Summary
여기, 우리는 여러 바이오 매스 소스 로부터 리그 닌의 에탄올 추출 수행 하는 프로토콜을 제시. 리그 닌 수율 및 β-O-4 콘텐츠 추출 조건의 효과 표시 됩니다. 선택적인 depolymerization 높은 방향족 모노 머 제품을 얻은 lignins에 수행 됩니다.
Abstract
리그 닌 어 전략 lignocellulosic 바이오 매스에 따라 경제적으로 경쟁 biorefineries 달성 하기 위한 핵심 요소 이다. 특정 아로마 제품을 신흥 우아한 절차의 대부분으로 네이티브 리그 닌 구조에 쉽게 쪼갤 β-O-4 결합의 높은 콘텐츠는 리그 닌 기판에 의존 한다. 이 매우 저하 되 고 따라서 β-O-4 연계에 낮은 전형적인 기술 lignins 미스 매치 제공 한다. 따라서, 획득된 리그 닌의 품질과 추출 수율 매우 중요 새로운 리그 닌 어 경로 액세스할 수 있습니다. 이 원고는 간단한 프로토콜 다른 lignocellulose 원본에 적용할 수 있는 상대적으로 가벼운 에탄올 추출 제시한 lignins 높은 β-O-4 콘텐츠를. 또한, 분석 절차는 lignins의 품질을 결정 하는 특정 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes, 획득된 lignins 평가 하는 데 사용할 수를 생성 하는 depolymerization 프로토콜 함께 제공 됩니다. 제시 결과 리그 닌 품질 및 lignins 특정 단위체 향기로운 화학 제품으로 depolymerized에 대 한 가능성 사이의 링크를 보여 줍니다. 전반적으로, 추출 및 depolymerization 절충 한 리그 닌 추출 수율 및 네이티브 aryl 에테르 구조 보존 하 고 따라서 대 한 화학 물질의 생산을 위한 기질으로 사용 하는 리그 닌의 잠재력을 보여줍니다. 값이 더 높은 응용 프로그램입니다.
Introduction
지속 될 화학 산업에 대 한 현재 지배적인 화석 들1에 안으로 lignocellulosic 바이오 매스 등 재생 재료를 사용 해야 합니다. 그러나, 같은 원료의 사용을 경제적으로 가능한, 고부가가치 응용 프로그램의 모든 내용에 대 한 발견 되어야 한다. Lignocellulosic 바이오 매스는 현재 몇 가지 응용 프로그램만 개발 되었습니다 낮은 값 연료2로 그것의 사용 저쪽 향기로운 biopolymer는 리그 닌의 약 30 wt %를 포함할 수 있습니다. 따라서, 잠재적으로 증가 값 향기로운 구성 요소 향해 방법론 미래 biorefineries의 성공을 보장 하기 위해 주요 관심입니다.
최근 연구를 특정 아로마, 일반적으로 페 놀, 단위체3,4 리그 닌에서 가장 풍부한 β-O-4 링크 (그림 1a)의 선택적 분열에 대 한 새로운 방법론의 개발에 무 겁 게 집중 했다 ,,56. 예를 들어 180 ° C에 80 ° C 사이 산의 응용 프로그램 알데하이드를 형성 하는 β-O-4 결합을 고착에 매우 효과적 이며 케 톤 조각7,8. 우리의 그룹 및 다른 최근 보여준 acidolysis 결합 안정화 방법론 및 트랩 반응 파편은 특정 화학 모티브9,10 페 놀 단위체를 매우 강력한 , 11 , 12. 이들의 특히 알콜 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals)를 가진 반응 알 데히드의 아 세 탈 트래핑 입증 강력한 상대 간단한 응용 프로그램 및 높은 기능성된 자연의 보존 리그 닌 단위체 (그림 1b)13,14의. 이 acetals G, S 단위체 상위 리그 닌 원료에 존재는 H의 분포에 관한 비율에 depolymerization에서 얻을 수 있습니다.
산 촉매 depolymerization, 가장 우아한 방법론의 많은 개발, 상대적으로 온화 하 고 리그 닌15에서 발생 하는 더 강한 C C 유대를 쪼개 하지 않습니다 처럼. 그러나, C-C 채권 될 가혹한 lignocellulose 분류 조건 반응 파편 약한 C O 채권16,17의 분열에서 발표의 응축으로 인해 적용 될 때 특히 풍부한. 메서드를 처리 하는 바이오 매스 로부터 β-O-4 콘텐츠 손실 다양 한 기술적 분석에 의해 명확 하 게 증명 됩니다만 100 향기로운 단위18당 최대 6 β-O-4 결합을 유지 하는 것을 보였다, lignins 동안 lignocellulose에서 이러한 숫자 범위 소스16에 따라 아로마 100 단위 당 90 연계에 45. 온화한 추출 조건에 선반, lignins는 더 나은 자연적인 리그 닌을 반영 하는 연계 배포판으로 얻을 수 있습니다. 그럼에도 불구 하 고,이 추출 효율과 획득된 리그 닌 소재17의 질 사이 교환을 요구 한다. 이것 또한 순위가 리그 닌의 organosolv 추출에는 리그 닌 충분치를 인기 있는 방법입니다. 다른 온도, 산 성 콘텐츠, 추출 시간 및 용 매를 사용 하는 방법으로이 프로세스 존재의 많은 유사. 여기, 추출 심각도 획득된 리그 닌 구조와 따라서 더 어19,,2021에 대 한 적합성에 직접적인 충격이 있다. 예를 들어 organosolv 리그 닌 데모 규모, 5 년 동안 운영 기반 에탄올 Alcell 프로세스에 의해 생성 했다 β-O-4 연계에 효율적인 delignification를 보장 하기 위해 상대적으로 높은 온도에서 운영 했다 왼쪽의 상대적으로 낮은 금액 바이오 에탄올 생산을 위한 고품질 탄수화물을 주문. 그럼에도 불구 하 고, 에탄올 같은 작은 환경에 미치는 영향으로 유기 용 매는 선호 되며 따라서 높은 가치의 lignins 결과 추출 방법의. 알콜 용 매는 추가 되 고 그들은 또한 예를 들어 리그 닌 구조에 통합 추출 매체에서 특정 관심의 β'-O-4 (그림 1a)22, 분할 "보호" 구조에서 원치 않는 분열입니다. 적당 한 방법은 잠재적으로 것입니다 먼저 리그 닌 높은 β-O-4 콘텐츠와 높은 값 셀에 액세스 하는 리그 닌의 나머지를 제거 하는 순차적 단계를.
이 원고에서 우리는 가벼운 에탄올 추출에 의해 높은 β-O-4 리그 닌의 추출에 대 한 정직 하 고 매우 재현 절차를 설명합니다. 바이오 매스 소스에 따라이 상대적으로 높은 추출 효율으로 이어질 수 있으며 항복. 획득된 리그 닌의 특성에 대 한 절차는 "deprotect" etherified β를 방법 제공 '-O-420. 또한, 평가 절차는 β-O-4 연계의 선택적 분열에 의존 하는 선택적 depolymerization 절차에서 이러한 lignins의 잠재력에 대 한 제공 됩니다. 이 평가 리그 닌 자료에서 β-O-4 콘텐츠 사이의 링크를 보여 주는 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes23 를 에틸렌 글리콜의 존재 iron(III) triflate 촉매 depolymerization를 사용 하 여 수행 되 고 단량체는21를 생성합니다. 결과 높은 리그 닌 추출 효율과 특정 아로마 단위체를 depolymerized 수 획득된 리그 닌의 잠재력 사이 균형을 보여.
Protocol
1. 리그 닌 추출 전에 호두 원료의 전처리
- 잘라 호두 포탄의 생산
- 호두 포탄 포탄 분쇄를 망치 커터에 피드. 콘센트에서 5mm 체와 망치 커터를 장비. 1 L 유리 비 커에 골절된 호두 껍질을 수집 합니다.
- 지상 조개를 마이크로 망치 커터에 골절된 포탄을 피드. 콘센트에서 2 mm 체와 마이크로 망치 커터를 장비. 1 L 유리 비 커에 지상 호두 껍질을 수집 합니다.
- 지상 호두 껍질에서 지방산의 추출
- 500 mL 둥근 바닥 플라스 크에 넣어 잘라 호두 포탄의 150 g. 둥근 바닥 플라스 크에 200 mL 톨루엔 및 교 반 막대를 추가 합니다.
- 둥근 바닥 플라스 크에 환류 콘덴서를 연결 합니다. 열 환류 온도 (111 ˚C) 활발 한와 2 시간에 대 한 기름 목욕에서 혼합물을 감동.
- 2 시간 후 난방을 중지 하 고 기름 목욕에서 그것을 제거 하 여 실내 온도까지 혼합물 식힙니다.
- 여과 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)는 톨루엔을 제거 합니다. 톨루엔 filtrate를 삭제 합니다.
- 80 ˚C와 50 mbar에서 진공 오븐에 호두 껍질을가 열 하 여 잔류물 하룻밤 톨루엔을 제거 합니다.
- 미리 추출 된 호두 포탄의 밀링
- ZrO2장소 7 ZrO2 그릇을 연 삭 250 mL 20 m m 직경을 가진 볼 연 삭에 의하여 이루어져 있다.
- 40 g 호두 입자의 그릇을 채우십시오. 연 삭 그릇에 소 프로 파 놀의 60 mL를 추가 합니다.
- 로터리 볼 밀과 호두 포탄의 연 삭을 수행 합니다. 2 분 4 분 일시 중지 다음 27 x g에서 연 삭의 4 사이클에 갈기. 언제 든 지 80 ˚C 아래 그릇의 온도 유지. 더 이상 3 일괄 처리를 수행 하 고 그릇 식 이후에 아래로.
- 가늘게 지상 수집 500 mL 둥근 바닥 플라스 크에 호두 껍질. 40 ˚C 125 mbar에서 회전 증발에 의해는 소 프로 파 놀을 제거 합니다.
- 건조 호두 껍질 50 ˚C와 50 mbar에서 진공 오븐에 하룻밤.
- 가늘게 지상 체 1 ㎜ 체 통해 호두 껍질. 회전 볼 밀으로 너무 큰 입자를 접지 합니다.
2입니다. 나무 재료의 준비
- 나무 판자의 절단
- 평평한 나무 속도 드릴 비트를 장착 한 드릴 아래 나무 판자를 놓습니다. 유리 비 커에 나무 부스러기를 수집 합니다.
- 더 작은 조각으로 잘라 커피 분쇄기에 나무 부스러기를 놓습니다.
- 나무에서 지방산의 추출
- 지방산의 추출 나무에서 정확 하 게 같은 방식에서 대로 수행 단계 1.2에서 호두 껍질에 대 한 설명.
참고: 나무의 아무 밀링이 수행 볼 밀에 1.3 단계에서에서 설명한 조건을 입자 크기의 감소 귀착되 지 않았다.
- 지방산의 추출 나무에서 정확 하 게 같은 방식에서 대로 수행 단계 1.2에서 호두 껍질에 대 한 설명.
3. 높은 β-O-4 Ethanosolv 리그 닌의 추출
- 온화한 에탄올 추출 (A 방법)
- 500 mL 둥근 바닥 플라스 크에는 원료의 25 g을 넣어. 80:20 에탄올/물 혼합물 (200 mL), 37 %HCl 솔루션 (0.24 M)와 둥근 바닥 플라스 크에 자석 교 반 막대의 4 개 mL를 추가 합니다.
- 둥근 바닥 플라스 크에 환류 콘덴서를 연결 합니다. 열 혼합물 atreflux 온도와 활기찬 5 h 오일 목욕과 감동.
- 기름 목욕에서 그것을 제거 하 여 실내 온도에 냉각 하는 혼합물을 허용 한다. 혼합물 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)를 필터링 하 고 에탄올의 4 회 25 mL와 잔류물을 씻어.
- 작업 및 리그 닌의 분리
- 500 mL 둥근 바닥 플라스 크에 주류를 수집 합니다. 40 ˚C 및 150 mbar에서 회전 증발에 의해 주류를 집중.
- 아세톤의 30 mL에서 얻은 고체를 용 해. 솔리드 완전히 분해 되지 않는 경우는 초음파 목욕을 사용 합니다.
- 물 600 mL에 혼합물을 추가 하 여는 리그 닌을 침전. 없는 강 수 발생 하는 경우 추가 적은 양의 포화 수성 나2그래서 flocculate는 리그 닌을4 솔루션.
- 여과 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)으로 리그 닌을 수집 합니다. 워시 물 25 mL와 리그 닌 4 번. 없는 분석 hemicellulose 분수의 경우는 여과 액을 삭제 합니다. 여과 액 아주 혼 탁 한 경우에, 원심 분리 관에 그것을 추가 하 고 원심 분리에 의해 (단단한) 바닥 분수를 수집 합니다.
- 공기에 리그 닌을 허용 하룻밤 건조 합니다. 리그 닌 더 (하룻밤에 50 ˚C와 50 mbar) 진공 오븐에서 건조.
- 리그 닌은 진공 오븐에서 하룻밤 말린 후 수익률을 결정 합니다.
- Klason 메서드24정한 총 리그 닌 콘텐츠로 나누어 리그 닌 추출 효율을 결정 합니다.
- 더 높은 온도 에탄올 추출 (방법 B)
- 250 mL 압력솥에는 원료의 15 g을 넣어. 80:20 에탄올/물 혼합물 (120 mL), HCl (0.24 M) 및 자석 교 반 막대의 2.4 mL를 추가 합니다.
- 열 5 h 5.2 x g.의 교 반 속도 대 한 120 ˚C에서 혼합 차가운 얼음 목욕 나중에 섞어.
- 혼합물 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)를 필터링 하 고 에탄올의 15 mL와 4 번 찌 꺼 기를 씻어.
- 3.2 단계에에서 설명 된 대로 정확 하 게 추가 작업 및 격리를 수행 합니다.
- 큰 규모 높은 온도 에탄올 추출 호두 껍질 (메서드 C *)의
- 1 L 고압 압력솥에 가늘게 지상 호두 껍질의 90 g을 넣어. 80:20 에탄올/물 혼합물 (750 mL)을 추가 하 고 H2의 6.25 mL 등등4 (0.12 M).
- 열 35.8 x g.의 교 반 속도와 5 h 120 ˚C에서 혼합 원자로 냉각 시스템 5 h 반응 시간 후에 설정 하 여 다시 실내 온도에 혼합물을 냉각 한다.
- 혼합물 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)를 필터링 하 고 에탄올의 75 mL와 4 번 찌 꺼 기를 씻어.
참고: 여러 개의 필터를 사용 하 여 많은 시간을 절약할 수 있습니다. - 2 동일한 일괄 처리에서 주류를 수집 합니다. 일 업 및 격리 단계 3.2 더블 양의 두 일괄 처리에 대 한 용 매에서 설명 된 대로 수행 합니다.
- 제어 실험 단계 3.1의. (방법 A *) 단계 3.3. (방법 B *) (선택 사항)
- 그래서4 (0.12M) H2의 대체 1.67 mL와 HCl 솔루션 3.1.1 단계에서 설명한 대로 일부 자료는 정확한 넣어. 3.1-3.2 단계의 나머지는 방법 A.
- 그래서4 (0.12M) H2의 대체 1.0 mL와 HCl 솔루션 3.3.1 단계에서 설명한 대로 일부 자료는 정확한 넣어. 단계 3.3의 나머지는 방법 B.
4. (선택 사항) 리그 닌의 드 etherification
- 1000mg 100 mL 둥근 바닥 플라스 크에 1:1 1, 4-dioxane/물 혼합물의 24 mL에 리그 닌의 분해. 혼합물에 37 %HCl 용액 1 mL를 추가 합니다.
- 교 반 막대를 추가 하 고 둥근 바닥 플라스 크에 환류 콘덴서를 연결 합니다. 열 혼합 100 ˚C와 활기찬 5 h 오일 목욕을 감동.
- 기름 목욕에서 그것을 제거 하 여 실내 온도에 아래로 냉각 하기 위하여 혼합물을 허용 한다. 하는 리그 닌을 침전 물의 160 mL에 혼합물을 추가 합니다.
- 여과 (185 m m 직경, 10 µ m 기 공 크기)으로 리그 닌을 수집 하 고 세척 물 25 mL와 리그 닌 2 번. 공기에 리그 닌을 허용 하룻밤 건조 합니다. 리그 닌 더 (하룻밤에 50 ˚C와 50 mbar) 진공 오븐에서 건조.
5입니다. 리그 닌의 분석
- 2 차원 핵 자기 공명 (2D NMR) 분석
- 60mg d6의 0.7 mL에 건조 리그 닌의 분해-아세톤. 리그 닌은 완전히 분해 되지 않습니다 경우 D2O의 몇 방울을 추가 합니다. NMR 튜브에 혼합물을 넣고가지고 2D 양성자 heteronuclear 단일 양자 일관성 스펙트럼 (HSQC) 다음 매개 변수는 NMR 분 광 기: (11,-1), (160,-10), nt 4, ni = 512 =20.
- 얻은 HSQC 스펙트럼을 분석 합니다. 모든 신호는 긍정적인,이 가로 (f2) 축 특히 중요 한 때까지 수동 단계 수정 두 축에 의해 스펙트럼을 조정 합니다. 아무 기본 수정 수행 합니다. 모든 관계의 위치 단계 5.1.3 5.1.6에에서 부여 됩니다.
- 향기로운 지역에 3 명의 다른 향기로운 단위 ( 그림 4에 의하여 번호 매기기 양성자)에 해당 하는 신호를 통합 합니다. 이러한 신호는 지역 [(Proton range) (탄소 범위)]:
S2/6: [(6.48-6.90)(104-109)]
S'2/6: [(7.17-7.50)(105-109)]
S응축: [(6.35-6.65)(106-109)]
G2: [(6.78-7.14)(111.5-116)]
G5: [(6.48-7.06)(115-120.5)]
G6: [(6.65-6.96)(120.5-124.5)]
H2/6: [(7.05-7.29)(128.5-133)]
참고: H3/5 G5 신호 오버랩 그리고 H2/6 H3/5으로 같은 강도 가정. 압축 된 G 위한 신호는 G5와 중복. G2 와 G6 신호 없음 (또는 거의 모든) 존재 하는 경우이 G의 전체 결로 발생 했음을 나타냅니다. - 수식으로 향기로운 단위의 금액을 계산:
총 방향족 = (((2/6 S + S'2/6) / 2) + S압축) + ((G2 + G5 G6-H2/6) / 3) + (H2/6 / 2) - G, H 및 S 단위 다음 수식으로 계산:
S 비율 = (((2/6 S + S'2/6) / 2) + Scondensed): 총 x 100% 아로마
비율 G = ((G2+ G5G6-H2/6) / 3): 총 x 100% 아로마
비율 H = (H2/6 / 2): 총 x 100% 아로마 - Hibbert Ketones, β β와 β-5 연계 β-O-4에 해당 하는 지방 족 지역 신호에서 신호를 통합 합니다. 이들은 지역 [(proton range) (탄소 범위)]:
Β-O-4α [(4.76-5.10)(73-77.5)]
Β '-O-4α [(4.44-4.84)(81.5-86)]
Β-O-4β 와 β'-O-4β [(4.03-4.48)(85-90.5)]
Β-O-4γ 와 β'-O-4γ [(3.10-4.00)(58.5-62)]
Β-5α [(5.42-5.63)(88-92)]
Β-5β [(3.36-3.56)(53-54.5)]
5 βγ [(3.50-4.00)(62-64.5)]
Β βα [(4.59-4.77)(86.5-89.5)]
Β ββ [(2.98-3.20)(55.5-59)]
Β βγ [(3.75-3.96)(72.5-76)]와 [(4.10-4.31)(72.5-76)]
홍콩γ [(4.20-4.30)(66-68)]
참고:는 β-양성자의 β-O-4와 β'-O-4 연계 오버랩. 이러한 연계의 구조 모티프는 그림 1에 부여 됩니다. - 100 c 9 단위 당 연계의 총 수는 관계의 α 양성자의 신호에 따라 모든. 다음 수식 관계의 총 수를 계산.
Β-O-4 연계 = (β-O-4α + β'-O-4α) / 향기로운 x 100 총
# Β-5 연계 =α β-5 / 총 향기로운 x 100
Β β연계 = β βα / 향기로운 x 100 총
- 겔 침투 크로마토그래피 (GPC) 분석
- (내부 표준으로 톨루엔의 드롭)과 tetrahydrofuran (THF)의 1 mL에 건조 리그 닌의 10 mg을 디졸브. 0.3 mL의 감소 볼륨 입구와 autosampler 유리병에이 혼합물을 0.45 μ m 주사기 필터를 통해 필터링. Autosampler 유리병 뚜껑을 닫습니다.
- THF GPC에는 샘플의 20 µ L를 삽입할. 얻은 데이터를 처리 합니다.
- 기준 신호 (톨루엔)에 대 한 얻은 신호를 수정 합니다. 올바른 범위에 대 한 차입 볼륨 선택 (~ 200-10000 다). 소프트웨어에 의해 질량 분포를 계산 합니다.
6. depolymerization Lignins 페 놀 2-Arylmethyl-1, 3-Dioxolanes (Acetals)에
- 반응 배는 자력을 갖춘로 20 mL 전자 레인지 유리병에 말린된 리그 닌의 장소 50 밀리 그램. 1, 4-dioxane (26 mg/mL)에 1, 4-dioxane, 에틸렌 글리콜의 1, 4-dioxane (0.54 mL/mL)에서 50 µ L, octadecane (내부 기준)의 50 µ L의 0.85 mL를 추가 합니다.
- 반응 배를 닫고 3.8 x g에서 교 반 하면서 140 ° C에 솔루션을 열.
- 반응 배 140 ° C에 도달 하면 1, 4-dioxane (0.1 g/mL)에서 Fe (III) OTf3 50 µ L를 추가 합니다.
- 15 분 동안 원자로 저 어.
- 실내 온도에 반응 기를 냉각 하 고 단계 7.1에서 설명한 대로 depolymerization 액체를 제거 합니다.
7. 작업 및 Depolymerization 혼합물의 분석
- Celite에 액체를 필터링 (침투성: 2.60-6-50 다아시; 입자 크기: 150 메쉬 타일러; 체 유지 (140 M 미국): 2.0-25.0%)와 2 mL 원심 분리기 튜브에 수집.
- 회전 진공 집중 장치에 35 ° C에 액체 하룻밤을 집중 한다.
- 다음 절차와 최종 오일/솔리드 압축을 풉니다.
- 일시 중단 및 0.15 ml dichloromethane (DCM)의 잔류물 (소용돌이)에 의해 광범위 한 혼합 쥡니다 및 자동 휠에 30 분 15 분 하 여 팽창.
- 최대 10 샘플 원심 사용 하 여 minispin 탁상 원심 분리기는 액체 튜브의 하단에는 s (원심 분리 속도: 671 x g).
- 광범위 하 게 (여 소용돌이 10 분 쥡니다) 0.75 mL 톨루엔과 믹스를 추가 합니다.
- 최대 10 샘플 원심 minispin 탁상 원심 분리기를 사용 하 여 s (원심 분리 속도: 671 x g)는 액체 튜브의 아래쪽에는 되도록.
- 고체 또는 두꺼운 기름 찌 꺼 기에서 빛 유기 액체를 분리 하 고 Celite의 플러그에이 액체를 필터링 유리 유리병에서 수집.
참고:이 절차에 서 스 펜 션/세 번 반복 하 고 마지막 추출 0.5 mL 톨루엔의 사용.
- 로터리 증발 (40 ˚C, 20 mbar)에 의해 결합 된 유기 단계를 집중.
- 가스 크로마토그래피 불꽃 이온화 검출기 (FID GC) 분석에 대 한 DCM의 1 mL에 기름 잔류물을 디졸브.
- GC-FID는 FID 검출기와 사용 캐리어 가스로 서 헬륨을 갖춘 GC를 사용 하 여 수행 합니다. 표준 설정: 1 µ L 주입, 50: 1의 분할 배급, 0.95 mL/분 장비 GC 장치 HP5 열 (30 m x 0.25 m m x 0.25 µ m)와 5 분 60 ° C 등온선으로 시작 되는 온도 프로 파일 실행의 헬륨 흐름. 260 ° c.에 20 분 동안 10 ° C/min 램프에 의해 후속 20 분 동안이 온도 개최.
- 수동으로 스펙트럼에서 봉우리를 통합 합니다. 봉우리의 정체 시간으로는 다음과 같은: octadecane (21.4 분), H-아 세 탈 (19.5 분), G-아 세 탈 (20.8 분), S-아 세 탈 (23.4 분). 단계 7.8에서 얻은 값을 사용 하 여를 정량화를 수행.
- 표준 복합 절연 사용 하 여 내부 표준 (octadecane) 교정 곡선에 따라 G 아 세 탈의 정량화를 수행 합니다.
참고: 보정 곡선: (R2= 0,9991)
G-아 세 탈을 얻을:
이전 결과9,,2123 응답 요소 각각 2.19와 1.82, H와 S 아 세 탈에 대 한 추정 했다을 기반으로 합니다.
Representative Results
그림 2에서 전처리 후 얻은 원료 (왼쪽된 열) 표시 됩니다. 모든 원료는 추출에 대 한 적당 한 입자 크기의 부스러기로 인수 되었다 너도 밤나무 나무 떨어져 있는 작은 칩으로 얻은 했다. lignins 얻은 추출 표시 후 색과 입자 크기의 넓은 범위. 가벼운 치료 (방법 A 및 두 번째 열 그림 2)에서 얻은 lignins는 일반적으로 색깔에 있는 빨강/분홍색 및 작은 조각으로 획득. 엄격한 조건이 적용된 (방법 B와 C *) 때 취득된 lignins는 갈색/갈색 노란 색상 (3, 4 열 그림 2). 수익률 (반응 계획 그림 1, 표 1에 결과) 온화한 조건에 비해 엄격한 조건 (방법 B 및 C*)에서 수행 하는 모든 기사에 대 한 증가 않았다. 이 효과 호두 (10.2% 증가), 너도 밤나무 (8.5% 증가) 및 삼목 나무 (5.1% 증가) 소나무 (만 0.5% 증가)에 비해 훨씬 더 심오한 했다. (호두 40.3%, 소나무2528.6%, 너도 밤나무25 18.8% 및 35.1% 삼나무25) 추출 하기 전에 바이오 매스의 리그 닌 내용에 따라, 너도 밤나무 나무의 리그 닌 추출 효율은 특히 높은 (73.9%), 반면에 낮은 추출 효율 얻은 다른 소스입니다. 메서드 A * B *, 제어 실험 방법 A와 B에 대 한 황산을 가진 일부는 추출 수율에 차이가 분명 했다. 황산 (방법 A *)와 호두 껍질의 온화한 추출은 염 산 (A 방법)와 추출 (2.6% 및 5.0%) 보다 현저히 낮은 2.6%의 매우 낮은 수익률만 했다. 엄격한 추출 조건, 황산 (방법 B *)와 추출 (19.3%와 15.2%), 염 산 (메서드 B)에 비해 높은 수익률을 보여줍니다 하지만, 설탕 성분 추출에 의해 얻어진 제품에는 주목 해야 한다 황산 산와.
(예를 들어 그림 4에 표시 된) 다른 lignins NMR 분석에서 연계의 양과 H/G/S 비율 결정 되었다 (표 1). Β와 β-O-4와는 β γ-양성자의 겹치는 때문 '-O-4 결합, 연계의 금액은 α-양성자를 사용 하 여 계량. 또한, G5/6 와 H3/5 신호 오버랩 하지만 이러한 H2/6 신호를 사용 하 여 그에 따라 비율을 조정 하 여 수정 될 수 있습니다. 또한, 해당 Hibbert Ketones와 리그 닌 끝 그룹에 발생은, 산화 S 단위, 신호 γ 양성자 하 신호 식별 됩니다.
NMR에서 얻은 비율은 일반적 방법 B 기사 제공 한다 리그 닌 방법 A 네이티브 소재 S 단위를 포함 하는 경우에 그에 비해 높은 콘텐츠를 표시 합니다. 또한, 메서드 B와 추출 방법 A, 온도 증가 따라 나타내는 증가 저하에 비해 총 β-O-4 연계의 낮은 금액으로 리그 닌을 제공 합니다. 예외는 A와 B는 총 β-O-4 연계의 금액은 매우 유사한 방법 방법에서 얻은 호두 리그 닌. Β β와 β-5 결합의 수는 낮은 정도로 엄격한 조건이 적용 될 때 감소지 않습니다. 또한, NMR 모든 lignins 얻은 에탄올 추출 β-O-4 결합의 구조 변경의 정도 보여준 후 공개 했다. 이 적어도 50% 인 α-ethoxylated β α-오 그룹에서 대체 '-O-4 링크. 리그 닌 추출 호두 껍질 (A 방법)의 가벼운 추출 4 번을 수행 하 여 입증 된 높은 재현성을 보여줍니다. 특히, β-O-4 연계의 총 수에 대 한 편차는 매우 작다. 가혹한 조건 (방법 B와 C *), α-ethoxylation의 비율에서 추출 되었다 수행 하는 때 증가 했다. HSQC에서 너도 밤나무 리그 닌의 스펙트럼 추출 가혹한 조건 (방법 B)에서 신호 S 응축은 표시, 맞는 완벽 하 게는 중요 한 β-O-4 결합의 양을 감소 하. 호두 추출 모든 관계에 대 한 상당한 감소에서 대규모 (방법 C *) 쇼를 수행 하 고 압축에 대 한 신호 HSQC 스펙트럼에 표시 됩니다. 온화한 조건 (A 방법)에서 삼목의 추출에 대 한 상대적으로 높은 수익률은 상당한 양의 지방산의 존재에 의해 발생 합니다. 제어 실험 황산 획득된 리그 닌의 성분에는 산의 효과에 좋은 통찰력을 했다. 온화한 추출 조건 (여 methodA *) 아주 순수 리그 닌 다른 가벼운 기사 (여 methodA)에 비해 구성에서 유사 했다 얻은 했다. Β-O-4 연계의 다소 낮은 금액 β의 낮은 수에 따른 리그 닌 프레임 워크에 에탄올의 덜 효율적인 설립에 기 인할 수 있다 '-O-4 연계. 엄격한 추출 조건 (방법 B *)에서 획득된 리그 닌과 차이 염 산 (메서드 B)의 추출 호두 껍질에서 얻은 리그 닌에 비해 훨씬 더 심오한입니다. Β-O-4 연계의 총 수 보여줍니다 날카로운 감소 (35 및 74, 각각) 리그 닌 황산으로 얻은 향기로운 지역 (48%), 통합의 S에 해당 하는 신호에 의해 결정 되었다에서 응축의 높은 금액을 보여줍니다 압축 하 고 G압축 (5.1.3 단계). 이 많은 양의 결로 향기로운 지역에서 비응축 보여 염 산 같은 추출에서 얻은 제품으로 황산에 완전히 인할 수 있다. 가혹한 큰 규모 추출 (방법 C *)에서 얻어진 제품의 구성 작은 규모 (방법 B *)에서 얻은 제품 큰 차이 보여줍니다. 유일 하 게 큰 차이점 대규모 추출 (9%)에 방향족 영역에서 응축의 낮은 금액은 이후 β-O-4 연계의 더 높은 금액. 이 차이가 다른 오토 클레이 브 난방 프로필에 차이 때문일 수 있습니다.
lignins 또한 GPC (그림 5) 분자량 (표 2)에 대 한 통찰력을 제공 하 여 분석 되었다. 이들은 그 때 엄격한 추출 조건 (메서드 B) 적용 되는 중량 평균 분자량 (Mw)와 증가할수록 증가 하 고 모든 소스에 대 한 공개. 수 평균 분자량 (Mn) 추출 조건 사이 각 소스에 대 한 비교할 수 있습니다. 전반적으로, 이러한 결과 엄격한 추출 조건 2 배 효과 있고 큰 조각 같은 파편의 추가 분석 뿐만 아니라 추출 됩니다 보여 줍니다.
일부 응용 프로그램, β의 형성 '-O-4 결합은 원하는, 예를 들어 benzylic (α) 수 산 기 그룹26,,2728의 산화에 의존 하는 depolymerization 메서드를 적용할 때. Β의 변화 '-O-4 일반적인 β-O-4 결합을 ethanosolv 리그 닌의 결합 이전에 보고 된20 그리고 호두 껍질에서 얻은 비교 호두 포탄이 보고에서 얻은 리그 닌 lignin 배치와 함께 수행한 종이 (그림 6)입니다. 이 리그 닌 이루어져 30 네이티브 β-O-4 연계 및 39 ethoxylated α β'-O-4 연계 (34 그리고 38 연계, 리그 닌이이 문서에 대 한 각각). 드 etherification 변환 거의 모든 α ethoxylated 연계 기본 구조 획득된 리그 닌 57 β-O-4 연계와 불과 3 α ethoxylated β의 구성으로 '-O-4 연계, β-O-4 단위의 총 수에서 작은 손실을 보여주는. 리그 닌의 질량은 에틸 그룹의 손실에 의해 주로 발생 하는 원래 리그 닌의 72%.
가벼운 depolymerization 통해 아로마 단위체의 생산에 대 한 리그 닌의 가능성을 입증 하려면3 에틸렌 글리콜의 존재 했다 Fe(OTf)와 acidolysis reations (그림 7) 수행. 이 반응은 세 가지 다른 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals) H, G, S 단위 제시는 리그 닌에 관련 된 생성 합니다. 표 3 은 보여준다 S, G 및 H acetals의 수확량 그리고 총 수익률은 그림 8에 표시 됩니다. 그것은 리그 닌 추출 방법 acetals의 항복을 받고 큰 효과 볼 수입니다. 낮은 수익률 리그 닌 가혹한 조건 (메서드 B)를 사용 하 여 추출에 대 한 얻을 수 있습니다. 이것은 더 수정된 (의 높은 비율로 α ethoxylation)으로 인해 이전 단락에서 설명한 구조를 응축.
Β-O-4 단위의 중요성 프로토콜 (그림 9)에 같은 depolymerization에 모노 머 수율에 상관 관계를 제공 하 여 반영 됩니다. 명확한 동향은 총 β-O-4 콘텐츠 및 etherified 비 β-O-4 관계, 높은 β-O-4 콘텐츠 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals)는 이전 결과21 라인의 높은 수익률에 일반적으로 결과 고려 하 고 볼 수 . Etherified β를 고려할 때 '-O-4 연계, 추세 또한 명확 하다, depolymerization 항복 하지 β의 수와 관련을 보여주는 '-O-4 연계. 반응 조건 하에서 etherified β-O-4 연계 드 etherified 수 있지만 앞에서 설명한 대로이 추가 단계 자료의 손실에 있는 결과.
전반적으로, 단위체 depolymerization 수익률 리그 닌 추출 수율에 대 한 수정, 다음과 같은 결과가 얻어질 수 있다 (표 4). 이 쇼는 그 비교 방법 A & B, 일반적으로 더 높은 양의 아 세 탈 얻어질 수 있다 엄격한 추출 (덜 선택적) depolymerization 다음 더 높은 전반적인 리그 닌 수익률을 제공 하 여. 그럼에도 불구 하 고, 파인 우드에 대 한 결과 또한이 바이오 매스 소스에 따라 이후 추출 심각도 증가 중요 한 수확량 증가 제공 하지 않습니다 보여줍니다. Β-O-4 구조의 보존은 더 높은 전반적인 페 놀 2-phenylmethyl-1, 3-dioxolane (acetals) 수익률에 게이 나무 종류에 대 한 선호 이다.
그림 1 . 얻은 제품의 화학 구조. (a) 일반적인 구조 작품으로 리그 닌 구조에. (b) 산 성 촉매 아 세 탈 트랩 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals)를 결합 하는 리그 닌 depolymerization. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2 . 다른 재료에서 리그 닌을 얻었다. 전처리 (1 단계와 2 단계) 후 4 개의 다른 lignocellulose 원료와 다른 조건에서 organosolv 추출 후 얻은 lignins 이미지 (방법 A-단계 3.1, 메서드 B 단계 3.3 및 방법 C *-단계 3.4). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3 . Ethanosolv 추출에 대 한 반응 방식. 취득된 연계의 개요: β-O-4 (R' = H), β'-O-4 (R' = 동부 표준시), β β와 β-5. 조건: (A) 80 ˚C, 0.24 M HCl (3.1 단계), ˚C (B) 120, 0.24 M HCl (3.3), 단계 (C *) 120 ˚C, 0.12 M H2이렇게4 (3.4 단계) 및 컨트롤 실험 A *, B * (3.5 단계). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4 . 리그 닌의 HSQC 분석. 모든 리그 닌 연계의 2D-HSQC 가벼운 치료 (3.1 단계)를 사용 하 여 호두 껍질에서 얻은 리그 닌의 측정. 홍콩γ 및 S에 대 한 신호 '2/6 그들을 볼 수 있도록 확대 됩니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5 . 리그 닌의 분자량. 소스 나눈 획득된 lignins의 GPC 그래프 (는 호두, b = 소나무 나무, c = = 너도 밤나무 나무 및 d = 삼목 나무). 라인은 표 2에 의해 주어진 다른 샘플에 해당합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 6 . 리그 닌의 드 etherification. 호두 껍질 (4 단계)에서 얻은 ethanosolv 리그 닌의 드 etherification의 반응 체계. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 7 . Acetals에 리그 닌 depolymerization. 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals) 리그 닌의 depolymerization에 대 한 반응 체계. H 단위: R1 R2 = = H; G 단위: R1 오메, R2 를 = = H; S 단위: R1 R2 = = 오메 (6 단계). 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 8 . 소스 당 아 세 탈 항복. 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals) 다른 소스에서 리그 닌의 depolymerization에서 얻은 생성 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 9 . 아 세 탈 수율에 β-O-4 결합의 영향. 총 β-O-4 (파란색)에 비해 리그 닌 depolymerization에서 얻은 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolanes (acetals)의 수확량 etherified 비 β-O-4 (오렌지) 및 etherified β-O-4 (회색) 리그 닌 원료에 콘텐츠. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
소스 | 조건 | 수익률 (%) | 추출 효율 (%)1 | S/G/H 비율 | 총 β-O-4 | Β-O-4 | Β '-O-4 | Β Β | Β-5 |
월 넛 | A | 5.0 ± 0.7 | 12.4 | 45/46/9 | 75 ± 2.5 | 36 ± 2.6 | 39 ± 3.1 | 11 ± 0.7 | 5 ± 1.5 |
월 넛 | A * | 2.6 | 6.5 | 47/45/8 | 53 | 32 | 21 | 9 | 4 |
월 넛 | B | 15.2 | 37.7 | 59/37/4 | 74 | 20 | 54 | 9 | 6 |
월 넛2 | B * | 19.3 | 47.9 | 75/25/0 | 35 | 5 | 30 | 7 | 3 |
월 넛2 | C * | 16.2 | 40.2 | 65/33/2 | 45 | 10 | 35 | 8 | 3 |
소나무 | A | 3.5 | 12.2 | 0 / > 99 / < 1 | 59 | 22 | 37 | 0 | 14 |
소나무 | B | 4.0 | 14.0 | 0 / > 99 / < 1 | 46 | 7 | 39 | 0 | 8 |
너도 밤나무 | A | 5.4 | 28.7 | 63/37/0 | 82 | 43 | 39 | 12 | 5 |
너도 밤나무3 | B | 13.9 | 73.9 | 83/17/0 | 45 | 11 | 35 | 9 | 2 |
삼나무 | A | 6.4 | 18.2 | 0 / > 99 / < 1 | 64 | 28 | 36 | 0 | 6 |
삼나무 | B | 11.5 | 32.8 | 0 / > 99 / < 1 | 41 | 7 | 34 | 0 | 7 |
표 1입니다. Ethanosolv 추출 결과. 바이오 매스에서 향기로운 유통 및 다른 기사에 대 한 연계 수행 수율 획득. * 황산은 산으로 사용 됩니다. 1 수익률 리그 닌 (Klason 리그 닌 결정에 의해 결정 되는 공급 원료에서 wt%)/Lignin 콘텐츠입니다. 2 Hemicellulose 그리고 제품에 현재 S 응축. 3S-단위의 32%는 집 광.
소스 | 조건 | Mn (g/mol) | Mw (g/mol) | Ð |
월 넛 | A | 1096 | 1805 | 1.65 |
월 넛 | B | 1174 | 2934 | 2.50 |
월 넛 | C * | 1248 | 2930 | 2.35 |
소나무 | A | 1331 | 3071 | 2.31 |
소나무 | B | 1319 | 3596 | 2.73 |
너도 밤나무 | A | 1645 | 3743 | 2.28 |
너도 밤나무 | B | 1368 | 4303 | 3.14 |
삼나무 | A | 860 | 1626 | 1.89 |
삼나무 | B | 1188 | 3292 | 2.77 |
제 표 2: 호 획득된 lignins 소자 분자 무게가
소스 | 조건 | 수익률 (%) | S/G/H 비율 | 총 β-O-4 | S 아 세 탈 (wt %) | G 아 세 탈 (wt %) | H 아 세 탈 (wt %) | 총 아 세 탈 수율 (wt %) |
월 넛 | A | 5.0 | 45/46/9 | 72 | 4.5 | 5.9 | 2.1 | 12.5 |
월 넛 | B | 15.2 | 59/37/4 | 74 | 3.6 | 4.7 | 1.0 | 9.3 |
월 넛 | C * | 16.2 | 65/33/2 | 45 | 3.8 | 3.9 | 0.6 | 8.3 |
소나무 | A | 3.5 | 0 / > 99 / < 1 | 59 | 0 | 9.9 | 0.3 | 10.2 |
소나무 | B | 4.0 | 0 / > 99 / < 1 | 46 | 0 | 1.1 | 0 | 1.1 |
너도 밤나무 | A | 5.4 | 63/37/0 | 82 | 7.7 | 6.7 | 0 | 14.4 |
너도 밤나무 | B | 13.9 | 83/17/0 | 45 | 3.6 | 3.4 | 0 | 7.0 |
삼나무 | A | 6.4 | 0 / > 99 / < 1 | 64 | 0 | 8.1 | 0.1 | 8.2 |
삼나무 | B | 11.5 | 0 / > 99 / < 1 | 41 | 0 | 4.7 | 0 | 4.7 |
표 3: 아 세 탈 리그 닌 depolymerization의 생성. 페 놀 2-arylmethyl-1, 3-dioxolones (acetals) 다른 소스에서 리그 닌의 depolymerization에서 얻은 생성 합니다. 조건: 50 mg 리그 닌, 60 wt % 에틸렌 글리콜, 10 wt % Fe(OTf)3, 용 매: 1, 4-dioxane, 140 ° C (1 mL 전체 볼륨), 15 분 (7 단계).
소스 | 조건 | 리그 닌 추출 수율 (%) | Β-O-4 | Β '-O-4 | 총 β-O-4 | 총 아 세 탈 수율 (wt %) | 전체 아 세 탈 수익률 리그 닌 추출 수율 (wt %)1 에 대 한 수정 |
월 넛 | A | 5.0 | 34 | 38 | 72 | 12.5 | 0.63 |
월 넛 | B | 15.2 | 20 | 54 | 74 | 9.3 | 1.41 |
월 넛 | C * | 16.2 | 10 | 35 | 45 | 8.2 | 1.33 |
소나무 | A | 3.5 | 22 | 37 | 59 | 10.2 | 0.36 |
소나무 | B | 4.0 | 7 | 39 | 46 | 1.1 | 0.04 |
너도 밤나무 | A | 5.4 | 43 | 39 | 82 | 14.4 | 0.78 |
너도 밤나무 | B | 13.9 | 11 | 35 | 45 | 6.9 | 0.96 |
삼나무 | A | 6.4 | 28 | 36 | 64 | 8.2 | 0.52 |
삼나무 | B | 11.5 | 7 | 34 | 41 | 4.7 | 0.54 |
표 4: 전반적으로 아 세 탈 항복 추출 수율 수정. 리그 닌 추출 수율에 대 한 수정 하는 서로 다른 소스에서 리그 닌의 depolymerization에서 얻은 페 놀 2-arylmethyl-1.3-dioxolanes (acetals)의 생성 합니다. 1 계산: 100 *(lignin yield/100) * (아 세 탈 수율/100 총). 조건: 50 mg 리그 닌, 60 wt % 에틸렌 글리콜, 10 wt % Fe(OTf)3, 용 매: 1, 4-dioxane, 140 ° C, 15 분 (6 단계를 통해 반응) & 7 단계를 통해 일 업.
Discussion
다른 조건에서 기사에서와 다른 바이오 매스 소스 로부터 결과 공개 β-O-4 결합의 상대적으로 높은 콘텐츠로 리그 닌 추출에 대 한 최적의 조건을 어떻게 소스에 따라 다를 수 있습니다. 가혹한 조건 (메서드 B)에서 호두 추출 동안 너도 밤나무와 삼나무 수확량 증가 하지만 β-O-4 단위, 양의 근처 유지와 수확량에 3 배 증가 제공 하는 예를 들어 β-O-4의 금액에 상당한 드롭 함께 단위입니다. 다른 한편으로, 소나무에 대 한 엄격한 추출 조건 항복에서 아주 작은 혜택을 제공 하 고 또한 β-O-4의 매우 낮은 금액으로는 리그 닌 이어질. 이 일반적으로 어떤 형태의 최적화 획득된 리그 닌 자료에서 리그 닌 수율과 β-O-4 단위의 금액의 보존의 형태로 품질 사이의 올바른 균형을 참여 하는 것을 의미 합니다.
엄격한 추출 조건에서 얻은 lignin 소재의 Mw 에 있는 큰 증가 이러한 조건 하에서 큰 조각을 추출 될 수 있다 더 높은 수익률을 제공 하는 방법을 보여 줍니다. 그러나, 이러한 조건에서 추가 조각화 발생, 추가 낮은 분자량 자료를 제공 하 고 볼 수 있는 명확 하 게 호두 (그림 5a)과 삼나무 (그림 5 d)의 GPC 그래프에 따라서는 증가할수록 증가 ~ 500 다에 신호의 형태.
HSQC NMR 다른 lignins의 품질에 비교 데이터를 제공 하는 중요 한 유익한 도구입니다. 그는 표준 HSQC 실험 수행이 절차에서는이 훌륭한 비교 데이터를 얻기 위해 이지만 반드시 휴식 시간 차이로 인해 양적은 주목 한다. 표 1 에 몇 가지 lignins 표시 관계의 높은 금액을과 대 평가. 양적 HSQC 실험 더 나은 결과 제공 하지만 훨씬 더 많은 NMR 시간, 대안 존재29비용. 우리의 경험에서는, 더 나은 100 향기로운 단위 당 β-O-4의 실제 금액을 반영 하는 1.3 배 표 1 에 번호를 구분 해야 한다.
앞서 언급 했 듯이, 보고 결과 어떻게 최대 모노 머 수율을 얻기 위해 소스에 따라 달라질 수 있습니다 최적의 조건을 찾는 지적. 예를 들어, 호두 시작 물자로 사용 하는 경우 전반적으로 총 acetals 항복 증가 약 두 번 더 가혹한 조건 (메서드 B) 리그 닌 추출에 대 한 고용 하는 경우. 그러나,이 β-O-4 콘텐츠를 영향을 주지 않고 리그 닌 추출 수율에 큰 차이 때문입니다. 다르게, 소나무는 온화한 추출 조건 (A 방법)는 바람직합니다. 사실, 두 가지 경우만 가혹한 조건에 매우 비슷한 수율에 리그 닌 추출 결과 이전 단락에서 설명한 것 처럼 β-O-4 단위 (특히 비 etherified β-O-4 결합) 같은 낮은 모노 머 수율에 대 한 이유가 있을 수 있습니다 드롭 발생할. Etherified 비 β-O-4 결합의 중요 한 손실을 관찰할 수 있습니다 뿐만 아니라 너도 밤나무과 삼나무의 경우에 조건 (메서드 B) 가능성이 낮은 단위체 수율에 이르게 추출에 적용 되는 경우. 그러나, 전반적인 아 세 탈 항복 추출 조건에 따라 그 정도 다 하지 않습니다. 사실, 리그 닌 추출 수율에 대략 2 배 증가 모두 바이오 매스 소스 B를 모노 머 수율의 약 두 배 감소에 대 한 보상 방법 A에서에서 전환에 대 한 관찰 됩니다.
Disclosures
저자 보고 충돌의 관심
Acknowledgments
작업 (광고 및 KB) 유럽 연구 위원회, ERC 시작 그랜트 2015 (CatASus) 638076에서에서 재정 지원 및 연구 프로그램 재능 (마리 퀴리 ITN 'SuBiCat' PITN-가-2013-607044 PJD, KB, JGdV), 유럽 연합에 의해 투자 되었다 프로젝트 번호 723.015.005 (KB), 과학 연구 (NWO) 네덜란드 조직에 의해 분할 융자 되는 체계 (돌아가기).
Materials
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Materials | |||
Iron (III) triflate | Sigma Aldrich | 708801-1G | purity: 90% |
Octadecane | Sigma Aldrich | 0652-100G | purity: 99% |
Celite | Alfa Aesar | H33152.0B | |
Silica Gel | SiliCycle | R12030B-1KG | P60 40-63 μm |
Dichloromethane | Macron Fine Chemicals | 6779-25 | |
Walnut shells | |||
Pine wood | |||
Cedar wood | |||
Beech wood | |||
Ethanol | JT Baker Chemicals | 00832000001 | Ethanol absolute |
Isopropanol | Acros Organics | 149320025 | 99.5+% extra pure |
Acetone | Macron Fine Chemicals | 2440-06 | |
Tetrahydrofuran | Boom B.V. | 164240025 | stabilized with BHT |
Toluene | Macron Fine Chemicals | 8608-02 | |
Water | Demi water from the internal supply | ||
1,4-Dioxane | Acros Organics | 408820010 | 99+% extra pure |
Hydrochloric acid | Acros Organics | 124620026 | 37% solution in water |
Sulfuric acid | Boom B.V. | 760519081000 | 95-97% |
Acetone-d6 | Acros Organics | 325320500 | 99.8 atom% D |
Deuterium oxide | Sigma Aldrich | 151882-100G | 99.9 atom% D |
Filters | Munktell | 400303185 | 185 mm diameter, 10 μm pore size |
Magnetic stirring bars | VWR | 442-4525 | |
Syringe filter | Sartorius | 17559-Q | 0.45 μm filter |
Autosampler vial (2 mL) | Brown | 151123 | |
Reduced volume inlet (0.3 mL) | Brown | 150820 | |
Autosampler caps (11 mm) | Brown | 151216 | |
Autosampler vial crimper | |||
Oil bath | |||
Syringes (1 mL) | Henke Sass Wolf | 4010-200V0 | |
Heating block-4 positions | IKA | ||
Micro tubes 2 ml | Sarstedt | 72691 | |
Crimp seals-20 mm | Brown Chromatography Supplies | 151287 | with Silicone/PTFE septa |
Equipment | |||
Rotary Ball Mill | Fritsch | 06.2000.00 | Laboratory Planetary Mono Mill PULVERISETTE 6 |
Hammer mill | Brabender | ||
Micro Hammer mill | Brabender | ||
Vacuum oven | Heraeus | Heraeus Vacutherm | |
Reflux setup and other glassware | CBN Suppliers B.V. | Reflux condensor, Roundbottom flask, Beaker glass and funnels | |
Rotary evaporator | IKA | ||
250 mL high pressure autoclave | Berghof | ||
1 L high pressure autoclave | Medimex | ||
Ultrasonic bath | Emerson | type Branson 3210 | |
NMR instrument | Bruker | Ascend 600 | |
THF-GPC | Hewlett Packard | 1100 series | |
Magnetic stirring plate | SalmenKipp | SK861492220263 | type x-1250 |
Coffee grinder | Profi Cook | PC-KSW1021 | |
Drilling machine | Solid | type TB 13 S | |
GC-FID | Shimadzu | ||
BUCHI Reveleris PREP purification system | Buchi | ||
BUCHI C18 column | Buchi | 150 mm × 21.2 mm × 10 μm | |
20 ml microwave vials | ??? | ||
Univapo 150 ECH rotational vacuum concentrator | UniEquip | ||
Eppendorf minispin tabletop centrifuge | Eppendorf | ||
SB2 rotator | Stuart | ||
Vortex | Wilten | ||
Processing Software | |||
WinGPC Unichrom | |||
MestReNova |
References
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