Abstract
मछली से otoliths (कान हड्डियों) बहुत मोटी खोपड़ी मुश्किल और बहुत समय लगता हो सकता है कि निकालने। एक हाथ या बिजली देखा के साथ खोपड़ी के शीर्ष पर एक अनुप्रस्थ ऊर्ध्वाधर चीरा otolith नुकसान हो सकता है, अगर सही ढंग से प्रदर्शन नहीं की आम बात। Sturgeons (Acipenseridae) विशेष रूप से एक परिवार के लिए एक बहुत बड़ी और मोटी खोपड़ी है कि कर रहे हैं। एक नई प्रयोगशाला विधि मछली otoliths को बेनकाब करने के उदर की ओर से मस्तिष्क गुहा में प्रवेश अन्य otolith निकासी साहित्य में पाया तरीकों की तुलना में आसान था। साहित्य में समीक्षा के तरीके क्षेत्र के लिए बनाया गया है और जल्दी से मछली की एक बड़ी मात्रा के प्रसंस्करण में अधिक कुशल हैं। हालांकि, इस नई तकनीक के लिए एक प्रयोगशाला स्थापित करने के लिए अधिक अनुकूल हो सकता है जब समय दबाव नहीं है और प्रत्येक नमूना से सफल निकासी के लिए महत्वपूर्ण है डिजाइन किया गया था। लग रहा है और इस तकनीक का उपयोग otoliths हटाने की सफलता बहुत अधिक है और एस समझौता नहीं करताकिसी भी तरीके से tructure। यह वैकल्पिक तकनीक otoliths निकालने के लिए इसी तरह की अन्य मछली प्रजातियों के लिए लागू है।
Introduction
स्टर्जन (Acipenseridae) दुनिया भर में आबादी निवास स्थान के नुकसान, जनसंख्या विखंडन सहित प्रभावों के कारण एक सदी से भी अधिक कमी आ रही है, और overfishing कि इस तरह के कई आबादी राज्य और संघीय कानून 1,2 द्वारा संरक्षित हैं। संयुक्त राज्य अमेरिका और दुनिया भर में प्रबंधन एजेंसियों बहाली और वसूली 1 के लिए एक लक्ष्य प्रजाति के रूप में समुद्री मछली की पहचान की है। सबसे स्टर्जन आबादी की जनसंख्या विशेषताओं (विकास, भर्ती, आहार) बेहतर बुनियादी जीव विज्ञान और जीवन के इतिहास विशेषताओं 1 समझने के लिए अध्ययन किया गया है। सबसे स्टर्जन आबादी की रक्षा की स्थिति के कारण, उम्र मूल्यांकन छोटे धमकी दी आबादी जहां कोई बलिदान या व्यक्तियों के लिए नुकसान का warranted है में मुश्किल है।
उम्र के आकलन और विकास के विश्लेषण के प्रयोजन के लिए बोनी संरचनाओं की निकासी Sturge की उम्र का निर्धारण करने के लिए पंख रे वर्गों की एक आम तकनीक 3 व्याप्ति उपयोग किया गया हैपर एक व्यावहारिक nonlethal तरीका बन गया है, लेकिन तकनीक के सत्यापन के लिए सीमित कर दिया गया है और उम्र में बड़े व्यक्तियों (> 15 साल) में समझने के लिए बहुत मुश्किल हो सकता है 4। शोधकर्ताओं ने खाड़ी स्टर्जन (Acipenser oxyrinchus desoti) 5, अटलांटिक स्टर्जन (ए ओ। Oxyrinchus) 6, सफेद स्टर्जन (ए transmontanus) 7, और झील स्टर्जन साल की उम्र में मान्य उनके उपयोग के लिए समुद्री मछली में कई बोनी संरचनाओं के उपयोग का मूल्यांकन (ए fluvescens) 8 निष्कर्ष निकाला है कि पहली सीमांत छाती पर का कवच पंख रे सबसे सही आयु प्रदान की है लेकिन इस आक्रामक प्रक्रिया के बड़े व्यक्तियों के लिए हानिकारक होने के लिए संपन्न हुआ। वर्तमान में, वहाँ सफलता 9 के एक बहुत ही उच्च दर के साथ उत्तर अमेरिकी समुद्री मछली प्रजातियों के बीच भेद करने के लिए otolith आकार मीट्रिक का उपयोग कर के विकास है। खोपड़ी के आधार पर एक पृष्ठीय अनुप्रस्थ चीरा के साथ otolith को हटाने की प्रक्रिया पर विवरण एक आम otolith अतिरिक्त हैction विधि साहित्य भर में पाया जाता है और स्पष्ट रूप से Secor एट अल द्वारा विस्तृत जानकारी दी। (1991) 10। हालांकि, इस पद्धति स्टर्जन otoliths है कि छोटे और नाजुक होते हैं और तोड़ने के लिए करते हैं जाएगा के साथ बहुत मोटी खोपड़ी है उस पर अमल करना मुश्किल है। साहित्य का एक और समीक्षा के लिए स्टर्जन otolith हटाने की प्रक्रिया का कोई अन्य विस्तृत कार्यप्रणाली से पता चलता है। इस पत्र का उद्देश्य विस्तार करने के लिए उदर की ओर से मस्तिष्क गुहा दर्ज करके स्टर्जन से otoliths निकालने का एक वैकल्पिक तरीका था।
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Protocol
महत्वपूर्ण नोट: संयुक्त राज्य अमेरिका में समुद्री मछली की सभी प्रजातियों की रक्षा की स्थिति के कारण, अधिग्रहण और संभाल मछली प्रयोगशाला प्रक्रिया से पहले प्राप्त किया गया करने के लिए अनुमति देता है। सभी नमूनों हैचरी स्रोतों से हासिल किया गया प्राकृतिक कारणों की वजह से पोस्टमार्टम के बाद और मानक प्रक्रिया के बाद का निपटारा किया।
1. नमूना तैयार
- इससे पहले किसी भी चीरों अपने पक्ष पर स्टर्जन शव और निकटतम 1 मिमी के लिए पूंछ की टिप करने के थूथन से कुल लंबाई मापने के लिए एक मापने टेप का उपयोग करना। (चित्रा 1 ए)
- निकटतम 1 ग्राम के लिए एक tared पैमाने पर समुद्री मछली शव वजन। किसी भी बाहरी या टैग के निशान और रिकार्ड के लिए शव का मूल्यांकन।
2. otolith निष्कर्षण
- शरीर (चित्रा 1 बी) से सिर अलग करने के लिए शरीर के माध्यम से खोपड़ी के आधार और पहली पृष्ठीय कछुआ के बीच एक बड़ा पट्टिका चाकू के साथ एक ऊर्ध्वाधर चीरा। सिर, तू हटाने के बादसिर आर.एन. इसलिए मुंह का सामना करना पड़ रहा है (चित्रा 1 सी)।
- पट्टिका चाकू का उपयोग खोपड़ी (चित्रा -1) के उदर पक्ष के साथ कटौती करने के लिए से मुंह के कोमल ऊतक और गहरे नाले निकालें। खोपड़ी पूरी तरह से सिर (चित्रा 1E) दोटूक के आधार करने के लिए थूथन की नोक से एक बिजली के अस्थि देखा के साथ एक चीरा। हाथ से दो हिस्सों को अलग मस्तिष्क गुहा (2A चित्रा) को बेनकाब करने के लिए।
- निकालें और त्यागने semicircular नहरों देखने के लिए संदंश के साथ मस्तिष्क पदार्थ (लाल बॉक्स बाएं) (लाल बॉक्स दाएं) मस्तिष्क गुहा (चित्रा 2 बी) के भीतर।
- संदंश (चित्रा 2 सी) के साथ मस्तिष्क गुहा से semicircular नहर उपास्थि निकालें। ध्यान से संदंश की नोक के साथ semicircular नहर उपास्थि पंचर और otolith हटाने के लिए (चित्रा 2 डी)। Semicircular नहर उपास्थि से संदंश के साथ otolith (उपास्थि के अंदर मुश्किल बोनी संरचना) निकालें (चित्रा 2 ई)
- दोहराएँ कदम 2.3 - 2.4 खोपड़ी के दूसरे आधे से otolith हटा दें।
- 5 सेकंड के लिए 92% इथेनॉल में otoliths डुबकी किसी भी उपास्थि हटा दें। एक खुले 25 मिलीलीटर जगमगाहट शीशी में रखें otoliths 24 घंटे के लिए सूखी।
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Representative Results
दुनिया भर में समुद्री मछली के वयस्क आकार बहुत भिन्न होता है लेकिन otoliths के स्थान के अनुरूप है। एक तेज चाकू पट्टिका का उपयोग मुंह आसानी से चित्रा -1 में दिखाया गया के कोमल ऊतक को दूर करने के लिए मिला था। एक बिजली की हड्डी देखा पार्श्व चीरा चित्रा 1E में मस्तिष्क गुहा का पर्दाफाश करने के लिए पसंदीदा उपकरण है। हालांकि, खोपड़ी के midline bisecting की ओर ध्यान अन्यथा otoliths इस प्रक्रिया के दौरान कुचल दिया जा सकता है की जरूरत है। इस प्रक्रिया को सही ढंग से तो किया जाता है तो मस्तिष्क गुहा otoliths के रूप में चित्रा 2A में दिखाया को कोई नुकसान के साथ समान रूप से अवगत कराया जाएगा। मस्तिष्क बात आसानी से चित्रा 2 बी में और semicircular नहर उपास्थि जो otolith आसानी से मस्तिष्क गुहा के आधार पर पाया जाता है के रूप में चित्रा -2 में दिखाया शामिल खोजने के रूप में संदंश के उपयोग के साथ हटा दिया जाता है। उपास्थि semicircular नहर में पाया ईएएस हैily संदंश चित्रा 2 डी में देखा के रूप में की एक जोड़ी के साथ otolith से हटा दिया।
इस प्रक्रिया को सफलतापूर्वक स्टर्जन otolith के हटाने से पता चलता है और मछली के जीवन के इतिहास के एक और मात्रात्मक विश्लेषण में एक प्रारंभिक कदम है। परिणाम सफलता संरचना को तोड़ने के बिना otolith को हटाने के द्वारा लगाया जा सकता है। उम्र निर्धारण और विकास दर दो मीट्रिक कि हटाया otoliths के उपयोग के साथ मूल्यांकन किया जा सकता हैं। प्रजातियों भेदभाव के लिए आकार विश्लेषण एक और औसत दर्जे का मीट्रिक कि otoliths से विकसित किया जा सकता है।
चित्रा 1. otolith हटाने के लिए स्टर्जन शव की नियुक्ति। अलग करने के लिए (ए) माप और वजन के लिए स्टर्जन शव पार्श्व दृश्य, (बी) ऊर्ध्वाधर चीरा स्टर्जन प्रमुख बो से वि, (सी) सिर फ्लिप प्रमुख के मुंह और उदर की ओर, (डी) कोमल ऊतक खोपड़ी के उदर की ओर, (ई) थूथन की खोपड़ी के आधार को सिरे से पार्श्व चीरा बेनकाब करने के लिए निकाला देखें करने के लिए एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें यह आंकड़ा की।
चित्रा 2. आंतरिक परीक्षा मस्तिष्क गुहा का Otoliths दूर करने के लिए। (ए) मस्तिष्क गुहा सिर के बाद उजागर अलग, (बी) के मस्तिष्क मामले, semicircular नहरों का पर्दाफाश करने के लिए हटाया (सी) semicircular नहर उपास्थि हटा दिया, (डी) otolith देखी गयी और हटाया semicircular नहर उपास्थि, (ई) Shortnose स्टर्जन otolith से54,316 / 54316fig2large.jpg "लक्ष्य =" _blank "> यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।
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Discussion
स्टर्जन शवों से otoliths निकालने का एक वैकल्पिक तरीका का अवलोकन विस्तृत किया गया है। यह ध्यान रखें कि विशेष ध्यान देने के क्रम में समान रूप से खोपड़ी दोटूक को विच्छेदन के दौरान otoliths को कोई नुकसान सुनिश्चित करने के लिए खोपड़ी के midline पर पार्श्व चीरा स्थापन करने की जरूरत है महत्वपूर्ण है। चीरा गहरी पर्याप्त पूरी तरह से खोपड़ी दोटूक करने के लिए नहीं है, तो यह मस्तिष्क गुहा का पर्दाफाश करने के लिए बहुत मुश्किल हो जाएगा जहां otoliths के स्थान स्पष्ट रूप से दिखाई दे रहा है। अनुभव के साथ, समग्र तकनीक अपेक्षाकृत सरल है और otoliths के एक उच्च प्रतिशत बरकरार पाया जा रहा है की ओर जाता है। इस नई विधि शोध स्टर्जन कि मानक otolith निष्कर्षण तरीकों का उपयोग कर मुश्किल हो सकता है के अलावा अन्य प्रजातियों के लिए otoliths को निकालने के लिए एक वैकल्पिक तरीका देता है।
इस विधि के लिए सीमाएं एक प्रयोगशाला क्षेत्र में इस्तेमाल के लिए नहीं स्थापित करने के लिए प्रयोज्यता हैं। समय शव तैयारी के लिए आवश्यक नमूने एकत्र करने के लिए अनुकूल नहीं हैएक समय पर ढंग से क्षेत्र में। एक और चिंता का विषय है स्टर्जन प्रजाति है कि आम तौर पर आबादी में गिरावट के कारण राज्य या संघीय कानून के तहत संरक्षित हैं पर इस्तेमाल होता है।
यह लोग कहते हैं कि आबादी को जीवित रखने के लिए आवश्यक हैं त्याग की कीमत पर मूल्यांकन के इस प्रकार के आचरण करने के लिए बहुत परमिट प्राप्त करने के लिए मुश्किल है। हालांकि, जब मृत नमूनों प्राकृतिक कारणों माध्यम से उपलब्ध हैं इस तकनीक का अधिक से अधिक जानकारी अन्यथा उपलब्ध हो जाएगा इकट्ठा करने के लिए एक उपयोगी तरीका प्रदान करता है।
यह इस तकनीक के महत्व को नोट करने के लिए सफलतापूर्वक इस वैकल्पिक पद्धति का उपयोग स्टर्जन से otoliths दूर करने के लिए महत्वपूर्ण है। सिर के पृष्ठीय क्षेत्र से otoliths हटाने मौजूदा तकनीक अभी भी उपयोगी और लाभकारी लेकिन समुद्री मछली के लिए लागू नहीं कर रहे हैं। मस्तिष्क गुहा का पर्दाफाश करने के लिए इस नई तकनीक का उपयोग करना भी अन्य क्षेत्रों तंत्रिका समारोह और मस्तिष्क आकृति विज्ञान के लिए उपयोग और प्रयोज्यता देता है। इस नई तकनीक के लिए फायदेमंद हो सकता हैबहुत मोटी खोपड़ी दीवारों या जहां otolith निकासी के लिए उपयोग करने के लिए मछली की एक सीमित मात्रा में है के साथ मछली के अन्य प्रजातियों पर इस्तेमाल करते हैं।
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Acknowledgments
सेंट रेगिस मोहॉक पर्यावरण डिवीजन, Welaka राष्ट्रीय मछली हैचरी, अमेरिका मछली और वन्य जीव सेवा रिसर्च यूनिट, दक्षिणी इलिनोइस विश्वविद्यालय, अमेरिका मछली और वन्य जीव सेवा पूर्वोत्तर मत्स्य केंद्र, स्टर्लिंग मछली के अंडे, कैलिफोर्निया डेविस विश्वविद्यालय, गैरीसन बांध राष्ट्रीय मछली के लिए विशेष धन्यवाद हैचरी, भालू ब्लफ़ राष्ट्रीय मछली हैचरी, और अमेरिका मछली और वन्य जीव सेवा पनामा सिटी मत्स्य संसाधन कार्यालय उनकी मदद इस परियोजना के लिए समुद्री मछली की आपूर्ति के लिए। यह लेख यूएसजीएस ग्रेट झील विज्ञान केंद्र का योगदान 2013 है।
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Measuring Board | Metric meter stick is preferred | ||
| Weighing scale | |||
| Filleting Knife | |||
| Scalpel | |||
| Forceps | |||
| Sample vials | 25 ml scintillation vials work well |
References
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