Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Методическая статья

Мышиной модели заживления ран

68.3K просмотров

⸱

DOI:

10.3791/50265

⸱

28 мая 2013 г.

 ,  ,  ,  ,  , 

В этой статье

Краткое содержание

Мышиной модели кожной заживление ран, которые могут быть использованы для оценки терапевтических соединений в физиологических и патофизиологических условиях.

Аннотация

Заживление ран и ремонта наиболее сложных биологических процессов, происходящих в жизни человека. После травмы, множественные биологические пути активизируются. Ухудшение заживления ран, которое происходит у больных сахарным диабетом, например, может привести к серьезным неблагоприятным последствиям, например, ампутации. Существует, следовательно, все большее толчком для развития новых препаратов, которые способствуют заживлению ран. Тестирование этих была ограничена большой модели на животных, таких как свиньи, которые часто являются непрактичными. Мыши являются идеальным доклинической модели, так как они экономичны и поддается генетической манипуляции, что позволяет механистической расследования. Тем не менее, заживления ран у мышей в корне отличается от людей, как это в первую очередь происходит через сокращение. Наши мышиной модели преодолевает это путем включения шины вокруг раны. По шинированием раны, процесс восстановления, то в зависимости от эпителизации, клеточную пролиферацию и ангиогенез, которая тесно зеркалобиологические процессы человека заживление ран. Несмотря на то, требующих согласованности и заботы, это мышиной модели не задействованы сложные хирургические методы и позволяет надежное тестирование перспективных агентов, которые могут, например, стимулировать ангиогенез или подавлять воспаление. Кроме того, каждая мышь действует как своим собственным контролем в виде двух ран готовят, позволяя применение обоих тестируемого соединения и управления транспортным средством на том же животном. В заключение мы демонстрируем практичный, легкий в освоении и надежная модель заживления раны, которая сопоставима с человека.

Введение

Ухудшение заживления ран отвечает за значительной заболеваемости и смертности во всем мире, это особенно актуально для страдающих сахарным диабетом 1,2. В организме человека, заживление ран континуум процессов, в которых имеется значительное перекрытие 3. Сразу же после ранения, воспалительные процессы инициируются. Воспалительные клетки высвобождают факторы, которые стимулируют процессы клеточной пролиферации, миграции и ангиогенез. После повторной эпителизации и формирования новых тканей есть фазы ремоделирования, что влечет за собой как апоптоз и реорганизации матрицы белки, такие как коллаген.

Сложность заживлени....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

1. Подготовка шины и окклюзионные соусов

  1. Краткие сведения 10 мм круги на 0,5 мм листа толщиной от силикона и использовать ножницы или дерматома для создания силиконовых дисков.
  2. Центр 5 мм биопсии удар в середине 10 мм круга и сильно прижать для создания отверстия в форме "пончика", как диск, который будет использоваться в качестве шины.
  3. Краткие сведения 10 мм круги на прозрачной герметичной повязкой, таких как Opsite и используйте ножницы, чтобы создать круговую повязку.

2. Экспериментальные животные

  1. Получить животных Комитета по этике утверждения для всех экспериментов, которые будут выполн....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Кривая закрытия раны определяется путем вычисления среднего диаметра раны и выражения результатов в виде процента, т.е. 100 - (день 0 диаметр / диаметр день X). В этом эксперименте терапевтического соединения (или контрольный носитель) наносили ежедневно к ране. Терапевтического соединения значительно ускорило закрытие раны (рис. 3). Важно отметить, что шина должна быть сохранена в течение всего эксперимента, а удаление шины приведет к быстрому сокращение раны (рис. 2г) и расхо.......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

Это экспериментальный мышиной модели заживления кожной раны. Важной особенностью данной модели является использование силиконовых шин, чтобы предотвратить сокращение раны, так что реэпителизация и новообразование ткани может происходить, что делает его похож на процесс, который происходит в организме человека. Эта модель является универсальным и может быть использован для оценки заживления ран и в физиологических и патофизиологических (например, сахарный диабет) настройки. Эта модель может также использоваться .......

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Авторы не имеют ничего раскрывать.

Благодарности

Авторы хотели бы выразить признательность финансовой поддержке национального здравоохранения и медицинских исследований (NHMRC) Австралии (грантового проекта ID: 632512). Луиз Данн был поддержан NHMRC Ранняя карьера стипендий и Кристина Bursill по Национальной стипендий Фонда Сердца развития карьеры.

....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
Пресс-запрессовка силиконовая пленка толщиной 0,5 ммInvitrogenP18178Разрезается на «пончики» с внешним диаметром 1 см внешним, 0,5 см внутренним диаметром
Биопсийный пуансон 5 ммSteifelBC-B1-0500Для контурирования области раны подлежат иссечению
ножницами Vannas изогнутыми 8,5 смWorld Precision Instruments 501232Для разреза и иссечения раны
Dumonte #7b щипцы, 11 смWorld Precision Instruments501302Для захвата кожи при создании разреза и иссечения кожи
Щипцы Graefe, зубчатые 10 смWorld Precision Instruments14142Для помощи в креплении силиконовой шины к коже
Иглодержатель, гладкие губки, изогнутые, 12,5 смWorld Precision Instruments14132
Щипцы Malis, гладкие, прямые, 12 смCodman and Shurtleff, Inc (J& ампер; J)80-1500Пришивать силиконовые кольца к коже
Линейка, градация 0,5 ммн/д
Штангенциркуль 0,25 мм градацияДакворт и Кент9-653Измерять площадь раны
прозрачной клейкой пленкой Opsite FlexiFix. 10 см x 1 мSmith & Племянник66030570
Римадил (Карпрофен)Pfizer462986

Ссылки

  1. Sen, C. K., et al. Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy. Wound Repair. 17, 763-771 (2009).
  2. Sen, C. K. Wound healing essentials: let there be oxygen. Wound Repair Regen. 17, 1-18 (2009).
  3. ....

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Шинированная ранаэпителизацияангиогенезпанч-биопсияокклюзионная повязкалазерная допплерометрияиммуногистохимический анализзакрытие раны