Summary
الاختبار السلوكي هو المعيار الذهبي لتحديد النتائج التالية إصابات الدماغ، ويمكن التعرف على وجود العاهات الخلقية في الأطفال الرضع والأطفال. ردود الفعل العصبية النمائية هي مؤشرا مبكرا على هذه التشوهات. وقد وضعت مجموعة كبيرة من إنجازه بسهولة اختبارات المنعكس التنموية في القوارض حديثي الولادة وصفها هنا.
Abstract
يستخدم النمو العصبي اختبار رد الفعل شيوعا في الممارسة السريرية لتقييم نضج الجهاز العصبي. ويشار إلى ردود الفعل العصبية النمائية أيضا أن ردود الفعل كما البدائية. فهي حساسة ومتسقة مع النتائج في وقت لاحق. ووصف ردود الفعل غير الطبيعية باعتبارها غياب والمثابرة، ظهور، أو الكمون من ردود الفعل، والتي هي المؤشرات التنبؤية للأطفال التي هي عرضة للاضطرابات النمو العصبي. نماذج حيوانية من الإعاقات النمائية العصبية، مثل الشلل الدماغي، وغالبا ما تظهر ردود الفعل التنموية الشاذة، كما هو الملاحظ في الرضع الإنسان. وصف تقنيات تقييم مجموعة متنوعة من ردود الفعل العصبية النمائية في الفئران حديثي الولادة. النمو العصبي اختبار رد الفعل يقدم المحقق طريقة الاختبار الذي لا يتوفر إلا في مثل هذه الحيوانات الصغيرة. منهجية المعروضة هنا تهدف لمساعدة المحققين في دراسة المعالم التنموية في الفئران حديثي الولادة كوسيلة من وسائل الكشف المبكر ر بدايةإصابة العين و / أو تحديد فعالية التدخلات العلاجية. منهجية المعروضة هنا تهدف إلى توفير توجيهي عام للمحققين.
Introduction
ردود الفعل العصبية النمائية، أو المعالم التنموية، هي واحدة من أقدم تقييم استخدامها على الأطفال حديثي الولادة والرضع الإنسان. ردود الفعل العصبية هي حركات لا إرادية ومتكررة التي تثبت جذع الدماغ والحبل الشوكي ردود الفعل. نضوج شبكات القشرية أعلى يتسم بالتطور والهجرة، وتكون الميالين، وsynaptogenesis تعزيز الرقابة الطوعية وتثبيط القشرية. تغييرات في تطور طبيعي لتطور الجهاز العصبي المركزي يمكن أن يحدث خللا نمو الدماغ، مما يؤدي إلى الأسلاك غير طبيعي القشرية وأداء، وتكون الميالين، مما تسبب في تأخير رد الفعل العصبية النمائية أو الغياب. الرضع الإنسان عرضة للإعاقة النمو العصبي غالبا ما تظهر ردود الفعل المبكرة غير طبيعية. يمكن أن ردود الفعل غير الطبيعية تقديم وتأخير في الاستحواذ، غياب، وجود لفترات طويلة، أو ظهور في وقت لاحق في الحياة، وهي التنبؤي من العاهات الخلقية. 1، 2 لذلكومن المهم لتقليد تأخر رد الفعل في نماذج تجريبية من الإعاقات النمائية العصبية.
ويعمل القوارض عادة كنماذج تجريبية. الفئران الوليدة هي altricial عندما ولد، وبالتالي غير ناضجة جدا للقيام محرك معين أو معقدة، والمهام السلوكية الحسية و / أو المعرفية. وفي هذا الصدد، عدم النضج نموهم يتعلق كلا من النمو البدني والجهاز. ولدت الفئران أصلع مع عدم القدرة على thermoregulate، مصابون بالعمى، وغير قادر على المشي. مع الإشارة إلى نمو الدماغ، يحدث النضج القشرية كبير بعد الولادة. الفئران الوليدة حديثي الولادة (يوم الولادة ويشار إلى اليوم ما بعد الولادة 1؛ PD1) وقد اقترح للوصول إلى مستوى النضج الدماغ مشابه لدماغ الإنسان قبل الأوان 23-28 أسبوعا من الحمل، في حين PD7-10 الجراء تعادل الادنى الدماغ البشري المدى. 3، 4، 5، 6وتستند هذه العلاقة على التحليلات التشريحية الإجمالية، ولكن، كما تم وصفها تدابير أخرى من نضوج الدماغ مثل الميالين والسعة متكاملة electroencephalograms. 5 و 7 على سبيل المثال، قبل قليلة التغصن هي الخلايا السائدة في تطوير دماغ الجنين البشري 23-32 أسابيع في الرحم، وهذه المرحلة يجرونها يتوافق مع القوارض PD1-3. 5 و 8 و 9 و 10 وعلاوة على ذلك، يبدأ تكون الميالين في الرحم لدى البشر في حين أنه في الفئران الوليدة يبدو في الدماغ الأمامي حول PD7-10. يبقى الدماغ القوارض حديثي الولادة الامم المتحدة والعصبي إلى حد كبير. 11، 12 تاكر وآخرون. وجدت أن السعة متكاملة النمط الكهربائي من الفئران P1 لتكون مشابهة لغيستا-23 أسبوعنشوئها الجنين البشري، في حين أن PD7 وPD10 الجرو هو أقرب إلى 30-32 أسبوع، وعلى المدى الرضع، على التوالي. 7 لهذه الأسباب، اختبار رد الفعل حديثي الولادة في الفئران الوليدة حديثي الولادة يوفر فرصة لالتقاط تطور الجنين و / أو اختلال نمو المخ.
يتم تكييفها البطارية من ردود الفعل هو موضح أدناه من الدراسات التي ويم فوكس وA. Lubics 13 و 14 كان ويم فوكس واحد من أقرب المحققين فيما يتعلق تطور الجنين من ردود الفعل في الماوس. وتشمل 13 ردود الفعل هذه، ولكن لا تقتصر على استيعاب الأطراف ووضع، وتجنب الهاوية، المقوم، تسارع المقوم، مشية، جفل السمعي، والموقف، وفتح العين. وسهلت كل من forelimb hindlimb وفهم (ويشار إلى الراحي الأخمصي وفهم في البشر، على التوالي) من خلال ردود الفعل في العمود الفقري وتثبيط القشري من مناطق السيارات غير الأساسية. 15، 16 Hindlimb وضع (منعكس أخمصي) يعكس نضوج الجهاز القشري. 16، 17، 18 تجنب كليف (ردود وقائية)، المقوم (المتاهة)، وتسارع تصحيح تنطوي على التكامل والتواصل بين المدخلات الحسية والحركية الانتاج (مثل تلك التي تتعامل مع vibrissae وأنظمة الدهليزي). 19، 20، 21 يعكس مشية الحركة. 14 جفل السمعي يقيم التحفيز الصوتية واتصالات متشابك من الخلايا العصبية العملاقة في النواة الشبكية للجسر الذنبية. ويشمل 21 الموقف / العمود الفقري-القشرية التوقعات المناسبة-القشرية الشوكي، وقوة العضلات، وتعصيب العصبي العضلي. 22، 23 ماturation من مستقبلات حمض غاما -aminobutyric قد ترتبط مع فتح العين. 24 ومن المهم أن نأخذ في الاعتبار أن ردود الفعل تعكس شبكة أكثر تعقيدا من ذلك بكثير، وقدمت هنا هو ارتباط العام. وعلاوة على ذلك، توفر هذه المنعكسات طريقة سريعة وسهلة لتقييم نمو الجهاز العصبي في سن مبكرة جدا حيث التجارب السلوكية أكثر تعقيدا ليس ممكنا.
والهدف من هذه الورقة هو توفير مبادئ توجيهية عامة لاختبار رد الفعل العصبية النمائية التي يمكن إدراجها بسهولة في دراسات الفئران حديثي الولادة التجريبية. تم تنفيذ المنهجية الواردة في لونغ إيفانس الفئران الوليدة حديثي الولادة واستند تقدير النتائج في اليوم الأول من المظهر. يبدأ اليوم الذي منعكس الاختبار والمعدات المستخدمة يمكن تعديلها لتناسب أفضل نموذج تجريبي مختلفة (مثل لسلالات مختلفة والأنواع). من خلال إنشاء التقدم الفيزيولوجي الطبيعي للالمرجعنضوج قانونا في نموذج حيواني معين، يمكن أن المحققين تقييم آثار الضغوطات الخارجية، والتلاعب الذاتية، و / أو التدخلات العلاجية على النمو العصبي في نماذج الفئران حديثي الولادة. وعموما، فإن استخدام ردود الفعل بمثابة تقرير من النضج الدماغ هو مفيد في توقع إصابات الدماغ فترة ما حول الولادة، وليس تعبيرا عن النتائج النمائية العصبية في وقت لاحق.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
وافق رعاية الحيوان واستخدام اللجنة، العلوم الصحية في جامعة ألبرتا جميع الدراسات على الحيوانات.
ملاحظة: في حين أن هذا البروتوكول يمكن تكييفها لأنواع وسلالات أخرى، يتم كتابة هذا البروتوكول بالنسبة للفئران لونغ إيفانس. وقد تبين أن هذه الفئران أن يكون أداء المحرك العالية والبصر بالمقارنة مع سلالات القوارض الأخرى. 25، 26 بروتوكول لحالات الحمل في الوقت المناسب، المكملات الغذائية، والتهاب الأمهات، وردود الفعل العصبية النمائية على النحو التالي.
1. حيوانات التجارب
- عند وصول الفئران إلى منشأة سكنية الحيوان، الامتناع عن أي تفاعل لمدة يوم أو يومين للسماح لهم يتأقلم مع البيئة الجديدة. وبعد التأقلم والتعامل مع الفئران كل يوم لمدة خمسة أيام تقريبا، أو عندما تكون الفئران لم تعد تظهر عليها علامات الإجهاد. الإجهاد الناجم عن الإنسان يمكن أن يغير نتائج اختبار ولوإعلان لفقدان الحمل.
- وبمجرد أن الفئران مريحة، تبدأ التكاثر. وضع اثنين من الإناث والذكور الفئران واحد في تربية قفص ذات الطابقين (ع = 38 سم، 1800 سم 2 المساحة الطابقية) بين عشية وضحاها (03:00 حتي 08:00). هذه أقفاص تمنع التوتر والاكتظاظ. في الصباح، وذلك باستخدام ماصة نقل، مسح المهبل من إناث الفئران مع ما يقرب من 0.25 مل من المياه المالحة. نقل الحل في أنبوب microcentrifuge.
- وضع الإناث اثنين وذكر مرة أخرى في أقفاص التقليدية الخاصة بكل منها.
- عرض حل جمعها في القسم 1.2 تحت المجهر الضوئي (100X) لتحديد أي مرحلة من مراحل دورة داقية الفئران تعاني وما إذا الحيوانات المنوية أم لا موجودة. إذا كان هناك الحيوانات المنوية، وتسجيل التاريخ كيوم الجنينية (E1) (الشكل 1). إذا الحوامل، وإعطاء الأنثى لها القفص الخاص على E14.
ملاحظة: الخلايا في مسحة مهبلية واضحة، وبالتالي استخدام إعداد الإضاءة الخافتة. تأكد من أن المكثف وتعديلها لوضع أدنى مستوياته. ميلاديمجرد سيطرة سطوع لضوء خافت. إذا كان الطلب السطوع متاحة، لأنها مجموعة 1.
2. الغذائية التكميلية
ملحوظة: تم تصميم هذا البروتوكول لتقييم الآثار العلاجية من البروكلي الغذائية استهلاك تنبت خلال الأسبوع الأخير من الحمل. تنمو براعم وفقا لوو وآخرون. 27.
- نقع بذور براعم البروكلي عن 2-3 ساعات. نشر بذور الخروج على مربع sprouter البذور كونترتوب ووضع على سطح دافئ لإنبات.
- الماء والبذور مرتين يوميا، مرة واحدة في AM (8-9 AM) ومرة واحدة في PM (3-4 م).
- في اليوم الخامس، ووضع براعم بنافذة لليوم (يجب أن يكون براعم اثنين من يترك كل وسوف تصبح خضراء على مدار اليوم).
- في نهاية اليوم، حصاد براعم عن طريق سحب بلطف براعم البروكلي من خارج منطقة الجزاء منخول ووضع على سطح مستو لتجف.
- مرة واحدة يتم تجفيفها براعم تماما، ثييغ من 200 ملغ وضعها في كيس من البلاستيك مختوم.
- تبدأ في E14، وإطعام كل حامل الفئران 200 ملغ من براعم البروكلي المجفف يوميا حتى PD21 (اليوم مفطوم الجراء).
3. التهاب
- للحث على التهاب وتتكاثر إصابة المادة البيضاء في نسل، حقن الفئران الحوامل مع lipopolysaccharide في (LPS) كل 12 ساعة على E19 E20 و. في يوم من الحقن، وجلب قفص في المختبر من منشأة سكنية. السماح للالفئران الحوامل حتى يتأقلم وتصبح هادئة لمدة 1 ساعة على الأقل. إذا يظهر الفئران علامات سريرية للضرر النظامية أو كلوي دائم، ويتم التخلص فورا وإزالتها من الدراسة.
- وزن السد حامل.
- حل 200 ميكروغرام / كغ من LPS (المصلي 0127: B8) في 100 ميليلتر من المياه المالحة. نضح الحل في حقنة 1 مل مجهزة 30 G ½ الإبرة.
- استخدام إبرة جديدة لكل الحقن. يسمح الحل في عملية الاحماء لدقائق قليلة للحد من عدم الراحة.
- تسجل الوقت وحقن السد حامل البريتونى. حقن بديلة بين الجانبين لضمان التوزيع العادل.
ملاحظة: Machholz وآخرون. يصف إجراءات ضبط النفس وحقن المناسبة. 28
4. الاختبارات التنموية رد الفعل
- على PD1 (يوم الولادة)، وإزالة الجراء من السد وسجل أوزان المواليد. وضع الجراء العودة إلى أقفاصها منها ونقلها إلى منشأة الحيوان حتى PD3. وهذا ما يضمن الترابط بين الأم السد والجرو.
- تسجيل اختبار رد الفعل لتقييم موثوق بها. ضبط كاميرا فيديو بحيث يكون في سرعة مصراع القصوى لتحليل الإطار حسب الإطار (1/1000 ق). وضع كاميرا فيديو بحيث يكون مباشرة فوق أو بجانب الجرو الفئران وجميع المواد التي تستخدم في كل المنعكس. على سبيل المثال، للوضع hindlimb، ضع الكاميرا بجانب الجرو الفئران لضمان القبض على رفع ووضع من hindlimb.
- لالمقوم المتسارع، ضع الكاميرا فوق الجرو الفئران ومهبط لتسجيل قدرة الجرو إلى صحيحا في الجو.
- أوزان قياسية يوميا حتى نهاية التجربة. على PD3، يبدأ النمو العصبي لا ارادي اختبار (الشكل 4). نقل الأقفاص في غرفة هادئة مدة لا تقل عن 1 ساعة قبل الاختبار للسماح التأقلم مع البيئة.
- أداء اختبار رد الفعل النمو العصبي في وقت ثابت كل يوم كما الفئران هي ليلى. على سبيل المثال، اختبار بين 09:00 حتي 12:00 يوميا. الحفاظ على الجراء مباشرة تحت مصباح التدفئة أو على وسادة الحرارة في جميع الأوقات، للحفاظ على درجة حرارة الجسم ثابتة من 36.5 درجة مئوية. الفئران الوليدة في هذه السن يفقد الحرارة بسهولة. قياس مع تحقيق درجة حرارة المستقيم. إذا فعلت بكفاءة، لا تتغير درجات الحرارة الجراء الجسم لأنها لا تتم إزالة من السد والقمامة طويلة بما فيه الكفاية. ملاحظة: مراقبة درجة حرارة مصباح الحرارة للتأكد من أنه لا يتجاوز 37 درجة مئوية.
- Forelimb استيعاب
- تبدأ في PD3، وإجراء اختبار رد الفعل forelimb فهم. وضع قضيب حادة ضد كف كل forepaw وتطبيق الضغط الخفيف يدويا. والضغط الخفيف يجب أن تحل قليلا من forepaw للتأكد من أن الاتصال يتم ويمكن الجراء يشعر قضيب. سوف تظهر استيعاب كما انثناء من كافة الأرقام حول قضيب. يحدث الاستحواذ الناجح لهذا المنعكس عندما اغتنام كل من الأرجل الأمامية للقضيب لمدة يومين على التوالي.
- يسجل فهم forelimb:
0 لعدم استيعاب
1 لاستيعاب الناجحة التي قام بها forepaw واحد (من اليسار أو صforepaw آيت يمكن أن يذكر هنا)
2 لاستيعاب الناجحة التي قام بها كل من الأرجل الأمامية
- Hindlimb استيعاب
- تبدأ في PD3، وإجراء اختبار رد الفعل hindlimb فهم. وضع قضيب حادة ضد وحيد من كل hindpaw وتطبيق الضغط الخفيف يدويا. والضغط الخفيف يجب أن تحل قليلا hindpaw للتأكد من أن الاتصال يتم ويمكن الجراء يشعر قضيب. يبدو استيعاب الناجح للقضيب كما انثناء من الأرقام حول قضيب. يحدث الاستحواذ الناجح لهذا المنعكس عندما فهم كلا hindpaws قضيب لمدة يومين على التوالي.
- يسجل فهم hindlimb:
0 لعدم استيعاب
1 لاستيعاب ناجحة من خلال hindpaw واحد (من اليسار أو اليمين hindpaw يمكن أن يذكر هنا)
2 لاستيعاب الناجحة التي قام بها كل من hindpaws
- المقوم
- تبدأ في PD3، بدء الاختبار المنعكس المقوم. اعتقادا راسخا الجرو في موقف ضعيف، مع كل الكفوف أربعة في وضع مستقيم. ترك سو الجرو وعلى الفور بدء موقت. ويتحقق المقوم عندما الجرو قادرة على الوجه / يتدحرج على جميع الكفوف الأربعة، ولكل مخلب هو عمودي على الجسم. إعطاء كل الجرو بحد أقصى 15 ثانية لتحقيق هذا الهدف.
- يسجل المقوم:
0 الكذب على الظهر (أو 15 ثانية لأقصى تخصيص الوقت)
1 عن الكذب على الجانب (الجانب الأيمن أو الأيسر يمكن أن يذكر هنا) أو قدرة الجرو إلى اليمين ولكن في الموقف الخطأ (أو 15 ثانية لأقصى تخصيص الوقت)
2 لالمقوم الناجح والموقف المناسب
- Hindlimb وضع
- تبدأ في PD4، يبدأ hindlimb وضع اختبار رد الفعل. عقد الجرو عموديا في الهواء، من خلال الجذع. بلطف السكتة الدماغية ظهر من hindpaw مع سطح حادة (مثل حافة الطاولة). A وضع رد الفعل الصحيح هو عندما ينسحب الجرو الفئران وhindlimb حفز، تليها موضع hindlimb الخناق على ذلك السطح.
- يسجل رر hindlimbالتفوق لا ارادي:
0 لعدم النجاحات
1 لوضع من hindpaw واحد (من اليسار أو اليمين hindpaw يمكن أن يذكر هنا)
2 لنجاح وضع hindlimb لكلا hindpaws
- جرف تجنب
- تبدأ في PD4، بدء اختبار جرف فسخ العقد. وضع الجرو الفئران على حافة سطح مستو، بحيث الأرجل الأمامية وخطم من الجرو هي على الحافة. نتائج الصحيحة هي استجابة وقائية، حيث يتحول الجرو الفئران بعيدا عن حافة الهاوية. يتم وضع يد المجرب أو الهبوط رغوة تحت الهاوية للقبض على الجرو من السقوط.
- يسجل تجنب الهاوية:
0 لأي حركة أو السقوط في الهاوية
1 لمحاولات الابتعاد عن حافة الهاوية ولكن مع أطرافه شنقا
2 لحركة ناجحة بعيدا عن الهاوية
- مشية
- بدء تقييم مشية على PD6. مكان ولادتها في وسط 15 سم diametإيه الدائرة وتسمح الجرو 30 ثانية لإكمال المهمة. يتم تنفيذ 14 ألف مشية ناجحة عندما الجرو الفئران قادرة على نقل كل الأرجل الأمامية خارج دائرة في أقل من 30 ثانية.
- يسجل مشية كما الوقت بالثواني الذي يستغرقه الجرو الفئران على التحرك خارج دائرة. تسجيل الوقت الذي يستغرقه الجرو لنقل كل الأرجل الأمامية خارج الدائرة. سجل 30 ثانية إذا كان الجرو غير قادر على إكمال المهمة في وقت معين
- السمعية باغت
- بدء تحليل جفل السمعي على PD10. تقديم ضوضاء عالية (جرس) مباشرة على الجرو لتقييم ما إذا كانت ردود الفعل المفاجئة موجودة. لوحظ استجابة جفل إيجابية عندما يعرض الجرو حركة "الرجيج، بعيدا عن الصوت.
- يسجل جفل السمعي:
(أو لا) لا لردود الفعل المفاجئة
(أو نعم) لردود الفعل المفاجئة الإيجابية
- وضع
- بدء تحليل الموقف على PD12. مكان الجراء على سطح مفتوح غير زلق، ومراقبة الموقف الجرو له عندما تتحرك. وينعكس موقفا غير ناضجة عن طريق سحب البطن عندما تتحرك، ومشيرا عمودي كل من الأرجل الأمامية وhindpaws النسبية للجسم. ويكتسب موقف ناضجة عندما الجرو يمكن رفع البطن من على سطح الأرض، وأشار كل من الأرجل الأمامية وhindpaws على التوالي، أو موازية للجسم، وعندما تتحرك.
- تسجيل الموقف:
0 لعدم الحركة
1 لموقف غير ناضجة عندما تتحرك
2 لموقف ناضج بينما تتحرك
- افتتاح العين
- يبدأ التحليل فتح العين على PD12. تسجيل يوم الجفنين المفتوحة:
0 لا لعيون مرئية
1 العيون مرئية واحد (الجانب الأيمن أو الأيسر يمكن أن يذكر هنا)
2 لعينان مرئية
- يبدأ التحليل فتح العين على PD12. تسجيل يوم الجفنين المفتوحة:
- المقوم المعجل
- تبدأ في PD14، يبدأ تسارع اختبار تصحيح. وضع الجرو في مستلق موقف 30.48 جentimeters فوق الهبوط الرغوة. إسقاط الجرو ومراعاة قدرته على الحق نفسه. يشير المقوم إلى عندما الجرو هو قادرة على تحويل أكثر من وضعية الانبطاح والأرض على الكفوف.
- يسجل المقوم المعجل:
0 لتسقط على ظهرها
1 لتسقط على جانبها (الجانب الأيمن أو الأيسر يمكن أن يذكر هنا)
2 للهبوط على الكفوف
ملاحظة: هي أنواع مختلفة من تقدير حجم ردود الفعل المتاحة اعتمادا على مسألة المحققين. تقدير حجم ردود الفعل يمكن القيام به الملاحظة الأولى من رد الفعل، اليوم الأول من ظهور حتى اختفاء منعكس، والوقت المستغرق لتنفيذ المهمة بنجاح، وسرعة الأداء، و / أو تحسين الأداء مع مرور الوقت. 13، 14، 29، 30، 31 لجدراسة urrent، وكان يستخدم في اليوم الأول من ظهور باعتباره النتيجة. عند استخدام نماذج متكررة الولادات، الجراء من نفس القمامة عادة تتصرف بالمثل بسبب التركيبة الجينية الخاصة بهم، في الرحم والبيئة ما بعد الولادة، وتوفر التغذية. 32 لذلك، الجرو واحد لا يمكن أن تمثل باعتبارها ن = 1 بسبب التحيز القمامة. الجراء فحص داخل القمامة يمكن متوسط بحيث تمثل كل القمامة ون = 1. 32 و 33 بدلا من ذلك، العديد من الجراء داخل نفس القمامة يمكن تحليلها باستخدام نموذج الآثار المختلطة، والتي تأخذ في الاعتبار الجراء داخل نفس القمامة. 32 و 33
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
يتم تقديم جدول زمني لهذا التصميم التجريبي في الشكل 2. سبق نشر 30 الأساليب والنتائج. وكان 30 والهدف من هذه الدراسة هو تقييم ما إذا كانت مكملات الغذائية مع براعم البروكلي أثناء الحمل وفترة preweaning حماية النسل من تأخير النمو العصبي الناجم عن التعرض في الرحم لLPS. أعطيت الفئران الحوامل توقيت الحقن داخل الصفاق من المياه المالحة (مراقبة، 100 ميليلتر) أو LPS (200 ميكروغرام / كغ مخففة في 100 ميكرولتر من محلول ملحي) على E19 E20 وكل ساعة 12. أعطيت السدود الحوامل تم اختيارها عشوائيا أيضا المكملات الغذائية من براعم البروكلي المجفف (200 ملغ / يوم) من E14 إلى PD21. وقد استخدم LPS لتقليد الالتهاب والقرنبيط أعطيت باعتبارها تدخل علاجي محتمل لحماية النسل براعم الأمهات. ولدت الجراء بشكل طبيعي على E23 (
أوزان المواليد
تحليل أوزان المواليد كشف الأثر الرئيسي للمعالجة (F (1،23) = 18.5، 0.0003)، والنظام الغذائي (F (1،23) = 6.5، ع = 0.02)، ولها تأثير التفاعل (F (1،23) = 7.4، ع = 0.01). LPS، كانعكاس لالتهاب الأمهات، أسفرت عن الجراء (5.1 ± 0.2 ز) من مواليد أصغر بكثير مقارنة مع الجراء المالحة (6.3 ± 0.2 ز، ص توكي في <0.001)، المالحة + بروكلي براعم الصغار (6.2 ± 0.2 ز، ص توكي ل <0.001)، وLPS + بروكلي براعم الصغار (6.0 ± 0.1 ز، ص توكي في <0.01). كانت أوزان المواليد من براعم الجراء LPS + بروكلي لا تختلف من الضوابط، مما يدل على أن براعم البروكلي بمنأى عن LPS الجراء من أن النمو مقيدة.
التطور العصبي رد الفعل اختبار
استيعاب رد الفعل
لم يلاحظ أي آثار العلاج أو النظام الغذائي لكلا forelimb واستيعاب hindlimb. كانت قادرة على أداء هذه المهام كل الجراء.
Hindlimb بيز
(F (1،23) = 6.8، ع = 0.02) تم الكشف عن التأثير الرئيسي من العلاج للوضع hindlimb. مقارنة المالحة (4.3 ± 0.1 أيام، ص توكي في <0.05) والمؤسسة العامة لتحلية + بروكلي براعم (4.3 ± 0.0 أيام، ص توكي في <0.05)، تأخرت LPS الجراء بشكل ملحوظ (5.1 ± 0.3أيام). على الرغم من أن أداء LPS + بروكلي براعم الصغار لم تختلف من الجراء LPS، أنها لم تعد تختلف عن الضوابط، مما يشير إلى وجود تحسن في هذه المهمة لا ارادي من تلك الجراء تلقي LPS وأي علاج.
جرف تجنب
(F (1،25) = 6.0، ع = 0.02) تم الكشف بعد تحليل تجنب الهاوية تأثير الرئيسي للعلاج. تم المساس LPS الجراء (5.8 ± 0.4 يوما) بشكل كبير في الحصول على هذا المنعكس مقارنة المالحة (4.4 ± 0.2 أيام، ص توكي في <0.05). لم LPS + بروكلي براعم الصغار لا يختلف أداء من أي من المجموعات، مما يشير إلى وجود تحسن في الأداء.
مشية
وهناك تأثير كبير للعلاج (F (1،24) = 15.1، ع = 0.0007)، والنظام الغذائي (F (1،24) = 6.3، ع = 0.02)، وبينتم العثور على عمل بين العلاج والحمية (F (1،24) = 9.5، ع = 0.005) تحليلات التالية مشية. تم الكشف عن تأخر الحصول على مشية في الجراء LPS (9.7 ± 0.4 يوما) مقارنة المالحة (7.5 ± 0.3 أيام، ص توكي في <0.001)، المالحة + بروكلي براعم (7.7 ± 0.3 أيام، ص توكي في <0.001)، وLPS + البروكلي براعم الصغار (7.9 ± 0.2 أيام، ص توكي في <0.01).
السمعية باغت
لم يلاحظ أي اختلافات.
المقوم
تم الكشف عن تأثير الجنس (F (1،43) = 16.3، ع = 0.0002) للتصحيح، لذلك، تم فحص الذكور والإناث الجراء بشكل منفصل. تم الكشف عن عدم وجود فروق بين الذكور. في الإناث، والأثر الرئيسي للحمية (F (1،21) = 11.8، ص = 0.002) وتأثير التفاعل (F (1،21) = 15.6،تم العثور ع = 0.0007). كانت LPS + بروكلي براعم الصغار (4.9 ± 0.4 يوما) قادرة على حق في وقت سابق مقارنة مع الجراء LPS (6.7 ± 0.6 أيام، ص توكي في <0.05).
المقوم المعجل
كشف اختبار تصحيح تسارع تأثير كبير الرئيسي من العلاج (F (1،25) = 4.51، ع = 0.04). تأخرت LPS (17.4 ± 0.6 يوما) وLPS + بروكلي براعم الصغار (16.9 ± 0.2 يوما) في أداء تسارع تصحيح مقارنة المالحة (16.0 ± 0.4 يوما) والمؤسسة العامة لتحلية + بروكلي براعم (16.4 ± 0.5 يوما).
وضع
تم الكشف عن تأثير كبير تفاعل العلاج والحمية (F (1،24) = 5.8، ع = 0.02) بعد تحليل الموقف. كان LPS + بروكلي براعم الصغار (14.9 ± 0.4 يوما) موقف ناضجة في وقت سابق من LPS (17.0 ± 0.4 أيام، ص توكي في <0.05).
افتتاح العين
(F (1،23) = 4.71، ع = 0.04) ولوحظ وجود تأثير كبير الرئيسي من النظام الغذائي في ما يخص فتح العين. كلا المالحة + BrSp (15.9 ± 0.1 يوما) وLPS + بروكلي براعم الصغار (15.4 ± 0.2 أيام) بلغ هذا المنعكس في وقت سابق من المالحة (16.0 ± 0.2 يوما) وLPS الجراء (16.0 ± 0.1 يوما).
وعموما، كان القرنبيط استهلاك تنبت في أواخر الحمل وفترة preweaning قادرة على توفير الحماية ضد تأخر النمو الناجم عن LPS في العديد من ردود الفعل التحقيق. يرجى الرجوع إلى المادة المشار إليها لمزيد من التفاصيل. 30
الشكل 1. بوsitive المهبل مسحة. مثال على مسحة المهبل تصوير مع 10X عدسة موضوعية على المجهر الضوئي. وتمثل هذه الشريحة شريحة الإيجابية المشار إليها وجود الحيوانات المنوية (السهم). عند إجراء مسحة المهبل، ودورة داقية من الفئران يمكن تقييم إما مقدمات الوداق، شبق، تلية الوداق، أو هجوع الودق. وهذا يساعد في توقيت بدقة خصبة لأعلى معدل نجاح الحمل.
الشكل 2. التجريبية تصميم الجدول الزمني. الجدول الزمني التجريبي لتقييم ذرية ولدوا لالسدود نظرا الحقن داخل الصفاق من LPS. المكملات الغذائية مع براعم البروكلي يبدأ على E14 حتى PD21. يتم حقن السدود على E19 E20 وكل 12 ساعة (كما تدل الأسهم الصفراء). يتم تسجيل أوزان الأمهات مع مقياس الوزن ودرجة حرارة الجسم مع التحقيق في درجة الحرارة المستقيم مغطاة مواد التشحيم. ولدت الجراء طبيعيا ذ على E23 (كما تدل على السهم الأسود). تبدأ في PD3، الجراء تخضع لعدة اختبار رد الفعل. على PD21، الجراء الخضوع لاختبار حقل مفتوح لتقييم الاستجابات السلوكية.
الشكل 3. مثال على الجدول الزمني للتقييم النمو العصبي ردود الأفعال. ويبدو أن ردود الفعل في مراحل مختلفة من التنمية، وبالتالي، واستولت على اقتناء هذه المنعكسات يتطلب أن الاختبارات تبدأ قبل أيام قليلة. استخدمت هذه الدراسة الطويلة ايفانز الفئران الوليدة، ولكن توجد اختلافات بين السلالات والأنواع، لذلك يجب أن يتم تنفيذ تجربة أولية باستخدام هذه التواريخ كدليل عام. يتم تقييم فهم Forelimb، فهم hindlimb، والمقوم على PD3، وضع hindlimb وتجنب الهاوية على PD4، ومشية على PD6. يتم تقييم جفل السمعي على PD10، الموقف والعين فتحات على PD12، وتسارع المقوم على PD14.
EP-together.within الصفحات = "1"> 
الرقم 4. صور التنموية ردود الأفعال. أداء صورا لاختبار رد الفعل على PD3 في الفئران الوليدة طويلة ايفانز. Forelimb فهم (A)، فهم hindlimb (B)، والمقوم (C) الفحص يبدأ في PD3. تجنب الهاوية (D) واختبار hindlimb وضع (E) يبدأ في PD4. مشية (F) يحلل يبدأ في PD6. ويصور جهاز للتعجيل المقوم (G). الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.
| فحص معلمة | المجموعات (يعني ± SEM) | أهم الآثار (ع القيمة) | |||||
| حجم القمامة والأوزان | ملحي | المالحة + بروكلي براعم | LPS | LPS + بروكلي براعم | علاج او معاملة | حمية | التفاعل |
| القمامة الحجم (عدد الجراء) | 13.3 ± 1.0 | 13.1 ± 1.0 | 10.3 ± 1.5 | 11 ± 1.2 | 0.03 | 0.8 | 0.7 |
| الأوزان الميلاد * # د | 6.3 ± 0.2 | 6.2 ± 0.2 | 5.1 ± 0.2 | 6.0 ± 0.1 | 0.0003 | 0.02 | 0.01 |
| الأوزان PD7 * د | 15.0 ± 0.5 | 15.5 ± 0.4 | 11.4 ± 1.1 | 13.6 ± 0.3 | 0.0006 | 0.09 | 0.2 |
| الأوزان PD21 د | 50.0 ± 1.4 | 48.7 ± 1.6 | 46.4 ± 1.2 | 48.2 ± 1.4 | 0.2 | 0.9 | 0.3 |
| Neurodevelop- ردود الأفعال العقلية | |||||||
| Forelimb امسك ل | 3.0 ± 0.0 | 3.0 ± 0.0 | 3.0 ± 0.0 | 3.0 ± 0.0 | ن / أ | ن / أ | ن / أ |
| Hindlimb امسك ل | 3.6 ± 0.3 | 3.5 ± 0.3 | 4.6 ± 0.6 | 3.3 ± 0.1 | 0.3 | 0.1 | 0.1 |
| Hindlimb بيز * ل | 4.3 ± 0.1 | 4.3 ± 0.0 | 5.1 ± 0.3 | 4.5 ± 0.2 0.02 | 0.07 | 0.2 | |
| جرف تجنب * ل | 4.4 ± 0.2 | 4.7 ± 0.2 | 5.8 ± 0.4 | 5.0 ± 0.4 | 0.02 | 0.4 | 0.1 |
| مشية * # ل | 7.5 ± 0.3 | 7.7 ± 0.3 | 9.7 ± 0.4 | 7.9 ± 0.2 | 0.0007 | 0.02 | 0.005 |
| السمعي باغت ل | 11.5 ± 0.3 | 11.5 ± 0.1 | 12.0 ± 0.5 | 11.8 ± 0.2 | 0.2 | 0.8 | 0.9 |
| الموقف #A | 15.6 ± 0.5 | 15.9 ± 0.6 | 17.0 ± 0.4 | 14.9 ± 0.4 | 0.8 | 0.08 | 0.02 |
| فتحات العين | 16.0 ± 0.2 | 15.9 ± 0.1 | 16.0 ± 0.1 | 15.4 ± 0.2 | 0.08 | 0.04 | 0.2 |
| تسارع تصويب ل | 16.0 ± 0.4 | 16.4 ± 0.5 | 17.4 ± 0.6 | 16.9 ± 0.2 | 0.04 | 1 | 0.3 |
| تصحيح # أ (إناث) | 4.9 ± 0.5 | 5.1 ± 0.4 | 6.7 ± 0.6 | 4.6 ± 0.4 | 0.09 | 0.003 | 0.0007 |
| تصحيح ل(ذكور) | 3.9 ± 0.2 | 4.6 ± 0.3 | 5.9 ± 1.9 | 4.2 ± 0.6 | 0.4 | 0.6 | 0.2 |
| يوم من ظهور | * تختلف اختلافا كبيرا بين LPS والمالحة | ||||||
| تم إجراء ب عدد مرات النشاط | # اختلافا كبيرا بين LPS وLPS + BrSp | ||||||
| ج ثواني | |||||||
| د غرام | |||||||
الجدول 1. الأوزان والنمو العصبي رد الفعل نتائج. النتائج التي تم الحصول عليها من نسل تتعرض لفي التهاب الرحم و / أو الغذائية براعم البروكلي مكملات. 30 الأوزان المقدمة هنا هي منذ ولادته، PD7، وPD21. تم اختيار النقاط الزمنية لتمثيل المبكرة، المدى، والرضع البالغ من العمر 1-2. يتم عرض البيانات كما يعني ± SEM. التحليلات الإحصائية المستخدمة في الدراسة كانت ANOVA اتجاهين تليها الاختبار اللاحق توكي و.و= يوم المظهر، ب = عدد المرات التي تم تنفيذ النشاط، وج = الوقت (ق) تم تنفيذ النشاط، * = الفرق كبير بين LPS والسيطرة، # = الفرق كبير بين LPS وLPS + براعم البروكلي. ن = 5-7 ليترات لكل مجموعة (وبلغ متوسط قيم من أربعة الجراء، اثنين من الذكور واثنتين من الإناث، داخل القمامة لتمثيل القمامة).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
النمو العصبي اختبار رد الفعل هو قياس التنبؤي للتنمية القشرية غير طبيعية والنضج، والتي قد تكون ذات أهمية في ظل الظروف التي الأعصاب العلني ليس واضحا. أثناء الاختبار النمو العصبي، فمن الأهمية بمكان لضمان أن يتم فحص الجراء في نفس الوقت يوميا. الفئران هي ليلى، وبالتالي، إيقاعهم الساعة البيولوجية قد يغير الأداء إذا تم إجراء اختبار في أوقات مختلفة خلال اليوم. ينبغي أن يستكمل 34 اختبار في غرفة هادئة كما سمع أصواتا عالية يمكن أن تضيف الضغط على الجراء. تتطلب 35 الجراء ما لا يقل عن 1 ساعة للتأقلم مع البيئات الجديدة، لأن النقل، والتعامل مع الإنسان، وإعدادات جديدة يمكن أن تحدث التوتر في الجراء. تحتاج 35 الجراء أيضا لفحصها مباشرة تحت مصباح ساخنة أو على وسادة ساخنة. الأصغر الجراء، وأقل قدرة أنهم قادرون على thermoregulate. 36 لهذا السبب، تعطى الجراء 15الصورة و30 ثانية لأداء المقوم على PD3 ومشية على PD6، على التوالي. 36 وبالإضافة إلى ذلك، الجراء السيطرة لا ينبغي أن يقتصر النمو عندما ولدت، كما يمثل الوزن عاملا الخلط. وينبغي أيضا أن أعدمت الفضلات إلى 8-10 لتوفير التغذية متساوية وتمثيل الجنس. مرة واحدة ولدت الجراء، فمن المهم السماح يوميا لمدة الفئران على تشكيل رابطة مع السد لمنع إهمال الأمهات.
يجب أن يتم اختبار الجراء يوم أو يومين قبل يوم يكتسبون المنعكس من أجل القبض على بداية ظهور. اعتمادا على نموذج تجريبي، قد تكون هناك حاجة بعض التعديلات. الفئران حديثي الولادة هي أصغر بكثير من الفئران. ولذلك، فإن حجم المعدات المستخدمة قد تضطر إلى تعديل لحجم الفئران حديثي الولادة. قد تكون هناك حاجة أيضا بعض المشاكل. قد يكون سلالات وأنواع مختلفة توقيت مختلف قليلا من ظهور ردود الفعل. 13 توقيت بالتفصيل في هذا التقرير هو specifiج لالجراء طويلة إيفانز، مع اختبار لردود الفعل جديدة تبدأ في PD3، 4، 6، 10، 12، و 14 (الشكل 3). قد يحتاج المحقق إلى إجراء اختبارات المنعكس على 2-3 ليترات لإنشاء تطور رد الفعل الطبيعي قبل الاختبار التجريبي. وعلاوة على ذلك، عند تنفيذ التحليلات الإحصائية على البيانات التي تم جمعها، المجرب يجب استخدام التقنيات المناسبة لمنع القمامة التحيز. الجراء من القمامة نفسه تميل إلى أداء مماثل لبعضها البعض، وبالتالي تمثل القمامة ون = 1، وليس الجرو الفردية. 32 و 33
اختبار ردود الفعل العصبية النمائية مهم لأنه هو الاختبار الوحيد المتاح للقوارض حديثي الولادة، لأن التجارب السلوكية أكثر تعقيدا من غير الممكن في هذه الأعمار. تتوفر في هذه الفترة المبكرة إلى جانب الوزن والمظهر المادي أي تدابير أخرى. وقد استخدمت الأساليب المقدمة هنا من قبل العديد من المحققين، وبالتالي دعماستخدام اختبار رد الفعل العصبي، وخاصة في القوارض الشباب حيث الاختبارات السلوكية الأخرى غير مجدية. 13، 14، 29، 30، 31، 37، 38 هذه الاختبارات موازية لمنعكس اختبار أجري في الرضع الإنسان، هي التنبؤية من اضطرابات النمو العصبي مثل الشلل الدماغي، وتوفر معلومات إضافية بشأن تطور الجنين من الشبكات العصبية. يحدث ظهور ردود الفعل في أوقات محددة خلال فترة preweaning، مما يعكس نضوج الجهاز العصبي. 39 وجود قيود على هذا البروتوكول هو أن ليس كل نماذج تجريبية يمكن أن تخضع لاختبار منعكس. ولدت القوارض غير ناضجة، بحيث تنميتها بعدها تقدم ميزة التقاط بداية للتنمية رد الفعل. نماذج حيوانية أخرى مثلكما الحمل ولدت ناضجة وتطوير مختلف من القوارض، حتى أن بعض من اختبار رد الفعل لا ينطبق على هذا النموذج. أيضا، اختبار رد الفعل ليست مقياسا مباشرا لتشوهات معرفية أو سلوكية، وأنه من غير المؤكد ما إذا كان أي تشوهات المرصودة عابرة أو مستمرة.
بالإضافة إلى ردود الفعل والاختبارات السلوكية لا يمكن أن يؤديها للتحليلات التكميلية في الأعمار المتقدمة. ولهذا الأمر أهمية بسبب تأخر رد الفعل الشاذة لا يؤدي دائما إلى الاضطرابات العصبية النمائية. وعادة ما تدار 2، 40 الاختبارات تبدأ في PD21 (يوم الفطام) عند القوارض قادرة على أداء المهام الإدراكية والحركية. وتشمل هذه الاختبارات بوت لا تقتصر على rotarod، موريس متاهة مائية، ومرتفعة بالإضافة إلى متاهة. لفترة وجيزة، ويجري اختبار rotarod عن طريق وضع القوارض على قضيب الدورية، وتسجيل أدائها على قضيب لفترة من الوقت أو حتى السقوط القوارضإيقاف. هذا الاختبار بتقييم التعلم الحركي والقوة، فضلا عن سلامة هياكل الدماغ مثل العقد القاعدية والمخيخ. تتكون 41 موريس متاهة مائية من وضع القوارض في بركة من المياه البيضاء حليبي، وتسجيل الوقت الذي يستغرقه القوارض لإيجاد منصة المغمورة. العظة يمكن وضعها فوق كل رباعي من التجمع مع نفس جديلة دائما فوق المنصة. هذا يدرس أناني مقابل أشكال غيري التركيز من قرن آمون بوساطة التعلم المكاني والذاكرة. 42 يقيس اختبار مرتفعة بالإضافة إلى متاهة الخوف والقلق، وكذلك السلوك الاستكشافي الأصيل. توضع القوارض في وسط أربعة أذرع، وهما المغلقة واثنين من فتح، مرتفعة عن سطح الأرض. 43 تجنب والسلوك الاستكشافي (اعتبرت الوقت الذي يقضيه في كل ذراع) من يتم تسجيل القوارض. 43 هذه الاختبارات إضافية تدرس الحسية والأداء الإدراكي، والسماح للمحقق لكماsess ما إذا كانت إهانة تستمر حتى سن البلوغ، أو ما إذا كان هو عابر.
تأخر النمو والتنبؤية، ومطلوب اختبار السلوكي التكميلي لتقديم أدلة مكملة لوجود اضطراب في وقت لاحق في الحياة. وبالإضافة إلى ذلك، يجب أن يكون الأمثل الردود السيطرة قبل تجريب سلالة وأنواع الاختلافات، تغيرات جينية، الدواء، وما إلى ذلك على الرغم من هذه الظروف، وتعلم تقنيات وصفها بسرعة، ويتقن بسهولة، وغير مكلفة، وتوفر معلومات هامة بشأن تطوير الجهاز العصبي. أنها توفر فرصة لتقييم تطور الجنين ونضوج الجهاز العصبي في الجراء في سن عندما تكون غير قادر على أداء المهام السلوكية ناضجة. وعلاوة على ذلك، والرضع الإنسان في كثير من الأحيان الخضوع لاختبارات المنعكس التنموي، وبالتالي اختبار القوارض المنعكس يوفر وسيلة لترجمتها. وفي الختام، وهذا هو وسيلة ممتازة لفحص أولي لغير طبيعينمو الجهاز العصبي في الأطفال حديثي الولادة يمكن أن يؤدي إلى التحقيق في وقت لاحق من الإدراك والسلوك.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لديهم ما يكشف.
Acknowledgments
الكتاب أود أن أشكر وكالات التمويل لدينا، والتي تشمل NeuroDevNet (أ مراكز التميز الوطني)، ومؤسسة ALVA، ومعهد بحوث صحة الطفل المرأة و، وجامعة ألبرتا.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Breeding | |||
| Transfer pipettes | Fisherbrand | 12-711-9AM | Used for vaginal flushes. |
| Sterile Saline | Hospira | 7983254 | The solution used to collect cells during vaginal flushes. |
| 400 µL Microcentrifuge tubes | Fisherbrand | 05-408-120 | Used to hold the saline solution. |
| Light microscope | Leica | Leica ATC 2000 | For observation of the saline solution. Can be any light microscope used in the lab. |
| Slides | Fisherbrand | 12-552-5 | The saline solution is placed on the slide. Can be any slides used in the lab. |
| Coverslips | Fisherbrand | 12-545-F | To coverslip the slides. Can use any coverslips used in the lab. |
| Dietary Supplementation | |||
| Broccoli Sprouts seeds | Mumm's Sprouting Seeds | Broccoli sprouts seeds are ordered and grown in the lab. | |
| Countertop Seed Sprouter Box | Mumm's Sprouting Seeds | A box is used to germinate and grow the seeds prior to harvest. | |
| 250 mL beaker | The beaker is used to soak the seed. Any size beaker that would fit can be used. | ||
| Maternal Inflammation | |||
| Lipoplysaccharide (LPS) | Sigma | L3129 | The endotoxin used to mimic maternal inflammation. |
| 1 mL Syringe | BD Syringe | 309659 | Used to inject the pregnant rat. |
| Gauge (30 G x 1/2) | BD PrecisionGlide Needle | 305106 | Use the smallest needle to avoid pain and discomfort. |
| Sterile Saline (0.9% Sodium Chloride, USP) | Hospira | Saline is used to dissolve LPS. | |
| Weights | |||
| Scale | Denver Instrument | For recording the weights. Can be any scale with 2 decimal places used in the lab. | |
| Neurodevelopmental Reflexes | |||
| Thin blunt rod | Can be a paperclip or toothpick. This is for forelimb and hindlimb grasping. | ||
| Round filter paper | Whatman | 1001 150 | 15 cm diameter paper used for gait analysis. |
| Timer | Fisher Scientific | 06-662-51 | For timing the time allocated to righting and gait. |
| Blunt surface | Can be an edge of a table. This is for hindlimb placing and cliff avoidance. | ||
| Foam landing | For when the pups perform accelerated righting. | ||
| Video recorder | Sony | VCT-D580RM | To record all reflexes tested. Must be able to record at 1/1,000 fps |
| Bell | For auditory startle. | ||
| Heat lamp or pad | To maintain the body temperature of the pups underoing examination. |
References
- Farber, J. M., Shapiro, B. K., Palmer, F. B., Capute, A. J. The diagnostic value of the neurodevelopmental examination. Clin Pediatr (Phila. 24 (7), 367-372 (1985).
- Zafeiriou, D. I. Primitive reflexes and postural reactions in the neurodevelopmental examination). Pediatr. Neurol. 31 (1), 1-8 (2004).
- Clancy, B., Finlay, B. L., Darlington, R. B., Anand, K. J. S. Extrapolating brain development from experimental species to humans. Neurotoxicology. 28 (5), 931-937 (2007).
- Dobbing, J., Sands, J.
- Semple, B. D., Blomgren, K., Gimlin, K., Ferriero, D. M., Noble-Haeusslein, L. J. Brain development in rodents and humans: Identifying benchmarks of maturation and vulnerability to injury across species. Prog. Neurobiol. , (2013).
- Dobbing, J., Sands, J. Quantitative growth and development of human brain. Arch. Dis. Child. 48 (10), 757-767 (1973).
- Tucker, A. M., Aquilina, K., Chakkarapani, E., Hobbs, C. E., Thoresen, M. Development of amplitude-integrated electroencephalography and interburst interval in the rat. Pediatr. Res. 65 (1), 62-66 (2009).
- Dean, J. M., et al. Strain-specific differences in perinatal rodent oligodendrocyte lineage progression and its correlation with. Dev. Neurosci. 33 (3-4), 251-260 (2011).
- Back, S. A., Riddle, A., McClure, M. M. Maturation-dependent vulnerability of perinatal white matter in premature birth. Stroke. 38, 724-730 (2007).
- Back, S. A., et al. Late oligodendrocyte progenitors coincide with the developmental window of vulnerability for human perinatal white matter injury. J. Neurosci. 21 (4), 1302-1312 (2001).
- Downes, N., Mullins, P.
- Jakovcevski, I., Filipovic, R., Mo, Z., Rakic, S., Zecevic, N. Oligodendrocyte development and the onset of myelination in the human fetal brain. Front. Neuroanat. 3 (5), (2009).
- Fox, W. M. Reflex-ontogeny and behavioural development of the mouse. Anim. Behav. 13 (2), 234-241 (1965).
- Lubics, A., et al. Neurological reflexes and early motor behavior in rats subjected to neonatal hypoxic-ischemic injury. Behav. Brain Res. 157 (1), 157-165 (2005).
- Futagi, Y., Toribe, Y., Suzuki, Y. The grasp reflex and moro reflex in infants: hierarchy of primitive reflex responses. Int. J. Pediatr. , 191562 (2012).
- Hashimoto, R., Tanaka, Y. Contribution of the supplementary motor area and anterior cingulate gyrus to pathological grasping phenomena. Eur. Neurol. 40 (3), 151-158 (1998).
- Isaza Jaramillo, S. P., et al. Accuracy of the Babinski sign in the identification of pyramidal tract dysfunction. J. Neurol. Sci. 343 (1-2), 66-68 (2014).
- Donatelle, J. M. Growth of the corticospinal tract and the development of placing reactions in the postnatal rat. J. Comp. Neurol. 175 (2), 207-231 (1977).
- Palanza, P., Parmigiani, S., vom Saal, F. S. Effects of Prenatal Exposure to Low Doses of Diethylstilbestrol, o,p'DDT and Methoxychlor on Postnatal Growth and Neurobehavioral Development in Male and Female Mice. Horm. Behav. 40 (2), 252-265 (2001).
- Pantaleoni, G. C., et al. Effects of maternal exposure to polychlorobiphenyls (PCBs) on F1 generation behavior in the rat. Fundam. Appl. Toxicol. 11 (3), 440-449 (1988).
- Yeomans, J. S., Frankland, P. W. The acoustic startle reflex: neurons and connections. Brain Res. Rev. 21 (3), 301-314 (1995).
- Vinay, L., Brocard, F., Clarac, F. Differential maturation of motoneurons innervating ankle flexor and extensor muscles in the neonatal rat. Eur. J. Neurosci. 12 (12), 4562-4566 (2000).
- Geisler, H. C., Westerga, J., Gramsbergen, A.
- Heinen, K., et al. Gabaa receptor maturation in relation to eye opening in the rat visual cortex). Neuroscience. 124 (1), 161-171 (2004).
- Whishaw, I. Q., Gorny, B., Foroud, A., Kleim, J. A. Long-Evans and Sprague-Dawley rats have similar skilled reaching success and limb representations in motor cortex but different movements: some cautionary insights into the selection of rat strains for neurobiological motor research. Behav. Brain Res. 145 (1-2), 221-232 (2003).
- Prusky, G. T., Harker, K. T., Douglas, R. M., Whishaw, I. Q. Variation in visual acuity within pigmented, and between pigmented and albino rat strains. Behav. Brain Res. 136 (2), 339-348 (2002).
- Wu, L., et al. Dietary approach to attenuate oxidative stress, hypertension, and inflammation in the cardiovascular system. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 101 (18), 7094-7099 (2004).
- Machholz, E., Mulder, G., Ruiz, C., Corning, B. F., Pritchett-Corning, K. R. Manual restraint and common compound administration routes in mice and. J. Vis. Exp. (67), (2012).
- Rousset, C. I., et al. Maternal exposure to lipopolysaccharide leads to transient motor dysfunction in neonatal rats. Dev. Neurosci. 35 (2-3), 172-181 (2013).
- Nguyen, A. T., Bahry, A. M. A., Shen, K. Q., Armstrong, E. A., Yager, J. Y. Consumption of broccoli sprouts during late gestation and lactation confers protection against developmental delay induced by maternal inflammation. Behav. Brain Res. 307, 239-249 (2016).
- Black, A. M., Armstrong, E. A., Scott, O., Juurlink, B. J., Yager, J. Y. Broccoli sprout supplementation during pregnancy prevents brain injury in the newborn rat following placental insufficiency. Behav. Brain Res. 291, 289-298 (2015).
- Wainwright, P. E. Issues of design and analysis relating to the use of multiparous species in developmental nutritional studies. J. Nutr. 128 (3), 661-663 (1998).
- Lazic, S. E., Essioux, L. Improving basic and translational science by accounting for litter-to-litter variation in animal models. BMC Neurosci. 14, 14-37 (2013).
- Sergio, D. P., Sanchez, S., Ruben, V. R., Ana, B. R., Barriga, C. Changes in behaviour and in the circadian rhythms of melatonin and corticosterone in rats subjected to a forced-swimming test. J Appl Biomed. 1 (47), (2005).
- Castelhano-Carlos, M., Baumans, V. The impact of light, noise, cage cleaning and in-house transport on welfare and stress of laboratory rats. Lab. Anim. 43 (4), 311-327 (2009).
- Zimmerberg, B., Ballard, G. A., Riley, E. P. The development of thermoregulation after prenatal exposure to alcohol in rats. Psychopharmacology (Berl. 91 (4), 479-484 (1987).
- Fan, L. W., et al. Hypoxia-ischemia induced neurological dysfunction and brain injury in the neonatal rat). Behav. Brain Res. 165 (1), 80-90 (2005).
- Smart, J. L., Dobbing, J. Vulnerability of developing brain. VI. Relative effects of foetal and early postnatal undernutrition on reflex ontogeny and development of behaviour in the rat. Brain Res. 33 (2), 303-314 (1971).
- Fox, M. W. Neuro-Behavioral ontogeny: A synthesis of ethological and neurophysiological concepts. Brain Res. 2 (1), 3-20 (1966).
- Piper, M. C., Mazer, B., Silver, K. M., Ramsay, M. Resolution of neurological symptoms in high-risk infants during the first two years of life. Dev. Med. Child Neurol. 30 (1), 26-35 (1988).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J. Neurosci. Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Vorhees, C. V., Williams, M. T. Morris water maze: procedures for assessing spatial and related forms of learning and memory. Nat. Protoc. 1 (2), 848-858 (2006).
- Walf, A. A., Frye, C. A. The use of the elevated plus maze as an assay of anxiety-related behavior in rodents. Nat. Protoc. 2 (2), 322-328 (2007).
