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Eine Ultra-clean Multilayer Vorrichtung zum Sammeln von Größe fraktioniert Meeresplankton und Schwebeteilchen

Published: April 19, 2018 doi: 10.3791/56811

Summary

Plankton und Schwebeteilchen spielen eine wichtige Rolle in den biogeochemischen Zyklen im Ozean. Hier bieten wir eine Ultra-clean, low-Stress-Methode für die Sammlung verschiedener Größen von Partikeln und Plankton auf hoher See mit der Fähigkeit zur Handhabung großer Mengen von Meerwasser.

Abstract

Die Verteilungen der viele Spurenelemente im Ozean sind eng verbunden mit dem Wachstum, den Tod und die Remineralisierung von Meeresplankton und derer ausgesetzt/Untergang Partikel. Hier präsentieren wir Ihnen ein alle Kunststoff (Polypropylen und Polycarbonat), Mehrschichtfiltration System zur Sammlung von suspendierten Partikeln (SPM) am Meer. Diese Ultra-clean Probenahmegerät wurde konzipiert und entwickelt speziell für Spurenelement Studien. Sorgfältige Auswahl aller nicht-metallischen Materialien und Nutzung eines Inline-durchströmten Verfahrens minimiert etwaige Metall Kontaminationen während der Probenahme. Dieses System wurde erfolgreich getestet und optimiert für die Bestimmung von Spurenelementen (z.B.Fe, Al, Mn, Cd, Cu, Ni) auf Partikel unterschiedlicher Größe im Küsten- und offenen Meerwasser. Ergebnisse aus dem Südchinesischen Meer an der Station South East Asia Time Series (Sitzplätze) zeigen, dass tagaktive Variationen und räumliche Verteilung des Planktons in der euphotischen Zone leicht gelöst und erkannt werden können. Chemische Analyse der Größe fraktioniert Partikel in den Oberflächengewässern der Taiwan-Straße schlägt vor, dass die größeren Partikel (> 153 µm) wurden vor allem biologisch abgeleitet, während die kleineren Teilchen (10-63 µm) meist aus anorganischer Materie bestanden. Abgesehen von Cd verringerte sich die Konzentrationen von Metallen (Fe, Al, Mn, Cu, Ni) mit zunehmender Größe.

Introduction

Partikel im Ozean spielen eine wichtige Rolle in der marine biogeochemische Zyklen1. Die meisten Eigenschaften von Partikeln, wie Größe, Mineralogie und Zusammensetzung, können von einer geologischen oder hydrographischen um weitere2tiefgreifend verändern. Die Verteilung der Elemente im Ozean sind darüber hinaus auch verbunden mit dem Lebenszyklus des marinen Phytoplanktons: Wachstum, Tod, Untergang und Remineralisierung3,4. Marine Partikel umfassen mindestens 4 Größenordnungen in der Größe von Submikron-Partikeln bis hin zu großen Aggregaten (> 5 mm). Die meisten Partikel sind biologisch, Prozesse wie virale Lyse, Exsudation, Sekretion, fäkale pelletherstellungabgeleitet. Andere Partikel werden von physischen Koagulation von Zellen, zelltrümmer oder lithogen Materialien1gebildet. Verschiedene chemische und biologische Eigenschaften der Partikel zu steuern die geochemische Zyklen und biologische Vorgänge auf und innerhalb der Partikel4,5,6. Diese Partikel sind wichtige Lebensräume und Nahrungsquellen für einige Organismen, wie Zooplankton oder Saprotrophs. Dementsprechend bezieht sich das Schicksal der Partikel oft auf ihre Größe, die durch biologische Prozesse auf und um Partikel geändert werden können.

Sampling-marine Partikel in der Regel erfordert Filtration, aber dieser Ansatz stellt eine gewisse Unklarheit bei der Ermittlung der Eigenschaften der Partikel, da marine Partikel nicht homogen in Zusammensetzung und Größe sind. Schwebeteilchen, hauptsächlich bestehend aus kleinen und niedrigen Dichte Partikel, die fast permanent in der Schwebe, sind nur für einen kurzen Zeitraum, abhängig von den hydrodynamischen Bedingungen mit unterschiedlichen Mengen von größeren und dichteren Partikel in Suspension gemischt. 7. die ersten Berichte über die Spur Metallzusammensetzung Plankton Proben wurden durch Plankton schleppt oder Aussetzung Plankton Netze auf einem Forschung Schiff8gesammelt. Die Autoren oft Metallpartikel gefunden und Chips in Proben, zu malen, was auf ein schwerwiegendes Problem der Kontamination während der marine Partikel Probenahme für die chemische Analyse. Andere Bemühungen sind net Abschleppen von Schlauchbooten oder mit einer Polyvinylchlorid (PVC)-hand seilwinde3. Die Schwierigkeit der zuverlässige Probenahme von Partikeln erschwert Fortschritte in unserem Verständnis von der chemischen Zusammensetzung der marine Partikel, vor allem für Spurenelemente. Als solche ist wichtigste Aussagen über den Gehalt an Spurenelementen im Phytoplankton von Kultur Studien9,10gekommen. Diese Anerkennung hat Meereswissenschaftler zum Erstellen von neuen Methoden für Partikel im Meer über den letzten dreißig Jahren11Studium motiviert.

Meeresforscher haben verschiedene Sampling-Techniken, einschließlich an Bord Filtration, in Situ Filtration verwendet und Sediment fallen11. Die Verarbeitung großer Mengen von Meerwasser unbelastete Proben sammeln kann schwierig sein, vor allem für Hochsee und tiefen Gewässern, in denen die Partikelkonzentrationen sehr niedrig sind (0,001 - 0,1 mg/L). Es ist auch notwendig, Filtern Sie große Mengen von Meerwasser, eine ausreichende Menge von Partikeln Spur Metallkonzentrationen messen zu erhalten. Einige Forscher haben die Größe-Fraktionierung-Methode verwendet, um Schwebeteilchen Untergang Partikel trennen. Partikelgröße, Porosität, Dichte und Form können jedoch alle Einfluss Partikel sinken Geschwindigkeiten. Sediment fallen sind nicht praktische Werkzeuge, Schwebstoffe, zu sammeln, da die zum Untergang Partikel vorgesehen sind. Daher ist es wichtig, Probenahme und Behandlungsmethoden zu entwickeln, die ausreichende Mengen an suspendierten Teilchen mit minimalen Verunreinigungen sammeln können. Daher ist Größe-Fraktionierung von in Situ Filtration noch ein viel versprechendes Instrument der Ozeanograph Probenahme Toolbox, da es wichtige Informationen über marine Partikel Dynamik offenbaren kann. Hier beschreiben wir eine erfolgreich erprobte Spur-Metall-clean, mehrschichtige Schwerkraft Filtration Probenahme Apparat, die große Mengen (120-240 L) behandeln kann Meerwasser an Bord in einem Arbeitsgang aus Polytetrafluorethylen (PTFE) beschichtet Probenahme Wasserflaschen in eine Multi-Flasche Probenahme Array. Dieser Apparat Probenahme verwendet säuregewaschen synthetischen Nylon Netze nacheinander und die Netze sind eingeschlossen in einem Polycarbonat-Container, Größe fraktioniert abgehängte Angelegenheit und Phytoplankton12,13, sanft zu sammeln 14,15 (Abbildung 1). Das Ziel dieser Arbeit ist es, ein besseres Werkzeug für die Untersuchung der Metall-Partikel-Verbände und ihre Reaktion Dynamik in marinen Lebensräume bieten, und zu einem besseren Verständnis über das Schicksal einer Vielzahl von Plankton, Partikeln und Spurenmetalle in diesen Umgebungen.

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Protocol

Das folgende Protokoll schließt die Arbeit mit schädlichen Chemikalien. Bitte lesen Sie sorgfältig die Sicherheitsdatenblätter (SDB) und befolgen Sie institutionellen Chemikaliensicherheit Richtlinien.

1. multi-Layer-Schwerkraft Filtration Sampler Vorbereitung

  1. Sampler-Reinigung
    1. Füllen Sie die Schläuche und Filtration Einheit mit 1 % (w/V) des anionischen Protease Enzym Reinigungslösung und legen Sie ihn für 24 h Flush den mehrschichtigen Schwerkraft Filtration Sampler mit doppelt destilliertem Wasser Umkehrosmose (RO-DDW) gründlich, dann füllen Sie ihn mit 0,1 % (V/V) Salzsäure (HCl, Reagenz Grade) und für 72 Stunden einweichen.
    2. Spülen Sie gründlich den mehrschichtigen Schwerkraft Filtration Sampler mit Umkehrosmose doppeltes destilliertem deionisiertes Wasser (RO-DD-DIW) drei-bis fünfmal, mindestens 20 Liter Zeit, und die Assemblage in Plastiktüten aufbewahren.
  2. Partikel-Container Reinigung/Probenvorbereitung
    1. Verwenden Sie Polyethylen niedriger Dichte (LDPE, 125 mL) oder fluorierten Ethylen-Propylen (FEP, 125 mL) Flaschen als Behälter für Partikel. Reinigen Sie die Flaschen durch Einweichen zuerst in alkalischen Reinigungsmittel (Mikro, 1 %), dann in 50 % (V/V) Salpetersäure (Druckaufschluss3, Reagenz Grad), dann 10 % (V/V) HCl Lösungen für mindestens 24, 48 und 24 h, beziehungsweise. Spülen Sie die Flaschen mit deionisiertes Wasser (RO-DD-DIW) zwischen den zwei Schritten einweichen.
    2. Spülen Sie nach einer abschließenden HCl Einweichen die Flaschen mit deionisiertes Wasser (RO-DD-DIW) gründlich und trocknen Sie die Flaschen in einem Reinraum oder Klasse-100 sauberen Werkbank.
      Legen die gereinigte Flasche auf der mehrschichtigen Schwerkraft-Filtration-Sampler oder Dichtung gereinigt Flaschen in PE-Beutel mit Reißverschluss und Doppel-Tasche sie für den Transport.
  3. Assemblage von mehrschichtigen Schwerkraft Filtration sampler
    1. Sechs 4 m lange chemisch beständigen thermoplastischen Elastomer-Rohre (Außen-ø von 0,635 cm) an die sechs Richtungen Buchten auf dem Sampler anschließen.
    2. Montieren Sie die drei verschiedenen Mesh Nylon Filter mit Polyethylen niedriger Dichte probenbehältern (125 mL LDPE) nacheinander in einem Reinraum (Bank) nach der Reinigung sind (siehe unten), mit den 10 µm Siebfilter positioniert auf der Außenseite der 63 µm-Siebfilter in der Mitte und den Siebfilter 153 µm auf der Innenseite. Für den Transport speichern Sie den mehrschichtigen Schwerkraft Filtration Sampler in zwei Schichten von Taschen aus Polyethylen (PE) zu, dann legen Sie sie in Polypropylen (PP)-Versandbehälter.

2. Probenahme

  1. Entnahme von Proben
    1. Haben Sie bei der Ankunft auf dem Gelände der Probenahme eine Person den mehrschichtigen Schwerkraft Filtration Sampler aus einem Container auf dem Deck des Forschungsschiffes entfernen und öffnen Sie den Beutel mit dem Sampler. Dann haben sie die PE-Handschuhe anziehen, verbinden Sie die sechs 4 m thermoplastische Elastomer Schläuche mit Wasser Zapfen von sechs 20 L PTFE-beschichtete Probenahme Flaschen auf dem erhöhten Multi-Flasche Probenahme-Array und führen das Meerwasser in diesem Filtrationseinheit. Das Meerwasser fließt durch die direktionalen Buchten, und Partikel/Plankton wird sanft durch die Netze getrennt/fraktioniert und LDPE-Flaschen, die auf der Basis der Netze gesichert sind in 125 mL zu begleichen.
    2. Nachdem das Meerwasser durch (in der Regel 120 L für Küsten Meerwasser und 240 L für offenen Ozeanwasser) geflossen ist, entfernen Sie jedes Netz in Reihenfolge (Erstens die 153 µm, dann die 63 µm und schließlich die 10 µm) in einem Klasse-100 sauberen Werkbank, dann Sprühen im Netz mit Trace-Metall-clean 0,4 µm f Iltered Meerwasser zu spülen alle Plankton stecken auf der inneren Oberfläche der Netze. Das Meerwasser mit konzentrierter Partikel/Plankton in 125 mL-Polyethylen-Flaschen zu sammeln.
    3. Schrauben Sie diese Flaschen aus den Netzen, und Filtern Sie die Lösungen mit konzentrierter Partikel/Plankton wieder durch eine Säure gewaschen Vakuumfiltration Vorrichtung mit vorab gewogen, säuregewaschen 47 mm 10 µm Porengröße Polycarbonat Filter unter niedrig-Vakuum Bedingungen (< 5 kPa).
    4. Um Partikel/Plankton kleiner als 10 µm zu sammeln, warten Sie mindestens 20 L Meerwasser zu durchfließen der Sampler, dann danach, zwei bis fünf Liter Wasser in den 5 L PE-Behälter sammeln und Filtern diese Probe Gewässer durch eine Säure gewaschen Vakuumfiltration-Vorrichtung mit vorgewogene, säuregewaschen, 47mm, 0,4 µm Pore Größe Polycarbonat Filter.
    5. Spülen Sie nach Vakuumfiltration die Probenahmefilter mit hochreinem Wasser DDW, das Entfernen von Meerwasser, Meersalz Beeinflussung bestimmen die trockene Gewichte der Partikel/Plankton zu minimieren. Halten Sie die Spülung, nur ein paar Milliliter beschädigen das fragile Plankton zu verhindern.
    6. Dann, nach dieser Spülung Schritt sorgfältig entfernen Sie den Filter aus der Vakuumfiltration, speichern Sie die Probenahmefilter in Säure gewaschen, vorgewogene Acryl Kunststoff Petrischalen und in wiederverschließbaren Plastiktüten versiegeln. Halten Sie die Taschen in Tiefkühltruhe an Bord-20 ° c bis zu seiner Rückkehr ins Land ansässige Labor für weitere Vorbehandlung und chemische Analyse von Proben.

3. Probe-Behandlung

  1. Frieren Sie ein, Trocknen und die Verdauung von Partikeln
    1. Setzen Sie die Filter mit Partikel-Proben in der Kollektor-Kammer der Gefriertrocknung Maschine, und die Maschine einschalten. Als die Maschinentemperatur-40 ° C erreicht, schalten Sie die Vakuumpumpe der Maschine und starten Sie die Gefriertrocknung Prozesse zu.
      Hinweis: Das Vakuumniveau stetig unter 0,12 mBar aufrechterhalten werden. Bitte lesen Sie die Bedienungsanleitung sorgfältig und befolgen Sie die Anweisungen des Herstellers für jeden Schritt.
    2. Nach 72 h die Gefriertrocknung Maschine ausschalten, entfernen Sie die getrockneten Filter und sie wiegen. Dann legen Sie getrocknete Beispielfilter in vorgewogene Perfluoroalkoxy Alkan (PFA) Schiffe (60 mL Fassungsvermögen), und fügen Sie 3 mL konzentrierter Salpetersäure ultrapure in die Schiffe2,3,6,7.
    3. Ziehen Sie die Gefäße mit einem Drehmomentschlüssel auf ein konstantes Drehmoment von 2,5 kg-m, und legen Sie die Schiffe in einem konventionellen Ofen bei 130 ° C für 12 h für die erste Sequenz der Verdauung. Nach dem Abkühlen die Schiffe aus dem Ofen nehmen, die Gefäße zu öffnen, und 2 mL ultrapure Flusssäure in die Schiffe2,3,6,7.
    4. Ziehen Sie die Gefäße mit einem Drehmoment von 2,5 kg-m, und legen Sie die Schiffe in einem konventionellen Ofen bei 130 ° C für 12 h, welches die zweite Sequenz der Verdauung ist. Nach dem Abkühlen, öffnen Sie die Gefäße und 16 mL 4,5 % Ultrareines Borsäurelösung in die Schiffe2,3,6,7.
    5. Ziehen Sie die Schiffe, die ein konstantes Drehmoment von 2,5 kg-m, und verdauen Sie die Proben im Backofen bei 130 ° C für 12 h für die endgültige Verdauung-Sequenz zu. Nach dem Abkühlen wiegen Sie jedes Schiff und bestimmen Sie die endgültige Masse und spezifische Masse der jeweiligen verdaute Lösung um eine endgültige Digestivum Volumen zu erzielen.
      Hinweis: Spezifische Masse wird bestimmt durch die Messung des Gewichts der genau 1,00 mL Digestivum.
    6. Gießen Sie vorsichtig die Digestivum in 30 mL Säure gereinigte PE-Flasche für weitere Metall Spurenanalyse.
  2. Spurenanalyse Metall
    1. Bestimmen Sie die Ablaufverfolgung Metallkonzentrationen (Cd, Cu, Fe, Mn, Ni und Al) in verdauliche Lösungen von Partikeln mit einem Graphit Ofen Atomabsorption Spektrometer (GF-AAS)6.
    2. Als ein Genauigkeitstest verwenden zertifiziertes Referenzmaterial (CRM), wie z. B. Meeresablagerungen Referenzmaterialien vom National Research Council of Canada, Mündungs Sediment standard Referenzmaterial vom National Institute of Standards and Technology von der USA und Plankton Referenzmaterial aus Wissenschaft und des Wissens Dienst der Europäischen Kommission. Der Prozess gibt 95 bis 107 % Rückgewinnung von zertifizierten Wert für die Spurenmetalle in das CRM zur Verfügung gestellt.

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Representative Results

Mit der Entwicklung der modernen Ozeanographie, es ist jetzt eine gängige Praxis, "saubere Techniken" verwenden, um genaue Spur Metallkonzentrationen in marine Partikel oder Plankton zu erhalten. Da die meisten Partikel in natürlichen Gewässern in den niedrigen mg/L µg/L-Bereich sind, ist die Behandlung von großen Mengen von Meerwasser notwendig, geochemische und biologischen Effekte von spurenmetallen auf verschiedene Partikel in ambient Umgebungen zu untersuchen. Mit dem Einsatz von sauber, mehrlagige Schwerkraft Filtration ("CATNET") Stichprobenverfahren (Abbildung 1) fand man guter Übereinstimmung zwischen Partikelkonzentrationen anhand konventioneller Druck Dead-End Filtration und diejenigen von CATNET gesammelt, verwenden ein DataSet Küsten Meerwasser von der Westküste aus Taiwan (Abbildung 2) abgetastet. Mehr als 90 % dieser Teilchen waren klein (0,4 - 10 µm). Wenn im Vergleich ambient ungefiltertes Meerwasser, CATNET Meerwasser gefiltert (< 10 µm), die Verwendung dieses Protokolls produziert sehr geringe Zuschnitte und keine merkliche Kontamination (Tabelle 1). Für Partikel gesammelt in einer Tiefe von Chlorophyll-a Maximum an das Südchinesische Meer zwischen 26.03.2002 und 28.03.2002, die meisten Partikel (> 80 %) lebte in kleinere (0,4 - 10 µm) Teilchen. Größere Partikel, dh, Zooplankton (> 153 µm), zeigte deutlich die tagaktive vertikale Migrationsmuster, während die Konzentrationen von kleineren Partikeln nahezu unverändert (Abbildung 3 blieb). Das live Zooplankton beobachtet in den Sampling-Flaschen angegeben die Sanftheit der Filtration Prozess10. In das Oberflächenwasser der Taiwan-Straße dienen die analytische Nasschemie und Sampling-Techniken, die hier beschriebenen marine Partikel Distributionen und Kompositionen zu messen. Das Histogramm der durchschnittliche Metallkonzentrationen in die suspendierten Teilchen (µg/g) unter den Fraktionen unterschiedlicher Größe gesammelt abwechslungsreiche dramatisch überspannt mehr als fünf Größenordnungen. Die Konzentrationen sehr unterschiedlich in verschiedenen Partikelgruppen Größe: 0,4 - 10-63 µm, 10 µm, 63-153 µm und > 153 µm. In der Regel die meisten Partikel wurden in Fe und Al bereichert, und die Konzentrationen verringert sich mit zunehmender Größe, mit Ausnahme von Cd, die mit zunehmender Größe, möglicherweise verursacht durch einen Bio-Konzentration Prozess3,10, 14 (Abbildung 4).

Figure 1
Abbildung 1: Ultra-clean mehrschichtigen Schwerkraft Filtration Sampler für das Sammeln von Größe fraktioniert Meeresplankton und suspendiert Partikel (CATNET). Diese Partikel Sammlung Sampler besteht aus Polycarbonat und Polypropylen Materialien und ausgestattet ist, in der Reihenfolge, mit 153 µm, 63 µm und 10 µm veränderbar Nylon Netze. Wasserproben stammen aus sechs 20-Liter-PTFE-beschichtete Probenahme Flaschen auf dem erhöhten Multi-Flasche Probenahme-Array an den Zufluss Enden des Apparates Größe fraktioniert Filtration über säuregewaschen thermoplastische Elastomer Schläuche angeschlossen. Dieses Filtersystem verhindert effektiv möglichen Kontamination während der Proben an Bord, und Partikel werden sanft in verschiedenen Größen nacheinander durch die Netze, versinken die LDPE-Flaschen am unteren Rand jedes Netz getrennt. Die "CATNET" wurde von der Co-Autor genannt Miss Wen-Huei Lee für eine kurze Abkürzung von "Dr. Cat Ultra-clean multi-Layer Kollektion net", so dass Benutzer die Vorrichtung und Filtration Methode in Bezug auf die Designer/Erfinder, Dr. Liang-Säge unterscheiden könnte "CAT" Wen. Dieses Gerät wurde patentiert bis zum 9. Maith, 2015-12. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 2
Abbildung 2: Vergleich der insgesamt abgehängte Materialien (TSM) gesammelt von Küstengewässern durch zwei unabhängige Filtrationsverfahren. Küstengewässer Proben in einer Tiefe von 5 Metern wurden an Bord an der R/V Ocean Research II im April 2007 (OR2-1432, 2007/4/21-4/23) gewonnen. (ein) Sampling-Stationen, (b) schematische Darstellung der Stichprobenverfahren, (c) verschiedene Partikelgröße Konzentrationen von jeder Probe Stätten von CATNET Methode bestimmt und (d) Vergleich der Partikel-Konzentration bestimmt durch konventionelle Filtrationsmethode (TSM) und CATNET Methode (TTSM). Die Fehlerbalken sind die Standardabweichungen der duplizierten Proben gemessen an der TSM. Sehr gutes Abkommen wurde zwischen suspendierten Teilchen Konzentrationen bestimmt mit den zwei unabhängigen Methoden in separaten Aliquote der gleichen Proben gefunden. Gab es 22 Probenahmestellen und zwei Proben für jede Site wurden gesammelt und direkt durch die häufig verwendete, unter Druck stehende Dead-End Filtration Gerät7,11,16 (insgesamt abgehängte Materialien, "TSM", gefiltert Teilchen Gewicht größer als 0,4 µm), und eine weitere Probe wurde von CATNET gefolgt von Niederdruck Vakuumfiltration gesammelt (Gesamtbetrag der suspendierten Materialien, "TTSM", die Summe der Gewichte von 0,4 - 10, 10-63, 63-153, und > 153 µm Partikel; nur einmal durchgeführt, aufgrund Betriebszeit). Ein großen Konzentrationsbereich impliziert, dass die Techniken für Partikel Studien in unterschiedlichen Umgebungen eignen wo Konzentrationen deutliche Unterschiede zeigen. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Analyten Feld doppelt deionisiertes Wasser Rohlinge Umgebende Meerwasser (< 0,4 µm) CATNET Filtrat Meerwasser (< 10 µm)
Nitrit (µM) n.d. 0,23 0,22
Nitrat (µM) n.d. 1.4 1,45
Ammonium (µM) n.d. 0.081 0,088
Phosphat (µM) n.d. 0,16 0,15
Silikat (µM) n.d. 4.01 4.05
DOC (ΜM) n.d. 83 81
Cu (nM) 0,08 0.91 0.85
Fe (nM) 0,005 0,34 0,35
NI (nM) 0,01 2.45 2.35

Tabelle 1: Nährstoff- und Spur Metallkonzentrationen im Verfahren leer Wasser, umgebende Meerwasser und CATNET gefilterte Wasser. Illustration der Nährstoff- and -Trace Metallkonzentrationen im 3 Feld Leerzeichen (hochreinem Wasser als Proben im Bereich behandelt) und umgebende Wasser (115˚34'E, 18˚15 ' n; 80 Meter Tiefe) vor und nach der CATNET Filtration, die anzeigen, der Wirksamkeit der die beschriebene Protokoll. Es gab keine Anzeichen für erhöhte Konzentrationen durch Gefangenschaft Stress Auswirkungen (unnatürlich Ausscheidung wegen Kollision, unnatürlichen Lichteinfall, Temperaturschock, kräftig mischen, Zelle Bruch, etc.) oder Kontamination (Spurenmetalle in Waschungen und Sammlung Flaschen, Sammlung Getriebe, Armaturen und Drähte, Kunststoffverschlüsse, etc.). Low-Feld Leerzeichen wurden auch erreicht. Nicht nachweisbar: n.d.

Figure 3
Abbildung 3: zeitliche Variationen von (a) Chlorophyll-Fluoreszenz in der euphotischen Zone und (b) unterschiedlicher Größe Partikel gesammelt in einer Tiefe von bis zu Chlorophyll-a. Proben wurden an Bord bei der R/V Ocean Research ich im März 2002 (OR1-639, 2002/3/21-3/30)13. Die gestrichelten Linien mit Dreiecken in (einem) zeigen die CTD niedergeschlagen und hydrographischen Daten Abrufzeiten; die solide Dreiecke bezeichnen die Abtastzeit für Partikel in einer Tiefe von maximal Chlorophyll für CATNET Bereitstellungen. Während einige kleinere Partikel fast unverändert, das Zooplankton-Konzentrationen (> 153 µm) nächtliche vertikale Migrationsmuster wurde deutlich. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

Figure 4
Abbildung 4: Vergleich der durchschnittlichen Metallkonzentrationen in den getrockneten Partikel (µg/g) unter den verschiedenen Größen ausgesetzt. (ein) Proben wurden an Bord an der R/V Ocean Research II während des Sommers von 2007 (OR2-1444, 2007/5/31-6/6) gewonnen. (b) Durchschnitt Metallkonzentrationen mit Standardabweichungen von der getrockneten Partikel (µg/g) für alle 35 Proben unter den verschiedenen Größen ausgesetzt. Insgesamt variiert die Trace-Metall-Kompositionen dramatisch überspannt mehr als fünf Größenordnungen. Die Ablaufverfolgung Metallkonzentrationen auch erheblichen Schwankungen der unterschiedlich große Partikel gesammelt (0,4 - 10, 10-63, 63-153, und > 153 µm) in den Oberflächengewässern der Taiwan-Straße; in der Regel die Konzentrationen sank mit zunehmender Größe, mit Ausnahme von CD. Bitte klicken Sie hier für eine größere Version dieser Figur.

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Discussion

Erhalten zuverlässige Spur Metallkonzentrationen von Plankton und Schwebeteilchen in natürlichen Gewässern, die in der Regel in sehr geringen Konzentrationen vorhanden sind, erfordert große Sorgfalt bei der Probenentnahme, Verarbeitung, Vorbehandlungen und Analyse mit dem Ziel Verringerung der Kontamination. Daher die Verfahren zu entwerfen und bereiten Probenahme Gang, Probenbehälter und Materialien zur Erhebung und prozessproben sind alle wichtigen Schritte in Richtung qualitativ hochwertiger Daten für Spurenmetalle in marinen Lebensräume zu erhalten. Mit dem Fortschritt der neuen Partikel sammeln Methoden in den letzten Jahrzehnten ist unser Wissen über Partikel Dynamik sowie Spurenelement Biogeochemie auch erweitern. In diesem Papier haben wir eine sequenzielle Größe Fraktionierung Technik gezeigt, die verwendet werden können, zur Untersuchung der Verteilung und Zusammensetzung der marinen Plankton/Partikel. In den Hoheitsgewässern untersuchten wir, Spur-Metall Kompositionen variiert erheblich in Partikel mit unterschiedlicher Größe und Herkunft, über mehr als fünf Größenordnungen. In der Regel die meisten kleinen Partikel (0,4 - 10 µm) wurden angereichert mit Spurenelementen wie Fe und Al, und die Konzentration verringert sich mit zunehmender Größe3,10,14. Im Vergleich mit konventionellen Dead-End Filtration, zeigten die Ergebnisse der gesamten Partikelkonzentrationen in küstennahen Meere, die unter Verwendung des genannten Protokolls ergab guten Übereinstimmung.

Das hier beschriebene Protokoll kann leicht Sammlung in verschiedene Arten von marinen Lebensräume, Flussmündungen und Küstengewässer, Seen oder offene Ozeane angewendet werden. Probenvolumen kann eingestellt werden, wenn mehr oder weniger Mengen an Partikeln erforderlich sind. In sehr trüben Wassern Proben sollten noch sauber gesammelt und großer Sorgfalt muss genommen werden, um alle restpartikel Einhaltung Nylonnetz vor der Verarbeitung der nächsten Wasserprobe zu entfernen. Die Reinigung und Vorkonditionierung Schritte und das Bewusstsein der "Spur-Metall sauber Stichprobenverfahren" sind entscheidend für zufrieden stellende Massenbilanz und konstant gute Ergebnisse. Diese Arbeit zeigt, dass die Bestimmung der Spur Metall Verteilung im Meeresplankton und Schwebeteilchen erfordert "saubere Techniken", die Probenahme und Trennung gehören, und dieses Gerät und die damit verbundene Verarbeitung liefert bessere Ergebnisse.

Das Spektrum der großvolumigen Meerwasser für die dieses Protokolls anwendbar ist impliziert, dass Untersuchungen von Partikel-Verteilungen und Verhalten in verschiedenen marinen Umgebungen auch effektiv durchgeführt werden können. Sammlung von Teilchen in diskrete Proben gefolgt chemische Charakterisierung hat noch räumliche und zeitliche Beschränkungen, die potenziell Bias in den Interpretationen aufgrund einer möglicherweise unvollständig Konto des Feldes Partikel einführen. Jedoch durch Vergleich der Ergebnisse der verschiedenen Teilchen Erhebungsmethoden, wir können weiter erweitern das Spektrum des Partikel/Plankton-Forschung durch Angabe der Reaktionen und Prozesse für die verschiedenen Größen der Partikel und die Bestimmung ihrer entsprechenden biogeochemischen Dynamik. Die kontinuierliche Forschung auf Partikel/Plankton wird Aufschluss über ihre Rollen in den Ozean.

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Disclosures

Der Co-Autor ist Herr Alan Chuang patent Mitinhaber und Geschäftsführer der Firma (Sino Instruments Co., Ltd.), die dieser Sammlung Apparat für interessierte Nutzer hergestellt. Das Patent endete im Mai 9th, 2015-12.

Acknowledgments

Die Autoren danken Miss Pi-Fen Lin, Herr Wei-Lung Tseng, Miss Pei-Hsuan Lin und Dr. Jia-Lu Chuan für ihre Unterstützung während der Bereich Probenahme und Laboranalyse für die praktische Entwicklung und Anwendung des "CATNET." Die Unterstützung der Besatzung und der Techniker an Bord des Forschungsschiffs Ocean Research-ich und Ocean Research-II während der Probenahme Expeditionen wird sehr geschätzt. Diese Arbeit wurde teilweise von Taiwan Ministry of Science unterstützt und Technologie gewährt 91-2611-M-002-007, 95-2611-M-002-009, 96-2611-M-002-004, 97-3114-M-002-006, 104-2611-M-002-019. Dieses Manuskript wird in Erinnerung an Miss Wen-Huei Lee für ihre immense Hingabe und Beitrag zur marine Forschungen in Taiwan geschrieben.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
thermoplastic elastomer (C-Flex) Tubings Cole Palmer EW-06424-67 O.D. 0.635 cm, Opaque White 1/8"ID x 1/4"OD, 25 ft/pack
LDPE Bottle (Nalgene) ThermoFisher Scientific 2103-0004 125 mL, Nalgene Wide-Mouth LDPE Bottles with Closure
anionic protease enzyme detergent detergent (Tergazyme) Alconox 1104-1 1×4 lb box (1.8 kg)
Hydrochloric Acid Sigma-Aldrich 258148 Reagent grade
Nitric acid Sigma-Aldrich 695025 Reagent grade
alkaline detergnet (Micro) Cole Palmer EW-99999-14 Micro-90 Cleaning Solution
polycarbonate filter, 47 mm, 0.4 µm Sigma-Aldrich WHA111107 Whatman Nuclepore Track-Etched Membranes, diam. 47 mm, pore size 0.4 μm, polycarbonate
polycarbonate filter, 47 mm, 10 µm Sigma-Aldrich WHA111115 Whatman Nuclepore Track-Etched Membranes, diam. 47 mm, pore size 10 μm, polycarbonate
PFA vessel, 60 ml capacity Savillex 300-060-03 60 mL Digestion Vessel, Flat Interior, Flat Exterior, Buttress Threaded Top
Nitric acid, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Nitric Acid
HF, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Hydrofluoric Acid
Boric acid, ultrapure Seastar Chemicals N/A BASELINE Hydrobromic Acid
polyethylene (PE) gloves Safty Zone GDPL-MD-5 Clear Powder Free Polyethylene Gloves
Multiple layer filtering and collecting device Sino Instrumnets Co. Ltd not available Multiple layer filtering and collecting device, CATNET
10 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 10 Nitex - Standard Widths (40 - 44 inches)
60 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 60 Nitex - Standard Widths (40 - 44 inches)
150 um Nylon filters, Nitex Dynamic Aqua-Supply Ltd. NTX 150 Nitex - Standard Widths (40 - 44 inches)
torque wrench Halfords 200238 Halfords Professional Torque Wrench 8-60Nm
multi-bottle sampling array, Rosette General Oceanics Model 1018 Rosette Sampler
PTFE-coated sampling bottles, GO-Flo General Oceanics 108020T GO-Flo water sampler teflon coated
Marine sediment reference materials National Research Council Canada MESS-3
Estuarine sediment standard reference material National Institute of Standards and Technology 1646a
Plankton reference material The European Commission's science and knowledge service CRM414

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

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Umweltwissenschaften Ausgabe 134 Ultra-Clean Partikel Plankton Filtration Plankton-Net Probe-Sammlung
Eine Ultra-clean Multilayer Vorrichtung zum Sammeln von Größe fraktioniert Meeresplankton und Schwebeteilchen
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Wen, L. S., Lee, C. P., Lee, W. H.,More

Wen, L. S., Lee, C. P., Lee, W. H., Chuang, A. An Ultra-clean Multilayer Apparatus for Collecting Size Fractionated Marine Plankton and Suspended Particles. J. Vis. Exp. (134), e56811, doi:10.3791/56811 (2018).

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