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Biochemistry

नमूना और स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप विश्लेषण के लिए दांत तामचीनी कार्बोनेट के उपचार

Published: August 15, 2018 doi: 10.3791/58002
Automatic Translation
1, 1,2, 1, 1, 1, 1, 1, 1
1Max Planck Institute for the Science of Human History, 2School of Archaeology, University of Oxford

Summary

मानव और पशु दांत तामचीनी कार्बोनेट के स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप विश्लेषण व्यक्तिगत आहार और पर्यावरण पुनर्निर्माण के लिए एक प्रॉक्सी के रूप में इस्तेमाल किया गया है । यहां, हम एक विस्तृत वर्णन और थोक और अनुक्रमिक दांत तामचीनी नमूने के दृश्य प्रलेखन के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पुरातात्विक और paleontological नमूनों के उपचार प्रदान करते हैं ।

Abstract

मानव और पशु दांत तामचीनी कार्बोनेट के स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप विश्लेषण paleodietary, paleoecological, और paleoenvironmental अनुसंधान में हाल ही में ऐतिहासिक समय से वापस १०,०००,००० साल पहले से लागू किया गया है । थोक दृष्टिकोण तामचीनी mineralization की अवधि के लिए एक प्रतिनिधि नमूना प्रदान करते हैं, जबकि एक दांत के भीतर अनुक्रमिक नमूनों इस अवधि के दौरान आहार और पर्यावरण परिवर्तन ट्रैक कर सकते हैं । हालांकि इन तरीकों को व्यापक रूप से लागू किया गया है और पुरातत्व, पारिस्थितिकी, और जीवाश्मिकी में वर्णित है, वहां कोई स्पष्ट दिशा निर्देशों के लिए आवश्यक प्रयोगशाला उपकरणों के चयन में सहायता और अच्छी तरह से विस्तृत प्रयोगशाला नमूने का वर्णन किया गया है और प्रोटोकॉल. इस अनुच्छेद में, हम दस्तावेज़ पाठ और नेत्रहीन, उपचार और diagenetic स्क्रीनिंग के माध्यम से नमूना से पूरी प्रक्रिया को और अधिक व्यापक रूप से प्रयोगशाला सेटिंग्स की एक किस्म में अपने आवेदन पर विचार शोधकर्ताओं के लिए उपलब्ध करने के लिए पद्धति बनाने के लिए ।

Introduction

स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप दांत तामचीनी कार्बोनेट का विश्लेषण करने के लिए पिछले मानव आहार का सेवन, प्रातः, और गतिशीलता, साथ ही वनस्पति पर faunal निर्भरता, पशुओं की आवाजाही, और पशुओं के चारे का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया गया है । इन आवेदनों पर व्यापक चर्चा की गई है और पर्यावरण की स्थिति की एक किस्म के लिए समीक्षा की स्थानीय शुष्कता, तापमान, जल स्रोतों के प्रभाव का संकेत है, और वनस्पति रचनाएं1,2, 3,4,5,6. पुरातत्व और जीवाश्मिकी में संभावित आवेदनों की विविधता, साथ ही दांत तामचीनी कार्बोनेट के अच्छे संरक्षण, यह स्थिर आइसोटोप काम3के लिए एक आकर्षक सामग्री बना दिया है । नमूना, पूर्व उपचार, और diagenesis स्क्रीनिंग के तरीकों संक्षेप में पिछले प्रकाशनों1,7की एक संख्या में वर्णित हैं । हालांकि, पूरी तरह से मौखिक और दृश्य प्रदर्शनों काफी हद तक अनुपलब्ध रहते हैं, विशेष रूप से पुरातत्व विज्ञान प्रयोगशालाओं के बाहर के लोगों के लिए और सीमित धन के साथ प्रयोगशाला समूहों के बीच जहां इस तकनीक के उपयोग में रुचि बढ़ रही है 5.

दांत तामचीनी मुख्य रूप से hydroxyapatite (bioapatite) crystallites से बना है8 हड्डी में उन लोगों से बड़ा है, यह और अधिक पोस्ट मार्टम diagenetic ईओण प्रतिस्थापन और संदूषण3के लिए प्रतिरोधी बना । आधुनिक अध्ययनों से यह प्रदर्शित किया है कि स्थिर कार्बन आइसोटोप (δ13C) मापन faunal दांत तामचीनी मज़बूती से रिकॉर्ड पशु आहार और व्यवहार9,10. दांत तामचीनी के स्थिर ऑक्सीजन आइसोटोप (δ18ओ) मूल्य, पानी पर पौधों और पशु खाद्य पदार्थों में पानी, पीने का पानी, श्वसन, साथ ही विभिन्न पर्यावरणीय प्रभावों शामिल है जो घूस पानी की ऑक्सीजन isotopic संरचना द्वारा निर्धारित किया जाता है जो आगे isotopic भिन्नीकरण करने के लिए नेतृत्व कर सकते हैं (जैसे, शुष्कता, तापमान, ऊंचाई, वर्षा राशि, महाद्वीपीय स्थान)11. यह पुरातात्विक, paleoecological, और paleontological अनुसंधान में आहार और पर्यावरण पुनर्निर्माण के लिए एक लोकप्रिय तरीका बना दिया है ।

दांत तामचीनी गठन की अवधि अपेक्षाकृत कम है (वर्ष) और दांत के आधार पर अलग किया जा रहा नमूना है । मनुष्यों के लिए, प्रथम दाढ़ तामचीनी mineralizes जन्म और 3 वर्ष की आयु के बीच, premolars mineralize के बीच १.५ और 7 वर्ष की आयु, दूसरी दाढ़ mineralize के बीच २.५ और 8 वर्ष की आयु, और तृतीय दाढ़ mineralize के दौरान किशोरावस्था, 7 से 16 वर्ष के बीच12 . यह देखते हुए कि दांत तामचीनी रूपों गठन की अवधि में संवर्द्धित, यह पूरे विकास अक्ष के साथ थोक में नमूना किया जा सकता है या आदेश में आहार और वातावरण है कि गठन की अवधि के दौरान हुई है परिवर्तन की जांच करने के लिए क्रमिक रूप से नमूना13 . कालक्रम के क्रम में एक दिया दांत के भीतर आहार परिवर्तन मानव और अंय जानवरों के लिए चौकस है1,14, अंतर के बारे में जानकारी उपलब्ध कराने के वार्षिक मौसमी और आहार भिंनता ।

जबकि तामचीनी आम तौर पर diagenesis के लिए प्रतिरोधी है, isotopic दफन पर्यावरण से उत्पंन संशोधनों संभव हो रहे है और15,16मनाया गया है, प्रयोगात्मक जांच और उपचार उपयोगी विकल्प बना । जबकि यह केवल उपलब्ध पद्धति नहीं है, रूपान्तर के रूप में बदल अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी (स्विचेज), विशेष रूप से तनु संचरण मोड में, दांत तामचीनी में taphonomic परिवर्तन का आकलन करने के लिए एक त्वरित, सस्ती और अपेक्षाकृत सुलभ विधि के रूप में उभरा है, विशेष रूप से paleontological संदर्भों में17,18,19,20। हालांकि, विस्तृत प्रोटोकॉल और रिकॉर्डिंग मानकों geochemistry या सामग्री विज्ञान के क्षेत्रों के बाहर कई लोगों के लिए अपेक्षाकृत दुर्गम रहते हैं ।

प्रतिक्रिया समय और दांत तामचीनी के उपचार में शोधकर्ताओं द्वारा नियोजित रसायन भी साहित्य में काफी भिंनता है, अक्सर के रूप में सीमित विचार के साथ जो इस परिवर्तनशीलता स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप के मूल्यों के लिए कर सकते हैं के साथ नमूना21 ,22. यहां, हम एक दृष्टिकोण है कि एसिटिक एसिड (०.१ मीटर) तामचीनी पाउडर के नमूनों के उपचार के लिए पतला का उपयोग करता है की रिपोर्ट । हालांकि, यह देखते हुए कि isotopic माप से उत्पंन में मतभेद दांत तामचीनी के लिए अपेक्षाकृत छोटे हैं, यह शोधकर्ताओं के लिए सबसे अच्छा है डेटासेट के लिए प्रोटोकॉल का पालन करें जिसके साथ वे11के लिए अपने डेटा की तुलना करना चाहते हैं । इसके अलावा, जहां छोटे अनुक्रमिक नमूनों ले रहे हैं, विशेष रूप से Holocene नमूनों पर, कोई इलाज नहीं चुना जा सकता है (पायलट diagenetic परीक्षण के बाद) नमूना अपव्यय से बचने के लिए ।

हालांकि तरीकों हम यहां रिपोर्ट कोई नई तरह से कर रहे हैं, हमारे ज्ञान के लिए, यह पहली बार है कि एक पूरी तरह से लिखा और थोक और अनुक्रमिक नमूना, उपचार के विकल्प के दृश्य प्रलेखन, और diagenetic जांच तरीकों (स्विचेज के रूप में) दांत तामचीनी के लिए व्यापक रूप से एक विविध अकादमिक दर्शकों के लिए उपलब्ध किया गया है । जब तक हमें उंमीद है कि हमारे प्रयासों को और अधिक आसानी से व्यक्तियों और प्रयोगशालाओं की एक व्यापक संख्या में सुलभ बनाने के प्रयास करेंगे, शोधकर्ताओं जो लागू करते है और इस तकनीक को प्रकाशित करना चाहते ंयूनतम रिपोर्टिंग मानकों के बारे में पता होना चाहिए, diagenetic विचार, और प्रस्तुति की आवश्यकताएं कहीं20की समीक्षा की, साथ ही साथ संभावित दुभाषिया जटिलताओं कि उनके अध्ययन क्षेत्र के लिए अद्वितीय होगा, taxa विश्लेषण, और समय अवधि5।

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Protocol

निंनलिखित प्रोटोकॉल मानव इतिहास के विज्ञान के लिए मैक्स प्लैंक संस्थान में प्रकाश आइसोटोप जन स्पेक्ट्रोमेट्री प्रयोगशाला के दिशा निर्देशों का पालन करता है । राष्ट्रीय और अंतरराष्ट्रीय समितियों से उपयुक्त नैतिकता अनुमति लुप्तप्राय आधुनिक या ऐतिहासिक faunal नमूनों को शामिल विश्लेषण के लिए मांग की जानी चाहिए, और समकालीन हितधारकों के लिए ब्याज की पुरातात्विक और faunal सामग्री के उपयोग के लिए . इस पत्र में इस्तेमाल किए गए नमूनों में पुरातात्विक और जीवाश्म नमूने थे । कोई जीवित मनुष्यों इस अध्ययन में इस्तेमाल किया गया और पूर्ण नैतिक, संस्थागत, और सरकारी अनुमति किसी भी विनाशकारी विश्लेषण के लिए प्राप्त किया गया है ।

1. थोक नमूना

नोट: मनुष्यों और जानवरों के लिए, थोक दांत तामचीनी नमूने की बुनियादी विधि दांत के buccal किनारे करने के लिए एक ड्रिल के आवेदन पत्र है ।

  1. दांत की बाहरी सतह को साफ (~ ०.१ mm) एक एल्यूमीनियम शॉट विस्फ़ोटक का उपयोग या कोमल घर्षण द्वारा सेट अप ड्रिल का उपयोग कर । एक हाथ से एक साफ हीरा इत्तला दे दी ड्रिल बिट के साथ आयोजित की ड्रिल का प्रयोग करें (नीचे देखें), यहां तक कि आकार, ड्रिल सेट अप करने के लिए एक चक के माध्यम से जुड़ी । सुनिश्चित करें कि कोमल और यहां तक कि घर्षण पूरे विकास अक्ष (चित्रा 1 और चित्रा 2) के समानांतर एक नाली के रूप में किया जाता है ।
  2. प्रयास, जहां संभव हो, प्रत्येक मानव या पशु नमूना के लिए एक ही दांत भाग के लिए विधि लागू करने के लिए ।
    नोट: मानव paleodietary अनुसंधान में, तीसरे दाढ़ आम तौर पर देर से किशोर के प्रतिनिधि के रूप में इष्ट है/जबकि पहले दाढ़23को प्रातः प्रभाव के कारण बचा रहे हैं । प्रत्येक taxon के लिए पसंदीदा दांत, और जीवन की अवधि का प्रतिनिधित्व किया, उपलब्ध नमूनों और प्रश्न के अध्ययन के तहत के साथ भिंन होगा ।
  3. एक अच्छी तरह हवादार कमरे में ड्रिल जबकि दांत तामचीनी पाउडर की साँस लेना से बचने के लिए एक मुखौटा पहने हुए । आंखों की रक्षा के लिए चश्मे पहनें । ध्यान रखें कि नमूना पाउडर की मात्रा विश्लेषण, उपचार के लिए प्रोटोकॉल, और दांत के आकार के लिए इस्तेमाल किया उपकरणों के आधार पर भिन्न हो जाएगा । कम गति पर ड्रिल के लिए नमूना हीटिंग को रोकने के लिए ।
    नोट: लगभग, 4-8 मिलीग्राम का नमूना पाउडर आइसोटोप अनुपात द्रव्यमान स्पेक्ट्रोमेट्री और diagenetic परीक्षण के लिए एक ऑनलाइन गैस तैयारी और परिचय प्रणाली का उपयोग कर कई विश्लेषण के लिए एक उपयुक्त लक्ष्य है. ध्यान रखें कि चुना ड्रिल गति नमूने की कमजोरी पर निर्भर करेगा और परीक्षण और त्रुटि के कुछ स्तर की आवश्यकता होगी । सामांय में, एक हाथ पर आयोजित की ड्रिल, दो ताकत के पांच सलाखों के बाहर पर्याप्त हैं । साफ एल्यूमीनियम पंनी का एक टुकड़ा या कागज वजन पर टूथ पाउडर ड्रिल ।
  4. जिसके परिणामस्वरूप तामचीनी पाउडर ले लीजिए और यह एक १.५ मिलीलीटर माइक्रो-केंद्रापसारक ट्यूब कि ड्रिलिंग के लिए एक उचित सटीक संतुलन पर धड़ा किया गया है में स्थानांतरण । लेबल प्रत्येक नमूना पदनाम (चित्रा 3) के साथ ट्यूब । नमूना संख्या रिकॉर्ड और एक प्रयोगशाला नोटबुक में वजन तामचीनी और साथ ही एक इलेक्ट्रॉनिक डेटाबेस ।
  5. प्रत्येक नए दांत ड्रिलिंग से पहले, उपयोग किया ड्रिल बिट्स पहले एक मजबूत ऊतक पर ०.५ मीटर एचसीएल का उपयोग कर साफ । फिर एक कार्बनिक विलायक (जैसे एसीटोन, मेथनॉल, या इथेनॉल के रूप में) के साथ ड्रिल बिट एक मजबूत ऊतक का उपयोग कर धो लो ।
  6. एक ड्रिलिंग बैठे के बाद, कार्यक्षेत्र अच्छी तरह से साफ एक समर्पित वैक्यूम क्लीनर, या एक dustpan और ब्रश का उपयोग कर । मेथनॉल के साथ नमूना अंतरिक्ष पोंछ । वैक्यूम या हल्के से नमूने के बीच धूल और नमूना पाउडर को दूर करने के लिए संपीड़ित हवा के साथ ड्रिल स्प्रे ।

2. अनुक्रमिक नमूना

नोट: अनुक्रमिक नमूना रूपों की एक किस्म में संपर्क किया जा सकता है और नमूना किया जा रहा taxon पर निर्भर करेगा, दांत का आकार, साथ ही वांछित लौकिक संकल्प.

  1. बाहरी दांत तामचीनी की एक बहुत पतली (~ ०.१ मिमी) परत को हटाने के द्वारा नमूना किया जा रहा दांत की सतह को साफ ।
  2. मुकुट के शीर्ष करने के लिए तामचीनी रूट जंक्शन से चल रहे हैं, दांत की वृद्धि धुरी के लिए सीधा buccal सतह के साथ नमूने ड्रिल । एक 1-2 मिमी चौड़ी नाली तामचीनी परत भर में जिसके परिणामस्वरूप प्रत्येक नमूने के साथ, क्षैतिज बैंड सीधा वृद्धि अक्ष करने के लिए ड्रिल (चित्रा 1 और चित्रा 4) । dentine में तामचीनी के माध्यम से ड्रिलिंग से बचने के लिए ध्यान रखना के रूप में यह नमूना और परिणामी माप दूषित होगा ।
    नोट: लिया नमूनों की संख्या वांछित लेकिन c .10 संकल्प के आधार पर भिंन होगा δ13सी में मौसमी परिवर्तन और एक hypsodont पालतू मवेशियों के आकार के लिए δ18ओ मूल्यों का अध्ययन करने के लिए एक उपयुक्त लक्ष्य का प्रतिनिधित्व करता है ।
  3. नमूना लाइन की चौड़ाई ड्रिल बिट के व्यास द्वारा निर्धारित किया जाता है के रूप में, प्रत्येक नमूने के लिए उपयुक्त ड्रिल बिट चुनें.
  4. अधिक नाजुक दांत (चित्रा 2) (उदाहरणके लिए, मानव दांत), और साथ ही अधिक स्थिर ड्रिलिंग के लिए की आवश्यकता होती है एक बड़ी संख्या के लिए एक रिग सेट-अप का प्रयोग करें । सेट अप रिग स्टैंड है कि ड्रिल सुरक्षित रूप से रखती है, ड्रिल नीचे की ओर इशारा करते हुए बिट के साथ ।
    नोट: जबकि चार नमूने आसानी से एक स्थाई मानव दाढ़ से प्राप्त किया जा सकता है एक हाथ से आयोजित दृष्टिकोण24, और अधिक परिष्कृत नमूना एक रिग या सह2 लेजर पृथक दृष्टिकोण है कि यहां चर्चा नहीं होगी14की आवश्यकता है । एक अंय सामांय दृष्टिकोण के लिए एक अर्द्ध स्वचालित microsampling25का उपयोग है ।
  5. दांत पकड़ो या एक क्लैंप के लिए देते हैं । ड्रिल बिट के खिलाफ दांत तामचीनी दबाएँ और दबाव लागू होते हैं । नमूने buccal सतह शीर्ष (occlusal सतह) से तामचीनी-रूट जंक्शन (ERJ) के स्थान पर क्राउन के आधार करने के साथ ड्रिल्ड कर रहे हैं । एक ही नमूना ड्रिलिंग रणनीति एकाधिक बार पिछले नमूना लाइन के समानांतर प्रत्येक लगातार लाइन ड्रिलिंग प्रतिकृति । ऐसे भेड़ दाढ़ के रूप में नाजुक दांत, के लिए एक छोटे बेलनाकार हीरे की ड्रिल बिट का उपयोग 1 मिमी (चित्रा 1C) के एक व्यास के साथ ।
  6. कैलिपर्स का उपयोग कर ERJ से प्रत्येक नमूना लाइन की दूरी को मापने और तुलना के लिए इस दूरी रिकॉर्ड.
  7. ऊपर दिए गए 1.3-1.6 चरणों का पालन करें ।
    नोट: यदि छोटे, नाजुक दांत विश्लेषण किया जा रहा है और उपचार और diagenetic जांच विधियों लागू नहीं कर रहे हैं, के रूप में छोटे नमूने के रूप में 1-4 एमजी पर विश्वसनीय परिणाम का उत्पादन होगा एक ऑन लाइन गैस की तैयारी और परिचय कार्बोनेट विश्लेषण के लिए सेट अप । संशोधित स्वचालित परिधीय प्रणालियों भी कम नमूना वजन के उपयोग की सुविधा कर सकते हैं, लेकिन अनिवार्य रूप से अध्ययन किया तामचीनी में कार्बोनेट के अनुपात द्वारा सीमित कर रहे हैं (4 से 5 wt%)26,27. शोधकर्ताओं ने प्रयोगशाला जहां नमूनों के लिए आवश्यक नमूना की मात्रा निर्धारित करने के लिए मापा जा रहे हैं के साथ परामर्श करना चाहिए.

3. रूपान्तर बदलने अवरक्त स्पेक्ट्रोमेट्री/तनु कुल चिंतनशील विधि

  1. तनु कुल चिंतनशील विधि के लिए, या तो वैक्यूम के तहत या सामान्य वायुमंडलीय स्थितियों में एक नमूना चैंबर पृष्ठभूमि की स्थापना ।
  2. लगभग एक रंग का उपयोग कर नमूना चैंबर में हीरे क्रिस्टल पर दांत तामचीनी के 1 मिलीग्राम रखें । निचले और नमूना पोस्ट सुरक्षित जब तक वहां पोस्ट, नमूना, और हीरे की थाली के बीच एक फर्म कनेक्शन है । नमूना कक्ष बंद करें, के साथ या बिना एक निर्वात स्थापित किया जा रहा, सेट-अप या उपलब्धता के आधार पर.
  3. ४०० और ४,००० सेमी-1के बीच लेकर wavenumber के लिए नमूना ६४ बार के स्विचेज स्पेक्ट्रा को मापने । दोहराने की वांछित संख्या अध्ययन के लक्ष्यों के आधार पर भिंन होगा, हालांकि तीन के विश्लेषण को दोहराने, विभिंन aliquots के साथ आदर्श रूप में लिया जा रहा है और फिर microcentrifuge ट्यूब आवास नमूने को लौट, मजबूत परिणाम सुनिश्चित करेंगे ।
  4. प्रत्येक aliquot के बीच और प्रत्येक नमूने के बीच मेथनॉल के साथ रंग को साफ करें ।
  5. उपलब्ध सॉफ़्टवेयर का उपयोग करते हुए एक आधारभूत सुधार करें । सॉफ़्टवेयर स्वचालित रूप से परिणामी स्विचेज प्रोफ़ाइल से नमूना कक्ष पृष्ठभूमि को घटाया । बेहतर reproducibility सुनिश्चित करने के लिए, केवल उच्चतम फॉस्फेट बैंड के लिए ०.०६ के एक न्यूनतम अवशोषण के साथ तामचीनी स्पेक्ट्रा ~१०३५ सेमी-1 पर ध्यान में रखा जाना चाहिए.
  6. ७११ सेमी-1पर एक चोटी के लिए जाँच करके सभी नमूनों में सामान्य माध्यमिक contaminant कार्बोनेट केल्साइट की उपस्थिति की निगरानी.
  7. विश्लेषण के बाद, ध्यान से एक रंग या सक्शन डिवाइस का उपयोग कर अपने microcentrifuge ट्यूबों के लिए नमूने वापस और पूर्व उपचार या विश्लेषण के अगले चरण पर ले ।
  8. एक. csv फ़ाइल (या इसी तरह) और ब्याज की सूचकांक की गणना करने के लिए उपयोग के रूप में कच्चे तरंग दैर्ध्य और तीव्रता डेटा निर्यात (आमतौर पर इस्तेमाल सूचकांक एक साइट फॉस्फेट सूचकांक, बी साइट फॉस्फेट सूचकांक, फॉस्फेट Crystallinity सूचकांक, फॉस्फेट सूचकांक पर पानी के बीच, और शामिल CO3/PO4 अनुक्रमणिका17,18,19) (तालिका 1) ।
  9. जीवाश्म या पुरातात्विक नमूनों से आधुनिक faunal टूथ तामचीनी के बढ़ते डेटासेट के लिए स्विचेज परिणामों की तुलना अब साहित्य में उपलब्ध19,20 के लिए प्रकृति और diagenetic परिवर्तन की हद निर्धारित करने के लिए मीनाकारी का नमूना लिया ।

4. सरल एसिटिक अम्ल (०.१ मी.) का उपचार

  1. उपयुक्त के रूप में एक संतुलन का उपयोग कर एक microcentrifuge ट्यूब में प्रत्येक नमूने के लिए तामचीनी पाउडर तौलना । तदनुसार ट्यूब लेबल । तामचीनी पाउडर एक समान आकार के कणों के साथ, एक ही डिग्री के लिए जमीन होना चाहिए ।
    नोट: कई शोधकर्ताओं ने एक ऑक्सीकरण एजेंट का उपयोग, जैसे ब्लीच पतला (NaClO) या 30% हाइड्रोजन पेरोक्साइड (एच2ओ2) एक नमूना से ऑर्गेनिक्स हटाने के लिए और इस बिंदु पर जोड़ा जाना चाहिए । हालांकि, न केवल इन एजेंट एक नमूना के स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप मूल्यों को बदल सकते हैं, लेकिन एक ऑन लाइन गैस तैयारी और परिचय प्रणाली में अस्थि कोलेजन नमूनों के स्पेक्ट्रा का प्रदर्शन है कि १००% फास्फोरस एसिड कार्बोनेट में उपयोग किया माप कार्बनिक नमूनों (चित्रा 5) के साथ प्रतिक्रिया नहीं है, सुझाव है कि यह कदम अनावश्यक है ।
  2. एक पिपेट का उपयोग कर प्रत्येक नमूने के लिए ०.१ एम एसिटिक एसिड (तामचीनी के प्रति 1 मिलीग्राम) की ०.१ मिलीलीटर जोड़ें । पिपेट के साथ नमूनों को छूने से बचें । यदि नमूना और पिपेट संपर्क में आते हैं, तो क्रॉस संदूषण से बचने के लिए अगले नमूने के लिए एक नए पिपेट का उपयोग करें ।
  3. आंदोलन, या तो झटकों के माध्यम से या एक इलेक्ट्रॉनिक आंदोलनकारी (चित्रा 3) और फिर 10 मिनट के लिए बैठने के लिए नमूने छोड़ने के लिए । तामचीनी पाउडर एसिटिक एसिड में समय की एक विस्तारित अवधि (> 4 एच) के लिए नहीं छोड़ा जाना चाहिए ।
  4. १३,७०० एक्स जी में 2 मिनट के लिए एक microcentrifuge में नमूने प्लेस
    नोट: एक कम लागत विकल्प एक मिनी का उपयोग है ३,५०० x जी, जो कम नमूनों रखती है, लेकिन कम समय लगता है जब बड़े नमूना सेट के साथ काम पर 4 मिनट के लिए केंद्रापसारक ।
  5. जब microcentrifuge कार्यक्रम बंद हो जाता है, ultrapure पानी की 2 मिलीलीटर के साथ एसिटिक एसिड की जगह एक साफ पिपेट का उपयोग कर, तो 2 मिनट के लिए १३,७०० x जी पर नमूने microcentrifuge
  6. ultrapure पानी दो बार बदल, पहले के रूप में, और तटस्थता के लिए परीक्षण । शेष द्रव एक पिपेट का उपयोग कर निकालें (supernatant परेशान किए बिना) ।
    नोट: ultrapure पानी के साथ तीन बहाकर की कुल तटस्थता को पाने के लिए मानक प्रक्रिया है । जब तक तटस्थता नहीं पहुंच जाती तब तक नमूने धोए जाने चाहिए ।
  7. Parafilm की चादरें (1 सेमी × 1 सेमी) और जगह प्रत्येक microcentrifuge ट्यूब पर कट । एक तेज वस्तु का उपयोग कर केंद्र में एक छोटा सा छेद करें ताकि नमूना उचित रूप से सूख जाता है ।
  8. किसी भी शेष द्रव को दूर करने के लिए एक फ्रीज सुखाने में ट्यूबों रखें ।
    नोट: यदि एक फ्रीज सुखाने उपलब्ध नहीं है, कोमल ओवन सुखाने (४० डिग्री सेल्सियस) भी एक संभावना है और स्थिर कार्बन और ऑक्सीजन आइसोटोप डेटा पर कोई प्रतिकूल प्रभाव नहीं होना चाहिए ।
  9. एक बार सूखा, Parafilm निकालें और microcentrifuge ढक्कन बंद कर दें । सुनिश्चित करें कि ट्यूब लेबलिंग सही है और यदि आवश्यक हो तो फिर से लिखें ।
    नोट: यह बाहर वजन के लिए भंडारण करने के लिए पहले अंतिम चरण है, जो सीमित धन के साथ प्रयोगशालाओं में विश्लेषण के लिए कहीं और नमूनों के वितरण से पहले अंतिम चरण हो सकता है ।

5. वजन और मापने के नमूनों और मानकों

  1. एक रंग का प्रयोग, बाहर वजन लगभग 2 मिलीग्राम तामचीनी पाउडर के एक टिन डिस्क पर एक ०.००१ मिलीग्राम (चित्रा 6) के लिए संवेदनशील संतुलन पर. तो ध्यान से एक फास्फोरस एसिड प्रतिरोधी borosilicate कांच की शीशी में नमूना हस्तांतरण । तामचीनी की इस राशि के दांत तामचीनी में कार्बोनेट के अपेक्षाकृत छोटे अनुपात के कारण विश्वसनीय परिणाम उपज के लिए आवश्यक है ।
  2. मेथनॉल का उपयोग कर नमूनों के बीच रंग साफ और प्रत्येक नमूने के लिए एक ताजा, स्वच्छ डिस्क या वजनी पोत का उपयोग करें ।
  3. इस तरह आईएईए NBS18, आईएईए ६०३, आईएईए CO8, या मर्क कएको छैन3के रूप में एक अंतरराष्ट्रीय मानक के ०.२ मिलीग्राम बाहर वजन । एक घर में एक बड़े दांत के homogenized तामचीनी से बने मानक के रूप में अच्छी तरह से20इस्तेमाल किया जा सकता है । ७६ नमूनों और मानकों का एक पूर्ण चलाने के लिए, उपयोग ६१ नमूनों और 15 मानकों, जो समान रूप से पूरे चलाने पर वितरित किया जाना चाहिए. कई अध्ययनों से सूचित किया है उचित संख्या में मानकों और विवरण के पुरातात्विक अनुसंधान20,28.
    नोट: दोहराया उपचार और घर मानक में एक तामचीनी के विश्लेषण, पुरातात्विक नमूनों के रन की एक संख्या के पार, भी20अध्ययन किया जा रहा नमूनों के लिए सटीकता का एक उचित उपाय प्रदान करने की संभावना है.
  4. विशेष रूप से डिजाइन किए गए ढक्कन कस, सुई के लिए सुलभ जब तक पट तंग है, लेकिन शीशी में चूसा नहीं है । पट पर दबाव के रूप में भी मजबूत हो जाएगा और अंततः विश्लेषण के दौरान एक टूटी हुई सुई में परिणाम कर सकते हैं के रूप में ढक्कन कस पर मत करो । ७० डिग्री सेल्सियस पर एक हीटिंग ब्लॉक के भीतर एक सूचीबद्ध क्रम में शीशियों प्लेस । आदेश और नमूनों की मोटाई मज़बूती से कंप्यूटर सॉफ्टवेयर में प्रवेश के लिए दर्ज किया जाना चाहिए ।
  5. तीन चरणों का पालन करके नमूनों को मापने: 1) फ्लश शुद्ध हीलियम के साथ नमूने भरें, 2) फॉस्फोरस एसिड जोड़ें, 3) नमूना उपाय ।
    1. परिवेशी वायु को फ्लश करने के लिए 5 मिनट के लिए १०० मिलीलीटर/मिनट के प्रवाह के साथ शुद्ध हीलियम (ग्रेड ५.०) के साथ नमूनों को फ्लश करें ।
    2. फॉस्फोरस एसिड (९९%, घनत्व १.८५ g/एमएल) के 4-5 बूंदें कार्बोनेट युक्त नमूना जोड़ें । नमूना और एच3पीओ4 के बीच प्रतिक्रिया शुरू होता है । प्रतिक्रिया के दौरान, co2 जारी किया गया है जो कार्बोनेट आयन सह32- नमूने के isotopic मूल्य वहन करती है ।
    3. जब तक सीओ2 के equilibration तक नमूना प्रति 1 h रुको पहुंच गया है । 1 घंटे के बाद, नमूनों को विश्वसनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए मापा जाना चाहिए । अधिग्रहण के दौरान, नमूना गैस का एक मिश्रण है और वह डिवाइस के लिए गुजरता है । एक सुखाने मंच नमूना गैस मिश्रण से पानी निकालता है ।
    4. एक ज्ञात isotopic रचना के साथ सह2 संदर्भ गैस की तीन चोटियों के साथ शुरू करके नमूना उपाय । चोटी की तीव्रता ४००० एमवी नमूना चोटियों की तीव्रता से मेल करने के लिए होना चाहिए (४००० के बीच ८००० एमवी). तीन संदर्भ गैस चोटियों 20 एस लंबी और 30 एस के अलावा होना चाहिए । नमूना के माप अंतराल को परिभाषित करने के साथ का पालन करें । 5 एस के लिए नमूना 10 बार उपाय प्रत्येक और ५५ एस के अलावा । सुनिश्चित करें कि पीक ऊंचाई नमूना/हीलियम मिश्रण (चित्रा 5) के उचित परिवहन का संकेत समय के साथ कम हो जाती है ।
      नोट: माप के दौरान, सॉफ़्टवेयर ज्ञात isotopic मान की तुलना करके नमूना की isotopic संरचना की गणना करता है, पीक ऊँचाई, और संदर्भ गैस के शिखर के क्षेत्र के साथ पीक ऊँचाई और नमूनों की चोटियों के क्षेत्र. raw 13c/12c और 18o/नमूना की16o संरचना परिकलित की जाती है ।
  6. माप के बाद नमूनों को सामान्य.
    नोट: यह महत्वपूर्ण है क्योंकि संदर्भ गैस नमूना गैस के रूप में एक ही रासायनिक और भौतिक पथ से गुजरना नहीं करता है जब जन स्पेक्ट्रोमीटर में शुरू की । इसलिए, यह आवश्यक है कि नमूने इसके अतिरिक्त अंतरराष्ट्रीय मानकों (५.३ कदम) है कि नमूना ही20के रूप में एक रन के भीतर ही शारीरिक और रासायनिक उपचार से गुजरना करने के लिए तुले हुए हैं । इन अंतरराष्ट्रीय कार्बोनेट मानकों अंतरराष्ट्रीय डेल्टा माप पैमाने पर नमूनों की दो सूत्री अंशांकन और एक दिया रन भर में सटीक और दोहराव का आकलन सक्षम करें ।

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Representative Results

ऊपर प्रस्तुत नमूना प्रक्रिया का उपयोग कर, वृद्धिशील तामचीनी bioapatite नमूने तैयार किए गए. तामचीनी में bioapatite का विश्लेषण नमूना की सटीकता पर निर्भर करता है, चाहे थोक या वृद्धिशील. इस मामले में, हम विभिंन जलवायु क्षेत्रों से पुरातात्विक नमूनों (दो भेड़) के परिणाम पेश करने के लिए चुना है । वृद्धिशील नमूने भेड़ दूसरी दाढ़ और ERJ (चित्रा 4) में शुरू लेबल से विश्लेषण किया गया । वृद्धिशील नमूना स्थान गिने गए थे, और प्रत्येक स्थान ERJ (चित्रा 7) से mm में अपनी दूरी के रूप में मापा गया था ।

दो भेड़ से विविध कार्बन और ऑक्सीजन स्थिर आइसोटोप परिणाम पुष्टि करते हैं कि वे विभिन्न वातावरण में रहते थे, इस मामले में एक उष्णकटिबंधीय चरागाह (ए) और एक शीतोष्ण शुष्क-कदम चरागाह (बी), क्रमशः. वृद्धिशील δ18हे भेड़ों के लिए मान ३.३ से ५.१‰ के बीच एक संकीर्ण सीमा दिखाने के लिए, इसी तरह के isotopic मूल्यों के साथ जल स्रोतों की घूस का सुझाव और वर्षण में मजबूत मौसमी बदलाव की कमी (चित्रा 8) । इसके विपरीत, भेड़ बी के लिए δ18हे मानों में भिंनता का एक उच्च आयाम है, ─ ५.२ से ─ १३.१‰ से लेकर, वर्षण में मजबूत मौसमी भिंनता का संकेत देता है । स्थिर कार्बन आइसोटोप मूल्यों के नमूनों के बीच में घूस वनस्पति में मजबूत मतभेदों का सुझाव, भेड़ एक होने के साथ मुख्य रूप से सी4 पौधों की एक आहार होने, जबकि भेड़ बी मुख्य रूप से सी3 वनस्पति घूस. इन भेड़ों विशेष रूप से पर्यावरण परिवर्तन वृद्धिशील ऑक्सीजन और कार्बन स्थिर आइसोटोप परिणामों में स्पष्ट प्रदर्शन के लिए चुना गया था ।

मानव दांत इसी तरह विकास धुरी के साथ मुकुट को ERJ से नमूने हैं । वृद्धिशील δ18हे और δ13ग एक rainforest पर्यावरण से एक मानव दांत के लिए मान अत्यधिक विवश कर रहे हैं, एक 2‰ रेंज के भीतर । इस तामचीनी mineralization की अवधि (9 अंक) पर चारा रणनीतियों में भिन्नता की कमी का पता चलता है.

Figure 1
चित्रा 1: एक दांत ड्रिलिंग । (क) एक दांत की तस्वीर एक रिग सेट पर ड्रिल्ड किया जा रहा है । (ख) तामचीनी पाउडर की तस्वीर टिन पंनी में एकत्र किया जा रहा है और एक १.५ मिलीलीटर माइक्रो-केंद्रापसारक ट्यूब में रखा (उचित लेबल के साथ) । (ग) वृद्धिशील नमूना के लिए उपलब्ध विभिन्न ड्रिल बिट्स की तस्वीर. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 2
चित्र 2: रिग सेट अप । जगह में ड्रिल के साथ सेट रिग की तस्वीर । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 3
चित्र 3: नमूना तैयारी । नमूना एक माइक्रो-केंद्रापसारक ट्यूब में रखा जा रहा है और रसायनों के बाद एक भंवर पर आंदोलन किया गया । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 4
चित्रा 4: संवर्द्धित भेड़ दांत नमूना । भेड़ दांत (A और B) जिसका संवर्द्धित नमूना लिया गया था । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 5
चित्रा 5: gasbench का वर्णलेख । समय के साथ संदर्भ गैस चोटियों और नमूना चोटियों की तीव्रता प्रदर्शित एक नमूना के एक वर्णलेख की तस्वीर । पया जन ४४, ४५ और ४६ हैं । पहली तीन चोटियों एक ज्ञात isotopic रचना के साथ सह2 संदर्भ गैस चोटियों हैं. का पालन करें कि दस चोटियों तीव्रता में कम नमूना चोटियों हैं. चोटियों हमेशा कई सेकंड से अलग किया जाना चाहिए चोटियों और इसलिए एक साफ चोटी एकीकरण के बीच एक सख्त भेदभाव सुनिश्चित करने के लिए । चोटी का पता लगाने के समय (ओं) प्रत्येक चोटी राज्य के शीर्ष पर संख्या । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 6
चित्रा 6: कार्बोनेट नमूना वजनी । एक रंग का उपयोग कर ग्लास शीशियों में भारित किया जा रहा नमूना की तस्वीर । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 7
चित्रा 7: एक भेड़ दांत पर वृद्धिशील नमूने । कार्बन और ऑक्सीजन स्थिर आइसोटोप मूल्यों के साथ साजिश रची क्राउन के शीर्ष करने के लिए ERJ से दांत की वृद्धि धुरी के साथ वृद्धिशील नमूने. कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 8
चित्र 8: भेड़ तामचीनी कार्बोनेट आइसोटोप परिणाम । स्थिर ऑक्सीजन और दो संवर्द्धित नमूना भेड़ दांत के लिए कार्बन आइसोटोप मान । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

Figure 9
चित्र 9: मानव तामचीनी कार्बोनेट आइसोटोप परिणाम । स्थिर ऑक्सीजन और एक संवर्द्धित नमूना मानव दांत के लिए कार्बन आइसोटोप मान । कृपया यहां क्लिक करें इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण को देखने के लिए ।

PCI (फास्फेट Crystallinity इंडेक्स) Equation 1 Sponheimer और ली-देहात, 1999b
अंय नाम:
सीआईआईआर (Crystallinity इंडेक्स इंफ्रारेड) Shemesh, १९९०
IRSF (अवरक्त विभाजन कारक) वेनर और बार-योसेफ, १९९०
BPI (बी-फॉस्फेट सूचकांक पर कार्बोनेट) Equation 2 LeGeros, १९९१
एपीआई (एक-फॉस्फेट सूचकांक पर कार्बोनेट) Equation 3 Sponheimer और ली-देहात, 1999b
बाई (सापेक्ष राशि बी-टू ए इट कार्बोनेट) Equation 4 Sponheimer, १९९९; Sponheimer और ली-देहात, 1999b
WAMPI (पानी फॉस्फेट सूचकांक पर छुटकारे) Equation 5 Roche एट अल., २०१०

तालिका 1: अनुभवजंय सूचकांकों कि तामचीनी bioapatite के क्रिस्टल रासायनिक गुणों की विशेषता । हम Sponheimer (१९९९), Sponheimer और ली-देहात (१९९९), और Roche एट अल से अनुभवजंय सूचकांकों का उपयोग करने की सलाह देते हैं । (२०१०) तामचीनी bioapatite के क्रिस्टल-रासायनिक गुणों को चिह्नित करने के लिए ।

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Discussion

दांत निकलना के सफल नमूना (थोक और वृद्धिशील) की चुनौतियों के अपेक्षाकृत सस्ती उपकरणों में निवेश के साथ ड्रिलिंग तकनीक और नमूना तैयारी के बारे में ज्ञान के उपयोग पर निर्भर करता है । स्पष्ट निर्देश नमूना और इलाज के दृष्टिकोण के विषय में उपलब्ध हैं जब इन चुनौतियों को आसानी से दुर्गम हैं. इस अनुच्छेद में, हम इन तरीकों के लिए नए शोधकर्ताओं के लिए एक स्पष्ट, संक्षिप्त फैशन में इन का प्रसार किया है उंमीद है । पहली बार के लिए इन तरीकों लागू विद्वानों के विश्लेषण और मूल्यवान पुरातात्विक और paleontological नमूनों के नमूने से पहले सुलभ आधुनिक जीव पर अभ्यास करना चाहिए ।

स्थिर आइसोटोप विश्लेषण के लिए मानव और पशु दांत तामचीनी कार्बोनेट का नमूना एक सरल प्रक्रिया है कि कई प्रयोगशालाओं में शुरू किया गया है । हालांकि, वहां तकनीक और दांत निकलना की ड्रिलिंग के साथ जुड़े प्रौद्योगिकी के लिए एक प्रवृत्ति को प्रयोगशाला द्वारा भिंन है और अंदरूनी सूत्र तकनीकी ज्ञान है कि खुले तौर पर साझा नहीं है की एक व्यापक सेट में शामिल किया जाना है । वृद्धिशील नमूना प्रमुख लाभ, आहार का सेवन और पानी की घूस में विस्तृत अंतर व्यक्तिगत भिंनता की पहचान की अनुमति है । यह बाध्यकारी विभिंन क्षेत्रों से व्यक्तियों के बीच आहार और पर्यावरणीय जानकारी के रूप में पाया मतभेद दांत तामचीनी bioapatite में संरक्षित है द्वारा सचित्र है । हमारे प्रतिनिधि डेटा में, महत्वपूर्ण isotopic भिन्नता शीतोष्ण सूखी-कदम घास के मैदानों (चित्रा 8) से भेड़ की तुलना में उष्णकटिबंधीय घास के मैदानों से भेड़ के बीच स्पष्ट है ।

प्रोटोकॉल के भीतर महत्वपूर्ण कदम ड्रिलिंग में सटीकता से संबंधित हैं, दांत तामचीनी के संरक्षण, और उपचार तकनीकों । ड्रिलिंग में छोटे अशुद्धियों, उदाहरण के लिए, दांत dentine में तामचीनी के माध्यम से, विशाल चर आइसोटोप माप29में परिणाम सकता है । दांत तामचीनी के संरक्षण तरीकों की एक किस्म के माध्यम से जांच की जा सकती है, एक दिया नमूना मापा की अनुमानित कार्बोनेट अनुपात सहित, साथ ही साथ स्विचेज सेट अप यहां चर्चा की । शोधकर्ताओं को भी दफन पर्यावरण की प्रयोगशालाओं को सूचित करना चाहिए, विशेष रूप से पानी लॉग इन या अंलीय मिट्टी में, जो जीवाश्म दांत तामचीनी के संरचनात्मक संरक्षण को प्रभावित कर सकते हैं । दांत तामचीनी की कठोरता संरक्षण, जो केवल ड्रिलिंग के दौरान स्पष्ट हो सकता है की एक प्रारंभिक संकेतक के रूप में माना जाना चाहिए । तामचीनी कि नरम और आसानी से drilled है पता चलता है कि bioapatite क्रिस्टल जाली नीचा हो सकता है और स्विचेज या अंय साहित्य में रिपोर्ट30के माध्यम से जांच की जानी चाहिए । नमूना उपचार में भिन्नता दांत तामचीनी21,22में सीमित isotopic भिन्नता में परिणाम के लिए लगता है. इसलिए, हम सरल प्रोटोकॉल का उपयोग सुझाव (जैसे, ०.१ मीटर एसिटिक एसिड से कम 4 घंटे के लिए आसुत जल के साथ धोने के बाद) ।

वहां तकनीक के लिए कई सीमाएं हैं, नमूना डिजाइन और व्याख्या के साथ जुड़े । अनुक्रमिक नमूनों ड्रिलिंग एक कौशल है कि गुरु के लिए कुछ समय लगता है । taxa और दांत का एक स्पष्ट समझ का विश्लेषण किया जा करने के लिए एक नमूना डिजाइन2,25तैयार करने में आवश्यक है । इसके अलावा, नमूनों की ड्रिलिंग को पूरा करने के लिए समय की एक काफी राशि ले सकते हैं । हालांकि, परिणामी कार्बन और ऑक्सीजन स्थिर आइसोटोप मान क्रमिक रूप से नमूना दांत निकलना के लिए शोधकर्ताओं आहार और पर्यावरणीय परिवर्तन ट्रैक करने के लिए अनुमति दें । के रूप में इन परिवर्तनों को प्राकृतिक मौसमी विविधताओं से संबंधित हैं, अक्सर प्राचीन काल में, विचारशील व्याख्याओं कि isotopic संदर्भ सेट में भिंनता की समझ के भीतर संदर्भित कर रहे है इस अनुसंधान6से अभिन्न हैं ।

लेख में, हम दोनों मानव और भेड़ दांत निकलना के वृद्धिशील नमूना और थोक नमूना प्रदर्शन किया है । इसके अलावा, हम दोनों नमूना सेट के लिए उपचार विधियों पर शोधकर्ताओं का निर्देश । वृद्धिशील नमूना विधि सफलतापूर्वक समान तामचीनी वृद्धि और mineralization (जैसे, पशु और घोड़े) के साथ प्राचीन और आधुनिक जीव के लिए लागू किया जा सकता है । तामचीनी bioapatite के उपचार के रूप में लेख में दिखाया प्राचीन अवशेष के एक पार से नमूने पर इस्तेमाल किया जा सकता है । हमारे नमूना प्रक्रिया से सबसे महत्वपूर्ण सबक थोक और दांत निकलना का वृद्धिशील नमूना है, जो आसानी से एक दस्तावेज़ में समझाया नहीं है । इसके अलावा प्रदर्शनों प्रजातंत्रीय बनाना सकता है अंय पुरातात्विक आइसोटोप नमूना और पूर्व उपचार दृष्टिकोण (जैसे, अस्थि कोलेजन निकालने या फैटी एसिड की स्थिर आइसोटोप माप के लिए पुरातात्विक मिट्टी के बर्तनों के नमूने) को बढ़ाने इस क्षेत्र में ज्ञान और प्रौद्योगिकी का प्रसार । इस तरह के लोकतंत्रीकरण, तथापि, विशेषज्ञों, या उपलब्ध साहित्य के साथ परामर्श के लिए एक पूर्ण प्रतिस्थापन के रूप में देखा जाना चाहिए, एक दिए गए संदर्भ में माप और व्याख्या के मानकों को स्थापित करने के लिए20,28.

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Disclosures

लेखक हितों के टकराव की घोषणा नहीं की ।

Acknowledgments

हम इस अनुसंधान के रूप में के रूप में अच्छी तरह से हाल ही में विभाग पुरातत्व, मैक्स प्लैंक मानव इतिहास के विज्ञान के लिए संस्थान में एक स्थिर आइसोटोप प्रयोगशाला की स्थापना के वित्तपोषण के लिए मैक्स प्लैंक सोसायटी का शुक्रिया अदा करना चाहूंगा ।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Dremel Micro Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/8050-micro
Diamond-tipped drill bit Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/accessories/7122-diamond-wheel-point
1.5 mL micro-centrifuge tube Sigma Aldrich https://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/t2422?lang=de&region=DE&gclid=EAIaIQ
obChMI7pHRpauW2QIV77ftCh1p1
wjhEAAYASAAEgKzkvD_BwE
Methanol Linear Formula: CH3OH
Acetic Acid Linear Formula: CH3CO2H
Dremel rig set-up (workstation) Dremel https://www.dremel.com/en_US/products/-/show-product/tools/220-01-workstation
Microcentrifuge Thermo Scientific http://www.thermofisher.com/order/catalog/product/75002401
Mini-centrifuge Sprout http://www.heathrowscientific.com/sprout-mini-centrifuge-4
Freeze drier Zirbus Technology http://www.zirbus.com

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References

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