Summary
Hier beschrijven we een eenvoudige methode om te induceren van klinisch relevante huid decubitus (PUs) in een muismodel van dwarslaesie (SCI). Dit model kan worden gebruikt in pre-klinische studies naar scherm voor verschillende therapeutics voor genezing PUs in SCI patiënten.
Abstract
Decubitus (PUs) zijn gemeenschappelijk invaliderende complicaties van traumatische dwarslaesie (SCI) en de neiging om het optreden in zachte weefsels rond benige uitsteeksels. Er is echter weinig bekend over de invloed van het GCB op huid wond genezing in de context van diermodellen in gecontroleerde experimentele instellingen. In deze studie wordt een eenvoudige, niet-invasieve, reproduceerbare en klinisch relevante muismodel van PUs in het kader van de volledige SCI gepresenteerd. Volwassen mannelijke muizen (Balb/c, 10 weken oud) waren geschoren en onthaard worden. Na ontharing (24u), muizen werden onderworpen aan laminectomie gevolgd door volledige ruggenmerg transect (T9-T10 wervels). Onmiddellijk na, was een vouw van de huid aan de achterkant van de muizen opgeheven en ingeklemd tussen twee magnetische schijven op zijn plaats voor de volgende 12 h, waardoor een ischemische gebied dat zich ontwikkeld tot een PU in de volgende dagen gehouden. De gewonde gebieden aangetoond weefsel oedeem en epidermale verdwijning door dag 3 na magneet toepassing. PUs spontaan ontwikkeld en genezen. Genezing was, echter langzamer in de SCI muizen vergeleken om te beheren niet-SCI muizen wanneer de wond is gemaakt onder het niveau van SCI. omgekeerd, werd geen verschil in genezing gezien tussen SCI controle niet-SCI muizen en wanneer de wond is gemaakt boven het niveau van SCI. Dit model is een potentieel nuttig instrument om te bestuderen van de dynamiek van huid PU ontwikkeling en genezing na SCI, evenals over het testen van therapeutische benaderingen die kunnen helpen deze wonden helen.
Introduction
Decubitus (PUs) zijn grote secundaire complicaties van traumatische SCI1. PUs zijn gelokaliseerde verwondingen aan de huid en/of de onderliggende weefsels, die meestal na verloop van benige uitsteeksels waar lichaamsgewicht is geconcentreerd optreden, terwijl de patiënt is zittend of liggend1. De huid vet en de spieren worden blootgesteld aan deze constante druk die tot de ontwikkeling van gelokaliseerde ischemie, ontsteking van het weefsel, mechanische schade en necrose2,3 leidt.
De ontwikkeling van PUs is beïnvloed door een aantal lokale factoren, met inbegrip van de grootte van de druk en shear, duur, huid vocht en temperatuur, letsel levensduur en algemene huid hygiëne laden. Er zijn ook systemische factoren die een rol, zoals de algemene lichamelijke conditie, bot en spier weefsel morfologie en sterkte4patiënten leeftijd, hematologische maatregelen, gender en zelfs sociaal-economische factoren spelen, met inbegrip van burgerlijke staat, onderwijs, en inkomen4,5.
De preventie en behandeling van PUs blijven belangrijke uitdagingen bij SCI patiënten. SCI patiënten ontwikkelen PUs in ~ 30-40% van de gevallen met een tarief van de re-voorkomen van 60-85%, wellicht als gevolg van de zwakke littekenweefsel en gebrek aan beschermende sensatie1. Dus, PUs leidt vaak tot opnieuw ziekenhuisopname van SCI patiënten, en over het geheel genomen vormen een aanzienlijke financiële last (80% meer vs. SCI alleen) naar de gezondheidszorg systeem5,6,7,8,9 , 10.
Tot de beste van onze kennis, zijn er geen studies in gecontroleerde experimentele instellingen te onderzoeken van het effect van het GCB op het genezingsproces van PU vanwege het gebrek aan geschikte diermodellen. Hier, wordt een reproduceerbare en klinisch relevante muismodel van PU in de huid beschreven. Dit model kan worden gebruikt om te studeren van de dynamiek van PU begin- en latere genezing, alsmede om te testen potentiële therapeutische benaderingen ter voorkoming van PU of verbeteren van PU genezing in de context van SCI.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alle dieren omgaan en chirurgische ingrepen werden uitgevoerd overeenkomstig een protocol goedgekeurd door de Rutgers Universiteit institutionele Animal Care en gebruik Comité. Muizen werden gevoed standaard voeding en water ad libitum.
1. bereiding van chirurgische en niet-chirurgische instrumenten
- De chirurgische en niet-chirurgische instrumenten in een autoclaaf steriliseren.
- Schoonmaken van het chirurgische operatietafel met 70% ethanol en warm een verwarming pad tot 37 ° C.
- Plaats de verwarming pad op de operatietafel en bedek het met steriele afdeklakens.
Opmerking: In alle procedures van de overleving, wordt de "No-Touch"-techniek hier gebruikt om de steriliteit.
2. voorbereiding van de dieren en het uitvoeren van de T9-T10 spinale laminectomie
- Volwassen (Balb/c) 10-week-oude mannelijke muizen aanschaffen. Verdoving in elk dier de begin van een inhalator met 5% Isofluraan veroorzaken, en vervolgens dalen tot 2-3% te handhaven van sedatie voor de rest van de procedures.
- Bevestig volledige verdoving door aanleiding kunnen geven tot geen reactie is op een staart/paw snuifje geïnduceerde Nociceptie stimulatie.
- Scheren van het haar over het dorsum (kop tot staart) met een elektrische clipper, en vervolgens toepassen de ontharende room (3 min) als u wilt verwijderen van de resterende haren. Tot slot was het dorsum met stromend water/nat scrub en de dieren terugkeren naar hun kooien.
Opmerking: Dit is nodig om het vermijden van extra irritatie van de huid en chemische verontreiniging op het moment van huid verwonding - De volgende dag, toepassing ophthalmic zalf op het hoornvlies te beschermen de ogen tegen het drogen tijdens de chirurgische ingreep en dan, scrub de huid met 3 alternatieve voorbereidingen van betadine scrub en 70% ethanol.
- Met een scalpel, uitvoeren van een huid incisie (~1.0-1.5 cm) langs de middellijn aan de achterzijde op het niveau van T8-T12 wervels.
Opmerking: Het niveau van de wervels wordt geïdentificeerd door het terug tellen de wervel van T13 met behulp van de locatie van drijvende ribs die met T13 wervel11,12 corresponderen. - Schakel het onderhuidse vetweefsel om toegang tot de paraspinal spieren en vervolgens ontleden ze langzaam om de spinous processen en laminae aan beide kanten bloot te stellen.
Opmerking: Doen deze procedure zeer zorgvuldig om te voorkomen dat overtollige bloeden of schade aan het ruggenmerg, op dit punt. - Een laminectomie blootstellen het ruggenmerg (T9-T10 wervels) door het voorzichtig peeling uit de spinale lamina microdissecting pincet gebruiken uitvoeren
Opmerking: Voer de laminectomie zodat een overmaat van het ruggenmerg is blootgesteld aan het vergemakkelijken van de oprichting van de schade. In de controlegroep, wordt alleen de laminectomie uitgevoerd.
3. uitvoeren van de Complete dwarslaesie van de T9-T10
- Met behulp van Tang, beveiligen de wervelkolom op T8 en lift omhoog te overdrijven de kromming van de wervelkolom.
- Met behulp van fijn schaar, sectie het ruggenmerg tussen de T9 en T10 wervel helemaal naar de bodem van het kanaal vertebral, om ervoor te zorgen volledige transect.
- Plak een stukje van onderhuids vet over deze laminectomie site voor extra bescherming voor het ruggenmerg vóór het sluiten van de chirurgische site na het observeren van de volledige transect onder een chirurgische Microscoop.
- Ten slotte sluit de wond en suture van de paravertebral spieren, oppervlakkige fascia, met behulp van continue hechtdraad en sluit vervolgens de huid met behulp van de12clips hechtdraad.
- Post-SCI, observeren de stoelgang op de eerstvolgende dag; echter de urineblaas worden beheerd door handmatige blaas evacuatie.
Opmerking: De Basso muis schaal (BMS) kan worden gebruikt om de voortgang van het stuk functionele herstel post-gcb op dag 2 en vervolgens per, Zie aanvullende figuur 111,12,13.
4. de inductie van cutane ulceratie van de druk na volledige SCI
- Onmiddellijk na de operatie van SCI, schrobben de achterkant van het dier met betadine en 70% alcohol.
- Voor een PU onder de SCI-site, injecteren in de dorsale huid in de buurt van het heiligbeen, een zeer kleine hoeveelheid (10 µL) 0,125% bupivacaine-oplossing met behulp van een 25 G naald equidistante plaatsen ~0.5-1.0 cm uit elkaar, in een ellips rond de magneet toepassing site.
Opmerking: Injecteren voor een PU boven de SCI-site, de dorsale huid in de buurt van de cervicale regio. - Zachtjes til een vouw van de huid op de rug van de muis en het sandwich tussen 2 magnetische schijven (5 × 12 mm diameter, 2,4 g/stuk, 3800 G magnetische kracht) (Figuur 1). 11 , 12
- Onmiddellijk na de toepassing van de magneet, terugkeer dieren naar één kooien geplaatst op weer een verwarming pad totdat volledige bewustzijn is (Figuur 1).
- Na 12 h van magneet toepassing, licht anesthetize dier met Isofluraan en verwijder de magneten. Neem een foto van de wond sites, om vast te leggen van de eerste verschijning van PU (dag 0 punt). Dekking van de wond met transparante dressing film (3M) drogen of besmetting te voorkomen.
5. post-operatieve dierenverzorgers, euthanasie en weefsel collectie voor histologie
- Onmiddellijk na de operatie, door het dier te injecteren met 1 mL van 0,9% zout subcutaan voor hydratatie.
- Subcutaan injecteren buprenorfine-SR (1 mg/kg) onmiddellijk voor analgesie.
- Injecteren subcutaan dierlijke dagelijkse meloxicam (1 mg/kg), en cefazolin (50 mg/kg gedurende 3-7 dagen), en tweemaal dagelijks handmatige blaas evacuatie.
- Plaats van dieren in één kooien en zorgen voor toegankelijke voedsel en water ad libitum. Muizen met volledige SCI kunnen lopen met behulp van hun voorpoten en aanpak van de voedsel en water zonder problemen.
- Verwijder chirurgische clips 7 dagen na de operatie van SCI.
- Op de gewenste tijdstippen na SCI en het verwonden van de huid, euthanaseren dieren na inademing CO2 (3-5 min), overeenkomstig de richtsnoeren van de AVMA inzake euthanasie14.
- Gewonde huid monsters verzamelen en oplossen in 10% formaline gedurende 24 uur op te slaan in 70% ethanol bij 4 ° C tot segmenteren.
- Voor het verwerken van weefsels, inbedden in paraffine en dunne gedeelten (5 µm) over een microtoom te genereren. Vlek met haematoxyline en eosine (H & E) te visualiseren weefsel morfologie (Figuur 3). Voor immunohistochemistry studies (Figuur 4), vlek secties met behulp van passende antilichamen voor Ki67 (proliferatie), CD31 (angiogenese), en alpha-gladde spier actine (α-SMA) zoals beschreven in Kumar et al.12
Opmerking: De software van de analyse van de afbeelding kan worden gebruikt te kwantificeren afbeelding functies12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Dit protocol creëert een PU in de omgeving van volledige SCI. kort (zoals wordt geïllustreerd in Figuur 1), alle muizen met of zonder volledige SCI getolereerd de magneten heel goed, die bleef in hun originele positie voor de volledige 12u (figuren 1 c, 1 d, 1f, 1 h ). Alle de muizen ontwikkeld twee cirkelvormige wonden, gescheiden door een brug van normale weefsel (Figuur 1e, 1 g, 1i). Het initiële antwoord van de verwonding was vergelijkbaar in muizen zonder SCI (Figuur 1e) of met SCI onder de SCI-site (Figuur 1 g) of boven de SCI-site (figuur 1i).
Figuur 2 toont de verdwijning van de epidermis op dag 3 van post magneet verwijdering, en de wederverschijning van dag 7, zij het met een aanzienlijk langzamer migratie in de wonden gemaakt onder het niveau van het gcb in SCI muizen.
De druk wonden waren ingedeeld volgens de criteria van de eerder gepubliceerde12. Figuur 3 en Figuur 4 verbeelden de helende functies in SCI en controle van niet-SCI muizen. De SCI groep tentoongesteld tragere genezing groter litteken-gebied, dunner epidermis en dermis en lagere dichtheid van delende cellen (Ki67+ cellen), bloedvaten (CD31+ cellen), en alpha-gladde spier actine (α-SMA+) in de huid wonden 11 , 12.
Wanneer de huid wonden boven het niveau van het GCB, zoals afgebeeld in Figuur 5, geen verandering in de genezing tijd, epidermale en dermale gemaakt waren werd diktes of litteken gebied gezien in vergelijking met niet-SCI besturingselementen.
Figuur 1 : Experimentele procedure voor het maken van druk wonden in niet-SCI (n = 3) en voltooien-SCI muizen (n = 3). Na 1 week gewenning in het laboratorium, muizen werden geschoren en onthaard worden van (een). Schematische voorstelling van magnetische schijf (M) plaatsing (b, gewijzigd van Stadler et al.15). Plaatsing van de magnetische schijven op huid dorsum van een normale muis en haar activiteit na herstel van verdoving in de kooi (d, c). In SCI muizen, schijven kunnen worden geplaatst onder (f) of boven (h) de SCI site. Het gebied van magneet-geïnduceerde huid schade is onmiddellijk na 12 h M toepassingsgebieden, waaruit blijkt van 2 wonden, gescheiden door een ongeschonden huid van een brug in de niet-SCI (e) en SCI muizen (g, i) zichtbaar. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 2 : Huid wond histologie (H & E vlek) en epidermale wond breedte. Op dag 3 en dag 7 na M toepassing, werden een aantal muizen in de niet-SCI (Control + M) en voltooien-SCI (SCI + M) groepen te bestuderen van de vroege effecten M-geïnduceerde ischemie en vervolgens reperfusie opgeofferd. Pijlen geven aan dat de randen van de epidermale wond, gelegen waar de epitheliale voering verdunt uit en verdwijnt. Schaal bar = 1 mm. breedte van de epidermale wond uitgedrukt in elke groep (n = 3 op elk tijdstip) wordt vertegenwoordigd in het onderste deelvenster bar diagram. Statistische significantie bepaald door Student t-test. * p < 0,05 en ** p < 0,01. Gegevens worden gepresenteerd zoals bedoel ± SEM (standaardfout van het gemiddelde). Dit cijfer is aangepast met toestemming van het dagboek van Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), gepubliceerd door Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY,12. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 3 : Impact van volledige SCI M-geïnduceerde PU ontwikkeling en genezing. (een) vertegenwoordiger beelden van huid wonden in niet-SCI (Control + M) en voltooien-SCI (SCI + M) muizen na PU inductie over de periode van 21 dagen. Schaal bar = 1 cm. (b) gekwantificeerde wond afbeeldingen tonen de breuk van de sluiting van de wond als een functie van de tijd. (c, d) Representatieve beelden van genezen wonden het litteken-gebied in niet-SCI en SCI muizen tonen. (e) gekwantificeerde litteken gebied in niet-SCI versus SCI muizen. (f, g) Representatieve histologie van de genezen wond huid (H & E kleuring) toont epidermis (E, dubbele pijlen), dermis (D, grote dubbele pijlen) en vetlaag (F). Schaal bar = 100 µm. (h) kwantificering van epidermale en dermale diktes van genezen wonden op moment van sluiting van de wond (21 dagen voor niet-SCI, en 35 dagen voor SCI muizen). Gegevens worden gepresenteerd als mean±SEM. statistische significantie bepaald door ANOVA gevolgd door post-hoc Fisher's LSD en Student t-test. * p < 0,05, ** p < 0,01, en *** p < 0,001. Dit cijfer is herdrukt met toestemming van het dagboek van Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), gepubliceerd door Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY,12. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 4 : Expressie van Ki67, CD31 en a-SMA in huid zweren van niet-SCI en SCI muizen. Wond weefsels zijn geoogst na sluiting van de wond, namelijk op dagen 21 (Control + M) en 35 (SCI + M) post-PU inductie. Representatieve beelden van 5 µm dik secties gekleurd met anti-Ki67, anti-CD31 of anti-α-SMA en gevisualiseerd met een 40 x doelstelling. Representatieve beelden van niet-SCI (a, d, g) en SCI (b, e, h) muizen Toon de verdeling van de Ki67+, CD31+, en α-SMA+ (bruine vlek, rode pijlen wijs sommige gekleurde gebieden) . Het % positieve gebied van meningsuiting zoals verkregen door beeldanalyse wordt vergeleken tussen de groepen (c, f, ik). Het gebied was gemiddeld drie 40 x velden (twee uit de wond randen) en één uit de wond center per sectie (2/muis, 3 muizen in elke groep). Gegevens worden gepresenteerd zoals gemiddelde ± SEM. statistische significantie werd bepaald door de Student t-test. Dit cijfer is herdrukt met toestemming van het dagboek van Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), gepubliceerd door Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY,12. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Figuur 5 : Impact van SCI ontwikkeling en genezing van maagzweren boven de SCI site. Representatieve beelden van zweren in de niet-SCI (Control + M) en SCI (SCI + M) muizen over de observatieperiode van (een). Schaal bar = 1 cm. Het litteken-gebied op dag 21 wordt vertegenwoordigd door cirkels (a) en waarden werden gemiddeld in niet-SCI en SCI muizen (b). Gekwantificeerde wond afbeeldingen tonen de breuk van de sluiting van de wond als een functie van de tijd (c). Representatieve histologie van de huid genezen ulcera met epidermis (E, kleine dubbele pijl) en dermis (D, grote dubbele pijl). Schaal bar = 100 µm (d). Kwantificering van epidermale en dermale diktes van genezen huid zweren wond afsluiting dag op tijd (21). Gegevens worden gepresenteerd als gemiddelde ± SEM. statistische betekenis bepaald door ANOVA gevolgd door posthoc Fisher's LSD test, of de Student t-test. NS-statistisch niet-significant. Dit cijfer is bewerkt en herdrukt met toestemming van het dagboek van Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), gepubliceerd door Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY,12. Klik hier voor een grotere versie van dit cijfer.
Aanvullende Figuur 1: Motor functie in SCI muizen werd beoordeeld met behulp van de BMS score op na letsel dag 2 en vervolgens per. De score van de BMS op dag 2 en week 5 waren 0,058 ±0.058 (mediane 0-no beweging, n = 17) en 0.35±0.12 (n = 17, mediaan-0). Gegevens worden weergegeven als mean±SEM. Dit cijfer is bewerkt en herdrukt met toestemming van het dagboek van Neurotrauma, 35, 6, 815-824, (2018), gepubliceerd door Mary Ann Liebert, Inc, New Rochelle, NY,12. Klik hier voor het downloaden van dit cijfer.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Het protocol in deze studie beschrijft een nieuwe experimentele model van PUs te evalueren van het effect van het GCB op wondgenezing. De huid PUs waren geïnduceerde via een 12u-toepassing van twee 12 mm diameter schijf magneten op een dorsale huid vouw, boven of onder de SCI-site instellen. Gegevens blijkt dat SCI vertraagt huid wondgenezing in muizen. Nog belangrijker is, deze opmerkingen werden speciaal gemaakt in de huid onder het niveau van de innervatie arm van het GCB, wonden als wonden gemaakt boven het niveau van SCI, en dus die bezenuwde bleef, werden grotendeels onaangetast in hun helende patroon ten opzichte van de niet-SCI muizen.
De PU-protocol hierin beschreven is gebaseerd op een eerder gepubliceerde methode gebruikt bij muizen, waar de zwakkere magneten (1000 Gauss) in drie cycli van 12u magneet toepassing gescheiden door 12 h zonder magneet15werden toegepast. In eerste instantie, vergeleken we met behulp van een, twee en drie 12u cycli van magneet toepassing. Een nadeel van het gebruik van herhaalde toepassingen is dat telkens bijzondere zorg moet worden genomen om de magneet van de huid vouw loskoppelen en opnieuw op exact dezelfde locatie. Een verzamelaanvraag is daarom veel eenvoudiger en was voldoende om te maken een PU in de muis dorsale huid vouw. Anders, deze methode vereist een complex apparaat geen verplaatsingen van dieren niet wordt aangetast en zeer reproduceerbaar is. Onderzoek met behulp van verschillende magneet maten, vormen en/of sterke punten, of probeert te maken van PUs in verschillende anatomische locaties wellicht afbeeldingsinstellingen van het protocol. Zoals in alle huid wond genezing studies is het belangrijk om correct toe te passen en regelmatig veranderen de transparante film die betrekking hebben op om te drogen en verontreiniging van het bed van de wond voorkomen.
Het mechanisme van PU formatie in dit model is gebaseerd op de drukkracht tussen twee magneten, die naar verwachting aanzienlijk overschrijden perfusie van capillaire en veneuze druk in de huid, en heeft eerder goed gedocumenteerd te induceren laesies in grotere dieren16. Met behulp van een cyclus van één 12u een cutane ulceratie die schade tot diep in de dermis, hetgeen overeenkomt met fasen I en II volgens de criteria van de kwaliteitsnorm15had gemaakt. Een beperking van deze techniek is dat we waren niet in staat om een fase III-IV PU. Daarom kan men de betrokkenheid van de spieren en botten in PU ontwikkeling en genezing zonder significante wijzigingen aan onze huidige model niet bestuderen. Bovendien, de PUs we genereren spontaan genezen en daarom niet getrouw vertegenwoordigen een chronische PU zoals kan worden gezien in de menselijke patiënten. Interessant, echter resulteerde de methode in een PU van de aanvankelijke vergelijkbare grootte afsluit met vergelijkbare dynamiek zo vaak gebruikt 1 x 1 cm full-dikte excisional huid wonden. De PU inductie methode spaart de onderliggende panniculus carnosus, terwijl het volledig is verwijderd in het excisional model. Dus het lijkt erop dat de panniculus carnosus niet een belangrijke rol in de wond sluiting proces, die speelt, in muizen en andere knaagdieren, voornamelijk via contractie overgebracht door fibroblasten en myofibroblasts in levensvatbare dermis rondom de wond site optreedt, met weinig litteken vorming17.
De site van PU inductie, boven of onder SCI, interfereert niet met de huid incisie gebruikt voor toegang tot de site van SCI. Dus de methode gemakkelijk toepasbaar onder of boven het niveau van het GCB, waarmee studies die de lokale vs. systemische effecten van SCI op wondgenezing kunnen onderscheiden. Zolang niet-SCI dieren gewichtstoename na PU inductie, is de groei van SCI dieren onvolgroeide. Ondanks deze diepgaande systemische verandering, wondgenezing niet geraakt toen de PU boven het SCI-niveau maakte. Dit model kan daarom worden gebruikt voor een beter begrip van de rol van de lokale innervatie van de arm in de wondgenezing. Zoals in alle studies waarbij SCI, is het belangrijk om speciale zorg en toezicht op de post-SCI-muizen, waarvoor handmatige aftappen van de blaas, toezicht op voorwaarden van de darm en profylactische behandeling met antibiotica11,12 .
SCI patiënten aanzienlijk worden uitgedaagd zelfs met de beste intramurale zorg en onderwijs, en huid PUs geven aanzienlijke kosten voor de Amerikaanse gezondheidszorg. Dankzij dit model kan side-by-side evaluatie van het effect van het GCB op huid PU ontwikkeling en genezing, die een platform biedt voor het testen van verschillende therapeutische strategieën die PU genezing in SCI patiënten kunnen helpen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
De auteurs hebben niets te onthullen.
Acknowledgments
Dit werk werd gedeeltelijk ondersteund door de Commissie van de New Jersey op Spinal Cord Research (CSCR15IRG010), het Amerikaanse ministerie van defensie (SC160029) en de Yale departement van chirurgie Arbo Research Grant Program. Wij danken Sean o ' Leary van het W.M. Keck Center for Collaborative Neuroscience, Rutgers voor technische bijstand.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Magnets | Master Magnetcs, Inc., Castle Rock, CO | CD14C | 3800 G Magnetic force |
| Mice standard diet | PMI Nutrition International, Brentwood, MO | Standard Food Pellet | |
| Isoflurane | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 029405 | |
| ImageJ | NIH, Bethesda, MD | Image Analysis Software | |
| BETADINE Surgical Scrub | HENRY SCHEIN Animal Health | ||
| Ophthalmic Ointment | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 008897 | |
| NAIR-Hair Remover Lotion | Church & Dwight Co., Inc. Princeton, NJ | ||
| ELOXIJECT (meloxicam) Injection | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 049755 | 5 mg/mL, 10 mL |
| Cefazolin Sodium | HENRY SCHEIN Animal Health | SKU 054846 | 1 g, 10 mL bottle |
| Buprenorphine-SR | ZooPharm, Windsor, CO | - | - |
| 0.9% Sodium Chloride Injection USP | BRAUN, Irvine, CA | S8004-5384 | |
| 10% Neutral Buffered Formalin | VWR, Radnor, PA | 16004-130 | |
| BALB/C Male Mouse | Charles River Lab., Wilmington, MA | 28 | |
| Sterile Cotton Tipped Applicator | Puritan, Guilford, ME | SKU#: 25-806 | |
| Michel Suture Clips | Fine Science Tools (USA) Inc., Foster City, CA | 12040-01 | |
| Surgical Suture, U.S.P. | Henry Schein Animal Health | 101-2636 |
References
- Rappl, L. M. Physiological changes in tissues denervated by spinal cord injury tissues and possible effects on wound healing. International Wound Journal. 5 (3), 435-444 (2008).
- Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. Animal models in pressure ulcer research. The Journal of Spinal Cord Medicine. 30 (2), 107-116 (2007).
- Mak, A. F., Zhang, M., Tam, E. W. Biomechanics of pressure ulcer in body tissues interacting with external forces during locomotion. Annual Review of Biomedical Engineering. 12, 29-53 (2010).
- National Pressure Ulcer Advisory Panel. Prevention and Treatment of Pressure Ulcers: Clinical Practice Guideline. , Cambridge Media. Osborne Park, Western Australia. (2014).
- Marin, J., Nixon, J., Gorecki, C. A systematic review of risk factors for the development and recurrence of pressure ulcers in people with spinal cord injuries. Spinal Cord. 51 (7), 522-527 (2013).
- Krause, J. S. Skin sores after spinal cord injury: relationship to life adjustment. Spinal Cord. 36 (1), 51-56 (1998).
- Redelings, M. D., Lee, N. E., Sorvillo, F. Pressure ulcers: more lethal than we thought? Advances in Skin & Wound. 18 (7), 367-372 (2005).
- Kruger, E. A., Pires, M., Ngann, Y., Sterling, M., Rubayi, S. Comprehensive management of pressure ulcers in spinal cord injury: current concept and future trends. The Journal of Spinal Cord Medicine. 36 (6), 572-585 (2013).
- Lala, D., Dumont, F. S., Leblond, J., Houghton, P. E., Noreau, L. Impact of pressure ulcers on individuals living with a spinal cord injury. Archives of Physical Medicine and Rehabilitation. 95 (15), 2312-2319 (2014).
- Li, C., DiPiro, N. D., Krause, J. A latent structural equation model of risk behaviors and pressure ulcer outcomes among people with spinal cord injury. Spinal Cord. 55 (6), 553-558 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on neovascularization and tissue granulation in mouse model of skin pressure ulcers. Journal of Neurotrauma. 34 (13), A72-A73 (2017).
- Kumar, S., Yarmush, M. L., Dash, B. C., Hsia, H. C., Berthiaume, F. Impact of complete spinal cord injury on healing of skin ulcers in mouse models. Journal of Neurotrauma. 35 (6), 815-824 (2018).
- Basso, D. M., Fisher, L. C., Anderson, A. J., Jakeman, L. B., McTigue, D. M., Popovich, P. G. Basso Mouse Scale for locomotion detects differences in recovery after spinal cord injury in five common mouse strains. Journal of Neurotrauma. 23 (5), 635-659 (2006).
- Leary, S., et al. AVMA Guidelines for the Euthanasia of Animals. , American Veterinary Medical Association. Schaumburg, Illinois, USA. (2013).
- Stadler, I., Zhang, R. Y., Oskoui, P., Whittaker, M. S., Lanzafame, R. J. Development of a simple, noninvasive, clinically relevant model of pressure ulcers in the mouse. Journal of Investigative Surgery. 17 (4), 221-227 (2004).
- Peirce, S. M., Skalak, T. C., Rodeheaver, G. T. Ischemia-reperfusion injury in chronic pressure ulcer formation: a skin model in the rat. Wound Repair and Regeneration. 8 (1), 68-76 (2000).
- Wong, V. W., Sorkin, M., Glotzbach, J. P., Longaker, M. T., Gurtner, G. C. Surgical approaches to create murine models of human wound healing. Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 969618-969625 (2011).
