Abstract
提取的鱼有很厚的头骨可能是困难和非常耗时的耳石（耳骨）。使得在用一只手或电锯头骨顶部的横纵切口如果操作不当可能损坏耳石的普遍做法。鲟鱼（ 鲟 ）是一个特别的家族，有一个非常大且厚头骨。从鱼揭露耳石的腹侧面进入大脑腔一个新的实验室方法比在文献中发现的其他耳石提取方法更容易。在文献中综述的方法被设计为场，并且在快速处理大量的鱼的更有效。但是，这种新的技术被设计为更适合于实验室环境时的时间并不紧迫，并且从每个试样成功提取是至关重要的。查找和使用这种技术去除耳石的成功是非常高的，且不会影响标tructure以任何方式。这种替代的技术是适用于其它类似的鱼种用于提取耳石。
Introduction
鲟鱼（ 鲟 ）的人口在世界各地已经超过一个世纪的下降，由于影响，包括栖息地的丧失，人口分散，和过度捕捞，使得许多人口由州和联邦法律的保护1,2。管理机构在整个美国和世界已经确定鲟鱼为修复和恢复1目标物种。多数鲟鱼种群的人口特征（增长，招聘，饮食）进行了研究，以更好地了解基础生物学和生活史特点1。由于多数鲟鱼种群的保护状况，年龄评估是小受威胁居民在没有牺牲或损害个人是必要的困难。
骨结构的年龄估计和生长分析的目的，提取已常用的技术3。使用翅片射线段，以确定斯特奇的年龄上已成为一个实际非致命的方法，但该技术的验证已被限制和年龄可以是非常困难的老年个体（> 15岁）破译4。研究人员评估在验证墨西哥湾鲟鱼（ 尖吻鲟desoti）5，大西洋鲟（A. O操作。oxyrinchus）6，白鲟（A. transmontanus）7，和湖鲟鱼的年龄中华鲟使用多个骨性结构及其使用（A. fluvescens）8总结说，第一边缘胸鳍线提供最准确的年龄，但结束了侵入性操作是有害的个体较大。目前，存在使用耳石形状指标成功9的非常高的速率北美鲟鱼种类区分的发展。与在颅底背横切口取出耳石的工艺细节是一种常见多耳石ction方法发现整个文献和塞科尔等清晰细腻。 （1991）10。然而，这种方法是难以在具有非常厚的头骨与小且脆弱和将趋向于打破耳石鲟实现。文学的进一步审查表明鲟鱼耳石去除过程中没有其他详细的方法。本文的目的是详细地从腹侧进入大脑腔提取鲟耳石的另一种方法。
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Protocol
重要提示：由于美国鲟所有物种的保护状态，允许收购和鱼之前，实验室方法得到处理。所有标本均从孵化来源获得验尸由于自然原因和处置下列标准程序。
1.试样制备
- 前的任何切口侧放鲟胎体和用卷尺从鼻子到尾部精确到1mm的前端测量总长度。（图1A）
- 在配衡衡称重鲟鱼胴体至最接近克评估任何外部标记或标记和记录胴体。
2.耳石提取
- 使与颅骨的基极和第一背盾之间的大的圆角刀的垂直切口穿过所述主体的头部从主体（图1B）中分离出来。去除头，涂后氡头部所以口朝上（图1C）。
- 通过使用圆角刀沿头骨（图1D）的腹侧切开取出口的软组织和腮。使从鼻子到颅骨完全平分头（图1E）的底部的前端的电的骨锯的切口。用手分开的两半，以暴露脑腔（图2A）。
- 取下并丢弃用钳子查看半规管脑腔（图2B）内脑质（红色方框左边）（红色框右侧）。
- 脑腔内有镊子（图2C）拆下半规管软骨。小心刺穿半规管软骨与钳子的前端，并删除耳石（图2D）。与来自半规管软骨镊子取出耳石（软骨内硬骨结构）（图2E）
- 重复步骤2.3 - 2.4从头骨的另一半去除耳石。
- 浸在92％乙醇的耳石，持续5秒，以消除任何软骨。在一个开设25毫升闪烁瓶中的地方耳石干燥24小时。
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Representative Results
世界各地的鲟鱼的成人的大小差别很大，但耳石的位置是一致的。使用一把锋利的片刀被发现删除图1D容易证明口腔的软组织。电动锯骨机是横向切口，显露图1E脑腔的首选工具。然而，注意平分头骨的中线需要否则耳石可以在此过程中压碎。如果正确进行该过程然后大脑空腔将均匀地为在图2A所示的耳石无损伤被暴露。脑物质容易与用钳如图2B和找到的半规管软骨包含耳石在大脑空腔的基座很容易发现， 如图2C除去。在半规管中发现的软骨EAS从具有一对如在图2D观察镊子的耳石随手取出。
此过程成功显示了除去鲟耳石的并且是在鱼的生活史的更定量分析的初步步骤。结果成功可以通过去除耳石的不破坏结构来衡量。年龄确定和增长率两个指标，可以通过使用去除耳石的进行评估。物种分化形状分析是可以从耳石开发另一个衡量指标。
图1. 鲟鱼胴体安置的耳石去除。 （A）鲟鱼胴体侧位测量和称重，（B）纵切口，从博分离鲟鱼目 DY，（C）翻转头查看头口及腹侧，（D）以暴露头骨腹侧，（E）从提示外侧切口吻到颅底软组织请点击这里查看大图这一数字。
头后露出图2. 脑腔内部审核删除耳石。（A）脑腔分隔，（B）脑质去除以暴露半规管，（C），半规管软骨去掉，（D）耳石查看和删除从半规管软骨，（E）短吻鲟鱼耳石54316 / 54316fig2large.jpg“目标=”_空白“>点击此处查看该图的放大版本。
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Discussion
提取鲟尸体耳石的另一种方法的概述已详细说明。要注意，特别注意的是需要在颅骨的中线的横向切口放置以均匀平分颅骨，以确保清扫期间不会伤害耳石是很重要的。如果切口是不够深以完全平分颅骨这将是非常困难的，以暴露脑腔，其中耳石的位置是清晰可见。有经验的，整体的技术是相对简单的，并导致被发现完整耳石的高百分比。这种新方法提供了研究的另一种方法，以提取比鲟可以使用标准耳石的提取方法是困难的其他物种耳石。
限制该方法的适用性到实验室设置不适合现场使用。所需胎体准备时间，不利于收集的样本在及时现场。另一个值得关注的是那些在州或联邦法律保护，通常由于人口下降鲟鱼种类的使用。
这是非常困难的，以获得许可以牺牲所需要保持种群存活个体的费用来进行这种类型的评价。然而，当死的标本都可以通过自然原因这个技术提供了比收集将可否则更多信息的有效途径。
注意本技术的意义成功删除使用这种可选择的方法从鲟耳石是重要的。现有技术从头部的背侧区域除去耳石仍然是有用的和有益的，但并不适用于鲟鱼。使用这种新技术暴露大脑腔还可以访问和适用性到其它区域神经功能和脑的形态。这种新技术可能是有益的其他品种的鱼使用带有很厚的颅骨墙壁或有用于提取耳石鱼的数量有限。
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Acknowledgments
特别感谢瑞吉莫霍克环保部，国家韦拉卡鱼类孵化场，美国鱼类和野生动物局研究单位，南伊利诺伊大学，美国鱼类和野生动物服务东北渔业中心，英镑鱼子酱，美国加州大学戴维斯分校，加里森坝国家鱼类孵化场，熊崖国家鱼类孵化场和美国鱼类和野生动物服务巴拿马市水产资源局的帮助为这个项目提供的鲟鱼。 本文是美国地质调查局大湖科学中心的贡献2013。
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Measuring Board | Metric meter stick is preferred | ||
| Weighing scale | |||
| Filleting Knife | |||
| Scalpel | |||
| Forceps | |||
| Sample vials | 25 ml scintillation vials work well |
References
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