Summary
في تخطيط العضل الضغط، هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من سفينة على اثنين قنية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة. هنا، نحن تصف طريقة لقياس استجابة ارتخاء وعائي من الفأرة 3
Abstract
نظم مخطاط العضل الضغط هي بشكل رائع مفيد في تقييم وظيفي من الشرايين الصغيرة، ضغط لضغط بطريق مناسبة. في حالة فسيولوجية قرب المحرز في تخطيط العضل الضغط يسمح توصيف متعمقة من الاستجابات الذاتية للمؤثرات الدوائية والفسيولوجية، والتي يمكن استقراء لفي السلوك المجراة من السرير الوعائي. مخطاط العضل الضغط لديها العديد من المزايا أكثر من myographs الأسلاك التقليدية. على سبيل المثال، يمكن دراستها سفن أصغر مقاومة في الضغوط داخل اللمعة لرقابة مشددة وذات الصلة من الناحية الفسيولوجية. هنا، علينا أن ندرس قدرة 3 ش النظام الشرايين المساريقي (3-4 مم طويل)، preconstricted مع فينيليفرين، لايتي-الاسترخاء في استجابة لأستيل. هي التي شنت الشرايين المساريقي على اثنين قنية متصلا نظام الضاغط ومختومة أن يتم الحفاظ على الضغط المستمر من 60 مم زئبق. قطر التجويف والخارجي للسفينة هي المستمر وسجلت خبيث باستخدام كاميرا الفيديو، مما يسمح الكمي الوقت الحقيقي من تضيق الأوعية وارتخاء وعائي ردا على فينيليفرين وأستيل كولين، على التوالي.
للتدليل على تطبيق تخطيط العضل الضغط لدراسة مسببات مرض القلب والأوعية الدموية، قمنا بتقييم وظائف الاوعية الدموية التي تعتمد على البطانة في نموذج الفئران من ارتفاع ضغط الدم النظامية. الفئران تعاني من نقص في α 1 الوحيدات من محلقة يعترضه القابلة للذوبان (sGCα 1 - / -) هي ارتفاع ضغط الدم عندما على 129S6 (S6) الخلفية (sGCα 1 -/-S6) ولكن ليس عندما على C57BL / 6 (B6) الخلفية (sGCα 1 -/-B6). باستخدام تخطيط العضل الضغط، علينا أن نظهر أن sGCα النتائج 1 نقص في ضعف ارتخاء وعائي التي تعتمد على البطانة. الخلل الأوعية الدموية أكثر وضوحا في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران، من المحتمل contributiنانوغرام إلى ارتفاع ضغط الدم في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران.
تخطيط العضل الضغط هي تقنية بسيطة نسبيا، ولكن حساسة ومفيدة ميكانيكيا التي يمكن استخدامها لتقييم تأثير مختلف المحفزات على انقباض الأوعية الدموية والاسترخاء، وبالتالي زيادة البصيرة لدينا في الآليات الكامنة وراء مرض القلب والأوعية الدموية.
Introduction
وتستخدم أنظمة مخطاط العضل الضغط لقياس وظيفة فسيولوجية وخصائص الشرايين الصغيرة والأوردة والأوعية الأخرى. هي التي شنت على شريحة صغيرة سليمة من الشريان أو الوريد على اثنين قنية زجاجية صغيرة وضغط لضغط اللمعية مناسبة، والسماح للسفينة للحفاظ على معظم الخصائص في الجسم الحي (الشكلان 1 و 2). في حالة فسيولوجية قرب في مخطاط العضل ضغط يعكس السلوك في الجسم الحي من السرير الأوعية الدموية، مما يسمح التحقيق في الخصائص الذاتية (على سبيل المثال لهجة عضلي) من سفن معزولة. بعض من مزايا تخطيط العضل الضغط على تخطيط العضل الأسلاك، حيث يتم تقييم تقلص العضلات عن طريق اقتران الميكانيكية مباشرة إلى محول القوة 1، وتشمل (ط) أن الشرايين المقاومة الصغرى، التي تحدد المقاومة الشاملة وضعت في نظام الأوعية الدموية، ويمكن دراستها، في حين ومخطاط العضل سلك تقتصر على الشرايين قناة أكبر، (الثاني) ريتم تقليل قبعة من مخاطر تضر البطانة منذ أي أسلاك يجب أن تمرر من خلال التجويف السفينة، (الثالث) أن الشكل الطبيعي للسفينة يتم الاحتفاظ أفضل، و (رابعا) أن البعد سفينة يمكن دراستها في مجموعة واسعة من الضغوط أو إجهاد القص 2.
يمكن دراسة السفن الصغيرة تكون أكثر إفصاحا من دراسة الشرايين قناة أكبر للمساعدة في فهم الآليات الجزيئية الفيزيولوجيا المرضية والتي تساهم في تغير نغمة الأوعية الدموية في أمراض القلب والشرايين مثل ارتفاع ضغط الدم. على سبيل المثال، يمكن أن يظهر ضعف في وظيفة بطانة الأوعية الدموية المرتبطة تغذية الفئران حمية عالية الدهون لمدة 8 أسابيع في 2 ND-النظام الشرايين المساريقي 3 ولكن ليس في حلقات الأبهر (الشكل 3). ميزة أخرى لتخطيط العضل ضغط انقباض عضلي هو أن الجوهرية للسفينة الضغط موجود، وأن دور ووظيفة البطانة في هذه الظاهرة يمكن دراستها. هنا، ونحن أن descrمتد استخدام مخطاط العضل الضغط لدراسة تفاعل الأوعية الدموية من الماوس المساريقي 3 ش النظام الشرايين مقاومة في محيط من أكسيد النيتريك ضعف (NO)، المركب الإشارة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. إعداد الحل
- الأسهم 500X EDTA: تزن 500 ملغ EDTA نا 2 • 2H 2 O وتذوب في 50 مل من الماء منزوع الأيونات. تخزين في درجة حرارة الغرفة.
- بوكل إزالة إستقطاب حل.
- إعداد محلول المخزون K10X: 3.69 غرام كلوريد الصوديوم، 18.64 ز بوكل، 0.36 G MgSO 4 اللامائية، 0.41 غ KH 2 PO 4، 0.46 G و CaCl 2 • 2H 2 O. تذوب في 250 مل من الماء منزوع الأيونات. تخزين في درجة حرارة الغرفة.
- ل100 مل بوكل النهائي إزالة إستقطاب حل 1X: ذوب 0.21 NaHCO 3، 0.18 ز الجلوكوز في 90 مل من الماء منزوع الأيونات. إضافة 10 مل من محلول المخزون K10X. إضافة 95 ميكرولتر من EDTA 500X حل. تخلط جيدا. تخزينها في 4 درجة مئوية. استخدام في غضون أسبوع واحد.
- إعداد الطازجة HEPES-PSS حل في يوم من التجربة (1 ليتر).
- 6.96 غرام كلوريد الصوديوم، 0.35 ز بوكل، 0.288 غرام MgSO 4 • 7H 2 O، 0.1605 ز KH 2 PO 4، 2.38 G HEPES. تذوب في 100 ملالماء منزوع الأيونات. إجعلها قارورة A.
- 0.312 غرام و CaCl 2 • 2H 2 O. تذوب في 100 مل من الماء منزوع الأيونات. احتفالا ب قارورة B.
- 1.25 غرام NaHCO 3، 0.991 غرام جلوكوز. تذوب في 98 مل من الماء منزوع الأيونات. احتفالا ب قارورة C.
- إضافة 2 مل من EDTA في قارورة 500X C. خذ 700 مل من الماء منزوع الأيونات في قارورة كبيرة. صب محتويات القارورة A، B و C في قارورة كبيرة مع vortexing لالمستمر. ضبط الرقم الهيدروجيني إلى 7.4 مع هيدروكسيد الصوديوم.
2. العقاقير المستخدمة
- فينيليفرين (10 -2 M): ذوب 20.37 ملغ في 10 مل من الماء منزوع الأيونات. قسامة 1 مل وتخزينها في -80 درجة مئوية. تمييع متسلسل للحصول على 10 -3، 10 -4، 10 -5، و 10 -6 مول / لتر في اليوم من التجربة.
- أستيل كولين (10 -2 M): ذوب 18.17 ملغ في 10 مل من الماء منزوع الأيونات. قسامة 1 مل وتخزينها في -80 درجة مئوية. تمييع متسلسل للحصول على 10 -3، 10 -4، 10 -5، و 10 -6مول / لتر في اليوم من التجربة.
3. الفئران
تم دراسة الفئران على خلفية S6 و B6 طوال هذه الدراسة - ذكر WT وsGCα 1 - /. وsGCα 1 - / - تم إنشاؤها كما هو موضح سابقا 4،5. تمت الموافقة الإسكان والإجراءات التي تنطوي على حيوانات التجارب (الفئران) من خلال اللجنة الفرعية للبحوث رعاية الحيوان من مستشفى ماساتشوستس العام في بوسطن، MA.
4. قياس تفاعل الأوعية الدموية في الشريان المساريقي
- الموت ببطء الفئران مع بنتوباربيتال (200 ملغ / كغ، والملكية الفكرية). فتح تجويف البطن وتشريح الأنسجة المساريقي. عزل وتشريح الشريان المساريقي من 3 طريق النظام الحر من الضام والأنسجة الدهنية، ووضع الشريان في الجليد الباردة HEPES-PSS حل قبل معايرتها مع 95٪ O 2/5٪ CO 2 لمدة 15 دقيقة. قطع حلقات من 2-3 مم طول مع عدم وجود المتفرعة من المساريقيالشريان. التفريق بين الشرايين والأوردة على مستوى السفن الصغيرة هي إشكالية عندما لا يكون هناك دم في الأوعية. ولذلك، فإننا نوصي تحديد السفينة حين انها لا تزال على حالها في الحيوان قبل تشريح بها.
- في ملء قنية الزجاج في الضغط مخطاط العضل غرفة (DMT نموذج 110P & 11P الإصدار 1.31، الشكل 2) مع حل HEPES-PSS بمساعدة حقنة 10 مل من خلال مدخل ومخرج الصمامات. ملء قنية وينبغي أن يتم برفق وبعناية كما الضغط المفرط يمكن أن تلحق الضرر محول هشة متصلا قنية. بعد ملء قنية إغلاق كل مدخل ومخرج الصمامات بإحكام.
- تحميل واحدة من نهاية السفينة على قنية حق وربط بعناية مع واحد حبلا غرامة من الخيط النايلون. مع مساعدة من حقنة، الاحمرار وملء وعاء مع حل HEPES عبر صمام مدخل. جلب قنية اليسار أقرب إلى السفينة وتحميل الطرف الآخر من السفينة على ذلك. ادراك التعادل مع الدرز النايلون. شغلغرفة مع ما يصل الى 10 مل مع HEPES حل. التحقق من وجود تسرب عن طريق دفع بلطف HEPES حل عن طريق صمام مدخل بمساعدة حقنة.
- تثبيت الدائرة على مخطاط العضل وتحت كاميرا الفيديو. بدء الأوكسجين والحرارة (37 درجة مئوية) في القاعة. ربط صمام مدخل مع P1 أنبوب من حل HEPES أول خزان، بينما هو صمام مغلقة. تدع أي فقاعة وتمرير حل من خلال أنبوب حتى عدم وجود فقاعات في أنبوب. فتح صمام.
- ربط صمام الأيسر من الغرفة مع P2 أنبوب قادمة من منظم الضغط. مرة أخرى تحقق من وجود أي فقاعات. لا ينبغي أن يكون هناك أي فقاعات أو تسرب في النظام بأكمله.
- انتقل إلى القائمة ضغط على لوحة ميو واجهة أو في البرنامج وقم بتشغيل مضخة في حين إيقاف التدفق.
- افتح البرنامج وانقر فوق تجميع. ينبغي أن ينظر إلى السفينة على الشاشة الآن (الشكل 3). السفينة هو تصور مع كاميرا تركيبها على المجهر، مما يسمح monitoriنانوغرام وتحليل لمعة السفينة، سفينة القطر، وسمك الجدار.
- رفع الضغط تدريجيا interluminal عبر صمام P1 من خلال تحديد الضغط P1 في لوحة ميو واجهة أو في البرنامج وأدخل القيمة الضغط على النحو التالي؛ 5 ملم زئبقي → 10 → 20 → 40 → 60 مم زئبق. سفينة يميل في بعض الأحيان إلى تحريف أو ملفوف في حين الضغط يتزايد؛ ضبط التوتر أو توتر وفقا لذلك مع مساعدة من micropositioner العمودي أو الطولي (الشكل 2). تتوازن هذه السفينة على بعد 60 ملم زئبقي و 37 درجة مئوية على الأقل لمدة 45 دقيقة. تغيير الحل حمام مرة واحدة مع HEPES قبل تحسنت خلال موازنة.
- تطبيق 10 مل من بوكل حل إزالة إستقطاب، prewarmed عند 37 درجة مئوية، إلى الحمام ليزيل الاستقطاب تماما خلايا العضلات الملساء وتحقيق أقصى قدر من انقباض. بعد انقباض مستقرة، وشطف الحمام مع HEPES حل 3 مرات كل 10 دقيقة.
- التحقق من صلاحية السفينة وسلامة البطانة بواسطة مستقرة والإنجابيردود إيبل إلى إضافة فينيليفرين (10 -5 M) والأستيل كولين (10 -5 M). شطف 3 مرات مع حل HEPES كل 10 دقيقة.
- إضافة فينيليفرين (10 -5 م) لpreconstrict السفينة، وعندما تم الحصول على انقباض مستقرة، إجراء منحنى استجابة تركيز-توسع الأوعية التراكمي (CRC) بإضافة متتابعة من جرعات متزايدة من الأستيل كولين (10 -9، 3 × 10 - 9، 10 -8، 3 × 10 -8، 10 -7، 3 × 10 -7، 10 -6، 3 × 10 -6، و 10 -5 م). بعد آخر جرعة، وشطف 3 مرات مع حل HEPES كل 10 دقيقة قبل البدء في CRC جديدة.
- تحديد قطر التجويف السلبي من خلال تطبيق كا 2 PSS مجانا + التي تحتوي على 2 ملي EGTA. من اقتفاء مسجل التدبير قطر التجويف لكل الاستجابة للجرعة (الشكل 4)، والتي سيتم استخدامها لحساب جميع المعلمات.
- التعبير عن جميع الردود الاسترخاء أستيل كما PERCالتغيير entage في قطر التجويف بعد preconstriction فينيليفرين مقارنة مع الفرق بين قطر خالية من الكالسيوم وقطر بعد انقباض فينيليفرين، وذلك باستخدام المعادلة التالية:
- نسبة تمدد = 100٪ X [(د خ - د ط) / (D كا خالية - D ط)]، حيث D هو قطر التجويف قياس وX، I، وخالية من الكالسيوم دلالة بأقطار الشرياني في كل جرعة من ناهض (خ)، فينيليفرين التالية قطره الأولي انقباض (ط)، وفي كا 2 +-عازلة خالية (خالية من الكالسيوم).
5. التحليل الإحصائي
يتم التعبير عن جميع القياسات المستمرة كما يعني ± SEM. يتم تحليل تفاعل الأوعية الدموية في الشرايين المساريقي بواسطة المتكررة تدابير في اتجاهين ANOVA. في جميع الحالات، P يعتبر <0.05 ذات دلالة إحصائية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
NO تشارك مركزيا في الحفاظ على توازن ضغط الدم سواء في البشر 6 و 7 في النماذج الحيوانية. وتتوسط قدرة NO للسيطرة على استرخاء العضلات الملساء الوعائية القابلة للذوبان التي كتبها يعترضه محلقة (SGC)، انزيم heterodimeric المحتوية على الهيم الذي يولد المركب 8. مؤخرا، تم تحديد ضغط الدم الوراثية في تعديل البديل موضعا الذي يحتوي sGCα 1 و 1 sGCβ الجينات، مما يدل على أهمية SGC في تنظيم ضغط الدم لدى البشر 9. ومن المثير للاهتمام، ذكور الفئران تعاني من نقص في α 1 الوحيدات من شركة غاز الجنوب (sGCα 1 - / -) هي ارتفاع ضغط الدم عندما على 129S6 (S6) الخلفية (sGCα 1 -/-S6) 5 ولكن ليس عندما على C57BL / 6 (B6) الخلفية (1 sGCα -/-B6) 4. كنا تخطيط العضل الضغط لدراسة استرخاء الأوعية الدموية في استجابة لأستيل في ريسي المساريقيالشرايين موقف معزولة عن WT وsGCα 1 - / - الفئران على S6 و B6 الخلفيات وpreconstricted مع فينيليفرين (الشكل 4). درسنا الشرايين مقاومة لأنها تحدد المقاومة في نهاية المطاف والامتثال لنظام الأوعية الدموية، وبالتالي تنظيم ضغط الدم مباشرة. sGCα 1 عوز كان مرتبطا مع انخفاض القدرة على cetylcholine للحث على الاسترخاء الأوعية الدموية، بغض النظر عن الخلفية الوراثية للفئران درس (الشكل 4 و 5). ومع ذلك، كان الاسترخاء التي تعتمد على البطانة ضعاف أكثر بشكل ملحوظ في sGCα 1 - / - الفئران على خلفية S6 مما كانت عليه في sGCα 1 - / - الفئران على خلفية B6 (الشكل 5) 10. معا، هذه النتائج تشير إلى أن انخفاض حساسية من الأوعية الدموية للاسترخاء تعتمد على البطانية يمكن أن تسهم في ارتفاع ضغط الدم سلالة محددة في شركة غاز الجنوب وALPHألف؛ 1 - / - الفئران.
الشكل 1. التخطيطي تصور أجزاء مختلفة من الضغط مخطاط العضل غرفة (DMT). أقحم يظهر السفن التي شنت على قنية في الغرفة. انقر هنا لعرض أكبر شخصية .
الشكل 2. صور الممثل، استولي عليه خلال تسجيل الفيديو، من أجل 2 الثانية الماوس الشريان المساريقي تحت (A) بصل و (ب) انقباض فينيليفرين التي يسببها. ويتم رسم القطر الخارجي والتجويف السفينة بواسطة خطوط خضراء وحمراء، على التوالي. آثار في لوحات اليمين تمثل كثافة إشارة، وتقاس في عEA التي يحددها الصندوق الأزرق في الصور على اليسار، للالقطر الخارجي (الأسهم الخضراء) والتجويف القطر (الأسهم الحمراء).
الشكل (3). كان اختلال وظيفي البطانية في الفئران التي تغذت على الحمية عالية الدهون لمدة 8 اسابيع وليس واضحا في حلقات الأبهري. تم قياس ظيفة بطانة الأوعية الدموية عن طريق الاستجابة ارتخاء وعائي الناجم عن أستيل كولين (10 -9 إلى 10 -5 M) في فينيليفرين (10 -5 M) قبل -تعاقدت حلقات الأبهري. نظاما غذائيا عاديا، تغذية الفئران البرية من نوع اتباع نظام غذائي القياسية (ن = 8)؛ اتباع نظام غذائي عالي الدهون، وتغذية الفئران البرية من نوع حمية عالية الدهون لمدة 4-6 أسابيع (ن = 13).
الشكل 4. اقتفاء أثر الأصلي ممثل منحنى الاستجابة للجرعة الأسيتيل كولين على فينيليفرين-proconstricted 2 الثانية أمر مالشرايين esenteric معزولة عن WTB6 (A) وsGCα 1 -/-S6 الماوس (B). سهام تمثل إضافة التراكمي للجرعات متزايدة من acetycholine (10 -9 إلى 10 -5 M). يمثل المحور X الوقت (بالثواني)، ومحور Y يمثل التجويف القطر (في ميكرومتر). انقر هنا لعرض أكبر شخصية .
الشكل 5. ويرتبط الفئران مع ضعف أكبر من تفاعل الأوعية الدموية في sGCα 1 -/-S6 الفئران مما كانت عليه في sGCα 1 -/-B6 الفئران قدرة أستيل كولين (10 -9 إلى 10 -5 - ارتفاع ضغط الدم سلالة محددة في sGCα 1 - /. وquantitated) للحث على الاسترخاء في فينيليفرين-Precontracted (10 -5 M) الشرايين المساريقي من البرية من نوع (WT، والرموز المغلقة، خط كامل) وsGCα 1 ذكر - / - (symbnols مفتوحة، خط متقطع) الفئران على B6 (الدوائر) أو S6 (المربعات) الخلفية الوراثية . هو اعاقة استرخاء الأوعية الدموية Acetycholine التي يسببها إلى حد أكبر في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران. N = 3،5،3 و 6 لsGCα 1 -/-S6، sGCα 1 -/-B6، WTS6، على التوالي. † * P <0.05 مقابل sGCα 1 -/-B6، P <0.05 مقابل sGCα 1 - / - من نفس الخلفية الوراثية. بايز تكييفها شكل، وآخرون (2012).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
الفئران هي نموذج تجريبي المفضل لكثير من المحققين، وذلك جزئيا بسبب إمكانية إدخال تعديلات وراثية، وبالتالي توليد نماذج الماوس لالفيزيولوجيا المرضية الإنسان. وضع فعال في الأوعية المقاومة الصغيرة ولكن ليس من السفن قناة أكبر يحدد إلى حد كبير تنظيم تدفق الدم في جميع أنحاء نظام الأوعية الدموية 11. حجم الشرايين المقاومة في الحيوانات الصغيرة، مثل الفئران، ويمنع استخدام مخطاط العضل سلك لدراسة وظيفة الاوعية الدموية الدقيقة. myographs الضغط ليس فقط التغلب على هذا القيد ولكن أيضا السماح لقياس وظيفة الأوعية الدموية في ظل الظروف الفسيولوجية القريب.
نحن ذكرت سابقا أن ذكور الفئران من نقص في sGCα في 1 هي ارتفاع ضغط الدم عند على (S6) خلفية 129S6 (1 sGCα -/-S6) 5 ولكن ليس عندما على (B6) خلفية C57BL / 6 (1 sGCα -/-B6) 4. افترضنا أن هذا قويرجع ذلك إلى الاختلافات في تفاعل الأوعية الدموية بين sGCα 1 التفاوت المتعلقة القطار في ضغط الدم - / - الفئران على B6 و S6 الخلفيات. باستخدام مخطاط العضل الضغط، درسنا الاستجابات ارتخاء وعائي التي تعتمد على البطانة في 3 ش النظام الشرايين المساريقي. أستيل كولين هو ناهض مستقبلات المسكارينية التي تربط لمستقبلات في البطانة لتفعيل البطانية سينسيز اكسيد النيتريك (أنوش) عن طريق زيادة الخلايا كا 2 + التركيز. NO يمكن تنشيط لاحقا SGC في الكامنة العضلات الملساء خلايا طبقة للحث على الاسترخاء.
باستخدام تخطيط العضل الضغط للمقارنة بين قدرة البطانية المستمدة NO إلى الشرايين المساريقي vasorelax معزولة عن WT وsGCα 1 - / - الفئران على خلفية S6 و B6، حددنا الاختلافات في تفاعل الأوعية الدموية بين sGCα 1 - / - الفئران على B6 و S6 خلفيات 10. sGCα 1 -وارتبط نقص مع ضعف ارتخاء وعائي التي تعتمد على البطانة في كل من S6 و B6 الفئران. ومع ذلك، كان هذا الانخفاض أكبر في sGCα 1 من -/-S6 في sGCα 1 -/-B6 الفئران. القدرة انخفضت من أستيل للحث على ارتخاء وعائي في S6 الفئران المرجح أن يساهم في زيادة ضغط الدم لوحظ في sGCα 1 -/-S6 الفئران ولكن ليس في sGCα 1 -/-B6 الفئران. على الرغم من أنه غالبا ما تنسب ارتفاع ضغط الدم إلى تشوهات الكلوي 12، وهذه النتائج تعزز فرضية الناشئة التي تشوهات الأوعية الدموية على نحو سلس الأولية من العضلات، على سبيل المثال ما يرتبط بها مع ضعف NO-المركب إشارات 10،13، يمكن أن تسهم بشكل مباشر في تطوير ارتفاع ضغط الدم النظامية 14.
في الختام، هذه التقنية مخطاط العضل الضغط هو أداة قوية جدا في أيدي فيزيولوجي الأوعية الدموية أو الصيدلي ويمكن به استخدامها لتحليل وظيفة السفينة الصغيرة. يوضح دراستنا انطباق تخطيط العضل الضغط في الكشف عن تشوهات الأوعية الدموية الكامنة في نموذج ارتفاع ضغط الدم النظامية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
Acknowledgments
سيكون الكتاب أن نعترف الدكاترة. بول هوانغ وديمتري Atochin للاستخدام من DMT الضغط مخطاط العضل والدكاترة. Binglan يو تشونغ لى وعن توفير الفئران التي تغذت على حمية عالية الدهون أو نظاما غذائيا عاديا.
مصدر التمويل
وأيد هذا العمل من قبل عالم التنمية المنحة 10SDG2610313 من جمعية القلب الأمريكية (لES بايز)، وإلينور ومايلز شور 50 برنامج زمالة الذكرى للعلماء في الطب من كلية الطب في جامعة هارفارد (لES بايز).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| NaCl | Fisher Scientific | BP358 | |
| CaCl2 (2H2O) | Fisher Scientific | C79-500 | |
| KCl | Sigma | P9333 | |
| MgSO4 | Fisher Scientific | M65-500 | |
| KH2PO4 | Sigma | P3786 | |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328 | |
| NaOH | Fisher Scientific | S318 | |
| D-Glucose | Sigma | G8270 | |
| EDTA | Fisher Scientific | BP121 | |
| HEPES | Sigma | H3375 | |
| Phenylephrine | Acros Organics | AC20724 | |
| Acetylcholine | Sigma | A6625 | |
| Pressure Myograph System | DMT |
References
- Bridges, L. E., Williams, C. L., Pointer, M. A., Awumey, E. M. Mesenteric artery contraction and relaxation studies using automated wire myography. J. Vis .Exp. (55), e3119 (2011).
- Arribas, S. M., Daly, C. J., McGrath, I. C. Measurements of vascular remodeling by confocal microscopy. Methods Enzymol. 307, 246-273 (1999).
- Lei, C., Yu, B., et al. Inhaled Nitric Oxide Attenuates the Adverse Effects of Transfusing Stored Syngeneic Erythrocytes in Mice with Endothelial Dysfunction after Hemorrhagic Shock. Anesthesiology. , (2012).
- Buys, E. S., Cauwels, A., et al. sGCα1β1 attenuates cardiac dysfunction and mortality in murine inflammatory shock models. Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 297 (2), H654-H663 (2009).
- Buys, E. S., Sips, P., et al. Gender-specific hypertension and responsiveness to nitric oxide in sGCα1 knockout mice. Cardiovasc. Res. 79 (1), 179-186 (2008).
- Panza, J. A., Quyyumi, A. A., Brush, J. E., Epstein, S. E. Abnormal endothelium-dependent vascular relaxation in patients with essential hypertension. N. Engl. J. Med. 323 (1), 22-27 (1990).
- Huang, P. L., Huang, Z., et al. Hypertension in mice lacking the gene for endothelial nitric oxide synthase. Nature. 377 (6546), 239-242 (1995).
- Friebe, A., Koesling, D. The function of NO-sensitive guanylyl cyclase: what we can learn from genetic mouse models. Nitric Oxide. 21 (3-4), 149-156 (2009).
- Ehret, G. B., Munroe, P. B., et al. Genetic variants in novel pathways influence blood pressure and cardiovascular disease risk. Nature. 478 (7367), 103-109 (2011).
- Buys, E. S., Raher, M. J., et al. Genetic modifiers of hypertension in soluble guanylate cyclase alpha1-deficient mice. J. Clin. Invest. 122 (6), 2316-2325 (2012).
- Kauffenstein, G., Laher, I., Matrougui, K., Guerineau, N. C., Henrion, D. Emerging role of G protein-coupled receptors in microvascular myogenic tone. Cardiovascular Research. 95 (2), 223-232 (2012).
- Ruilope, L. M. Hypertension in 2010: Blood pressure and the kidney. Nat. Rev. Nephrol. 7 (2), 73-74 (2011).
- Michael, S. K., Surks, H. K., et al. High blood pressure arising from a defect in vascular function. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105 (18), 6702-6707 (2008).
- Mendelsohn, M. E. In hypertension, the kidney is not always the heart of the matter. J. Clin. Invest. 115 (4), 840-844 (2005).
