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Medicine

가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성

Published: May 21, 2011 doi: 10.3791/2692
* These authors contributed equally

Summary

Cholestasis은 일반적으로 외과의와 소화기 전문 내과 모두에 의해 발생 임상 조건입니다. 가역 cholestatic 랫 모델의 생성 쥐의 작은 크기와 독특한 hepatopancreatobiliary 해부학보기에 도전하실 수 있습니다. 이 동영상이 문서는 가역 cholestatic 모델의 생성을 보여줍니다.

Abstract

Cholestasis은 일반적으로 외과의와 소화기 전문 내과 모두에 의해 발생 임상 조건입니다. Cholestasis 다양한 생리 변화를 원인과 영양 상태 및 수술 결과에 영향을 미칠 수 있습니다. 간 및 다른 장기에서 발생 pathophysiological 변화 연구 중요하다. 다양한 연구 cholestatic 쥐 모델에서 수행되었습니다.

우리는 국소 빈혈 reperfusion의 부상에 methylprednisolone의 역할을 보는 우리의 최근 연구에서 가역 cholestatic 랫 모델을 사용합니다. 가역 cholestatic 모델의 창출을위한 다양한 기법을 설명하고 있습니다. 가역 cholestatic 랫 모델의 생성 쥐의 작은 크기와 독특한 hepatopancreatobiliary 해부학보기에 도전하실 수 있습니다. 이 동영상이 문서는 가역 cholestatic 모델의 생성을 보여줍니다.

이 모델은 같은 위장관의 영양, 생리, 병리, histological 및 면역 변화의 변화를보고 등 다양한 연구에 사용할 수 있습니다. 이 모델은 또한 cholestasis 주요 간장 수술에 대한 다양한 치료 개입의 효과를 볼 수 있습니다.

Protocol

1. 쥐 담즙의 해부학

평균 담즙 덕트 직경 및 길이는 각각 1mm와 29mm였다. pylorus과 십이지장 유두 사이의 평균 거리는 28mm했습니다. 담즙 덕트에 열 두 가지 주요 췌장 덕트가있다 - 앞쪽에 덕트는 왼쪽에 열리고 후부 덕트의 오른쪽에 열립니다. 이러한 주요 덕트 이외에 췌장의 세 부분을 물기 사소한 관의 숫자가 담즙 덕트에 직접 열려 6.

2. 기술

모든 동물 실험 윤리 연구를위한 건강 지침의 국립 연구소와 계약에 수행되었으며 기관의 연구위원회 및 동물 관리위원회에 의해 승인되었습니다. 팔주 세 남자 스프 라그 - 돌리 쥐이 실험을 위해 사용되었습니다. 쥐 찰스 강 윌밍턴에 연구소, MA 및 모든 300g 이상했다 얻은했다. 쥐 표준 실험실 다이어트에 대한 액세스를했고 표준 실험실 조건에서 함께 보관되어 있었다.

쥐 처음 isofluorane와 anesthetized되었고 마스크를 통해 isofluorane와 수술 중 마취 유지. 2cm의 정중선 절개는 흉부의 검상 부부부터 만들어졌다. 일단 근막은 간 엽 (叶)가 센의 견인기와 cranially 철회했고 오픈, 그리고 십이지장은 caudally Q - 팁을 사용하여 철회했다. 담즙 덕트는 십이지장을 입력 관형 구조로 확인되었다. 담즙 관은 긴장에 따라 배치하고 부분적으로 오픈 컷했습니다. 0.6 mm와 0.9 mm의 외부 직경의 내경과 멸균 5cm 길이 폴리에틸렌 관을 사용했습니다. 이 튜브의 한쪽 끝을 열이 봉인되었고 다른 끝을 부드럽게 beveled되었습니다. beveled 끝을 다음 담즙 덕트에 통과되었다. 이것은 근위 및 담즙 덕트의 개방에 말초 모두 8-0 나일론 봉합을 사용하여 장소에 확보했다. 밀봉된 엔드와 함께 남아있는 튜브는 복막 캐비티에 배치되었다. 효과적인 사이트는 정상적인 생리와 irrigated했다. 복부는 다음 4-0 Polyglactin의 봉합과 함께 2 레이어에 폐쇄되었습니다. linea 알바는 연속 봉합과 함께 폐쇄되었으며 중단 피부 봉합이 배치되었습니다. 피부 접착제 그런 다음 피부에 적용되었습니다. 쥐가은 적절한 보습을 위해 매일 체중 모니터링 표준 실험실 조건에서 복구할 수있었습니다.

cholestasis 반전 작업, 쥐들이 앞에서 설명한 것처럼 isofluorane를 사용 anaesthetized되었습니다. 복부는 이전 절개 사이트를 통해 오픈했습니다. 튜브는 식별 및 복막 캐비티에서 제거되었습니다. 튜브 주위 Omental adhesions는 무딘과 날카로운 해부를 사용하여 해제됩니다. 십이지장에있는 사이트는 다음 duodenostomy 튜브의 편안한 위치에 대한 확인되었다. 지갑 문자열 봉합, 직경 2~3mm은 다음 8-0 나일론을 사용하여 배치했다. 십이지장은 다음이 지갑 문자열 봉합 안에 문을 열었습니다. 튜브의 봉인 끝에 그런 다음 적절한 길이로 절단했다. 담즙의 흐름을 무료로 보장했다. 튜브의 끝이 다음 십이지장에 배치되었고 지갑 문자열 봉합이 강화되었습니다. 복부는 레이어에서 irrigated 및 폐쇄되었습니다.

이전 연구에서 궁극적 choledochoduodenostomy가 다른 기술을 사용하여 수행되었다, 쥐 12 주 동안 살아와 쥐 그 기간 동안 건강하게 하였다. 또한이 연구는 2 주 기간 동안의 담즙 덕트의 방해를 받게 쥐에 choledochoduodenostomy 이후 생화학 및 histological 변경 반전을 확인 7.

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Discussion

Cholestasis은 위장 시스템의 변화 수많은로 연결됩니다. 연구는 면역 시스템과 영양 상태의 변화를 찾고 완료되었습니다. 1-3 Cholestasis는 간장 수술 결과에 영향을 줄 수 있습니다. 연구가 cholestasis의 존재에 간장 수술의 결과를 개선하기 위해 수행되었습니다. 의학 및 연구 개선으로 4-5, 추가 연구 cholestasis에서 수행됩니다. 따라서 그것은 좋은 cholestatic 모델을 가지고 필요합니다. 쥐가 그것은 쉽게 사용할 수 있기 때문에 실험 동물로 선호하는, 쉽게 처리, 저렴한과 hepatopancreatobiliary 시스템 연구를위한 튼튼한 모델 6.이 동영상이 문서를 통해 우리는 미래의 연구에 사용할 수있는 가역 cholestatic 모델의 생성을 설명합니다.

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Disclosures

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

References

  1. Gouma, D. J., Roughneen, P. T., Kumar, S., Moody, F. G., Rowlands, B. J. Changes in nutritional status associated with obstructive jaundice and biliary drainage in rats. Am J Clin Nutr. 44, 362-369 (1986).
  2. Ohtsuka, M., Miyazaki, M., Kondo, Y., Nakajima, N. Neutrophil-mediated sinusoidal endothelial cell injury after extensive hepatectomy in cholestatic rats. Hepatology. 25, 636-641 (1997).
  3. Abe, T. Kupffer cell-derived interleukin 10 is responsible for impaired bacterial clearance in bile duct-ligated mice. Hepatology. 40, 414-423 (2004).
  4. Saiki, S. Preoperative internal biliary drainage is superior to external biliary drainage in liver regeneration and function after hepatectomy in obstructive jaundiced rats. Ann Surg. 230, 655-662 (1999).
  5. Subhas, G. Protective effect of methylprednisolone on warm ischemia-reperfusion injury in a cholestatic rat liver. Am J Surg. 199, 377-380 (2010).
  6. Kara, M. E. The anatomical study on the rat pancreas and its ducts with emphasis on the surgical approach. Ann Anat. 187, 105-112 (2005).
  7. Ryan, C. J., Than, T., Blumgart, L. H. Choledochoduodenostomy in the rat with obstructive jaundice. J Surg Res. 23, 321-331 (1977).

Tags

의학 제 51 Cholestasis 쥐 모델 가역 cholestasis Choledochoduodenostomy 담즙 덕트 방해 Cholestasis
가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성
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Cite this Article

Subhas, G., Bhullar, J., Mittal, V.More

Subhas, G., Bhullar, J., Mittal, V. K., Jacobs, M. J. Creation of Reversible Cholestatic Rat Model. J. Vis. Exp. (51), e2692, doi:10.3791/2692 (2011).

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