Inductie van allogeen-specifieke anergie in humane perifere bloed mononucleaire cellen door allogeen stimulatie met Co-stimulerende signaal blokkade

Summary

Dit artikel beschrijft een eenvoudige techniek om allogeen-specifieke anergie induceren in humane perifere bloed mononucleaire cellen. De techniek kan klinisch worden toegepast op niet-alloreactieve donorcellen te genereren. Infusie van deze cellen zou kunnen verbeteren immuun reconstitutie en vermindering van toxiciteit na allogene hematopoietische stamceltransplantatie.

Abstract

Allogene hematopoietische stamceltransplantatie (AHSCT) biedt de beste kans op genezing voor veel patiënten met aangeboren en verworven hematologische ziekten. Helaas kan transplantatie van alloreactieve donor T-cellen die een erkenning en schade gezonde patiënt weefsels resulteren in Graft-versus-Host Disease (GvHD) ^1. Een uitdaging om succesvol te AHSCT is het voorkomen van GvHD zonder bijbehorende aantasting van de gunstige effecten van donor T-cellen, in het bijzonder immuun reconstitutie en het voorkomen van terugval. GvHD kan voorkomen worden door niet-specifieke depletie van donor T-cellen van de stamcel transplantaten of door de toediening van farmacologische immunosuppressie. Helaas zijn deze benaderingen te verhogen besmetting en ziekte terugval ^2-4. Een alternatieve strategie is om selectief afbrekende alloreactieve donor T-cellen na allostimulation door de ontvanger antigeen presenterende cellen (APC) voor transplantatie. Vroege klinische trials van deze allodepletion strategieën verbeterde immuun herstel na HLA-mismatch HSCT zonder overdrijving GvHD ^{5, 6.} Echter, sommige allodepletion technieken vereisen speciale ontvanger APC productie ^{6, 7} en sommige benaderingen kunnen off-target effecten waaronder uitputting van de donor pathogeen-specifieke T-cellen ⁸ en CD4 T-cellen regelgeving ^9. Een alternatieve benadering is de inactivatie van alloreactieve donor T-cellen via inductie van allogeen-specifieke hyporesponsieve. Dit wordt bereikt door het stimuleren van donor cellen met de ontvanger APC terwijl blokkade van CD28-gemedieerde co-stimulatie signalen ^10. Deze "alloanergization" aanpak vermindert alloreactiviteit met 1-2 logs met behoud van pathogeen-en tumor-geassocieerde antigen T-cel responsen in vitro ¹¹ . De strategie is met succes toegepast in 2 afgerond en een lopende klinische pilot-studies waarin alloanergized donor T-cellen werden toegediend tijdens of na het HLA-mismatch HSCT resulteert in snelle immuun reconstitutie weinig infecties en minder ernstige acute en chronische GvHD dan historische controlegroep ontvangers van ongemanipuleerde HLA-mismatch transplantatie ^12. Hier beschrijven we onze huidige protocol voor het genereren van perifere bloed mononucleaire cellen (PBMC) die zijn alloanergized aan HLA-mismatch niets stimulator PBMC. Alloanergization wordt bereikt door allostimulation in de aanwezigheid van monoklonale antilichamen tegen de liganden B7.1 en B7.1 tot CD28-gemedieerde costimulatie blokkeren. Deze techniek is niet vereist dat de productie van gespecialiseerde stimulator APC en is eenvoudig uit te voeren, waarvoor slechts een enkele en relatief korte ex vivo incubatie stap. Als zodanig kan de aanpak gemakkelijk gestandaardiseerd voor klinisch gebruik om donor T-cellen met een verminderde alloreactiviteit maar met behoud van pathogeen-specifieke immuniteit voor adoptieve overdracht in de setting van AHSCT om immuun reconstitutie te verbeteren zonder al te veel GvHD te genereren.

Protocol

Discussion