Protocol
Karışık C57BL / 6 arka plan üzerine Yetişkin (3-4 aylık) erkek fareler bu protokol kullanıldı. Hayvanlar, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde tutuldu ve gıda ve suya serbest olarak ulaşmalarına izin verilmiştir. Bu protokolde yapılan tüm işlemler Drexel Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokollere göre gerçekleştirilmiştir.
1. Cerrahi Alan hazırlanması
- % 70 etanol ile, cerrahi tablo dezenfekte, daha sonra, emici ped ile tüm cerrahi tezgah kapağı ve stereotaksik bitişik cerrahi aletler sağlayabilir.
- Manipülatör kolunun olmadan stereotaksik ekipman ayarlayın. Stereotaksik ısıtma yastığı yerleştirin ve 37 ° C olarak ayarlayın. Hayvan ve ısıtma yastığı arasındaki kağıt havlu veya cerrahi ped küçük bir parça koyarak hayvan aşırı ısınma kaçının.
- Otoklava makas kullanarak, Rea kadar% 0.9 steril tuzlu su çözeltisi içeren steril bir Petri kabı içine otoklava gelfoam küçük parçalarkullanım için dy.
Not: otoklavlanmış aletleri ve steril cerrahi malzemeleri kullanarak steril bir çalışma ortamı sağlayın. Gerektiğinde, 10-15 saniye boyunca bir boncuk sterilizatör içine batırarak hayvanlar arasındaki işlem sırasında ya da cerrahi aletler yeniden sterilize edin. Dezenfekte etmek, gerektiği gibi,% 70 etanol ile ellerini ovuşturarak tarafından işlem boyunca temiz eldiven koruyun.
Cerrahi 2. hazırlıyor Fare
- (G) ev kafesinden fareyi çıkarın ve tartın.
- Izofluran indüksiyon odasına ve 5 2 L / dk ve izofluran buharlaştırıcı ayarlanmış oksijen içine yerleştirin fare anestezi cerrahi uçağı, yaklaşık 3-5 dakika ikna etmek. Yavaşlaması solunum ve immobilizasyon için izleyin. Fare tam ayak tutam refleks ile sedasyon olup olmadığını kontrol edin.
- Fare tamamen uyuşturulmuş olduğunda, stereotaksik çerçeve içinde yer izofluran boru ile bağlı burun konisi, burun sabitleyin. Kafa sağlanması istikrarlı, kulak kanalı içine kulak çubukları yerleştirin ve sıkın.
- Kulaktan kulağa tıraş ve gözler arasında gelen kulakların arkasında için.
- Izopropil alkol ve betadin iyot çözeltisi, 3 kez her alternatif mendil ile cilt sterilize edin.
- Cerrahi işlem sırasında kurumasını önlemek için her iki göze yapay gözyaşları uygulayın.
3. Cerrahi Prosedür
- Ayak veya kuyruk kısma anestezi derinliği izleyin. Orada bir yanıttır ve solunum yavaş ve daha fare uygun cerrahi düzlemdedir.
- Sadece neredeyse bir No. 11 neşter bıçak kullanarak tek firma hareket kulaklar arasına gözlerin arkasında bir parasagital cilt kesi olun. Kenara cildi taşıyın ve hemostatla sağ tarafı klibi.
- No: 11 neşter ve pamuk mat tarafı kullanılarak örten zarın Temizle kafatası aplikatör uçlu. Pamuklu çubuk% 0.9 tuzlu su çözeltisi içinde daldırma ile isteğe bağlı olarak, kafatası silin. Tamamen kurumasını bekleyin.
- BiziKüçük bir cetvel ing, kalıcı bir kalem ile, sagital sütür (Şekil 1) yanal 1 mm koronal sütür ile kaudal ve 1 mm Kraniotomi sol kenarında Kraniotomi anterior sınırını çizecek. Sonra sagital ve koronal sütür, sırasıyla (Şekil 1) 4 mm kraniotomi hakkını ve kaudal sınırları işaretleyin.
- 0.5 mm'lik matkap ucu kullanarak, kalıcı marker anahat takip yavaş delerek kraniotomi yapmaya başlar. Tamamen kafatası yoluyla kırmak için değil emin olun. Basın hafifçe No. 5 forseps ile parietal kemiğin izole parçası üzerinde, zayıflık alanları basınca yol verecek. Inceltilmiş kemik çevre boyunca yeterince zayıf olduğunda, kemik parçası çıkarılmaya hazırdır.
NOT: Araştırmacı deneyimleri zorluk tek parça kemik çıkarmadan, bu kemik yeterince sondaj esnasında inceltilmiş olmadığını göstermektedir. Facilita sonraki hayvanlarda daha kafatası delme dikkateKemik parçasının te kolay çıkarılması. - Bir 23 G iğne ile donatılmış 10 ml'lik bir şırınga kullanarak, izole edilmiş kemik ve delinmiş alanı emmek için% 0.9 tuzlu su, küçük bir miktar uygulanır.
- Stereotaksik ekipmana manipülatör kolunu takın. Rostrally bakan bıçak keskin tarafı ile prob tutucu için yeni bir No. 11 neşter bıçak takın.
NOT: rostral ve kaudal dokular bıçağın keskin ve künt kenarları tecrübe olsa da, sırasıyla, delici yaralanma ile uyarılan mekanik hasar lezyonun ölçüde boyunca karşılaştırılabilir. Biz rostral ve kaudal bölümler arasında GFAP ifade veya çoğalması artışıyla da dahil olmak üzere reaktif gliozis en önemli özelliklerinden hiçbir kayda değer farklılıklar görüyoruz. - Yolumdan manipülatör kolunu tutarak, dikkatli 5/45 açılı forseps kullanılarak izole kemik kaldırın. Ful birinde geride kemik parçasını koparmak kaldıraç kullanarak, izole kemik ve asansörün yan içine forseps ucu takınl hareketi.
NOT: Beyni bıçaklanma veya kafatası altında dura rahatsız etmemek için dikkatli olun. - Emdirilmiş jel köpük küçük bir parça alın ve kurumasını önlemek ve mevcut olabilecek herhangi bir kan emmek için çıplak beyin üzerine yerleştirin.
- Jel köpük yerleştirildikten sonra, yerine manipülatör kolu salıncak ve jel köpük üzerinde Kraniotomi merkezine bıçağı ayarlayın. Jel köpük çıkarın ve uç dura dura delinmesiyle olmadan temas edene kadar bıçak indirin. Mark dorsal / stereotaksik dikey kolunda sürmeli ölçeği kullanılarak ventral koordinatlar.
- Manipülatör kolunu kullanarak, yavaşça bıçağı beyin içine tam 3 mm indirin. Bu manipülatör kolunun üzerinde sürmeli ölçekli işaretleri kullanılarak elde edilir. Bıçak 5-10 saniye yerde kalmak için izin verir. Opposi geçmeden önce Kraniotomi rostral ve kaudal sınırları ulaşmasını sağlayan bıçağı üç kez kaudal bıçak eki rostral ile stereotaksik kol Taşıte sonu.
NOT: Dura bıçağı takmadan önce kaldırılmaz. O | an sıçan dura, ~ aksine kalınlığı 7 80 um, fare dura önemli ölçüde daha incedir (sadece birkaç hücre tabakası kalınlığında) ve sokma esnasında bisturi için kayda değer bir direnç üretmez. Her hayvan tutarlı bir yaralanma almasını sağlamak için her bir fare için yeni bir neşter bıçak kullanın. - Yavaş yavaş beyin bıçağı çıkararak, stereotaksik kol yükseltmek. Bıçağın çıkarıldıktan sonra, hemen herhangi bir aşırı kan veya sıvının kadar emmek için beyin yüzeyindeki gelfoam başka bir parça koyun.
- Bu arada, stereotaksik kol kaldırmak ve No. 11 neşter bıçak atmayın. Kanama durduktan sonra, gelfoam çıkarın.
- Böyle etilon veya prolen olarak emilmeyen sütür, cildi dikilmesi yoluyla yarayı kapatın. Dikişler ameliyattan sonraki 9-10 gün çıkarılmalıdır.
- Evde kafes fare dönün ve fare heatin yavaş yavaş kurtarmak için izinsıkıntı herhangi bir işaret için g ped ve monitör. Isofluorane kaynaklı anestezi Kurtarma tipik isofluorane çıkarıldıktan sonra 2-5 dakika içinde ortaya çıkar. Bu sternum recumbancy kazanmış kadar sahipsiz hayvan bırakmayın.
- Hidrasyon sağlamak için laktat Ringer solüsyonu subkutan 0.5-1 ml yönetme.
4. Post-cerrahi Bakımı
- Yakından koloniye dönmeden önce anestezi kurtarma kadar ameliyat sonrası hayvanların izleyin.
- , Ameliyat sonrası ağrı ve rahatsızlığı azaltmak hemen prosedür takip ip enjeksiyon yoluyla 0.05-0.1 mg / kg buprenorfin yönetmek için.
- Böyle kısıtlı hareketler, tımar eksikliği, ya da kilo kaybı gibi sıkıntı şiddetli belirtileri ameliyat sonrası 2-3 gün hayvanları gözlemleyin. Sıkıntı bu işaretlerin herhangi biri gösteren hayvanlar Euthanize ve çalışma çıkarın.
- Stan tarafından hayvanların euthanize, yaralı dokuların histopatolojisini incelemek içindard Intracardial perfüzyon.
- Kısaca, ketamin / ksilazin aşırı dozda hayvanlara anestezi, daha sonra intrakardiyak 15-20 ml% 0.9 NaCl emdirilmiştir veya karaciğer Deneyin sonunda% 4 paraformaldehit, 60 ml, ardından, kan temizlenene kadar.
- % 30 sukroz çözeltisi aktarmadan önce% 4 paraformaldehid içinde 2-4 saat boyunca beyin ve sonrası düzeltme teşrih. Garcia 8,9 açıklandığı gibi veya standart histolojik veya immünohistokimyasal prosedürlerle Bölüm 40-60 mikron bir kriyostat üzerinde beyinleri ve süreç.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Bu prosedürü geçiren hayvanlar gerekmez, çünkü post-operatif bakım uzman, kısa veya uzun süreli zaman sağ kalım süreleri kolayca yaralanma sonrası akut veya kronik patolojiyi araştırmak için ihtiyaca göre, çalışmaya dahil edilmiştir. Böyle GFAP ve soma hipertrofisi artışı gibi reaktif gliozis temel özellikleri, gibi erken yaralanma sonrası 2-3 gün olarak görülebilir. Reaktif astrositlere için çoğalması zirve faz yaralanma 10 şu günlerde 3-5 sırasında. Aşağıda gösterilen temsilcisi sonuçları 7 gün önce bir bıçak yara lezyonu alınan hayvanlardan vardır.
Bir ön beyin bıçak yaralanması aşağıdaki önbeyin genel morfolojisi ve hücre mimarisini Nissl boyama (Şekil 2) tarafından görüntülenebilir. Bıçak parça lezyonun merkezinde boyunca en belirgin olmasına rağmen, kesintiye kortikal hücre mimarisini hasarlı t rostral ve kaudal ölçüde ortayakonu. Reaktif astrocytes GFAP'ye (Şekil 3) için immünohistokimyasal olarak görülebilir. Birçok kortikal astrositler yaralanma olmaksızın GFAP immünohistokimyasal olarak saptanabilen seviyeleri göstermezler unutmayın. Kontralateral hemisferde (Şekil 3) göreli olarak düşük seviyelerde, kalan Bununla birlikte, GFAP ifadesi, büyük oranda reaktif astrositler ipsilateral hemisferde sınırlıdır düşündüren, yaralanma hemisfer ipsilateral yukarı regüle edilir. Not lezyona kortikal doku ipsilateral GFAP'nin belirgin yükselişini, diğer astrositik belirteçler, S100β gibi kurucu bir yaralanma (Şekil 4) yokluğunda ifade ve yaralanma (Şekil 4) Aşağıdaki benzer ifade düzeylerini korumak vardır gösteriyor iken. Artan GFAP ekspresyonuna ek olarak, reaktif astrositler, hücresel hipertrofi tabi tutulur. Hücre gövdeleri ve süreçler genişlemiş olur ve (GFAP yoğun boyama göstermekŞekil 3).
reaktif astrositler çoğalması veya proliferatif işaretleyiciler Ki67 ya PCNA için immün timidin analogu, 5-bromo-2'-deoksiüridin (BrdU) uygulanması ile gözlenebilir. Biz rutin günlerinde hayvanlara, 3-5 aşağıdaki yaralanma, reaktif gliozis 10 (Şekil 3) tepe 200 mg / kg BrdU, ip yönetmek. Ancak BrdU kesin dozaj ve zamanlama bağımsız olarak BrdU sürekli tatbikat zamanında, proliferasyon geçiren hücreleri, hem de bunların soyu etiket olacağı göz önünde, her bir çalışma için kabul edilir, ama gerektiği BrdU önce hücre döngüsüne girmelerini hücreleri başlar, ya da BrdU yönetim tamamlandıktan sonra, işaretli olmayacak. Şekil 4'te, birçok reaktif astrositler BrdU uygulama zamanı sırasında çoğaldı belirten, 1 hafta sonrası yaralanma de GFAP ve BrdU arasında kapsamlı işbirliği lokalizasyon gösterir. O pr unutmayınoliferating reaktif astrositler reaktif astrositler lezyon çekirdekten distal lokalize ise ağırlıklı olarak, lezyon iç kısma bitişik olarak lokalize büyük ölçüde proliferatif olmayan (Şekil 4) vardır.
Şekil 1:. Fare kafatası şematik kraniotomide alanı gösteren Mavi çizgiler alanının sınırlarını tanımlayan ilk işaretler delinmiş olması betimliyor. Üst ve sol işaretleri sırasıyla aşağıdaki 1 mm ölçülen veya koronal veya sagittal sütür yanal vardır. alt ve sağ işaretleri sırasıyla koronal ve sagital sütür 4 mm ölçülür. kranyotomi çapı (kesikli çizgi), kabaca 3 mm olan bir kranyotomi oluşturma işaretlenen sınırlar içinde bir çember (noktalı çizgi) delme gerçekleştirilir. Şema ölçekli biçimde çizilmiş değildir.
Şekil 2: lezyon hacminde rostral-kaudal ölçüde boyunca Nissl boyama. (A - C) lezyon hemisfer ipsilateral gösteren yaralı beyinleri koronal dilim 1 hafta sonrası yaralanması. Insets çerçeve içindeki bölgelerin görüntüleri yakınlaştırılmış tasvir etmektedir. Bıçak parça ~, Bregma (B ok) den 2,5 mm lezyonun merkezindeki en belirgindir. Lezyon merkezi bölümleri anterior (A) ve posterior (C) 'de bozulmuş kortikal hücre mimarisini (takmalar) unutmayın. Ölçek çubuğu 500 mikron, gömme, 250 mikron. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
Şekil 3: strong> ön beyin bıçak yaralanmasından sonra GFAP 1 hafta aydınlık immünohistokimya. (A - B) yaralı hayvandan taraftaki (A) GFAP boyama ve ipsilateral (B) aynı doku bölümünde hemispheres düşük büyütme görüntüleri. Lezyon bölgesi (B) 'de gösterilmektedir, ve yaralanmamış Kontralateral hemisferde karşılık gelen bölgesi (A)' da gösterilmektedir. Ölçek çubuğu, 100 mikron. (C - D) Normal (C) ve kontralateral ve ipsilateral hemisferde reaktif (D) astrosit, yüksek büyütme görüntüleri sırasıyla. (C) ile karşılaştırıldığında hücre gövdesi ve reaktif astrosit süreçleri dramatik hipertrofi (D) dikkat ediniz. Ölçek çubuğu, 10 mikron.
825 / 52825fig4.jpg "/>
Şekil 4: Reaktif astrositler bir ön beyin bıçak yaralanmasından sonra çoğalırlar. (A - B) BrdU (kırmızı) ve GFAP'ye (yeşil) yaralanmamış kontrol (A) ve yaralı (B) beyinleri, bıçak yaralanması izleyen 1 hafta Immunofluorescent boyama. (C - D) BrdU (kırmızı) için Immunofluroescent boyama ve astrositik işaretleyici S100β (yeşil) yaralanmamış (C) ve yaralı (D) hemisfer, bıçak yaralanması aşağıdaki 1 hafta. Hayvanlar gün 3-5 sonrası yaralanma üzerinde BrdU aldı. Yaralanmamış kortekste astrositler (A ve C, takmalar) çoğalan değil oysa birçok astrositler, yaralı korteks (B ve D takmalar, ok uçları) lezyon yerinde çoğalan unutmayın. DAPI (mavi) ile counterstaining. Ölçek bar, 100 mikron, gömme, 25 mikron.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Bu kafatası ya da altta yatan dura delme sırasında hasar görmemesi çok önemlidir. Patlak değil kafatası sağlamak için sondaj yaparken hafif baskı uygulayın. Dura sağlamak için kafatası parçasını kaldırma kemik ile kaldırdı değilken ek olarak, dikkatli olunmalıdır.
ön beyin bıçak yaralanması modelleri burada MSS bir delici yaralanma nitelendirdi. Böyle FPI veya CCİ olarak TBI modellere göre daha az klinik çevrilebilir olsa da, ön beyin bıçak lezyon modeli ayrık MSS hakaret tarafından tetiklenen çeşitli biyokimyasal, hücresel veya moleküler olayları araştıran amaçlayan çalışmaların geniş bir yelpazede için yararlı bir araç olarak hizmet vermektedir. Bilişsel bozukluklar, sıçanlarda rapor edilmiş olmasına rağmen, 3 haftada bir iki taraflı bıçak yaralanma 11 sonra, tek taraflı bıçak lezyon modeli, burada açıklandığı gibi, yaralanmaya hücresel yanıtı yönelik çalışmalar için en uygun olduğu dikkate alınmalıdır. Böyle yeniden gibi çeşitli nöropatolojik süreçlerin temel yönleri,Aktif gliozis ve skar oluşumu kolaylıkla gözlenir ve ele alınabilir. Yaygın ve yaygın nevropatolojisi, lokalize glial aktivasyon ve patoloji üreten FPI veya CCI aksine, yaralı ve yaralanmamış hemisfer arasında, içi hayvan karşılaştırmaları kolaylaştırmak. Buna ek olarak, lezyon yerinde MSS içine meningeal hücrelerin infiltrasyonu bu hücrelerde ve yerel reaktif astrositler arasındaki etkileşimleri araştırmak için bir fırsat sunuyor. Gerçekte, bu tür etkileşimlerin skar dokusu oluşumunda önemli olan ve olumsuz aksonal rejenerasyon 12 reaktif astrositler permisif özelliklerini düzenlemek için gösterilmiştir.
İşte biz böyle hücre gövdeleri ve süreçlerin hipertrofisi, artan GFAP ifade ve yaralanma kaynaklı çoğalması gibi reaktif astrogliyozun başlıca özelliklerinden bazıları göstermek için standart immünohistokimyasal prosedürleri kullanmak. Oyuklar 1-2 haftalık farelerde gözlenen olmamakla birlikte fol Notlowing bu prosedür, fareler kullanılarak çalışmalar yaralanma 11 Aşağıdaki 3 hafta, kavite oluşumu rapor. Fare ve sıçanlarda nöropatolojisinde farklılıklar da omurilik yaralanması gözlenir. Bir omurilik yaralanması sergi kistleri ya da lezyon yerinde kavite oluşumu geçmesi sıçanlarda ise bu tür boşluklar fareler 13,14 oluşmaya yok.
Prosedür, basit, kolayca tekrarlanabilir, güvenilir ve çok az ekipman gerektirir. Kolayca sıçan veya fare çalışmaları yapmak için modifiye edilebilir. Özellikle, çeşitli transgenik fare hatları ile ya da farmakolojik çalışmalarda bu modelin kullanılması yaralanma MSS yanıtı düzenleyen mekanizmaları yeni fikir verebilir. Lezyon büyüklüğü ve şiddeti ayrı delikler yerine boyuna mekanik lezyonlar üretmek için bıçağı tutan stereotaksik kol kanat ve seyahat mesafe derinliği ayarlanarak değiştirilebilir. Böylece, ön beyin bıçak yaralanması modeli mükemmel bir experimenta olarak hizmet verebilirile l platformu sakatlığı çeşitli nöropatolojik yanıtların belirli yönlerini incelemek için.
CNS Yaralanma, dinamik ve 6 hücreli olan karmaşık bir yanıtı tetikler. Reaktif astrositler ek olarak, mikroglia artıkları fagosite ve pro ve anti-inflamatuar sinyal iletim 15-18 hem başlatmak için hızlı bir şekilde mobilize. Aktif mikroglia ve işgalci makrofajlar, normal hücre fonksiyonu ve hayatta kalma 19-21 için düşmanca bir ortam yaratarak, sitokinler ve kemokinleri üretirler. Bu tür kondroitin sülfat proteoglikan (CSPG) gibi hücre dışı matrisin (ECM) moleküller, reaktif astrositler ve fibroblastlar dahil olmak üzere hücre tiplerinin, çeşitli üretilir ve nöronlar 22,23 hayatta rejenerasyonu ve yapısal yeniden düzenlenmesi için düşman bir ortam yaratmaktadır. Burada bir ön beyin bıçak yaralanması takiben ortaya çıkar reaktif astrogliyozun başlıca özelliklerinden bazıları göstermektedir. Ara-madde F upregülasyonusonraki doku yeniden takiben böyle GFAP, astrosit çoğalması ve glial skar oluşumu gibi ilaments, kolayca standart immünohistokimyasal yöntemler kullanılarak değerlendirilir.
Bu reaktif gliozdan bazı özellikleri Burada vurgulanması ise, reaktif gliyoz değişen özellikler ve özel bir tetikleyici 24 bağlı olarak ortaya çıkan bir gen sentezleme profilleri ile yüksek bağlama bağlı olduğuna dikkat edilmelidir. Bununla birlikte, tamir yaralanma ve girişimlerine MSS yanıtı ile ilgili temel özellikler bir dizi modellenmiş ve ön beyin bıçak lezyonlu dokuda incelenebilir. Gerçekten de, reaktif astrositler 2 nöro-koruyucu özellikler gösteren, levha hasarı, CNS içine artan lökosit süzülmesini ve artan nöronal dejenerasyona yol açan bir ön beyin, aşağıdaki reaktif astrositler çoğalan ablasyon hedef olduğu gösterilmiştir. Daha yakın zamanlarda, reaktif astrositler bir penetre kesici delici alet lezyon, b aşağıdaki izoleut değil non-invaziv yaralanma, in vitro 25,26 nöral kök hücre potansiyelini göstermektedir. Böylece ön beyin bıçak MSS yaralanma tetiklediği, biyokimyasal, hücresel ve moleküler olayların geniş bir eğitim için güçlü bir yaralanma modelidir. Bu yaralanma modelinde kolaylığı ve basitlik yaralanma ve onarım mekanizmaları MSS tepki içine yeni anlayışlar yol açabilir ileri çalışmalar kolaylaştıracaktır.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Stereotax | Harvard Apparatus | 726049 | |
| High speed micro drill | Harvard Apparatus | 724950 | |
| stainless steel scalpel blade, #11 | MedVet | JOR581S | |
| 5/45 angled forceps | Fine Science Tools | 11251-35 | |
| Gelfoam sponge 12 cm x 7 mm | Fisher | NC9841478 | |
| Rb anti-GFAP | DAKO | Z033429-2 | Dilution - 1:20,000 (bright-field); 1:1,000 (fluorescence) |
| Shp anti-BrdU | Abcam | ab1893 | Dilution - 1:20,000 (bright-field); 1:500 (fluorescence) |
| Biotinylated goat anti-rabbit | Vector Laboratories | BA-1000 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Biotinylated rabbit anti-sheep | Vector Laboratories | BA-6000 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Alexafluor 488 goat anti-rabbit | Life Technologies | A-11008 | Dilution - 1:400 (bright-field) |
| Alexafluor 568 donkey anti-sheep | Life Technologies | A-21099 | Dilution - 1:1,000 (fluorescence) |
| DAPI Nucleic Acid Stain | Life Technologies | D3571 | Dilution - 1:1,000 (fluorescence) |
| Cresyl Violet Acetate | Sigma Aldrich | C5042-10G | Dilution - 1% (bright-field) |
References
- Hamby, M. E., Sofroniew, M. V. Reactive astrocytes as therapeutic targets for CNS disorders. Neurotherapeutics. 7 (4), 494-506 (2010).
- Bush, T. G., et al. Leukocyte infiltration, neuronal degeneration, and neurite outgrowth after ablation of scar-forming, reactive astrocytes in adult transgenic mice. Neuron. 23 (2), 297-308 (1999).
- Faulkner, J. R., et al. Reactive astrocytes protect tissue and preserve function after spinal cord injury. The Journal of neuroscience : the official journal of the Society for Neuroscience. 24 (9), 2143-2155 (2004).
- Okada, S., et al. Conditional ablation of Stat3 or Socs3 discloses a dual role for reactive astrocytes after spinal cord injury. Nature Medicine. 12 (7), 829-834 (2006).
- Voskuhl, R. R., et al. Reactive Astrocytes Form Scar-Like Perivascular Barriers to Leukocytes during Adaptive Immune Inflammation of the CNS. Journal of Neuroscience. 29 (37), 11511-11522 (2009).
- Burda, J. E., Sofroniew, M. V. Reactive Gliosis and the Multicellular Response to CNS Damage and Disease. Neuron. 81 (2), 229-248 (2014).
- Maikos, J. T., Elias, R. A., Shreiber, D. I. Mechanical properties of dura mater from the rat brain and spinal cord. Journal of neurotrauma. 25 (1), 38-51 (2008).
- Garcia, A. D., Doan, N. B., Imura, T., Bush, T. G., Sofroniew, M. V. GFAP-expressing progenitors are the principal source of constitutive neurogenesis in adult mouse forebrain. Nat Neurosci. 7 (11), 1233-1241 (2004).
- Garcia, A. D., Petrova, R., Eng, L., Joyner, A. L. Sonic hedgehog regulates discrete populations of astrocytes in the adult mouse forebrain. J Neurosci. 30 (41), 13597-13608 (2010).
- Amat, J. A., Ishiguro, H., Nakamura, K., Norton, W. T. Phenotypic diversity and kinetics of proliferating microglia and astrocytes following cortical stab wounds. Glia. 16 (4), 368-382 (1996).
- Hozumi, I., et al. Administration of prosaposin ameliorates spatial learning disturbance and reduces cavity formation following stab wounds in rat brain. Neuroscience letters. 267 (1), 73-76 (1999).
- Ness, R., David, S. Leptomeningeal cells modulate the neurite growth promoting properties of astrocytes in vitro. Glia. 19 (1), 47-57 (1997).
- Byrnes, K. R., Fricke, S. T., Faden, A. I. Neuropathological differences between rats and mice after spinal cord injury. Journal of magnetic resonance imaging : JMRI. 32 (4), 836-846 (2010).
- Steward, O., et al. Genetic approaches to neurotrauma research: opportunities and potential pitfalls of murine models. Experimental neurology. 157 (1), 19-42 (1999).
- Davalos, D., et al. ATP mediates rapid microglial response to local brain injury in vivo. Nature neuroscience. 8 (6), 752-758 (2005).
- Hanisch, U. -K., Kettenmann, H. Microglia: active sensor and versatile effector cells in the normal and pathologic brain. Nature neuroscience. 10 (11), 1387-1394 (2007).
- Neumann, H., Kotter, M. R., Franklin, R. J. M. Debris clearance by microglia: an essential link between degeneration and regeneration. Brain. 132 (2), 288-295 (2008).
- Nimmerjahn, A. Resting Microglial Cells Are Highly Dynamic Surveillants of Brain Parenchyma in Vivo. Science. 308 (5726), 1314-1318 (2005).
- Horn, K. P., Busch, S. A., Hawthorne, A. L., van Rooijen, N., Silver, J. Another Barrier to Regeneration in the CNS: Activated Macrophages Induce Extensive Retraction of Dystrophic Axons through Direct Physical Interactions. Journal of Neuroscience. 28 (38), 9330-9341 (2008).
- Ip, C. W. Immune Cells Contribute to Myelin Degeneration and Axonopathic Changes in Mice Overexpressing Proteolipid Protein in Oligodendrocytes. Journal of Neuroscience. 26 (31), 8206-8216 (2006).
- Perry, V. H. Contribution of systemic inflammation to chronic neurodegeneration. Acta neuropathologica. 120 (3), 277-286 (2010).
- McKeon, R. J., Jurynec, M. J., Buck, C. R. The chondroitin sulfate proteoglycans neurocan and phosphacan are expressed by reactive astrocytes in the chronic CNS glial scar. Journal of Neuroscience. 19 (24), 10778-10788 (1999).
- Silver, J., Miller, J. H.
- Zamanian, J. L., et al.
- Buffo, A., et al. Origin and progeny of reactive gliosis: A source of multipotent cells in the injured brain. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 105 (9), 3581-3586 (2008).
- Sirko, S., et al. Reactive glia in the injured brain acquire stem cell properties in response to sonic hedgehog. [corrected]. Cell stem cell. 12 (4), 426-439 (2013).
