ERRATUM NOTICE
Important: There has been an erratum issued for this article. Read more …
Summary
النضج في المختبر (IVM) قبل عملية أمراض النساء (OP-IVM) يجمع بين IVM بعد استرجاع البويضات مع الجراحة النسائية الروتينية ويعمل كامتداد لتطبيقات IVM التقليدية للحفاظ على الخصوبة.
Abstract
استخدام النضج في المختبر (IVM) قبل العملية النسائية (OP-IVM) هو امتداد IVM التقليدية التي تجمع بين IVM بعد استرجاع البويضات مع الجراحة النسائية الروتينية. OP-IVM مناسب للمرضى الذين يخضعون لجراحة أمراض النساء الحميدة الذين يحتاجون إلى الحفاظ على الخصوبة (FP) أو علاجات العقم مثل الإخصاب في المختبر ونقل الأجنة (IVF-ET). في غرفة العمليات، يتم تخدير المرضى الذين يخضعون لجراحة أمراض النساء الحميدة أولا ويتلقون علاجا غير ناضج للجريبات الموجهة بالموجات فوق الصوتية (IMFA). كما يتم إجراء الجراحة النسائية اللاحقة، يتم فحص مجمعات الركاز البويضات (COCs)، ويتم نقل COCs غير ناضجة في المتوسط IVM ومثقفة لمدة 28-32 ساعة في مختبر التلقيح الاصطناعي. بعد التقييم، سيتم اختيار البويضات الناضجة في مرحلة MII و cryopreserved في النيتروجين السائل ل FP أو تخصيبها عن طريق حقن الحيوانات المنوية داخل السيتوبلازم (ICSI) للتلقيح الاصطناعي-ET. من خلال الجمع بين IVM وجراحة أمراض النساء ، يمكن حفظ البويضات غير الناضجة التي كان سيتم التخلص منها واستخدامها في تكنولوجيا الإنجاب المساعدة (ART). ويرد وصف للإجراءات والأهمية والجوانب الحاسمة من البروتوكول الاختياري الرابع في هذه المقالة.
Introduction
IVM هو العلاج بمضادات الفيروسات القهقرية التي يتم فيها استزراع البويضات البشرية غير الناضجة في المختبر لنضوج التلقيح الاصطناعي-ET أو FP. في IVM ، لا يتم استخدام أدوية تحريض الإباضة ، وبالتالي تقليل الألم والعبء المالي والمضاعفات مثل متلازمة فرط تحفيز المبيض (OHSS)1،2. وبالإضافة إلى ذلك، IVM مناسبة بشكل خاص لFP من مرضى السرطان وعلاج العقم من المرضى الحساسة للهرمونات الذين قد تكون غير قادرة على أو ليس لديهم الوقت لتلقي العلاج التعريفي الإباضة3. لذلك ، على الرغم من أن عدد البويضات التي تم استرجاعها ، فإن معدل الحمل السريري (CPR) ومعدل المواليد الأحياء (LBR) أقل من معدل التلقيح الاصطناعي4،5، فإن IVM له مزاياه الفريدة الخاصة.
المرضى الذين يعانون من العقم مع آفات بطانة الرحم، هيدروسالبينإكس، أو أكياس المبيض وعادة ما يكون جراحة أمراض النساء قبل العلاج بمضادات الفيروسات القهقرية، والبويضات عادة ما تكون غير ناضجة. يستخدم OP-IVM الموجات فوق الصوتية المهبلية الموجهة لاسترداد البويضات غير الناضجة وتنميتها في المختبر حتى نضوج التلقيح الاصطناعي ET أو FP. OP-IVM يجمع بين IVM بعد استرجاع البويضات وجراحة أمراض النساء ، وبالتالي تقليل المضاعفات الشائعة في دورات فرط تحفيز المبيض الخاضعة للرقابة وتوفير الوقت والمال. بالنسبة للمرضى الخصبين، يمكن أن يكون OP-IVM بمثابة "تأمين الخصوبة" أثناء خضوعه لجراحة نسائية روتينية.
وعلاوة على ذلك، يمكن تقليل الأضرار الناجمة عن جراحات أمراض النساء، مثل استئصال ورم المبيض6و7 والكهربائية، من خلال استرجاع البويضات قبل الجراحة النسائية. لذلك ، بالمقارنة مع الجراحة النسائية الروتينية ، يمكن أن يقلل OP-IVM من عدد العمليات أثناء علاج العقم ويمنع فقدان البويضات الوظيفية أثناء جراحة المبيض.
وقد أظهرت دراسة سابقة أن الإجراء الإضافي لاسترجاع البويضات لن يزيد من المضاعفات الجراحية ونتائج الحمل السلبية ، ولا يطيل بقاء المستشفى8. وقد أعطى بعض المرضى ولادة حية من خلال OP-IVM8, مما يدل على جدوى هذه الطريقة. تصف هذه الورقة خصائص المرضى الذين قد يستفيدون من OP-IVM وكذلك الإجراءات والنقاط الحرجة في OP-IVM وتناقش تقييم نضج البويضات البشرية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
ملاحظة: تمت الموافقة على الدراسات المتعلقة بطريقة OP-IVM من قبل مجلس المراجعة المؤسسية (IRB) في مستشفى جامعة بكين الثالث ولجنة الأخلاقيات في جامعة بكين (2014S2004). يظهر ملخص OP-IVM في الشكل 1. سيتم تقديم الإجراء خطوة بخطوة في المقطع التالي.
1. إدخال OP-IVM للمرضى المناسبين
- تحديد المرضى المحتملين الذين قد يستفيدون من OP-IVM مثل تلك الموصوفة في الخطوات 1.1.1-1.1.3.:
- متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS) المرضى الذين يعانون من مقاومة الكلوميفين الذين يحتاجون إلى جراحة حفر المبيض بالمنظار.
- المرضى الذين يعانون من العقم الذين يحتاجون إلى جراحات أمراض النساء الحميدة، مثل استئصال عضلة الرحم بالمنظار، والفحص المتعدد الأنواع، واستئصال الحاجز والمنظار، واستئصال الأوفوروسيستيك، قبل العلاج بمضادات الفيروسات القهقرية.
- المرضى الذين يعانون من السرطان أو أمراض الدم الذين يتلقون العلاج الكيميائي أو العلاج الإشعاعي.
2. الموافقة المستنيرة
- توفير المعلومات الكاملة للمرضى، بما في ذلك لماذا OP-IVM قد تكون مفيدة، وإجراءاته، واستخدامات البويضات IVM (التلقيح الاصطناعي-ET أو التبريد)، CPRs المقدرة وLBRs، والمضاعفات المحتملة. اطلب من المرضى إعطاء موافقة مستنيرة عن طريق التوقيع على نموذج الموافقة.
3. إعداد التسميات و IVM البويضات المتوسطة
- طباعة بطاقات تعريف (ID) تحمل اسم المريض وتواريخ أطباق الثقافة والأنابيب.
- إضافة 0.5 مل من IVM المتوسطة تكملها 0.075 وحدة IU/mL من هرمون تحفيز الجريب (FSH) و 0.075 وحدة IU/مل من هرمون اللوتين (LH) إلى كل بئر من لوحة 4-جيدا. غطي الوسط بالزيت.
ملاحظة: تنفيذ كافة هذه الإجراءات في مقاعد نظيفة تدفق صفح. - قبل الحربم لوحة 4-جيدا مع IVM البويضات المتوسطة في 37 درجة مئوية في الهواء المرطب التي تحتوي على 5٪ CO2 و 5٪ O2 على الأقل 6 ساعة قبل الاستخدام.
4. إدارة التخدير في غرفة العمليات
- تحقق من اسم المريض قبل إعطاء التخدير.
- تخدير المريض عن طريق الوريد عن طريق طبيب التخدير.
5. أداء استرجاع البويضات
- ضع علامة على التسميات التي تحمل الاسم والتاريخ والبطاقة على أطباق الثقافة والأنابيب.
- وضع المريض في وضع استئصال المثانة; تطهير باستمرار، والستائر، وفرك المهبل مع المالحة الدافئة.
- وضع التحقيق بالموجات فوق الصوتية داخل المهبل. مسح وتسجيل عدد من بصيلات في كلا المبيضين. ابحث عن أقرب موقع للمبيض كموقع ثقب، وتجنب الأمعاء والمثانة والأوعية الدموية الكبيرة.
- أسبيرات السائل الجريبي.
- غسل الإبرة مع درجة الحموضة مستقرة التعامل مع المتوسطة قبل ثقب (انظر جدول المواد).
- حقن 19 G, إبرة طموح واحد التجويف في المبيضين تحت إشراف الموجات فوق الصوتية.
- ثقب بصيلات أكبر مع حدود واضحة الأقرب إلى التحقيق. في وضع منخفض، حقن بسرعة محلول شطف تستكمل مع 25 U / مل من الهيبارين. أسبيرات السائل الجريبي مع الإبرة تحت ضغط 80-90 ملم زئبق، وتناوب الإبرة قليلا لتنشق أكبر قدر ممكن من السوائل الجريبية. ثقب بصيلات أخرى من الجانب القريب إلى البعيد على هذه الطائرة.
ملاحظة: أثناء الطموح، سيتدفق السائل الجريبي الذي يحتوي على البويضات إلى أنبوب اختبار معقم سعة 10 مل تحت ضغط سلبي. الهيبارين يمكن أن تقلل من لزوجة السائل الجريبي لتسهيل عملية الطموح. - إزالة الإبرة من المبيض (إبقاء الإبرة في جدار المهبل). ضبط اتجاه مسبار الموجات فوق الصوتية، وثقب بصيلات المتبقية على طائرات أخرى. في محاولة لتنشق جميع بصيلات بقطر ~ 5-9 ملم.
ملاحظة: ضبط موضع المسبار لإبقائه الأقرب إلى المبيضين في جميع الأوقات. اضغط على fornix المهبلية مع القوة المناسبة للحد من الاصابة والنزيف. - سحب الإبرة بعد الانتهاء في المبيض واحد، وغسل الإبرة مع وسيطة التعامل، وثقب الجانب الآخر باستخدام نفس الطريقة.
ملاحظة: طموح بصيلات كاملة في غضون 25-30 دقيقة.
- نقل السائل الجريبي من غرفة العمليات إلى مختبر التلقيح الاصطناعي في غضون دقائق قليلة بعد التأكد من اسم المريض وهوية المريض.
ملاحظة: نقل السائل الجريبي المصفي إلى مقاعد البدلاء مختبر التلقيح الاصطناعي في أقرب وقت ممكن لمنع التخثر. - الكشف عن نزيف نشط في تجويف الحوض مع الموجات فوق الصوتية وضع B بعد ثقب جميع بصيلات. أدخل منظارا، وصوب الطرف إلى الثقب الخلفي للكشف عن النزيف النشط في موقع الثقب.
ملاحظة: لا ينبغي ملاحظة أي نزيف نشط في موقع ثقب المهبل إذا كان وضع المبيض طبيعيا ويتم استرجاع البويضات بعناية. للنزيف الخفيف الذي يستمر حتى بعد الضغط، حافظي على ضغط شاش معقم في المهبل لمدة 2-4 ساعة. السيطرة على النزيف المفرط من الشرايين الصغيرة باستخدام المشابك مع ملقط الأوعية الدموية لمدة 2-4 ساعة. النزيف في تجويف الحوض أو المبيض، والذي نادرا ما يحدث، ينبغي السيطرة عليه عن طريق التخثر الكهربائي عن طريق الجراحة بالمنظار.
6. جراحة النساء
- بناء على حاجة وحالة المريض ، قم بإجراء جراحة نسائية مناسبة بعد استرجاع البويضات.
- إجراء جراحة حفر المبيض بالمنظار لمرضى متلازمة المبيض المتعدد الكيسات (PCOS) الذين يعانون من مقاومة الكلوميفين.
- إجراء جراحة أمراض النساء الحميدة للمرضى الذين يعانون من العقم قبل العلاج بمضادات الفيروسات القهقرية، مثل استئصال عضلة الرحم بالمنظار، والفحص المتعدد الأنواع، واستئصال الحاجز والبطين بالمنظار، واستئصال الأوفوروسيستيك.
- إجراء استئصال المبيضين للحفاظ على التبريد الخصوبة من المرضى الذين يعانون من السرطان أو أمراض الدم الذين يحتاجون إلى تلقي العلاج الكيميائي.
ملاحظة: هذه العمليات الجراحية النسائية هي العمليات السريرية الأساسية والموحدة. وينبغي أن تكون المبادئ التوجيهية للعمليات في مختلف البلدان والمستشفيات متشابهة نسبيا.
7. تنفيذ IVM
ملاحظة: تنفيذ العملية الكاملة IVM على مسطح متجانس 37 درجة مئوية.
- تصفية السائل المسام يستنشق مع مصفاة خلية النايلون 70 ميكرومتر. شطف مرارا وتكرارا أنبوب الثقافة ومصفاة مع درجة الحموضة قبل الدافئة مستقرة التعامل مع المتوسطة. تأكد من نقل جميع COCs غير ناضجة تماما إلى طبق الثقافة. جمع السوائل المصفاة، وشطف، والثقافة في طبق بيتري 100 × 15 ملم.
- فحص COCs (الشكل 2) تحت التجسيم مع التكبير 40x. نقل بسرعة غير ناضجة في المتوسط البويضات IVM قبل الحارة.
ملاحظة: اختر تكبير مناسب حسب عادة المشغل. - سجل عدد COCs غير الناضجة المثقفة.
- إبلاغ المريض عن عدد من COCs المستزرعة. مناقشة جمع السائل المنوي مع المرضى وشركائهم. إجراء استخراج الحيوانات المنوية وفقا للإجراء الطبيعي.
- زراعة COCs غير ناضجة في 37 درجة مئوية في الهواء المرطب التي تحتوي على 5٪ CO2 و 5٪ O2 لمدة 28-32 ساعة.
- تقييم نضج البويضات.
- دنود خلايا الركامية عن طريق الأنابيب المتكررة باستخدام ماصة باستور الزجاج تحت مجسمة مع التكبير 40x. فحص قذف الجسم القطبي (PB) لتحديد مرحلة نمو البويضات. انظر الشكل 2 للصور التمثيلية للبويضات في مركبات الكربون الكلورية فلورية، والميتافيزي الثاني (MII)، والميتافيزي الأول (MI)، والفيصلات الجرثومية (GVs) ذات الخصائص المورفولوجية الواضحة.
ملاحظة: استخدم لهبا عموديا (على سبيل المثال، موقد بونسن) لضبط قطر ماصة باستور الزجاجية إلى حجم البويضات. - عد البويضات MII وتسجيل العدد.
- اختر البويضات الناضجة للتلقيح الاصطناعي أو التزجيج.
ملاحظة: جمع الحيوانات المنوية في اليوم الذي تنضج فيه البويضات للتلقيح الاصطناعي، ولكن ليس لتزجيج البويضات. - ثقافة البويضات غير ناضجة في مرحلة GV و MI في المتوسط ثقافة IVM الأصلي مع خلايا الركاز لآخر 10-14 ح. كرر الخطوات 7.6.2-7.6.3.
- دنود خلايا الركامية عن طريق الأنابيب المتكررة باستخدام ماصة باستور الزجاج تحت مجسمة مع التكبير 40x. فحص قذف الجسم القطبي (PB) لتحديد مرحلة نمو البويضات. انظر الشكل 2 للصور التمثيلية للبويضات في مركبات الكربون الكلورية فلورية، والميتافيزي الثاني (MII)، والميتافيزي الأول (MI)، والفيصلات الجرثومية (GVs) ذات الخصائص المورفولوجية الواضحة.
8. تنفيذ ICSI أو التزجيج البويضات
- اتبع الإجراء القياسي للمركز التناسلي8.
9. زراعة الأجنة وإجراء حفظ الأجنة
- اتبع الإجراء القياسي للمركز التناسلي8.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
حتى ديسمبر 2019، تم استخدام OP-IVM للحفاظ على الخصوبة ل 274 مريضا. نشرت النتائج الجنينية والإنجابية ل 158 مريضا بين عامي 2014 و2016 في ورقة سابقة8. يناقش المثال التالي الإجراء المتبع لمريض PCOS يتلقى OP-IVM في عام 2016. المريض هو 28 عاما تشخيص العقم الأولي، كيس النكسل الأيسر، وكيس المبايض. تلقت استئصال المثانة بالمنظار وOP-IVM في سبتمبر28th, 2016; تم الحصول على 27 COCs غير ناضجة. بعد ثقافة 28 ساعة، تم اختيار 7 بويضات في مرحلة MII وتخصيبها من قبل ICSI. كان عدد الأجنة ذات الجودة الجيدة 2 الموالية للنوى (2PNs) في اليوم 1 والأجنة في اليوم 3، واليوم 5 6 و 6 و 2، على التوالي. تم تجميد الكيسات الأريمية التي تم الحصول عليها في اليوم الخامس(4أكتوبر 2016). في 14فبراير 2017، تم إذابة الكيسة الأريمية. كان هذا الانفجار المذاب على قيد الحياة ونقل إلىالرحم في 14 فبراير 2017. كانت نتائج اختبار gonadotropin المشيمي البشري في الدم (hCG) إيجابية ، وأظهر التصوير فوق الصوتي الحمل المبكر داخل الرحم. قام المريض برعاية فتاة سليمة عن طريق عملية قيصرية في الأسبوع 40 في2نوفمبر 2017.
الشكل 1: مخطط تدفق OP-IVM. قبل الجراحة النسائية، تحت توجيه الموجات فوق الصوتية عبر المهبل، يستنشق سائل الجريبات من خلال IMFA. يتم نقل السائل الجريب التي تم الحصول عليها إلى مختبر التلقيح الاصطناعي، وتصفيتها، وشطف. يتم نقل COCs غير ناضجة إلى حل ثقافة IVM قبل الحرب ومثقفة لمدة 28-32 ساعة. وتستخدم البويضات الناضجة مع PB لالتبريد أو التلقيح الاصطناعي-ET. المختصرات: IMFA = طموح المسام غير الناضجة؛ التلقيح الاصطناعي = الإخصاب في المختبر; التلقيح الاصطناعي-ET = التلقيح الاصطناعي ونقل الأجنة. COCs = مجمعات الركاز البويضات؛ IVM = في النضج في المختبر; OP-IVM = IVM قبل إجراء عملية أمراض النساء؛ GV = الحويول الجرثومي؛ MI = ميتافيزي I; ICSI = حقن الحيوانات المنوية داخل السيتوبلازمي; PB = الجسم القطبي; PN = الموالية للنواة؛ D1 = اليوم الأول. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 2: الخصائص المورفولوجية للصور التمثيلية للبويضات. (أ) COCs ، (B) MII ، (C) MI ، (D) مرحلة GV. الاختصارات: COCs = مجمعات الركاز-البويضات; GV = الحويول الجرثومي؛ MI = ميتافيزي I; MII = ميتافيزي الثاني. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
تمتد طريقة OP-IVM الموصوفة في هذه المقالة إلى تطبيقات IVM التقليدية وتجمع بين IVM بعد استرجاع البويضات والجراحة النسائية الروتينية. يمكن الآن استخدام البويضات التي كانت ستفقد في جراحة أمراض النساء في التلقيح الاصطناعي -ET أو FP دون مخاطر جراحية إضافية. تم استخدام OP-IVM لأول مرة لاسترداد البويضات قبل حفر المبيض في مرضى PC PCOS. وسرعان ما توسع تطبيقه ليشمل المرضى الذين يعانون من العقم والذين يحتاجون إلى جراحة نسائية حميدة ومرضى السرطان أو أمراض الدم الذين يحتاجون إلى العلاج الكيميائي. بسبب احتمال خطر الانبثاث، OP-IVM غير مناسب أو موصى به للمرضى الذين يعانون من الأورام الخبيثة. استنادا إلى OP-IVM، تم إنشاء طريقة صينية جديدة لبنك البيض لFP من المرضى الذين يعانون من العقم ومرضى السرطان في هذه المؤسسة.
بالنسبة ل OP-IVM ، يجب النظر في كل من الحاجة الملحة لجراحة أمراض النساء وإمكانية الحصول على عدد أكبر من البويضات. بشكل عام، ترتبط نتائج IVM بشكل إيجابي مع عدد البويضات غير الناضجة التي تم الحصول عليها أثناء استرجاع البويضات9. قد تمنع الجريبات المهيمنة نمو الجريبات الصغيرة المحيطة وتسبب10أترسيا ، مما يؤدي إلى انخفاض عدد البويضات غير الناضجة المستردة. لذلك ، إذا لم تكن جراحة أمراض النساء عاجلة ، فإن أفضل نافذة ل OP-IVM هي عندما يلاحظ عدد أكبر من الجريبات الصغيرة ذات الجريبات القليلة المهيمنة من خلال التصوير الفائق الوضع B. بالإضافة إلى ذلك، يمكن استخدام الهرمون المضاد لموليان (AMH) كمعلمة للتنبؤ باحتياطيات المبيض حيث ترتبط أعداد البويضات المستردة بشكل إيجابي بشكل كبير مع AMH11،12. في الحالات التي تم فيها إعطاء الأولوية لعملية أمراض النساء ، يجب استرجاع أكبر عدد ممكن من البويضات غير الناضجة. في العمليات الطارئة، يجب تقييم استرجاع البويضات وIVM بعناية بناء على حالة المريض و إرادة المريض.
IMFA تحت التوجيه الموجات فوق الصوتية عبر المهبل هو وسيلة تستخدم لاسترداد البويضات التي يمكن أن تقلل من الأضرار التي لحقت وظيفة المبيض13،14. كما يستخدم ثقب المبيض بالمنظار لابتذاء البويضات غير الناضجة في بعض الدراسات15. ومع ذلك ، بالمقارنة مع تنظير البطن ، يستغرق IMFA تحت الموجات فوق الصوتية المهبلية وقتا أقل ، وأقل توغلا ، ويسهل أداء16،17، ويمكن أن يحقق طموحا أكثر استهدافا للجريب. لذلك، لتقليل التأثير على احتياطي المبيض وزيادة دقة الطموح، يوصى ب IMFA تحت إرشادات الموجات فوق الصوتية عبر المهبل كطريقة أفضل لاسترجاع البويضات في OP-IVM. ومع ذلك، يوصى بICSI للإخصاب. وقد أظهرت الدراسات السابقة أن zona pellucida سوف تصلب بعد أن مثقف في المختبر لفترات طويلة، مما أدى إلى انخفاض معدل الإخصاب الناجح18. وقد ثبت ICSI لتحسين فعال في معدل الإخصاب من البويضات IVM في الدورات الطبيعية19,20. على الرغم من أن الدراسات الحديثة أظهرت معدلات الإخصاب مماثلة لICSI وIVF21,22, ICSI يحمل ميزة استخدام الدورات الطبيعية بدلا من تحفيز المبيض. يتم تجميد الأجنة التي تم جمعها بسبب بطانة الرحم غير الجاهزة، ويمكن إجراء نقل الأجنة في وقت لاحق وفقا للإجراء القياسي في كل مركز.
الغرض من العلاج المضاد للفيروسات القهقرية هو علاج العقم وولادة أطفال أصحاء. أظهرت الأبحاث السابقة حول النتائج الإنجابية ل OP-IVM أن أعداد البويضات المستردة ومعدلات نضوج البويضات قابلة للمقارنة مع تلك التي لوحظت لدورات IVM التقليدية باستخدام FSH و hCG. ومع ذلك، OP-IVM لديه أقل CPR وأقل LBR من IVM التقليدية8،23،24،25. ويمكن تفسير ذلك من خلال نضوج البويضات المقيد بسبب ضعف إمكانات نمو البويضات غير الناضجة في الدورات الطبيعية. ومع ذلك، تحفيز هرمون ليس خيارا لبعض المرضى الذين لا يستطيعون أو الذين ليس لديهم الوقت لتلقي العلاج. بالإضافة إلى ذلك ، قد يضر التزجيج بالإمكانات التنموية للبويضات ، مما يؤدي إلى انخفاض CPRs و LBRs26،27.
وعلاوة على ذلك، قد تضخم gonadotropins المبيضين وتزيد من خطر النزيف أثناء استرجاع البويضات، مما يؤثر سلبا على التعرض للحقول المنطوق في تنظير البطن. وLBR من الأسلوب OP-IVM منخفضة نسبيا. هناك حاجة إلى مزيد من الدراسات لدراسة أفضل توقيت عملي وتعديل نظام ثقافة IVM لتحسين نتائج OP-IVM. بشكل عام، يجمع OP-IVM بين IVM والجراحة النسائية بحيث يمكن حفظ البويضات غير الناضجة التي كانت ستتلف أو يتم التخلص منها واستخدامها في العلاج المضاد للفيروسات القهقرية. OP-IVM له مزايا تجنب المضاعفات الناجمة عن الأدوية المحفزة للمبيض وتقليل عدد العمليات لعلاج العقم. لذلك، ينبغي اعتبار OP-IVM طريقة علاج قيمة محتملة لبعض المرضى ودراسة أكثر عمقا لفهم أفضل لآثاره ونتائجه.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وليس لدى صاحبي البلاغ ما يكشفان عنه.
Acknowledgments
وقد تم دعم هذا العمل من خلال منح من البرنامج الوطني الصيني للبحث والتطوير (رقم 2017YFC1002000، 2018YFC1004001، 2019YFA0801400)، والمؤسسة الوطنية للعلوم الصينية (رقم 81571386، 81730038)، وصندوق الابتكار CAMS للعلوم الطبية (2019-I2M-5-001)، ومشروع البحوث الخاصة للتنمية الصحية الرأسمالية الصينية (2018-2-4095).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 19 G single-lumen aspiration needles | Cook, Australia | K-OPS-7035-REH-ET | |
| 4-well plate | Corning | ||
| 70 μm nylon cell strainer | Falcon, USA | 352350 | |
| CO2 Incubator | Thermo | ||
| Culture oil | Vitrolife, Sweden | 10029,OVOIL | Step 3.2. |
| FSH & LH | Ferring Reproductive Health, Germany | MENOPUR® | |
| Glass Pasteur pipette | Hilgenberg GmbH, Germany | 3154102-26 | |
| G-MOPS medium | pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing | ||
| IVM medium | Origio, Denmark | ART-1600-B | |
| Laminar Flow Clean Benches | ESCO | ||
| Petri dish | Thermo Fisher Scientific, Denmark | 263991 | |
| pH stable handing media designed to support the handling and manipulation of oocytes and embryos outside the incubator | Vitrolife, Sweden | 10130, G-MOPS PLUS | Step 7.1. |
| Rinse solution | Cook, Australia | K-SIFB-100 | |
| Stereoscope | Nikon |
References
- Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
- Yang, Z. Y., Chian, R. C. Development of in vitro maturation techniques for clinical applications. Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).
- Hatirnaz, S., et al. Oocyte in vitro maturation: A sytematic review. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).
- Gremeau, A. S., et al. In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles. Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).
- Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
- Sahin, C., et al. Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy. Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).
- Xiao, J., et al. Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy. Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).
- Song, X. -L., et al. Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures. Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).
- Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety. Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).
- Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. Current Topics in Developmental Biology. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).
- Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications. Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).
- Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients. Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).
- Katayama, K. P., et al. Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization. Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).
- Dellenbach, P., et al. Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval. Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).
- Hirata, T., et al. Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).
- Deutinger, J., et al. Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach. European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).
- Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).
- Nagy, Z. P., et al. Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report. Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).
- Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients. Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).
- Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).
- Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes. Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).
- Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).
- Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome. Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70 (2018).
- Zheng, X., et al. Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40 (2012).
- Tannus, S., et al. Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome. Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).
- Cohen, Y., et al. Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).
- Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes. Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).
Tags
الطب، العدد 171، IVM، الحفاظ على الخصوبة، استرجاع المهبل، إجراءات أمراض النساء بالمنظار، PCOSErratum
Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 06/26/2023.
Citeable Link.
An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
to:
Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
