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Behavior

Tâche de conditionnement d'opéra pour mesurer la préférence de chanson dans les pinsons de zèbre

Published: December 26, 2019 doi: 10.3791/60590

ERRATUM NOTICE

Summary

Nous décrivons une technique pour évaluer la préférence de chanson dans les pinsons zébrés. Les femelles sont placées dans une cage à deux chambres et la préférence pour la chanson est mesurée par le nombre de fois où elle déclenche la lecture d'une chanson en atterrissant sur une perche dans une chambre, par rapport au déclenchement d'une chanson différente dans la deuxième chambre. Les atterrissages de perche sont comptés à l'aide de capteurs infrarouges.

Abstract

Un paradigme de conditionnement d'opéra est employé pour tester la préférence de chanson des pinsons zébrés femelles. Les pinsons sont placés dans une cage à deux chambres avec une ouverture de connexion et indiquent leur préférence pour une chanson en atterrissant sur une perche dans chaque chambre. En interrompant le faisceau infrarouge d'un capteur photoélectrique au-dessus de chaque perchoir, l'oiseau active la lecture d'une chanson à travers un haut-parleur situé de chaque côté de la cage. Un logiciel disponible gratuitement est utilisé pour déclencher la lecture de la chanson à partir de chaque perchoir. Pour déterminer la préférence de chanson de chaque animal, sa préférence de chambre est d'abord identifiée en déclenchant aucune lecture de chanson quand elle atterrit sur chaque perchoir. Cette préférence de chambre est alors comparée à sa préférence de chanson. Un seuil d'activité minimum est fixé pour s'assurer que la préférence est réelle. En utilisant cette méthode, nous montrons que les femelles jumelées préfèrent la chanson de leur partenaire. Cette méthode a été utilisée pour comprendre la contribution de la dopamine à la formation et au maintien de la préférence de chanson.

Introduction

L'une des questions fondamentales en biologie est la façon dont les animaux forment des liens affiliatifs. En particulier, quels sont les mécanismes neuronaux par lesquels ces liaisons sont faites et ces mécanismes de base sont-ils conservés entre les espèces de vertébrés? Le campagnol de prairie a donné des indices à certains des systèmes de neurotransmetteur qui sont importants pour la formation de paire-bond1,2,3. En particulier, la dopamine agissant à travers les récepteurs dans le noyau accumbens peut induire la préférence du partenaire dans les deux campagnols masculins et féminins4,5. Il n'est pas clair si les principes généraux qui sous-tendent la formation et le maintien des préférences des partenaires sont conservés de façon évolutive.

La monogamie est plus fréquente chez les oiseaux que chez les mammifères6. Par conséquent, la comparaison des mécanismes de comportement affiliatif chez les oiseaux à d'autres espèces est essentielle à la compréhension des fondations neuronales conservées7,8,9. En général, à travers de nombreuses espèces d'oiseaux chanteurs, le chant masculin est pensé pour servir d'indicateur honnête de la condition physique masculine10,11. Les oiseaux chanteurs mâles de pinson zèbre chantent pour attirer des compagnons et influencer la formation des paires monogames12,13. Ainsi, le chant peut être utilisé pour déterminer la préférence du partenaire chez ces oiseaux.

Les mécanismes par lesquels les femelles forment une préférence pour la chanson de leur partenaire sont inconnus. La mésotocine, l'homologue aviaire de l'ocytocine, semble jouer un rôle dans la formation de paires-liaisons dans les pinsons14,15. En outre, la dopamine a également été montré pour jouer un rôle dans la formation de paire-bond9,16,17,18. Par exemple, les niveaux de dopamine sont plus élevés dans le noyau accumbens de pinsons appariés par rapport aux pinsons non appariés9.

Pour étudier le rôle des systèmes de neurotransmetteurs sur la formation et l'entretien des liaisons de couple, nous avons mesuré la préférence de la chanson à l'aide d'un paradigme de test d'opéra équipé de capteurs infrarouges pour déclencher des lectures de chansons19. Le rapport des lectures de chansons a identifié la préférence de la femelle pour la chanson d'un mâle. Avant la tâche de conditionnement d'opéra, chaque femelle a été isolée pendant jusqu'à 48 h dans une chambre anéchoïque avec son partenaire pour les « femelles appariées » ou avec un mâle inconnu, pour des « femelles non appariées ». Pour tester l'effet de la dopamine sur la préférence de chanson, les femelles non appariées ont été traitées deux fois avec un agoniste de dopamine de D2R tandis qu'elles sont isolées avec le mâle inconnu. Ce paradigme comportemental est basé sur des études antérieures19,20 et est favorable à la recherche par les étudiants de premier cycle.

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Protocol

Toutes les expériences ont été approuvées par le Comité des soins et de l'utilisation en établissement du Département des sciences de W.M. Keck, conformément aux lignes directrices des NIH. Tous les animaux utilisés étaient des adultes (90 jours après l'éclosion).

1. Construction de la chambre de conditionnement d'opéra

  1. Construire une cage d'essai composée de deux chambres identiques, 15 x 15 x 17 pouces3 chacune (Figure 1A). Faire une petite porte (comme une entrée à chaque chambre) sur le côté de la cage près des perchoirs en coupant une petite fenêtre de 4,5 x 6 pouces2 qui est de 2,5 pouces du centre de la cage entre les chambres. Utilisez un morceau séparé de l'étagère pour faire une porte qui couvre la fenêtre.
    REMARQUE: La cage est faite à partir des étagères de fil pour des garde-dits qui peuvent être obtenus de n'importe quel magasin d'amélioration de l'habitat. La charnière de la porte peut être faite avec des tyroliennes.
  2. Couper les étagères avec des coupe-fils pour faire une ouverture de 4 x 6 pouces2 entre les deux chambres pour permettre à l'oiseau de se déplacer entre les chambres.
  3. Dans chaque chambre, placez une perche à 11 pouces du centre de la cage et 6 à partir du fond de la cage. Utilisez n'importe quelle perche qui convient au type d'oiseau testé et qui couvrira la largeur de la cage.
  4. Placez l'émetteur et le récepteur du capteur photoélectrique sur la cage directement au-dessus de chaque extrémité de la perche. Attachez les capteurs au fil au-dessus de la perche à l'aide de fermetures éclair.
    REMARQUE: Placer les capteurs sur un support rigide (p. ex., un dépresseur de la langue) peut aider à empêcher les capteurs de se tordre sur la cage métallique et de devenir désalignés. Il est important de tester le placement des capteurs avant chaque expérience en cassant manuellement le faisceau infrarouge (IR). Si les capteurs ne sont pas correctement alignés, un oiseau ne déclenchera pas un chant, ou l'atterrissage sur la perche peut être compté comme des événements multiples.
  5. Placez les lumières LED sous le cabinet sur le dessus de la cage pour fournir assez d'éclairage de sorte que les animaux se déplacent librement entre les deux chambres latérales.
  6. Placer les graines d'oiseaux et l'eau à côté de chacun des perchoirs.
  7. Placez un haut-parleur à chaque extrémité de chaque chambre.
  8. Pour réduire la diffraction sonore et les distractions audio et visuelles, placez de la mousse anéchoïque sur le périmètre de toute la cage, avec des trous laissés pour les portes de la cage et des bouteilles d'eau.
  9. Connectez le haut-parleur à un amplificateur audio et connectez l'amplificateur audio à la sortie sonore d'un ordinateur.

2. Connexion des capteurs

REMARQUE: Il existe deux ensembles de capteurs IR, chacun avec un émetteur et un récepteur. L'émetteur a un câble avec quatre fils (brun, bleu, noir et blanc). Le récepteur a un câble avec trois fils (brun, bleu et noir). Le fil blanc d'un émetteur est relié directement à l'entrée #1 sur le tableau I/O numérique. Le fil blanc du deuxième émetteur est relié directement à l'entrée #9. L'entrée de puissance AC a deux fils (généralement rouge et noir).

  1. Installer une carte I/O numérique(tableau des matériaux),ses pilotes, et le programme associé 'Measurement and Automation'.
    REMARQUE: La carte I/O numérique utilisée ici nécessite un bloc de connecteur et un câble ruban multifonction pour terminer l'installation. Alternativement, un appareil USB I/O ne nécessite aucune carte PCI (ou le bloc de connecteur requis et accessoires de câble ruban), et peut être exécuté sur un ordinateur portable.
  2. Connectez les deux fils bleus de chaque émetteur et récepteur ensemble. Fixez deux petits fils au fil noir du câble d'alimentation afin que le fil d'alimentation noir puisse se connecter aux fils bleus de chaque ensemble de capteurs.
  3. Connectez le fil d'alimentation noir et deux fils bleus à un fil commun. Connectez ce fil commun à l'entrée #2 ou à la 9e sur le bloc de connecteur.
    REMARQUE: Un ensemble de capteurs doit être connecté à des #1 d'entrée et #2 et l'autre ensemble de capteurs doit être connecté à des #9 d'entrée et #10.
  4. Pour les deux ensembles de capteurs, connectez le fil brun de l'émetteur et le récepteur ensemble. Pour chaque ensemble de capteurs, connectez les deux fils bruns au fil d'alimentation rouge AC.
    REMARQUE: Les quatre fils bruns sont reliés au fil d'alimentation rouge AC. Les capteurs photoélectriques sont alimentés par une entrée de 10 à 30 V et doivent être connectés à un convertisseur AC (par exemple, un convertisseur de 120 V à 12 V).
  5. Dans le cadre du programme de mesure et d'automatisation associé à la carte I/O numérique, déterminez l'ID de l'appareil pour la carte I/O en sélectionnant le menu Appareils et interfaces.
  6. Sélectionnez l'option 'Device Pinouts' pour déterminer le port et le numéro de ligne qui correspondent aux entrées dans 2.3.
  7. Vérifier que l'I/O détecte lorsque le faisceau IR est cassé à l'aide des panneaux d'essai... option dans le programme. Notez les iD de canal et de port pour chaque ensemble de capteurs.
    REMARQUE: Les indicateurs verts changent de couleur lorsque l'état du faisceau est modifié.

3. Installer des logiciels et du matériel pour compter les atterrissages de perchoirs

  1. Téléchargez et installez Sound Analysis Pro 2011 (SAP2011) et MySQL à partir de http://soundanalysispro.com/.
    REMARQUE: Il s'agit de freeware et est livré avec des instructions d'installation et un manuel d'utilisation.
  2. Ouvrez SAP recorder.exe.
  3. Pour configurer l'entrée du capteur afin que SAP puisse détecter les atterrissages de perchaudes et initier la lecture de chansons, cliquez sur l'onglet Appareils Operant dans la fenêtre de contrôle SAP Recorder. Cochez la case Enable Operant Training (NI Card Installed).
  4. Sélectionnez l'ID de périphérique approprié (le curseur Ports peut être réglé à 3). Pour chaque détecteur, indiquez le port et la ligne appropriés à partir des renseignements recueillis à l'étape 2.6.
    REMARQUE: Lorsque le port et la ligne sont réglés correctement pour chaque détecteur, la lumière passe du jaune au rouge.
  5. Dans la fenêtre principale de l'enregistreur SAP, appuyez sur Train pour activer les capteurs pour les canaux appropriés.
    REMARQUE: Un bouton jaune doit apparaître.
  6. Enregistrez le nom de l'oiseau en sélectionnant le numéro d'intérêt du canal (Presse canal 1 ou 2 onglet sur le côté gauche de l'écran), et dans la fenêtre identification et mode, tapez l'identification de l'oiseau dans le champ Nom.
  7. Pour vous assurer que le son est joué sur les haut-parleurs, manipulez les paramètres de l'onglet Sélection de sortie pour sélectionner l'appareil approprié connecté à l'ordinateur (c.-à-d. haut-parleurs) et le canal connecté au haut-parleur.
    REMARQUE: Des informations de configuration supplémentaires peuvent être trouvées dans le manuel d'utilisation Sound Analysis Pro.

4. Isoler les paires d'oiseaux et de recueillir le chant masculin

  1. Isoler un pinson mâle et un pinson femelle dans une chambre d'atténuation du son pendant 24 à 48 h. Au cours de cette cohabitation, recueillir la chanson masculine, qui est appelé la «chanson du partenaire».
    REMARQUE: Les oiseaux appariés sont un mâle et une femelle qui ont été logés ensemble pendant au moins 2 semaines. Les femelles non appariées sont placées avec un mâle pour seulement 24-48 h.
    1. Utilisez un microphone connecté à un amplificateur audio pour capturer la chanson du partenaire.
    2. Acquérir la chanson en utilisant Sound Analysis Pro 2011 et stocker la chanson sur un disque dur.
    3. Pour vérifier l'effet des systèmes de neurotransmetteurs sur la préférence de chanson femelle, donnez à la femelle une injection sous-cutanée de 50 L de saline (contrôle de véhicule) ou de quinpirole (1 mg/mL dans 0.9% salin) quand la paire est d'abord mise dans la chambre. Répétez l'injection après 6 à 24 h (voir Figure 1B).
  2. Créez des chansons pour la lecture dans la cage de conditionnement d'opéra.
    1. Créez un fichier .wav qui joue 'silence' à peu près la même longueur que les lectures de chansons.
      REMARQUE: Cela peut être fait à l'aide de n'importe quel logiciel d'édition sonore (par exemple, Audacity).
    2. Couper une chanson représentative (2-3 motifs) du mâle partenaire.
    3. Coupez une chanson représentative (2-3 motifs) d'un mâle inconnu.
      REMARQUE: Utilisez la même chanson masculine inconnue pour toutes les expériences.
    4. Filtrer les chansons de 300 Hz 10 kHz.
    5. Ajuster le volume de sorte que les chansons jouent à 70 dB (amplitude moyenne sur la durée de la chanson des haut-parleurs dans la chambre de comportement).
      REMARQUE: Le volume de la chanson est testé à l'aide d'un compteur de pression sonore qui est placé à la perche.

5. Testdez la préférence de chanson dans les femelles paires

  1. Déterminer la préférence de chambre latérale de la femelle.
    1. Avant l'essai comportemental, placez la femelle dans la cage d'essai pour lui laisser le temps de s'adapter à la cage pendant au moins 1 h. Assurez-vous que le pinson explore les deux chambres latérales en utilisant un objet pour faire bouger l'oiseau d'une chambre à l'autre par l'ouverture.
    2. Dans Sound Analysis Pro, sélectionnez l'onglet 'Playbacks'puis le bouton 'Sounds' dans la fenêtre principale.
    3. Sélectionnez le fichier audio .wav pour jouer 'Silence' de la chambre 1 et la chambre 2.
    4. Retournez à 'Main'et frappez 'Reset' sur le dessus des cases sur la droite.
    5. Après la période d'acclimatation, appuyez sur «Démarrer».
    6. À la fin de la session, appuyez sur «Stop». Notez le nombre de déclencheurs à chaque perche, qui est affiché dans les boîtes bleues.
      REMARQUE: Les données sont enregistrées dans une base de données MySQL. Avoir un nombre minimum de déclencheurs pour compter l'essai pour s'assurer que la femelle est assez active (p. ex., 12 perchoirs ou plus au total).
  2. Déterminez la préférence de la chanson.
    1. Répétez les étapes de la section 5.1, mais choisissez la chanson du partenaire à jouer à partir de la chambre latérale avec le moins de déclencheurs de perche (le côté non-préféré), et une chanson inconnue de la chambre latérale avec le plus de déclencheurs de perche (le côté préféré).
      REMARQUE: La chanson du partenaire est jouée à partir de la chambre latérale avec le moins de déclencheurs pendant la lecture du silence (le côté non-préféré).
    2. Appuyez sur 'reset' avant de commencer le 1 h avec la lecture de la chanson.
    3. Calculez la préférence de la chambre et de la chanson en divisant le nombre de déclencheurs sur la chambre latérale en jouant la chanson du partenaire par le nombre total de déclencheurs.

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Representative Results

Suivant le protocole, nous avons constaté que les femelles jumelées préféraient la chanson de leur partenaire (Figure 2A). Il y avait une différence significative entre la préférence de chambre latérale pendant le silence et celle pendant la lecture de la chanson (t-test corrigé pour de multiples comparaisons; p - 0,004; t - 3,35, df - 16). Ainsi, la femelle a préférentiellement déclenché la chanson de son partenaire par rapport à la chanson d'un mâle inconnu.

Les femelles qui ont été jumelées avec un mâle inconnu pendant 24-48 h et donné des injections salines n'ont pas eu une préférence pour sa chanson au-dessus du chant d'un autre mâle inconnu. C'est-à-dire qu'il n'y avait aucune différence entre la préférence de la chambre latérale lors de l'atterrissage sur une perche qui a déclenché le silence par rapport au chant (t-test corrigé pour de multiples comparaisons; p - 0,726; t - 0,357, df - 16). Par conséquent, les femelles logées avec un mâle pour moins de 48 h n'ont pas formé une préférence pour sa chanson.

Après avoir montré que nous pouvions utiliser le paradigme comportemental pour tester la préférence de chanson des pinsons femelles, nous avons utilisé l'essai pour tester l'influence de la dopamine sur la formation de la préférence de chanson. Dans ce cas-ci, une femelle naïve a été logée avec un mâle inconnu pendant 24-48 h et a donné deux injections sous-cutanées du quinpirole agoniste de récepteur de dopamine 2 (figure 1B,2B). Dans l'ensemble, les femelles ayant reçu le quinpirole préféraient la chanson du mâle avec lequel elle était pour seulement 24 à 48 h (t-test corrigé pour de multiples comparaisons; p 'lt; 0,001; t ' 5,25; df ' 18). Dans l'exemple montré, deux des femmes n'ont pas montré de préférence pour la chanson de son partenaire (Figure 2A). Dans un cas, la femelle était plus âgée (5 ans). Il n'est pas clair pourquoi la deuxième femelle n'a pas formé de préférence. Une possibilité est que la femelle peut ne pas avoir reçu une dose complète de la drogue.

Pour nous assurer qu'il n'y avait pas de différence dans l'activité totale des femmes entre les groupes de traitement qui pourrait expliquer la différence dans la préférence de chanson, nous avons comparé le nombre total de déclencheurs de perche (figure 2B). Le nombre total de déclencheurs de perche est le nombre de fois qu'une femelle a atterri sur les deux perchoirs au cours de la période d'essai de 1 h pour le silence ou la lecture de chansons. L'activité totale des oiseaux dans n'importe quel traitement était similaire (ANOVA, p ' 0,436).

Figure 1
Figure 1 : Schéma de la cage de conditionnement d'opéra et de la chronologie de l'expérience. (A) La cage a deux chambres de taille égale avec une ouverture reliant les deux chambres latérales. Une paire opposée de capteurs photoélectriques est placée au-dessus de chaque perche qui s'étend sur toute la largeur de la chambre. Lorsqu'un oiseau atterrit sur une perche, il brise le faisceau infrarouge des capteurs, ce qui déclenche la lecture de la chanson à partir du haut-parleur le plus proche de la perche. Les dimensions de la cage sont montrées, en plus du placement des perchoirs. (B) Chronologie de l'expérience. Ce chiffre a été modifié à partir de Day etcoll. 21. Veuillez cliquer ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

Figure 2
Figure 2 : Données représentatives de la préférence pour les chansons féminines. (A) Le rapport des déclencheurs de perche pendant les essais d'opéra indique la préférence pour les chansons produites par des mâles conspécifiques. La préférence de chanson de chaque femelle a été comparée à sa préférence de chambre latérale dans laquelle aucune chanson (silence) n'a été déclenchée quand elle a atterri sur un perchoir. Dans chaque cas, la chanson du partenaire a été jouée quand elle a atterri sur un perchoir dans la chambre non-préférée. Les points connectés sont des préférences pour chaque individu. Ce chiffre a été modifié à partir de Day etcoll. 21. (B) Le nombre total de perchoirs de chaque côté de la chambre de la cage pour les femelles dans toutes les conditions. Veuillez cliquer ici pour voir une version plus grande de ce chiffre.

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Discussion

Nous décrivons une méthode pour tester la préférence de chanson des pinsons zébrés. Nous avons utilisé cet essai pour tester la préférence d'une femelle jumelée pour la chanson de son partenaire. En outre, l'essai a été employé pour tester l'effet de la dopamine sur l'induction de la préférence de chanson dans les femelles naïves. Cette méthode est relativement peu coûteuse et a été conçue et utilisée par les étudiants de premier cycle, ce qui en fait un excellent outil de formation pour les étudiants. Plusieurs autres études ont testé la préférence de chanson dans plusieurs espèces de chanson, rendant cette méthode utile à beaucoup d'investigateurs étudiant des préférences auditives chez les oiseaux22,23.

Ce paradigme comportemental est basé sur un système de test de reconnaissance auditive, ARTsy, décrit pour la première fois par Gess etal.19. Ces auteurs ont utilisé un système similaire pour tester la discrimination des chants chez les oiseaux. Nous avons modifié le système pour tester la préférence d'une femme pour une chanson plutôt qu'une autre. Nous avons adapté le protocole décrit dans Gess etal.19 pour utiliser SAP2011 pour jouer des chansons et collecter les données, au lieu de scripts personnalisés dans MATLAB. Nous avons constaté que ce changement pour l'acquisition de données était plus facile à utiliser et plus accessible aux étudiants de premier cycle. Les lectures d'opéra peuvent également être déclenchées en utilisant les perchoirs comme commutateurs24.

Nous avons constaté que le protocole décrit ici donne des données plus faciles à analyser que l'utilisation de méthodes similaires. Par exemple, Woolley et Doupe20 ont mesuré la durée de temps qu'une femelle a passé de chaque côté d'une cage lors de lectures passives de différents types de chansons afin d'identifier la préférence de la chanson. Pour quantifier le temps passé dans une chambre par rapport à une autre, il faut filmer les oiseaux pendant qu'ils se comportent, ce qui n'est pas nécessaire pour le protocole décrit ici. De même, d'autres ont compté le nombre d'appels féminins en réponse à la chanson masculine comme une mesure de sa préférence25,26. Pour ce faire, il faut compter manuellement ou semi-automatique des appels féminins. La quantification de la préférence de chanson décrite ici est beaucoup plus simple car le logiciel garde automatiquement une trace du nombre d'atterrissages de perchoir.

En utilisant le protocole décrit ici, nous avons constaté que les femmes jumelées ont toujours choisi d'écouter la chanson de leur partenaire. La tâche ne teste pas la préférence du partenaire de la femme, seulement sa préférence pour la chanson. Les expériences futures devraient examiner une préférence de partenaire aussi bien que la préférence de chanson13,16,27. Ce protocole peut être utilisé pour tester l'influence d'autres systèmes de neurotransmetteurs sur la formation de la préférence de chanson pour comparer les mécanismes évolutifs conservés sous-jacents au réseau de comportement social partagé par de nombreux vertébrés7,28. Par exemple, les expériences futures peuvent cibler directement des zones spécifiques dans le cerveau pendant que les animaux apprennent la tâche d'accéder aux circuits neuronaux sous-jacents aux comportements sociaux.

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Disclosures

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Acknowledgments

Nous remercions Petra Grutzik pour la construction de la cage comportementale, le Dr Thomas Borowski pour l'aide à la conception de l'expérience, et le Dr Stephanie White pour son généreux soutien. Financement d'une subvention de recherche d'été de premier cycle de l'HHMI (HHMI #30052007536 à D.S. et L.H.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
(-)-Quinpirole sigmaaldrich Q102
acoustic foam Coulbourn Instruments, Allentown, PA H10-24A
audio amplifier - 2 channel Amazon Pyle PCAU46A any small audio amplifier should work
Banner Engineering Q08 Series, emitter. SO60-Q08 https://www.alliedelec.com Stock #:70659809 photoelectric sensor
Banner Engineering Q08 series, receiver. EO60-Q08-AN6X https://www.alliedelec.com Stock #:70699384 photoelectric sensor
Car stereo speakers Amazon Pioneer TS - F1643R
Digital I/O card National Instruments PCI-6503 or USB-6501
LED lights - under-counter Amazon
multifunctional ribbon cable National Instruments 180524-20
sound pressure level meter Amazon
terminal block National Instruments 777101-1

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Tags

Comportement Numéro 154 oiseau chanteur monogamie lien de couple social préférence de partenaire dopamine

Erratum

Formal Correction: Erratum: Operant Conditioning Task to Measure Song Preference in Zebra Finches
Posted by JoVE Editors on 02/18/2020. Citeable Link.

An erratum was issued for: Operant Conditioning Task to Measure Song Preference in Zebra Finches. An affiliation was updated.

One of the affiliations was updated from:

W.M. Keck Science Department, Clarmont McKenna College – Pitzer College – Scripps College

to:

W.M. Keck Science Department, Claremont McKenna College – Pitzer College – Scripps College

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Coleman, M. J., Saxon, D., Robbins,More

Coleman, M. J., Saxon, D., Robbins, A., Lillie, N., Day, N. F. Operant Conditioning Task to Measure Song Preference in Zebra Finches. J. Vis. Exp. (154), e60590, doi:10.3791/60590 (2019).

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