Abstract
कम रीढ़ की हड्डी रक्त प्रवाह (SCBF) (यानी, ischemia) दर्दनाक रीढ़ की हड्डी में चोट (एससीआई) pathophysiology में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है और तदनुसार न्यूरोप्रोटेक्टिव उपचार के लिए एक महत्वपूर्ण लक्ष्य है। कई तकनीकों SCBF का आकलन करने के लिए वर्णित किया गया है, वे सभी महत्वपूर्ण सीमाएं हैं। उत्तरार्द्ध पर काबू पाने के लिए, हम वास्तविक समय विपरीत बढ़ाया अल्ट्रासाउंड इमेजिंग (CEU) के उपयोग का प्रस्ताव है। यहाँ हम एससीआई के एक चूहा कुचलन मॉडल में इस तकनीक के आवेदन का वर्णन है। एक कंठ कैथेटर पहली विपरीत एजेंट, सल्फर हेक्साफ्लोराइड समझाया microbubbles के एक सोडियम क्लोराइड समाधान के दोहराया इंजेक्शन के लिए प्रत्यारोपित किया जाता है। रीढ़ की हड्डी तो एक कस्टम निर्मित 3 डी-फ्रेम के साथ स्थिर है और रीढ़ की हड्डी में ड्यूरा मेटर ThIX-ThXII पर एक laminectomy के द्वारा अवगत कराया है। अल्ट्रासाउंड जांच तो (अल्ट्रासाउंड जेल के साथ लेपित) ड्यूरा मेटर के पीछे पहलू पर तैनात है। कॉन्ट्रा की आधारभूत SCBF, एक भी नसों में इंजेक्शन (400 μl) का आकलन करने के लिएसेंट एजेंट बरकरार रीढ़ की हड्डी microvasculature के माध्यम से इसके पारित होने को दर्ज करने के लिए आवेदन किया है। एक वजन ड्रॉप डिवाइस बाद में एससीआई की एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य प्रयोगात्मक कुचलन मॉडल उत्पन्न करने के लिए प्रयोग किया जाता है। इसके विपरीत एजेंट के बाद एससीआई SCBF परिवर्तन का आकलन करने के लिए चोट के बाद 15 मिनट के लिए फिर से इंजेक्ट किया जाता है। CEU वास्तविक समय के लिए और इन विवो एससीआई निम्नलिखित SCBF परिवर्तन के मूल्यांकन की अनुमति देता है। रिहाई का जानवर में, अल्ट्रासाउंड इमेजिंग बरकरार रीढ़ की हड्डी के साथ असमान रक्त के प्रवाह को दिखाया। SCBF अधिक सुदूर बरकरार क्षेत्रों में संरक्षित रहे इसके अलावा, जबकि 15 मिनट के बाद एससीआई, महत्वपूर्ण ischemia के उपरिकेंद्र के स्तर पर हुई थी। उपरिकेंद्र (व्याख्यान चबूतरे वाला और दुम दोनों) से सटे क्षेत्रों में, SCBF काफी कम हो गया था। यह पहले से वर्णित "इस्कीमिक Penumbra क्षेत्र" से मेल खाती है। यह उपकरण ischemia और एससीआई के लिए बाद में जिसके परिणामस्वरूप ऊतक परिगलन को सीमित करने के उद्देश्य से चिकित्सा के प्रभाव का आकलन करने के लिए प्रमुख ब्याज की है।
Introduction
घाव रीढ़ की हड्डी में चोट (एससीआई) का संवेदी मोटर में महत्वपूर्ण हानि, और स्वायत्त कार्यों के लिए अग्रणी एक विनाशकारी स्थिति है। तिथि करने के लिए, कोई चिकित्सा रोगियों में अपनी क्षमता का प्रदर्शन किया है। ऐसे कारण से, यह संभावित उपचार के मूल्यांकन में सुधार होगा और आगे की चोट pathiophysiology 1 को स्पष्ट कर सकते हैं कि नई तकनीक की पहचान करने के लिए महत्वपूर्ण है।
एससीआई के रूप में प्राथमिक और माध्यमिक चोटों के लिए भेजा, दो अनुक्रमिक चरणों में बांटा गया है। प्राथमिक चोट प्रारंभिक यांत्रिक अपमान से मेल खाती है। आगे प्रारंभिक घाव, ऊतकों को नुकसान और इसलिए न्यूरोलॉजिकल घाटा 2,3 के प्रगतिशील विस्तार में योगदान कि माध्यमिक चोट समूहों (जैसे सूजन, oxidative तनाव और हाइपोक्सिया के रूप में) विभिन्न जैविक घटनाओं की एक झरना जबकि।
एससीआई की तीव्र चरण में, न्यूरोप्रोटेक्टिव उपचारों माध्यमिक चोट विकृति और श को कम करने के उद्देश्य से कर रहे हैंतदनुसार न्यूरोलॉजिकल परिणामों में सुधार ould। कई माध्यमिक चोट की घटनाओं के अलावा, ischemia के एक महत्वपूर्ण भूमिका 4,5 निभाता है। एससीआई उपरिकेंद्र के स्तर पर, क्षतिग्रस्त parenchymal microvessels प्रभावी रीढ़ की हड्डी रक्त प्रवाह (SCBF) में बाधा। इसके अलावा, SCBF भी काफी चोट उपरिकेंद्र, विशेष रूप से "इस्कीमिक Penumbra जोन 'के रूप में जाना जाता है एक क्षेत्र के आसपास के क्षेत्र में कम हो जाता है। SCBF जल्दी से इन क्षेत्रों के भीतर बहाल नहीं किया जा सकता है, तो ischemia के अनुपूरक parenchymal गल जाना और आगे तंत्रिका ऊतकों को नुकसान हो सकता है। थोड़ा सा भी ऊतक संरक्षण समारोह का पर्याप्त प्रभाव हो सकते हैं, यह ischemia के बाद एससीआई कम कर सकते हैं कि दवाओं और चिकित्सा के विकास के लिए प्रमुख ब्याज की है। इस घटना को उजागर करने के लिए, पिछले काम मेलिनकृत axons की केवल 10% की है कि संरक्षण से पता चला है के बाद एससीआई 6 बिल्लियों में चलने की अनुमति के लिए पर्याप्त था।
कई तकनीकों SCBF, आकलन करने के लिए वर्णित किया गया हैY सभी महत्वपूर्ण सीमाएं हैं। उदाहरण के लिए, रेडियोधर्मी microspheres के 7,8 और सी 14-iodopyrine autoradiography 9 के उपयोग के बाद पशु बलि की आवश्यकता है और बाद में समय-अंक में दोहराया नहीं जा सकता। हाइड्रोजन निकासी तकनीक 10 आगे रीढ़ की हड्डी को नुकसान हो सकता है, जो intraspinal इलेक्ट्रोड, की प्रविष्टि पर निर्भर करता है। लेजर डॉपलर इमेजिंग, 14,15 photoplethysmography और इन विवो प्रकाश माइक्रोस्कोपी 16 माप 11-13 की एक बहुत ही सीमित गहराई / क्षेत्र की है।
हमारी टीम पहले से विपरीत बढ़ाया अल्ट्रासाउंड (CEU) इमेजिंग वास्तविक समय का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कि दिखाया गया है और इन विवो चूहे रीढ़ की हड्डी पैरेन्काइमा 17 में SCBF बदल जाता है। यह एक ऐसी तकनीक हुआंग एट अल द्वारा लागू किया गया था कि नोट करना महत्वपूर्ण है। एससीआई 18 के एक सुअर का मॉडल में। CEU स्केल रूपात्मक आईएम संबद्ध करने के लिए अनुमति देता है जो अल्ट्रासाउंड इमेजिंग के एक विशिष्ट विधा पर लागू होता हैरक्त का प्रवाह 19 के स्थानिक वितरण के साथ (पारंपरिक बी मोड द्वारा प्राप्त) उम्र। SCBF इमेजिंग और मात्रा का ठहराव गूंज विपरीत एजेंटों की intravascular इंजेक्शन पर निर्भर करता है। इसके विपरीत एजेंट (के व्यास मतलब के बारे में 2.5 माइक्रोन और एक व्यास कम से कम 6 माइक्रोन होने के 90%) सल्फर हेक्साफ्लोराइड microbubbles से बना है फॉस्फोलिपिड द्वारा स्थिर हो। microbubbles इस प्रकार रक्त echogenicity और उनके रक्त के प्रवाह के अनुसार ऊतकों की बढ़ती विपरीत बढ़ाने जांच द्वारा उत्सर्जित अल्ट्रासाउंड बीम को दर्शाते हैं। यह परिलक्षित संकेत की तीव्रता के अनुसार ब्याज की एक दिए गए क्षेत्र में रक्त के प्रवाह का आकलन करने के लिए इसलिए संभव है। microbubbles भी सुरक्षित हैं और वे चिकित्सकीय मानव में लागू किया गया है। सल्फर हेक्साफ्लोराइड जल्दी से मंजूरी दे दी है (टर्मिनल आधा जीवन का मतलब है 12 मिनट है) और प्रशासित सल्फर हेक्साफ्लोराइड का 80% से अधिक इंजेक्शन के बाद 2 मिनट के भीतर हवा exhaled में बरामद किया है। इस प्रोटोकॉल CEU आईएम का उपयोग करने के लिए एक आसान तरीका प्रदान करता हैचूहे में SCBF परिवर्तन का आकलन करने के लिए उम्र बढ़ने की।
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Protocol
नोट: इस पांडुलिपि में वर्णित विधि चिकित्सा, पेरिस, फ्रांस (CEEALV / 2011/08/01) की Lariboisière स्कूल की जैवनैतिकता समिति द्वारा अनुमोदित किया गया।
1. साधन तैयारी
- तैयार है और कैथेटर प्रविष्टि के लिए निम्नलिखित उपकरणों को साफ: सूक्ष्म संदंश, सूक्ष्म कैंची, सूक्ष्म नाड़ी बंद करना, बड़ी कैंची, शल्य चिकित्सा धागा (काला लट रेशम 4-0) और एक 14 जी कैथेटर। एक हेपरिन समाधान (5,000 यू / एमएल) के साथ कैथेटर Heparinize।
- तैयार है और laminectomy के लिए निम्नलिखित उपकरणों को साफ: बड़ी कैंची, छुरी और एक हड्डी कटर। Laminectomy (चित्रा 1) के दौरान रीढ़ की हड्डी की चोट के जोखिम को कम करने के लिए बनाया गया एक कस्टम निर्मित हड्डी कटर के साथ laminectomy प्रदर्शन।
- सेट-अप जानवर की स्थिति और स्थिरीकरण के लिए इस्तेमाल किया 3 डी-फ्रेम। कस्टम बनाया फ्रेम संदंश के साथ सहयोग में एक बाहरी Fixator हॉफमैन 3 के तत्वों के साथ बनाया गया है जोएच जानवर की काठ का रीढ़ की हड्डी को फिट करने के क्रम में घुमावदार किया गया है।
- रीढ़ की हड्डी बायोमैकेनिकल चोट के लिए इस्तेमाल वजन ड्रॉप डिवाइस (impactor) तैयार करें।
नोट: कस्टम बनाया कसाव डिवाइस एक 3 डी सॉफ्टवेयर के साथ बनाया गया है और 3 डी में छपा था। - अल्ट्रासाउंड मशीन को चालू करें।
- इसके विपरीत एजेंट के पुनर्गठन के लिए किट तैयार करें।
नोट: किट lyophilised पाउडर के 25 मिलीग्राम, 5 मिलीलीटर सोडियम क्लोराइड और एक मिनी कील हस्तांतरण प्रणाली (चित्रा 2) युक्त 1 पहले से भरे सिरिंज युक्त 1 शीशी भी शामिल है। इसके विपरीत एजेंट के पुनर्गठन के लिए कदम (खंड 5 में) नीचे विस्तृत रहे हैं।
2. गले नस कैथीटेराइजेशन (चित्रा 3)
- 4% isoflurane के साथ पशु anesthetize। लापरवाह स्थिति में पशु रखें। पंजे के एक संदंश के साथ pinched कर रहे हैं जब पशु अनुत्तरदायी है कि सुनिश्चित करने के द्वारा उचित anesthetization की पुष्टि करें। अंड जबकि सूखापन को रोकने के लिए आंखों पर पशु चिकित्सक मरहम लागूएर संज्ञाहरण।
- गर्दन दाढ़ी और त्वचा को साफ। गर्दन के midline पर एक चीरा बनाओ। आंतरिक कंठ नस को खोजने के क्रम में sternocleidomastoidian पेशी वापस लेना। नस का व्याख्यान चबूतरे वाला भाग में एक संयुक्ताक्षर कस दें।
- नस, संयुक्ताक्षर नीचे 1 सेमी पर एक माइक्रोवैस्कुलर दबाना लागू करें। बस दबाना जारी की है जब कसने बनने के लिए तैयार गाँठ के साथ दबाना नीचे, नस के आसपास एक धागे से गुजरती हैं।
- दबाना और व्याख्यान चबूतरे संयुक्ताक्षर के बीच नस (venotomy) की दीवार को खोलें। नस के लुमेन में एक 14 जी कैथेटर का परिचय और दिल की ओर धक्का।
- यह दबाना के खिलाफ आता है, उत्तरार्द्ध जारी है और आगे कैथेटर धक्का। मजबूती के अंदर कैथेटर के साथ नस पर गाँठ कस द्वारा, नस में कैथेटर सुरक्षित।
- कैथेटर में शिरापरक रक्त की एक छोटी राशि वापस लेने और बाद में फिर heparinized खारा साथ यह निस्तब्धता द्वारा कैथेटर की प्रत्यक्षता का आकलन करें। इस सी की बाधा से बचाता हैएक संभावित खून का थक्का द्वारा atheter।
- इसके विपरीत एजेंट (microbubbles) के आगे इंजेक्शन के लिए कैथेटर को लचीला ट्यूबिंग कनेक्ट करें। यह प्रयोग के लिए तैयार है जब तक (सील) बंद रखें।
3. रीढ़ प्रवेश, Laminectomy और चूहा पोजिशनिंग (3 डी-फ्रेम में)
- एक फ्लैट होने का खतरा क्षैतिज स्थिति में पशु रखें। दाढ़ी और जानवर की पीठ (वक्ष क्षेत्र) साफ।
- टटोलने का कार्य (चित्रा 4) द्वारा पिछले पसली (चूहे में XIIIth) को पहचानें। यह एक XIIIth वक्ष बांस (ThXIII) के स्थान का अनुमान लगाने के लिए अनुमति देता है।
- ThXIII पर केन्द्रित midline पर एक 4 सेमी त्वचा चीरा, बनाते हैं। त्वचा चीरा के साथ-साथ अंतर्निहित बर्सा खोलें। पीठ की मांसपेशियों की aponeurosis के साथ-साथ कशेरुकी रीढ़ प्रक्रियाओं के सुझावों को ध्यान से देखें।
- ध्यान से XIIIth पसलियों छूकर ThXIII की रीढ़ की प्रक्रिया स्थानीय बनाना।
नोट: XIIIth पसली इसलिए ThXIII से जुड़ा है और loca है के लिए एक आसान का प्रतिनिधित्व करता हैThXIII की पहचान के लिए ते शारीरिक मील का पत्थर। यह कदम ThXII के स्थानीयकरण spinous प्रक्रिया के रूप में अच्छी तरह से एल 1 और एल 2 (पहले और दूसरे काठ vertebras) ThIX करने के लिए सक्षम बनाता है। - पेशी aponeurosis कट और L2 के लिए ThIX से spinous प्रक्रियाओं, laminas और पहलू जोड़ों को बेनकाब करने के लिए दोनों तरफ की मांसपेशियों को अलग। अनुप्रस्थ प्रक्रियाओं से मांसपेशियों को निकाल कर L1 और L2 के पार्श्व पहलुओं को बेनकाब।
- स्थिति (चित्रा 5) सुरक्षित करने के लिए 3 डी-फ्रेम पर जानवर के कृन्तक हुक। संशोधित संदंश के साथ L1 और L2 vertebras दबाना। पशु को स्थिर करने के क्रम में 3 डी-फ्रेम करने के लिए संशोधित संदंश कनेक्ट करें।
- धीरे पूरे रीढ़ की हड्डी मजबूत करने के लिए और बेंच से छाती तरक्की के क्रम में दुमदारी काठ का रीढ़ पकड़े संदंश खींच।
नोट: वर्णित व्यवस्था के साथ पशु साँस करने के लिए सक्षम होना चाहिए। इसके अलावा, रिब पिंजरे, रीढ़ की हड्डी और रीढ़ की हड्डी की सांस आंदोलनों के बावजूदकॉर्ड भी स्थिर रहना चाहिए। - ThIX से ThXII को spinous processess निकालें। धीरे ThXII की बाईं पटल के नीचे की हड्डी कटर के अवर ब्लेड डालने और फिर पटल (चित्रा 6) में कटौती करने के क्रम में हड्डी कटर बंद कर दें।
- सही पटल के लिए एक ही पैंतरेबाज़ी दोहराएँ और क्रमिक पीछे कट्टर हटा दें। एक चार स्तर laminectomy के लक्ष्य को हासिल करने के क्रम में ThIX को vertebras ThXI के लिए पिछले चरणों को दोहराएँ। प्रत्येक बांस के लिए दोनों पहलू जोड़ों निकालें।
नोट: प्रक्रिया के दौरान, स्थानीय खून बह रहा से सहकारी क्षेत्र को साफ। उस के लिए, गुनगुना नमक के साथ कपास swabs और सिंचाई का उपयोग करें। Hemostasis व्यवस्थित ढंग मिनट के भीतर होता है।
4. CEU जांच स्थिति
- अल्ट्रासाउंड जेल के साथ ड्यूरा मेटर कवर। यह जांच और रीढ़ की हड्डी (चित्रा 7) के बीच अल्ट्रासाउंड तरंगों के प्रभावी संचरण अनुमति देता है।
- अल्ट्रासाउंड जांच बुद्धि स्थिरबाद में एक jointed हाथ से 3 डी-फ्रेम करने के लिए जोड़ा जा सकता है कि हा दबाना। मैन्युअल जांच की स्थिति। जांच एक परोक्ष अनुदैर्ध्य बाण के समान टुकड़ा प्राप्त करने के लिए उन्मुख है कि सुनिश्चित करें। एक सही स्थिति में, रीढ़ की हड्डी छवि पर सख्ती से क्षैतिज है और रीढ़ की हड्डी के मध्य नहर रीढ़ की हड्डी का पूरा खंड के साथ दिख रहा है।
नोट: पोजिशनिंग अल्ट्रासाउंड मशीन की स्क्रीन पर प्रदर्शित वास्तविक समय बी मोड छवि द्वारा निर्देशित किया जाना चाहिए। अल्ट्रासाउंड जांच के फोकल दूरी रीढ़ की हड्डी के मध्य नहर के साथ गठबंधन किया जाना चाहिए। इस समय, रीढ़ की हड्डी के पीछे पहलू अंततः impactor की स्थिति के लिए अनुमति देगा जो पहुँचा जा सकता है। - जब इष्टतम, स्थिति को स्थिर करने के jointed बांह ताला।
इसके विपरीत एजेंट 5. तैयारी - Microbubble पुनर्गठन
- एक वाणिज्यिक पुनर्गठन किट की सामग्री का प्रयोग और छूत यह बन्धन से सवार रॉड से कनेक्टhtly सिरिंज (दक्षिणावर्त) में। हस्तांतरण प्रणाली छाला खोलें और सिरिंज टिप टोपी को हटा दें। हस्तांतरण प्रणाली टोपी खोलें और हस्तांतरण प्रणाली के लिए सिरिंज कनेक्ट (कसकर जकड़ना)।
- शीशी से सुरक्षात्मक डिस्क निकालें। के पारदर्शी आस्तीन में शीशी स्लाइड
- अंतरण प्रणाली और प्रेस जगह में मजबूती शीशी बंद करने के लिए।
- सवार रॉड पर धकेलने के द्वारा शीशी में सिरिंज की सामग्री को खाली करें। एक सफेद दूधिया सजातीय तरल प्राप्त करने के लिए शीशी में सभी सामग्री मिश्रण करने के लिए 20 सेकंड के लिए सख्ती से हिला।
- प्रणाली पलटना और ध्यान से सिरिंज में विपरीत एजेंट वापस ले लें। हस्तांतरण प्रणाली से सिरिंज खोल देना। (निर्देशन के रूप में) पुनर्गठन के बाद, जिसके परिणामस्वरूप फैलाव के 1 मिलीलीटर microbubbles में 8 μl सल्फर हेक्साफ्लोराइड गये हैं। एक 100 मिलीलीटर सिरिंज में microbubbles के निलंबन ड्रा। बिजली के पंप में 100 मिलीलीटर सिरिंज डालें। ढक्कन बंद कर दें।
- पुनः के लगातार आंदोलन प्रारंभगठन microbubbles। Microbubble निलंबन का कहना है जो सिरिंज, की धीमी गति से बारी-बारी से प्राप्त निरंतर आंदोलन। लचीला टयूबिंग के माध्यम से कंठ कैथेटर के लिए पंप से कनेक्ट करें। "सुरीले मोड" के लिए अल्ट्रासाउंड मशीन सेट करें।
नोट: microbubbles विशेष रूप से पता लगाया है और कल्पना की जा सकती है जिसमें मोड के लिए उत्तरार्द्ध मेल खाती है। यह मोड बी मोड के लिए विरोध के रूप में microbubbles को नष्ट नहीं करता है, जो एक कम यांत्रिक सूचकांक है। - इसके विपरीत एजेंट के पहली खुराक (400 μl) के निवेश से कैथेटर शुद्ध। यह पहला निषेचन के दौरान, microbubbles अल्ट्रासाउंड स्क्रीन पर दिखाई देते हैं कि जाँच करें। यह (चूहे का खून करने के लिए सिरिंज से) पूरी सर्किट बरकरार है और खुला है कि पुष्टि करता है।
- रीढ़ की हड्डी पैरेन्काइमा और खून में शेष कुछ microbubbles के विनाश की कल्पना करने के लिए "बी मोड" के लिए अल्ट्रासाउंड मशीन सेट करें। "बी-मोड" के उच्च आवृत्ति ट्रॅनटूटने के लिए उन्हें सक्षम बनाता है जो microbubbles को SMITS उच्च ऊर्जा,।
- पशु लगभग 30 मिनट के लिए अभी भी रखना करते हैं। इस अवधि में haemodynamic मापदंडों के स्थिरीकरण के लिए अनुमति देता है।
बरकरार रीढ़ की हड्डी में SCBF 6. आकलन
- "सुरीले मोड" के लिए अल्ट्रासाउंड मशीन सेट करें। इसके विपरीत एजेंट (400 μl) और (2) ठीक घड़ी की एक साथ (1) जान फूंकना शुरू करो।
नोट: निषेचन के दौरान, खून में microbubbles की एकाग्रता रीढ़ की हड्डी (8 चित्रा) के विपरीत कल्पना, सक्रिय करने में वृद्धि करनी चाहिए। Microbubbles जल्दी नष्ट कर रहे हैं के बाद से, microbubbles के खून एकाग्रता इंजेक्शन रीढ़ की हड्डी के विपरीत दृश्य में एक प्रगतिशील कमी उत्पन्न करता है, जो पूरा हो गया है एक बार घटते शुरू होता है। - 1 मिनट, का चयन करें (प्रेस) अल्ट्रासाउंड मशीन पर "क्लिप स्टोर" बटन के बाद। यह आर के 1 मिनट बचाने के लिए एक सक्षम हो जाएगाओ अल्ट्रासाउंड डेटा और रिकॉर्डिंग इमेजिंग वीडियो (जो कि पहले से अल्ट्रासाउंड स्क्रीन पर प्रदर्शित किया गया था)।
- "बी-मोड" के लिए अल्ट्रासाउंड मशीन सेट करें। इस शेष microbubbles को समाप्त होगा।
7. प्रायोगिक एससीआई
- THX और ThXI के बीच जंक्शन पर, Impactor की नोक (रीढ़ की हड्डी midline पर) ड्यूरा मेटर के साथ संपर्क में आता है, इसलिए है कि वजन ड्रॉप कसाव डिवाइस की स्थिति में 3 डी-फ्रेम करने के लिए लॉग इन micromanipulator का उपयोग (9 चित्रा) ।
नोट: इस स्तर अल्ट्रासाउंड डिवाइस के साथ मनाया रीढ़ की हड्डी के खंड के बीच के अनुरूप होना चाहिए। स्ट्राइकर और impactor के शरीर व्यास में 8 मिमी हैं। चोट उत्पन्न होगा जो impactor की नोक, व्यास में 3 मिमी है। - एक 10 सेमी ऊंची स्थिति में कसाव डिवाइस के स्ट्राइकर रखें। कसाव डिवाइस के स्ट्राइकर को रिहा द्वारा प्रयोगात्मक एससीआई प्रेरित। स्ट्राइकर गिर जाता है और रिलीज वेंई impactor, रीढ़ की हड्डी घायल हो गए। कस्टम मेड कसाव एक 10 ग्राम वजन करने के लिए एक प्रभाव बराबर 10 सेमी की ऊंचाई से गिरा बचाता है।
SCBF 5 मिनट के पोस्ट-एससीआई 8. आकलन
- धारा 6 (SCBF का आकलन) में वर्णित चरणों को दोहराएँ। microbubbles (चित्रा 10) अंधेरा रहेगा क्षतिग्रस्त microvasculature और चोट केंद्र के माध्यम से पारित करने में असमर्थ हो जाएगा।
9. पशु बलि
- Pentobarbital का इंट्रा-पेरिटोनियल घातक इंजेक्शन (100 मिलीग्राम) के साथ पशु euthanize।
ऑफ़लाइन विश्लेषण द्वारा SCBF के 10 मात्रा का ठहराव
- (अल्ट्रासाउंड मशीन पर) मात्रा का ठहराव के लिए इस्तेमाल किया अल्ट्रा बढ़ाएँ सॉफ्टवेयर शुरू। "फाइल" का चयन करें और फिर पहले से बचाया कच्चे डेटा का चयन करें और संबंधित फाइलों को खोलने के। (चयन) "ची क्यू" बटन दबाकर "मात्रा का ठहराव मोड" को सक्रिय करें। Seleसीटी "सेट आरओआई" (बटन) और गोल आकार का चयन करें।
- "आरओआई ड्रा" का चयन करें (बटन) और रीढ़ की हड्डी (चित्रा 11) पर ब्याज की सात आसन्न परिपत्र क्षेत्रों (आरओआई) आकर्षित। "फिटिंग" मेनू खोलें और समारोह "वक्र मूल्य" का चयन करें। प्रत्येक एक रॉय के अंदर microbubbles एकाग्रता के परिवर्तन करने के लिए इसी कई घटता प्रदर्शित करने सॉफ्टवेयर का निरीक्षण करें।
नोट: प्रत्येक वक्र एक "छिड़काव-deperfusion" प्रोफ़ाइल है। वक्र के पहले चरण में फ्लैट है और microbubbles के आने से पहले की अवधि से मेल खाती है। दूसरे चरण में, microbubbles की एकाग्रता जल्दी लगाने की एक परिणाम के रूप में बढ़ जाती है। वे खून में disintegratse के रूप में जान फूंकना पूरा हो गया है जब शुरू होता है जो तीसरे चरण में, microbubbles की एकाग्रता उत्तरोत्तर कम हो जाती है। - सी के दूसरे चरण की शुरुआत में पहले खड़ी रेखा रखेंurve और सेट "" का चयन करें। इस विश्लेषण शुरू करने के लिए जहां सॉफ्टवेयर बताते हैं।
- "सेट" का चयन एक बार फिर से रिकॉर्डिंग के अंत में दूसरी खड़ी रेखा प्लेस और। इस विश्लेषण को रोकने के लिए जहां सॉफ्टवेयर बताते हैं।
- "CV" मेनू को देखो और विश्लेषण "वक्र के तहत क्षेत्र" से मेल खाती है, जो "नीलामी" मूल्य, रिकॉर्ड है। यह मान इसी आरओआई अंदर SCBF के लिए आनुपातिक है।
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Representative Results
प्रोटोकॉल ऊपर वर्णित के साथ, यह एक अनुदैर्ध्य रीढ़ की हड्डी बाण के समान खंड साथ SCBF नक्शा करने के लिए संभव है।
बरकरार रीढ़ की हड्डी में, पैरेन्काइमा (चित्रा 12) के भीतर SCBF अनियमितताओं प्रतीत होता है। यह एक से दूसरे जानवर से radiculo-मस्तिष्क धमनियों के चर वितरण (आरएमए) के द्वारा समझाया जा सकता है। आरएमए पूर्वकाल रीढ़ की धमनी (एएसए) तक पहुँचने और इसलिए रीढ़ की हड्डी पैरेन्काइमा को रक्त की आपूर्ति प्रदान करते हैं कि धमनियों कमानी को दर्शाता है। इसके विपरीत, मेरुनाडीय धमनियों रीढ़ की हड्डी में रक्त की आपूर्ति प्रदान नहीं करते हैं इसलिए एएसए पहुँचने के लिए और जो नहीं धमनियों, कमानी के अनुरूप हैं। इसलिए, आरएमए एएसए के साथ anastomoses जहां रीढ़ की हड्डी क्षेत्रों में, (के रूप में हमारे परिणामों में दिखाया गया है) और अधिक रक्त प्रवाह है।
एससीआई के बाद, वास्तविक समय CEU इमेजिंग चोट उपरिकेंद्र पर संचलन में एक कमी को दर्शाता है। उपरिकेंद्र, अंधेरे (कोई विपरीत एजेंट संकेत) बनी हुई हैकोई सक्रिय रक्त के प्रवाह के रूप में वहाँ। कई ROIs का उपयोग करते हुए रक्त के प्रवाह के अधिक विस्तृत विश्लेषण के तीन अद्वितीय रक्त प्रवाह प्रदेशों से पता चलता है। सबसे पहले, उपरिकेंद्र के स्तर पर, रक्त प्रवाह के बारे में -90% का मतलब है एक कमी के साथ सबसे कम है। दूसरा, उपरिकेंद्र (व्याख्यान चबूतरे वाला और दुम दोनों) से सटे प्रदेशों में, SCBF भी काफी (-50% से -80% से लेकर) कम था। तीसरा, बरकरार ऊतक करने के लिए इसी सबसे दूरस्थ क्षेत्रों में, SCBF संरक्षित है। दूसरा क्षेत्र संभावित न्यूरोप्रोटेक्टिव उपचारों का लक्ष्य होना चाहिए जो "इस्कीमिक Penumbra क्षेत्र ', से मेल खाती है। आसानी से SCBF कल्पना और यों के लिए सक्षम होने के नाते के बाद एससीआई ऊतक ischemia को कम करने के उद्देश्य से चिकित्सा की दक्षता का आकलन करने के लिए उपयोगी है बदलता है, और इसलिए इस तकनीक (चित्रा 13) के महत्व पर प्रकाश डाला गया।
Microbubbles पुनर्गठन के लिए किट और microbubbles निषेचन के लिए इस्तेमाल किया पंप ° Vueject चित्रा 2. योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व। हस्तांतरण प्रणाली शीशी और सिरिंज के बीच microbubbles और खारा के वितरण के लिए अनुमति देता है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
3. गले कैथेटर चित्रा। कैथेटर गले नस में डाला जा रहा है, तो दिल की ओर धकेल दिया और एक गाँठ के साथ जकड़ना अंत में। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
वर्टिब्रल स्तर की सही पहचान के लिए 4. विधि चित्रा। चूहे में, पिछले पसली XIIIth बांस से जुड़ी है। बाद के पिछले वक्ष बांस के लिए एक मील का पत्थर, XIIIth के रूप में त्वचा के माध्यम से palpated जा सकता है। स्नायु spinous प्रक्रियाओं के दोनों तरफ अलग कर रहे हैं। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 3 डी-फ्रेम में पशु 5. स्थिरीकरण। पहली और दूसरी काठ vertebras (एल 1 और एल 2) कस्टम बनाया संदंश के साथ clamped हैं जबकि (1) कृन्तक फ्रेम पर झुका कर रहे हैं। (2) काठ का रीढ़ थोड़ा जिससे रीढ़ आंदोलनों के बिना मुक्त सांस की गति के लिए अनुमति देता है, पशु स्थिर और बेंच से छाती उठ जो कड़ी कर दी गई है। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा laminectomy 6. तकनीकी विवरण। सबसे पहले, कस्टम बनाया हड्डी कटर की पतली ब्लेड पटल के नीचे पारित कर दिया है रीढ़ की हड्डी को नुकसान पहुँचाए बिना। तो हड्डी कटर, बंद हो गया है जो गयूटीएस और लामिना का एक हिस्सा निकाल देता है। प्रक्रिया एक चार स्तर laminectomy के लक्ष्य को हासिल करने के क्रम में दोनों पक्षों पर और TxIX को ThXII से दोहराया है। अंत में, कर रहे हैं को भी हटाया पहलू जोड़ों। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
वजन ड्रॉप impactor ड्यूरा के पीछे पहलू के खिलाफ रखा जा सकता है इतना है कि अल्ट्रासाउंड जांच और कसाव डिवाइस के 7 चित्रा पोजिशनिंग। जांच, रीढ़ की हड्डी के समानांतर और (20-30 डिग्री) थोड़ा तिरछा है। रीढ़ की हड्डी में अल्ट्रासाउंड इमेजिंग "बी मोड 'पर मध्य खंड भर में केंद्रीय नहर वर्तमान के साथ दिखाई जानी चाहिए। देखने के लिए यहां क्लिक करेंइस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण।
बरकरार रीढ़ की हड्डी की संख्या 8 विपरीत इमेजिंग। इसके विपरीत मोड में लगातार आंकड़े (नारंगी रंग का चित्र) विपरीत एजेंट (microbubbles) उत्तरोत्तर जिससे रीढ़ की हड्डी के विपरीत बढ़ाने, संचार निम्नलिखित प्रतीत होता है कि कैसे दिखा। सांस में जान फूंकना के बारे में 10 सेकंड तक रहता है और इसके विपरीत डेटा 1 मिनट के लिए दर्ज की गई थी। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
9 चित्रा प्रयोगात्मक एससीआई निम्नलिखित बी मोड में परिवर्तन। ए hyperechoic घाव प्रारंभिक parenchymal एच करने के लिए इसी पैरेन्काइमा अंदर प्रकट होता है emorrhage के बाद एससीआई। प्रोटोकॉल (एच एंड ई धुंधला): पैरेन्काइमा में रक्त परिस्त्राव (पीला पैमाने बार = 2,000 माइक्रोन) के प्रमुख के लिए छोटे से रक्त वाहिकाओं की भारी दर्दनाक विघटन से नकसीर का परिणाम है। कसाव डिवाइस सही पर दिखाया जाता है। स्ट्राइकर एक 10 सेमी ऊंचाई से जारी है और बाद में रीढ़ की हड्डी में चोट है कि उत्पन्न impactor से टकरा जाता है। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
वे रीढ़ की हड्डी microvasculature के माध्यम से पारित रूप में 15 मिनट के बाद एससीआई। इसी प्रकार 8 संख्या को 10 चित्रा विपरीत इमेजिंग, microbubbles दिखाई दे रहे हैं। उपरिकेंद्र (तारांकन) में रक्त के प्रवाह में microvascular व्यवधान से बाधित है।10large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
SCBF मात्रा का ठहराव के लिए चित्रा 11. प्रोटोकॉल। अल्ट्रा बढ़ाएँ सॉफ्टवेयर के साथ, ब्याज (आरओआई) के सात परिपत्र और आसन्न क्षेत्रों अनुदैर्ध्य रीढ़ की हड्डी की छवि पर तैयार कर रहे हैं। पहले आरओआई चोट उपरिकेंद्र पर रखा गया है। प्रत्येक रॉय, सॉफ्टवेयर एक छिड़काव-deperfusion वक्र उत्पन्न करता है और इस वक्र के तहत क्षेत्र की गणना करता है। इस मान को इस क्षेत्र में रक्त के प्रवाह के साथ संबद्ध है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
साथ में रक्त के प्रवाह के 12 चित्रा विविधतारीढ़ की हड्डी। ये ग्राफ़ रीढ़ की हड्डी रक्त के प्रवाह की विविधता के साथ ही पशुओं के बीच परिवर्तनशीलता प्रदर्शित करते हैं। यह काफी हद तक रीढ़ की हड्डी की नाड़ी शरीर रचना विज्ञान के द्वारा समझाया जा सकता है। हालांकि, विविधता और चर नाड़ी शरीर रचना की वजह से, एक पूर्व आधारभूत रूप में चोट करने के लिए (प्रत्येक रॉय) से रक्त का प्रवाह माप का उपयोग करना चाहिए। निम्नलिखित समय अंक (पोस्ट-एससीआई) पर किए गए माप आधारभूत का प्रतिशत परिवर्तन के रूप में व्यक्त कर रहे हैं। इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
चित्रा 13. प्रयोगात्मक रीढ़ की हड्डी में चोट से प्रेरित रीढ़ की हड्डी रक्त प्रवाह (SCBF) में परिवर्तन (एससीआई)। SCBF बने रहे, जबकि केंद्र के स्तर पर महत्वपूर्ण ischemia के पी वहाँ है एससीआई के बाद 15 मिनटअधिक सुदूर बरकरार क्षेत्रों में सुरक्षित हैं। (व्याख्यान चबूतरे वाला और दुम दोनों) उपरिकेंद्र से सटे क्षेत्रों में, SCBF काफी कम है। यह पहले से वर्णित "इस्कीमिक Penumbra क्षेत्र" से मेल खाती है। यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
हम एक चूहा एससीआई कुचलन मॉडल में CEU उपयोग करने के लिए कैसे का वर्णन किया है हालांकि, इस प्रोटोकॉल अन्य प्रायोगिक उद्देश्यों या एससीआई मॉडल फिट करने के लिए संशोधित किया जा सकता है। हम फिर भी समय बिंदुओं की संख्या और SCBF माप के बीच देरी अन्य अध्ययनों की जरूरतों को पूरा करने के लिए अनुकूलित किया जा सकता है, (चोट और 15 मिनट के बाद एससीआई से पहले) केवल दो समय बिंदुओं पर SCBF को मापने के लिए चुना है। उदाहरण के लिए, हमारे पिछले काम 17 में, हम पहले घंटे के बाद एससीआई भर में लगातार पांच बिंदुओं पर समय SCBF मापा जाता है। यह दिखावा समूह (कोई एससीआई) में, हम SCBF में एक प्रगतिशील कमी निरीक्षण करने के लिए हैरान थे कि नोट करना महत्वपूर्ण है। हम शुरू में दोहराया microbubble अर्क रीढ़ की हड्डी वाहिका संरचना, आगे प्रयोग (अप्रकाशित डेटा) को नुकसान पहुँचा सकता है डर था कि एक ओर जहां इन परिवर्तनों प्रगतिशील laminectomy के द्वारा प्रेरित स्थानीय ऊतक शारीरिक स्थितियों में परिवर्तन (तापमान, जलयोजन), और साथ ही लंबे समय तक के कारण किया गया है कि इस बात की पुष्टि टी की प्रदर्शनीवह ड्यूरा और परिवेशी वायु और अल्ट्रासाउंड जेल करने के लिए आसपास के ऊतकों। संचलन कई मापदंडों के प्रति बेहद संवेदनशील और vascoconstriction या vasodilatation इसलिए संभावना है के रूप में इन समस्याओं, microcirculation के साथ काम कर रहे सभी प्रयोगों में आम हैं। इसलिए, हम शल्य घाव खुला रहता है अवधि के दौरान जो जितना संभव हो कम है कि सलाह देते हैं। कई SCBF माप एक लम्बी अवधि में की जरूरत है, इसके चारों ओर शारीरिक स्थितियों को बहाल करने के क्रम में और रीढ़ की हड्डी के अंदर अधिग्रहण के बीच पशु चीरा बंद करने के लिए बेहतर होगा।
यह आकार, आकार, स्थान और SCBF विश्लेषण के लिए ROIs की संख्या को संशोधित करने के लिए भी संभव है। CEU के प्रमुख लाभ में से एक माप दर्ज आंकड़ों ऑफ़लाइन प्रसंस्करण द्वारा प्रयोगात्मक पूरा होने के बाद कभी भी बनाया जा सकता है। यह माप दोहराने के लिए या यदि आवश्यक हो तो माप सेटिंग्स / मानकों को संशोधित करने के लिए भी संभव है।
अल्ट्रासाउंड इमेजिंग के स्थानिक संकल्प अल्ट्रासाउंड तरंगों की आवृत्ति के लिए आनुपातिक है। स्थानिक संकल्प बेहतर, अल्ट्रासाउंड आवृत्ति अधिक है। हम एक उच्च का इस्तेमाल किया हैके बारे में 100 माइक्रोन के एक पिक्सेल संकल्प के साथ एक छवि प्रदान करता है जो -frequency (12-14 मेगाहर्ट्ज) जांच। बहुत-उच्च संकल्प सिस्टम के साथ, आवृत्ति 55 मेगाहर्ट्ज तक बढ़ जाती है और प्रत्येक पिक्सेल के बारे में 20 माइक्रोन 20 है। इस तरह के उपकरणों पैरेन्काइमा में SCBF की बहुत अधिक ठीक वितरण को दर्शाती है जो CEU, के लिए भी इस्तेमाल किया जा सकता है। हालांकि, बहुत-उच्च संकल्प सिस्टम बहुत अधिक महंगे हैं।
कई अन्य तकनीकों एससीआई में SCBF को मापने के लिए प्रस्तावित है, लेकिन वे सभी अद्वितीय सीमाएं हैं किया गया है। ऐसे रेडियोधर्मी microspheres के 7,8 या C14-iodo-antipyrine autoradiography 9, के रूप में कुछ, पशु बलि की आवश्यकता होती है। इन मामलों में, रीढ़ की हड्डी के विश्लेषण के लिए काटा जाना चाहिए। दूसरी ओर, हाइड्रोजन निकासी तकनीक 10, वास्तव में SCBF संशोधित कर सकते हैं जो intraspinal इलेक्ट्रोड प्रविष्टि की आवश्यकता है। इसके अलावा, माप केवल रीढ़ की हड्डी पैरेन्काइमा का एक बहुत ही प्रतिबंधित क्षेत्र में बनाया जा सकता है। हल्की माइक्रोस्कोपीएक रीढ़ की खिड़की के माध्यम से भी microcirculation में आकलन करने के लिए एक तरीका प्रदान करता है, लेकिन इस दृष्टिकोण अवलोकन का एक बहुत ही सीमित गहराई है। यह केवल पैरेन्काइमा 16 भीतर सतही पिया मामले में और नहीं संचलन का निरीक्षण करने की अनुमति देता है।
साहित्य में, SCBF का वास्तविक समय में विवो आकलन आमतौर पर लेजर डॉपलर इमेजिंग 11-13 से प्रदर्शन कर रहे हैं। हालांकि, यहां तक कि इस तकनीक को कई सीमाएं हैं। लेजर व्यास में कम से कम 1 मिमी है के बाद से सबसे पहले, SCBF केवल व्यास में लगभग 1 मिमी की एक अर्ध-क्षेत्र को इसी एक बहुत ही सीमित क्षेत्र में मूल्यांकन किया जा सकता है। चूहे की रीढ़ की हड्डी के व्यास में लगभग 3 मिमी है, विश्लेषण के सीमित क्षेत्र में एक बड़ी बाधा है। हम बरकरार रीढ़ की हड्डी में है कि SCBF सजातीय नहीं है पता चला है के रूप में इसके अलावा, यह ऊतक microcirculation में से एक उचित प्रतिनिधित्व के लिए एक बड़े क्षेत्र में SCBF को मापने के लिए महत्वपूर्ण है। दूसरे, लेजर पैठ और इसलिए देते का एक सीमित गहराई हैसतही SCBF cts। नतीजतन, यह parenchymal SCBF लेकिन यह भी पाई मैटर की है कि (कि पैरेन्काइमा चारों ओर से घेरे) के उपाय ही नहीं है। पाई मैटर एक अद्वितीय नाड़ी तंत्र है और parenchymal जहाजों के रूप में ही ऑटो नियामक तंत्र के अधीन नहीं है, इस जानकारी को गुमराह किया जा सकता है। अन्त में, लेजर डॉपलर किसी भी रूपात्मक जानकारी प्रदान नहीं करता है। CEU विशिष्ट स्पष्ट रूप से पैरेन्काइमा में पहचाना जा सकता है कि इसके विपरीत एजेंट पेश करते हुए कॉर्ड (बी मोड) की रूपात्मक छवियों को प्रदर्शित करने से ऐसी सीमाओं पर काबू।
दूसरे दृष्टिकोण के लिए इसके कई फायदे के बावजूद, CEU भी कुछ अलग सीमाएं हैं। माप एक द्वि-आयामी बाण के समान टुकड़ा पर किया जाता है के बाद से पैरेन्काइमा के अन्य क्षेत्रों से, SCBF (आमतौर पर केंद्रीय नहर के समानांतर) दुर्गम हैं। इसके अलावा, एक भी द्वि-आयामी बाण के समान रीढ़ की हड्डी खंड द्वारा उत्पन्न की जानकारी पूरी की हड्डी के प्रतिनिधि नहीं हो सकता। Nevertheleएस एस, यह कई सावधानियों के द्वारा नियंत्रित किया जा सकता है। सबसे पहले, एक ही स्थान पर माप दोहरा द्वारा, पहली माप (बरकरार रीढ़ की हड्डी) एक आधारभूत मूल्य के रूप में इस्तेमाल किया जा सकता है बनाया है। दूसरा, रीढ़ की हड्डी के midline (द्विपक्षीय चोट) पर घायल करके, SCBF परिवर्तन बाएँ और दाएँ (अप्रकाशित डेटा) के बीच सममित होना चाहिए। इन सावधानियों SCBF के वैश्विक अनुदैर्ध्य वितरण को प्रतिबिंबित करने के लिए पर्याप्त है एक बाण के समान टुकड़ा का विश्लेषण है कि यह सुनिश्चित करने में मदद।
अल्ट्रासाउंड मशीनों की उच्च लागत के एक और सीमा है। हालांकि, कई समाधान इस समस्या को लक्षित करने के लिए मौजूद हैं। सबसे पहले, कुछ प्रयोगशालाओं उनके प्रयोगों के लिए निर्माता द्वारा एक अस्थायी ऋण के लिए बातचीत कर सकते हैं। अल्ट्रासाउंड मशीनों परिवहनीय हैं, अस्थायी ऋण संभव हो रहे हैं। यह हमारी प्रयोगशाला द्वारा इस्तेमाल किया दृष्टिकोण से किया गया है। वैकल्पिक रूप से, प्रयोगशालाओं के एक समूह मशीन खरीदने के लिए संसाधनों पूल और लागत को विभाजित कर सकते हैं। अन्यथा, कई विश्वविद्यालय संस्थानों इमेजिंग सुविधाओं और अल्ट्रासाउंड मशीन हैआवश्यक उपकरण के रूप में की सिफारिश की जा सकती है। इस प्रकार, जानवरों CEU मूल्यांकन के लिए इमेजिंग सुविधा जाया जा सकता है और उसके बाद अन्य प्रयोगों के लिए वापस लाया।
संवहनी परिवर्तन, इसके विपरीत एजेंट (microbubbles) का आकलन करने के लिए नसों के द्वारा इंजेक्शन चाहिए। कंठ या ऊरु नस की कैथीटेराइजेशन आक्रामक और जोखिम भरा है, नसों आसानी से सुलभ है और स्पष्ट रूप से पहचाने जाने योग्य हैं। इसके विपरीत, पूंछ नस इंजेक्शन बहुत कम आक्रामक है, लेकिन पोत उचित कैथीटेराइजेशन के लिए खराब / प्रतिष्ठित दिख रहा है। इसलिए, सुई टिप ठीक से नस के अंदर रखा नहीं किया जाएगा या यह पूरे प्रयोग से समझौता किए, इंजेक्शन के दौरान स्थानांतरित कर सकते हैं कि वहाँ एक जोखिम है। ऐसे कारण से, हम गले नस का उपयोग करें और लगातार microbubble निषेचन के लिए एक कैथेटर को पेश करने के लिए पसंद करते हैं।
बांस हड्डियों रीढ़ की हड्डी के चारों ओर। अल्ट्रासाउंड तरंगों हड्डी से परिलक्षित होते हैं और रीढ़ की हड्डी laminas माध्यम से पारित नहीं कर सकते हैं, इमेजिंग की आवश्यकता हैहड्डी हटाने (laminectomy) एक ध्वनिक विंडो खोलने के लिए। कशेरुका नहर खोलने के लिए सबसे आसान तरीका है एक laminectomy के माध्यम से बांस के पीछे कट्टर दूर करने के लिए है। इस प्रोटोकॉल में, हम उपरिकेंद्र, Penumbra क्षेत्र और बरकरार रीढ़ की हड्डी के दूरदराज के क्षेत्रों सहित रीढ़ की हड्डी का एक लंबा खंड, कल्पना करने के लिए एक चार स्तर laminectomy की आवश्यकता होती है। प्रयोगात्मक एससीआई मॉडल की एक बहुमत (क्लिप आवेदन या impactor कुचलन के लिए) एक laminectomy की आवश्यकता होती है, ये आम तौर पर 1-2 पटल हटाने से मिलकर बनता है। व्यापक 4-स्तर laminectomy के हमारे अध्ययन की एक और सीमा है। एक ही उपरिकेंद्र और Penumbra क्षेत्र का अध्ययन करने की जरूरत है, तो हालांकि, एक कम व्यापक laminectomy के बनाया जा सकता है और सिफारिश की है।
अंत में, ऊपर वर्णित कई सीमाओं के बावजूद, CEU SCBF परिवर्तन और विभिन्न उपचारों (अनुसंधान प्रयोजनों) के प्रभाव का आकलन करने के लिए एक उपयोगी उपकरण है। यह विश्वसनीय, वास्तविक समय, इन विवो दृष्टिकोण को कम करने के उपचार को देख के लिए आदर्श हैischemia और बाद के ऊतक परिगलन के बाद एससीआई।
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| External Fixator Hoffman 3 | Stryker, Kalamazoo, USA | Modular system used to build the custom made 3D frame and the jointed arm holding the ultrasound probe | |
| Toshiba Applio | Toshiba, Tokyo, Japan | Ultrasound machine | |
| Sonovue | Bracco, Milan, Italy | Contrast agent : microbubbles | |
| Vueject pump | Bracco, Milan, Italy | Electric pump for infusion of microbubbles bolus | |
| Aquasonic Ultrasound Gel | Parker Laboratories, Fairfield, NJ, USA | Ultrasound gel used to transmit the ultrasound waves | |
| Isovet | Piramal Healthcare, Mumbai, India | Isoflurane used for anesthesia | |
| Ultra Extend | Toshiba, Tokyo, Japan | Software used for quantification of spinal cord blood flow | |
| Mastercraft Five-piece Mini-pliers Set, Product #58-4788-6 | Canadian Tire, Toronto, Canada | Set of pliers for Do-it-yourself job |
References
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