Summary
אולטרסאונד Transabdominal מתואר כאמצעי יעיל, פולשני להערכת מצב הרבייה צבי muntjac של ריבס. שיטות אלה ניתן להשתמש כדי להשיג אבחון הריון מוקדם כדי להעריך את הכדאיות העוברית. יישומים עתידיים של טכניקה זו כוללים הערכה של גיל ההיריון ואת ההשפעות של מחלה אימהית על התפתחות העובר.
Abstract
צבי המונטג'אק של ריבס(Muntiacus reevesi)הוא מין קטן שמקורו בדרום מזרח אסיה, וכיום הוא נחקר כמודל פוטנציאלי להעברת מחלות פריון ופתוגנזה. שידור אנכי הוא תחום עניין בקרב חוקרים החוקרים מחלות זיהומיות, כולל מחלת פריון, וחקירות אלה דורשות שיטות יעילות להערכת ההשפעות של זיהום אימהי על ביצועי הרבייה. בדיקה אולטרה-סונוגרפית היא כלי מבוסס היטב לאבחון הריון ולהערכת בריאות העובר במינים רבים של בעליחיים 1-7, כולל מספר מינים של cervids חקלאי8-19, אולם טכניקה זו לא תוארה צבי muntjac ריבס. כאן אנו מתארים את היישום של אולטרסאונד transabdominal כדי לזהות הריון muntjac עושה כדי להעריך את הצמיחה וההתפתחות העוברית לאורך כל תקופת ההיריון. באמצעות הליך זה, בעלי חיים בהריון זוהו כבר 35 ימים לאחר זיווג doe-buck וזה היה אמצעי יעיל כדי לפקח בבטחה על ההריון במרווחי זמן קבועים. מטרות עתידיות של עבודה זו יכללו קביעת התייחסויות מדידת עובר נורמלי להערכת גיל ההיריון, קביעת רגישות וספציפיות של הטכניקה לאבחון הריון בשלבים שונים של ההריון, וזיהוי וריאציות בצמיחה והתפתחות העובר בתנאים ניסיוניים שונים.
Introduction
בדיקה אולטרה-סונוגרפית היא שיטה מתוארת היטב לאבחון הריון בבקר1, כבשים2,3, עזים4, סוסים5, חיותלוויה 6,7, ומינים אחרים של בעלי חיים מקומיים. שיטה זו הדמיה זוהתה גם ככלי רב ערך לגילוי הריון והערכת גיל העובר במספר מינים של cervids בשבי, כולל צבי fallow8-11, צבי אדום12-16, Hokkaido sika צבי17, ואיילים18,19. במקרים רבים, אולטרה סאונד הפיק שיעורי דיוק גבוהים יותר מאשר מנגנונים אחרים של גילוי הריון, כגון פרוגסטרון בסרום או ניתוח גליקופרוטאין הקשורות להריון9,18. יתר על כן, הדמיה אולטרה-דמוגרפית של מערכת הרבייה יכולה לספק מידע נוסף לגבי הכדאיות העוברית, גיל ההיריון וזיהוי מומים התפתחותיים שאחרת היה קשה להעריך. התועלת של אולטרה-סאונד להערכת מצב הרבייה מרמזת על כך שיש להתאים מתודולוגיה זו למינים אחרים שבהם נעשה שימוש בתוכניות רבייה פעילות.
צבי המונטג'אק של ריבס(Muntiacus reevesi)הוא מין קטן שמקורו בדרום מזרח אסיה20. בעוד מחזור הרבייה של בעלי חיים אלה אינו מאופיין היטב בשטחים מולדתם, מחקרים של אוכלוסיות פראיות בחלקים של דרום אנגליה שיפרו את ההבנה של דפוסי הרבייה שלהם20. שלא כמו רוב הסרווידים, נראה כי המונטג'אק של ריבס מתרבה כל השנה, ללא פסגות מתרפסות עונתיות לכאורה20-22. נקבת muntjac בדרך כלל ללדת עופר יחיד לאחר תקופת הריון של 210 יום, ולהיכנס באופן אמין אסטרוס לאחר לידה בתוך 24 שעות20-22. האם זה לא להרות במהלך תקופה זו לאחר הלידה יחזור estrus כ 24-25 ימים מאוחר יותר20. במצבים שבויים, רבייה מושגת בדרך כלל על ידי דיור עושה עם זכר שלם אחד או יותר. מערכת זו מייצרת שיעורי תפיסה משביעי רצון ודורשת מיומנות טכנית מועטה עבור כוח אדם, אולם תאריכי רבייה מדויקים קשים, אם לא בלתי אפשריים, לקבוע.
Muntjac משמשים בדרך כלל במחקרים ציטוגנטיים בשל מגוון רחב של מספרי כרומוזום דיפלואיד ושיעור גבוה של גיוון karyotypic בקרב המינים השונים23. בעלי חיים אלה נחקרים גם כיום כמודל של מחלת פריון פתוגנזה והעברת, עם עניין מיוחד להציב על המחקר של שידור אנכי של מחלת בזבוז כרונית (CWD) ב cervids. החשיבות של muntjac במספר יישומי מחקר שונים עולה כי טכנולוגיות הרבייה משופרת יש להקים כדי להשלים את הליכי החקירה הנוכחיים. באופן ספציפי, מנגנונים לא פולשניים להערכת תקופת ההיריון עלולים להבהיר שינויים קריטיים בביצועי הרבייה ובצמיחה והתפתחות העובר בתנאים ניסיוניים שונים. יתר על כן, הפיתוח של הפניות מדידה עוברית בזמן אמת יהיה בעל ערך פוטנציאלי בהערכת גיל ההיריון במצבים שבהם תאריכי הרבייה לא ניתן לקבוע. מחקרים קודמים תיארו מנגנונים לשימוש במדידות עובריות, כגון אורך כתר-עכוז (CRL), עומק חזה (CD) ואורך הראש (HL) כדי להעריך את השלב המשוער של ההריון במיניםcervid 11-14, 16,17. בנוסף, חלק ממחקרים אלה קבעו גם קווים מנחים המתארים מתי אבני דרך התפתחותיות ספציפיות, כגון מינרליזציה שלד או פעימות לב עובריות, ניתן לזהות8-19. בעוד נתונים אלה עשויים להיות שימושיים כדי לעזור להנחות ניתוח אולטרסאונד הרבייה muntjac, רוב המינים cervid אחרים שנחקרו יש גודל גוף גדול בהרבה ותקופות הריון ארוכות יותר, הפחתת הערך התרגומי של מחקרים אלה עבור יישומי muntjac.
הפרוטוקול המתואר כאן מתאר אולטרה-סאונד טרנסבדומינלי של המונטג'אק הנשי לצורך אבחון וניטור הריון. ביצוע מוצלח של פרוטוקול זה יכול להקל על גילוי הריון מוקדם והערכה של צמיחה והתפתחות העובר. טכניקה זו יש יישומים בעלי ערך בניהול מחקרים לחקור רבייה, בפיתוח הרחם, או שידור אנכי של מחלות זיהומיות במודל cervid קטן עשוי גם להיות שימושי למטרות קליניות בפעולות רבייה בשבי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. הכנה פרוצדורלית
כל ההליכים בבעלי חיים המתוארים נבדקו ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת קולורדו, האגודה להערכה והסמכה של טיפול בבעלי חיים במעבדה (AAALAC), Intl. מוסד מוכר.
- לפני הבדיקה, לשתק בעלי חיים באמצעות פרוטוקולי הרדמה או הרדמה מתאימים כדי לספק רגיעה ולאפשר מיצוב מתאים. מטפל אחד מרסן את הצבי בזמן שאדם שני מנהל את ההרדם לבעל החיים.
שים לב: המחברים מצאו את השילוב הבא כדי לספק הרדמה יעילה במין זה: butorphanol (0.45 מ"ג / קילוגרם), אזפרון (0.035 מ"ג / קילוגרם), ו medetomidine (0.04 מ"ג / קילוגרם), מנוהל תוך שרירי העכוז. - לאחר שהאלב הגיע למישור של הרדים המאפשר טיפול תואם, מקם אותה בנסיכה הגבית או הצדדית על שולחן בדיקה או בתוך שוקת V. הרימו מעט את הראש, הצוואר והת'ורן (כ-20-30 מעלות) כדי להפחית את הסיכון להתחדשות ושאיפה לתכולת רומן ולאפשר אוורור תקין במהלך ההליך.
שים לב: ברוב cervids או מינים מהורהרים אחרים, אולטרסאונד בטן מבוצעת בבעלי חיים עומדים; עם זאת, הגודל הקטן והשיקולים ההתנהגותיים של מין זה דורשים הרדמה כבדה לבדיקה ומיצוב עצם החזה ולכן קשה יותר ועשוי למנוע טכניקת הדמיה יעילה. מיקום החיה באמצע הדרך בין עצם החזה לבין כבידה לרוחב עשוי להיות אידיאלי להפחתת הסיכון של regurgitation ו hypoventilation ויש לשקול במידת האפשר. בכל תנוחה שכיבה, חיוני לעקוב בזהירות אחר נשימות בעלי החיים ולהפסיק לאלתר את הבדיקה ולהציב את החיה בנסיכות קשה אם צוין regurgitation או hypoventilation. - במידת הצורך, קליפ שיער מאזור הבטן להיבדק על מנת להשיג מגע הולם בין טביעת הרגל של המתמר לבין העור.
שים לב: בהריון מוקדם, ראיות של הריון ניתן לזהות בבטן caudal ליד בלוטות החלב. אזור זה של muntjac הוא בדרך כלל חסר שיער, ולכן גילוח לא ניתן לציין בשלב זה. ככל שהעובר גדל והרחם מתפזר כדי לתפוס תנוחה גולגולתית יותר בבטן, יהיה צורך בגזירת השיער לפני ההדמיה. יש להקפיד להימנע מגרימת טראומה מכנית כלשהי לעור, כולל חתכים מסכיני גילוח או פגיעה תרמית מקוצץ חשמלי. - מקם את יחידת האולטרסאונד במקום המאפשר לטכנאי לדמיין בקלות את הצג תוך ביצוע הבדיקה עם ידו הדומיננטית. הזן מידע זיהוי בעלי חיים (שם, מספר זיהוי וכו ')לתוך המערכת כדי לתייג באופן אוטומטי תמונות שמורות ולולאות וידאו.
2. בדיקת אולטרסאונד רבייה טרנסבדומינלית
- יש למרוח כמות נדיבה של ג'ל צימוד אקוסטי על הבטן הקאודלית.
- מניחים מתמר ליניארי מעוקל 5-10 MHz על העור של הבטן caudal, מיד גולגולת הערווה, ולהזיז אותו לאט בכיוון גולגולתי כדי להעריך את המבנים בתוך חלל האגן. סרוק את הרבעים השמאליים והימניים של הבטן הקאודלית כדי להעריך את שתי הקרניים של הרחם הדו-קרן של המונטיאק.
שים לב: אולטרסאונד בטן מקיף כרוך בהערכה של כל הקרביים הבטן, כולל הכבד, הכליות, הטחול, מערכת העיכול, שלפוחית השתן, ודרכי הרבייה. לצורך פרוטוקול זה, רק בדיקה של הריון תידון בפירוט; עם זאת, המראה הרגיל של איברי בטן אחרים caudal צריך להיות מוכר כמו מבנים אלה צפויים להיתקל במהלך המחקר. האיברים הנפוצים ביותר במיקום זה כוללים קטעים של מערכת העיכול, שלפוחית השתן, ואת מערכת הרבייה. המעי הגס והמעי הדק מזוהים על ידי המראה השכבתי האופייני של דופן המעי. לומן עשוי או לא יכול להיות מבוטא בהתאם לסוג וכמות התוכן, אשר עשוי לכלול נוזלים, גז, רירי, או חלקיקי מזון. ייתכן שיהיה קשה לזהות את שלפוחית השתן אלא אם כן היא נפוחה בשתן, והשכבות של דופן שלפוחית השתן פחות ברורות באופן משמעותי מאלה של המעיים. מלבד הרחם, השחלות ניתן למצוא גם על אולטרסאונד של מערכת הרבייה של muntjac הנשי. השחלות יופיעו כמבני ביציות ליד מוט הקאודל של הכליות, ומראהן עשוי להשתנות במהלך מחזור האסטרוס. נוכחותם של זקיקים בוגרים ומלאי נוזלים מרובים בתוך קליפת המוח מרמזת על אסטרוס.
שים לב: על ידי סיבוב ו/או "פנינג" ראש הסריקה של המתמר, ניתן להעריך מבנים במישורים רוחביים או קשתיים.- במידת הצורך כדי להבדיל בין רחם גרוויד לבין שלפוחית השתן, רוקן את שלפוחית השתן באופן ידני על ידי הפעלת לחץ עדין על הבטן הקאודלית או על ידי הנחת קטטר שתן וחזרה על הסריקה.
שים לב: ביטוי ידני של שלפוחית השתן יש לנסות רק כאשר החיה נמצאת במצב קשה או זקוף, אשר מקל על אוריינטציה טבעית יותר של הקרביים הבטן ומפחית את הסיכון לטראומה למבנים אחרים. הרחם עשוי גם להיות מובחן משלפוחית השתן על ידי הערכת עובי דופן האיבר. העובי האופייני של שלפוחית השתן נפוחה בינונית הוא כ 1.4 מ"מ24, בעוד המחברים מצאו כי הקיר השרירי יותר של הרחם gravid ב muntjac בדרך כלל מודד בין 7-8 מ"מ.
שים לב: הריון מוקדם קשה לאבחן באופן סופי בשל חוסר מבנים עובריים לזיהוי, ולמעשה האינדיקציה הראשונה להריון עשויה פשוט להיות כיס נוזלי קטן בבטן הקאודלית. אם יראו אותו בשלב זה, העובר המתפתח יופיע כהיפרכואי, אוב למבנה אמורפי בתוך הרחם (איור 1).
- במידת הצורך כדי להבדיל בין רחם גרוויד לבין שלפוחית השתן, רוקן את שלפוחית השתן באופן ידני על ידי הפעלת לחץ עדין על הבטן הקאודלית או על ידי הנחת קטטר שתן וחזרה על הסריקה.
- בצעו התאמות בעומק, בתדירות וברווח לפי הצורך כדי לשפר את הניגודיות ואת פרטי התמונה.
הערה: תדרים גבוהים יותר משויכים לאורכי גל קצרים יותר, הנחוצים לשיפור רזולוציית התמונה. רוב המתמרים מסוגלים לפעול בטווח של תדרים (לדוגמה, 6-10 מגה-הרץ)24. ניתן לכוונן את התדירות באמצעות פקדי הסורק ביחידת האולטרסאונד, והגדלת התדירות תגרום לתמונה ברורה יותר. הגדלת התדירות בו זמנית מקטין את עומק חדירת גל קול; לכן, הפחתת התדירות עשויה להיות נחוצה כדי לדמיין מבנים עמוקים יותר, אבל הרזולוציה עלולה להיות בסכנה24. מסיבה זו חשוב לבחור את התדר הגבוה ביותר האפשרי כדי להגיע לעומק הרקמה הרצוי. התאמות לבקרות הרווח ישנו את ההגברה של גלי קול החוזרים אל המתמר מהרקמות וישפיעו על מידת הניגוד בתמונה24. הרווח צריך להיות מוגדר לנקודה שבה ניגודיות אופטימלית בין רקמות hyperechoic ו hypoechoic מושגת, והגדרות אלה ייתכן שיהיה צורך להתאים בהתאם למבנים כי הם להיות בתמונה.
3. קבלת מדידות עובריות
הערה: גיל ההיריון במינים רבים של בעלי חיים מקומיים ניתן להעריך באמצעות טווחי התייחסות הוקמה למדידות עובריות המתקבלות מבדיקת אולטרסאונד. המדידות הנפוצות ביותר כוללות אורך ישר של כתר עכוז (SCRL), עומק חזה (CD) ואורך הראש (HL)17. בעוד נתונים מספיקים עדיין לא נאספו כדי לפתח הנחיות גיל הריון אמין צבי muntjac של ריבס, מדידות ניתן לאסוף על מנת להתחיל להקים הפניות אלה. קצב הלב העוברי (FHR) הוכח במינים אחרים של cervid ו מהורהר להגדיל באופן ליניארי כמו ההריון מתקדם לנקודה מסוימת (בדרך כלל סביב יום 60 של ההריון), שבו קצב הלב מתחיל לרדת17. FHR עשוי לשמש להערכת גיל ההיריון בשילוב עם תצפיות אולטרסאונד אחרות, אולם הוא נפוץ יותר כמדד של הכדאיות העוברית17,24. FHR חושב במונטג'אק של ריבס כבר 35 ימים לאחר ההזדווגות שנצפתה.
- כדי למדוד SCRL, לאתר את הרחם על הצג ולבצע התאמות עדינות למיקום של מתמר עד תצוגה קשתית של העובר כולו מתקבל (איורים 2 ו -3). להקפיא את התמונה ולמדוד את המרחק בין ההיבט הגבי ביותר של הגולגולת ואת הבסיס של הנביאה (איורים 2 ו -3).
- כדי למדוד תקליטור, לקבל תצוגה קשתית של העובר (אותה תמונה עשויה לשמש למדידת SCRL) ולמדוד את המרחק בין ההיבטים הגביים הגחוניים של בית החזה (איורים 2 ו -3).
- כדי למדוד HL, באמצעות אותה תצוגה קשתית של העובר כמתואר במדידות SCRL ותקליטורים, למדוד את המרחק מן הסמל העורפי לבסיס האף (איורים 2 ו -3).
- כדי לחשב את קצב הלב העוברי, לזהות את הלב בתוך חלל בית החזה של העובר על ידי הדמיה התכווצויות קצביות שלה. לחשב את הדופק על ידי ספירת מספר הצירים (פעימות לב) המתרחשים בתוך 1 דקות של זמן.
שים לב: אם יחידת אולטרסאונד בשימוש יש יכולות דופלר, תכונה זו עשויה להיות מועסקת כדי לסייע עוד יותר להבחין את הלב מתנועות עובריות לא ספציפיות אחרות. - ודא שכל התמונות השמורות ולולאות הווידאו כוללות את כל המידע המזהה הדרוש, כולל שם בעל חיים או מספר, תאריך, מדידות ותוויות מבנה מתאימות.
4. מסקנות פרוצדורליות והתאוששות
- הסר את כל שאריות ג'ל מגע אולטרסאונד מהבטן של החיה באמצעות מטלית רכה או מגבות נייר. יש לנקות את הג'ל מהמתמר לפני האחסון.
- אם משתמשים בפרוטוקול ההרדמה המתואר בשלב 1.1, יש לנהל את atipamezole תת עורית במינון של 0.25 מ"ג/ק"ג כדי להפוך את ההשפעות של מדטומידין. אם באמצעות פרוטוקול סם שונה שבו אנטגוניסט זמין, לנהל סוכן זה לבעל החיים על פי המינונים שפורסמו בסיום ההליך כדי להאיץ את ההתאוששות.
- מניחים את muntjac על משטח מיטה רך ב recumbency עצם החזה, עם הראש מורם מעט כדי להפחית את הסיכון של regurgitation ושאיפה של תוכן rumenal. לפקח על החיה מקרוב עד התאושש באופן מלא ומסוגל להסתובב סביב המתחם ללא סיוע.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
באמצעות הפרוטוקול המתואר כאן, הריון יכול להיות מאובחנים ומנוטרים צבי muntjac של ריב עם טכניקות פולשניות מינימלית. נקודת הזמן המוקדמת ביותר כי ההריון יכול להיות מזוהה על ידי המחברים היה כ 35 ימים לאחר התנהגות הזדווגות שנצפו.
בשלבים המוקדמים של ההיריון, ההריון אובחן על ידי הדמיה של רחם מלא נוזלים שזוהה כחלל אנכרואלי בבטן הקאודלית. בתוך הרחם, העובר המתפתח הופיע כמבנה ביודואיד היפרכואי עם מעט תכונות הניתנות לזיהוי (איור 1). ככל שההריון התקדם, מבנים עובריים התבררו ואבחון חד משמעי יכול להתבצע בעקבות התבוננות של מינרליזציה השלד ופעימות לב עובריות (איורים 2 ו -3).
מדידות עובריות ניתן להשיג ולהשתמש בהם כדי לקבוע הנחיות התייחסות להערכת גיל ההיריון במקרים שבהם תאריך רבייה מדויק אינו ידוע, אם כי עדיין לא פיתחנו מערכת זו במלואה muntjac. אורך ישר של כתר-עכוז (SCRL), HL ו- CD הן מדידות עובריות סטנדרטיות המשמשות בדרך כלל להערכת גיל העובר במינים רבים17, ומדידות אלה התקבלו מתמונות אולטרסאונד של הריונות muntjac באמצעות הפרוטוקול המתואר כאן. את כל שלוש המדידות הללו ניתן להשיג מאותה תמונה קשתית הממוקמת כראוי (איורים 2 ו -3), אך ניתן להשתמש בתמונות נפרדות אם העובר כולו אינו מסוגל להיתפס בתצוגה קשתית אחת. בעתיד, טכניקות אלה יכולות לשמש גם כדי לזהות וריאציות בצמיחה ופיתוח שנצפו בתנאים ניסיוניים שונים כדי לקבוע את הכדאיות העוברית.
איור 1. תמונת אולטרסאונד המדגימה הריון מוקדם בצבי מונטג'אק של ריבס. האילה במחקר זה שוכנה עם muntjac זכר שלם במשך 46 ימים, אולם תאריך רבייה מדויק אינו ידוע. תכונות עובריות אינן ניתנות להבחנה בשלב זה של ההריון.
איור 2. תמונת אולטרסאונד של אותו הריון המתואר באיור 1, 91 ימים לאחר כניסתה של האילה לכסף. (תקליטור - עומק החזה, HL - אורך הראש, P - שליה, SCRL - אורך ישר כתר-עכוז).
איור 3. תמונת אולטרסאונד של הריון שני המדגים מיקום מתאים להשגת מדידות עובריות. התמונה צולמה 91 ימים לאחר הצגת האין אל הדולר. (תקליטור - עומק החזה, HL - אורך הראש, P - שליה, SCRL - אורך ישר כתר-עכוז).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
פרוטוקול זה מתאר את היישום של אולטרה סאונד transabdominal לאבחון הריון בצבי muntjac של ריבס. עולה בקנה אחד עם מחקרי אולטרסאונד אחרים, ציוד מתאים ומיומנות טכנית הם הכרחיים לבדיקת הרבייה מוצלחת של האימונית muntjac. סקירה מדוקדקת של אנטומיה בסיסית של יונקים, העקרונות הפיזיים של אולטרסאונד אבחון, ואת המראה האולטרה-סאונד האופייני של הקרביים הבטן יסייעו בהפחתת אבחנות מוטעות. יתר על כן, בחירת מתמרים מתאימים והיכרות עם פקדי המכשור והסורק היא קריטית להשגת תמונות באיכות גבוהה ופרשנות מדויקת.
עבור אולטרה-סאונד לא מנוסים רבים, ממצאי הדמיה הם סיבה נפוצה לרזולוציית תמונה ירודה והערכה לא מדויקת של מבנים. הדהוד בממשק מתמר העור הוא אחד הממצאים הנפוצים ביותר נתקל אולטרסאונד בטן וטרינרית, והוא יכול להיות מופחת באופן משמעותי על ידי ביטול נוכחות של גז בין שני משטחים. הסרת שיער נאותה ואת היישום הנדיב של ג'ל אקוסטי לעור צריך להיות מספיק כדי למזער את ההשפעה של חפץ זה. דיונים על חפצי הדמיה אחרים ניתן למצוא בטקסטים שונים של אולטרה-סאונד אנושי ווטרינרי, ולכן לא יידונו בפירוט רב יותר כאן; עם זאת, ידע כללי של תופעות אלה יאפשר האולטרה סונוגרף לשלוט בהם בצורה יעילה יותר24.
אם עורכים בדיקת רבייה, יש להבין כי הרחם עשוי להיות קשה לדמיין בעל חיים נורמלי, nonpregnant. בתחילת ההריון, לומן של הרחם עשוי להיות מזוהה כמו היפוכוזה לחלל אנכואי כמו שק ההריון צורות. בשלב זה muntjac, הרחם בדרך כלל ניתן למצוא על ידי סריקה ברמה של, או מעט caudal, בלוטות החלב. לפני מינרליזציה השלד או את המראה של פעימות לב עובריות, ההריון עשוי להיות מאובחנים בטעות בנוכחות תנאי רבייה אחרים הגורמים נוזל לצבור ברחם, אשר עשוי לכלול פתולוגיה כגון פיומטרה, הידרומטרה, או mucometra. אבחנות אולטרסאונד צריך להתבצע בשילוב עם הערכה קלינית מלאה של החיה לפני הסתעה להליך. בהריון מוקדם, המושג יופיע כמבנה כדורי לביצים, היפרכולוגי בתוך שק מי השפיר. נקודות זמן התפתחותיות ספציפיות אינן מאופיין היטב במין זה; עם זאת מינרליזציה השלד ותנועת לב העובר נראה לזיהוי עקבי בערך 8 שבועות לאחר ההזדווגות.
בתנאים אידיאליים, אולטרסאונד transabdominal יכול להיות כלי שימושי מאוד להערכת מבני הרבייה במינים רבים, כולל muntjac של ריבס. הערך של טכניקה זו, לעומת זאת, תלוי מאוד ביכולות הספציפיות של מתקני הדיור של בעלי החיים. שלא כמו מנגנונים פסיביים יותר של גילוי הריון, כגון התבוננות חזותית של התנהגות הזדווגות והתפרקות הבטן הבאים של האיילים, אולטרסאונד דורש ריסון פיזי ו / או כימי של החיה לתקופה של זמן שנמשך 5-10 דקות או יותר. במתקנים רבים הדבר אינו אפשרי או מעשי, ויש לשקול את הצורך בבחינה על סמך המטרות הספציפיות של המחקר. בנוסף, מצבים פיזיולוגיים או פתולוגיים מסוימים עשויים להציע כי אולטרה סאונד הוא התווית בבעלי חיים מסוימים בשל ההשפעות שעלולות להזיק של מצוקה הקשורים לכידה ו sedation. חשוב להעריך את התאמתו של כל בעל חיים לבדיקת אולטרסאונד לפני תחילת המחקר, ויש להתייעץ עם וטרינר בשלבי התכנון של פרויקטים אלה.
השיטות הנוכחיות לגילוי הריון במונטג'אק של ריבס ובמינים אחרים של חיות בר הן בדרך כלל פסיביות בטבע (התבוננות בהתנהגות ההזדווגות והתפרקות הבטן). פרוגסטרון בסרום או רמות גליקופרוטאין הקשורות להריון ניתן למדוד כדי לאשר את האבחנה18,25, אולם התוצאות של מבחנים אלה אינם מספקים כל מידע לגבי שלב ההריון או הכדאיות העוברית. אולטראסאונד מציע את היתרון של מתן הערכה בזמן אמת של מצב הרבייה עם דיוק דומה או גדול יותר מזה של הורמון הסרום מבחנים18, תוך שמירה על פולשנות מינימלית ומצוקה לבעלי החיים. בפעולות שבהן תאריך הרבייה קשה או בלתי אפשרי לקבוע, אולטרסאונד עשוי לספק מנגנון מדויק יותר שבאמצעותו להעריך את שלב ההריון מאשר מבחנים הורמונליים, גם בהיעדר שולחנות הריון שפורסמו. יתר על כן, ריסון פיזי וכימי לבדיקת אולטרסאונד נראה לגרום מצוקה מינימלית muntjac בריא ומספק הזדמנות אידיאלית לבצע בדיקה גופנית יסודית ולאסוף דגימות נוספות (דם, שתן, וכו ')עבור הערכות בריאות כלליות.
הערכת גיל ההיריון באמצעות מדידות אולטרה-סונוגרפיות הוקמה במינים רבים, כולל בקר1, כבשים2,3, עזים4וסוסים5, ותוארה במספר מצומצם של מינים סרווידיים גםכן 8-19. בהיעדר תאריכי רבייה מדויקים או שולחנות הריון מבוססים, ניתן להעריך את גיל העובר של המונטיאק של ריבס רק בערך בהתבסס על פרמטרי התפתחות העובר המתוארים למינים אחרים. מטרה ספציפית של העבודה המתוארת כאן היא לקבוע הנחיות רשמיות יותר להזדקנות העובר במין זה. עם נתונים נורמטיביים מספיק במקום, יישומים עתידיים של אולטרה סאונד במושבה זו יכללו זיהוי חריגות בהתפתחות העובר בנוכחות משתנים ניסיוניים שונים והערכת הכדאיות העוברית. בנוסף, רגישות וספציפיות של אולטרסאונד transabdominal ניתן לקבוע בהשוואה למנגנונים נפוצים אחרים לגילוי הריון במינים cervid.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
למחברים אין מה לחשוף.
Acknowledgments
המחברים מבקשים להודות לג'נט הייז-קלוג וקלי אנדרסון על ניהול מושבת המונטג'אק, ד"ר אלן יאנג על שהכירו לנו את המונטיאק ומר קליב טדפורד מ-Cervid Solutions Inc. על שסיפקו את המונטג'אק לפרויקט זה. עבודה זו נתמכה על ידי מענק NIH R01AI093634.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Butorphanol tartrate (Torbugesic) (0.45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, Iowa | NADA 135-780 | |
| Azaperone tartrate (0.035 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomidine HCl (0.04 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Ultrasound contact gel | Medline, Mundelein, Illinois | MDS092005 | |
| Atipamezole hydrochloride (Antisedan) (0.25 mg/kg) | Orion Corporation, Espoo, Finland | NADA 141-033 | |
| V-trough (optional) | N/A | N/A | Animal may be supported in dorsal recumbency on a standard examination table or other surface without the use of a V-trough |
| Electrical clippers or razor blades for hair removal | Oster, McMinnville, Tennessee | 78005-140 | |
| Ultrasound system: Ibex Pro portable ultrasound | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | Ibex Pro | |
| 5-10 MHz transducer: CL3.8 5-2.5 MHz 60 mm curved linear array | E.I. Medical Imaging, Loveland, CO | 290420 | |
| 3 ml syringes | Covidien | 1.18E+09 | |
| 22 G needles | Covidien | 8.88E+09 |
References
- White, I. R., Russel, A. J., Wright, I. A., Whyte, T. K. Real-time ultrasonic scanning in the diagnosis of pregnancy and the estimation of gestational age in cattle. Vet Rec. 117 (1), 5-8 (1985).
- Sergeev, L., et al. Real-time ultrasound imaging for predicting ovine fetal age. Theriogenology. 34 (3), 593-601 (1990).
- Aiumlamai, S., Fredriksson, G., Nilsfors, L. Real-time ultrasonography for determining the gestational age of ewes. Vet. Rec. 131 (24), 560-562 (1992).
- Lee, Y., et al. Ultrasonic measurement of fetal parameters for estimation of gestational age in Korean black goats. J. Vet. Med. Sci. 67 (5), 497-502 (2005).
- Renaudin, C. D., Gillis, C. L., Tarantal, A. F., Coleman, D. A. Evaluation of equine fetal growth from day 100 of gestation to parturition by ultrasonography. J. Reprod. Fertil. Suppl. (56), 651-660 (2000).
- Lopate, C. Estimation of gestational age and assessment of canine fetal maturation using radiology and ultrasonography: a review. Theriogenology. 70 (3), 397-402 (2008).
- Gatel, L., Rosset, E., Chalvet-Monfray, K., Buff, S., Rault, D. N. Relationships between fetal biometry, maternal factors and birth weight of purebred domestic cat kittens. Theriogenology. 76 (9), 1716-1722 (2011).
- Mulley, R. C., English, A. W., Rawlinson, R. J., Chapple, R. S. Pregnancy diagnosis of fallow deer by ultrasonography. Aust. Vet. J. 64 (8), 257-258 (1987).
- Willard, S. T., Sasser, R. G., Jaques, J. T., White, D. R., Neuendorff, D. A., Randel, R. D. Early pregnancy detection and the hormonal characterization of embryonic-fetal mortality in fallow deer (Dama dama). Theriogenology. 49 (4), 861-869 (1998).
- Willard, S. T., Petty, S. J., Sasser, R. G., White, D. L., Randel, R. D. Pregnancy detection and the effects of age, body weight, and previous reproductive performance on pregnancy status and weaning rates of farmed fallow deer (Dama dama). J. Anim. Sci. 77 (1), 32-38 (1999).
- Lenz, M. F., English, A. W., Dradjat, A. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and foetal ageing in fallow deer. Aust. Vet. J. 70 (10), 373-375 (1993).
- White, I. R., McKelvey, W. A., Busby, S., Sneddon, A., Hamilton, W. J. Diagnosis of pregnancy and prediction of fetal age in red deer by real-time ultrasonic scanning. Vet. Rec. 124 (15), 395-397 (1989).
- Bingham, C. M., Wilson, P. R., Davies, A. S. Real-time ultrasonography for pregnancy diagnosis and estimation of fetal age in farmed red deer. Vet. Rec. 126 (5), 102-106 (1990).
- Wilson, P. R., Bingham, C. M. Accuracy of pregnancy diagnosis and prediction of calving date in red deer using real-time ultrasound scanning. Vet. Rec. 126 (6), 133-135 (1990).
- Revol, B., Wilson, P. R. Ultrasonography of the reproductive tract and early pregnancy in red deer. Vet. Rec. 128 (10), 229-233 (1991).
- Revol, B., Wilson, P. R. Foetal ageing in farmed red deer using real-time ultrasonography. Anim. Reprod. Sci. 25 (3), 241-253 (1991).
- Yanagawa, Y., et al. Fetal age estimation of Hokkaido sika deer (Cervus nippon yesoensis) using ultrasonography during early pregnancy. J. Reprod. Dev. 55 (2), 143-148 (2009).
- Savela, H., Vahtiala, S., Lindeberg, H., Dahl, R. E., Beckers, J. F., Saarela, S. Comparison of accuracy of ultrasonography, progesterone, and pregnancy-associated glycoprotein tests for pregnancy diagnosis in semidomesticated reindeer. Theriogenology. 72 (9), 1229-1236 (2009).
- Vahtiala, S., Sakkinen, H., Dahl, E., Beckers, J. F., Ropstad, E. Ultrasonography in early pregnancy diagnosis and measurements of fetal size in reindeer (Rangifer tarandus tarandus). Theriogenology. 61 (4), 785-795 (2004).
- Chapman, N. G., Harris, S. Evidence that the seasonal antler cycle of adult Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) is not associated with reproductive quiescence. J. Reprod. Fertil. 92 (2), 361-369 (1991).
- Chapman, D. I., Chapman, N. G., Dansie, O. The periods of conception and parturition in feral Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi) in southern England, based upon age of juvenile animals. J. Zool. 204 (4), 575-578 (1984).
- Chapman, N. G., Furlong, M., Harris, S. Reproductive strategies and the influence of date of birth on growth and sexual development of an aseasonally-breeding ungulate: Reeves' muntjac (Muntiacus reevesi). J. Zool. 241 (3), 551-570 (1996).
- Liming, S., Yingying, Y., Xingsheng, D. Comparative cytogenetic studies on the red muntjac, Chinese muntjac, and their F1 hybrids. Cytogenet. Cell Genet. 26 (1), 22-27 (1980).
- Nyland, T. G., Mattoon, J. S. Chapter 2. Small Animal Diagnostic Ultrasound. , 2nd edition, Saunders. Philadelphia. 19-29 (2002).
- Huang, F., Cockrell, D. C., Stephenson, T. R., Noyes, J. H., Sasser, R. G. A serum pregnancy test with a specific radioimmunoassay for moose and elk pregnancy-specific protein B. J. Wildl. Manag. 64, 492-499 (2000).
