的准则和法规的规定执行。
Acknowledgments
琥珀萨斯维尔成立的设备和训练有素的作者在其使用。经费是由一个从NINDS保罗帕特森的资助。
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Beams: 1-m strips of smooth wood with small, medium, and large square (i.e., 6, 12, and 28 mm wide) cross-sections | |||
Support stand to hold up the start section of the raised beam (∼1.5-cm cross-section, 50 cm high) | |||
Goal box (20 cm on each side) mounted on a support stand (3 cm cross-section, 50 cm high) | |||
Hammock-∼7.5 cm above tabletop | |||
60-watt (W) desk lamp | |||
Video camera, tripod, and blank video tapes | |||
Ethanol, paper towels, cleaning materials |
References
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