Summary
我们提出了一个离散的微滴样品引入系统，用于电感耦合等离子体质谱法（ICPMS）。它是基于一种廉价和一次性的微流体芯片，其生成高度单分散的液滴中的40-60微米的尺寸范围的频率范围从90至7000赫兹上。
Abstract
该协议将讨论一种一次性的低成本微流体芯片作为样品引入系统，用于电感耦合等离子体质谱法（ICPMS）的制造和使用。该芯片生产的全氟（PFH）单分散水样滴。大小，并且将水的液滴的频率可以在40至60微米的范围内和从90到7000赫兹，而变化分别。液滴从芯片喷出PFH的第二流动和喷射期间保持不变。一个定制的脱溶剂系统中删除PFH和运输液滴入ICPMS。这里，具有窄强度分布非常稳定的信号，可测，显示了液滴的单分散性。我们表明，引入系统可用于定量确定在单个牛红细胞的铁。在未来，引进设备的能力可以容易地通过的额外的微流体模块一体化延长。
Introduction
液体样品通过电感耦合等离子体质谱法（ICPMS）元素分析通常进行了使用喷雾器结合雾化室作为介绍系统1。在这个样品引入系统的样品通过喷雾器喷洒以产生多分散的气溶胶。下游雾化室是用来过滤掉大滴。这种方法是用高样品消耗（>0.3毫升分钟-1）2和一个不完整的检体搬送相关联。因而，变得不切实际的应用场合只微升的样品体积是可用的，如在生物，法医，毒理学和临床研究3。为了降低样品的消耗，喷雾器具有较小尺寸的喷嘴被开发3。但是，减小喷嘴尺寸增大堵塞时的未消化生物流体或浓盐溶液的样品必须被分析3的风险。
等。4。笔者注入液体到ICPMS在单分散的离散微滴，这是由压电电驱动微泵产生的形式。尽管这个系统并没有得到广泛的应用，它启动了离散液滴引入ICPMS概念的进一步发展。今天，压电电驱动分配系统，它可以在30，50，70和100微米的大小，并在100-2,000赫兹频率产生液滴，就可以买到。液滴可以被输送到ICPMS与接近100％的效率5。这些微滴分配器已申请了定量测定单个纳米颗粒5,6，以及表征个体生物细胞7。基于热喷墨技术8类似的系统，生物样品9的分析测试。虽然阿瓦伊拉布勒单个液滴引入系统是非常有效的，可用于小样品体积，并有望用于纳米颗粒和细胞的分析中，它们有若干限制。对于一个固定的喷嘴尺寸，液滴尺寸可以仅稍微被改变（除非自定义设置用于10）。液体（pH值，盐含量）的物理性质的变化可以改变墨滴的特性（尺寸，注射速度）。此外，这些设备是相当昂贵的，易发生堵塞，并且难以清洁。
另一种方法，以产生液滴已知在微流体液滴11的字段。近年来液滴微流控已获得的（生物）化学反应12-15和单细胞研究16,17兴趣。此外，这种技术应用于用于引入在电喷雾质谱18,19的样品和用于制备样品中的基质辅助激光解吸/ ionizatioñ质谱20,21。
最近，我们推出了基于微流体系统中ICPMS 22样品引入。我们引入系统的关键组成部分是辅助液体的液滴喷射（拉德）芯片。这个芯片包括完全的聚（二甲基硅氧烷）（PDMS）。在第一沟道结流动聚焦用于生成的水溶液样品溶液（ 图1）的单分散的液滴。为了这个目的和不混溶的载相全氟己烷（PFH）高挥发性（58-60℃，23沸点）时（ 图1）。这些PFH属性使稳定液滴的产生和快速去除载波相位。变化的样品液体影响本产生方法少的特性，相对于其他液滴发生器。液滴尺寸是可调节的在很宽的范围内，通过改变水相和PFH的流速。在下游secondarÝ结，更PFH被添加以增加流动速度，以至少1m秒-1。在此速度下，液体可以从在稳定和直喷射的芯片（ 图1），而不破坏液滴（ 图1插图）喷射。这双结设计让控制飞机的稳定性独立液滴产生。液滴被输送到ICPMS用定制的运输系统。该系统包括一个下降管和膜desolvator除去PFH。水性液滴的干燥残基被随后电离的等离子体质谱的血浆和质量检测器测量离子。芯片的前部是筒状，以确保与液滴运输系统的紧密连接。水性样品中PFH液滴的喷射是有利的，因为与喷嘴接触得以避免。这大大降低了喷嘴堵塞的危险性，用细胞悬浮液，或共同工作时这可能是一个问题ncentrated盐溶液。在拉德芯片，由PDMS制成软光刻，价格便宜（2材料成本大约为每块芯片），一次性的，容易修改。与仅需要少量的手工工作的制造组合每个实验可以用一个新的芯片来执行。因此，一个费力的清扫不需要和交叉污染最小化。
这里，拉德芯片通过软光刻和其ICPMS应用的制作进行说明。与一种水溶液和细胞悬浮液的测量实例。
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Protocol
1. SU-8主控制作（图2）
注：在一个干净的房间，以防止由于灰尘颗粒缺陷执行的SU-8母模的制造。都需要的制造中，一个晶片与微流体特征和一个没有两个晶片。
- 准备主模具的微流控芯片。首先施加粘合层的硅晶片。
- 脱水的硅晶片在200℃下10分钟。向下冷却晶片至RT，并用下面的协议将其加载到一个旋涂器和旋涂用的SU-8 2002。
- 分配约3ml抗蚀到晶片上。
- 旋转晶片以500rpm进行10秒，以分散在抗蚀剂在整个晶片。
- 旋转晶片以2000rpm进行30秒，达到大约2微米的抗蚀剂的高度。
- 删除从用丙酮浸泡过的拭子的晶片的边缘多余的抗蚀剂，以防止晶片粘附到热板中的下一个步骤。烘烤晶片60秒，在95℃的热板上。
- 露出晶片的整个用紫外光（80毫焦/厘米2，在365纳米）。后烘焙晶片120秒至95℃。
- 冷却该晶片向下，并立即使用以下协议的SU-8 2050再次旋涂在晶片：
- 旋转晶片以100rpm进行20秒（分配在该步骤期间约3ml的SU-8抗蚀剂）。
- 旋转晶片以500rpm进行10秒，以分散在抗蚀剂在整个晶片。
- 旋转晶片在3250转，30秒产生的大约40微米的抗蚀剂厚度。
- 再次，去除用丙酮浸泡拭子和软烘烤的热板上进行180秒的晶片的晶片在65℃的边缘，为360秒，在95℃下过量抗拒。
- 准备通过光掩膜STI它CKING到钠钙玻璃。参见图3为掩膜设计。使用掩模对准以暴露抗蚀剂的紫外线（160毫焦耳/厘米2，在365nm下测得）通过制备面膜。再次烘烤暴露的晶片上的热板上进行60秒，在65℃和360秒，在95℃。
- 晶片冷却至室温后，浸泡在一个玻璃培养皿填充有显影剂5分钟来开发抵抗。轻轻摇动培养皿中，除去未曝光的SU-8。冲洗晶圆异丙醇和吹干燥，氮气枪。
- 检查在显微镜下的晶片。万一未显影抗蚀遗体上的功能，又开发晶片几分钟，如在步骤1.7中所述。
- 通过烘烤晶片2小时，在200℃除去任何残余的溶剂。检查的功能，高度与台阶仪。在的情况下测得的高度不同于所述期望高度开始与该原再次山坳并且在步骤1.1.4适应的转速。
- 防止PDMS到晶片的粘附通过用50μl1 1H，1H，2H，2H -perfluorodecyltrichlorosilane的将其放置在干燥器一起在一个小瓷盘silanize它。减少在干燥器中的压力为100毫巴和孵化晶片12小时。
- 为空白的PDMS份silanize使用步骤1.10的方法的另一硅晶片。为了节省时间silanize两晶片同时在一个单一的干燥器。
2. LADE芯片制造
注：拉德芯片是由那些通过粘接24粘接 在一起的两个的PDMS片出来。第一部分包含了微流控功能。另一部分则是平坦的，并用于密封所述通道。结合在一起时，它们形成所必需的圆形状的接口与液滴运输系统的芯片。这里，在制造两部分，并测试其粘合进行说明。所有的处理步骤示于图4中 。
- 制备44克PDMS的混合40克预聚物与4克固化剂的PDMS（这将导致在高达6芯片）。脱气PDMS在干燥器中，直到它是无气泡（这将需要约20分钟）。
- 结构化半的副本成型。
- 将铸造的形式于晶片顶部和周围使用设计的指导结构咬合到位（ 见图5）。跳过捕捉到地方平PDMS减半。
- 倾大约3到脱气的PDMS为4g在铸造形式，并放置6分钟的热板上在150℃。降温在铸造的形式固化PDMS小心地提起用抹刀铸造形式晶圆。
- 为了防止该微流体通道的任何污染覆盖，这是以前在接触无线芯片的侧TH用胶带的晶片。小心切割沿的PDMS部分的边缘上的胶带，以除去过量的PDMS。
- 以制造平坦PDMS半部重复上述步骤2.2.1至2.2.3与空白硅烷化晶片。
- 胶带剥离和冲流体连接孔与活检冲床的结构化半。保护用胶带结构储存过程中。
- 通过使用固化剂24的PDMS粘接粘结PDMS部分组合在一起。
- 就拿未经处理的硅片上，旋涂用PDMS固化剂30秒在6000转。取晶片出的旋涂机的。
- 从结构化半取出磁带，并把它们与向下面临到晶圆的结构。轻轻推了PDMS的顶部以去除气泡。
- 从空白PDMS半取下胶带。取从晶片结构化减半，并手动对齐的平坦PDMS减半的顶部。轻轻挤压分一同以除去气泡并让组装芯片固化24小时在RT。不要用力的部位推到一起，因为这可能会导致渠道崩溃。
- 切割沿标志线正交用美工刀，打开出口喷嘴的喷嘴通道中的芯片的前端。使用一个对准装置，以确保一个直的切口，这是必要的直喷液。检查显微镜在微流体通道和灰尘颗粒缺陷下的芯片。放的磁带上的进气孔存储过程中保护芯片。
- 一个缓冲瓶与管路连接到一个干燥氮气源和到拉德芯片的所有入口。存50微升1 1H，1H，2H，2H -perfluorodecyltrichlorosilane在缓冲瓶的底部，并关闭它。
- 通过冲洗所有通道20分钟用携带1 1H，1H氮气流Silanize微流体通道小时，在大约为1毫升/秒的流速2小时-perfluorodecyltrichlorosilane。该芯片已准备好用于实验和可以存储在至少几个星期在RT。
3.准备测量/液滴运输系统
注：建立整个液滴运输系统上的光学表的顶部，由于必须构造一个稳定的支撑结构的安装。整个液滴运输系统的方案， 如图6所示。
- 安装自定义气旋聚（甲基丙烯酸甲酯）（PMMA）的适配器附不锈钢管垂直地一个50厘米。附加适配器氦源与质量流量控制器。附加（高速）相机和灯适配器上的另一网站的液滴可视化。
- 放置一个盒式加热器，在钢管的中部，并使用聚（氯乙烯）（PVC）管和一个可利管连接器连接到钢管的端部与膜desolvator的入口连接。
- 连接desolvator的出口与另一个PVC管，以层流适配器，它被直接连接到所述ICPMS入口。层流适配器连接到氩源与质量流量控制器和以后用它来掺和氩以实现稳定的运转状态。
- 对齐适配器以及钢管垂直用水平。如果定位不准确，就有可能导致液滴显著的损失。插入插头插入适配器，以防止气体泄漏系统预热时间期间。
- 启动所有上述气体流和使用中的设置，从表1中的设备。允许系统预热15分钟。墨盒加热器需要2个小时，温度稳定，就提前开机。
- 放置在机架上的注射泵在旋风氦适配器的高度。守之间的距离注射器泵和所述适配器尽可能短。
4.测量
注意：下面的协议被写入，因为可以使用各种溶液和悬浮液的一般术语。然而，细胞悬浮液，应稀释到<1×10 7个细胞/ ml，当进行单细胞分析，其浓度，以确保大部分液滴仅携带一个小区。用于与细胞的测量将注射器泵以一定的角度，使得所述注射器的出口点向下和安装管道中，它们指向向下的方式。
- 连接管的注射器。负载25毫升注射器用全氟己烷和1 1ml注射器与样品溶液或悬浮液。删除被困在注射器和管所有的泡沫。
- 在注射泵安装注射器，并把它们连接到该芯片的入口。使用从一开始就设置启动注射泵表1（或更高的流速）。给流3到5分钟，以稳定。
- 从与组织的芯片的端部除去过量的液体。液体现在应该从芯片在一条直线喷气弹出。如果一个直的喷射不能由用纸巾擦拭来实现更换芯片并重新开始此步骤。
- 从适配器拔下插头，并小心地将芯片插入适配器。润滑与FC-40，如果有必要的芯片。的芯片可用于在至少2小时的实验。
- 改变流速为从表1中的推荐的测量设置范围内。所述PFH更低流量不仅节省PFH而且还降低了信号的背景下，所造成的等压干扰。
- 给系统2-5分钟，以稳定（取决于所选择的流速）。优化ICPMS感兴趣的分析物的信号强度最高。
- 先后调整所有的克流在质量流量控制器ASES（参照表1中的推荐范围），直到所关注的分析物的最大信号强度来实现的。调等离子体功率和聚焦透镜的电压（根据制造商建议的范围）上以同样的方式的ICPMS。
- 设置ICPMS至10毫秒的停留时间（适用于所使用的非常ICPMS，但可以与其他仪器进行调整，以保证一个时间分辨获取）。开始记录使用制造商的协议特定的M / Z的信号。
- 在测量后，传送原始数据到数据分析程序进行评估。仓中的数据，每10毫秒中的计数定，具有一个内置的功能，并积所得对数仓中心值。配合一个高斯函数的标绘频率分布直方图的每个峰。均值和拟合的西格玛代表平均值的信号强度及其标准偏差，分别。
- 测含有所述元素或感兴趣的同时流速为样本元素的单层或多层元件标准溶液。
- 放置拉德芯片中在显微镜培养皿。为了更好的图像质量，请使用一个非圆的芯片。制造该芯片如在步骤2中所述，但使用的部分圆形一个简单的矩形铸造形式代替。
- 按照步骤4.1到4.2.1启动液滴产生。设置流率以在步骤5.1中使用的流速。
- 水性液滴附着到显微镜（20X物镜）高速摄像机的记录图像。使用图像分析软件如微滴形态和测速软件通过巴苏25，以获得从记录的平均液滴直径。
- 使用平均液滴直径来计算液滴体积，假定液滴是球形对象。
- 从这个体积和KN在微滴中的分析物的自身浓度计算对应的原子数。除以每液滴测量离子的数量由原子数，得到了检测效率。使用这种检测效率来计算未知样品的原子数。
注意：由于各个芯片之间的变化是小的22，它是没有必要重复液滴尺寸的测量为每个芯片或解决方案，如果流率保持不变。液滴大小和频率根据特定流速的列表是通过Verboket 等人 22出版。
- 从这个体积和KN在微滴中的分析物的自身浓度计算对应的原子数。除以每液滴测量离子的数量由原子数，得到了检测效率。使用这种检测效率来计算未知样品的原子数。
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Representative Results
所提出的系统可用于测量小体积的溶液或含有细胞或纳米颗粒悬浮液。单细胞的标准溶液和表征测量的实例如下所示。更多的例子可在Verboket 等 22中找到。
典型的溶液中的单个液滴的信号是一个非常短的事件。它通常持续数100微秒26。同这里使用的ICPMS（停留时间10毫秒）这样的短的信号不能被暂时解决。 图7a和图7b示出的钠标准溶液的信号和频率分布直方图。液滴到达了时间抖动> 10毫秒等离子体。该检测是不同步的。酮（201±24），2（381±34）或3（560±45）的信号的液滴1的停留时间内进行检测。低变化的信号强度显示高DRO诗人盖伊单分散性。第一拖尾峰很可能液滴片段的结果;这种分散的原因仍在调查中。
（使用铁标准溶液）中5中描述的校准方法为Fe含量的单牛/小牛红细胞悬浮在磷酸盐缓冲盐水（PBS）的判定（6-7微米直径）进行了测试。的1×10 7个细胞mL -1的该悬浮液用于确保大多数液滴仅携带一个小区。 图8示出了从细胞作为频率分布直方图的信号。平均每个细胞含有5.3±1.2×10 8的Fe原子（见Verboket 等人22）。
图1的显微照片的液滴的产生，加速和喷射。在一个流聚焦junct离子，PFH流中产生的单分散水性液滴。附加PFH是在第二结加入。随后，将液体流从通过喷嘴的拉德芯片喷出。箭头指示流动的方向。比例尺为500微米。插图：水性液滴的PFH外壳由拉德芯片脱模后的显微照片。比例尺为100μm。改编自22许可。版权所有2014美国化学学会。这个数字已被修改，从出版以来在PS迪特里希的实验室进行的研究数据。 请点击此处查看该图的放大版本。
图2.原理的SU-8的处理。首先粘合层涂。硅晶片旋涂覆的SU-8 2002，软烘烤，洪水曝光用紫外光和后烘焙。在该层的顶部上的微流体结构被制造。晶片旋涂上SU-8 2050和软烘烤。微流体结构的设计是由通过光掩模用紫外光曝光其转移到晶片。一个曝光后烘烤之后，光刻胶研发和hardbake进行。 请点击此处查看该图的放大版本。
光掩模包含以下功能的拉德芯片的图3的设计：用于铸造形式）引导的结构，b）一种用于液滴加速度入口为PFH，c）一种用于产生液滴和d）入口入口PFH对于水性样品。五）指标线切断的芯片的顶端。通道宽度F）= 40微米，G）= 20微米和H）= 25微米。 请点击此处查看该图的放大版本。
图4.拉德芯片制造工艺的流程图。首先，结构化和平坦PDMS部分用复制品成型制成。这两个片通过粘接接合。最后，该芯片的前端被切断，并在微流体通道被硅烷化。改编自22许可。版权所有2014美国化学学会。自公布这一数字已被修改。 请点击此处查看大图这个数字。
图5. LADE芯片的铝铸件形式的技术图纸。 请点击此处查看该图的放大版本。
设置（不按比例）图6.示意图。该系统由拉德芯片，适配器气旋，加热钢管，膜desolvator，和ICPMS的。 请点击此处查看该图的放大版本。 。
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图7（A）的从1毫克千克-1钠标准溶液制成的液滴的信号。（B）的频率分配这些信号的直方图。在10毫秒住之一（黄色）的时间信号，2（红色）或三个（蓝色）的液滴被记录。平均值和信号的标准偏差被拟合高斯函数确定的。使用的流量为0.5，50，和60微升分钟- 1水样中，PFH液滴产生，PFH液滴的加速，分别为。 请点击此处查看该图的放大版本。
图8.频率分布的56铁+直方图信号GE由红血细胞nerated。平均数和信号的标准偏差通过拟合高斯函数确定。所使用的流速为2次，80次和80微升分钟- 1细胞悬浮液，PFH液滴的产生，和PFH液滴加速度，分别。
| He气的流速 | 0.6-0.8 L分-1 | |
| 墨盒加热器 | 30瓦 | |
| Desolvator膜温度 | 160℃ | |
| Desolvator吹扫气体流量 | 3-4升分钟-1 | |
| 氩气流量 | 0.1升分钟-1 | |
| ICP等离子电源 | 1300W¯¯ | |
| 采样流量 | 启动 | 1微升分钟-1 |
| 测量 | 0.3-15微升分钟-1 | |
| PFH液滴产生流量 | 启动 | 60微升分钟-1 |
| 测量 | 35-80微升分钟-1 | |
| 的PFH滴加速流量 | 启动 | 60微升分钟-1 |
| 测量 | 35-80微升分钟-1 |
表1.启动设置和推荐的ICPMS和注射泵测量设置。
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Discussion
虽然芯片的制造中是非常可靠的存在需要特别注意的制造过程中的一些关键点。首先，在组装过程中的清洁是非常重要的，以防止该芯片受到灰尘的污染。灰尘可阻断通道，并防止了稳定的液滴的产生。其次，它是特别重要的是，尖端被切割垂直于喷嘴通道。切口的角度强烈影响的喷射角度。如果液体被喷射在一个角度上，会引起喷射的液滴的损失。
当构建设置确保它是稳定的。金属管和适配器的垂直对齐是很重要的。另外，在测量有几点需要特别注意。芯片到适配器的插入，必须小心进行。可能发生的是在插入过程中的射流被破坏并停止。对于细胞的位置和测量奥里注射器泵和管道的ntation是重要的。其适当的放置可以减少沉淀的细胞在注射器和油管。
在拉德芯片这里介绍了在现有的商业液滴发电机几个优点。该系统是更健壮，提供了一个更宽的液滴尺寸范围，这可以通过该通道的几何形状的变形例被进一步扩展，并且是一次性的。单一用途的设备是具有用于样品与盐或固体残留物的含量高的分析特别感兴趣，因为例如纳米颗粒或细胞的悬浮液，其中可以堵塞微小通道，并且不能总是容易地洗掉。由拉德生成到该MS单个微滴的传输仍是在我们的系统中的限制步骤，并且必须进一步优化。目前液滴的传输组件，虽然消除了PFH蒸气，否则会产生额外的光谱和非光谱干扰，导致等离子的不稳定性，但STILL结果在微滴到达在MS和一个不完整的微滴输送的高时间抖动。相较于市售液滴导入系统的这个设置的交通系统需要更多的设备。目前芯片是专为只进样。然而，随着设计先进引入轻微的变化和样品制备步骤云被芯片上实现， 例如 ，稀释27-29，超快混合30，化学反应31，分离32-34，或细胞分选35,36。根据先进引进装置我们理解例如引入样品和标准液滴的顺序或并行地在单个芯片。这将增加吞吐量和提高定量分析的精度。
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Silicon wafer 100 mm | Si-Mat (Kaufering, Germany) | ||
| SU-8 2002 | Microchem Corp. (Massachusetts, U.S.A.) | ||
| SU-8 2050 | Microchem Corp. (Massachusetts, U.S.A.) | ||
| Acetone | Merk VWR (Darmstadt, Germany) | 100014 | |
| MR-developer 600 | Microresist Technology GmbH (Berlin, Germany) | ||
| Isopropanol | Merk VWR (Darmstadt, Germany) | 109634 | |
| 1H,1H,2H,2H-perfluorodecyltrichlorosilane | ABCR-Chemicals (Karlsruhe, Germany) | AB111155 | |
| Sylgard 184 silicone elastomer kit (PDMS) | Dow Corning (Michigan, U.S.A.) | 39100000 | |
| Perfluorohexane 99% | Sigma-Aldrich (Missouri, U.S.A.) | 281042 | |
| FC-40 | ABCR-Chemicals (Karlsruhe, Germany) | AB103511 | |
| Phosphate-buffered saline | Life Technologies (Paisley, U.K.) | 10010-015 | |
| Red blood cells in phosphate-buffered saline | Rockland Immunochemicals Inc. (Pennsylvania, U.S.A.) | R400-0100 | |
| Single-element standard solutions Na, Fe | Inorganic Ventures (Virginia, U.S.A.) | ||
| Multielement standard solution | Merck Millipore (Massachusetts, U.S.A.) | IV | |
| Nitric acid | Sub-boiled | ||
| Ultrahigh-purity water | Merck Millipore (Massachusetts, U.S.A.) | ||
| Hot plate HP 160 III BM | Sawatec (Sax, Switzerland) | used for wafer preparation | |
| Spin modules SM 180 BM | Sawatec (Sax, Switzerland) | used for wafer preparation | |
| High resolution film photomask | Microlitho (Essex, U.K.) | ||
| Step profiler Dektak XT advanced | Bruker (Massachusetts, U.S.A.) | ||
| Hot plate MR 3002 | Heidolph (Schwabach, Germany) | used for replica molding | |
| 1.5 mm biopsy puncher | Miltex (Pennsylvania, U.S.A.) | 33-31AA/33-31A | |
| Spin coater WS-400 BZ-6NPP/LITE | Laurell (Pennsylvania, U.S.A.) | used for adhesive bonding | |
| Syringe pump neMESYS | Cetoni (Korbussen, Germany) | ||
| 1 ml syringe | Codan (Lensahn, Germany) | 62.1002 | |
| 5 ml syringe | B. Braun (Melsungen, Germany) | 4606051V | |
| PTFE tubing | PKM SA (Lyss, Switzerland) | PTFE-AWG-TFT20.N | |
| Quadrupole-based ICPMS ELAN6000 | PerkinElmer (Massachusetts, U.S.A.) | ||
| Membrane desolvator CETAC6000AT+ | CETAC Technologies (Nebraska, U.S.A.) | only the desolvator unit is used | |
| High speed camera Miro M110 | Vision Research (New Jersey, U.S.A.) | ||
| Data analysis program Origin pro | OriginLab Corp. (Massachusetts, U.S.A.) | version 8.6 | |
| Microscope | Olympus (Tokyo, Japan) | IX71 |
References
- Todoli, J. -L., Mermet, J. -M. Liquid sample introduction in ICP spectrometry: A Practical Guide. , Elsevier. Amsterdam. 10-1016 (2008).
- Sutton, K. L., B'Hymer, C., Caruso, J. A. Ultraviolet absorbance and inductively coupled plasma mass spectrometric detection for capillary electrophoresis - A comparison of detection modes and interface designs. J. Anal. At. Spectrom. 13 (9), 885-891 (1998).
- Todoli, J. -L., Mermet, J. -M. Sample introduction systems for the analysis of liquid microsamples by ICP-AES and ICP-MS. Spectrochim. Acta, Part B. 61 (3), 239-283 (2006).
- Olesik, J. W., Hobbs, S. E. Monodisperse dried microparticulate injector - A new tool for studying fundamental processes in inductively-coupled plasma. Anal. Chem. 66 (20), 3371-3378 (1994).
- Gschwind, S., Hagendorfer, H., Frick, D. A., Günther, D. Mass quantification of nanoparticles by single droplet calibration using inductively coupled plasma mass spectrometry. Anal. Chem. 85 (12), 5875-5883 (2013).
- Garcia, C. C., Murtazin, A., Groh, S., Horvatic, V., Niemax, K. Characterization of single Au and SiO2 nano- and microparticles by ICP-OES using monodisperse droplets of standard solutions for calibration. J. Anal. At. Spectrom. 25 (5), 645-653 (2010).
- Shigeta, K., et al. Sample introduction of single selenized yeast cells (Saccharomyces cerevisiae) by micro droplet generation into an ICP-sector field mass spectrometer for label-free detection of trace elements. J. Anal. At. Spectrom. 28 (5), 637-645 (2013).
- Orlandini v. Niessen, J. O., Schaper, J. N., Petersen, J. H., Bings, N. H. Development and characterization of a thermal inkjet-based aerosol generator for micro-volume sample introduction in analytical atomic spectrometry. J. Anal. At. Spectrom. 26 (9), 1781-1789 (2011).
- Orlandini v. Niessen, J. O., Petersen, J. H., Schaper, J. N., Bings, N. H. Comparison of novel and conventional calibration techniques for the analysis of urine samples using plasma source mass spectrometry combined with a new dual-drop-on-demand aerosol generator. J. Anal. At. Spectrom. 27 (8), 1234-1244 (2012).
- Shigeta, K., et al. Application of a micro-droplet generator for an ICP-sector field mass spectrometer - optimization and analytical characterization. J. Anal. At. Spectrom. 28 (5), 646-656 (2013).
- Teh, S. -Y., Lin, R., Hung, L. -H., Lee, A. P.
- Zheng, B., Tice, J. D., Ismagilov, R. F. Formation of arrayed droplets by soft lithography and two-phase fluid flow, and application in protein crystallization. Adv. Mater. 16 (15), 1365-1368 (2004).
- Theberge, A. B., et al. Microfluidic platform for combinatorial synthesis in picolitre droplets. Lab Chip. 12 (7), 1320-1326 (2012).
- Li, L., et al. Nanoliter microfluidic hybrid method for simultaneous screening and optimization validated with crystallization of membrane proteins. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 103 (51), 19243-19248 (2006).
- Zhang, Q., Liu, X., Liu, D., Gai, H. Ultra-small droplet generation via volatile component evaporation. Lab Chip. 14 (8), 1395-1400 (2014).
- Baret, J. C., Beck, Y., Billas-Massobrio, I., Moras, D., Griffiths, A. D. Quantitative cell-based reporter gene assays using droplet-based microfluidics. Chem. Biol. 17 (5), 528-536 (2010).
- Brouzes, E., et al. Droplet microfluidic technology for single-cell high-throughput screening. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106 (34), 14195-14200 (2009).
- Pei, J., Li, Q., Lee, M. S., Valaskovic, G. A., Kennedy, R. T. Analysis of samples stored as individual plugs in a capillary by electrospray ionization mass spectrometry. Anal. Chem. 81 (15), 6558-6561 (2009).
- Kelly, R. T., Page, J. S., Marginean, I., Tang, K., Smith, R. D. Dilution-free analysis from picoliter droplets by nano-electrospray ionization mass spectrometry. Angew. Chem., Int. Ed. 48 (37), 6832-6835 (2009).
- Küster, S. K., et al. Interfacing droplet microfluidics with matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry: label-free content analysis of single droplets. Anal. Chem. 85 (3), 1285-1289 (2013).
- Pabst, M., Jefimovs, K., Zenobi, R., Dittrich, P. S. High-Resolution Droplet-Based Fractionation of Nano-LC Separations onto Microarrays for MALDI-MS Analysis. Analytical Chemistry. 86 (10), 4848-4855 (2014).
- Verboket, P. E., Borovinskaya, O., Meyer, N., Günther, D., Dittrich, P. S. A New Microfluidics-Based Droplet Dispenser for ICPMS. Analytical Chemistry. 86 (12), 6012-6018 (2014).
- Ammerman, C. N., You, S. M. Determination of the boiling enhancement mechanism caused by surfactant addition to water. J. Heat Transfer. 118 (2), 429-435 (1996).
- Samel, B., Chowdhury, M. K., Stemme, G. The fabrication of microfluidic structures by means of full-wafer adhesive bonding using a poly(dimethylsiloxane) catalyst. J Micromech Microeng. 17 (8), 1710-1714 (2007).
- Basu, A. S. Droplet morphometry and velocimetry (DMV): a video processing software for time-resolved, label-free tracking of droplet parameters. Lab Chip. 13 (10), 1892-1901 (2013).
- Dziewatkoski, M. P., Daniels, L. B., Olesik, J. W. Time-resolved inductively coupled plasma mass spectrometry measurements with individual, monodisperse drop sample introduction. Anal. Chem. 68 (7), 1101-1109 (1996).
- Abate, A. R., Hung, T., Mary, P., Agresti, J. J., Weitz, D. A. High-throughput injection with microfluidics using picoinjectors. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107 (45), 19163-19166 (2010).
- Bremond, N., Thiam, A. R., Bibette, J. Decompressing emulsion droplets favors coalescence. Phys. Rev. Lett. 100 (2), 024501 (2008).
- Niu, X., Gulati, S., Edel, J. B., deMello, A. J. Pillar-induced droplet merging in microfluidic circuits. Lab Chip. 8 (11), 1837-1841 (2008).
- Song, H., Ismagilov, R. F. Millisecond kinetics on a microfluidic chip using nanoliters of reagents. J. Am. Chem. Soc. 125 (47), 14613-14619 (2003).
- Song, H., Chen, D. L., Ismagilov, R. F.
- Lombardi, D., Dittrich, P. S. Droplet microfluidics with magnetic beads: a new tool to investigate drug-protein interactions. Anal. Bioanal. Chem. 399 (1), 347-352 (2011).
- Edgar, J. S., et al. Compartmentalization of chemically separated components into droplets. Angew. Chem., Int. Ed. 48 (15), 2719-2722 (2009).
- Edgar, J. S., et al. Capillary electrophoresis separation in the presence of an immiscible boundary for droplet analysis. Anal. Chem. 78 (19), 6948-6954 (2006).
- Baret, J. C., et al. Fluorescence-activated droplet sorting (FADS): efficient microfluidic cell sorting based on enzymatic activity. Lab Chip. 9 (13), 1850-1858 (2009).
- Agresti, J. J., et al. Ultrahigh-throughput screening in drop-based microfluidics for directed evolution. Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107 (9), 4004-4009 (2010).
