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Biology

ऑर्थोवोल्टेज (40-300 केवी) एक्स-रे सुविधाओं का उपयोग करके सेल विकिरण के लिए डोसिमेट्री

Published: February 20, 2021 doi: 10.3791/61645

Summary

यह दस्तावेज़ कम ऊर्जा एक्स-रे उपकरणों का उपयोग करके सेल विकिरणों के लिए एक नए डोसिमेट्री प्रोटोकॉल का वर्णन करता है। माप यथासंभव वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों का अनुकरण करने वाली स्थितियों में किया जाता है।

Abstract

रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययन के लिए डॉसिमेट्री प्रोटोकॉल और मानकों का महत्व स्वयं स्पष्ट है। कम ऊर्जा एक्स-रे सुविधाओं का उपयोग करके खुराक निर्धारण के लिए कई प्रोटोकॉल प्रस्तावित किए गए हैं, लेकिन विकिरण विन्यास, नमूने, सामग्री या बीम गुणवत्ता के आधार पर, कभी-कभी यह जानना मुश्किल होता है कि कौन सा प्रोटोकॉल रोजगार के लिए सबसे उपयुक्त है। इसलिए, हम कम ऊर्जा एक्स-रे सुविधा का उपयोग करके सेल विकिरणों के लिए एक डॉसिमेट्री प्रोटोकॉल का प्रस्ताव करते हैं। इस विधि का उद्देश्य कोशिका मोनोलेयर के स्तर पर खुराक अनुमान करना है ताकि इसे वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों के जितना संभव हो सके उतना करीब बनाया जा सके। प्रोटोकॉल के विभिन्न चरण इस प्रकार हैं: विकिरण मापदंडों का निर्धारण (उच्च वोल्टेज, तीव्रता, सेल कंटेनर आदि), बीम गुणवत्ता सूचकांक (उच्च वोल्टेज-हाफ वैल्यू लेयर कपल) का निर्धारण, आयनीकरण कक्ष के साथ खुराक दर माप हवा कीर्मा स्थितियों में अंशांकित, एबीटी3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों के साथ सेल कल्चर मीडियम के क्षीणन और बिखरने की मात्रा, और सेलुलर स्तर पर खुराक दर का निर्धारण। यह पद्धति प्रत्येक नए सेल विकिरण विन्यास के लिए की जानी चाहिए क्योंकि केवल एक पैरामीटर का संशोधन सेल मोनोलेयर के स्तर पर वास्तविक खुराक जमाव को दृढ़ता से प्रभावित कर सकता है, विशेष रूप से कम ऊर्जा एक्स-रे शामिल है।

Introduction

रेडियोबायोलॉजी का उद्देश्य वितरित खुराक और जैविक प्रभावों के बीच संबंध स्थापित करना है; रेडियोबायोलॉजिकल प्रयोगों के डिजाइन में डॉसिमेट्री एक महत्वपूर्ण पहलू है। 30 से अधिक वर्षों के लिए, डॉसिमेट्री मानकों के महत्व और प्रथाओं के सामंजस्यको1,2,3,4, 5पर प्रकाश डाला गया है। एक खुराक दर संदर्भ स्थापित करने के लिए, कई प्रोटोकॉल मौजूद हैं6,7,8,9,10; हालांकि, जैसा कि पेक्सोटो और एंड्रियो11 द्वारा दिखाया गया है, खुराक दर निर्धारण के लिए उपयोग की जाने वाली डोसिमेट्रिक मात्रा के आधार पर 7% तक का अंतर हो सकता है। इसके अलावा, भले ही प्रोटोकॉल मौजूद हो, यह जानना कभी-कभी मुश्किल होता है कि किसी विशेष आवेदन के लिए कौन सा प्रोटोकॉल सबसे उपयुक्त है, यदि कोई हो, क्योंकि कोशिकाओं के लिए खुराक दर सेल कंटेनर, सेल संस्कृति मीडिया या बीम गुणवत्ता की मात्रा जैसे मापदंडों पर निर्भर करती है, उदाहरण के लिए। इस प्रकार के विकिरण के लिए बिखरने और बैकस्कैटरिंग भी ध्यान में रखने के लिए एक बहुत महत्वपूर्ण पैरामीटर है। दरअसल, कम और मध्यम ऊर्जा एक्स-रे के लिए, AAPM टीजी-६१ संदर्भ प्रोटोकॉल10में, पानी में अवशोषित खुराक को पानी के प्रेत की सतह पर मापा जाता है । बहुत विशिष्ट सेल विकिरण स्थितियों को ध्यान में रखते हुए, हवा से घिरे सेल संस्कृति मीडिया की छोटी मात्रा टीजी-61 प्रोटोकॉल के रूप में एक बड़े पानी के समकक्ष प्रेत के साथ एक अवशोषित खुराक के लिए परिभाषित लोगों की तुलना में केर्मा स्थितियों के करीब है। इसलिए, हमने पानी में अवशोषित खुराक के बजाय संदर्भ के लिए एक डोसिमेट्रिक मात्रा के रूप में पानी में केरमा का उपयोग करने के लिए चुना है। इस प्रकार, हम कोशिकाओं को दिए गए वास्तविक खुराक का बेहतर निर्धारण प्रदान करने के लिए एक नए दृष्टिकोण का प्रस्ताव कर रहे हैं ।

इसके अलावा, रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययन के लिए एक और महत्वपूर्ण पहलू विकिरण के लिए उपयोग किए जाने वाले तरीकों और प्रोटोकॉल की पूरी रिपोर्टिंग है ताकि प्रयोगात्मक परिणामों को पुन: पेश करने, व्याख्या करने और तुलना करने में सक्षम हो सके। 2016 में, पेडरसेन एट अल12 ने प्रीक्लिनिकल रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययनों में डोसिमेट्री की अपर्याप्त रिपोर्टिंग पर प्रकाश डाला। ड्रेगर एट अल से हाल ही में किए गए एक बड़े अध्ययन मेंइस बात पर प्रकाश डाला गया है कि भले ही खुराक, ऊर्जा या स्रोत प्रकार जैसे कुछ डोसिमेट्री मापदंडों की सूचना दी जाती है, भौतिकी और डोसिमेट्री मापदंडों का एक बड़ा हिस्सा जो विकिरण की स्थिति को ठीक से दोहराने के लिए आवश्यक हैं। पिछले 20 वर्षों को कवर करने वाले 1,000 से अधिक प्रकाशनों की यह बड़े पैमाने पर समीक्षा, रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययनों में भौतिकी और डॉसिमेट्री स्थितियों की रिपोर्टिंग की एक महत्वपूर्ण कमी को दर्शाती है। इस प्रकार, मजबूत और प्रजनन योग्य प्रयोगों के लिए प्रोटोकॉल और रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययनों में उपयोग की गई विधि का पूर्ण विवरण अनिवार्य है।

इन विभिन्न पहलुओं को ध्यान में रखते हुए, आईआरएसएन (विकिरण संरक्षण और परमाणु सुरक्षा संस्थान) में किए गए रेडियोबायोलॉजिकल प्रयोगों के लिए, ऑर्थोवोल्टेज सुविधा में सेल विकिरणों के लिए एक कठोर प्रोटोकॉल लागू किया गया था । यह डोसिमेट्री प्रोटोकॉल वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों को यथासंभव अनुकरण करने के लिए डिज़ाइन किया गया था और इस प्रकार, कोशिकाओं को वितरित वास्तविक खुराक निर्धारित करने के लिए। इस उद्देश्य के लिए, सभी विकिरण मापदंडों को सूचीबद्ध किया गया है, और बीम गुणवत्ता सूचकांक का मूल्यांकन आधा मूल्य परत (एचवीएल) को मापकर किया गया था जिसके लिए कुछ अनुकूलन किए गए हैं क्योंकि AAPM प्रोटोकॉल10 से मानक सिफारिशों का पालन नहीं किया जा सकता है। पूर्ण खुराक दर माप तब सेल विकिरणों के लिए उपयोग किए जाने वाले सेल कंटेनर के अंदर आयनीकरण कक्ष के साथ किया गया था, और सेल संस्कृति मीडिया के क्षीणन और बिखरने को भी ईबीटी 3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों के साथ निर्धारित किया गया था। चूंकि प्रोटोकॉल के केवल एक पैरामीटर के संशोधन से खुराक अनुमान को काफी प्रभावित किया जा सकता है, प्रत्येक सेल विकिरण विन्यास के लिए एक समर्पित डोसिमेट्री किया जाता है। इसके अलावा, एचवीएल मूल्य प्रत्येक वोल्टेज-फ़िल्टर संयोजन के लिए गणना की जानी चाहिए। इस वर्तमान कार्य में, 220 केवी का वोल्टेज, 3 एमए की तीव्रता, और क्रमशः 0.8 मिमी और 0.15 मिमी बेरिलियम और तांबे का एक अतिरिक्त निस्पंदन का उपयोग किया जाता है। चुना गया सेल विकिरण विन्यास एक टी-25 फ्लास्क पर है, जहां कोशिकाओं को सेल संस्कृति मीडिया के 5 एमएल के साथ विकिरणित किया गया था।

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Protocol

1. विकिरण मंच और विकिरण मापदंडों का निर्धारण

  1. मध्यम ऊर्जा एक्स-रे के लिए कम देने के लिए एक विकिरण मंच का उपयोग करें। रेडियोबायोलॉजिकल प्रयोग की मजबूती और प्रजनन क्षमता सुनिश्चित करने के लिए प्रयोग के मापदंडों का निर्धारण करें: उच्च वोल्टेज, तीव्रता, निस्पंदन (अंतर्निहित और अतिरिक्त), हाफ वैल्यू लेयर (एचवीएल), प्रभावी ऊर्जा, डोसिमेट्री माप के लिए उपयोग किया जाने वाला डिटेक्टर, स्रोत नमूना दूरी (एसएसडी), विकिरण क्षेत्र (आकार, आकार, ज्यामिति), डोसिमेट्री मात्रा, डॉसिमेट्री विधि, खुराक दर, सेल कंटेनर और सेल मीडिया की मात्रा। इस प्रोटोकॉल में उपयोग किए जाने वाले सभी पैरामीटर तालिका 1में दिए गए हैं।

2. बीम गुणवत्ता सूचकांक: आधा मूल्य परत का निर्धारण

नोट: एचवीएल को मूल मूल्य की तुलना में दो के कारक द्वारा बीम की तीव्रता को कम करने के लिए एक क्षीण (आमतौर पर तांबा या एल्यूमीनियम) की मोटाई के रूप में परिभाषित किया गया है।

  1. चित्रा 1में निर्देशों का पालन करके विकिरण बाड़े के अंदर उपकरण (समर्थन, कोलिमेटर, डायाफ्राम, आयनीकरण) स्थापित करें। इस चरण में कोई क्षीण सामग्री का उपयोग नहीं किया जाता है।
  2. सुनिश्चित करें कि चित्र 1 में बताई गई सभी दूरियां सही हैं। इन्हें टेप के उपाय से मापें।
  3. क्षैतिज स्थिति में आयनीकरण कक्ष रखें। इस काम के लिए, हमने एयर केर्मा में कैलिब्रेटेड 31002 (31010 के बराबर) बेलनाकार आयनीकरण कक्ष का उपयोग किया।
  4. आयनीकरण कक्ष को 5 मिनट के लिए पूर्व-विकिरणित करें और पृष्ठभूमि को मापें (यह कदम कोलिमेटर के बिना किया जा सकता है)।
  5. एमरॉ वैल्यू (कूलम्ब्स में) के अनुरूप प्रभारी संग्रह मोड में 1 मिनट के 10 माप करें।
  6. हमारे मामले में विकिरण बाड़े के अंदर रखा उपयुक्त अंशांकित उपकरणों के साथ तापमान और दबाव ले लो (यदि यह संभव नहीं है, यह प्रयोग के पास जगह) । तापमान और दबाव सुधार कारक द्वारा विद्युतमीटर पर एमकच्चे पढ़ने को सही करें इस प्रकार दिया गया है:
    Equation 1
    कहां: टी (डिग्री सेल्सियस) और पी (एचपीए) क्रमशः वास्तविक तापमान और दबाव हैं । टीरेफरी और पीरेफरी संदर्भ तापमान और दबाव जब आयनीकरण मानक प्रयोगशाला द्वारा अंशांकित किया गया है । दबाव और तापमान को अंशांकित उपकरणों के साथ मापा जाना चाहिए। प्रभारी मोड में प्राप्त मूल्य औसत संदर्भ मूल्य एम (coulombs में) है।
    नोट: यह कदम एचवीएल माप के लिए सख्ती से आवश्यक नहीं है, लेकिन इसकी सिफारिश की जाती है।
  7. डायाफ्राम के ऊपर कुछ मोटाई का एक क्षीणता रखें। एचवीएल सेट विभिन्न मोटाई (0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5 और 10 मिमी तांबे) के साथ पन्नी से बना है, जिसमें पूरे बीम (80 x 80 मिमी यहां) को कवर करने की अनुमति है।
  8. 1 मिनट का माप लें (पहले वर्णित के रूप में केटी, पी द्वारा एमकच्चे सही)।
    1. यदि खुराक दर शुरुआती मूल्य के संबंध में 2 के कारक से विभाजित है, तो एचवीएल मूल्य पाया जाता है। औसत खुराक दर का अनुमान लगाने के लिए 1 मिनट के 5 माप लें।
    2. यदि खुराक दर शुरुआती मूल्य के संबंध में 2 के कारक से विभाजित नहीं है, तो क्षीण मोटाई को बढ़ाएं या कम करें और एक और माप लें। आवश्यक के रूप में तनु के रूप में तनु की मोटाई समायोजित करें।
  9. एक बार एक कारक दो द्वारा बीम की तीव्रता को कम करने वाले क्षीणता को पाए जाने के बाद, एचवीएल की पुष्टि करने के लिए 1 मिनट के 5 माप लें।
    नोट: ज्यादातर मामलों में, क्षीणन की सटीक मोटाई उपलब्ध पन्नियों से नहीं मिल सकती है। इस मामले में, बाइसेक्शन द्वारा आगे बढ़ें और एचवीएल को इंटरपोलेट करें।

3. विकिरण क्षेत्र का मूल्यांकन (कोई खुराक अनुमान नहीं)

  1. विकिरण के लिए उपयोग किए जाने वाले समर्थन पर एक EBT3 फिल्म रखें।
  2. इस फिल्म को एक अच्छी तरह से चिह्नित विकिरण क्षेत्र (कम से कम 2 Gy) प्राप्त करने के लिए विकिरणित करें।
  3. एक समर्पित स्कैनर का उपयोग कर EBT3 फिल्म स्कैन करें।
  4. विश्लेषण और फिर प्लॉट प्रोफाइल विकल्प(चित्रा 2)का उपयोग करके इमेज जे का उपयोग करके खुराक प्रोफाइल को प्लॉट करें।
  5. विकिरण के लिए विकिरण क्षेत्र के उपयोग के आकार का निर्धारण करें (सजातीय क्षेत्र, पेनुम्ब्रा क्षेत्रों को छोड़कर, चित्र 2देखें)।
  6. यह सुनिश्चित करने के लिए विकिरण के लिए उपयोग किए जाने वाले समर्थन पर निशान बनाएं कि सेल कंटेनर सही स्थिति में है।
    नोट: इस चरण में, विकिरण क्षेत्र का आकार निर्धारित किया जाता है, और खुराक का अनुमान नहीं है। फिल्म रीडिंग और एनालिसिस की पूरी प्रक्रिया सेक्शन 5 में दी गई है। इसके अलावा, सेल कंटेनर पोजिशनिंग के कारण त्रुटियों से बचने के लिए मार्जिन लें।

4. आयनीकरण कक्ष के साथ खुराक दर माप

  1. सेल कंटेनर लें और कंटेनर को अंदर(चित्रा 3,ऊपरी खंड) या नीचे(चित्रा3, निचले खंड) के अंदर आयनीकरण कक्ष रखने में सक्षम होने के लिए साइड या नीचे (विशेष कंटेनर और आयनीकरण कक्ष के आधार पर) पर थोड़ा हिस्सा तोड़ें। उदाहरण चित्र 3 में विभिन्न आयनीकरण कक्षों (बेलनाकार या विमान समानांतर) और सेल कंटेनरों के साथ दिए गए हैं। इस मामले में, एक टी-25 फ्लास्क(चित्र 3,लाल बॉक्स) का उपयोग किया गया था।
    नोट: एक टांका लोहा या गर्म स्केलपेल प्लास्टिक के बर्तन में छेद बनाने के लिए एक अच्छा विकल्प है
  2. विकिरण (यहां कार्बन प्लेट) के लिए उपयोग किए जाने वाले समर्थन पर कंटेनर को बाड़े के अंदर रखें।
  3. आयनीकरण कक्ष को कंटेनर(चित्रा 3,लाल बॉक्स) में सही स्थिति में रखें और इसे विद्युतमीटर से कनेक्ट करें।
  4. सुनिश्चित करें कि धारा 1 में सूचीबद्ध सभी विकिरण पैरामीटर सही हैं (उच्च वोल्टेज, तीव्रता, अतिरिक्त निस्पंदन, स्रोत नमूना दूरी, आदि)।
  5. आयनीकरण कक्ष को 5 मिनट के लिए प्री-विकिरणित करें और इलेक्ट्रोमीटर के शून्य प्रदर्शन करें।
  6. एयर केर्मा (Gy.min-1) में औसत खुराक दर निर्धारित करने के लिए 1 मिनट के10माप लें। कश्मीरहवा में खुराक दर के निर्धारण की गणना इस प्रकार है:
    Equation 2
    जहां एम तापमान, दबाव, ध्रुवीयता प्रभाव, आयन पुनर्संयोजन, और विद्युतीकरण द्वारा सही खुराक मीटर का पढ़ना है। एनकैर और केक्यू विकिरण की गुणवत्ता के लिए अंशांकन और सुधार कारक हैं, जिनके मूल्य प्रत्येक आयनीकरण कक्ष के लिए विशिष्ट हैं।

5. सेल संस्कृति मीडिया क्षीणन और बिखरने की माप

नोट: प्रक्रिया के दौरान दस्ताने के साथ EBT3 फिल्मों संभाल ।

  1. प्रयोग की तैयारी
    1. विकिरण से पहले कम से कम 24 घंटे EBT3 फिल्मों के छोटे टुकड़े काटें।
    2. रेडियोबायोलॉजी प्रयोगों के लिए उपयोग किए जाने वाले सेल कंटेनर के एक समारोह के रूप में फिल्मों के आकार का निर्धारण करें (उदाहरण के लिए टी-25 फ्लास्क के लिए 4 x 4 सेमी)।
      रेडियोक्रोमिक फिल्मों के दो सेट काटें: खुराक या समय बिंदु (इस काम के लिए कुल नौ अंक) द्वारा EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्म के तीन टुकड़ों से बना अंशांकन घटता के लिए एक सेट; और सेल संस्कृति मीडिया क्षीणन की मात्रा के लिए एक सेट, प्रति बिंदु तीन टुकड़े भी।
    3. पहचान के लिए सभी फिल्मों की संख्या (ऊपरी-दाएं कोने यहां) और स्कैनर पर एक ही स्थिति पर उन्हें स्कैन ।
    4. फिल्मों को रोशनी से दूर रखें।
    5. EBT3 फिल्म माप के लिए इस्तेमाल सेल कंटेनर तैयार करें और यदि आवश्यक हो, तो फिल्म को अंदर रखने के लिए एक हिस्सा काटें (टी-25 के साथ एक उदाहरण चित्रा 4में दिया गया है)।
  2. खुराक दर अनुमान
    1. पिछले खंड में वर्णित विन्यास के लिए खुराक दर को मापें।
    2. EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों के विकिरण के लिए इस विन्यास को जगह में रखें और एक ही प्रकार के सेल कंटेनर का उपयोग करें।
  3. अंशांकन वक्र का निर्माण
    1. अंशांकन वक्र के लिए प्री-कट EBT3 फिल्मों को लें।
    2. तीन टुकड़े (0 Gy) को विकिरणित न करें।
    3. सेल विकिरण के लिए के रूप में एक ही विन्यास में, सेल कंटेनर के अंदर पहली फिल्म रखें।
    4. पहली खुराक अंक प्राप्त करने के लिए इसे विकिरणित करें।
    5. एक ही खुराक के साथ विकिरणित EBT3 फिल्मों के तीन टुकड़े प्राप्त करने के लिए इस ऑपरेशन को दोहराएं।
    6. प्रत्येक खुराक बिंदु (इस काम में नौ खुराक अंक (0, 0.25, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 2, 2.5, और 3 जीवाई) के लिए यह प्रदर्शन करें जैसा कि चित्रा 5में दर्शाया गया है)।
  4. सेल संस्कृति मीडिया और बिखरने के क्षीणन का मूल्यांकन।
    1. सभी विकिरणों के लिए एक ही विकिरण समय चुना (60 एस, उदाहरण के लिए)।
    2. बिना पानी के कंटेनर में EBT3 फिल्मों के तीन टुकड़े विकिरणित करें ।
    3. कंटेनर में EBT3 फिल्मों के तीन टुकड़ों को पानी के साथ इस प्रकार विकिरणित करें ।
      1. फिल्म को कंटेस्टेंट के अंदर रखें।
      2. सेल कल्चर मीडिया (यहां 5 एमएल) का प्रतिनिधित्व करने के लिए कंटेनर को पानी की सही मात्रा से भरें। अगर फिल्में ठीक से जलमग्न न रह जाएं तो टेप के छोटे-छोटे टुकड़ों का इस्तेमाल करें।
      3. सेल कंटेनर को बाड़े के अंदर रखें और सुनिश्चित करें कि फिल्म सही ढंग से डूबे हुए हैं।
      4. जब विकिरण पूरा हो जाता है, तो EBT3 फिल्मों को लें, उन्हें शोषक कागज के साथ सुखा लें, और उन्हें प्रकाश से दूर स्टोर करें।

6. EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों का पढ़ना

  1. पढ़ें EBT3 फिल्में विकिरण के बाद कम से 24 घंटे ।
  2. एक समर्पित स्कैनर पर फिल्मों को स्कैन करें।
  3. स्कैनर पैरामीटर सेट करें: 48 बिट लाल-हरे-नीले रंग का झगड़ा प्रारूप, ट्रांसमिशन मोड में 150 डीपीआई, और कोई छवि सुधार नहीं।
  4. स्कैनर के एक वार्म अप इस प्रकार प्रदर्शन करते हैं।
    1. स्कैनर पर एक गैर-विकिरणित फिल्म रखें।
    2. स्कैन का पूर्वावलोकन लॉन्च करें।
    3. एक टाइमर लॉन्च करें और 30 एस का इंतजार करें।
    4. स्कैन लॉन्च करें।
    5. स्कैन के अंत में, एक टाइमर लॉन्च करें, और 90 एस का इंतजार करें।
    6. साथ ही, स्कैन रजिस्टर करें, इमेजेज के साथ इमेज खोलें, एक स्क्वायर आरओआई (हमेशा एक ही आकार और एक ही स्थिति में) का पता लगा लें, और क्षेत्र के औसत लाल पिक्सेल स्तर का माप लें।
    7. 90 s के अंत में, चरण 2 से प्रक्रिया दोहराएं (स्कैनर के अंदर फिल्म को छूने के बिना)।
    8. स्कैनर को गर्म करने और स्थिर करने के लिए इसे कम से कम 30 बार दोहराएं (गैर-विकिरणित फिल्मों पर चयनित क्षेत्र के औसत लाल पिक्सेल स्तर में कोई भिन्नता नहीं)। यदि स्कैनर, यानी, औसत लाल पिक्सेल मूल्य, स्थिर नहीं है, प्रक्रिया जारी रखें ।
  5. EBT3 फिल्मों की स्कैनिंग
    1. स्कैनर बिस्तर के केंद्र में पहली फिल्म रखें। हमेशा एक ही स्थान पर और एक ही अभिविन्यास में फिल्म जगह करने के लिए एक क्षेत्र परिसीमन ।
    2. स्कैन का पूर्वावलोकन लॉन्च करें।
    3. एक टाइमर लॉन्च करें और 30 एस का इंतजार करें।
    4. स्कैन लॉन्च करें।
    5. स्कैन के अंत में, एक टाइमर लॉन्च करें, और 90 एस का इंतजार करें। इन 90 s के दौरान EBT3 फिल्म बदल जाते हैं।
      नोट: EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों का विश्लेषण एक स्व-प्रोग्राम किए गए सी + + कार्यक्रम का उपयोग करके किया गया था। ईबीटी 3 फिल्म विश्लेषण के लिए विभिन्न तरीकों का उपयोग किया जा सकता है, जैसे कि लाल चैनल विधि या तीन चैनल विधि14,15। इस मामले में, हमने लाल चैनल विधि का उपयोग नहीं किया है जिसमें कोई पृष्ठभूमि घटाव नहीं है, और छवियों को ऑप्टिकल घनत्व में परिवर्तित किया गया था और फिर हमारे कार्यक्रम का उपयोग करके खुराक में परिवर्तित किया गया था। चूंकि यह विधि पहले से ही अच्छी तरह से परिभाषित है, इसलिए हमारे सी + + कार्यक्रम को यहां शामिल नहीं किया गया था। इसके अलावा, समर्पित सॉफ्टवेयर16 का उपयोग EBT3 फिल्म विश्लेषण के लिए भी किया जा सकता है।

7. सेल मोनोलेयर के स्तर पर खुराक दर का निर्धारण

  1. फोटॉन फ्लूसेंस स्पेक्ट्रम (μ एन/एन) पर मूल्यांकन की गई हवा के लिए पानी के लिए औसत द्रव्यमान ऊर्जा अवशोषण गुणांक के अनुपात का उपयोग करके सेल कल्चर मीडिया (के)को पानी के केरमा में तनु और बिखरने से सही आयनीकरण कक्ष के साथ प्राप्त औसत खुराक दर को परिवर्तित करें।
    Equation 3
    एक समर्पित सॉफ्टवेयर17 का उपयोग हवा में फोटॉन ऊर्जा स्पेक्ट्रम की गणना करने के लिए किया गया था, जिसमें कोई प्रेत नहीं था, और हमने मतलब द्रव्यमान ऊर्जा अवशोषण गुणांक की गणना करने के लिए एनआईएस्ट टेबल18 का उपयोग किया।

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Representative Results

इस काम में, हमने छोटे जानवर विकिरण19को समर्पित एक मंच का उपयोग किया; हालांकि, इस प्लेटफ़ॉर्म का उपयोग अन्य प्रकार के नमूनों जैसे कोशिकाओं को विकिरणित करने के लिए किया जा सकता है। विकिरण स्रोत एक वेरियन एक्स-रे ट्यूब (एनडीआई-225-22) है जिसमें 0.8 मिमी बेरिलियम का अंतर्निहित निस्पंदन, 3 मिमी का एक बड़ा फोकल स्पोर्ट आकार, लगभग 30 से 225 केवी की उच्च वोल्टेज रेंज और 30 एमए की अधिकतम तीव्रता है।

इस अध्ययन के लिए उपयोग किए जाने वाले मापदंडों की सूचना तालिका 1में दी गई है । हमने सेल कल्चर मीडिया के 5 एमएल के साथ टी-25 फ्लास्क में सेल विकिरण के लिए इस प्रोटोकॉल के उपयोग का एक उदाहरण दिखाने के लिए चुना है।

आधा मूल्य परत
तालिका 2 दो के एक कारक द्वारा बीम की तीव्रता को कम करने के लिए आवश्यक तनु मोटाई का अनुमान लगाने के लिए किए गए माप की रिपोर्ट करता है। इसके लिए, तापमान और दबाव सुधार कारक (केटी, पी)द्वारा सही किए गए इलेक्ट्रोमीटर (कूलोमब्स में) पर औसत एमकच्चे पढ़ने का अनुमान लगाने के लिए 10 संदर्भ माप लिए गए थे।

तनुएटरों की विभिन्न मोटाई तो दो के एक कारक द्वारा बीम तीव्रता कम मोटाई खोजने के लिए परीक्षण किया गया । जब यह मोटाई पाई गई, तो केटी, पीद्वारा सही औसत एमकच्चे मूल्य का मूल्यांकन करने के लिए पांच माप लिए गए ।

इस कॉन्फिग्रेशन के लिए 0667 एमएम कॉपर की हाफ वैल्यू लेयर पाई गई। एचवीएल माप से, हम बीम की प्रभावी ऊर्जा की गणना कर सकते हैं, जो हमारे मामले में लगभग 69 केवी है।

खुराक दर माप
इन मापों से पहले, एक EBT3 फिल्म को उस सतह को निर्धारित करने के लिए विकिरणित किया गया था जिस पर विकिरण क्षेत्र सजातीय है, जिससे हमें सेल कंटेनर को सही ढंग से रखने की अनुमति मिली। यह क्षेत्र लगभग 10 x 10 सेमी ² है, जिसमें पेनुम्ब्रा क्षेत्रों को शामिल किया गया है जो चित्र 2 में बिंदीदार रेखाओं द्वारा दिखाया गयाहै । फिर, वायु केरमा में कैलिब्रेटेड 31002 (31010 के बराबर) बेलनाकार आयनीकरण कक्ष का उपयोग करके खुराक दर माप किया गया था। इस विन्यास के लिए, एक कार्बन प्लेट पर रखे टी-25 सेल कंटेनर में स्रोत के लिए 35 सेमी पर एक खुले मैदान विकिरण क्षेत्र के साथ, खुराक दर कश्मीरहवामें लगभग 0.626 Gy.min-1 थी।

कोशिकाओं पर सटीक खुराक निर्धारित करने के लिए, मापा कश्मीरहवा पानी kerma में परिवर्तित किया गया था । चित्रा 5 समर्पित सॉफ्टवेयर17के साथ प्राप्त एक्स-रे ऊर्जा स्पेक्ट्रम से पता चलता है । इस ऊर्जा स्पेक्ट्रम और NIST तालिका से, हम कश्मीरहवा में खुराक की दर को कश्मीरके पानीमें परिवर्तित कर सकते हैं, जो 0.659 Gy.min-1 था।

पूर्ण खुराक दर माप की समग्र अनिश्चितता 95% आत्मविश्वास स्तर पर लगभग 3% थी।

सेल संस्कृति मीडिया क्षीणन और बिखरने
सेल कल्चर मीडिया क्षीणन और बिखरने के परिमाणीकरण के लिए, EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों के साथ डोसिमेट्री माप कमरे के तापमान पर किया गया था। आयनीकरण कक्ष के साथ माप से, खुराक दर निर्धारित की गई थी। अंशांकन फिल्मों तो एक ही स्थिति में विकिरणित किया गया । EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों को 0 और 3 जीवाई के बीच 0.25 Gy चरणों के साथ 0 और 1 Gy और 0.5 Gy चरणों के बीच 1 और 3 Gy (अंशांकन वक्र का निर्माण करने के लिए नौ खुराक अंक) के बीच अंशांकित किया गया था जैसा कि चित्रा 6में दिखाया गया है। खुराक अंक एक4डिग्री पॉलीनोमियल वक्र के साथ लगे थे । EBT3 फिल्मों तो के साथ और सेल कंटेनर के अंदर सेल संस्कृति मीडिया की सही मात्रा के बिना विकिरणित करने के लिए क्षीणन और सेल संस्कृति मीडिया के कारण बिखरने का मूल्यांकन किया गया । इस विन्यास के लिए, सेल कल्चर मीडिया का क्षीणन लगभग 1.5% था।

EBT3 फिल्म माप की समग्र अनिश्चितता एक ९५% विश्वास के स्तर पर लगभग 4% था ।

नियमित माप
सेल विकिरण प्रदर्शन करने से पहले, खुराक दर विकिरण के लिए उपयोग किए जाने वाले एक ही कंटेनर में हर बार मापी गई थी। इस प्रकार, हमने विकिरण समय का अनुमान लगाने के लिए दैनिक खुराक दर का उपयोग किया। यदि हम प्रोटोकॉल का बारीकी से पालन करते हैं और किसी भी मापदंड को नहीं बदलते हैं, तो सेल कल्चर मीडिया के कारण एचवीएल माप और क्षीणता को दोहराने की आवश्यकता नहीं है। उदाहरण के तौर पर, दैनिक माप के लिए उपयोग की जाने वाली तालिका तालिका 3में दी गई है।

Figure 1
चित्रा 1: विन्यास की योजना एचवीएल माप के लिए SARRP बाड़े पर जगह में ले । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 2
चित्रा 2: विकिरण क्षेत्र आकार का मूल्यांकन। कोलिमेटर के बिना स्रोत के लिए 35 सेमी पर प्राप्त खुराक प्रोफ़ाइल। बिंदीदार रेखाएं विकिरण के लिए विचार किए गए क्षेत्र को दिखाती हैं। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 3
चित्रा 3: खुराक दर माप के लिए आयनीकरण कक्ष के साथ सेल कंटेनरों की तस्वीरें। ऊपरी भाग: 31002 बेलनाकार आयनीकरण कक्ष के साथ माप के लिए उदाहरण। निचला हिस्सा: TM23342 आयनीकरण कक्ष के साथ माप के लिए उदाहरण। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 4
चित्रा 4: सेल कल्चर मीडिया क्षीणन के मापन के लिए उपयोग किए जाने वाले टी-25 की तस्वीरें। फिल्म को फ्लास्क के अंदर रखने के लिए टी-25 का ऊपरी हिस्सा काट दिया गया था। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 5
चित्रा 5: 220 केवी हाई वोल्टेज के लिए 0.8 मिमी बीई और 0.15 मिमी सीयू निस्पंदन17 के साथ नकली ऊर्जा स्पेक्ट्रा। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

Figure 6
चित्रा 6: EBT3 फिल्मों अंशांकन वक्र और इसी अंशांकन वक्र का निर्माण करने के लिए विकिरणित । कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें ।

हाई वोल्टेज (केवी) 220
तीव्रता (एमए) 3
निस्पंदन (अंतर्निहित और अतिरिक्त) 0.8 मिमी बीई + 0.15 मिमी सीयू
आधा मूल्य परत (मिमी सीयू) नीचे निर्धारित
प्रभावी ऊर्जा (केवी) नीचे निर्धारित
डिटेक्टर का इस्तेमाल किया बेलनाकार आयनीकरण कक्ष + EBT3 रेडियोक्रोमिक फिल्में
स्रोत नमूना दूरी 35 सेमी
विकिरण क्षेत्र (आकार, आकार, ज्यामिति) ओपन फील्ड (कोई कोलिमेटर), स्क्वायर, 20 x 20 सेमी
डोसिमेट्री मात्रा कैर और क्वार
डोसिमेट्री विधि जैसा कि प्रोटोकॉल अनुभाग पर वर्णित है
सेल कंटेनर टी-25
सेल संस्कृति मीडिया की मात्रा 5 मिलीलीटर
खुराक दर (Gy/min) नीचे निर्धारित

तालिका 1: विन्यास मापदंडों की एक सूची।

एटेन्यूटर (एमएम सीयू) आईसी उपाय (एनसी) तापमान (डिग्री सेल्सियस) दबाव (एचपीए) केटी.पी. आईसी उपाय कश्मीरटी.पी.(एनसी) द्वारा सही सही मतलब मूल्य (एनसी) अनुसूचित जनजाति विचलन क्षीणन अनुमान (एम/एमईएफ)
संदर्भ मापन (एमईएफ) 0 10.480 21.6 993.2 1.026 10.752 10.761 0.005 -
10.480 21.6 993.1 1.026 10.752
10.490 21.6 993.1 1.026 10.763
10.490 21.6 993.1 1.026 10.763
10.490 21.6 993.2 1.026 10.763
10.490 21.6 993.2 1.026 10.763
10.490 21.6 993.1 1.026 10.763
10.490 21.6 993.2 1.026 10.763
10.490 21.6 993.2 1.026 10.763
10.490 21.6 993.1 1.026 10.763
क्षीण मोटाई का ढिंढोरा मोटाई का ढूँढना (एम) 0.514 5.840 21.7 993.2 1.026 5.992 - - 0.557
0.564 5.651 21.7 993.2 1.026 5.798 - - 0.539
0.584 5.569 21.7 993.2 1.026 5.714 - - 0.531
0.604 5.491 21.7 993.2 1.026 5.634 - - 0.524
0.615 5.441 21.7 993.2 1.026 5.582 - - 0.519
0.627 5.380 21.7 993.2 1.026 5.520 - - 0.513
0.647 5.307 21.7 993.2 1.026 5.445 - - 0.506
0.667 5.240 21.8 993.2 1.026 5.376 - - 0.500
सही क्षीण (एम) के साथ मापन 0.667 5.231 21.8 993.4 1.026 5.368 5.373 0.003 0.499
0.667 5.236 21.8 993.1 1.026 5.375
0.667 5.235 21.8 993.2 1.026 5.373
0.667 5.236 21.8 993.2 1.026 5.374
0.667 5.235 21.8 993.3 1.026 5.373

तालिका 2: आधा मूल्य परत निर्धारण के लिए माप।

आईसी उपाय (एनसी) तापमान (डिग्री सेल्सियस) दबाव (एचपीए) केटी.पी. आईसी उपाय कश्मीरटी.पी.(एनसी) द्वारा सही केटीपी (एनसी) द्वारा सही मतलब मूल्य अनुसूचित जनजाति विचलन सभी सुधार कारकों द्वारा सही मतलब मूल्य एयर केर्म में खुराक दर (Gy/min) Kwater में सेल स्तर पर खुराक दर (Gy/min)
2.495 22.3 1001 1.020 2.545 2.546 0.001 2.536 0.626 0.659
2.496 22.3 1001 1.020 2.546
2.497 22.3 1001 1.020 2.547
2.498 22.3 1001 1.020 2.548
2.496 22.3 1001 1.020 2.546
2.495 22.3 1000.9 1.020 2.545
2.494 22.3 1000.9 1.020 2.544
2.495 22.3 1000.9 1.020 2.545
2.496 22.3 1000.9 1.020 2.546
2.496 22.3 1000.9 1.020 2.546

तालिका 3: सेल विकिरण के लिए दैनिक खुराक दर माप।

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Discussion

यह काम कम ऊर्जा एक्स-रे सुविधा का उपयोग करके सेल विकिरणों के लिए उपयोग किए गए प्रोटोकॉल और लागू किया जाता है। आजकल, कई रेडियोबायोलॉजी प्रयोग इस प्रकार के विकिरणकर्ता के साथ किए जाते हैं क्योंकि उदाहरण के लिए कोबाल्ट स्रोत की तुलना में वे उपयोग करने में आसान, लागत प्रभावी और बहुत कम रेडियोप्रोटेक्शन बाधाओं के साथ होते हैं। हालांकि इन सेटअप के कई फायदे हैं, क्योंकि वे कम एक्स-रे ऊर्जा स्रोत का उपयोग करते हैं, केवल एक विकिरण पैरामीटर का संशोधन डोसिमेट्री को काफी प्रभावित कर सकता है। कई अध्ययनों में रेडियोबायोलॉजी अध्ययन के लिए डॉसिमेट्री मानकों और प्रोटोकॉल के महत्व पर पहले ही प्रकाश डाला गया है2,5 ,20,21. यद्यपि साहित्य1,5में कई प्रोटोकॉल पहले ही अच्छी तरह से परिभाषित किए जा चुके हैं, हमने वास्तविक कोशिका विकिरण स्थितियों को यथासंभव अनुकरण करने के लिए डोसिमेट्री माप करने के लिए एक नया प्रोटोकॉल विकसित करने का निर्णय लिया और उन सभी मापदंडों को ध्यान में रखा जो शारीरिक खुराक को प्रभावित कर सकते हैं, विशेष रूप से कम ऊर्जा एक्स-रे21,22के लिए। इस प्रकार, हमने अनिश्चितताओं को कम करने के लिए एक कठोर प्रोटोकॉल को लागू करने का चयन किया है । इस उद्देश्य के लिए, विकिरण पैरामीटर(तालिका 1)निर्धारित किए गए थे। निम्नलिखित तीन चरण तब आवश्यक हैं: i) बीम गुणवत्ता सूचकांक का निर्धारण, ii) आयनीकरण कक्ष के साथ पूर्ण खुराक दर का माप और iii) ईबीटी 3 रेडियोक्रोमिक फिल्मों के साथ सेल संस्कृति माध्यम के कारण क्षीणन और बिखरने का माप।

बीम गुणवत्ता सूचकांक कम ऊर्जा एक्स-रे बीम की विशेषता के लिए इस्तेमाल वोल्टेज-हाफ वैल्यू लेयर (एचवीएल) जोड़े से मेल खाती है। एचवीएल पॉली एनर्जेटिक विकिरण का वर्णन करने के लिए एक व्यावहारिक संकेतक है और मूल मूल्य से दो के कारक द्वारा हवा केर्मा खुराक दर को कम करने के लिए एक क्षीण (आमतौर पर तांबा या एल्यूमीनियम) की मोटाई के रूप में परिभाषित किया गया है। एचवीएल माप 40-300 केवी एक्स-रे बीम10के लिए AAPM प्रोटोकॉल की निम्नलिखित सिफारिशों का उपयोग करके किया गया था। हालांकि, कुछ अनुकूलन किए जाने थे क्योंकि विकिरण बाड़े में स्रोत और आयनीकरण कक्ष के बीच 1 मीटर की दूरी प्राप्त करना संभव नहीं है। इसलिए, वर्तमान काम में, हमने एचवीएल माप के लिए स्रोत और डिटेक्टर के बीच 58 सेमी की दूरी का उपयोग किया, जैसा कि चित्र 1में दर्शाया गया है। हमने आयनीकरण कक्ष के बाद 25 सेमी जाने का फैसला किया क्योंकि इन तत्वों के बैकस्कैटर प्रभाव को सीमित करने के लिए बाड़े के तल पर बहुत सारे इलेक्ट्रॉनिक सामग्री, समर्थन और धातु तत्व मौजूद हैं। एचवीएल का मापन इस प्रोटोकॉल के महत्वपूर्ण पहलुओं में से एक है। दरअसल, कई एक्स-रे विकिरणों के लिए, बाड़ों के अंदर बहुत प्रतिबंधित है और ये माप करने के लिए इष्टतम शर्तें नहीं हैं या यह असंभव हो जाता है। यद्यपि प्रयोगात्मक माप एचवीएल का मूल्यांकन करने का सबसे अच्छा तरीका है, जब ये माप बहुत कठिन या प्रदर्शन करने में भी असंभव हैं, तो समर्पित सॉफ्टवेयर17 का उपयोग एचवीएल के लिए एक अच्छा अनुमान प्रदान करने के लिए किया जा सकता है, या मोंटे कार्लो सिमुलेशन का उपयोग23किया जा सकता है। वर्तमान कार्य में, हमने एक्स-रे ऊर्जा स्पेक्ट्रम(चित्रा 5)प्राप्त करने के लिए एक समर्पित सॉफ्टवेयर का उपयोग किया। हम मापा और गणना एचवीएल, जो एक ही था की तुलना करने में सक्षम थे, और भी प्रभावी ऊर्जा की तुलना करने के लिए ।

डोसिमेट्री मापन के लिए, हमने तब यथासंभव वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों का अनुकरण करने का फैसला किया। इसके लिए, हमने कोशिका विकिरण(चित्रा 3)के लिए उपयोग किए जाने वाले सेल कंटेनर के अंदर आयनीकरण कक्ष के साथ पूर्ण खुराक दर माप का सीधे प्रदर्शन किया। हालांकि, जैसा कि हमने 100 केवी से अधिक बीम के लिए कैलिब्रेटेड बेलनाकार आयनीकरण कक्ष का उपयोग किया, हम आयनीकरण कक्ष की मोटाई के कारण कोशिकाओं के समान स्थिति में नहीं थे। निचले बीम (15-70 केवी) के लिए, जहां विमान समानांतर कक्ष का उपयोग किया जा सकता है, हम वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों के करीब भी हो सकते हैं। फिर, सेल संस्कृति माध्यम के कारण क्षीणन और बिखरने का मूल्यांकन करने के लिए सापेक्ष डोसिमेट्री माप किए गए थे। इस काम पर प्रस्तुत परिणाम सेल संस्कृति मीडिया की सही मात्रा के साथ या बिना जमा खुराक में एक महत्वपूर्ण भिन्नता को उजागर नहीं करते हैं क्योंकि हमने 220 केवी के वोल्टेज का उपयोग किया, सीयू के 0.15 मिमी का अतिरिक्त निस्पंदन और हमारे पास केवल सेल संस्कृति माध्यम का 5 एमएल था। हालांकि, 80 केवी में किए गए पिछले अध्ययन21 में, हमने बताया कि सेल कल्चर मीडिया और निस्पंदन की भिन्नता शारीरिक खुराक को काफी प्रभावित करती है, जब हमने 1 मिमी एल्यूमीनियम निस्पंदन का उपयोग किया था तो संदर्भ विन्यास की तुलना में 40% तक। क्लोनोजेनिक परख21,23का उपयोग करके जीवित कोशिका अंश को मापकर जैविक प्रभावों के संदर्भ में भी इस प्रभाव को प्रदर्शित किया गया था । इस प्रकार, वोल्टेज, अतिरिक्त निस्पंदन, कंटेनर और सेल संस्कृति मीडिया की मात्रा के आधार पर, कोशिकाओं पर जमा खुराक अलग हो सकती है यदि प्रोटोकॉल सभी विकिरणों के लिए बारीकी से पालन नहीं किया जाता है।

नतीजतन, सभी सेल विकिरण विन्यास के लिए एक समर्पित डोसिमेट्री स्थापित किया जाना चाहिए। यद्यपि यह प्रतिबंधात्मक है और केवल एक पैरामीटर के संशोधन के लिए एक नए विन्यास के कार्यान्वयन की आवश्यकता होती है, हमने इस विकल्प को वास्तविक सेल विकिरण स्थितियों के जितना संभव हो उतना करीब बनाने का फैसला किया है। विन्यास के लिए सबसे अच्छा डिजाइन स्थापित करने के लिए भौतिकविदों और रेडियोबायोलॉजिस्ट के बीच घनिष्ठ सहयोग की आवश्यकता होती है। हमारे संस्थान में, 40 से 220 केवी की वोल्टेज रेंज के लिए हमारे मंच पर एक दर्जन प्रोटोकॉल स्थापित किए गए थे जिसके लिए टी-25, T75, 6-से 96-प्लेट कुओं या पेट्री व्यंजन को विकिरणित किया जा सकता है।

यद्यपि यह प्रोटोकॉल लागू करने के लिए काफी लंबा लगता है, एक बार विन्यास स्थापित होने के बाद, विकिरण के दिन लिया जाने वाला एकमात्र माप सेल कंटेनर के अंदर आयनीकरण कक्ष के साथ खुराक दर का माप है। यह माप भी एक गुणवत्ता नियंत्रण है जो हमें यह सुनिश्चित करने में सक्षम बनाता है कि खुराक दर अपेक्षा के अनुसार है।

रेडियोबायोलॉजिकल अध्ययनों की पुनरुत्पादन क्षमता सुनिश्चित करने के लिए, और प्रयोगों की तुलना और व्याख्या करने में सक्षम होने के लिए, स्थापित प्रोटोकॉल का कड़ाई से पालन करना और सभी डॉसिमेट्री और विन्यास पहलुओं की रिपोर्ट करना महत्वपूर्ण है, विशेष रूप से कम या मध्यम ऊर्जा एक्स-रे का उपयोग करने वाली सुविधाओं के लिए। यहां प्रस्तावित नया प्रोटोकॉल सेल विकिरणों के लिए है, जो कई एक्स-रे सुविधाओं पर लागू होता है, और डोसिमेट्री को प्रभावित करने वाले सभी मापदंडों को ध्यान में रखता है और कोशिकाओं को वितरित वास्तविक खुराक का बेहतर अनुमान प्रदान करता है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ नहीं है ।

Acknowledgments

कोई नहीं

Materials

Name Company Catalog Number Comments
31010 ionization chamber PTW ionization Radiation, Detectors including code of practice, catalog 2019/2020, page 14 https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/DETECTORS_Cat_en_16522900_12/blaetterkatalog/index.html?startpage=1#page_14
EBT3 radiochromic films Meditest quote request https://www.meditest.fr/produit/ebt3-8x10/
electrometer UNIDOSEwebline PTW online catalog, quote request https://www.ptwdosimetry.com/en/products/unidos-webline/?type=3451&downloadfile=1593&
cHash=
6096ddc2949f8bafe5d556e931e6c865
HVL material (filter, diaphragm) PTW online catalog, page 70, quote request thickness foils: 0.02, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5, 1, 2, 5 and 10 mm of copper, https://www.ptwdosimetry.com/fileadmin/user_upload/Online_Catalog/Radiation_Medicine_Cat_en_
58721100_11/blaetterkatalog/index.html#page_70
scanner for radiochromic films Epson quote request Epson V700, seiko Epson corporation, Suwa, Japan
temperature and pressure measurements, Lufft OPUS20 lufft quote request https://www.lufft.com/products/in-room-measurements-291/opus-20-thip-1983/

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References

  1. Zoetelief, J., Broerse, J. J., Davies, R. W. Protocol for X-ray dosimetry EULEP. Report No. Report EUR 9507. Commission of the European Communities. , (1985).
  2. Zoetelief, J., et al. Protocol for X-ray dosimetry in radiobiology. International Journal of Radiation Biology. 77 (7), 817-835 (2001).
  3. Zoetelief, J., Jansen, J. T. Calculated energy response correction factors for LiF thermoluminescent dosemeters employed in the seventh EULEP dosimetry intercomparison. Physics in Medicine and Biology. 42 (8), 1491-1504 (1997).
  4. Coleman, C. N., et al. Education and training for radiation scientists: radiation research program and American Society of Therapeutic Radiology and Oncology Workshop, Bethesda, Maryland. Radiation Research. 160 (6), 729-737 (2003).
  5. Desrosiers, M., et al. The importance of dosimetry standardization in radiobiology. Journal of Research of National Institute of Standards and Technology. 118, 403-418 (2013).
  6. DIN. Klinische Dosimetrie: Teil 4. Anwendung von Röntgenstrahlen mit Röhrenspannungen von 10 bis 100 kV in der Strahlentherapie und in der Weichteildianostik. , Report No. DIN 6809 (1988).
  7. DIN. Klinische Dosimetrie: Teil 5. Anwendung von Röntgenstrahlen mit Röhrenspannungen von 100 bis 400 kV in der Strahlentherapie. , Report No. DIN 6809-5 (1996).
  8. NCS. Dosimetry of low and medium energy x-rays: A code of practice for use in radiotherapy and radiobiology. NCS. , Report No. 10 (1997).
  9. International Atomic Energy Agency. Absorbed Dose Determination in External Beam Radiotherapy. International Atomic Energy Agency. , (2000).
  10. Ma, C. M., et al. AAPM protocol for 40-300 kV x-ray beam dosimetry in radiotherapy and radiobiology. Medical Physics. 28 (6), 868-893 (2001).
  11. Peixoto, J. G., Andreo, P. Determination of absorbed dose to water in reference conditions for radiotherapy kilovoltage x-rays between 10 and 300 kV: a comparison of the data in the IAEA, IPEMB, DIN and NCS dosimetry protocols. Physics in Medicine and Biology. 45 (3), 563-575 (2000).
  12. Pedersen, K. H., Kunugi, K. A., Hammer, C. G., Culberson, W. S., DeWerd, L. A. Radiation biology irradiator dose verification survey. Radiation Research. 185 (2), 163-168 (2016).
  13. Draeger, E., et al. A dose of reality: how 20 years of incomplete physics and dosimetry reporting in radiobiology studies may have contributed to the reproducibility crisis. International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 106 (2), 243-252 (2020).
  14. Devic, S., et al. Precise radiochromic film dosimetry using a flat-bed document scanner. Medical Physics. 32 (7), 2245-2253 (2005).
  15. Micke, A., Lewis, D. F., Yu, X. Multichannel film dosimetry with nonuniformity correction. Medical Physics. 38 (5), 2523-2534 (2011).
  16. Filmqa Software. GAF Chromic.com. , Available from: http://www.gafchromic.com/filmqa-software/filmqapro/index.asp (2020).
  17. Poludniowski, G., Landry, G., DeBlois, F., Evans, P. M., Verhaegen, F. SpekCalc: a program to calculate photon spectra from tungsten anode x-ray tubes. Physics in Medicine and Biology. 54 (19), 433-438 (2009).
  18. Hubbell, J. H., Seltzer, S. M. X-Ray mass attenuation coefficients - Tables of X-ray mass attenuation coefficients and mass energy-absorption coefficients 1 keV to 20 MeV for elements Z = 1 to 92 and 48 additional substances of dosimetric interest (version 1.4). NIST Standard Reference Database. , 126 (1995).
  19. Wong, J., et al. High-resolution, small animal radiation research platform with x-ray tomographic guidance capabilities. International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. 71 (5), 1591-1599 (2008).
  20. Trompier, F., et al. Investigation of the influence of calibration practices on cytogenetic laboratory performance for dose estimation. International Journal of Radiation Biology. , 1-9 (2016).
  21. Dos Santos, M., et al. Importance of dosimetry protocol for cell irradiation on a low X-rays facility and consequences for the biological response. International Journal of Radiation Biology. , 1-29 (2018).
  22. Noblet, C., et al. Underestimation of dose delivery in preclinical irradiation due to scattering conditions. Physica Medica. 30 (1), 63-68 (2014).
  23. Paixao, L., et al. Monte Carlo derivation of filtered tungsten anode X-ray spectra for dose computation in digital mammography. Radiologia Brasileira. 48 (6), 363-367 (2015).

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Dos Santos, M., Paget, V., Trompier, F., Gruel, G., Milliat, F. Dosimetry for Cell Irradiation using Orthovoltage (40-300 kV) X-Ray Facilities. J. Vis. Exp. (168), e61645, doi:10.3791/61645 (2021).

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