Introduction
마우스는 다른 개인을 인식하는, 음식을 찾는 새로운 환경을 탐색하기위한 후각에 의존하고, 성적 행동 1-3. 그것은 연구자가 실험 동물 음식, 사회적 상호 작용, 또는 마우스의 응답을 유도하기위한 어떤 냄새를 포함하는 행동 테스트를 투여하기 전에 냄새가 작동하는 감각을 가지고 있는지 여부를 설정하는 것이 중요하다. 후각 상실증 또는 무능력 행동 패러다임 다양한 가양 음화 초래할 수있는 다른 냄새 구별하기 때문에 행동 검사의 다른 유형이 수행되기 전에 검출하고 악취를 구별하는 마우스의 능력은 확립되어야한다.
후각 습관화 / dishabituation 시험 제 1980 4에 기재 하였다. 시험은 박사에 의해 마우스에서 사용되도록되어왔다. 뮤 양 및 재클린 크롤리 5. 이 조사는 ESTA 할 수있는 간단하고 저렴한 검사입니다마우스를 감지하고 냄새를 구별 할 수 blish. 후각 테스트뿐만 아니라,이 테스트는 조사자 마우스의 일반적인 동작을 관찰하고 초기 테스트 요법으로 수행 할 수있게한다. 질적 마우스의 운동에 대한 관찰, 불안의 징후, 활동 수준, 음식 냄새 대 사회 냄새에 반응 테스트를 수행 할 수있는 새로운 영역을 신호 수 있습니다.
이 시험에서, 다양한 냄새에 침지 면봉 행 마우스에 세 번 제공된다. 냄새의 각 반복 프레 젠 테이션으로, 마우스는 각 후속 프리젠 테이션을 조사 적은 시간을 보내고, 면봉에 길들 것이다. 새로운 냄새가 제공되면 dishabituation가 발생하고, 전형적인 마우스는 현재 및 이전 (5) 냄새를 구별 할 수 있음을 나타내는, 면봉을 조사 시간을 보낼 것이다. 이 시험은 한번에 하나의 마우스에 투여하고 45 분 ACC를 포함limation 기간은 시험을 45 분으로 하였다.
이 테스트를 수행하기 쉽지만 그것은 마우스 후각 시스템에 대한 정교한 질문을 조사하는데 사용될 수있다. 이러한 매립 식품 시험 후각 등의 다른 대중적인 테스트는 단순히 후각 상실증의 유무를 확립한다. 그러나 후각 차별과 습관화 검사는 수사관이 마우스는 냄새를 감지 할 수 있지만, 다른 냄새를 구별 할 수있는 능력을 가지고뿐만 아니라 것을 확인할 수 있습니다. 습관화 및 dishabituation의 패턴은 새로운 돌연변이 -6,7- 냄새를 구별 할 수 있음을 확립하는데 사용되어왔다. 놀라운 연구에서, Fadool 연구진은 정상 마우스 (8)보다 매우 유사한 냄새를 구별 할 수 있습니다 "슈퍼 smellers을"Kv1.3 채널의 유전자 타겟 삭제와 그 쥐를하고 있습니다 보여 냄새의 복잡한 혼합물을 사용했다.
새로운 녹아웃 마우스 모델을 검토 할 때 그것은 establis하는 데 유용합니다시간 기본 감각 작업에 대한 정상적인 동작의 존재. 테스트식이 요법 초기에 완료되면, 냄새 차별과 습관화 검사는 수사관에게 이상한 행동을 관찰 할 수있는 기회를 제공합니다. 이러한 관찰은 돌연변이의 특성을 교란하기 때문입니다 이후 테스트에서 거짓 긍정적이거나 부정적인 결과를 방지 할 수있다. 연구자들은 사회적 행동을 기본 후각 기능을 검증 할 필요성을 조사하기 위해 지속적으로 점점 더 중요 해지고있다. 돌연변이 라인 후각 검사 이외에도,이 시험은 모든 냄새 자극에 대한 약리학 적 치료가 특히 사회적 냄새 자극에 대한 동물의 반응을 증가 여부 등 또는 그들의 응답이 향상되는지 구체적인 질문을 해결하기 위해 사용될 수있다.
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Protocol
다음 실험에 사용 된 성인 남성 쥐가 생성되어 어두운 14 시간 조명 및 10 시간 (20시부터 6시까지 시간) 낮의주기, 22 ° C의 주변 온도에서 베일러 대학에서 보관 하였다. 마우스는 음식과 물에 대한 광고 무제한 액세스 권한을 부여했다. 마우스에 대한 모든 절차는 베일러 대학 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인 된 실험실 동물의 관리 및 사용과 동물의 프로토콜에 대한 건강 가이드의 국립 연구소에 부합했다. 마우스는 늦은 아침 / 오후 일찍 시험 하였다. 연구자 아래의 모든 절차는 냄새를 제거하고 오염을 방지하기 위해 장갑을 착용해야합니다.
비 사회적 냄새 1. 준비
- 신선한 비 사회적 냄새를 테스트의 매일을 준비합니다.
주 : 조사는 냄새를 준비하기 위해 장갑을 사용해야합니다.- 물 각각 10 ㎖로 3 원심 분리기 튜브를 입력합니다.
- 15 ml의 & #에 바나나 추출물의 피펫 100 μL(160), 원뿔 튜브와 1 초 15 ML 원뿔 튜브에 아몬드 추출물 100 ㎕ : 100 희석.
참고 : 제 15 ML 튜브는 물을 포함 할 것이다.
사회 냄새 2. 준비
- 발생합니다 아침 시험에 신선한 사회적 냄새를 준비합니다. 적어도 3 일에 대한 청소와 마우스의 동일한 번호가 포함되지 않은 두 개의 케이지에서 사회 냄새를 얻습니다. 테스트 피사체와 같은 성별의 생쥐에서 사회적 냄새를 얻습니다.
주 :이 RT에 저장되는 강한 냄새 일관성을 유지하기 위해 4-6 시간 이내에 사용하여야한다.- 면봉이 필요로하는 사회적 냄새가 생성하는 방법에 대해 많은 결정 : 테스트중인 각 마우스는 사회 냄새 2에서 사회 냄새 1, 3의 세 면봉으로 표시됩니다.
- 더러운 케이지의 하단에 지그재그 방식으로 면봉을 닦아 사회 냄새를 준비합니다. 팁에 집착 초과 침구를 흔들어.
- 뚜껑 또는 파라 필름으로 덮여 비커에 큰 유리 항아리에 보관 면봉. 한 사회 냄새 1 컨테이너 및 사회 냄새 2 번째를 지정합니다.
- 실험 테스트 룸의 외부 냄새 소스 새장을 유지한다.
테스트 마우스 3. 적응도
- 장갑을 착용하고 테스트 할 마우스의 무게 위에 와이어 뚜껑 제거 물 병 깨끗한 케이지에 개별적으로 배치합니다.
- 마우스가 테스트 룸이 아닌 다른 방에서 45 분 동안 새 케이지에 적응하도록 허용합니다. 방에는 이상한 냄새 나 소음이 없는지 확인합니다.
- 테스트는 약 45 분 소요로, 현재의 마우스를 테스트하기 전에 권리를 적응 깨끗한 케이지에 테스트 할 다음 마우스를 바꾸어 적응 시간을 비틀.
테스트 룸 4. 준비
- 신선한 면봉, 실험실 테이프, 사회 냄새 면봉이 들어있는 병, N의 튜브를 배치온 사회 냄새, 마이크로 피펫, 두 타이머 및 시험 방에 뚜껑이있는 폐기물 병.
- 테스트 룸 냄새, 시끄러운 소리, 밝은 빛의 합리적 없는지 확인합니다. 향수 오드 콜로 뉴 또는 로션을 착용하지 마십시오.
참고 : 관찰자는 테스트 기간 동안 껌이나 사탕을 씹는 안 강한 냄새 식품에 노출을 제한하는 시도해야합니다.
5. 시험 절차
- 시험 방으로 새장에 적응 마우스를 가져오고 앉아있는 동안 볼 편안한 높이에 카운터에 새장을 배치합니다.
- 2 분 동안 각 행의 각 냄새 3 회 제시. 표 1에서 발견 될 수있는 프리젠 테이션을 위해 사용한다.
- 피펫 향기에 부 취제의 50 μL은 면봉의 끝 부분에 테스트 냄새 소스를 캡 다시합니다. 뱃짱, 새장 와이어 상단을 들어 올려 물 병 구멍에 면봉의 무향, 나무 끝을 삽입G 가기 와이어의 아래쪽에서를 통해 길이. 그 냄새의 오염이 방지되도록, 손가락을 포함하여 아무것도에면의 끝 부분을 만지지 마십시오.
- 면 끝의 약 1 인치 케이지로 아래로 중단 될 때까지 물 병 구멍에 면봉을 끌기 위해 계속합니다. 실험실 테이프를 사용하여 케이지의 측면에 면봉의 나무 끝을 붙입니다.
참고 : 뚜껑을 다시 케이지 위에 떨어지지 않도록주의, 테스트 마우스를 방해 할 큰 소음을 유발. - 즉시 2 분 동안 타이밍을 시작합니다. 2 분의 프리젠 테이션 시간이 하나의 타이머를 사용합니다. 2 분 재판 중에 냄새를 킁킁 소요 된 누적 시간을 기록한다. 별도 스톱워치를 사용하여 동물의 행동을 스니핑 개수. 동물의 코는 코 ~ 2cm 또는 팁에 가까운과면 팁을 지향 할 때 활성 스니핑가 정의됩니다.
- 각각의 시험의 종료 후, 와이어 리드를 올리고 UN 통해 아래쪽으로 당겨 면봉 삭제뚜껑 derside (이 와이어를 접촉하는면 팁을 방지하여 악취 오염을 피한다). 500 ml의 폐기물 병에 사용 된 면봉을 밀봉.
- 준비하고 다음 면봉을 삽입하고 타이밍을 시작합니다. 각 간 시험 간격 사이에 약 1 분을 허용합니다. 각각의 향기가 2 분마다 시간, 3 회 연속으로 제공되었다까지 계속한다.
- 마우스가 모든 시험을 완료하면, 할 수있는 외부 시험의 객실에 쓰레기통에 사용 된 면봉을 포함하는 폐기물 병을 비 웁니다. 홈 케이지에 마우스를 돌려줍니다.
6. 분석
- 분산 분석은 뉴먼 - Keuls 다음 양방향 또는 중요한 습관화를 결정하는 유사한 포스트 특별 시험 (연속 같은 냄새 스니핑 적은 시간), 및 dishabitutation (더 많은 시간 새로운 냄새를 킁킁)를 사용하여 냄새의 조건에 따라 각 그룹에 대한 데이터를 분석 할 수 있습니다.
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Representative Results
기술 된 프로토콜에 따라, 결과는 열 성인 (출생 후 하루 90-120) 남성 C57BL / 6J 마우스와 팔 남성 FVB 혼합 배경 변형 (출생 후 하루 50 ~ 70)를 사용하여 기록 하였다. 테스트는 여러 날에 걸쳐 하나의 연구자에 의해 수행되었다. 그래프의 각 점은 냄새를 조사 소요되는 평균 시간을 나타냅니다.
물에 침지 면봉이 처음에 도입되는 경우에는,이 마우스는 새로운 물체 (: 처음 세 데이터 포인트도 1)를 조사하고 많은 시간을 소비한다. 각각의 연속적인 표현으로, 더 적은 시간이 습관화를 나타내는, 면봉을 조사 소요된다. 새로운 냄새가 도입 될 때, 시간이 업틱 생쥐 새로운 냄새와 이전 (: 아몬드 데이터 포인트도 1)를 구별 할 수 있음을 나타내는, 면봉을 조사 보냈다있다. 또, 각각의 연속 프리젠 테이션, 적은 시간이 냄새를 조사 소요된다. 마우스는 상당한 D를 표시세 가지 시험 F (2,18)를 통해 물을 면봉을 스니핑 시간 ecrease 3.8, P <0.05 =. 반복 아몬드 냄새 F (2,18) = 3.6, P <0.05되게 때 그들은 비슷한 패턴을 보여줍니다. 셋째 냄새함으로써 여전히 습관화 시연되고 있지만,이 시험에 의해 동물 바닥 효과 (도 1 : 바나나 데이터 점)에 도달한다. 동작은 기능이 어떤 낮은 신뢰성없는 동작을 측정하기 너무 낮을 때 바닥 효과이다. 바나나 냄새 F (2,18) = 2.5, P <0.1되게 때 그들은 세 가지 시험을 통해 변경 사항을 표시하지 않습니다. 그러나 냄새의 모든 9 프리젠 테이션이 일원 분산 분석은 시간이 F (8,72) = 3.8, P <0.001에 비해 상당한 효과를 보여줍니다.
습관화과 차별의 동일한 패턴은 비 사회적 냄새와 같은 소셜 냄새로 알 수있다. 그러나 마우스는 더 많은 시간 사회 냄새를 조사 (그림 2)를 쓴다. T 스니핑 보낸 시간의 유의 한 감소가그는 사회 악취 모든 (6) 시험은 F (2,18) = 6.1을 결합했을 때, P <0.01. 그러나, 처음 세 개의 시험 F (2,18) = 3.0, P = 0.076 이상 한계 효과가 있었다. 이것은 약간의 습관화가 아닌 최초의 사회적 냄새를 킁킁 시간 감소의 통계적으로 유의 한 양이 있었다 제안합니다. 동물 사회 악취 제 프레젠테이션 중에 사회적 악취 F (2,18) = 6.1, p <0.01를 조사 시간의 양의 상당한 감소가 있었다.
우리는 남성 FVB 혼합 배경 변형의 방법을 반복했다. 물에 침지 면봉이 처음에 도입되는 경우에는,이 마우스는 새로운 물체 (: 처음 세 데이터 포인트도 3)을 조사하고 많은 시간을 소비한다. 각각의 연속적인 표현으로, 더 적은 시간이 습관화를 나타내는, 면봉을 조사 소요된다. 새로운 냄새가 도입되면, 시간 업틱이 마우스는 새로운 냄새를 구별 할 수 있음을 나타냅니다 면봉을 조사 보냈다가차 이전 (그림 3 : 아몬드 데이터 점). 또, 각각의 연속 프리젠 테이션, 적은 시간이 냄새를 조사 소요된다. 마우스는 세 가지 시험 F (2,14) = 13.3, P <0.001 이상 물을 면봉을 스니핑 시간의 유의 한 감소를 보여줍니다. 반복 아몬드 냄새 F (2, 14) = 12.7, P <0.001되게 때 그들은 비슷한 패턴을 보여줍니다. 이 변형에서 여전히 세 가지 시험에서 유의 한 차이가 있었다. 세 번째 냄새에 의해 그들은 여전히 습관화 입증된다 (그림 3 : 바나나 데이터 포인트)하지만 바나나 냄새 F (2,14) = 3.04, P되게 때 바닥 효과로 인해 그들은 세 가지 시험을 통해 변화를 보이지 않는다 = 0.08. 그러나 냄새의 모든 9 프리젠 테이션이 일원 분산 분석은 시간이 F (8,56) = 9.6, P <0.001에 비해 상당한 효과를 보여줍니다.
습관화과 차별의 동일한 패턴은 비 사회적 냄새와 같은 소셜 냄새와 보이지 않았다. 중요한 없었다시간의 감소는 모든 (6) 시험이 F (5,35) = 0.16, P = 0.97를 결합했을 때 사회적 냄새를 킁킁 보냈다. 데이터는 쥐가 두 사회 냄새의 반복 프리젠 테이션에 길들하지 않는 것이 좋습니다.
그림 1 : 평균 시간은 남성 C57BL / 6J 마우스 비 사회적 냄새를 조사 보냈다 각각의 데이터 포인트는 동물이 특정의 비 사회적 냄새를 조사 소요되는 평균 시간을 나타냅니다.. 오차 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다. 별표 (*)는 그룹 습관화 표시되는 유의 한 차이 (p <0.05)를 나타낸다.
그림 2 :. 평균 시간은 남성 C57BL / 6J 마우스에 대한 사회적 냄새를 조사 보냈다 각각의 데이터 포인트는 평균 시간을 나타내는 동물 SPENt는 특정한 사회적 냄새를 조사. 오차 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다. 별표 (*)는 그룹 습관화 표시되는 유의 한 차이 (p <0.05)를 나타낸다.
그림 3 : 평균 시간은 남성 FVB 혼합 배경 변형에 대한 비 사회적 냄새를 조사 보냈다 각각의 데이터 포인트는 동물이 특정의 비 사회적 냄새를 조사 소요되는 평균 시간을 나타냅니다.. 오차 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다. 별표 (*)는 그룹 습관화 표시되는 유의 한 차이 (p <0.05)를 나타낸다.
그림 4 : 평균 시간은 남성 FVB 혼합 배경 변형에 대한 사회적 냄새를 조사 보냈다 각각의 데이터는 represen를 가리 킵니다.그 동안 TS 동물은 특정 사회 냄새를 조사 보냈다. 오차 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다.
| 냄새 |
| 물 |
| 물 |
| 물 |
| 아몬드 |
| 아몬드 |
| 아몬드 |
| 바나나 |
| 바나나 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 1 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 1 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 1 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 2 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 2 |
| 익숙하지 않은 사회 냄새 2 |
표 1
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Discussion
이 문서에서 제공되는 결과는 마우스에 최적입니다. 마우스는 새로운 냄새에 강한 반응을 보여, 신속하게 길들. 이 방법의 주요 단계 중 하나는 악취의 제조이다. 조사는 오염을 방지하기 위해 서로 냄새를 분리하기 위해 상당한주의를 기울 필요가있다. 또 다른 중요한 측면은 면봉의 표현이다. 마우스가 팁을 조사 할 수 있지만, 끝에 찢어지지 않도록 조사는면 팁의 최적의 위치 문제를 해결해야합니다. 시험의 중요한 구성 요소는 악취의 선택이다. 우리는 세 가지가 아닌 사회적 냄새를 제시하지만 추가 냄새를 포함 어렵지 않을 것입니다. 한 가지주의해야 할 점은 서로 눈에 띄게 다른 냄새를 선택하는 것입니다. 비슷한 냄새가 순차적으로 제시하는 경우 하나는 "바닥 효과"를 관찰 할 수 있습니다. 또한, 마우스는 너무 많은 소설 냄새가되게 할 때 그들의 반응을 줄이기 위해 시작할 수 있습니다. 수사관을 포함하고자하는 경우뉴 부가 냄새는 그 / 그녀는 시험을 추가로 일을 포함 할 수 있습니다. 그것은 각각의 마우스를 테스트하기 위해 약 1 시간 소요됩니다. 또한, 하나는 실험 조건으로 그들을 포함하기 전에 제어 생쥐의 냄새의 선택의 문제를 해결해야합니다.
후각 습관화 / dishabituation는 사회적 행동을 조사 할 때 포함 할 수있는 중요한 시험이다. 세 챔버 사회적 행동 검사는 일반적으로 마우스의 사회적 행동 적자를 검사하는 데 사용됩니다. 이 테스트는 실험 동물은 새로운 객체와 챔버의 다른 끝에서 컵 아래에 위치하는 새로운 마우스를 조사하는 조건이 포함되어 있습니다. 시험은 또한 신규 한 마우스 컵과 다른 컵 아래에 배치되는 다른 마우스 (익숙한 마우스) 아래에 배치되는 상태를 포함 할 수있다. 연구자는 실험 마우스가 두 개의 구별 할 수 있는지 여부를 검사합니다. 후각이기 때문에 메인 감각 양상 쥐는 다른 쥐 9-11를 식별하는 데 사용할, 장애인 후각이 작업에 자신의 능력을 손상시킬 수 있습니다. 장애인 후각의 데이터를 잘못 해석 될 수 있습니다. 예를 들어, 실험자는 마우스 익숙한 마우스에 비해 신규 한 마우스로 더 많은 시간을 소요하지 않는다는 것을 관찰 할 수있다. 이 사회 적자 또는 마우스에서 손상된 사회적 기억의 증거가 테스트되고 보여 나타날 수 있습니다. 그러나, 단순한 해석은 동물이 제대로 동물을 감지 할 수 있음을 할 수있다.
후각 습관화 / dishabituation 테스트는 자폐증의 마우스 모델을 명확히하는 데 유용했다. 자폐증 하나 종종 사용 마우스 모델 BTBR T + TF / J (BTBR) 마우스 균주이다. 이는 자폐증의 세 가지 핵심 행동 특성에 대한 강한 얼굴 타당성이있는 근친 변형이다. 그러나, 하나의 관심사는 자신의 사회적 행동 적자가 손상 후각 시스템에 의한인지하고있다. 양 연구팀은 BTBR 변형이 habitu의 사용을 통해 후각을 손상 여부 조사ATION / dishabituation 테스트 (12). 그들은 그들의 nonsocial 냄새 물, 아몬드 냄새, 바나나 냄새의 세 프리젠 테이션을 사용했다. 그런 다음 129 / SvlmJ 및 B6 마우스 균주로부터 제조 된 사회 냄새를 사용했다. BTBR 변형은 nonsocial 냄새에 습관화 및 dishabituation을 표시. 마우스는 최초의 사회적 냄새에 거주을 보여하지만, 사회 냄새에 dishabituation을 보이지 않았다. 하나의 가능성은 서로 다른 사회 냄새를 구별 할 수 없을 수 있다는 것이다. 이 사회적 자극이 제시 할 때 사회적 행동 시험에서 자신의 능력을 손상시킬 수 있습니다. 자폐증의 다른 마우스 모델을 탐구하고이 생쥐에서 변경 무엇에 새로운 통찰력을 제공 할 수있는 때 중요한 고려 사항이다.
요법 이니 및 dishabituation 학습의 기본 비 연관 메커니즘입니다. 이러한 학습 원리는 복잡하고 단순한 유기체 (13, 14)의 다양한 종류에서 증명되고있다. 그러나, 이러한 메커니즘학습의 마우스 후각 행동을 자주 조사하지만,이 시스템은 행동 검사의 더 큰 배터리의 일환으로 측정하는 것이 중요했다. 이 테스트는, 설정 및 실행에 저렴 테스트 하루 만 필요하며, 여러 마우스는 일일 내에서 테스트 할 수 있습니다. 이 시험의 주요 목적은 후각 기능을 검사하는 것이다. 시험의 결과는 악취 성분을 포함 사회적 행동 검사 및 기타 검사의 오해를 줄일 수 있습니다.
모든 작업에서 마우스 동작을 검사 할 때 몇 가지 고려 사항이 있습니다. 마우스의 변형, 동물의 성별, 하루의 시간을 검사하는 데 필요한 모든 요소입니다. 연구자가 혼합 균주를 사용하는 경우, 냄새의 조사 행동에 더 많은 변화가있을 수 있습니다. 우리는 혼합 FVB 변형에서 데이터를 발표했다. 이들은 비 사회적 악취 테스트에서 우수한 (도 3)를 수행 하였다. 그들은 많은 양의 O에 대한 사회적 냄새를 조사,하지만F 시간, 그들은 사회 냄새 (그림 4)의 반복 프리젠 테이션에 습관화를 보여주지 않았다. 마우스는 습관화을 보여 더 많은 시련을 받아야 할 필요가 있습니다. 우리는 대부분의 균주들에게 유용하게 쓰일 수있을 것이다 일반적인 방법을 제공하고 있습니다. 처음으로 임의의 변형 거동을 조사 때, 상기 요인을 고려하여야한다. 대조 동물의 성능을 검사하여 조사자 선택된 냄새를 조절해야 할 수도, 냄새가 제시되는 횟수, 조명 조건, 테스트에 대한 일 시간, 동물의 성별. 이것은 다른 마우스 동작에 대한 사실 및 테스트의이 유형에 고려되어야한다. 우리는 쉽게 구입할 수 있습니다 냄새를 포함했다. 연구자는 그들이 순수한 냄새를 사용하지 않을 것을 우려한다면 그들은 시그마 - 알드리치에서 주문 고려할 수 있습니다. 그들은 1600 위에 아로마 원료 데이터베이스를 갖는다. 이것은 조사자 순수한 냄새를 사용할 수 있지만, 비용이 될 수있다일부 실험실에 금지.
실험이 고려할 수있는 몇 가지 시험 조건이 있습니다. 많은 테스트에서 동물은 시험 될 방에 순응한다.이 프로토콜에서 우리는 한 방에서 실험 동물을 적응하고 다른에 그것을 테스트. 새로운 방으로 이동 할 때 약간의 흥분을 일으키는 원인이됩니다. 마우스의 모든 테스트 생쥐 같은 방에 수용되는 경우에 모든 생쥐 신규 냄새에 노출되기 때문에 우리는 과정이 방법을 수행 하였다. 실험이 고려할 수있는 두 가지 옵션이 있습니다. 첫 번째는 우리가 위에서 설명한 것입니다. 다른 하나는 그 다음 방에 적응 테스트를 시작할 수 있도록 방으로 동물을 이동하는 것입니다. 테스트가 완료되면 그때 그때 순응시켰다 방에 넣고 다음에 동물이있다. 이 가능하지만 거의 실험 시간을 두 배로한다. 우리가 사용하는 옵션은 실험 기간 동안 시험장에 시험 동물을 이동하는 것이었다. 이 L 초래ESS 테스트 시간. 신규성 유도 각성에 대한 테스트 효율성 및 관심에 균형이있다. 실험은 실험에 가장 적합한 결정해야한다.
이 프로토콜은, 개인 성적 행동 실시간, 그것은 자신의 행동을 기록하는 카메라와 동물의 행동을 연구하기 위해 점점 더 인기를 끌고있다 방법. 동물 행동의 비디오 레코딩의 사용에 따른 장점은 여러 가지가있다. 하나는 방 인간 조사자가 마우스의 동작에 영향을 미칠 수 있다는 것이다. 실제로 한 연구는 남성 실험자를 갖는 마우스의 고통 감도 15 테스트되고 영향을 미칠 수 있음을 발견했다. 또 다른 관심사는 결과 한 조사원으로부터 만 있다는 것이다. 비디오의 사용 기록을 통해 여러 전문가들은 동작을 득점 할 수 있습니다. 하나는 점수가 더 일관된 측정에서 발생합니다 관찰자 사이에 얼마나 신뢰할 수있는 측정 할 수 있습니다. 또 다른 장점은 비디오 프레임 속도가 감소 될 수 있고 친 수 있다는동작의보다 정확한 측정을 제공해 줄. 카메라들의 사용은이 방법으로 쉽게 도입 될 수있다. 설정은 실험실 공간 구성에 따라 달라집니다. 카메라를 사용하는 단점은 채점 시간이 상당히 증가한다는 것이다. 동작 점을 두 개 이상의 관찰자를 요구하는 것은 결과를 생성하는 데 필요한 시간을 증가시킬 것이다. 이 연구실로 노동 부담을 증가하고 많은 녹아웃 라인을 선별 경우 상황에 따라 금지 할 수있다. 또 다른 단점은 두 개 이상의 카메라가 요구 될 수 있다는 것이다. 카메라가 고정 된 위치에있을 것입니다. 마우스 동물을 볼 관찰자 금지 방법으로 악취를 조사하면 다음 시험은 제거 될 필요가있을 수있다. 이것은 쉽게 시력 자신의 라인을 조정하여 동물의 자신의보기를 조정할 수 있습니다 개인과 우려의 적습니다. 그러나,이 프로토콜에 기재된 방법은 쉽게 우리 DESC 프로토콜에 큰 변경없이 비디오 녹화를 포함하도록 조절 될 수있다리베.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Mouse cage | Allentown | Standard mouse cage | |
| Wire lid | Allentown | BCU Mouse WBL 2500 | |
| Bedding | Harlan | 7090 Sani-Chips | |
| Cotton swabs | VWR | 89031-270 | 6” wooden handle |
| Banana extract | McCormick | ||
| Almond extract | McCormick | ||
| Laboratory tape | VWR | 89098-062 | |
| Stop watch | VWR | 62374-000 | |
| Nitrile gloves | VWR | 82026 | |
| Timing device | VWR | 61161-350 | |
| 15 ml conical tubes | VWR | 89003-294 | |
| 2 L beakers | Pyrex | 1003 | |
| Parafilm | Parafilm | PM-992 | 4” x 250’ |
| 1 L bottle with cap | VWR | 89000-240 |
References
- Doty, R. L.
- Restrepo, D., Arellano, J., Oliva, A. M., Schaefer, M. L., Lin, W. Emerging views on the distinct but related roles of the main and accessory olfactory systems in responsiveness to chemosensory signals in mice. Horm Behav. 46, 247-256 (2004).
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- Wesson, D. W., Levy, E., Nixon, R. A., Wilson, D. A. Olfactory dysfunction correlates with amyloid-beta burden in an Alzheimer's disease mouse model. J Neurosci. 30, 505-514 (2010).
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