Summary
Intranasally जाग मस्तिष्क को निशाना बनाने का उद्देश्य के लिए चूहों को दवा प्रशासन के लिए एक विधि का वर्णन है. इस विधि संज्ञाहरण के बिना दवा के intranasal प्रशासन का उपयोग करने से अधिक लंबी अवधि, वितरण और न्यूनतम प्रणालीगत जोखिम के साथ नाक मस्तिष्क dosing दोहराने के लिए अनुमति देता है.
Protocol
1. Intranasal Dosing के लिए जाग चूहे के लिए हैंडलिंग acclimation
परिचय
चूहे intranasal dosing के शुरू होने से पहले दो - चार सप्ताह की अवधि के लिए से निपटने के लिए इस्तेमाल किया जाना चाहिए. से निपटने के लिए acclimation महत्वपूर्ण है, के रूप में यह जाग intranasal दवा वितरण का अधिकतम प्रभाव के लिए एक सही शरीर की स्थिति सुनिश्चित करने में मदद करता है. इसके अलावा, चूहों कि ठीक से नहीं किया गया है इस प्रक्रिया के लिए आदी dosing के बाद एक गंभीर चिंता की प्रतिक्रिया हो सकती है. चूहे नौ कदम के प्रत्येक पर 2-3 दिनों के बारे में अगले कदम के लिए प्रगति से पहले खर्च करने, पशु से निपटने के लिए आराम के आधार पर करना चाहिए. माउस के तनाव के स्तर प्रगति का एक उपाय के रूप में किया जाना चाहिए. यह माउस आंदोलनों की निगरानी, / पेशाब, शौच, की राशि आवृत्ति, कांप, और काटने का मतलब है. अगर एक माउस के एक उच्च तनाव की प्रतिक्रिया है, जब तक प्रतिक्रिया कम है अगले करने के लिए प्रगति से पहले उस कदम पर रहते हैं. एक नमूना दशानुकूलन schedule तालिका 1 में देखा जा सकता है. चूहों के acclimation निम्नलिखित कदम एक बार एक दिन के माध्यम से प्रगति चाहिए. इन चरणों का एक बार से अधिक प्रति दिन, एक दशानुकूलन में तेजी लाने के प्रयास में प्रदर्शन की सिफारिश नहीं है.
- हाथ की हथेली में दो से तीन मिनट की अवधि के लिए माउस, पिंजरे के ऊपर से ऊपर कोई एक से अधिक पैर, जगह के रूप में पशुओं को अक्सर इस प्रारंभिक चरण के दौरान कूद. अगर माउस के लिए हाथ से बाहर क्रॉल और एक हाथ ऊपर, बस पूंछ के आधार से माउस उठा और यह एक हाथ में वापस जगह करने का प्रयास करता है.
- तीन मिनट के लिए हाथ की हथेली में माउस प्लेस और धीरे पालतू जानवर. माउस directionally सिर से पूंछ को पालतू जबकि जानवर के बारे में स्थानांतरित करने के लिए स्वतंत्र रूप से करने की अनुमति है.
- हाथ की हथेली में तीन मिनट के लिए माउस जबकि कान (हल्के से एक साथ गर्दन की पीठ पर त्वचा pinching अंगूठे और सूचक उंगली का उपयोग) के पीछे मालिश रखें.
- / पकड़ ली30 सेकंड के लिए अपनी गर्दन के कूड़ा द्वारा माउस, फुट पकड़ फिर से दोहरा से पहले 30 सेकंड के लिए पिंजरे के शीर्ष पर माउस बाकी दे.
- Intranasal पकड़ है, जो 2 खंड में वर्णित है का उपयोग माउस पकड़ो, लेकिन पलटना (ऊपर चरण पूरा करने के लिए 2.4) जानवर नहीं. 30 सेकंड की अवधि के लिए इस तरह पशु पकड़ो और पिंजरे शीर्ष पर वापस जारी. एक एक मिनट बाकी अवधि के बाद एक दूसरी बार दोहराएँ.
- Intranasal पकड़ के रूप में 2 खंड में वर्णित सहित inverting पशु तो इसकी उदर पक्ष छत की ओर का सामना करना पड़ रहा है, साथ माउस पकड़ो. सुनिश्चित करें कि जानवर की गर्दन मंजिल के समानांतर है. 30 सेकंड के लिए इस स्थिति को पकड़ो. यह एक एक मिनट बाकी अवधि के बाद एक दूसरी बार दोहराएँ. कुछ चूहों intranasal पकड़ दूसरों की तुलना में अधिक विरोध है, खासकर जब दशानुकूलन में इस कदम पर उलटा के साथ पहली बार के लिए इस्तेमाल किया जाएगा. यदि माउस ही पकड़ से मुक्त, माउस वापस पिंजरे ऊपर और फिर से पकड़ पर डाल दिया. फिर से पकड़ दोहराएँ अगर जरूरत, लेकिन माउस के तनाव के स्तर की निगरानी और यह यदि आवश्यक पिंजरे लौटने. एक और पहलू है कि दशानुकूलन प्रक्रिया में इस बिंदु पर पकड़ खो में एक भूमिका निभा सकते intranasal प्रसव तकनीक के साथ जानवर के संचालकों की अनुभवहीनता है.
- Intranasal पकड़ के साथ माउस पकड़ो पलटना, संक्षेप में प्रत्येक नथना पर एक खाली टिप के साथ एक pipettor जगह, और 30 सेकंड के लिए पशुओं की स्थिति पकड़. एक एक मिनट बाकी अवधि के बाद इस दोहराएँ.
- Intranasal पकड़ के साथ माउस पकड़ो, इसे पलटना, और intranasally बाएँ और दाएँ Nare में खारा की 6 μl प्रशासन धारा 3 (3.7 कदम के माध्यम से) के रूप में वर्णित है.
- Intranasal पकड़ के साथ माउस पकड़ो, यह पलटना, और intranasally दो बार छोड़ दिया और सही Nare जानवर पिंजरे शीर्ष पर वापस बीच में रखकर, धारा 3 में वर्णित के रूप में खारा की 6 μl प्रशासन.
2. Intranasal जाग चूहे स्थिर पकड़
- माउस ओ जगहn पिंजरे शीर्ष.
- अपने प्रमुख हाथ की तर्जनी और अंगूठे के साथ, पूंछ से माउस पकड़. आपके बीच, अंगूठी, और गुलाबी रंग उंगलियों का उपयोग, हल्के पिंजरे शीर्ष (चित्रा 1 ए) के शरीर के निचले हिस्से को पिन. चलो माउस सलाखों पर हड़पने के रूप में आप हल्के माउस बाहर खिंचाव और बेहतर कूड़ा हड़पने.
- अपने गैर प्रमुख हाथ पर अंगूठे और मध्यम उंगली का उपयोग करना, माउस मजबूती चुटकी गर्दन और कंधों के पीछे कूड़ा (अतिरिक्त त्वचा) में. ढीली त्वचा पर खींचो कंधे ब्लेड (चित्रा 1B) भर त्वचा की एक तम्बू. संभव के रूप में ज्यादा त्वचा के रूप में ले लो, लेकिन सावधान रहना खींच नहीं मांसपेशियों के रूप में यह माउस के लिए परेशानी का कारण होगा. व्यायाम सावधानी इतनी के रूप में लागू करने के लिए बहुत ज्यादा पशु ribcage या रीढ़ की हड्डी के लिए दबाव नहीं है. अत्यधिक या त्वचा के दबाव खींच श्वसन के कुछ मामलों में निषेध करने के लिए हो सकता है.
- माउस के सिर पर जल्दी के रूप में अपने गैर प्रमुख हाथ की तर्जनी जगहसंभव के रूप में नाक के करीब है और त्वचा (चित्रा 1C, 1D) पर वापस खींच. एक ही समय में, इष्टतम स्थिति के लिए सिर की ओर अंगूठे और उंगलियों के बीच स्लाइड. आदर्श रूप में, माउस खड़ी या क्षैतिज अपने सिर को स्थानांतरित करने के लिए सक्षम नहीं होना चाहिए.
- जबकि कूड़ा पर पकड़ बनाए रखने, उसकी पीठ पर माउस बारी. माउस वापस अपने हाथ की हथेली में होना चाहिए. मजबूती से अपनी हथेली के खिलाफ अपने पिछले दो उंगलियों (अंगूठी और कनिष्ठा) के साथ माउस पूंछ (आधार) के पास करने के लिए माउस को स्थिर पकड़, या आप निचले शरीर (चित्रा 1E, 1F) भर में अपनी उंगलियों लपेटो कर सकते हैं.
- इस बिंदु पर यह सुनिश्चित करें कि माउस की गर्दन और ठोड़ी फ्लैट और मंजिल के समानांतर हैं. ठोड़ी जितना संभव intranasal वितरण के साथ सहायता के गर्दन के साथ एक 180 डिग्री के कोण पर करीब होना चाहिए. कोण में थोड़ा सा परिवर्तन दवा के कारण गलत साइट में समाप्त कर सकते हैं. सुनिश्चित करें कि माउस पेट देख कर साँस लेने में सक्षम है. माउस थानेदारuld को स्थानांतरित करने के लिए सक्षम नहीं हो सकता है, लेकिन किसी भी दर्द में आराम से नहीं होना चाहिए. यदि आप माउस गर्दन और ठोड़ी एक 'वी' देखते हैं, तो आप फिर से पकड़ करने के लिए जरूरत है.
3. दवा की intranasal जाग चूहे को डिलिवरी
परिचय
Intranasal पकड़ का उपयोग करना, प्रत्येक माउस दो बार रोक लगाई गई है और उनकी मंजिल के समानांतर गर्दन के साथ आयोजित किया जबकि तरल की 20-30 μl की एक मात्रा दिलाई है. यह मात्रा छोटे बड़े चूहों के लिए सुरक्षित और प्रभावशाली है, हम आम तौर पर 24 μl का उपयोग करते हैं, और कि इस प्रोटोकॉल में वर्णित है. जाग intranasal विधि किसी भी उम्र के चूहों में विकासात्मक तंत्रिका विज्ञान अनुसंधान के लिए नवजात चूहों में उदाहरण के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. नवजात चूहों में, एक छोटे कुल आयतन (8 μl) और छोटी बूंद आकार (1 μl) नाक गुहा की छोटी मात्रा को समायोजित करने के लिए किया जाना चाहिए. दवा आम तौर पर एक समय में दो चूहों को दिया है, बाकी समय बारी करने के लिए समय का सबसे कुशल उपयोग बनाने के लिए और ओ रखनेn अनुसूची. सेट अप एक छोटे से अगर आप समूह रखे चूहों या व्यक्तिगत रूप से रखे चूहों dosing कर रहे हैं के आधार पर अलग अलग हो जाएगा. व्यक्तिगत रूप से रखे चूहों के साथ, यह अन्य पिंजरे शीर्ष को पार करने से चूहों को रोकने के पिंजरों के बीच में अपनी सामग्री के सभी जगह के लिए मददगार है. साथ समूह रखे उस पिंजरे से केवल चूहों खुराक,. यह महत्वपूर्ण है कि एक समूह रखे पिंजरे में प्रत्येक माउस ही intranasal उपचार प्राप्त है, दो अलग उपचार के पार संदूषण के लिए संभावित रूप में हवा में या त्वचा से संपर्क के साथ दवा expelling के कारण मौजूद है. यह अत्यधिक अनुशंसित है कि एक dosing शीट अग्रिम में मुद्रित किया, उपचार कार्य के तकनीशियनों को याद दिलाने के लिए, याद बूंदों के किसी भी नोट्स रिकॉर्ड करने के लिए, प्रत्येक जानवर के सामान्य स्वास्थ्य, आदि नोट
कदम
- पिंजरों जहां वे dosing के लिए होना चाहिए, और एक dosing स्टेशन (2 चित्रा) सेट सेट.
- पिंजरे से निकालें और माउस dosing के के दौरान पिंजरे शीर्ष पर रखने.
- Intranasal पकड़ धारा 2 में वर्णित का उपयोग कर माउस उठाओ.
- अपने प्रमुख हाथ का उपयोग, तो लिए दवा या वाहन के 6 μl साथ pipettor लोड. माउस में आम तौर पर एक 45 डिग्री के कोण (चित्रा 1G, 1H) बाएं नथुने, के पास भरा pipettor की नोक रखें. यदि आप एक चिपचिपा समाधान है, आप अपने 90 डिग्री के कोण को बढ़ाने की जरूरत है क्योंकि दवा विंदुक टिप के बजाय एक बूंद बनाने की ओर चला सकते हैं कर सकते हैं. यदि बहुत चिपचिपा, तरल expelling से पहले एक ऊतक के साथ विंदुक टिप पोंछते मदद मिल सकती है. धीरे धीरे मात्रा के बारे में आधे (3 μl) के साथ एक छोटी सी छोटी बूंद के रूप में दवा बेदखल.
- छोटी बूंद माउस नथना के काफी करीब रखा जाना चाहिए इतना है कि माउस छोटी बूंद श्वास कर सकते हैं. तुरंत बाद माउस इस छोटी सी बूंद कश लेता है, विंदुक टिप में दवा के बाकी बेदखल करने के लिए माउस के लिए एक और छोटी छोटी बूंद बनाने के बाद 2-3 सेकंड के बारे में एक ही नथुने से श्वास. मुंह देखने के लिए सुनिश्चित. अगर मैं वहाँमुंह में कोई भी तरल, ड्रॉप यह पूरी तरह से नहीं बना था और नाक में यह ध्यान दिया जाना चाहिए.
- इस स्थिति में 15 सेकंड के लिए माउस को पकड़ो. यह अत्यधिक अनुशंसित है कि एक टाइमर के लिए इस 15 सेकंड पकड़ मानकीकृत करने के लिए इस्तेमाल किया जा.
- सही नथना के लिए 3.6 - 3.3 चरणों को दोहराएँ. यदि किसी भी बूँदें बाहर सूंघकर कर रहे हैं, कि ड्रॉप और प्रतिस्थापित किया जाना चाहिए उल्लेख किया.
- माउस वापस अपने पिंजरे के शीर्ष पर 2 मिनट के लिए रखें. पूरे 2 मिनट शुरू करने की प्रक्रिया को दोहराएँ. पहली बूंद के प्रसव के बाद. इस माउस समाधान के 24 μl कुल 6 μl प्रत्येक के चार बूँदें देता है. एक बार में एक या दो चूहों dosing के लिए एक नमूना अनुसूची 2 तालिका में देखा जा सकता है.
- बाद माउस सभी बूँदें प्राप्त हुआ है, अपने पिंजरे माउस वापस.
4. जनरल पशु acclimation और दवा की intranasal वितरण के लिए जाग चूहे के लिए हैंडलिंग तकनीक
प्रत्येक दशानुकूलन या intranasal dosing सत्र के बाद, चूहों देना होना चाहिएना या सकारात्मक सुदृढीकरण के रूप में खुली सूरजमुखी के बीज बंदगी के रूप में इलाज. व्यवहार इनाम और उन्हें उनकी नाक scratching से विचलित, संभवतः खुद को चोट के कारण के रूप में दिया जाता है. जब चूहों रखे समूह के साथ काम कर रहे हैं, पर्याप्त मानते हैं प्रत्येक माउस के लिए गिरा दिया जाना चाहिए. अपने पिंजरों के लिए पशुओं को लौटने से पहले अपने मूल राज्यों को घोंसले को बहाल करने में तनाव को कम करने के लिए सुनिश्चित हो. जब समूह रखे जानवरों dosing, दस्ताने पिंजरों की खुराक के रूप में हस्तांतरण करने के लिए नहीं खुशबू पिंजरे कॉलोनी से पिंजरे कॉलोनी के रूप में वे एक दूसरे के प्रति आक्रामक हो जाएगा के बीच परिवर्तित किया जाना चाहिए.
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Representative Results
दवा वितरण की प्रभावकारिता निर्धारित करने के लिए कई तरीके हैं. 1 intranasally भारत स्याही या methylene नीले रंग के रूप में इस तरह के एक डाई, प्रशासन और डाई कल्पना घ्राण उपकला के भीतर पशु की इच्छामृत्यु के बाद और मस्तिष्क के बाद निकाल दिया जाता है चालनी - पटल के माध्यम से CNS में प्रवेश करने के लिए है. दूसरे के लिए एक रेडियो लेबल टैग का उपयोग कर या unlabeled अणु की एलिसा का पता लगाने का उपयोग कर या तो दिया दवा उपाय है. प्रशासन के बाद CNS में जाग चूहों को दवा वितरण का एक अच्छा उदाहरण Hanson एट अल में पाया जा सकता 7 +२०१२. हम घ्राण बल्ब और trigeminal तंत्रिका वितरित दवा के एक उच्च एकाग्रता शामिल करने की उम्मीद है. 3.65 μmol deferoxamine की intranasal प्रशासन के बाद 30 मिनट, trigeminal तंत्रिका और घ्राण तंत्रिका में सांद्रता 29 सुक्ष्ममापी और 13 सुक्ष्ममापी क्रमशः थे. दवा सांद्रता मस्तिष्क के सभी क्षेत्रों के दौरान स्पष्ट किया जा सकता है (इस उदाहरण में एक बजी4.1 सुक्ष्ममापी 0.6 सुक्ष्ममापी की ई) घ्राण और trigeminal नसों से इनपुट प्राप्त क्षेत्रों में उच्च सांद्रता के साथ मापा गया था. उदाहरण के लिए, प्रांतस्था का व्याख्यान चबूतरे वाला क्षेत्रों लांगुलिय प्रांतस्था और पोंस से उच्च सांद्रता शामिल मध्यमस्तिष्क या मज्जा से उच्च सांद्रता शामिल होगा. रीढ़ की हड्डी में काठ का रीढ़ की हड्डी में गर्भाशय ग्रीवा से उतरते एकाग्रता ढाल आम तौर पर मनाया जाता है (इस उदाहरण में 1.5 2.0 सुक्ष्ममापी सुक्ष्ममापी की एक ढाल). Intranasal प्रशासन भी दवा की उच्च सांद्रता meninges और गर्भाशय ग्रीवा लिम्फ नोड्स तक पहुँचने में यह परिणाम है. 3 के लिए वितरण की प्रभावकारिता प्रदर्शित प्रशासित दवा एक व्यवहार या जैव रासायनिक प्रतिक्रिया को मापने है. उदाहरण के लिए, ट्रांसजेनिक अल्जाइमर चूहों के intranasal deferoxamine उपचार स्थानिक स्मृति 7 कार्य और ग्लाइकोजन synthase 3 kinase 9 बीटा की phosphorylation में बेहतर प्रदर्शन में हुई.
| दिन | कार्रवाई | |
| 1 | एम | ~ 2-3 मिनट के लिए रुको |
| 2 | तू | ~ 2-3 मिनट के लिए रुको |
| 3 | डब्ल्यू | पकड़ो और ~ 2-3 मिनट पालतू |
| 4 | गु | पकड़ो और ~ 2-3 मिनट पालतू |
| 5 | एफ | हल्के चुटकी या कूड़ा |
| 6 | एम | हल्के चुटकी या कूड़ा |
| 7 | तू | कूड़ा और लिफ्ट |
| 8 | डब्ल्यू | कूड़ा और लिफ्ट |
| 9 | गु | Intranasal पकड़ |
| 10 | एफ | Intranasal पकड़ |
| 11 | एम </ P> | Intranasal में पकड़ और उलटें |
| 12 | तू | Intranasal में पकड़ और उलटें |
| 13 | डब्ल्यू | चपेट में, उलटा, नाक के पास विंदुक टिप जगह |
| 14 | गु | चपेट में, उलटा, नाक के पास विंदुक टिप जगह |
| 15 | एफ | उलटा, चपेट में प्रत्येक Nare 1 दौर खारा वितरित करने के लिए |
| 16 | एम | उलटा, चपेट में प्रत्येक Nare 1 दौर खारा वितरित करने के लिए |
| 17 | तू | उलटा, चपेट में 2 राउंड प्रत्येक Nare खारा देने |
| 18 | डब्ल्यू | उलटा, चपेट में 2 राउंड प्रत्येक Nare खारा देने |
तालिका 1. Intranasal Dosing के लिए जाग चूहे के लिए हैंडलिंग acclimation के लिए नमूना अनुसूची.
Pipettor * एक बार 6 μl के साथ भरी हुई है, लेकिन 2 एक्स 3 μl बूंदों के रूप में माउस को दिलाई.
तालिका 2. एक या दो चूहे Dosing के लिए नमूना समय.
चित्रा 1. विभिन्न चरणों और दवा के जाग intranasal वितरण के लिए एक माउस के आयोजन की कोण की तस्वीरें 1 ए.) माउस मजबूती से नीचे पिंजरे शीर्ष पर प्रमुख हाथ छोड़ने त्वचा पकड़ के उजागर कंधे के साथ पकड़ो. 1B) अंगूठे और मध्यम उंगली का प्रयोग करेंगैर प्रमुख हाथ की पकड़ और ऊपर खींचने के लिए कंधे ब्लेड के पीछे सिर्फ त्वचा 1C) सूचकांक उंगली का उपयोग करने के लिए त्वचा वापस अंगूठे और मध्यम उंगली (सामने देखने) की दिशा में आंखों के बीच से खींच. 1D) 1C (पक्ष के रूप में ही देखें). 1E) माउस उल्टा पकड़ो, अनामिका और / या गुलाबी रंग का उपयोग करने के लिए हाथ की हथेली को पूंछ के आधार सुरक्षित. माउस की गर्दन क्षैतिज 1F. चाहिए) ई के रूप में एक ही है, दूसरी तरफ से 1G) के साथ एक 20 μl pipettor और जेल लोड विंदुक टिप. 1H) 1g, क्लोज़ - अप दृश्य के रूप में एक ही दवा प्रशासन.
चित्रा 2. 2 व्यक्तिगत रूप से रखे चूहों के लिए एक पूरा dosing स्टेशन की एक तस्वीर शामिल दो के बीच काफी दूरी के साथ माउस पिंजरों के लिए चूहों को अलग रखने के लिए, एक pipetटिप्स, टो इस्तेमाल सुझावों के लिए एक कंटेनर, एक घड़ी, dosing चादर, एक के इलाज के बाद dosing (सूरजमुखी के बीज या cheerios की तरह), सैनिटरी पोंछे, एक P20 pipettor (या P10), और दवा के लिए दिया जा के साथ.
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Discussion
इस विधि से पता चलता है कि किस तरह चूहों intranasal दवा के नियमित खुराक के लिए संज्ञाहरण के उपयोग के बिना मस्तिष्क को लक्ष्य बनाएं दिया जा सकता है. Intranasal दवा न्यूनतम प्रयास के साथ समय की विस्तारित अवधि के लिए चूहों के बड़े समूहों को दिया जा सकता है. अप करने के लिए एक एकल intranasally 20 चूहों के समूह में कम से कम एक घंटे में एक भी व्यक्ति के द्वारा इलाज किया जा सकता है. अणुओं की एक विशाल सरणी, छोटा सा लोहे chelators से mesenchymal स्टेम सेल के विकास के कारकों को लेकर तेजी से सीएनएस को लक्षित किया गया प्रदर्शन किया और कृन्तकों मॉडल में प्रभावकारिता दिखाया. नाक से मस्तिष्क के लिए प्रत्यक्ष वितरण की प्रस्तावित तंत्र घ्राण और trigeminal perivascular 1,10 रिक्त स्थान के भीतर और थोक प्रवाह नसों के साथ बाह्य परिवहन शामिल हैं. सीएनएस intranasal वितरण एक विशेष रूप से उपयोगी तकनीक है क्योंकि न केवल यह तेजी से है, लेकिन यह CNS लक्ष्य प्रणालीगत जोखिम को कम करने. उदाहरण के लिए, चूहों को deferoxamine के intranasal प्रशासन 3-19 बार में उच्च conce परिणामस्वरूप11 रक्त में 28 गुना कम सांद्रता के साथ मस्तिष्क क्षेत्रों में ntrations. एक अन्य उदाहरण में, 15 मिनट के भीतर intranasally प्रशासित इंसुलिन इंसुलिन या 12 ग्लूकोज के प्लाज्मा स्तर को बदलने के बिना अल्जाइमर के रोगियों में याददाश्त में सुधार. एक अतिरिक्त लाभ intranasal प्रसव तकनीक के गैर invasiveness है.
इस विधि के लिए कई सीमाएं हैं. सबसे पहले, दवा वितरण में 20-30 के बारे में एक ही प्रशासन μl सीमित है, तो चिकित्सीय की विलेयता खुराक सीमा का निर्धारण करने में एक भूमिका निभानी होगी. इसके अलावा, दवा तैयार पीएच जैसे कारकों के रूप में महत्वपूर्ण है और लवणता डिलीवरी को प्रभावित कर सकते हैं. चरम पीएच और लवणता के रूप में प्राकृतिक स्थिति, से बड़े विचलन 13,14 इसके अलावा, unanesthetized चूहों के intranasal dosing मास्टर करने के लिए मुश्किल हो सकता है चूहों की श्वसन और घ्राण epithelia नुकसान कर सकते हैं., और intranasal "dosers के लिए प्रशिक्षण के कई सप्ताह लग सकते हैं "अर्धस्वर करने में सक्षम होने के लिए"सिर wiggle कमरे" ize और दवा का इष्टतम intranasal dosing हासिल. गलत dosing तकनीक के साथ, दवा फेफड़ों या पेट है, जो दवा मस्तिष्क तक पहुंचने में परिवर्तनशीलता को लागू कर सकते हैं में पलायन कर सकते हैं. संकेत हैं कि ऐसा हुआ है प्रशासन के बाद मुंह में कठिनाइयों या तरल के दृश्य से साँस ले रहे हैं. यदि संभव हो तो, यह नए / खारा वाहन देने के लिए कई सप्ताह या महीनों के लिए समूहों को नियंत्रण से पहले वे विशेषज्ञ प्रशिक्षकों द्वारा खुराक दवा को मंजूरी दे दी intranasal "dosers" सीमित करने की सलाह दी जाती है. अंत में, इस जाग intranasal विधि चूहों के लिए सीमित है, के रूप में जाग चूहों और बड़े जानवरों के रूप में आसानी से सोचने के लिए मजबूर है, और पीढ़ी पर जोर दिया जा सकता है जब उल्टा आयोजित नहीं कर रहे हैं.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
लेखकों के लिए धन्यवाद HealthPartners संस्थागत पशु की देखभाल और क्षेत्र के अस्पताल में समिति का उपयोग करना चाहते हैं.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| P20 pipettor set at 6 μl | |||
| Gel loading pipette tips | |||
| Timer | |||
| Waste receptacle for tips | |||
| Dosing sheet for notes | |||
| Pen | |||
| Drug and vehicle | |||
| Container to hold drug vials | |||
| Animals to be dosed | |||
| Spare gloves | |||
| Paper towels to wipe urine | |||
| Table 3. Materials Needed | |||
References
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