Summary
משלוח סמים מקומי נקראות בלוטות הוא עניין בביולוגיה בלוטת הרוק ההבנה ועל ההתפתחות של הריפוי. אנו מציגים פרוטוקול הזרקת retroductal מעודכן ומפורט, שנועדו לשפר את המסירה ודיוק הפארמצבטית ניסיוני. היישום שהוצגו במסמך זה הוא המסירה של חלקיקים פולימרים.
Abstract
שתי מטרות משותפות של בלוטת הרוק הרפוי הם מניעה וריפוי של תפקוד לקוי של רקמות בעקבות או אוטואימוניות או פציעה של קרינה. מאת מקומי אספקת תרכובות ביו בלוטות הרוק, ריכוזים רקמות גדול יותר ניתן להשיג בבטחה לעומת ניהול מערכתי. יתר על כן, את רקמת המטרה תופעות של הבלוטות במיוחד הצטברות של חומר יכול להיות מופחת באופן דרמטי. בהקשר זה, הזרקת retroductal היא שיטה בשימוש נרחב עבור חוקרים בביולוגיה בלוטת הרוק וגם פתופסיולוגיה. Retroductal ניהול של גורמי גדילה, ראשי תאים, וקטורים adenoviral ותרופות מולקולה קטנה הוכח כדי לתמוך בלוטת פונקציה בסביבה של פציעה. אנחנו בעבר הראו את היעילות של אסטרטגיה ננו-חלקיק-siRNA retroductally מוזרק כדי לשמור על תפקוד בלוטת בעקבות הקרנה. כאן, שיטה יעילה מאוד לשחזור כדי לנהל ננו את בלוטת submandibular מאתר דרך צינור וורטון. זה מפורט (איור 1). אנו מתארים גישה לחלל הפה, המתאר את השלבים הנחוצים להפיכת צינור cannulate וורטון, עם תצפיות נוספות הגשה בדיקות איכות לאורך כל ההליך.
Introduction
תפקוד לקוי של בלוטת הרוק יש חבלות מסיבות רבות, כולל תסמונת סיוגרן, אובדן מתווכת אימונית של רקמה תפקודית הפרשה, קרינה הנגרמת hyposalivation (ריה), sequella משותפת של ראש וצוואר לסרטן הקרנות1. אובדן התפקוד הרוק עקב תנאי או predisposes יחידים זיהום אוראלי ומערכתית, עששת, בעיות בתפקוד במערכת העיכול ולשלם, ליקויי דיבור ודיכאון1,2,3. כתוצאה מכך, איכות החיים באופן משמעותי סובל, עם התערבויות מוגבל ל- palliation של תסמינים יותר מאשר תרופה4. כדי לבדוק טיפולים ויוו, זה עניין כדי לנהל תרכובות ביו ישירות את בלוטת הרוק.
הזרקת Retroductal היא שיטה יקר להעביר תרכובות ביו ישירות אל בלוטות הרוק ולבדוק את היעילות, מחלה, פציעה, או תחת הרקמות הומאוסטזיס. בלוטות הרוק הגדולות שלוש הן את parotid (עמוד), submandibular (SMG) ו את sublingual (. סיג), כל אילו ריקה לתוך חלל הפה דרך צינוריות excretory. האנטומיה של מאתר SMG מאפשרת גישה ישירה דרך תעלות של צינור של וורטון, ממוקם בקומה של הפה מתחת הלשון5. בעקבות את תעלות, תרופות solvated יכול להינתן ישירות אל SMG. לאחר הלידה, retroductal, דיפוזיה במיוחד הבלוטות הוא מוגבל על ידי הקפסולה הרקמה שמסביב המסדירה את חילופי חומר עם סביב מבנים6. את SMG וסרט הדבקה שלו בנויות באופן דומה בבני אדם, מתבצעת באופן שגרתי במהלך SMG ניתוח ו sialoendoscopy7. בבני אדם ועכברים, עמוד נגיש גם דרך צינור של Stensen buccal רירית8.
דגמים מאתר של ריה, SMG retroductal הזרקת שימש כדי לספק הרפוי לרבות גורמי גדילה, ראשי תאים, וקטורים adenoviral, ציטוקינים נוגדי חמצון תרכובות לווסת את התגובה התאית לפגיעה, ולהפחית את התוצאה רקמת נזק5,9,10,11,12,13,14,15,16. ההצלחה קליניים הבולטים של הזרקת retroductal הוא המנהל של וקטור adenoviral להפנות את הביטוי של תעלת מים (Aquaporin 1; AQP1) בקרב מטופלים לאחר הקרינה עבור סרטן הראש והצוואר17.
בעבר, יש שפותחה ואנו הראו את היעילות של מערכת ננו-חלקיק פולימריים-siRNA retroductally מוזרק להגן על תפקוד בלוטת הרוק ריה11,18,19,20. כהרחבה של העבודה האחרונה שלנו, כאן, נדגים את הפרוטוקול שלנו להזרקה SMG retroductal באמצעות שכותרתו fluorescently ננו-חלקיק (NP) מסוגל לטעון ואספקה אחרת מסיסות סמים21,22, 23.
יש לנו לסנתז את NP מ קופולימר diblock המורכב פוליפוני (styrene-alt-maleic anhydride)-b-poly(styrene) (PSMA) באמצעות תוספת הפיך שרשרת פיצול (רפסודה) פלמור, כפי שתואר לעיל21. באמצעות החלפת הממס, פולימרים אלה באופן ספונטני בעצמם למבנים NP מיצלה עם הידרופובי פנים ו הידרופילית החיצוני21. NPs מסומנות עם טקסס-אדום fluorophore להתיר את האימות של NP משלוח לתוך הבלוטות מבלי להתפשר על החיה. חיים הדמיה בעלי חיים, SMG אימונוהיסטוכימיה מוצג ב 1 h ו 1 יום בעקבות הזריקה.
This עודכן, תעלות לשחזור פרוטוקול צריך לאפשר לאחרים להשיג זריקה retroductal. אנו מצפים כי טכניקה זו מעודן יהיה קריטי עבור מחקרים ויוו ופיתוח טיפולית24,25.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל ויוו ההליכים המתוארים להלן אושרו על ידי ועדת האוניברסיטה חיה משאבים ב אוניברסיטת רוצ'סטר, רוצ'סטר, ניו יורק.
1. הכנה
- באמצעות צינורות קטטר תוך-גולגולתי 32G עם שיבוץ תיל, חותכים 3 ס מ של הצנרת כדי ליצור קצה משופע, כ- 45° עד לציר הארוך. לאשר החוט הוא לפחות 1 ס מ לאורך צינור יותר.
- לטעון µL 50 PSMA nanoparticle פתרון (איור 1), או חומר אחר זריקה, לתוך מזרק המילטון. כדי להקטין את ההסתברות של בארוטראומה במהלך ההזרקה, לצרף את הצנרור קטטר, עם stylet הסיר, כדי המזרק ובכבד נפח מת.
- לבדוק את הפתרון הזרקת כדי להבטיח ש-nanoparticle באופן מלא solvated כדי למנוע שיבוש ductal בעקבות המינהל.
- להכין פתרון אטרופין-0.1 מ"ג/מ"ל.
הערה: מכיוון אטרופין הוא רגיש אור ופוגם לאורך זמן, פתרון זה צריך להיות את היום של הזרקת, מוגן מפני אור עד מנוהל.
2. גישה והצגה של נקודת כניסה Ductal
- שוקלים C57/BL6 עכברים באמצעות איזון האנליטי.
- באמצעות מזרק 0.5 mL עם 29G x ½" מחט, עזים ומתנגד עכברים עם פתרון סטרילי מלוחים intraperitoneally מוזרק של 100 מ"ג/ק"ג קטמין ו- 10 מ"ג/ק"ג חריגות השירותים הווטרינריים. המשך לשלב הבא כאשר העכבר אינו מגיב לגירויים, אשר בדרך כלל מתרחשת בתוך 5-10 דקות לאחר ההזרקה.
הערה: הליך זה יכול גם להתבצע תחת איזופלוריין, אך ידרוש קונוס האף מותאם אישית המאפשר גישה אל חלל הפה. - למניעת יובש במהלך ההליך, להחיל סיכה כדי העיניים והניחו העכבר במצב של שכיבה על שלב מותאם אישית.
הערה: כדי לשמור על תנאים מתאימים לניתוח אינטרה-אוראלי, כלים צריך להיות מחוטא או לעקר לפני כל שימוש. - פתח את חלל הפה נאבטח את החותכות בלסת העליונה מעל קרן מתכת, והשתמש גומייה כדי להחיל המתח כלפי מטה מאחורי החותכות mandibular (איור 2 א).
- יישר את העכבר מתחת למיקרוסקופ ויבתר כזה כי הבסיס של הלסת הוא מדמיין.
- כדי להרחיב את הפתח, השתמש מנהג, מעוקל המדחק פלדה כדי להחיל את המתח באופן דו-צדדי על רירית buccal.
- כדי להמחיש את submandibular ואדומות סטיגמטה והיו שלמים, והרם בעדינות את הלשון מן הרצפה של הפה באמצעות מלקחיים בוטה.
הערה: ואדומות סטיגמטה והיו שלמים תופיע שתי בליטות חיוור מתחת ללשון (איור 2B). - כדי להקל על ויזואליזציה של מניפולציה נוספת בתוך חלל הפה, במקום כותנה בין הלשון buccal רירית.
3. ductal תעלות והמיקום קו
- שימוש בסדר, מלקחיים מעוקל, לאחוז אבובים קטטר עם שיבוץ חוט. עבור בקרת ידניים האופטימלי במהלך תעלות, יישר את הצנרור עם העקמומיות של המלקחיים (איור 3 א).
- באמצעות המיקרוסקופ ויבתר, להזיז את המלקחיים חוט לתוך שדה הראייה.
הערה: החוט צריך להיות מהעורקים הצנרת. - לחץ על בעדינות לתוך הבסיס של אחד papilla submandibular באמצעות הכבל הזחה לייצר קטנים שטחיים, הרירית ניקוב (0.076 מ"מ קוטר) שיאפשרו כניסה מאוחרת יותר של הצנרת קטטר (0.25 מ"מ קוטר). אם הוא נתקל בהתנגדות, לחתוך טריים משופע טיפים על אבובים והן שיבוץ חוט עם מספריים ויבתר חדות.
- בעקבות הכניסה, למשוך את stylet ואשר, באמצעות המיקרוסקופ ויבתר, הנוכחות של רוק החדירה. להימנע התנועה כוחני או פתאומי (גמילה או ההכנסה) של stylet העלול לגרום לדימום או לסכן את שלמות ductal.
- . משכי את stylet בתוך הצנרת (איור 3B).
- כדי להבטיח כי הזרקת אבובים יתאימו לתוך צינור וורטון פתיחת, הכנס אבובים המכיל את stylet כמדריך נוקשה לתוך הניקוב שבוצעה בעבר (איור 2 C).
הערה: אם לא לבצע במהירות, נפיחות מקומית עשויה למנוע הכניסה מחדש. - כדי למנוע לחץ אחורי של חסימה ductal ממושך, למשוך את הצנרור. בדוק כדי לוודא כי פתיחה, גלוי תחת מיקרוסקופ, ניתן לראות את papilla נקראות. אם דימום גלוי מתרחשת, להסיר את stylet, reattempt מ שלב 3.2 על submandibular מנוגדות ואדומות סטיגמטה והיו שלמים.
- מבלי להזיז את העכבר, לנהל הזרקת בקרום הבטן של 1 מ"ג/ק"ג אטרופין פתרון, להקטנת ריור במהלך ההליך. המתן 5-10 דקות.
- לאחוז בקצה של הצנרת מזרק, והכנס לתוך כגדולים באמצעות המיקרוסקופ ויבתר (איור 3C). אם הוא נתקל בהתנגדות, חותכים קצה משופע טריים אבובים, יכפיל.
- לאחר הצנרת במקום בתוך papilla submandibular, באיטיות, 3-5 מ מ לתוך התעלה. שחרור הצנרת של המלקחיים.
- כדי לשפר את החותם בין הצנרת של papilla submandibular, יבשים הממשק ב- סופג בעדינות עם גזה עבור 1 דקות.
- בדוק כדי לוודא המיקום של הצנרת לא השתנה במהלך הייבוש.
4. הזרקה
- מזריקים חומר בקצב של 10 µL לדקה בדוק כדי לאשר העכבר נשאר מסומם לא מראה סימנים של מצוקה (איור דו-ממדי).
הערה: זריקות של µL 15-50 נסבלות היטב. הזרקה של אחסון גדולים יותר יכולים לגרום בארוטראומה. - בעקבות הזריקה, לשמור על מזרק לחץ על 5 דקות כדי לשפר את השמירה של חומר בתוך צינור וורטון SMG (איור 4). בדוק את papilla submandibular מעת לעת על מנת להבטיח כי צינורות לא תצא ductal כגדולים.
- בעזרת מלקחיים בסדר, לאחוז ולסגת בעדינות לאורך צינור submandibular ואדומות סטיגמטה והיו שלמים.
הערה: זה נורמלי להתבונן קצת יציאה נוזלים מן ואדומות סטיגמטה והיו שלמים. - הסר את המדחק וכותנה חלל הפה לפני הזזת העכבר מן הבמה.
הערה: החיה לא אמורים להישאר ללא השגחה עד זה שהכרתו מספיק כדי לשמור על recumbency בחזה ובצלעות. יתר על כן, ודא כי העכבר לא שוכן עם אחרים עכברים עד החלים לחלוטין.
5. אימות וניתוח
הערה: יישום ויוו מערכת הדמיה (IVIS) ניתן להשתמש כדי להעריך את השמירה של חלקיקים fluorescently שכותרתו לאחר ההזרקה (כפי שמוצג h 1 ו- 24 שעות לאחר ההזרקה באיור5).
- כדאי להמחיש ניאון האות בתוך SMG דרך העור, הסר את הפרווה הגחון המכסים את SMGs גילוח או באמצעות דפילציה כימי.
הערה: בעקבות המתת חסד, SMG רקמות ניתן גם לקצור קבוע (לילה ב- 4% paraformaldehyde), צבעונית באמצעות אימונוהיסטוכימיה לאשר ההתמדה של NP fluorescently שכותרתו יום אחד לאחר ההזרקה (איור 6).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
הזרקת Retroductal ניתן לנהל NPs SMG מאתר (איור 1). כאן, אנו מספקים 50 µg PSMA של NPs המסומנת אדום טקסס fluorophore.
השמה נכונה של העכבר מאפשר גישה נתיישב והדמיה של רצפת הפה (איור 2 א-ב). ואדומות סטיגמטה והיו שלמים submandibular מזוהים כפי בליטות הבשרי שני מתחת ללשון. בעקבות תעלות (איור 2C) הזרקת אטרופין, אבובים מזרק ניתן להציב לתוך ואדומות סטיגמטה והיו שלמים submandibular (איור דו-ממדי).
כדי להקל את תעלות, נקב קטן. ב- papilla submandibular הוא קודם עשה שימוש stylet את החוט בתוך הצנרת קטטר (איור 3 א). ברגע זה נעשה, stylet צריך להיות נסוגים בתוך הצנרת לשרת כמדריך נוקשה בזמן פתח גדול עשוי (איור 3B). Stylet יש קוטר של 0.076 מ מ, בעוד הצנרת קטטר יש של הקוטר החיצוני של 0.25 מ מ. בעקבות הקמתה של פתיחה גדולה זו, הקטטר טעון מראש אבובים, המצורפת המזרק הזרקה, יכול אז להיות מונחה לתוך כגדולים ductal (איור 3C).
בעקבות הזריקה, מומלץ כי המזרק להיות משותק ומתוחזק הזרקה בלחץ. אם הלחץ אינו מוחל, משלוח יהיה מוצלח, אמנם עם פחות הפארמצבטית ויעילות. זה מומחש הזרקת 50 µL של 1% טולדין כחול צבע דו צדדיים והתבוננות מכתים חלשה בבלוטת ללא לחץ מתוחזק בעקבות הזריקה (איור 4).
כדי לוודא משלוח NP, IVIS יכול לשמש כדי לזהות אות ניאון בתוך העכבר, אשר הוא lateralized למינהל פוסט 1 h אזור מוזרק (איור 5). גישה זו מאפשרת האישור מבלי המתות חסד העכבר והמשיך יכול להיות longitudinally עד האות הוא כבר לא לזיהוי26,27.
כדי לאשר התמדה NP הזריקה הבאה h SMG 24, בלוטות יכול להיות למחלקה, להצגה על-ידי הדמיה פלורסנט. Aqp5 ו- Krt5 IHC לסמן ותאי הפרשה ductal של SMG, בהתאמה, להראות NPs בתאים שני (איור 6).
איור 1 . ואחר כך נסיגה הזרקת סכמטי. בעקבות תעלות ductal מזרק השמה, µL 50 של 1 מ"ג/מ"ל פולימריים NP פתרון מוזרק SMG. שידור נציג אלקטרון micrograph (TEM) מראה monodisperse (polydispersity אינדקס = 0.2) NP האוכלוסייה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2 . נסיגה הזרקת צעדים. (א) לגשת חלל הפה על-ידי הפרדת את בלסת העליונה והתחתונה. (B) דמיינו את ואדומות סטיגמטה והיו שלמים (boxed) מתחת ללשון בקומה של הפה, המסמנים את מיקומו של צינור וורטון. (ג) באמצעות קטטר עם שיבוץ תיל, בעדינות נקרר בבסיס papilla נקראות. (ד) בעקבות תעלות, הצנרת צנתר ניתן להחליף עם מזרק אבובים אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 3 . מיצוב יעיל של קטטר, stylet על תעלות אוורור וורטון. (א) יישר את הצנרור עם העקמומיות של המלקחיים ולאחר מכן חותכים קצה משופע על אבובים, חוט תיל. כדי בתחילה לנקב את papilla sublingual. (B) . משכי את stylet בתוך הצנרת קו נוקשה להכנסת הצנרת בתוך papilla sublingual. (ג) להכניס קטטר אבובים (stylet הסיר), הצטרפו הזרקת מזרק, בתוך כגדולים שבוצעה בעבר. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 4 . שמירה על מזרק לחץ בעקבות הזרקת משפר את השמירה גשמי. בעקבות זריקות retroductal של 50 µL של 1% טולדין כחול, מזרק הלחץ נשמר גם עבור 5 דקות (נכון SMG - הזריקה הראשונה) או המזרק היה מסוגר מיד לאחר ההזרקה (שמאל SMG - הזרקת השני). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 5 . אישור של הזרקת פוסט משלוח retroductal NP. (א) אין ויוו הדמיה מערכת (IVIS) מציג את lateralization של אות ניאון אדום בצד (שמאל) שטופלו של העכבר 1 h post הזריקה. (B) NP IVIS אות ב 24 שעות הצטמצמה משמעותית. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 6 . אישור של הזרקת פוסט של 24 שעות התמדה retroductal NP. א, ג. שליטה uninjected SMG מוכתם עבור Aqp5 ו- Krt5, סימון acinar, ductal לתאי הפרשה, בהתאמה. B, D. ב retroductal NP מוזרק SMG, Aqp5 ו- Krt5 כתמי בלוטה נורמלית ומורפולוגיה NPs נלקח על acini והן צינוריות (גודל ברים: 75 מיקרומטר). אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
הזרקת Retroductal חיוני למסירה תרופות המותאמות לשפות אחרות בלוטת הרוק. טכניקה זו יש יישומים בהקרנת סוכני טיפולית עבור תנאים כולל תסמונת דאון Sjogren ו ריה9,10,28. משלוח סמים ישירות לתוך SMG באמצעות הזרקת retroductal מספק יתרון מפתח על הממשל מערכתית הפוטנציאל להפחתת חופש-יעד אפקטים, כולל הפעלת המערכת החיסונית11. היכולת להגדיל את משלוח סמים מקומי, ללא הצטברות של הרקמות הסובבות ניתן גם להפעיל בדיקה טיפולית בטווח מינון רחב יותר מאשר ניתן להשיג מערכתית.
אנו מציגים פרוטוקול זה, עם פתרון בעיות ואיכות לבדוק צעדים, כשיטה המעודכנת למסור ננו-חומרים פולימריים דרך צינור וורטון SMG מאתר20. לדוגמה, שימוש נכון של מדריך תיל מקלה בצינורית השמה. יתר על כן, באמצעות סופג יבש במקום דבקים דבק מגע כדי להחזיק את הצינורית במקום במהלך ההזרקה, הסיכון של טראומה הרירית ממוזער. שיטה זו יכולה לשמש לטיפול עכברים עם מגוון של תרכובות, ניתן לבצע על פני ימים מרובים עם העכבר אותו כדי להעריך timecourse אני חוזר מינהל11.
הפרשת בלוטת רגיל יספק מנגנון פשוט וברור סיווג עבור מטען עודף, אם כי אסטרטגיה זו צריכה להיות אופטימיזציה עבור יישומים שונים על-ידי בחירה זהירה של חומר מוזרק טיטור של אטרופין במינון. במקרה זה, NPs מתעקש SMG לפחות 24 שעות. באמצעות NPs מסוגל סמים טעינה, או דומה ננו, יישומים עתידיים של עבודה זו כוללים להתגבר על המגבלה מסיסות אחרת מונעות בדיקות סוכנים הידרופוביות עם retroductal הזרקת20,21.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים אין לחשוף.
Acknowledgments
מחקר דיווח בפרסום זה נתמך על ידי מחקר ואסטתיים (NIDCR) את נבחרת המכון של שיניים ו של המכון הלאומי לסרטן (NCI) של מכוני הבריאות הלאומיים תחת פרס מספר R56 DE025098, UG3 DE027695 ו F30 CA206296. התוכן הוא אך ורק באחריות המחברים, ואינם מייצגים בהכרח את הנופים הרשמי של מכוני הבריאות הלאומיים. עבודה זו נתמכה גם על ידי 1206219 DMR של ה-NSF וחדשנות IADR את פרס טיפול אוראלי (2016).
ברצוננו להודות ג'יין Gavrity על הסיוע בביצוע ניסויים IVIS. ברצוננו להודות לקרן בנטלי שלה קלט וסיוע בביצוע EM. ברצוננו להודות וונג פיי-לון שלו בסיוע IHC. ברצוננו להודות אינגלס מתיו על עזרתו איור הכנה. ברצוננו להודות ד ר איליין Smolock, אמילי וו על קריאה ביקורתית של כתב היד הזה.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Pilocarpine hydrochloride | Sigma Aldrich | P6503 | Pilocarpine |
| Student Vannas Spring Scissors | Fine Science Tools | 91500-9 | Spring Scissors for Tracheostomy |
| Sterile Saline Solution | Medline | RDI30296H | Saline |
| Dumont #7 Forceps | Fine Science Tools | 11274-20 | Curved Forceps |
| Dumont #5 Forceps | Fine Science Tools | 11251-10 | Straight Forceps |
| Standard Pattern Forceps | Fine Science Tools | 11000-12 | Blunt Forceps |
| Fine Scissors- Tungsten Carbide | Fine Science Tools | 14568-09 | Dissection Scissors |
| Microhematocrit Heparinized Capillary Tubes | Fisher Scientific | 22362566 | Capillary tubes |
| Lubricant Eye Ointment | Refresh | N/A | Refresh Lacri-Lube |
| Goat polyclonal anti-Nkcc1 | Santa Cruz Biotech | SC-21545 | Nkcc1 Antibody |
| DAPI (4',6-Diamidino-2-Phenylindole, Dihydrochloride) | Thermo Fisher Scientific | D1306 | DAPI |
| GraphPad Prism | GraphPad | ver6.0 | Statistical Software |
| Cotton tipped applicator | Medline | MDS202000 | Applicator for eye ointment |
| 0.5cc Insulin Syringe, 29G x 1/2" | BD | 7629 | Syringe for intraperitoneal injection |
References
- Miranda-Rius, J., Brunet-Llobet, L., Lahor-Soler, E., Farre, M. Salivary Secretory Disorders, Inducing Drugs, and Clinical Management. International Journal Of Medical Sciences. 12 (10), 811-824 (2015).
- Acauan, M. D., Figueiredo, M. A. Z., Cherubini, K., Gomes, A. P. N., Salum, F. G. Radiotherapy-induced salivary dysfunction: Structural changes, pathogenetic mechanisms and therapies. Archives of Oral Biology. 60 (12), 1802-1810 (2015).
- Dirix, P., Nuyts, S., Vander Poorten, V., Delaere, P., Van den Bogaert, W. The influence of xerostomia after radiotherapy on quality of life. Supportive Care in Cancer. 16 (2), 171-179 (2008).
- Vissink, A., et al. Clinical management of salivary gland hypofunction and xerostomia in head-and-neck cancer patients: successes and barriers. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (4), 983-991 (2010).
- Delporte, C., et al. Increased fluid secretion after adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA to irradiated rat salivary glands. Proceedings of the National Academy of Sciences. 94 (7), 3268-3273 (1997).
- Samuni, Y., Baum, B. J. Gene delivery in salivary glands: from the bench to the clinic. Biochimica et Biophysica Acta. 1812 (11), 1515-1521 (2011).
- Beahm, D. D., et al. Surgical approaches to the submandibular gland: A review of literature. International Journal of Surgery. 7 (6), 503-509 (2009).
- Zheng, C., Shinomiya, T., Goldsmith, C. M., Di Pasquale, G., Baum, B. J. Convenient and reproducible in vivo gene transfer to mouse parotid glands. Oral diseases. 17 (1), 77-82 (2011).
- Zheng, C., et al. Prevention of Radiation-Induced Salivary Hypofunction Following hKGF Gene Delivery to Murine Submandibular Glands. Clinical Cancer Research. 17 (9), 2842-2851 (2011).
- Okazaki, Y., et al. Acceleration of rat salivary gland tissue repair by basic fibroblast growth factor. Archives of Oral Biology. 45 (10), 911-919 (2000).
- Arany, S., Benoit, D. S., Dewhurst, S., Ovitt, C. E. Nanoparticle-mediated gene silencing confers radioprotection to salivary glands in vivo. Molecular Therapy. 21 (6), 1182-1194 (2013).
- Cotrim, A. P., Sowers, A., Mitchell, J. B., Baum, B. J. Prevention of irradiation-induced salivary hypofunction by microvessel protection in mouse salivary glands. Molecular Therapy. 15 (12), 2101-2106 (2007).
- Redman, R. S., Ball, W. D., Mezey, E., Key, S. Dispersed donor salivary gland cells are widely distributed in the recipient gland when infused up the ductal tree. Biotechnic & Histochemistry. 84 (6), 253-260 (2009).
- Grundmann, O., Fillinger, J. L., Victory, K. R., Burd, R., Limesand, K. H. Restoration of radiation therapy-induced salivary gland dysfunction in mice by post therapy IGF-1 administration. BMC Cancer. 10, 417-417 (2010).
- Limesand, K. H., et al. Insulin-Like Growth Factor-1 Preserves Salivary Gland Function After Fractionated Radiation. International Journal of Radiation Oncology Biology Physics. 78 (2), 579-586 (2010).
- Marmary, Y., et al. Radiation-induced loss of salivary gland function is driven by cellular senescence and prevented by IL-6 modulation. Cancer Research. , (2016).
- Baum, B. J., et al. Early responses to adenoviral-mediated transfer of the aquaporin-1 cDNA for radiation-induced salivary hypofunction. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 109 (47), 19403-19407 (2012).
- Arany, S., et al. Pro-apoptotic gene knockdown mediated by nanocomplexed siRNA reduces radiation damage in primary salivary gland cultures. Journal of Cellular Biochemistry. 113 (6), 1955-1965 (2012).
- Benoit, D. S. W., Henry, S. M., Shubin, A. D., Hoffman, A. S., Stayton, P. S. pH-responsive polymeric siRNA carriers sensitize multidrug resistant ovarian cancer cells to doxorubicin via knockdown of polo-like kinase 1. Molecular pharmaceutics. 7 (2), 442-455 (2010).
- Malcolm, D. W., Varghese, J. J., Sorrells, J. E., Ovitt, C. E., Benoit, D. S. W. The Effects of Biological Fluids on Colloidal Stability and siRNA Delivery of a pH-Responsive Micellar Nanoparticle Delivery System. ACS Nano. , (2017).
- Baranello, M. P., Bauer, L., Benoit, D. S. Poly(styrene-alt-maleic anhydride)-based diblock copolymer micelles exhibit versatile hydrophobic drug loading, drug-dependent release, and internalization by multidrug resistant ovarian cancer cells. Biomacromolecules. 15 (7), 2629-2641 (2014).
- Wang, Y., et al. Fracture-Targeted Delivery of β-Catenin Agonists via Peptide-Functionalized Nanoparticles Augments Fracture Healing. ACS Nano. 11 (9), 9445-9458 (2017).
- Baranello, M. P., Bauer, L., Jordan, C. T., Benoit, D. S. W. Micelle Delivery of Parthenolide to Acute Myeloid Leukemia Cells. Cellular and Molecular Bioengineering. 8 (3), 455-470 (2015).
- Kuriki, Y., et al. Cannulation of the Mouse Submandibular Salivary Gland via the Wharton's Duct. Journal of Visualized Experiments. (51), e3074 (2011).
- Nair, R. P., Zheng, C., Sunavala-Dossabhoy, G. Retroductal Submandibular Gland Instillation and Localized Fractionated Irradiation in a Rat Model of Salivary Hypofunction. Journal of Visualized Experiments. (110), (2016).
- Wang, Y., Malcolm, D. W., Benoit, D. S. W. Controlled and sustained delivery of siRNA/NPs from hydrogels expedites bone fracture healing. Biomaterials. 139 (Supplement C), 127-138 (2017).
- Hoffman, M. D., Van Hove, A. H., Benoit, D. S. W. Degradable hydrogels for spatiotemporal control of mesenchymal stem cells localized at decellularized bone allografts. Acta Biomaterialia. 10 (8), 3431-3441 (2014).
- Nguyen, C. Q., Yin, H., Lee, B. H., Chiorini, J. A., Peck, A. B. IL17: potential therapeutic target in Sjogren's syndrome using adenovirus-mediated gene transfer. Laboratory Investigation. 91 (1), 54-62 (2011).
