Summary
Le but de ce travail est de décrire un protocole pour la création d’un fantôme de graisse-eau pratique qui peut être personnalisé pour produire les fantômes avec différents pourcentages de matières grasses et des volumes.
Abstract
Comme les nouvelles techniques sont développées à l’image du tissu adipeux, les méthodes pour valider ces protocoles gagnent en importance. Fantômes, répliques expérimentales d’un tissu ou un organe d’intérêt, offrent une solution économique et flexible. Cependant, n’ayant pas accès à l’équipement coûteux et spécialisé, construction stables fantômes avec des fractions de matières grasses élevées (p. ex.., > niveaux 50 % fraction gras tels que ceux observés dans le tissu adipeux brun) peut s’avérer difficile en raison du caractère hydrophobe des lipides. Cet ouvrage présente un protocole détaillé, à faible coût pour la création de fantômes de 5 x 100 mL avec des fractions de matières grasses de 0 %, 25 %, 50 %, 75 % et 100 % à l’aide de fournitures de laboratoire de base (plaque chauffante, gobelets, etc.) et des composants facilement accessibles (eau distillée, agar, soluble dans l’eau agent tensio-actif, benzoate de sodium, agent de contraste gadolinium-diethylenetriaminepentacetate (DTPA), huile d’arachide et liposolubles agent tensio-actif). Le protocole a été conçu pour être flexible ; Il peut être utilisé pour créer des fantômes avec différentes fractions de matières grasses et un large éventail de volumes. Fantômes créées avec cette technique ont été évalués dans l’étude de faisabilité qui a comparé les valeurs de grosse fraction de graisse-eau résonance magnétique aux valeurs cibles dans les fantômes de construit. Cette étude a donné un coefficient de corrélation de concordance de 0,998 (intervalle de confiance à 95 % : 0.972-1,00). En résumé, ces études démontrent l’utilité de graisses fantômes pour la validation de tissu adipeux, techniques d’imagerie dans un éventail de tissus cliniquement pertinentes et les organes.
Introduction
Intérêt pour quantifier le tissu adipeux et du contenu triglycérides des modalités d’imagerie, telles que l’imagerie par résonance magnétique (IRM), s’étend sur plusieurs domaines. Domaines de recherche comprennent l’étude des dépôts de tissus adipeux blanc et brun et ectopique stockage des lipides dans les organes et les tissus tels que le foie1, pancréas2et le muscle squelettique3. Comme ces nouvelles techniques de quantification adipeuse sont développés, méthodes sont nécessaires pour confirmer que les paramètres d’imagerie sont valides pour la recherche et applications cliniques.
Fantômes, répliques expérimentales d’un tissu ou un organe, fournissent un outil flexible et contrôlée de faible coût, pour développer et valider de techniques d’imagerie4. Plus précisément, fantômes peuvent être construits pour se composent de la graisse et l’eau dans un rapport ou la graisse fraction volumique (FF) comparable à celui du tissu d’intérêt clinique. Cliniquement, les valeurs de FF dans les tissus et organes peuvent varier considérablement : FF dans le tissu adipeux brun se situe entre 29,7 % et 93,9 %5; le foie moyen FF chez les patients de stéatose est de 9,0 % 18,1 ±6; le FF pancréatique chez les adultes à risque pour le type 2 diabète se situe entre 1,6 % et 22,2 %7; et dans certains cas de maladie avancée, patients atteints de dystrophie musculaire peuvent avoir des valeurs de la FF de près de 90 % dans certains muscles8.
Parce que les molécules non polaires tels que les lipides ne se dissolvent pas bien dans les solutions composés de molécules polaires tels que l’eau, créant des fantômes stables avec une cible haute FF reste difficile. Pour FF jusqu'à 50 %, nombreuses méthodes existantes peuvent servir à créer les eau graisse fantômes9,10,11,12. Autres méthodes qui atteignent FFs supérieurs généralement nécessitent des équipements coûteux comme un homogénéisateur ou une cellule ultrasonique disruptor13,14. Bien que ces techniques fournissent une feuille de route pour la hautes fantômes FF, contraintes d’équipement et des quantités variables de détails expérimentaux limitent les efforts déployés pour créer des fantômes d’eau graisse robuste et reproductible.
S’appuyant sur ces techniques précédentes, nous avons développé une méthode pour construire des fantômes les eau graisse stable et rentable à travers une valeurs de plage personnalisable de FF. Ce protocole détaille les étapes nécessaires pour faire 5 x 100 mL de graisses fantômes avec des valeurs de la FF de 0 %, 25 %, 50 %, 75 % et 100 % à l’aide d’une plaque unique. Il peut facilement être ajusté pour créer divers volumes (10 à 200 mL) et les pourcentages de graisse (0 à 100 %). L’efficacité de la technique du fantôme a été évaluée dans les valeurs de MRI FF faisabilité étude comparant graisse-eau pour les valeurs cibles de FF dans les fantômes construites.
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Protocol
1. préparer le poste de travail et des matériaux
- Respecter toutes les règles de sécurité de laboratoire. Porter des gants et des lunettes de protection. Lire la fiche signalétique pour chacun des réactifs utilisés et prendre les précautions appropriées. Examiner les matériaux et liste d’équipement, procédures de gestion des produits chimiques et verrerie précautions.
ATTENTION : Ce protocole nécessite l’utilisation d’une plaque de cuisson à haute température. Soyez prudent et porter des gants résistant à la chaleur pour interagir avec chaud conteneurs et ne touchez pas la surface de la plaque chauffante. - Dégager l’espace de travail et nettoyer les surfaces avec du désinfectant. Lavez-vous les mains et enfilez les gants.
- Stériliser tous les instruments et l’intérieur de tous les pots en verre pour réduire le risque potentiel de contamination et augmenter la longévité du fantôme.
Remarque : Si le fantôme sera utilisé pendant plus de quelques jours, nettoyer périodiquement la surface de la phantom remplie avec de l’éthanol pour empêcher la croissance bactérienne.
2. préparer la Solution de l’eau
- Préparer l’espace de travail pour la solution de l’eau. Positionner le matériel et les équipements suivants sur le banc : diplômé de cylindre, bécher de 400 mL, remuer bar, échelle, 2 bateaux de pesée x, spatule, 2 x 1.0 mL seringues avec aiguille, eau distillée, agent de contraste gadolinium-diethylenetriaminepentacetate (DTPA), agent tensio-actif soluble dans l’eau, agar et benzoate de sodium.
Remarque : Les seringues peuvent être utilisés avec ou sans aiguilles. Toutefois, à l’aide d’aiguilles améliorera la précision de la mesure et aider à prévenir les éclaboussures quand le contenu est ajouté à l’eau ou l’huile des solutions. - Placer une barre de mélanger dans un bécher de 400 mL. Utiliser un cylindre de 100 ou 200 mL gradué pour mesurer 300 mL d’eau distillée et versez l’eau dans le bécher. Placer le bécher sur la plaque chauffante et fixé à 90 ° C avec un taux de remuer de 100 tr/min.
Remarque : Des températures élevées sont utilisées dans le présent protocole pour obtenir des résultats rapides. Parce que les solutions ne restent pas sur la plaque chauffante pendant de longues périodes de temps, la température de consigne pour la plaque chauffante ne reflète pas la température de la solution. - Utilisez une échelle étalonnée pour mesurer 0,30 g de benzoate de sodium dans une barque de pesée. Ajoutez le benzoate de sodium à la solution de l’eau.
- Utiliser une seringue à 0,6 ml de surfactant soluble dans l’eau. Assurez-vous qu’il n’y a pas de bulles d’air. Tenez l’aiguille de quelques millimètres au-dessus du centre de la solution, puis relâcher lentement le surfactant soluble dans l’eau pour éviter les éclaboussures sur les parois du bécher.
- À l’aide d’une seringue propre, mesure 0,24 mL de l’agent de contraste gadolinium-DTPA. Ajoutez-le dans le bécher, utilisant la même technique qu’à l’étape 2.4.
NOTE : Gadolinium-DTPA est utilisé pour ajuster les propriétés de détente de la phantom MRI pour correspondre à celles du tissu d’intérêt. Le lecteur peut régler le volume de gadolinium-DTPA ajouté pour mieux correspondre aux propriétés de relaxation du tissu d’intérêt. - Mesure 9,0 g d’agar dans une barque de pesée. Lentement, verser l’agar avec une spatule dans le bécher avec de l’eau.
- Une fois que tout a été ajouté à la solution de l’eau, augmenter la température de la plaque de cuisson à 350 ° C et mélanger bar vitesse à 1100 tr/min pendant 5-10 min faire fondre l’agar.
- Pour vérifier si l’agar est fondu, brièvement retirer la solution d’eau de la plaque chauffante, arrêter en remuant et vérifier la couleur de la solution. Agar fondu doit être clair (aucun serpentins ou des grumeaux) et jaune ou orange en couleur.
- Une fois l’agar est entièrement fondu, utiliser une seringue ou verser environ 3,5 mL de la solution de l’eau dans un petit flacon. Si la solution d’essai ne fixe pas ou se sépare après 5-10 min, l’agar n’est pas fondu. Augmenter la température de la plaque de cuisson à 350 ° C et continuer la solution de chauffage.
- Répétez l’étape 2.8 jusqu’en solution aqueuse dans les ensembles de flacon test correctement.
- Laisser la solution de l’eau sur la plaque chauffante à 50 ° C et 100 tr/min. Nettoyer l’espace de travail et préparer la solution de l’huile.
- Retirez les matériaux suivants à l’audience : échelle, 2 x bateaux de pesée, spatule, 2 x 1.0 mL seringues avec aiguille (utilisé), eau distillée, agent de contraste gadolinium-DTPA, surfactant soluble dans l’eau, agar et benzoate de sodium.
- Positionner le matériel et les équipements suivants sur le banc : bécher de 400 mL (propre), remuez bar (propre), seringue 2,0 mL avec aiguille, huile d’arachide et surfactant solubles dans l’huile.
3. Solution d’huile
- Placer une nouvelle barre de mélanger dans un bécher propre 400 mL. Utiliser une éprouvette graduée pour mesurer 300 mL d’huile d’arachide et la verser dans le bol. Retirer le bécher contenant la solution d’eau et placer le bécher de solution de l’huile sur la plaque chauffante. Affectez à 90 ° C avec un taux de remuer de 100 tr/min pendant 1 min.
Remarque : l’huile d’arachide est utilisé parce qu’il a un spectre de résonance magnétique nucléaire similaire comparativement aux triglycérides dans les tissus adipeux humains15.- N’abandonnez pas l’huile sur la plaque chauffante. Si l’huile devient trop chaud et commence à fumer, retirer de la plaque de cuisson et réduire la température avant de regagner le foyer de l’huile.
- Mesure 3,0 mL du surfactant solubles dans l’huile avec une seringue propre. En utilisant la même technique que décrite à l’étape 2.4, ajouter le surfactant huile soluble dans le bécher. Définissez la table de cuisson à 150 ° C et 1100 tr/min pendant 5 min pour bien mélanger la solution de l’huile.
- Prendre la solution de pétrole au large de la plaque chauffante et nettoyer l’espace de travail en vue de créer le fantôme.
- Retirez les matériaux suivants à l’audience : seringue 2,0 mL avec aiguille (utilisé), huile d’arachide et surfactant solubles dans l’huile.
- Positionner le matériel et les équipements suivants sur le banc : mélanger 250 mL fiole d’Erlenmeyer, bar (propre), pipettes jaugées, titulaire de pipette volumétrique et pots en verre 5 x 120 mL.
4. créer une émulsion fantôme
- Pipettes jaugées préparer les solutions de l’eau et l’huile. Pipettes ne doivent servir avec leur solution respectif afin d’éviter la contamination croisée.
- Correspondre à la taille de la pipette sur le volume utilisé dans le protocole. Par exemple, utiliser des pipettes jaugées 2 x 50 mL (50 mL de solution d’eau + 50 mL de solution d’huile) pour créer un 100 mL fantôme avec une cible FF de 50 % de matière grasse.
- Placer la solution de l’eau sur la plaque de cuisson et mettre la plaque de cuisson à 300 ° C et 1100 tr/min. Après 4-5 min, éteindre l’agitateur.
- À l’aide d’une pipette jaugée, vérifier si la solution de l’eau est prête pour l’extraction en partiellement la pipette de remplissage avec une petite quantité (5 à 10 mL) de la solution et en libérant dans le bécher. Si la solution de l’eau peut être facilement enlevée et relâchée sans restes excessives dans la pipette, passez à l’étape suivante, sinon, laisser sur la plaque chauffante et vérifiez à nouveau en 2-3 min.
Remarque : Les composants de la solution de l’eau sont plus sensibles à la définition et la séparation, il est donc préférable de garder la solution eau agitation et/ou chaud aussi souvent que possible. Si la solution de l’eau n’est pas chauffée et agitée avant le transfert, il sera très difficile de mesurer les volumes précis en raison de la tendance d’agar se figer quand refroidi. - Soigneusement ajouter un propre à une fiole d’Erlenmeyer de 250 mL. Prendre la solution de l’eau au large de la plaque chauffante, mesurer le volume approprié (tableau 2) et de le transférer dans l’erlenmeyer.
- Placer la solution de l’huile sur la plaque chauffante et mis à 90 ° C et 1100 tr/min pour assurer que la solution est homogène. Après 1-2 min, enlever la solution de l’huile de la plaque chauffante et remplacez-le par l’erlenmeyer.
- Mesurer la quantité appropriée de la solution d’huile (tableau 2) et ajoutez lentement à la solution de l’eau dans l’erlenmeyer.
- Après avoir ajouté toutes les solution huileuse, augmentez la température à 300 ° C et maintenir l’agitation à 1100 tr/min. Mélanger les solutions combinées pendant 4-5 min (il doit rester vortex dans la barre de remuer). L’émulsion doit être blanche, avec une texture crémeuse.
- Utiliser un extracteur de bar agitation magnétique pour enlever la barre de remuer.
Remarque : L’extracteur de bar émoi devrait servir pour retirer les barres de remuer toutes les émulsions futures. Nettoyez-la soigneusement entre chaque utilisation. - Utilisez des gants résistants à la chaleur pour verser délicatement le mélange dans l’erlenmeyer dans un bocal en verre propre 120 mL. Verser doucement le mélange sur le côté de la Jarre de verre pour éviter les bulles d’air dans le mélange en refroidissant.
- Nettoyer la fiole Erlenmeyer et barre de remuer, puis répétez les étapes 4,2 à 4,8, ajustant les quantités de solutions de l’eau et l’huile, jusqu'à ce que tous les fantômes sont créés.
Remarque : Assurez-vous que le verre est froid avant de le nettoyer.
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Representative Results
Si la solution de l’eau a été établie correctement, une petite quantité de la solution doit se figer rapidement dans un flacon d’essai (Figure 1, gauche). Si la solution sépare (Figure 1, droite), la solution doit être préparée à nouveau (en suivant les instructions à l’étape 3.8 du protocole). Si l’émulsion sépare (exemples dans la Figure 2, gauche et droite), le fantôme n’est pas viable et devrait être jeté. Lorsque cela se produit, c’est généralement parce que l’émulsion n’a pas atteint une température suffisamment élevée.
Phantoms de succès vont se figer pour former un mélange homogène, qui peut être imagé et mesuré par l’intermédiaire de MRI. (Figure 3). Un coefficient de corrélation forte concordance (0,998 ; intervalle de confiance à 95 % : 0.972-1,00) et l’inclusion de la ligne de l’identité au sein du groupe de confiance de 95 % de la ligne de régression indique les valeurs de fraction (FSF/FLL) moyenne observée MRI fat signal mesurés dans un région d’intérêt dans les images ne différait pas significativement les valeurs connues de FF dans les fantômes de graisse-eau (Figure 4).
Figure 1. Illustration de figé (à gauche) et séparés des flacons de solution d’essai (à droite) de l’eau. Une petite éprouvette doit être échantillonné pour évaluer la viabilité de la solution de l’eau. Si la solution de l’eau se fige (à gauche), passez à l’étape suivante dans le protocole de construction fantôme. Si la solution de l’eau se sépare (indiqué par les deux flèches sur le flacon de droit), la solution de l’eau doit être re-préparé avant il peut être utilisé pour la formation de l’émulsion de fantôme.
Figure 2. Exemple d’émulsions fantômes infructueuses. Inspecter visuellement le fantôme environ 10 min après coulée afin de déterminer si l’émulsion sera correctement définie. Si le fantôme commence à se séparer (àgauche) ou paraît inhomogène (àdroite), les fantômes ont besoin d’être refait.
Figure 3. Représentation schématique d’une gamme de fantômes et de leurs résultats respectifs d’imagerie par résonance magnétique (IRM). Photos montrent des différences de couleur légère dans les fantômes construites (0 %, 25 %, 50 %, 75 % et 100 % ; en haut). Cartes de protons graisse-signal-fraction (FSF/FLL) révèlent une mesure FSF homogène semblable à la teneur en matières grasses de cible (au milieu). Des effets de bord distincts en raison des propriétés d’imagerie des conteneurs verre sont visibles sur les bords de chaque feuille de la FSF.
Figure 4. Affichage de diagramme de dispersion FSF valeurs de mesure en fonction des valeurs connues de FF (points bleus). La ligne noire épaisse indique identité. La ligne bleue pointillée indique la ligne de régression. La zone ombrée indique l’intervalle de confiance de 95 % des estimations. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
Figure 5. Croquis illustrant le haut niveau vue d’ensemble du protocole. Le coin supérieur gauche du diagramme montre les ingrédients, les matériaux et les paramètres table de cuisson pour la préparation de la solution de l’eau, et le coin supérieur droit du diagramme montre les ingrédients, les matériaux et les paramètres table de cuisson pour la préparation de la solution de l’huile. La partie inférieure affiche les paramètres de plaque chauffante permettant de combiner les solutions huile et l’eau pour former l’émulsion. S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.
| Quantité | Équipement/matériel | ||
| 300 mL | Eau distillée | ||
| 9,0 g | Agar | ||
| 0,6 mL | Agent tensio-actif soluble dans l’eau | ||
| 0,24 mL | Agent de contraste gadolinium-DTPA | ||
| 0,3 g | Benzoate de sodium | ||
| 300 mL | Huile d’arachide | ||
| 2,0 mL | Surfacant solubles dans l’huile | ||
| 1 * | Plaque chauffante w / agitateur | ||
| 3 | Remuer les barres | ||
| 2 | 400 mL bécher | ||
| 1 | Fiole d’Erlenmeyer de 250 mL | ||
| 2 | Pipette jaugée de 25 mL | ||
| 1 | 3,0 mL seringue | ||
| 2 | 1,0 mL seringue | ||
| 3 | Aiguilles de seringue | ||
| 1 | Spatule | ||
| 1 | Échelle | ||
| 2 | Peser les bateaux | ||
| 5 | Pots en verre de 120 mL | ||
| 1 | Gants résistants à la chaleur (paire) | ||
| 1 | flacon de dram de 1-3 | ||
| 2 | pipette jaugée de 50 mL | ||
| 2 | pipette jaugée de 75 mL | ||
Tableau 1. Quantité de matériaux et l’équipement nécessaires pour fantômes 5 x 100 mL (0 %, 25 %, 50 %, 75 % et 100 %).
| Mesures de fantôme eau/huile | ||
| Taux de graisse corporelle | Solution d’eau | Solution huileuse |
| 0 % | 100 mL | 0 mL |
| 25 % | 75 mL | 25 mL |
| 50 % | 50 mL | 50 mL |
| 75 % | 25 mL | 75 mL |
| 100 % | 0 mL | 100 mL |
Le tableau 2. Mesures de l’huile et l’eau des solutions pour créer des fantômes de 5 x 100 mL (0 %, 25 %, 50 %, 75 % et 100 %).
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Discussion
Les auteurs décrivent une méthode robuste pour créer les eau graisse fantômes pouvant pour la validation des techniques d’imagerie médicale utilisés pour quantifier le tissu adipeux et triglycérides content in vivo. En créant deux réservoirs (un pour la solution de l’huile) et un pour la solution de l’eau, des fantômes stables avec une variété de valeurs FF, y compris les valeurs dépassant 50 %, ont été construits sans besoin de matériel coûteux. Fantômes de FF élevés (> 50 %) fournissent l’utilitaire afin de s’assurer que les techniques d’imagerie pour la quantification adipeuse sont valables pour les tissus ou organes avec des valeurs élevées de FF, tels que le tissu adipeux brun5. Les estimations de MRI de la FSF sont bien corrélées avec les valeurs connues de la FF.
Lorsque seulement une seule plaque chauffante est disponible (comme décrit dans le présent protocole), la logistique de maintenir la chaleur dans chaque solution est une préoccupation majeure. Sans chauffage ni en agitant, la solution de l’eau peut refroidir et commence à se figer. Pour éviter cela, placez la solution de l’eau sur la plaque chauffante (< 100 ° C, ~ 100 tr/min) lorsque cela est possible et toujours entre mélange des fantômes. Ce qui est important, l’huile et l’eau des solutions doivent être bien mélangées lors de chaque solution est extraite pour créer le fantôme. Placez toujours la solution respectif sur la plaque chauffante pendant au moins 30 s (< 100 ° C, ~ 100 tr/min) avant d’extraire la solution. Dans un cas idéal, plaques de cuisson séparés doivent servir pour la solution de l’eau, la solution de l’huile et l’émulsion fantôme. Suivez les mêmes étapes comme décrit ci-dessus pour créer chaque solution. Une fois bien mélangé, mettre les deux plaques de cuisson à 50 ° C et 100 tr/min pour empêcher fige et décantation. Avant d’extraire la solution du bécher, éteignez l’appareil et attendez que la barre de remuer pour complètement arrêter de bouger.
Alors que la précision et l’exactitude de l’huile à l’eau ratio dans l’émulsion est critique, les mesures de chaque composante dans l’huile et l’eau des solutions permettent une plus grande souplesse. À sa fondation, la FSF MRI observée est une mesure de « graisse » versus « non gras » signaux dans le volume total ; « sans gras » peut donc s’avérer tout composé qui contribue à l’intensité du signal image (eau, agar, surfactant, etc.). Nous conseillons toujours mesurer les composants de la solution de l’eau et l’huile aussi précisément que possible, que ces proportions trouvées pour créer les fantômes plus stables et reproductibles. Petites déviations du montant de la gélose dans la solution de l’eau (p. ex.., 8,9 au lieu de 9,0 grammes), cependant, ne devrait pas affecter le FF global de l’émulsion si l’huile à rapport de solution de l’eau est maintenue. La mesure des volumes des solutions eau et huile température ambiante peut également entraîner une petite erreur à cause des effets de dilatation thermique sur le volume de chaque composant. Compte tenu la température volumétrique des coefficients de dilatation de l’eau et l’huile, comme l’indiquent leurs densités16,17et le relativement petit changement de température, nous estimons que l’erreur de la FF globale en raison de la thermique expansion à moins de 0,5 %. Notons aussi la possibilité que la relaxivité de gadolinium-DTPA pour l’eau et les lipides peut-être être différentes. Si oui et en fonction des paramètres de séquence de pulsation, la précision quantitative des mesures IRM FSF pourrait être diminuée. La FSF MRI-observé peut aussi varier avec le modèle utilisé pour analyser les données.
Bien que la méthode décrite ici n’a été utilisé pour faire les fantômes entre 10 et 200 mL, la technique peut être utilisée pour produire des fantômes de volume plus petit ou plus grand. Notamment, il est difficile d’extraire des volumes de < 10 mL des réservoirs en raison de la viscosité des solutions. Fantômes de petit volume, nécessitent donc des excès émulsion où puiser le volume désiré afin de maintenir l’exactitude de la FF du fantôme final. Par exemple, un 10 mL fantôme avec un objectif de 10 % FF nécessite une extraction de 10 mL d’une émulsion de 100 mL. Lors de la création de grands fantômes (> 100 mL), la taille de la barre de remuer et verrerie doit faire évoluer ensemble vers le haut (et le ratio de solution à la capacité de la verrerie) pour créer un tourbillon dans la solution lorsque l’agitateur a > 500 tr/min. L’émulsion probable n’atteindront pas homogénéité sans un vortex.
Compte tenu de la complexité de la création hautes fantômes FF, petites déviations par rapport au protocole peuvent avoir un effet profond sur la stabilité et la qualité de la phantom finale. Les conditions environnementales, telles que la température ambiante, d’altitude et l’humidité, peuvent modifier le processus de préparation fantôme de façon irrégulière et altèrent le produit final. Contrôles intermédiaires de la solution de l’eau fournissent des occasions de détecter et d’atténuer ces effets possibles. Cependant, il est possible que même avec la rigoureuse attention sur les détails du protocole, le fantôme final peut se séparer, et le processus devra être répété.
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Disclosures
Les auteurs déclarent que la recherche a été effectuée en l’absence de toute relation commerciale ou financière qui pourrait être interprétée comme un conflit d’intérêts potentiel.
Acknowledgments
Soutien financier pour cette recherche a été pourvue le National Institutes of Health (NIH) et de l’Institut National du diabète et digestif Kidney Diseases (NIDDK) / NIH R01-DK-105371. Nous remercions Dr Houchun (Harry) Hu pour conseils et suggestions sur création fantôme de graisse de l’eau.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Distilled Water | Amazon | B000P9BY38 | Base of water solution |
| Agar | Sigma Aldrich Incorporated | A1296-100G | Gelling agent |
| Water-Soluble Surfactant | Sigma Aldrich Incorporated | P1379-500ML | Surfactant/emulsifying agent |
| Gadolinium-DTPA Contrast Agent | Bayer Healthcare | 50419-0188-01 | Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent. |
| Sodium Benzoate | Sigma Aldrich Incorporated | 71300-250G | Preservative |
| Peanut Oil | Amazon | 54782-LOU | Base of oil solution |
| Oil-Soluble Surfactant | Sigma Aldrich Incorporated | S6760-250ML | Surfactant/emulsifying agent |
| Hotplate w/ Stirrer | Fisher Scientific | 07-770-152 | |
| Stir bars (Egg-Shaped) | Sigma Aldrich Incorporated | Z127116-1EA | |
| 400 mL Beaker | Sigma Aldrich Incorporated | CLS1003400-48EA | |
| 250 mL Erlenmeyer Flask | Sigma Aldrich Incorporated | CLS4450250-6EA | |
| 25 mL Glass Volumetric Pipette | Fisher Scientific | 13-650-2P | Quantity = 2 |
| 50 mL Glass Volumetric Pipette | Fisher Scientific | 13-650-2S | Quantity = 2 |
| 75 mL Glass Volumetric Pipette | Fisher Scientific | 13-650-2T | Quantity = 2 |
| 3.0 mL Syringe | Sigma Aldrich Incorporated | Z248002-1PAK | |
| 1.0 mL Syringe | Sigma Aldrich Incorporated | Z230723-1PAK | |
| Spatula | Sigma Aldrich Incorporated | S3897-1EA | |
| Scale (100g X 0.01g Resolution) | Amazon | AWS-100-BLK | |
| Weigh Boats | Sigma Aldrich Incorporated | Z740499-500EA | |
| 120 mL Glass Jars | McMaster Carr Supply Co | 3801T73 | |
| Heat Resistant Gloves (pair) | Amazon | B075GX43MN | |
| Syringe Needles | Sigma Aldrich Incorporated | Z192341-100EA | |
| 18" stir bar retriver | Fisher Scientific | 14-513-70 | |
| 1 Dram Clear Glass Vial | Fisher Scientific | 03-339-25B |
References
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