Introduction
Helt siden sin utvikling på midten av 1990-tallet SOD1-G93A transgen musemodell har vært den mest brukte dyremodell av amyotrofisk lateral sklerose (ALS) 1. Dette transgen musemodell ble genmodifisert til overuttrykke en mutant form av det menneskelige Cu / Zn superoksyddismutase 1 (SOD1) genet husing ALS-assosiert glysin til alaninmutasjon på aminosyre 93 (G93A). Den G93A mutasjon er en av mange mutasjoner i SOD1 genet som kollektivt sminke omtrent en femtedel av familiære ALS tilfeller 2.
Den SOD1-G93A modellen har blitt en arbeidshest av ALS narkotika utviklingsforskning fordi i tillegg til den åpenbare genetisk kobling til ALS, rekapitulerer det mange av de patologiske trekk ved ALS hos mennesker som motor nevron tap, progressiv muskelsvakhet og atrofi, med eventuell lammelse og død tre. Skjønt, som ofte er tilfelle med transgene dyremodeller, er det en iboende biological variasjon forbundet med SOD1-G93A mus. Scott et al. har fastslått at årskull av minst 24 søppel-matchet kjønnsbalansert mus trengs i narkotika-effekt studiedesign for å overvinne støy skapt av biologiske variasjoner fire. Det store antall dyr som kreves i disse studiene i kombinasjon med aggressiv sykdomsutvikling og behovet for daglig oppfølging forbyr bruk av forseggjorte, tidkrevende og potensielt stressende teknikker for å måle nevromuskulær styrke og funksjon (f.eks elektromyografi, gripestyrke, rotorod , etc.). I stedet, fremhever behovet for en in vivo screening-verktøy som på en pålitelig måte vurderer neuromuskulær funksjon av SOD1-G93A mus på en rask måte.
Ved ALS TDI en protokoll utviklet som gjør det mulig for pålitelig vurdering av neuromuskulær funksjon av SOD1-G93A mus på mindre enn 30 sekunder per mus i gjennomsnitt. Denne protokollen encompasses daglig vurdering av bakben funksjon ved hjelp av en enkel nevrologisk poengsystem (NeuroScore) som er beskrevet i denne rapporten i pressen og i videoen. NeuroScore er fokusert på bakben funksjon fordi bakben underskudd er det tidligste rapporterte nevrologiske tegn på sykdom i SOD1-G93A mus 5,6. Videre protokoll utviklet av ALS TDI gir et objektivt vurdering av utbruddet av pareser (svak eller delvis lammelse), progresjon og alvorlighetsgraden av lammelse og den er følsom nok til å identifisere legemiddelinduserte endringer i sykdomsprogresjon.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle forsøk er gjennomført i samsvar med protokollen beskrevet ved National Institutes of Health Guide for omsorg og bruk av dyr, og ble godkjent av ALS TDI institusjonelle dyr omsorg og bruk komité (IACUC).
1. Dyr, bolig og studiedesign
Merk: SOD1-G93A mus koloni ble avledet fra det høye kopien B6SJLTgN (SOD1G93A) 1Gur stamme opprinnelig produsert av Gurney et al 7.. Kolonien blir for tiden opprettholdes ved passering av transgene C57BL / 6-SJL-hanner med villtype C57BL / 6-SJL F1 hunner. F1 dyr er generert ved å krysse SJL hanner med B6 hunner. Mus er sendt til ALS TDI ukentlig på 35-45 dagers alder.
- Tillat mus minst en uke for å akklimatisere seg til dyret av innretningen (12-timers lys / mørke-syklus ved en temperatur på 18-23 ° C og 40-60% fuktighet) før tilordning av en undersøkelse.
- Huset mannlige SOD1-G93A mice ett muse per bur, siden gruppen holder til menn har en tendens til å kjempe. Huset kvinnelige SOD1-G93A mus opp til to per bur. Gi miljøberikelse, i form av plast hytter. Skaffe mat og vann ad libitum, med mindre musene er en del av en studie som krever Drug Administration i drikkevann / mat. I disse tilfellene rasjon og ta opp mat og vann.
- Begynn en narkotika-efficacy studie rundt alder dag 50 og inkluderer 64 søppel-matchet kjønnsbalansert mus (32 per kohort). Til slutt, sørge for at forskerne gjennomfører studiene er blindet for forsøksbetingelsene.
Merk: Det anbefales at en typisk narkotika-effekt studie starter i en alder av dag 50, men basert på den type terapeutisk intervensjon kan det være en fordel å starte studiet tidligere eller senere.
Merk: En studie med 32 mus per årsklasse er drevet til å oppdage kjønnsspesifikke narkotika-effekter. Hvis ingen kjønnsspesifikke sammenligninger er nødvendig, bør 24 mus per kohort nok til å oppdage samlede legemiddel-effekter.
2. Kroppsvekt
- Record kroppsvekter for alle mus i undersøkelser daglig med en nøyaktighet på en tidels gram. Merk: Kroppsvekt er en følsom indikator på sykdomsprogresjon og om eventuelle ubehag som kan følge av kronisk behandling.
- Musekroppsvekt varierer betydelig i løpet av en dag, å være høyere i morgen, og dermed ta dem rundt samme tid hver dag.
3. Nevrologisk Scoring System (NeuroScore)
- Vurdere nevrologiske score (NS) for hver mus daglig ved å observere musen under de tre følgende betingelser utføres i rekkefølge: a) mus er opphengt i halen, b) mus får lov til å gå, og etter utbruddet av parese c) mus blir plassert på dens side.
- For halen suspensjonstest, hold muse ca 1,5 "fra haleroten over ledningen toppen av deres hjem bur for 1-2 sek, vekk fra maten bassenget, mens obsErving bakbena. Gjenta suspensjonstest 3 ganger og ta den mest konsekvente utfallet.
- For gangtest, plasserer du muse på en ren overflate som gir noen trekkraft og en gangavstand på 25 cm (f.eks., Et papirhåndkle teipet ned for å hindre slipping). Tillat musen til å gå totalt 75 cm (3X lengden på papirhåndkle) mens observere sin gangart.
- For "rettende refleks" test, plasserer du muse på venstre eller høyre side, og ved hjelp av en stop-watch måle tiden det tar å rette seg opp uten hjelp fra begge sider. Merk: Bare ett forsøk med denne testen er nødvendig.
- Bestem NS av hvert bakben (venstre eller høyre) uavhengig på en skala fra 0 til 4. Merk: For eksempel en score fra 0, 1 indikerer at venstre bakben NS er 0, mens den høyre bakben NS er en.
- Tildele nevrologiske score (0-4) tilsvarer følgende sett med observasjoner (sammendrag er gitt i tabell 1):
- Tildele NS 0 (Pre-symptomatisk) hvis følgende observeres: Når musen er suspendert etter halen, presenterer bakben en normal spriker altså, det er fullt utvidet bort fra sidelinjen, og det forblir i denne posisjonen i 2 sek eller lenger. Når musen er lov til å gå, er normal gangart observert.
- Tildele NS 1 (første symptomer) hvis følgende observeres: Når musen er suspendert etter halen, presenterer bakben en unormal spriker, det vil si, det er kollapset eller delvis kollapset mot sidelinjen eller det dirrer under halen suspensjon eller det er trukket tilbake / foldet. Når musen er lov til å gå, er normal eller litt treg gangart observert.
- Tildele NS 2 (Onset of parese) hvis følgende observeres: Når musen er suspendert etter halen, er bakben helt eller delvis kollapset, ikke strekker seg mye. (Det kan fortsatt være felles bevegelse). Når musen er lov til å gå, er bakben brukes for frem motion men tærne krøller seg nedover minst to ganger i løpet av en 90 cm gange eller noen del av foten er å dra sammen bur bunnen / bord. Når musen er plassert på venstre og høyre side, er det i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra begge sider.
- Tildele NS 3 (lammelse) hvis følgende observeres: Når musen er suspendert etter halen, det er stiv lammelse i bakben OR minimal felles bevegelse. Når musen er lov til å gå der er bevegelse fremover men bakben ikke brukes for bevegelse fremover. Når musen er plassert på venstre og høyre side, er det i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra begge sider. Merk: Sjelden, etter utbruddet av lammelser, kan urin fuktighet vises på bakbena. Venstre ubehandlet urin fuktighet kan føre til urin "burn" og hudskader. Behandle urin fuktighet ved å klippe håret, bruke varmt vann soaks å fjerne urin, og forsiktig klatt tørr. Hvis hudlesjoner er tilstede gjelder antibiotic salve.
- Tildel NS 4 (Humane end-point) dersom det følgende observert: Når musen er opphengt i halen, er det stivt lammelse i baklemmene. Når musen får lov til å gå, er det ingen bevegelse fremover. Når musen er plassert på venstre og høyre side er det ikke i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra hver sin side. Dvs. fravær av rettende refleks.
4. Dataregistrering og analyse
- I løpet av et medikament effektstudie, legge inn data som samles inn for hver mus i en Laboratory Information Management System (LIMS) eller inn i en kommersielt tilgjengelig regnearkprogrammer.
Merk: ALS TDI-utviklet LIMS programvare er et sentralt register for alle innsamlede data fra interne studier, noe som gjør disse dataene lett tilgjengelig over tid for ALS TDI etterforskere. LIMS sporer noen enkelte mus, med sin unike ID, tilbake til sin avstamning, kroppsvekt eller nevrologisk score på alle studie dager,og inkluderer eventuelle andre observasjoner bemerket i løpet av sin levetid. LIMS genererer til slutt et regneark som brukes for senere analyser. - Etter fullføringen av et medikament effekt studie, dvs. når alle mus når human endepunktet, bruk regnearkprogram (se tabell of Materials) for å beregne den kombinerte NS for hver mus, for hver dag ved å midle de venstre og høyre bakben NS . Deretter beregne median alder ved hver NS for hver mus og antall dager hver mus bruker på et bestemt NS.
- Analysere generelle endringer i NS over tid ved å importere data fra regneark programvare til statistisk programvare (se tabell for material). Passe disse data ved hjelp av en modell av ordinal logistisk regresjon som anslår den forventede NS, med median alder på NS og medikamentfri behandling som virkninger i regresjon. Bruke log-rank khikvadrattest anslå effekten sannsynligheten sannsynlighet og avgjøre om narkotikabehandlingseffekten på NS progresjon er statistiskly betydelig (se Kode Opplysning File for trinn-for-trinn-instruksjoner).
Merk: En p-verdi <0,05 er ansett som statistisk signifikant.
Merk: Denne metoden for statistisk analyse respekterer ordens natur NS data og variable natur NS baner for individuelle mus. Det er foretrukket fordi de enkelte NS baner kan være markert forskjellig noe som resulterer i tids NS-assosierte gruppe gjennomsnitt som ikke er tilstrekkelig reflekterende av NS-responser. I tillegg, i noen tilfeller NS kan variere, spesielt når i null-til-en rekkevidde. - Til slutt, bruk grafer programvare (se tabell of Materials) til å generere "Ordens Forventet NS vs Median alder på NS" grafer for narkotika behandlede og kontroll dyr (figur 2; se Opplysning kodefilen for trinn-for-trinn-instruksjoner). Bruk disse grafene til praktisk anslå skift mellom medikamentbehandlede og kontrollgrupper ved å interpolere fra y-aksen median alder av sykdomsutbruddet (i.e., NS 2) på x-aksen.
Merk: Forskjellen i median alder mellom de to grupper representerer et medikament-indusert forskyvning og blir behandlet som et praktisk mål på størrelsen av effekten.
Merk: høyreskift i forventet NS vs. median alder kurve indikerer bremset symptomatisk sykdomsprogresjon. Omvendt venstrevendte endringer i forventet NS vs. median alder kurve indikerer akselerert symptomatisk sykdomsprogresjon.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Nevrologiske poengsum data for 90 mannlige og 94 kvinnelige ikke-behandlede SOD1-G93A mus studert ved ALS TDI under 2014 ble evaluert. Resultatene viser at mannlige mus vanligvis har en mer aggressiv sykdomsutvikling enn hunnmus, som dokumentert av en større andel av sin levetid på NS 1 sammenlignet med kvinner. NS 2 og NS 3 oppstå med tilnærmet lik frekvens på tvers av kjønn. NS 0 ble ekskludert fra analysen fordi det regnes som en "normal" fenotype. NS 4 ble også ekskludert fordi per definisjon kan det bare skje en gang i SOD1-G93A mus levetid (tabell 2 og figur 1).
NS data blir presentert fra en ALS sykdomsprogresjon effekt farmakologi studie av testforbindelsen TDI173 i SOD1-G93A mus (n = 16 per kjønn / behandling, og 64 totalt mus). I figur 2, er hastigheten av nevrologiske sykdomsprogresjon presenteres som fanges opp av ordinal regresjonsanalyse av data captured bruker NeuroScore protokollen detaljert her. TDI173-behandlede mus ble sammenlignet med vehikkel behandlet kontrollgruppe. Ingen statistisk signifikante forskjeller ble observert når kjønnene ble analysert separat, men statistisk signifikans ble nådd når kjønnene ble slått sammen. Kaplan-Meier analyse for å overleve, selv om viser liknende trender som ordenslogis statistisk analyse, var ikke følsom nok til å avdekke signifikante forskjeller selv når kjønnene ble slått sammen (figur 3).
| NS 1 | Den bakben presenterer en unormal spriker, dvs. den er kollapset eller delvis kollapset mot sidelinjen eller det dirrer under halen suspensjon eller det er trukket tilbake / foldet. | Normal eller litt saktere gangart. | NA |
| NS 2 | Den bakben er delvis eller fullstendig kollapset, ikke strekker seg mye. Det kan still være felles bevegelse. | Den bakben brukes til bevegelse fremover men tærne krøller seg nedover minst to ganger i løpet av en 75 cm gange eller noen del av foten er å dra sammen bur bunnen / bord. | Musen er i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra begge sider. |
| NS 3 | Rigid lammelse i bakben OR minimal felles bevegelse. | Bevegelse fremover er imidlertid den bakben IKKE brukes til bevegelse fremover. | Musen er i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra begge sider. |
| NS 4 | Rigid lammelse i bakbena. | Ingen bevegelse fremover. | Musen er ikke i stand til å rette seg innen 10 sekunder fra hver sin side. |
Tabell 1: Oversikt over fenotypiske observasjoner som brukes til å tildele nevrologiske score.
| Hyppigheten av NS1 | Hyppigheten av NS2 | Hyppigheten av NS3 | ||||
| Male | Female | Male | Female | Male | Female | |
| Antall mus | 90 | 94 | 90 | 94 | 90 | 94 |
| Minimum | 12 | 5 | 1 | 1 | 0 | 0 |
| 25% | 29 | 16 | 4 | 4 | 0 | 0 |
| Median | 37 | 27.5 | 5 | 5 | 1 | 1 |
| 75% | 44 | 37.5 | 7.5 | 6.5 | 2.5 | 3 |
| Maksimal | 61 | 60 | 28 | 11 | 8 | 9 |
Tabell 2: En frekvensanalyse av NS data fra ikke-behandlede SOD1-G93A mus scoret daglig fra alder dag 50 til døden. Fordelinger ble beregnet for NS 1, 2 og 3.
Figur 1. Grafisk fremstilling av antall dager på hver unormal NeuroScore for hver mus fra populasjonen av ubehandlet SOD1-G93A mus i vår koloni under 2014 (hann n = 90, kvinnelig n = 94). De resultater frekvenser for de samme mus er representert for hvert mulig NS. NS 4 ble utelatt fordi hendelsen kan bare skje én gang i hver mus levetid per definisjon. Klikk her for å se et større versjo n av dette tallet.
Figur 2 En typisk ordenslogis statistisk analyse graf sammenligne nevrologisk sykdom progresjon av TDI173-behandlede mus (rød linje) til søppel matchet vehikkelbehandlede kontrollmus.. (Blå linje; Rapportert p-verdier representerer log-rank khikvadrattest) Vennligst klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
. Figur 3 En typisk Kaplan-Meier analyse grafisk sammenligning levetid TDI173-behandlede mus (rød linje) til søppel matchet vehikkelbehandlede kontrollmus (blå linje; Rapporterte p-verdier representerer log-rank test).jove.com/files/ftp_upload/53257/53257fig3large.jpg "target =" _ blank "> Klikk her for å se en større versjon av dette tallet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
I denne rapporten beskriver vi en rask og enkel video protokoll som, hvis riktig brukt, er i stand til på en pålitelig måte å vurdere sykdomsutvikling i SOD1-G93A mus og identifisere narkotikainduserte endringer. Mens ulike grupper har utviklet fenotypiske scoring systemer for SOD1-G93A mus 8-10, de ofte ikke gir tilstrekkelig informasjon om inngrepet og er utilstrekkelig for replikering. Som et resultat, er scoring systemer sjelden brukes utenfor bestemt gruppe som utvikler dem. I denne rapporten, er kombinasjonen av et detaljert manus med video minimerer scorings uklarheter og inter-experimenter variabilitet og dermed gir for protokollen som skal vedtas av andre laboratorier og muliggjør sammenligninger mellom studier som finner sted på forskjellige innstillinger.
Nevrologiske scoring system som er beskrevet i denne rapporten, kalt NeuroScore genererer ordinale data hvor de eksakte tallverdier henføres til de sett av tegn og symptoms har ingen betydning utover etablere rangert sykdommens alvorlighetsgrad. I dette tilfellet, NS 0 er den minst alvorlig sykdomstilstand og betyr en mus med normal bakben funksjon mens NS 4 er den mest alvorlige sykdomstilstand med mus i eller nærmer sykelighet sekundært til nevromuskulær sykdom. Selv om poengsystem gjør bruk av symptomatisk terskler, omfatter hvert ordens NS verdi et bredt spekter av mulige kliniske presentasjoner hvorav mange ble fanget på video og er inkludert i denne rapporten.
NS 1 omfatter hele spekteret av tidlige symptomer på sykdom i SOD1-G93A mus, som kan variere mye fra mus til mus. Noen mus viser en unormal spriker med bakbena kollapser mot midtlinjen mens andre viser bakben skjelvinger og noen enda vise bakben tilbaketrekking eller spenne. Videre i de tidlige stadiene av sykdommen NS av noen mus kan svinge i flere dager mellom NS 1 og 0. Alltid skjønt, i SOD1-G93A mus frekvensenav NS 1 øker med tiden og det inkluderer mer og mer av de ulike fenotyper beskrevet. I gjennomsnitt, mannlige og kvinnelige SOD1-G93A mus vanligvis bruker henholdsvis 37 og 28 dager på dette stadiet.
NS 2 representerer angrep av parese (svak eller delvis lammelse) og gir unektelig bevis for tilstedeværelse av patologi. Mens det er ikke uvanlig for en vill-type mus til noen ganger til stede som NS 1, NS 2 bare oppstår i SOD1-G93A mus. I likhet med NS 1, NS to fanger et spekter av tegn og symptomer. I et tidlig stadium presentasjon av NS 2 musen er ambulerende og energisk. En mer avansert presentasjon av NS 2 avslører en mus med en svært begrenset evne til å bevege seg. Advanced parese i bakbena kan hindre musene fra å nå frem til mat og vann på toppen av buret, slik at pellets skal plasseres på bunnen av buret eller hydrert mat bør gis. I tillegg bør lengre nippe-rør plasseres på vannflasker. SOD1-G93A mus typically bruke 5 dager på dette stadiet.
NS 3 betyr komplett bakben lammelse, og etter sigende er den enkleste fenotype å identifisere og score. Lammelse symptomer som omfattes av NS 3 kan enten være slapp tilstand eller spastiske, men er vanligvis spastisk. Ved dette punktet, mus er veldig syk og bør overvåkes jevnlig. I gjennomsnitt, SOD1-G93A mus bruker en til to dager på dette stadiet.
NS 4 betegner fravær av "rettende refleks" som ikke utelukkende avhenger bakben funksjon som NS 0-3, men i stedet det gjenspeiler hele kroppen velvære av musen. Muligheten av en mus til å demonstrere en normal "rettende refleks" krever motivasjon, energi, men også funksjonen av flere muskelgrupper inkludert bakbena, forbein og magen. Det er viktig å merke seg at sykdomsprogresjon hos disse musene er ofte ikke symmetrisk, og en mus som kan fullføre rettende refleks når den plasseres på en side may være ute av stand til å gjøre dette når den plasseres på den andre siden. Det er derfor viktig, for human behandling av dyr og for integriteten av studien, for å utføre testing på begge sider og avlive mus hvis den ikke kan rette seg på hver side.
NS 4 definerer dato for aktiv dødshjelp, og som standard på linje direkte med overlevelsesdata. Men den totale sykdomsutvikling, som definert av ordinal regresjonsanalyse av NS, kanskje ikke er helt overlapper med Kaplan-Meier-overlevelseskurver og kroppsvektdata. Visse terapeutiske intervensjoner kan påvirke sykdomsutbruddet eller symptomer, men mislykkes i å påvirke totale levetid.
Selv ikke grundig drøftet i denne rapporten, kan kroppsvekt være et annet tiltak som kan brukes i kombinasjon med NS å vurdere sykdomsutbruddet og progresjon i SOD1-G93A men det kan bli fordreid av forskjeller i kosthold og ved therapeutics som forårsaker ødem eller innflytelse fettstoffskiftet 11,12.
13 og ikke bakben motoriske underskudd, en fenotype som ikke fanges opp av NeuroScore. En annen begrensning av denne protokollen er det faktum at det var designet for, og gjelder bare for høy kopi SOD1-G93A mus. I vår erfaring, den kliniske presentasjonen av sykdom i andre musemodeller av ALS, som den lave kopi SOD1-G93A mus 14 eller TDP-43 mus 15,16, er annerledes enn i høy kopi SOD1-G93A mus og dette NS system kan være dårlig egnet for disse modellene. Derfor er det viktig å bestemme den transgenet kopiantallet av mus forut for å plassere dem i studier og verifisere at den er lik den til høye kopi positiv-kontrollmus. Uansett, fordelene med ossing denne nevrologiske scoring system oppveier sine begrensninger og denne videoen protokollen kan fungere som en utmerket treningsverktøy for ALS forskere.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| B6SJLTgN(SOD1G93A)1Gur strain | The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME | 002726 | Strain of mice used in this study |
| Breeders | Biomedical Research Models, Inc., Worcester, MA | Colony maintainance | |
| Scale | Navigator OHAUS, Parsippany, NJ | Model N14120 | Used to weigh mice |
| Nutra-GelH | Bio-Serv, Flemington, NJ | #S4798 | Wet food provided to sick mice |
| Irradiated Lab Animal Diet | Harlan, Indianapolis, IN | 2918-111914M | Chow diet |
| Lab-grade Sani-chips | Harlan Teklad, Indianapolis, IN | 7090 | Bedding |
| JMPH | SAS Institute, Inc., SAS Campus Drive, Cary, NC | v10.0.2 | Statistical software |
| Microsoft Excel | Microsoft, One Microsoft Way, Redmond, WA | Excel 2013 (v 15.0) | Spreadsheet software |
| GraphPad Prism 5 | GraphPad software Inc., La Jolla, CA | v5.4 | Graphing software |
| Mouse Huts | Bio-Serv, Flemington, NJ | K3272 | For environmental enrichment |
References
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Rosen, D. R., et al. Mutations in Cu/Zn superoxide dismutase gene are associated with familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature. 362 (6415), 59-62 (1993).
- Gurney, M. E. The use of transgenic mouse models of amyotrophic lateral sclerosis in preclinical drug studies. J Neurol Sci. 152, Suppl. 1 (6415), (1997).
- Scott, S., et al. Design, power, and interpretation of studies in the standard murine model of ALS. Amyotroph Lateral Scler. 9 (1), 4-15 (2008).
- Hegedus, J., Putman, C. T., Gordon, T. Time course of preferential motor unit loss in the SOD1 G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurobiol. Dis. 28 (2), 154-164 (2007).
- Gordon, T., Ly, V., Hegedus, J., Tyreman, N. Early detection of denervated muscle fibers in hindlimb muscles after sciatic nerve transection in wild type mice and in the G93A mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Neurol. Res. 31 (1), 28-42 (2009).
- Gurney, M. E., et al. Motor neuron degeneration in mice that express a human Cu,Zn superoxide dismutase mutation. Science. 264 (5166), 1772-1775 (1994).
- Kim, K., Moore, D. H., Makriyannis, A., Abood, M. E. AM1241, a cannabinoid CB2 receptor selective compound, delays disease progression in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis. Eur. J. Pharmacol. 542 (1-3), 1-3 (2006).
- Weydt, P., Hong, S. Y., Kliot, M., Moller, T. Assessing disease onset and progression in the SOD1 mouse model of ALS. Neuroreport. 14 (7), 1051-1054 (2003).
- Azari, M. F., et al. Behavioural and anatomical effects of systemically administered leukemia inhibitory factor in the SOD1(G93A G1H) mouse model of familial amyotrophic lateral sclerosis. Brain Res. 982 (1), 92-97 (2003).
- Guan, Y., et al. Thiazolidinediones expand body fluid volume through PPARgamma stimulation of ENaC-mediated renal salt absorption. Nat. Med. 11 (8), 861-866 (2005).
- Savcheniuk, O. A., et al. The effect of probiotic therapy on development of experimental obesity in rats caused by monosodium glutamate. Fiziol. Zh. 60 (2), 63-69 (2014).
- Smittkamp, S. E., Brown, J. W., Stanford, J. A. Time-course and characterization of orolingual motor deficits in B6SJL-Tg(SOD1-G93A)1Gur/J mice. Neuroscience. 151 (2), 613-621 (2008).
- C, M., Gurney, M. E. A low expressor line of transgenic mice carrying a mutant human Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) gene develops pathological changes that most closely resemble those in human amyotrophic lateral sclerosis. Acta Neuropathol. 93 (6), 537-550 (1997).
- Wegorzewska, I., Baloh, R. H. TDP-43-based animal models of neurodegeneration: new insights into ALS pathology and pathophysiology. Neurodegener. Dis. 8 (4), 262-274 (2011).
- Hatzipetros, T., et al. C57BL/6J congenic Prp-TDP43A315T mice develop progressive neurodegeneration in the myenteric plexus of the colon without exhibiting key features of ALS. Brain Res. 1584, 59-72 (2014).
