Summary
דליפה anastomotic או התמוטטות לאחר הניתוח היא הגורם העיקרי לזיהום לאחר הניתוח. הניתוח ליצירת השקה של המעי הגס הוא שיטה לשחזור ואמין ללמוד את מנגנוני הריפוי של חיבור.
Abstract
. חיבור מעיים מבוצעים בדרך כלל בפעולות בחירה והן מתהווה. למרות זאת, דליפות anastomotic סיבוכים המפחידים ביותר של ניתוחי המעי הגס והוא יכול להתרחש עד 26%. חיבור כירורגי, עם תמותה להיות עד 39% עבור חולים עם דליפה כזאת. כעת, נותר במחסור של נתונים המפרט את המנגנונים התאיים של ריפוי anastomotic. להמציא אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול עבור הנזילה anastomotic יכול להיות מאוד potentiated על ידי הבנה טובה יותר של ריפוי anastomotic המתאים.
מודל מאתר אידיאלי כפי שמחקרים קודמים הראו כי ההשקה מאתר המקרה האנושי לעומת דגמים אחרים בעלי חיים דומה ביותר מבחינה רפואית. אנו מציעים מודל מאתר בקלות לשחזור של השקה שטיפת המעי הגס בעכברים אשר יאפשרו להמחשה נוספת של ריפוי anastomotic.
Introduction
סיבוך המפחידים ביותר של ניתוחי השקה של המעי היא התמוטטות anastomotic או דליפה. דליפה anastomotic, אשר גורמת זליגת התכנים intraluminal לתוך חלל הבטן, היא סכנת והוא יכול להוביל במהירות אלח דם אינטרה-בטן; הלם המחירים משתנים בין 0.3% ל- 5.5% בעקבות חיבור המעי הגס קטן, לעלות בין 0.5% ל- 26% עבור חיבור חוקן1,2. שיעורי התמותה עקב דליפות יכול להיות גבוה ככל 39% בשל תחילתה מהירה של אלח דם והתקדמות מהירה למוות בעקבות זיהום intraabdominal3. אסטרטגיות מניעה ואופני הטיפול כיום מבוססות על פתופיזיולוגיה זה אינה מובנת במלואה.
כיום, ריפוי anastomotic מושווה לעתים קרובות למד באופן נרחב יותר עורית ריפוי הפצע, אשר היא להוכיח להיות עני יחסית פקסימיליה. ריפוי מתרחש בסדרה של שלבים חופפים, החל השלב הראשוני השהיה. במהלך ימים 0-4 לאחר היצירה של ההשקה מעיים, השלב השהיה מוגדר על-ידי לתגובה דלקתית חריפה שמנקה את הפצע של פסולת הסלולר. בשלב הבא, בימים 3-4, התפשטות fibroblastic, ייצור של קולגן מאפיינת את שלב fibrophasia. לבסוף, אחרי 10 יום תקופה ממושכת של קולגן שיפוץ מכונה שלב ההבשלה. חשוב שימו לב כי הכוח anastomotic הוא נמוך למדי, תלוי תמיכה חיצונית של סיכות שמוקם בניתוח או תפר עד קולגן הופקדו4. להבין את התפקיד והעיתוי כל שכבה של הקיר מעי משחקת ריפוי הפצע anastomotic ומעורבות סוגי תאים דלקתיים בתיווך כגון מקרופאגים, כמו גם סמנים הפונדקאית שחקרתי לחזות כשל anastomotic או הצלחה במידה רבה להפחית תחלואה, תמותה, הוצאות בריאות בעקבות פעולות המעי הגס5.
המודל מאתר הוכח במחקרים קודמים כדי להיות שימושי מחקה השקה האנושי6. אמנם יש דוגמאות פופולרי, מוכחות, למד היטב של המודל מאתר anastomotic מעי, במיוחד השיטה המתוארת על ידי Komen. et al. 7, מודלים אלה מעדיפות ileocecal או בסדר עולה colocolonic טכניקות anastomotic8. מחקרים קודמים של בני אדם חולים הראו הבדל משמעותי בשיעורי דליפה בין ileocecal, colocolonic, חיבור המעי הגס, המדגיש את הצורך בהמשך ניסיוניות אנטומיים במקומות שונים. שיטות נוספות, בשימוש העממי מכוונים לפיתוח מודל אשר במכוון יוצר דליפת anastomotic במקום להבהיר את המנגנונים התאיים הדרושים עבור ריפוי9הפצע anastomotic רגילה. מודלים עכברוש נוסו בעבר אבל המחירים של התבקעות anastomotic ו/או סימנים של דליפה (קרי, היווצרות מורסה) נמוך משמעותית מאשר בני אדם ו עכברים6,7. בנוסף, קווים ניסיוני יותר מהונדסים זמינים בעכברים מחולדות. זה הופך את המודל עכברוש פחות שימושי עבור מודל anastomotic. בנוסף, חזירי דגמים הכלבים היו החקירה קליני פחות מ-6,המודל מאתר7.
אנו מציעים הליך בטוח מבחינה טכנית פשוטה, בקלות ובמהירות לשחזור להקמת חוקן. חיבור במודל מאתר זה אמור להקל על חקירה נוספת מנגנון underreported שלריפוי הפצע anastomotic 10 .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
להלן כללי התנהגות אושרה על ידי האוניברסיטה של אוקלהומה מדעי מרכז מוסדי חיות בריאות הוועדה להשתמש (IACUC), תואם כל המוסדיים הנחיות אתיות לגבי מחקר בבעלי החיים. בנוסף, כל הניסויים בוצעו על פי תקנות מוסדיים, מדיני ופדראלי לגבי מחקר בבעלי חיים ניסיוני.
הערה: עבור פרוטוקול זה, השתמשנו congenic הנקביים והזכריים הישנות C57BL6/J עכברים בגיל 12-72 שבועות של גיל. כל העכברים המשמשים בהליך זה הוחזקו במתקן שלנו ללא מכשול לפחות שבוע לפני הפעולה כדי להתאים biome מקומיים. חיות הורשו כדי להאכיל את הזמן של המבצע, השתמשנו הכנה המעי מכני בעל פה וגם שטיפה פי הטבעת לפני ההליך.
1) יצירת חיבור
- אוטוקלב מכשירי הניתוח, לחמם את הפתרון מלוחים השקיה ולנקות ביסודיות כל המשטחים פעיל עם 70% אתנול.
- כדי לגרום הרדמה, במקום העכבר בתיבת אינדוקציה מחובר אליו מכשיר אידוי. לספק 2-3% איזופלוריין ב 1-2 L/דקה עד עכברים הם תרופות הרגעה.
- במקום החיה על התקן התחממות כדור הארץ, כגון כרית החימום, כדי למנוע היפותרמיה.
- Subcutaneously להזריק אחד זמן במינון של 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין (3 µg עכבר 30 g) על שיכוך כאבים לאחר הניתוח, פעם אחת במינון של 10 מ"ג/ק"ג של enrofloxacin עבור טיפול מונע אנטיביוטי לפני הניתוח.
הערה: למרות אנטיביוטיקה מראש, לאחר הניתוח אינם נדרשים עבור פעולה זו, המוסדיים הנחיות והחיה רבה ושימוש ועדה במוסד שלנו מומלץ השימוש במתקן שלנו. - מקם את קונוס האף הרדמה סביב האף של העכבר. במהלך המבצע, בזהירות את קצב הנשימה של בעל החיים, להתאים את קצב הזרימה הרדמה כנדרש. לשמור על קצב הנשימה ב- 30-40 נשימות לדקה.
- השתמש שיער clipper ואחריו סוכן depilatory להסרת השיער מעל פני העור כולו של הבטן. ביסודיות להסיר את הסוכן depilatory עם גזה שנרטבו עם מים או 70% אתנול. יבש ביסודיות את החיה.
- לפני מכינים את הבטן, להקליט את הגפיים של העכבר על כרית החימום או סוכן השטח בקצה של כל רגל כדי למנוע את העכבר ומזיזה במהלך הניתוח. לחטא את הבטן chlorhexidine. כוללים האזור מגולח כולו, כמו גם את השיער בקצוות של האזור המגולח. הצב תלוי סטרילי על העכבר (איור 1 א').
- לפני רפוי, חלון קטן אובאלית או מלבנית וחותכים את הכיסוי ותאבטחי לחשוף את הבטן שומר. על פרופיל
הערה: החלון צריך לחשוף את הבטן כל של העכבר אך לכסות את הגפיים, הזנב, הראש ואת החזה. חתכנו חלון2 4 x 3 ס"מ לפעולות שלנו (איור 1B). - לעשות חתך קטן לאורך הקו האמצעי מאסו, מהקצה התחתון לכיוון החלון אובאלית או מלבני, כדי לאפשר גישה אל פי הטבעת במהלך ההליך (איור 1C).
- לפני רפוי, חלון קטן אובאלית או מלבנית וחותכים את הכיסוי ותאבטחי לחשוף את הבטן שומר. על פרופיל
- עושים חתך בעור. להתחיל לאורך הקו האמצעי של הבטן התחתונה, פצעים וחתכים בעור עם מספריים אנכית כדי מצאתי. פצעים וחתכים רק את העור ולמנוע חיתוך את מערכת השרירים של דופן הבטן (איור 2 א).
- אחוז האמצע של קיר הבטן עם מלקחיים והרם מן התכנים בטן. מטפל שלא לפצוע מבנים intraabdominal, תחתכי את אורך קו האמצע בבטן fascia אנכית עם מספריים חדות. להאריך את אורך החתך בעור (איור 2B).
- כאשר המעיים חשופים, לאתר את המעי האטום ואת המעי הגס קטן, וסובב את הקרביים צד שמאל medially לחשוף את יורד ואת המעי הגס. מעיל קצה המקדח בוטה עם שימון ג'לי ולהתקדם בזהירות את החללית לתוך פי הטבעת כדי לסייע בזיהוי של המעי הגס היורד/סיגמואידי (איור 3).
הערה: בניגוד לבני אדם, המעי העכבר נמצא בדרך כלל ברבע העליון השמאלי של הבטן. הקפידו לא לנקב בקיר המעי עם החללית בשלב זה. אם המעי קיר הוא מחורר, לסיים את ההליך, המתת חסד העכבר.- הימנע האוחז את המעי האטום עם מלקחיים או שיניים חדות. במקום להשתמש מלקחיים atraumatic, כותנה המוליך משופעת, או אצבע עדינה מניפולציה כדי לסובב מעיים.
- שימוש חימם מלח סטרילית כדי להבטיח שהמעי הגס חשוף נשמרת לחות לאורך כל ההליך.
- המעי הגס יהיה בצד השמאל של קו האמצע, מצורף מקבץ דרך את מצע המעי. לאחר זיהוי, תיסוג המכשיר הקהה חלקית כדי להקל על colotomy.
- לבצע colotomy רוחבי של המעי העקול.
- לאחוז בעדינות המעי העקול מעולה לים האגן עם מלקחיים atraumatic (איור 4A).
- באמצעות מיקרו-מספריים חדות, לבצע חתך לאורך המעי העקול בניצב לכיוון של המעי הגס והארכת על פני 80-90% הרוחב של המעי הגס. זה יעזור למנוע הכחשה של קצה אחד של המעי הגס לעבוד בשטח כירורגית, וכדי להקל על תיקון (איור 4B).
- אם וריד מצע המעי העליון הוא נפגע במהלך הסיבוב מהבטן או colotomy, בעדינות להחזיק לחץ למשך עד 2 דקות עם גזה או של המוליך שקצהו כותנה. אם הדימום נמשך אחרי הזמן הזה, מקם את הספרה של-שמונה 8-0 בתפר monofilament סביב הנקודה של דימום.
הערה: אם המעי הגס מראה סימנים של נמק או פגיעה. אחרי זה, לסיים את ההליך, המתת חסד העכבר באמצעות שיטה הומאנית אושרה על ידי הוועדה המוסדית שימוש בבעלי חיים שלך.
- לתקן את colotomy סיגמואיד.
- באמצעות מנהל התקן המחט Castroviejo, מקום 5-6 פשוט קטע 8-0 nonabsorbable תפרים פוליפרופילן לתקן את למעי הגס. במקום תפרים 1 מ מ אחד מהשני, עם עקיצות 0.5 מ מ.
- לטפל כדי למנוע לגלגל את קצות המעי התיקון על ידי לקיחת serosa מעט יותר מאשר רירית עם כל תפר. . עזוב את הזנב באורך 5 מ מ הקפידו לא בטעות המעי שמסביב לתפוס לתוך התפר (איור 4C).
הערה: מומלץ להתחיל תפירת בבית ליד הגבול מצע המעי העליון של colotomy, חיסכון של אנטי-mesenteric-רוב חלק colotomy לסוף. - בהמשך לתיקון, בדיקה לנתיחה שקצהו בלאנט מראש טרנס-אנאלי כדי להתפרס התיקון לפני התפרים הסופי ממוקמים. זה יעזור למנוע צר מדי תיקון ולהקטין את שערי anastomotic stricture.
- לטפל כדי למנוע לגלגל את קצות המעי התיקון על ידי לקיחת serosa מעט יותר מאשר רירית עם כל תפר. . עזוב את הזנב באורך 5 מ מ הקפידו לא בטעות המעי שמסביב לתפוס לתוך התפר (איור 4C).
- באמצעות מנהל התקן המחט Castroviejo, מקום 5-6 פשוט קטע 8-0 nonabsorbable תפרים פוליפרופילן לתקן את למעי הגס. במקום תפרים 1 מ מ אחד מהשני, עם עקיצות 0.5 מ מ.
- באמצעות מזרק 10 מ"ל מלא מי מלח ומחוממת, להשקיית הבטן מספר פעמים. אם השטח מתחת העכבר הופך רטוב, לייבש את העכבר או הזז את העכבר על משטח יבש על מנת למנוע היפותרמיה.
- להשתמש גזה סטרילי הניח על החתך כדי לספוג עודף השקיה.
- ב ההשקייה הסופי, למלא את הבטן עם מלח סטרילית. בקפידה מראש angiocatheter 18 גרם משומנים לתוך פי הטבעת ונפח עם 0.5-1 ס מ3 של אוויר. זה תדגים הדלפות בשנת ההשקה, ממה אפשר לתקן עוד בתפר פוליפרופילן קטעה באמצעות המכשיר סטרילי כדי להתפרס ההשקה.
- השטחת קצה המעי הגס באמצעות את angiocatheter לפני ההסרה.
- ודא כי קיים אין דימום פעיל. אם יש, הפעילו לחץ עדין ישירות על גבי הדם במשך 1-2 דקות במקום תפרים hemostatic, כמתואר לעיל, אם הדימום ממשיך.
- בעדינות להחזיר את הקרביים medialized למיקומו אנטומי נורמלי (איור 5A).
- סגירת החתך בבטן (איור 5B).
- באמצעות 4-0 נספגים קלועה, מקום suture הריצה לאורך השכבה שרירים לקיר הבטן מתחילה בחלק העליון של החתך וגימור -ההיבט נחות של החתך. התקן עניבה, לחתוך את התפר להשאיר זנבות 5 מ מ.
הערה: לא לשלב בטעות המעי לסגירת דופן הבטן. - חזור על 4-0 בתפר monofilament לסגור את העור (איור 5C).
- באמצעות 4-0 נספגים קלועה, מקום suture הריצה לאורך השכבה שרירים לקיר הבטן מתחילה בחלק העליון של החתך וגימור -ההיבט נחות של החתך. התקן עניבה, לחתוך את התפר להשאיר זנבות 5 מ מ.
- ודא כי החיה כולו חם ויבש, כדי למנוע היפותרמיה לאחר הניתוח.
- לפקח בקפידה על החיה כפי זה מתאושש מן ההרדמה. לנהל 0.1 מ"ג/ק"ג. הבופרנורפין כל 72 h 2-3 ימים לאחר הניתוח לבקרת כאב. במהלך תקופת ההחלמה, עכברים צריך בזהירות להיבדק מדי יום סימנים של מורסה או אלח דם הצפק. תצפית שלאחר הניתוח עבור כאב ומצוקה צריכה לכלול: הגבלות על תנועה כולל hunching סוג של התנוחה, חוסר אכילה או שתייה, לא ראוי לטפח, דלקת מופרזת סביב הפצע, חוסר ריפוי תקין באתר של החתך, או קינון לא נורמלי. כל חיה הוכחת באחד מהמעשים האלה צריך להרדימם באופן מיידי על ידי חנק2 CO למשך תקופה מינימלית של 10 דקות ולאחריו ניקור חזה דו צדדיים.
- מערבבים 0.1 מ"ג/מ"ל של enrofloxacin עם מי השתייה של העכבר במשך 7 ימים לאחר הניתוח כדי למנוע זיהום אינטרה-בטן או אלח דם עקב זיהום צואתי המשויך הפעולה.
2) קצירת רקמות Anastomotic
- רגע לפני excising רקמה anastomotic, המתת חסד העכבר באמצעות שיטה הומאנית אושרה על ידי הוועדה המוסדית שימוש בבעלי חיים.
הערה: על סמך מדיניות מוסדית, אנחנו המתת חסד החיות שלנו על-ידי הצבתם בחדר פחמן דו-חמצני עם 100% פחמן דו-חמצני אינפוזיה גז ב 2 ל'/דקה במשך 5 דקות לפני ביצוע ניקור חזה דו צדדיים. - לעקר את הבטן עם chlorhexidine ואחריו 70% אתנול.
- מחדש פצעים וחתכים החתך קו האמצע המקורי עם מספריים חדות. מתחילים בקוטב התחתון של החתך הקודמות ולהרחיב את החתך הזה עליונית כדי מצאתי (איור 6A).
- באמצעות מספריים, לחתוך אל שכבת שרירים, לאחר הזנת את חלל הצפק, להרחיב את החתך העליון והתחתון של החתך. לטפל כדי למנוע ופצעו המעי הגס בעת הזנת הבטן או שיבוש ההשקה, שכן ייתכנו מעיים דבקה החתך או את אתר anastomotic.
- בזהירות לבצע סיבוב הקרביים המדיאלי השמאלי חשיפת המעי העקול המתוקן (איור 6B). סביר להניח יהיה הדבקויות מעיים כדי המעי המקיפים התיקון. בלשון בוטה ובעדינות לנתח אלה הדבקויות מן האתר של תיקון. . שמור על עצמך לא להפריע ההשקה.
- זהה את האתר לתקן על-ידי איתור זנבות התפר פוליפרופילן. נעשה שימוש עבור התיקון. באמצעות מספריים ואני מתחיל proximal לתיקון, 1 ס מ באופן רוחבי transect דרך המעי הגס. חזור על שלב זה 1 ס מ דיסטלי לאתר של ההשקה.
- להסיר את קטע sigmoidal על ידי בחדות לנתח המעי הגס מ מצע המעי צמוד לאורך הגבול האחורי של המעי הגס במספריים בסדר (איור 7).
- לזהות את הגבול מצע המעי העליון של הדגימה קולון ושימוש בסדר מספריים לחתוך לאורך הגבול מצע המעי העליון בצורה אורכית. פעולה זו תיצור חתך מרובע או מלבני של המעי הגס מן הדגימה גלילי בעבר הוסרו (איור 8).
- השתמש בעט סימון לתיחום הגבול אנטי-מצע המעי העליון של המעי הגס לפני להסרת מקטע המעי הגס. לאחר ההסרה, לבצע חתך אורכי לאורך המעי הגס מול הסימון. לתקן, להטביע על דגימת רקמות לחתוך לפי הצורך עבור היסטולוגיה ו/או immunostaining.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
ב 7 ימים לאחר הניתוח, ההשקה צריך גם להירפא. ניתן לקצור ההשקה בנקודות זמן לפני ואחרי שבעה ימים טוב יותר להמחיש את שלבי ריפוי anastomotic. איור 9, הניתוח היסטולוגית מראה שהותירה (קולגן דמיינו ידי מכתימה trichrome) התגובה מתווכת על-ידי שריר חלק אלפא-אקטין myofibroblasts חיובי. עם זאת, מצאנו כי תוצאות מניתוחי היסטולוגית משתנות בין עכברים, במיוחד את מידת epithelialization מחדש וריכוז של myofibroblasts באתר anastomotic. . מדווחים התמותה הליך זה להיות פחות מ-10%, עם יותר מ- 90% לשרוד עכברים שיש היטב נרפא. חיבור ב- 7 ימים.
איור 1: הכנה כורכת וכירורגי. בד סטרילי (א) א ממוקמת מעל העכבר לאחר הבטן כבר מוכנה. (B) A קטן אליפסה או מלבן הוא לחתוך את הכיסוי ותאבטחי לחשוף את הבטן. חתוך קטן (ג) א צריכה להיעשות לאורך הקו האמצעי של הכיסוי ותאבטחי ליד החלון אובאלית או מלבני, כדי לאפשר גישה אל פי הטבעת במהלך ההליך. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 2 : חתכים. (א) א מבצעים חתך מתבצע תוך דאגה לא לפצוע את הצפק. (B) הצפק הוא גבוה מן התכנים בטן, חרות חשיפת תכני אינטרה-בטן.
איור 3 : בדיקה השמה. בדיקה בוטה ימוקם בעדינות החלחולת. לאחר איתור המעי, מסובבים את תכולת הבטן medially להמחיש החללית רקטלי בעבר להציב.
איור 4 : Colotomy ותיקון. (א) סיגמואיד הוא אחז עם מלקחיים atraumatic. (B) באמצעות מיקרו-מספריים, עושים חתך לאורך המעי העקול בניצב לכיוון של המעי הגס, המקיפה 80-90% הרוחב של המעי הגס. (ג) באמצעות מנהל התקן המחט קסטרו-וייחו, מקום 5-6 פשוט קטע תפרים פוליפרופילן 8-0 כדי לתקן את colotomy. התפרים צריך להיות 1 מ מ אחד מהשני עם עקיצות 0.5 מ מ. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 5 : פצע הסגר. (א) האברים הקרביים מוחזרות למיקום אנטומי נורמלי שלהם. נסגר (ב') הבטן החתך בתפר קלועה 4-0. (ג) העור סגורה בתפר monofilament 4-0. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.
איור 6 : חתך הניתוח. (א) לפתוח מחדש החתך קו האמצע מקורי חושף את תוכן אינטרה-בטן. הקפד להרחיב את החתך עליונית רוחבית יותר חשיפה סיגמואיד. (B) לסובב את הקרביים medially חשיפת ההשקה סיגמואיד.
איור 7 : קציר ההשקה. הסר את הקטע של המעי לקרע, כדי ההשקה על ידי 1 ס מ מכל צד.
איור 8 : התמצאות למקטעי רקמות. חתך לאורכו של הגבול מצע המעי העליון בצורה אורכית. זה משאיר דגימה מלבני. זה מתאר הבנוי השקה סיגמואיד.
איור 9 : היסטולוגיה וניתוח immunohistochemical של מלא. שהחלים חוקן. ניתוח היסטולוגית מראה שהותירה (קולגן דמיינו ידי מכתימה trichrome) התגובה מתווכת על-ידי שריר חלק אלפא-אקטין myofibroblasts חיובי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ישנם מספר שלבים מרכזיים כדי להבטיח ההצלחה של ולצמצם את התחלואה/התמותה הקשורים בהליך זה. ראשית, להבטיח טיפול זהיר של רקמת המעי, לטפל כדי למנוע פגיעה המתיחה כשהוא מסתובב את הקרביים לחשוף את המעי הגס. מתח מיותר על המעי או מצע המעי יכול פציעה לנמק המעי המעי או להערכת ולגרום מן האתר של ההשקה. בנוסף, מלקחיים חדה או מלקחיים עם שיניים לא ישמש כדי להתמודד עם המעי הגס.
פגיעה המעי הגס נפרד מאתר של ההשקה המתוכנן, או במהלך הסיבוב מהבטן או על ידי ניקוב עם המכשיר הקהה, צריך לגרום המתת חסד של החיה. מניסיוננו, נמק המעי או פציעה יכול לגרום אלח דם אינטרה-בטן או מוות, תגובה דלקתית מוגבר מאוד מדי מקשה את השחזור של הדגימה anastomotic נרפא.
חיתוך של המעי הגס ישתרע באותה מידה של המעי הגס היורד ככל האפשר, אבל צריך לקחת כדי לא transect serosa המעי עם מצע המעי. מניסיוננו, חיתוך הכולל serosa-במיוחד מצע המעי יכול להוביל הכחשה של המקטע proximal של המעי הגס מקשה השקה, יכול להוביל לפציעה נוספת מנסה לשחזר את המקטע שקועה.
השקה אפשר לתקן עם התפרים קטע 5-6. עוד עשוי להיות נחוץ עבור עכברים גדולים. התפרים צריך להיות 1 מ מ אחד מהשני. התפרים המקום משני צדי הגבול מצע המעי העליון ולאחר מכן על לסירוגין צידי חיתוך להיפגש באמצע בגבול אנטי-מצע המעי העליון מקלה לחיבור תעלות יותר קל ומהיר. לפני התפר האחרון, פורש והחיבור עם המכשיר הקהה מבטיחה השקה פטנטים, מונע "גב-לקירות" ההשקה, אשר באופן יעיל מאתרים ומפסיקים את המעי הגס.
ודא hemostasis לפני סגירת בטן. למרות כיסוי אנטיביוטי לאחר הניתוח, hemoperitoneum את תקופת ההחלמה לאחר זיהום intraabdominal יכול להוביל שיעור מתקבל על הדעת של זיהום אינטרה-בטן ומחלת דבק.
כאשר קודם ביצוע הליך זה, מספר עכברים עלול ללכת לאיבוד בתוך התקופה שלאחר הניתוח. שיעור התמותה הראשונית שלנו לקרב את ערכיהן 30%. . מצאנו שזה יהיה בעיקר בזכות anastomotic stricture מובילים חסימה של נמק המעי, פירוט של תיקון anastomotic, או נמק המעי קיר מאתר של השקה ככל הנראה בגלל איסכמיה לאחר פציעה מצע המעי העליון. כל אלה יכולים להוביל זיהום אינטרה-בטן, אלח דם ומוות. פעם אחת, חווה בהליך זה, המנתח ההפעלה צריך לחוות שיעור התמותה של תחת 10%. ראיות של דליפה באתר anastomotic תת-קליני, מאויר על ידי מוגלה, הדבקויות צפופה באתר של ההשקה, היו קיימות ב- 10% נוספים. הליך זה יכול להיעשות בלי הסיוע של הגדלה, החיסרון הגדול שלה כמודל לשחזור ניסיוני הוא האתגר הטכני יחסית בהשוואה ileocecal או המעי היורד. חיבור. מצאנו זכוכיות מגדלת כירורגי מאוד מועיל בביצוע ההשקה תוך הקטנת הטראומה לדופן המעי. מיקרוסקופ כירורגי עשוי לשמש גם, אך לא מצאנו את זה הכרחי.
טכניקות רבות השתמשו כדי לתאר מודלים בבעלי חיים עבור ההשקה שטיפת המעי הגס; ניצול במיוחד מודלים עכבר, ארנב. מצאנו שיהיו במחסור של ההליכים לשחזור של יורד המעי הגס השקה במודלים של העכבר; אנו חושדים שזה בשל גודל קטן יותר של עכברים הגדלת הקושי הטכני של הליכים anastomotic. אולם, עכברים יש מבחר גדול וזמינות רחב יותר של קווים הטרנסגניים נוגדנים, לנקודה זו אינו זמין לשמש מודל השקה של המעי הגס. פיתחנו מודל הנוכחי לאחד דגם עכבר עם דגם של המעי הגס השקה.
הניסיון שלנו עם התהליך הזה כולל גם זכר וגם נקבה עכברים של גדלים והגילאים. בשלב זה, אנו לא משווים anastomotic פצע ריפוי תוצאות בין הגילאים, גדלים או המינים של עכברים, אבל בהחלט ייתכן הבדלים, מודל זה יאפשר את ההשוואה הזאת.
אנו מאמינים כי מודל זה יכול להיות בקלות ובאופן עקבי לשכפל, המשמשות ללימוד ריפוי הפצע anastomotic. אמנם אנו ממליצים יבול הדגימה הראשונה-שבעה ימים, מוקדם ומאוחר יותר נקודות הזמן עשוי להיות שימושי ב הממחישות ציר זמן של ריפוי anastomotic; להפגין, למשל, העברה מוקדמת של תאים דלקתיים, מגשרים לתוך האתר anastomotic, בתצהיר של קולגן מאת fibroblasts בשבועות שלאחר מכן.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים מצהירים כי יש להם אינטרסים כלכליים אין מתחרים.
Acknowledgments
אף אחד
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
- Murrell, Z. A., Stamos, M. J.
- Shaban, F., Carney, K., McGarry, K., Holtham, S. Perforated Diverticulitis: To Anastomose or Not to Anastomose? A Systematic Review and Meta-Analysis. International journal of surgery (London, England). , (2018).
- Chambers, W. M., Mortensen, N. J. Postoperative leakage and abscess formation after colorectal surgery. Best practice, research. Clinical gastroenterology. 18, 865-880 (2004).
- Ashkanani, F., Krukowski, Z. H. Surgery - Oxford International Edition. Intestinal Anastomosis. 20, 104-107 (2002).
- Raptis, D., Pramateftakis, M. G., Kanellos, I. Our 20-year experience with experimental colonic anastomotic healing. Journal of medicine and life. 11, 5-14 (2018).
- Pommergaard, H. C., Rosenberg, J., Schumacher-Petersen, C., Achiam, M. P. Choosing the best animal species to mimic clinical colon anastomotic leakage in humans: a qualitative systematic review. European surgical research. Europaische chirurgische Forschung. Recherches chirurgicales europeennes. 47, 173-181 (2011).
- Komen, N., et al. Colorectal anastomotic leakage: a new experimental model. The Journal of surgical research. 155, 7-12 (2009).
- Perry, T., Borowiec, A., Dicken, B., Fedorak, R., Madsen, K. Murine ileocolic bowel resection with primary anastomosis. Journal of visualized experiments : JoVE. , e52106 (2014).
- Pommergaard, H. C., Achiam, M. P., Rosenberg, J. Colon anastomotic leakage: improving the mouse model. Surgery today. 44, 933-939 (2014).
- Bosmans, J. W. A. M., Jongen, A. C. H. M., Bouvy, N. D., Derikx, J. P. M. Colorectal anastomotic healing: why the biological processes that lead to anastomotic leakage should be revealed prior to conducting intervention studies. BMC Gastroenterology. 15, 180 (2015).
