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Behavior

Behavioral Fenotipizzazione di modelli di malattia murini con la stazione Integrated Behavioral (INBEST)

Published: April 23, 2015 doi: 10.3791/51524

Summary

Monitoraggio prolungato e completo di topi in un ambiente home-cage fornisce una più profonda comprensione dei comportamenti problema in modelli murini di patologie del cervello. Questo articolo descrive la stazione Behavioral Integrated (INBEST) come componente chiave di analisi comportamentale contemporaneo.

Abstract

A causa di rapidi progressi nel campo dell'ingegneria genetica, piccoli roditori sono diventati i soggetti preferiti in molte discipline della ricerca biomedica. In studi di disturbi cronici del sistema nervoso centrale, vi è una crescente domanda di modelli murini con alta validità a livello comportamentale. Tuttavia, molteplici meccanismi patogeni e deficit funzionali complesse spesso impongono sfide per misurare in modo affidabile e interpretare il comportamento dei topi malati cronici. Pertanto, sono necessari la valutazione della patologia periferico e un profilo comportamentale in diversi punti temporali usando una batteria di test. Video-tracking, spettroscopia comportamentale, e l'acquisizione a distanza di misure fisiologiche sono tecnologie che consentono un'analisi completa, accurata e imparziale comportamento in un ambiente home-base-simile emergendo. Questo rapporto descrive un protocollo fenotipizzazione raffinata, che comprende un apparato di monitoraggio su misura (Stazione comportamentale integrato, INBEST) che si concentra su misurazioni prolungate di bauscite funzionali sic, come l'attività spontanea, cibo / assunzione di acqua e il comportamento motivato in un ambiente relativamente priva di stress. I miglioramenti tecnici e concettuali nel design INBEST possono promuovere ulteriormente la riproducibilità e la standardizzazione degli studi comportamentali.

Introduction

Progressi rapidi in ingegneria genetica nel corso degli ultimi decenni hanno portato ad una proliferazione senza precedenti di modelli animali di malattie umane. I topi hanno acquisito lo status di soggetti sperimentali primarie in scienze biomediche per diversi motivi. Dal punto di vista pratico, hanno un tasso di riproduzione ad alta, sono relativamente poco costoso, e sono facili da alloggiare. Da un punto di vista concettuale, sono geneticamente vicino agli esseri umani, possono essere geneticamente modificati con relativa facilità, e hanno endocrino, immunitario e nervoso altamente sviluppata. Oltre alle lesioni a livello genetico e cellulare, studi contemporanei di disturbi cerebrali richiedono la dimostrazione del deficit replicabili funzionali che evidenziano viso, costruire, o validità predittiva di un nuovo modello di topo 1.

Un'infezione acuta in un mammifero homoeothermic traduce spesso in risposta febbrile, che insieme con il comportamento di malattia, costituisce uno degliprincipali meccanismi di sopravvivenza 2. Acutamente animali malati mostrano alterazioni significative nel cibo / assunzione di acqua e le prestazioni in compiti riflettenti di reattività emozionale, comportamento esplorativo, e capacità di apprendimento / memoria. Queste modifiche in gran parte rappresentano ridotta attività sessuale / sociale e la conservazione di energia per reazioni immunitarie di difesa. Tuttavia, quando le condizioni acute girare cronica (come si vede in molti immunologiche, endocrine e malattie neurologiche), prestazioni comportamentale può ulteriormente peggiorare a causa di danni strutturali di vari organi, compreso il cervello 3.

Malattie neurodegenerative umane e animali sono spesso accompagnate da una costellazione di deficit neurologici e comportamentali. Pertanto, uno scopo fondamentale negli studi comportamentali degli animali cronicamente malati è distinguere effetti centrali dei deficit indotti da sintomatologia periferico. Tuttavia, la durata relativamente breve dei compiti comportamentali standard, limita la collettaion di informazioni sulle misure funzionali di base, come l'olfatto, riposo, il sonno, il cibo / assunzione di acqua, o episodi epilettici. L'inclusione di queste misure migliora profilazione comportamentale e permette una migliore interpretazione delle performance in compiti di attività esigenti.

Perfezionamenti in fenotipizzazione comportamentale di topi malati

Le carenze nella valutazione del profilo comportamentale di topi malati hanno reso necessario il monitoraggio continuo di topi singolarmente-ospitati dai PC in rapida trasformazione. Anche se diverse batterie comportamentali possono essere progettati 4, 5, elencate di seguito sono le procedure che sono stati utilizzati per stabilire con successo un modello animale di lupus neuropsichiatrico 6. Questa batteria è ripetutamente applicato in entrambi i modelli sub-cronica e cronica della malattia (Figura 1), come ad esempio decadimento cognitivo lieve e malattia di Alzheimer 7. Dopo una serie di test neurologici 8-10, acApparecchiatura ustom misura, progettato per soddisfare le esigenze di cui sopra utilizzando il monitoraggio continuo delle uscite multiple comportamentali in un ambiente domestico-gabbia arricchito, può essere impiegato. Questo approccio basato su etologico alla valutazione di attività esplorativa spontanea e comportamento motivato fornisce una comprensione più completa dei deficit di performance in altri paradigmi, come quelli riflettente di apprendimento e memoria.

Figura 1
Figura 1. Rappresentazione schematica di fenotipizzazione comportamentale longitudinale nel nostro laboratorio. La batteria comportamentale è progettata per evolvere da Lessing verso più- compiti stressanti, che si ripetono in diversi momenti per valutare gli effetti di fattori sostenuti, come la progressione della malattia, trattamento farmacologico , o reazioni immunologiche. Test INBEST e individuali vengono eseguite durante la p scuroHase, spesso over 10 e 2 ore, rispettivamente, abbreviazioni:. R - riflessi; BW - Beam Test Walking; RR - rotarod; OT - test olfattivi; SP - Test Preferenza saccarosio; SD - Step Down test; NO - Test Object Romanzo; OF - Test in campo aperto; SAB - spontaneo Alternanza Behavior; FS - test di nuoto forzato; MWM - Morris Water Maze. * - Gli aspetti della prova (ad esempio, l'ubicazione, il contesto, colore, forma) che devono essere modificati nel corso degli studi successivi per tutta corso dell'esperimento.

Continuo di video-registrazione e l'analisi del comportamento in un ambiente home-gabbia sono stati segnalati nel 2007 11. A più complesso apparato automatizzato che integra test comportamentali utilizzati negli studi con i topi autoimmune è stato presentato al 'Comportamento misura' incontrare un anno dopo 12. La stazione comportamentale integrato (INBEST, Figura 2A) è un sistema modulare, che comprises di uno stimolo leggero riparo, computer controllato, due lickometers fotocellula controllati (uno per l'acqua, una per una soluzione di interesse), un distributore automatico di cibo, una ruota in esecuzione computerizzato, e una maglia arrampicata digitalizzato. Latenze, le frequenze e le durate di comportamenti specifici vengono esaminati con il software personalizzato. Locomotore e l'attività esplorativa (ad esempio, di un oggetto o di un romanzo conspecifici non familiare) può essere valutata con il software di video-tracking (Elenco dei materiali / attrezzature), durante il sonno e dei modelli comportamentali meno frequenti, come il comportamento autolesionistico e convulsioni, può essere segnato manualmente con il software di video-tracking o pacchetti evento-registrazione dedicati. Otto completi configurazioni INBEST / video vengono utilizzati, permettendo il controllo simultaneo di 4 animali sperimentali e di controllo 4 (Figura 2B).

Figura 2 Figura 2. La stazione comportamentale integrato. (A) Rappresentazione schematica di hardware e software utilizzati nella progettazione di una scatola INBEST (L = 39 x W = 53 x H = 50 cm). (B) Otto scatole INBEST complete offrono l'opportunità di concomitante monitoraggio domiciliare-gabbia di quattro topi sperimentali e quattro di controllo. Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Variabili dipendenti comprendono misure di assunzione di cibo / acqua, la risposta alla stimolazione appetibile, l'attività ambulatoriale spontanea, arrampicata, corsa volontaria, i comportamenti legati all'ansia (ad esempio, l'esplorazione di nuovi oggetti), governare, cogliendo e dormire. Inoltre, gli stimoli visivi possono essere presentati per il condizionamento e di apprendimento paradigmi. I vantaggi di INBEST oltre test comportamentali di serie comprendono l'eliminazione di confondimento Induc effetticato da stress del trasporto, così come continua, la raccolta automatizzata di misure riflettenti di attività notturna, l'esplorazione, l'ansia legate e comportamenti depressivi-like. L'integrazione di componenti hardware sensibili con un pacchetto di video-tracking produce una ricchezza di informazioni, che consente una migliore valutazione del comportamento in relazione alla progressione di malattia cronica in modelli animali diversi. INBEST può essere usato per studiare altri disturbi cronici del sistema nervoso centrale (ad esempio, l'autismo, depressione maggiore, schizofrenia), così come in studi longitudinali concentrandosi su sviluppo neurologico, effetti comportamentali di disturbi sistemici / neoplastica, e farmacoterapia prolungata.

Protocol

Tutte le procedure sono approvate dal Comitato Animal Care McMaster University e svolta in conformità con le linee guida stabilite dal Consiglio canadese della cura degli animali.

1. Procedure generali

  1. Abituare i topi per 1-2 settimane per un 12 ore di luce / buio ciclo esistente (ad esempio, 08:00-8:00). Eseguire tutte le procedure e test durante il ciclo scuro, con RT, l'umidità e l'intensità della luce è relativamente costante.
  2. Mark o la coda-tattoo tutti i mouse per una facile identificazione numerica per un periodo prolungato e gestirli 1-2 ore ogni giorno per 5-7 giorni.
  3. Misurazioni giornaliere ripetute di temperatura rettale, il peso corporeo e assunzione di cibo / acqua per rilevare febbre potenziale e / o malnutrizione indotta da invecchiamento o il progresso della malattia. Criteri di esclusione standard includono basso peso corporeo a causa della ridotta cibo / assunzione di acqua, la postura ingobbita con pelliccia arruffata, idrocefalo, porfirina scarico intorno agli occhi, etc.
  4. Per identifdeficit neurologici y che possono confondere l'attività e le prestazioni complessive, eseguire test sensorimotorie standard come l'arto posteriore stringendo reflex 13, visual sistemazione reflex 14, geotassi prova 15, prova di cesto 16, fascio test del cammino 17-19, rotarod 20, e le prove olfattive 21.
    Nota: I risultati possono anche aiutare in analisi di correlazione con misure INBEST, più attenta selezione di altre procedure (ad esempio, Morris water maze se i topi sono ciechi, prova romanzo oggetto se i topi sono hyposmic / anosmic), riduzione del all'interno del gruppo la variabilità, e esclusione dei topi con deficit di nascita o di infezione.
  5. Pulire la plastica e apparecchiature di vetro con un disinfettante per rimuovere tracce urinarie durante il test i topi da gruppi sperimentali e di controllo in modo alternato.

2. Stazione Integrated Behavioral (INBEST) Procedura

  1. Casa-cage istituito
    1. Riempire dispenser cibos con 20 mg pellet topo Chow.
    2. Riempire bottiglie con acqua di rubinetto.
      Nota: Una seconda bottiglia può essere riempito con una soluzione di interesse, quali saccarosio o saccarina soluzione per un test di preferenza.
    3. Pesare bottiglie per calcolare il volume consumato alla fine della sessione.
    4. Inserire beccucci bottiglia nel lickometers. Assicurarsi che l'ugello non blocca il sensore a infrarossi; se lo fa, ridurre la lunghezza del beccuccio.
    5. Mettere rifugi in un angolo selezionato della casa-gabbia.
  2. Computer impostato
    Nota: I comandi software forniti in passaggi 2,2-2,11 sono rilevanti per il pacchetto software 8.5 Ethovision XT (indicato nella lista dei materiali / apparecchiature) e di condizioni di prova nel nostro laboratorio.
    1. Illuminare la stanza con diffusa, luce fioca che è sufficiente per il video-monitoraggio, ma non riflette la casella, pavimento o parete.
    2. Aprire un progetto predefinito di video-tracking e configurare le impostazioni dell'esperimento, digitandoin dettagli rilevanti (ad esempio, la data / ora di studio, l'assegnazione di gruppo, le condizioni delle camere, ecc). Successivamente, scegliere la sorgente video appropriata (Picolo grabber Diligent), numero di arene (4), i punti di monitoraggio (centrosinistra, nose- e coda-point), e unità di misura (centimetri, secondi e gradi).
    3. Dopo aver selezionato la scheda Elenco Trial in Imposta, definire il numero di prove facendo clic sul pulsante Aggiungi Trials (1). Avanti, specificare le variabili indipendenti (ad esempio, ID del mouse, il sesso, l'assegnazione di gruppo, deformazione) utilizzando il pulsante Aggiungi variabile.
    4. Fare clic sulla scheda Impostazioni Arena e catturare l'immagine di sfondo del video in diretta. Definire i parametri della scena individuale delineando il perimetro esterno utilizzando lo strumento di disegno appropriato (come creare rettangolo / polilinea / ellisse).
    5. Avanti, aggiungere zone di interesse facendo clic sul pulsante Aggiungi gruppo Zone e illustrate le varie zone (ad esempio, piano, lickometers, dispenser di cibo, salendo a rete (ad esempio, un riparo e ruota in esecuzione, figura 2) facendo clic sul pulsante Aggiungi Hidden Zone Group. Assicurarsi che un ingresso / uscita è specificato e collegato ad ogni zona nascosta.
    6. Ripetere i passaggi 2,4-2,5 per ogni arena. Eseguire la calibrazione arena evidenziando taratura e utilizzando l'apposito attrezzo (creare scala di taratura / assi) per fornire larghezza arena e la lunghezza. Infine, confermare le impostazioni Arena facendo clic sul pulsante Impostazioni Convalida Arena.
    7. Evidenziare la scheda Impostazioni di prova di controllo e specificare start / stop le condizioni e la durata del processo. Impostare la condizione di partenza per iniziare quando la durata del punto centrale è superiore a 1 sec nell'arena. Manipolare la durata processo ampliando la casella condizione di arresto e l'impostazione del processo per terminare dopo un ritardo, come 10 ore.
    8. Nella scheda Impostazioni di rilevamento, evidenziare i metodi di rilevazione adeguati (ad esempio, Sottrazione dinamico e model-based).
    9. Avanti, afferrare l'immagine di riferimento della scena vuota facendo clic sul pulsante Impostazioni nella scheda Rilevamento e premendo il pulsante di corrente Grab.
    10. Regolare la gamma di contrasto tale che il centro, naso e rilevazione basata coda per ogni mouse sia affidabile, accurato e continuo. Per i topi albini, specificare che il mouse è più luminoso del fondo, e più scuro dello sfondo se si utilizza un ceppo pigmentato.
      Nota: Le dimensioni soggetto e frequenza di campionamento video può essere cambiato secondo la distanza tra la telecamera testa e il soggetto, così come la velocità di elaborazione del PC utilizzato (ad esempio, 14,9 fotogrammi / sec).
    11. Assicurarsi che tutte le modifiche vengono salvate prima di uscire il modulo impostazioni di rilevamento.
    12. Accendere il dispositivo di interfaccia, che è responsabile della conversione analogico eventi registrati da dispositivi di ingresso (ad esempio, interruzione del fascio infrarosso, il movimento della ruota portante ecc) in dilogs gital.
  3. Acquisizione Dati
    Nota: Le seguenti comandi software sono rilevanti per il Med PC IV di routine su misura ("wizard") che fornisce ingresso step-by-step di parametri di sessione (ad esempio, la durata di 10 ore di prova, ID del mouse, assegnazione di gruppo, ecc).
    1. Mettere ogni mouse nella casella assegnata.
    2. Sincronizzare i pacchetti video e di eventi di tracciamento premendo contemporaneamente i tasti 'record'.
    3. Uscite dalla stanza sperimentale tranquillamente.
    4. Quando il periodo di registrazione scade (ad esempio, poche ore, giorno o settimane), rimuovere i topi e restituirli alla loro casa-gabbie.
    5. Misurare pesi bottiglia e salvare tutte le registrazioni digitali su supporti digitali (hard disk, chiavetta USB portatile, DVD).
    6. Trasferimento dati grezzi di un foglio di calcolo.
    7. Salvare i file MPG per la successiva punteggio di atti comportamentali rari (ad esempio, la stereotipia, convulsioni).

Representative Results

Figura 3 esemplifica diverse letture in uno studio prolungato comportamentale con i topi CD1. I dati rappresentano le prestazioni di base (giorni 6-2 prima dell'intervento), il recupero post-chirurgico (giorni 2 a 4) ed effetti comportamentali indotti dalla prolungata somministrazione intra-cerebro-ventricolare di anticorpi cervello-reattiva (giorni da 6 a 10, dove 0 denota il giorno chirurgia). Analisi con software di eventi di registrazione rivela che il gruppo sperimentale mostra alterazioni nel comportamento Ingestive, come evidenziato da una minore frequenza di lecca bottiglia d'acqua (A), un aumento della latenza di avvicinarsi alla soluzione di saccarosio (B), e una diminuzione del consumo di cibo (C) durante il periodo di sperimentazione. In coincidenza con questi cambiamenti, mostrano anche attività ruota portante diminuita rispetto ai topi di controllo (D). Come misurato da un software di video-tracking, il gruppo sperimentale ambula anche meno in casa-gabbia (E) e preferisce trascorrere più tempo nel rifugio (F). Queste differenze di comportamento are illustrato ethograms campione (G).

Figura 3
Figura 3. variabili rappresentative in una serie di 10-hr sessioni giornaliere che illustrano il potere discriminante del sistema INBEST. Topi sperimentale (esposti agli anticorpi del cervello-reattiva oltre 2 settimane) bere meno acqua (A), prendere più tempo per affrontare la soluzione di saccarosio ( B), e consumano meno cibo (C) durante il periodo di prova. In concomitanza con questi cambiamenti, mostrano anche l'attività ridotta, come esemplificato da un numero ridotto di ruote corsa (D), diminuzione deambulazione (E) e soggiorno prolungato nel rifugio (F). Queste differenze di comportamento sono illustrati ethograms campione (G). Il pannello superiore visualizza il comportamento di un mouse sperimentale il giorno 6, caratterizzato da un comportamento Ingestive ridotta,attività ruota portante inferiore e aumento del tempo rifugio rispetto ad un mouse di controllo che riceve un veicolo (pannello inferiore). Cliccate qui per vedere una versione più grande di questa figura.

Discussion

Il rilevamento di effetti funzionali in animali dipende in gran parte dalla capacità del ricercatore di limitare la variabilità intrinseca di studi comportamentali. Pertanto, è importante meticolosamente controllo e minimizzare i potenziali confondenti che possono ridurre l'affidabilità e riproducibilità dei dati comportamentali. Allo stesso tempo, è importante rilevare che nessuna prova riflette un singolo dominio di comportamento, che la conoscenza della funzione neurologica è obbligatorio, e che il comportamento è molto sensibile a fattori di stress esterni. Se i postulati di cui sopra sono apprezzati, si può concludere che l'analisi comportamentale globale dovrebbe includere l'andamento nel tempo della risposta misurata, così come, coinvolgere i tratti funzionali di base e paradigmi che tap in aspetti comportamentali specifici. Molti di questi criteri possono essere soddisfatti utilizzando la valutazione computerizzata dei movimenti e atti comportamentali in un ambiente home-cage arricchito.

Finora, è stato Emphasized fenotipizzazione che comportamentale di modelli murini di warrants malattie umane considerazioni aggiuntive. Questo concetto si basa sulla premessa che omeostasi funzionale è contestata da fattori stressanti interni ed esterni durante l'insorgenza della malattia. Anche se tutti confonde potenziali non possono essere eliminati con l'introduzione di automatizzato, casa-gabbia fenotipizzazione, le questioni relative alle impostazioni incoerenti ambientali, lo stress del trasporto e la movimentazione ripetuta sono ridotti al minimo. Questo migliora notevolmente la coerenza e la precisione negli studi; anche piccole riduzioni variabilità possono migliorare il rilevamento degli effetti indotti da una malattia incipiente. Infatti, INBEST offre una ricchezza di informazioni, che consente una valutazione più accurata della insorgenza, cinetica, e la gravità dei cambiamenti comportamentali, così come le relazioni importanti tra i vari deficit comportamentali malattia indotta. Affidabile video tracciamento dipende da due condizioni di illuminazione. Innanzitutto, la luce diffusa è necessaria nella camera di prova per impediremanufatti da oggetti vicini riflettenti. In secondo luogo, elevato contrasto colore può essere ottenuto scegliendo un colore piano opportuno differire dal colore soggetto il più possibile. Nel nostro laboratorio, questo è realizzato utilizzando alluvione luci posizionate sotto le scatole e vassoi INBEST pavimento nero durante il monitoraggio topi albini (sfondo bianco o grigio sarebbe sufficiente se testare i ceppi pigmentati). Per quanto riguarda l'aspetto di registrazione degli eventi del INBEST, l'impostazione hardware corrente (1 scheda video Piccolo con 4 ingressi) limita 4 scatole essere utilizzate simultaneamente per PC. Questo è piuttosto piccolo numero di caselle, mentre un più adatto set-up richiederebbe 8 o addirittura 16 gabbie, e quindi 2 o 4 PC, rispettivamente. Preferibilmente, INBEST può essere utilizzato in modo continuativo per 24 ore come la casa-gabbia. Ciò consentirebbe animali abituano pienamente l'ambiente e stabilire, modelli comportamentali circadiani stabili, che possono essere analizzati in modo imparziale. Per evitare la perdita di dati del computer a causa di un'interruzione di corrente, una potenza continua suPPLY (o almeno un gruppo di continuità) devono essere fissati. Infine, per garantire la corretta valutazione della alimentazione quotidiana, va osservato che le dimensioni del pellet alimentari non deve superare la dimensione dei fori del dispenser cibo (la dimensione consigliata di una singola pastiglia cibo è 20 mg).

Essa non deve essere trascurato, tuttavia, che questa analisi dovrebbe anche includere come differenti misure INBEST possono interagire con l'altro. Ad esempio, i topi che spendono più tempo nella ruota corsa rischiano di ingerire maggiori quantità di cibo e acqua per soddisfare le loro crescenti richieste caloriche. Allo stesso modo, i topi ingestione più soluzione di saccarosio possono ridurre la loro assunzione di cibo. L'interpretazione di questi risultati può essere ulteriormente complicata dal miglioramento generale delle prestazioni nel tempo, in particolare con riferimento a Ingestive comportamento e funzionamento dell'attività della ruota. Data la loro incentivazione-proprietà, sperimentatori possono anche prendere in considerazione la limitazione dell'accesso alla soluzione di saccarosio e tegli correre ruota per contrastare il rischio di effetti di post-ingestive e eccessiva perdita di peso, rispettivamente. Tuttavia, queste preoccupazioni possono essere più rilevanti in alcuni ceppi di altri a causa diversi ceppi di topi hanno profili comportamentali dissimili. Nonostante sia funzionante sia di base e controlli di valutazione sperimentale per molte delle questioni di cui sopra, gli sperimentatori devono riconoscere che queste variabili devono essere prese in considerazione quando si interpretano i dati INBEST. Allo stesso tempo, alcuni aspetti del comportamento non possono essere studiati in ambiente domestico gabbia, necessitando quindi una combinazione con test standard per completare il profilo del comportamento dei soggetti.

Monitoraggio computerizzato all'interno standardizzato, ma ambienti flessibili sembra essere il prossimo passo logico in analisi comportamentale contemporaneo. Tale non invasivo, approccio basato etologicamente permetterà ai ricercatori di osservare il repertorio di risposte comportamentali per un periodo prolungato di tempo. Iloretically, questo può essere ottenuto studiare il comportamento in un ambiente arricchito "virtuale" che assomiglia molto un habitat naturale. Diversi gruppi di ricerca hanno descritto gli strumenti di monitoraggio di visione-based che supportano fenotipizzazione comportamentale di topi nella loro 22-25 in casa gabbia, in diadi 26, 27, o nel contesto dei grandi gruppi sociali 28. Alta precisione e risoluzione spaziale possono essere realizzati integrando video tracciamento con microchip per la raccolta simultanea e sincronizzata di dati comportamentali in un gruppo di topi 28. Telecamere termografiche in grado di rilevare calore firme possono essere combinati con microchip impiantabili o transponder per fornire la posizione relativa e le funzioni fisiologiche di base di ogni mouse (ad esempio, la temperatura del corpo, del cuore / frequenza respiratoria). Inoltre, il sistema di tracciatura 3D advanced produrrebbe riconoscimento più accurato e quantitativa di atti comportamentali. Per eseguire ripetutamente variety di test, un tale sistema dovrebbe essere automatizzato, controllato a distanza, e modulare. Ad esempio, la memoria spaziale può essere studiata in ambienti di grandi dimensioni programmando la comparsa di segnali distali sulle pareti LCD, o presentando / nascondere distributori di cibo appetibile da fondi mobili. In modo simile, nuovi oggetti potrebbero essere presentati / nascosta in momenti specifici durante lo studio. Tale fenotipizzazione computerizzato può aiutare a chiarire i determinanti genetici del comportamento, meccanismi patogenetici modelli malattia di base, e lo sviluppo di nuove strategie terapeutiche. Se il consenso è raggiunto rispetto alle condizioni di prova, la sequenza di test, così come l'hardware e il software utilizzato, ci si può aspettare che la normalizzazione tanto atteso migliorerebbe la riproducibilità di studi comportamentali e di elevare psicometria sperimentali ad un nuovo livello.

Disclosures

Pubblicazione Open Access di questo articolo è sponsorizzato da Med Associates, Inc. (St. Albans, VT).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Power control interface operating package Med Associates Inc. MED-SYST-8 Interface box and PCI card that manage all A/D data inputs and outputs
Stimulus light Med Associates Inc. ENV-221M 28 V DC, 100 mA, 2.5 cm diameter light (for presentation of a conditioned stimulus)
Head entry detector Med Associates Inc. ENV-254-CB Permits head entry detection into the pellet receptacle
Photobeam lickometer Med Associates Inc. ENV-351W Infrared sensor system for detecting beam interception by snout
Food pellets Bio-Serv F0163 Dustless precisions food pellets (20 mg rodent grain-based diet)
Food dispenser Med Associates Inc. ENV-203-20 Automated food dispensing system consisting of elevated plastic container and dispensing tube
Food receptacle Med Associates Inc. ENV-303R2W Infrared sensitive base to signal when food pellet is dispensed or collected
Climbing mesh Med Associates Inc. CT-Climbing mesh Durable metal rungs, dimensions
Med PC IV software Med Associates Inc. SOF-735 Integrates data acquisition from all electronic devices
MPC2XL v1.4 Med Associates Inc. SOF-731 Raw data transfer utility
Soft CR Pro v1.05 Med Associates Inc. SOF-722 Remote online monitoring software
Running wheel Med Associates Inc. CT-MSUB-ENV-3042-X1 Activity wheel for mice
Digital counter Med Associates Inc. ESUB-ENV-3000 LCD counter (4 counts = 1 revolution = 54.6 cm length)
Picolo Diligent frame grabber Euresys High-resolution PCI video capture card
Ethovision XT 8.5 Noldus Information Technology Video-tracking software
Camera Panasonic WV-BP334 Digital, low-lux video camera suspended from a custom-made metal stand
Video Splitter American Dynamics ADQUAD87 Integrates and digitizes inputs from 4 video cameras

DOWNLOAD MATERIALS LIST

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Comportamento fenotipo comportamentale Stazione Integrated Behavioral modelli di malattia il monitoraggio di casa-gabbia tracciabilità informatica studi cronici i topi
Behavioral Fenotipizzazione di modelli di malattia murini con la stazione Integrated Behavioral (INBEST)
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Sakic, B., Cooper, M. P. A., Taylor, More

Sakic, B., Cooper, M. P. A., Taylor, S. E., Stojanovic, M., Zagorac, B., Kapadia, M. Behavioral Phenotyping of Murine Disease Models with the Integrated Behavioral Station (INBEST). J. Vis. Exp. (98), e51524, doi:10.3791/51524 (2015).

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