Summary
Protocol
Protocole pour la dissection des ovaires chez la drosophile
- Flux mouches avec de la levure 1-2 jours avant de les disséquer pour engraisser les ovaires.
- Anesthésier mouches en utilisant flux de dioxyde de carbone.
- En utilisant une paire de pinces, sélectionnez une mouche femelle.
- Plonger la mouche femelle en PBS 1X.
- Prenez la volée à sa partie inférieure du thorax avec une paire de pincettes.
- Tirez légèrement le bas de l'abdomen avec une autre paire de pincettes jusqu'à ce les organes internes de l'abdomen sont exposés.
- Cherchez la paire d'ovaires et de le détacher des autres organes (par exemple les intestins).
- Démêler les ovarioles (si les ovaires sont à utiliser pour immunomarquage ou par hybridation in situ).
- Gardez ovaires glacée PBS 1X tout disséquer la volée suivante.
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Discussion
Ici nous démontrons une méthode de dissection des ovaires chez la drosophile. Comme la méthode de culture des différents types de cellules qui existent dans l'ovaire de drosophile n'a pas encore été définie, il est une méthode rapide pour obtenir le tissu ovarien chez la drosophile. Essentiellement, nous montrons que la dissection des ovaires chez la drosophile implique un simple de deux ou trois étapes de procédure. Le traitement ultérieur de ces ovaires disséqués dépendent de l'aval des expériences qui seront effectuées.
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Materials
Name | Type | Company | Catalog Number | Comments |
Forceps | Tool | Sigma-Aldrich | T43537 | |
Glass dissecting dish | Tool | Pyrex | 7220-85 |
References
- Costa, A., et al. The Drosophila fragile X protein functions as a negative regulator in the orb autoregulatory pathway. Dev Cell. 8, 331-342 (2005).
- Tan, L., et al. An autoregulatory feedback loop directs the localized expression of the Drosophila CPEB protein Orb in the developing oocyte. Development. 128, 1159-1169 (2001).